JP7317866B2

JP7317866B2 - オキサボリニン環を含む新規ベンズイミドアミド化合物

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Publication number: JP7317866B2
Application number: JP2020567854A
Authority: JP
Inventors: リドル，ジョン; ウォーカー，アン・ルイーズ; ホワイト，ジェンマ・ヴィクトリア; ドゥニ，アレクシ; ドディク，ネリーナ; フーシェ，マリー－エレーヌ; ブイヨ，アン
Original assignee: アンスティチュナショナルドゥラサンテエドゥラルシェルシュメディカル
Priority date: 2018-06-07
Filing date: 2019-06-05
Publication date: 2023-07-31
Anticipated expiration: 2039-06-05
Also published as: EP3802550A1; ES2973710T3; CN112236433B; EP3802550B1; KR20210018464A; BR112020024740A2; CN112236433A; US20210253604A1; CN116217603A; US11352372B2; WO2019234075A1; US20220267357A1; US11767333B2; GB201809378D0; JP2021530440A; KR102661802B1

Description

本発明は、４－（１－ヒドロキシ－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）ベンズイミドアミド誘導体、及び異常に高レベルのプロテアーゼ活性（特に、カリクレイン等のセリンプロテアーゼ）によって引き起こされる皮膚の疾患及び病態（例えば、ネザートン症候群、酒さ、アトピー性皮膚炎、乾癬、及び掻痒）の処置におけるその使用に関する。更に、本発明は、該誘導体を含有する組成物及びそれを調製するためのプロセスに関する。

背景技術
ネザートン症候群は、異常な落屑及び慢性的な皮膚の炎症を特徴とする遺伝性皮膚疾患である。皮膚のバリア機能が失われると、深刻な脱水症状に陥り、感染症に罹りやすくなる。出生後死亡率が高く、一般に幼少期に成長障害が起こる。患者は、しつこい掻痒症（掻痒）に悩まされる。紅皮症が一般的であり、魚鱗癬を発症することが多い。全ての患者がアトピーになり、皮膚においても、食物アレルギーとしても現れる。

ネザートン症候群は、SPINK-5遺伝子の突然変異によって引き起こされ、常染色体劣性遺伝する。４０を超える既知の突然変異が存在するが、その全てが、遺伝子産物であるリンパ上皮カザール型関連阻害因子（LEKTI）の皮膚における発現を部分的に又は完全に失わせる（Chavanas et al, Nature genetics (2000), 25(2), 141-2）。

LEKTIは、カリクレイン５、７、及び１４（KLK-5、-7、及び-14）等のセリンプロテアーゼと共に、表皮の最も分化した層において発現するセリンプロテアーゼ阻害剤である。正常条件下では、LEKTIは、より下層の表皮でプロテアーゼ活性を阻害するが、この阻害はより酸性の外層である角質層では失われるので、コルネオデスモソームが切断され、最外層が失われる（落屑）。LEKTIが存在しないと角質層におけるプロテアーゼ活性が増大し、その結果、デスモソームタンパク質が不適切に切断され、外皮層全体が失われる。

表皮内の異常なプロテアーゼ活性によってPAR-2も活性化され、TSLP等のTh-2型サイトカインの増加を特徴とする炎症反応がトリガーされる。これは、紅皮症の観察、及びこの疾患に特徴的な深在性掻痒症につながる。生後間もなくは免疫系がTH2反応に偏っていることも、これら患者にアトピーの有病率が高いことの説明になる。

皮膚のより外層におけるKLK-5活性を阻害すると、ネザートン症候群を駆動するLEKTIの部分的又は完全な欠如が妨げられる。これにより、異常な落屑が減少することによって皮膚のバリア機能が回復し、またPAR-2受容体の活性化が阻止され、その後の炎症駆動が減少することによって紅皮症及び掻痒が減少する。

酒さは、３０歳を超える米国人口の３％が罹患していると推定される炎症性皮膚疾患であり、紅斑、膿疱性丘疹、及び毛細血管拡張症を特徴とする。酒さでは皮膚におけるプロテアーゼ活性の増大が報告されている（Yamasaki K, et al. Nat. Med. (2007) 13: 975-80）。多数の研究によって、酒さにおけるKLK-5の発現増加の病態生理学的役割が確認されている（Two A, et al., J Clin Aesthet Dermatol (2014) 7(1): 20-25）。また、アゼライン酸等の酒さの処置についての活性成分は、KLK-5を阻害する処置的作用を有することが示されている（Coda A. et al., J Am Acad Dermatol (2013) 69(4): 570-577）。これらデータは、カリクレインプロテアーゼ経路の阻害剤、特にKLK-5の阻害剤が、酒さの処置に有用であることを示している。

アトピー性皮膚炎（AD）は、湿疹、掻痒症及び環境因子に対する皮膚の過敏性を特徴とする慢性炎症性皮膚疾患である。臨床的に影響を受けていないADの皮膚は、皮膚バリア機能の低下を示し、微生物及びアレルゲンが侵入しやすくなる。ADはほとんどの場合５歳前の幼少期に始まり、小児の約２５％が成人期までこの病態に悩まされ続ける。SPINK-5の多型がアトピー性皮膚炎と関連している（Walley et al, Nature Genetics 29 (2001)）ので、KLK経路の阻害がADの処置に有効である可能性がある。

