JP7328654B2 - 候補物質が生体の活性に与える影響を評価する方法、生分解性粒子、キット、および候補物質が生体の活性に与える影響を評価するシステム - Google Patents
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Description
[1]候補物質が生体の活性に与える影響を評価する方法において、信号物質を含有する生分解性粒子を取り込んだ生細胞に、前記候補物質を投与する工程と、前記投与する工程の前後を通じて、前記信号物質からの信号を経時的に検出する工程と、を含む評価方法。
[2]前記信号物質は磁性体である、[1]に記載の評価方法。
[3]前記生分解性粒子は、徐放性を有する、[1]または[2]に記載の評価方法。
[4]前記生分解性粒子は、ハイドロゲル粒子である、[1]~[3]のいずれかに記載の評価方法。
[5]前記生細胞は、肝細胞である、[1]~[4]のいずれかに記載の評価方法。
[6]前記生分解性粒子は、平均粒子径が10nm以上2.0μm以下の粒子である、[1]~[5]のいずれかに記載の評価方法。
[7]前記信号物質は、平均粒子径が0.5nm以上50nm以下の粒子である、[1]~[6]のいずれかに記載の評価方法。
[8]前記生分解性粒子は、前記信号物質を粒子内に内包する、[1]~[7]のいずれかに記載の評価方法。
[9]前記信号物質は、Fe3O4を含む、[1]~[8]のいずれかに記載の評価方法。
[10]前記投与する工程の後、所定時間が経過した後における前記信号の信号強度と、前記投与する工程がなかったとして予測される、前記所定時間が経過した後における前記信号の信号強度と、の強度差を算出し、前記強度差から、前記候補物質が前記生細胞に与える影響の大きさを定量する工程をさらに含む、[1]~[9]のいずれかに記載の評価方法。
[11]前記信号の検出は、前記投与する工程の前後を通じての、生体に移植した前記生細胞からの信号の検出である、[1]~[10]のいずれかに記載の評価方法。
[12][1]~[11]のいずれかに記載の評価方法に用いられる、信号物質を含有する生分解性粒子。
[13][12]に記載の生分解性粒子と、生細胞と、を含むキット。
[14]候補物質が生体の活性に与える影響を評価するシステムにおいて、信号物質を含有する生分解性粒子を取り込んだ生細胞であって、前記候補物質を投与された生細胞からの信号を、前記候補物質の投与の前後を通じて経時的に検出する、検出部を有する評価システム。
[15]さらに、前記候補物質を投与される前の複数の時点において、前記信号物質を含有する生分解性粒子を取り込んだ生細胞から前記検出部が検出した前記信号の強度から、前記信号強度の減衰の度合いを予測する予測部と、前記候補物質を投与した後の時点において前記検出部が前記生細胞から検出した前記信号の強度と、前記予測部が予測した前記信号の強度と、の強度差を算出する算出部と、を有する、[14]に記載の評価システム。
1-1.信号物質
上記信号は、生細胞内に上記信号物質が存在することを確認できる信号であればよい。上記信号の例には、磁場(磁化量)、X線、ガンマ線および蛍光などの電磁波、ならびに、超音波および光音響信号などの音響波などが含まれる。
上記生分解性粒子は、細胞内で加水分解されるか、または細胞内で分泌される酵素により分解される材料を含んで形成され、分解されることによって上記信号物質を徐放できる粒子であればよい。なお、リポソームは徐放性を有さないため、上記生分解性粒子には含まれない。
上記生分解性粒子は、溶融した生分解性粒子の材料を含む液体(以下、単に「材料溶液」ともいう。)の液滴を加熱管または乾燥室の雰囲気中に吐出して乾燥させる方法(気中滴下法)、材料溶液の液滴を疎水性溶媒内に吐出して分散させる方法(液中滴下法)、および、材料溶液をエマルジョン化してゼラチンを含む微小液滴を分散させる方法(液中分散法)等によって、材料溶液を粒子化して、製造することができる。
上記生細胞は、上記生分解性粒子を細胞膜の内側に取り込み、かつ、分解などできる細胞であればよい。
上記生細胞および上記複合粒子は、これらを含むキットとすることができる。あるいは、上記生細胞、上記生分解性粒子および上記信号物質は、これらを含むキットとすることができる。上記キットは、いずれも、上記生細胞を培養するための培地を含んでもよい。
上述した候補物質が生体の活性に与える影響を評価する方法は、図4に示すような、信号物質を含有する生分解性粒子を取り込んだ生細胞であって、上記候補物質を投与された生細胞からの信号を、上記候補物質の投与の前後を通じて経時的に検出する、検出部210を有するシステム200によって、実行することができる。
(合成条件1)
