JP7339650B2 - ペプチド - Google Patents
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Description
血圧降下作用の評価、腸内分泌細胞のカルシウム応答性試験、及び動脈弛緩実験は、特許文献1及び非特許文献1に記載の方法に準じた。
(血圧降下作用の評価)
(i)使用動物
高血圧自然発症の雄ラット(SHRs/Izm)(日本SLC社製)を使用した。SHRラットは、23±1℃、湿度50%、12時間/12時間の明暗サイクルに制御された部屋で飼育した。餌は固形SP飼料(株式会社フナバシファーム製)を与え、水と共に自由摂取させた。SHRラットは、25週齢より高い週齢のラットを用いた。なお、SHRラットは25週齢を超えると一部の降圧剤が効果を示しにくく、高血圧発症後期(Advanced stage)に相当すると考えられる。
無麻酔下のSHRラットについて、Tail-cuff法での収縮期血圧(Systolic blood pressure)を測定して。血圧測定には、MK-2000(室町機械社製)を用いて測定した。約3週間Tail-cuff装置でトレーニングをした動物を本実験に用いた。各試料を生理食塩水に溶解し、メタルゾンデを用いて強制的に経口投与した。血圧測定は、投与直前及び各表に示す投与からの経過時間後(2時間後、4時間後、6時間後、24時間後、48時間後)に行った。
安楽死させたSHRラットから腸間膜動脈を摘出し、螺旋状に切開して標本を作成した。Krebs-Henseleit栄養液((120mMのNaCl,4.7mMのKCl,1.2mMのMgSO4,1.2mMのKH2PO4,2.5mMのCaCl2,25mMのNaHCO3,10mMのグルコース)、37℃、5%CO2、95%O2混合ガス飽和)を満たしたマグヌス管中にこの標本を懸垂し、その張力(緊張)変化を歪みトランスデューサー(三栄社製)を介してポリグラフ上に記録した。
定法により、ペプチドKFWGK(配列番号1)を合成した。
(統計解析)
試験により得られたたデータを、試行数nの平均(Mean)と標準誤差(Standard error of the mean、SEM)との和で表した。2群間の比較にはt検定を用いた。3群間以上の比較には、データを1方向ANOVAにより解析し、引き続いて多重比較のためのTukey-Kramer試験を行った。対照(Control)に対してp<0.05の場合(図中、”*”)に、有意差ありと判定した。
(実施例1:血圧降下作用(1))
ペプチドKFWGKを5.0μg/kgを経口投与したSHRラットを用いて、血圧降下作用を評価した(n=5)。溶媒の生理食塩水のみの投与を、対照(Control)とした(以下、同様)。投与後2時間後、4時間後、6時間後、24時間後及び48時間後の各時点で、Tail-cuff法により収縮期血圧を測定した。
ペプチドKFWGKに加えてCCK1受容体アンタゴニスト(CCK1R Antagonist)であるロルグルミド(lorglumide)を添加して投与した場合について血圧降下作用を評価した。
ペプチドKFWGKを試験物質として、各種阻害剤の存在下または非存在下で動脈弛緩実験により動脈弛緩作用を評価した(n=1)。
本発明のペプチドKFWGKの予想される作用機構を図4に示す。
Claims (2)
- KFWGK(配列番号1)のアミノ酸配列を有するペプチドを有効成分とする、動脈弛緩剤。
- 動脈弛緩のために用いられる、KFWGK(配列番号1)のアミノ酸配列を有するペプチドを含有する食品又は医薬組成物。
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ARRUTIA, Fatima et al.,Influence of heat pre-treatment on BSA tryptic hydrolysis and peptide release,Food Chemistry,2016年01月27日,Vol. 202,pp. 40-48 |
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