ゼラチン(新田ゼラチン株式会社製、G-2613P)の濃度が50mg/mlとなるように調製した200mlのゼラチン水溶液を用意し、これに0.835gのFeCl2・4H2Oおよび0.760gのFeCl3・6H2Oを添加した。このゼラチン水溶液に、さらに、40mlの28%NH3水溶液を添加して、ゼラチンスラリーを得た。
上記ゼラチンスラリーに対して、相分離誘起剤としてアセトンを添加して、50℃で混合した。その後、0.1mgのグルタルアルデヒドを加え3時間撹拌したのち、1Mのグリシン水溶液を添加した。ゼラチンスラリー中に析出した粒子を回収し、純粋で洗浄して、ゼラチンおよびFe3O4粉末を含む複合粒子を得た。このとき、FeCl2・4H2OおよびFeCl3・6H2Oの添加量、またはアセトンの添加量を調整して、生分解性粒子または磁性体粒子の平均粒子径が異なる複合粒子からなる複合粒子7~複合粒子9を製造した。
透過型電子顕微鏡(TEM)を用いて上記作製した複合粒子1~複合粒子11を撮像し、撮像された画像をMountech社製画像解析式粒度分布ソフトウェアMac-Viewを用いて解析して、任意に選択した20個の複合粒子中に含まれる合計40個の磁性体粒子の短径および長径を求め、これらの短径および長径の平均値を複合粒子が含有する磁性体粒子の平均粒子径とした。
2-1.複合粒子の平均粒子径
nano particle sz-100(株式会社堀場製作所製)を用いて、上記作製し複合粒子1~複合粒子11に含まれる複合粒子の体積平均粒子径を光子相関法で測定した。
透過型電子顕微鏡(TEM)を用いて上記作製した複合粒子1~複合粒子11を撮像し、撮像された画像をMountech社製画像解析式粒度分布ソフトウェアMac-Viewを用いて解析して、任意に選択した20個の複合粒子中に含まれる合計40個の磁性体粒子の短径および長径を求め、これらの短径および長径の平均値を複合粒子が含有する磁性体粒子の平均粒子径とした。
上記作製した複合粒子1~複合粒子11を市販のFe染色キットで染色したところ、複合粒子1~複合粒子11のすべてにおいて、粒子内に磁性体(FeCl3)が内包されていることが確認された。
3-1.細胞内への導入
肝細胞培養キットP-2(マウス)(コスモ・バイオ株式会社製)に含まれる増殖用培地を用いて、マウス由来の肝細胞(NCTC-Clone 1469 (Murine Liver cell line) 、Cell Lines Services社製)を培養した。
上記評価用サンプルの一部を取り出し、以下の手順によって、細胞膜の内側に取り込まれた複合粒子が確認できるか否かを観察し、以下の基準によって判定した。
培養した細胞に1%パラホルムアルデヒド1mlを加えて細胞固定化処理を行った。次いで、下記組成のFe染色液1mlを加えてFeを染色した。さらに、下記の濃度に調整した核染色液1mlを加えて細胞を染色した。
下記の2液を同体積混合してFe染色液を調製した。
・20体積% HCL(濃塩酸を5倍希釈したもの)
・10質量% K4(Fe(CN6))水溶液(100mg/ml)
硫酸アンモニウム5質量部と、Nuclear fast red 0.1質量部とを、蒸留水100質量部に混合して核染色液を調製した。
任意に選択された20個の細胞を光学顕微鏡で観察して、細胞膜の内側に青い染色部位(複合粒子中のFeに由来する)が確認できるか否かを観察し、以下の基準で評価した。
○ 上記20個の細胞のうち、10%以上50%未満(2個以上10個未満)の細胞で、細胞膜の内側に染色部位が確認された
× 上記20個の細胞のうち、10%未満(2個未満)の細胞で、細胞膜の内側に染色部位が確認されたか、または細胞膜の内側に染色部位が確認される細胞は存在しなかった
4-1.スフェロイドの作製
スフェロイド作成用の容器(PrimeSurface、住友ベークライト株式会社製、「PrimeSurface」は同社の登録商標)を用いて評価用サンプルNo.2に含まれる細胞をさらに培養し、これらのサンプルに含まれる細胞からスフェロイドを作製した。
門脈内に留置したカテーテルを通じて、上記スフェロイドをマウスに注入した。
MRIシステム(実験小動物用 高性能コンパクトMRIシステム Mシリーズ M3、プライムテック株式会社製)を用いて、上記スフェロイドを導入したマウスの、導入部位から測定されるT2値を、導入から1時間後、12時間後、24時間後、36時間後および48時間後に、測定した。
評価用サンプルNo.2に含まれる細胞をプレート上でさらに培養し、表3に示す候補物質を上記プレートにさらに添加した。
MRIシステム(実験小動物用 高性能コンパクトMRIシステム Mシリーズ M3、プライムテック株式会社製)を用いて、上記複合粒子を取り込ませた細胞から測定されるT2値を、細胞濃度が1×105個程度になった時点から1時間後、12時間後、24時間後、36時間後および48時間後に、測定した。
110 生分解性粒子
120 信号物質
200 システム
210 検出部
220 予測部
230 算出部
240 表示部
250 記憶部
260 CPU
Claims (15)
- 生体の活性に与える影響を評価したい化合物である候補物質が生体の活性に与える影響を評価する方法において、
MRI用の造影剤、X線撮像用の造影剤、ポジトロン断層撮像法(PET)用の造影剤、蛍光撮像用の造影剤、超音波撮像用の気泡、および光音響撮像用の造影剤からなる群から選択される信号物質を含有する生分解性粒子を取り込んだ生細胞に、前記候補物質を投与する工程(ヒト体内の生細胞に外科的処理を伴う方法によって候補物質を投与する態様を除く)と、
前記投与する工程の前後を通じて、前記信号物質からの信号を経時的に検出する工程(ヒト体内から外科的処理を伴う方法によって信号を検出する態様を除く)と、
前記投与する工程の後において、前記投与する工程の前と比較して前記信号の減衰の度合いが低下したことの測定により、前記候補物質が生体の活性に与える影響を評価する工程と、
を含む評価方法。 - 前記信号物質は磁性体である、請求項1に記載の評価方法。
- 前記生分解性粒子は、徐放性を有する、請求項1または2に記載の評価方法。
- 前記生分解性粒子は、ハイドロゲル粒子である、請求項1~3のいずれか1項に記載の評価方法。
- 前記生細胞は、肝細胞である、請求項1~4のいずれか1項に記載の評価方法。
- 前記生分解性粒子は、平均粒子径が10nm以上2.0μm以下の粒子である、請求項1~5のいずれか1項に記載の評価方法。
- 前記信号物質は、平均粒子径が0.5nm以上50nm以下の粒子である、請求項1~6のいずれか1項に記載の評価方法。
- 前記生分解性粒子は、前記信号物質を粒子内に内包する、請求項1~7のいずれか1項に記載の評価方法。
- 前記信号物質は、Fe3O4を含む、請求項1~8のいずれか1項に記載の評価方法。
- 前記投与する工程の後、所定時間が経過した後における前記信号の信号強度と、
前記投与する工程がなかったとして予測される、前記所定時間が経過した後における前記信号の信号強度と、
の強度差を算出し、
前記強度差から、前記候補物質が前記生細胞に与える影響の大きさを定量する工程をさらに含む、
請求項1~9のいずれか1項に記載の評価方法。 - 前記信号の検出は、前記投与する工程の前後を通じての、生体に移植した前記生細胞からの信号の検出(ヒトの体内に移植した前記生細胞からの外科的処置を伴う方法による信号の検出を除く)である、請求項1~10のいずれか1項に記載の評価方法。
- 請求項1~11のいずれか1項に記載の評価方法に用いられる、信号物質を含有する生分解性粒子。
- 請求項12に記載の生分解性粒子と、生細胞と、を含むキット。
- 生体の活性に与える影響を評価したい化合物である候補物質が生体の活性に与える影響を評価するシステムにおいて、
MRI用の造影剤、X線撮像用の造影剤、ポジトロン断層撮像法(PET)用の造影剤、蛍光撮像用の造影剤、超音波撮像用の気泡、および光音響撮像用の造影剤からなる群から選択される信号物質を含有する生分解性粒子を取り込んだ生細胞であって、前記候補物質を投与された生細胞からの信号を、前記候補物質の投与の前後を通じて経時的に検出する、検出部を有し、
前記候補物質の投与の後において、前記候補物質の投与の前と比較して前記信号の減衰の度合いが低下したことの測定により、前記候補物質が生体の活性に与える影響を評価する、
評価システム。 - さらに、前記候補物質を投与される前の複数の時点において、前記信号物質を含有する生分解性粒子を取り込んだ生細胞から前記検出部が検出した前記信号の強度から、前記信号の強度の減衰の度合いを予測する予測部と、
前記候補物質を投与した後の時点において前記検出部が前記生細胞から検出した前記信号の強度と、前記候補物質を投与した後の時点であって、前記検出部が前記信号の強度を前記生細胞から検出した時点における前記予測部が予測した前記信号の強度と、の強度差を算出する算出部と、
を有する、請求項14に記載の評価システム。
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WO2010055829A1 (ja) | 2008-11-11 | 2010-05-20 | 独立行政法人科学技術振興機構 | 三次元細胞培養体の生体シグナルの検出方法及び検出キット |
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