乾癬は、ケラチノサイトの増殖及び分化の障害を特徴とする慢性炎症性皮膚疾患であり、これにより、痛みや掻痒を伴うことがある銀色の鱗屑に覆われた、赤く、鱗状の、硬化した皮膚の斑が引き起こされる。斑の程度は、小さく且つ局所的なものから全身を覆うものまで、様々な重症度であり得る。乾癬病変では、Ｔ細胞及び樹状細胞の活性化が異常なプロテアーゼ活性を引き起こす（Komatsu, N. et al, British Journal of Dermatology (2007) 156(5): 875-883）ので、KLK経路の阻害が乾癬の処置において有効である可能性がある。

デスモソームタンパク質の切断においてKLK-5等のセリンプロテアーゼ酵素が果たす役割に鑑みて、KLK-5活性を阻害する化合物であって、KLK-5経路によって媒介される疾患及び症候群の処置において有用でありうる化合物を調製することが望ましい。

発明の概要
第１の態様によれば、本発明は、式（Ｉ）：

（式中、Ｒ^１、Ｒ^２及びＲ^３は、本明細書に定義の通りである）
の化合物、又はその薬学的に許容し得る塩を提供する。

本発明の更なる態様は、
ｉ）式（Ｉ）の化合物、又はその薬学的に許容し得る塩を用いて、KLK-5経路によって媒介される疾患及び病態を処置する方法；例示的な疾患及び病態は、ネザートン症候群、酒さ、アトピー性皮膚炎、乾癬、及び掻痒を含むが、これらに限定されない；
ii）ａ）式（Ｉ）の化合物、又はその薬学的に許容し得る塩、及びｂ）薬学的に許容し得る担体又は賦形剤を含む医薬組成物；並びに
iii）KLK-5によって媒介される疾患及び病態を処置するための、式（Ｉ）の化合物、又はその薬学的に許容し得る塩の使用
を含む。

発明を実施するための形態
第１の態様によれば、本発明は、式（Ｉ）：

（式中、
Ｒ^１はＨであり、Ｒ^２はＣＦ_３であり、Ｒ^３は３－ピリジルメトキシ、３－クロロベンジルオキシ、若しくはＨである；
Ｒ^１はＣｌであり、Ｒ^２はＦであり、Ｒ^３は３-ピリジルメトキシである；又は
Ｒ^１はＨであり、Ｒ^２はＨであり、Ｒ^３は３－ピリジルメトキシである）
の化合物、又はその薬学的に許容し得る塩を提供する。

一実施態様では、式（Ｉ）の化合物は、
４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンズイミドアミド（化合物１）；
２－（（３－クロロベンジル）オキシ）－４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）ベンズイミドアミド（化合物５）；
４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）ベンズイミドアミド（化合物６）；
４－（６－クロロ－７－フルオロ－１－ヒドロキシ－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンズイミドアミド（化合物７）；及び
４－（１－ヒドロキシ－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンズイミドアミド（化合物８）；
又はその薬学的に許容し得る塩からなる群から選択される。

一実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンズイミドアミド

又はその薬学的に許容し得る塩である。

一実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、２－（（３－クロロベンジル）オキシ）－４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）ベンズイミドアミド

又はその薬学的に許容し得る塩である。

一実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）ベンズイミドアミド

又はその薬学的に許容し得る塩である。

一実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、４－（６－クロロ－７－フルオロ－１－ヒドロキシ－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンズイミドアミド

又はその薬学的に許容し得る塩である。

一実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、４－（１－ヒドロキシ－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンズイミドアミド

又はその薬学的に許容し得る塩である。

第１の態様で定義された式（Ｉ）の化合物は、塩基性中心を含有し、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、及びリン酸等の無機酸、カルボン酸、又は有機スルホン酸と共に形成される非毒性の酸付加塩を形成し得る。例としては、４－アセトアミド安息香酸塩、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩（ベシル酸塩）、安息香酸塩、重硫酸塩、酒石酸水素塩、酪酸塩、カルシウムエデト酸塩、ショウノウ酸塩、カンファースルホン酸塩（カンシル酸塩）、カプリン酸塩（デカン酸塩）、カプロン酸塩（ヘキサン酸塩）、カプリル酸塩（オクタン酸塩）、ケイ皮酸塩、クエン酸塩、シクラミン酸塩、ジグルコン酸塩、２，５－ジヒドロキシ安息香酸塩、ジコハク酸塩、ドデシル硫酸塩（エストル酸塩）、エデト酸塩（エチレンジアミン四酢酸塩）、エストル酸塩（ラウリル硫酸塩）、エタン－１，２－ジスルホン酸塩（エジシル酸塩）、エタンスルホン酸塩（エシル酸塩）、ギ酸塩、フマル酸塩、ガラクタル酸塩（ムチン酸塩）、ゲンチジン酸塩（２，５－ジヒドロキシ安息香酸塩）、グルコヘプトン酸塩（グルセプト酸塩）、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、グルタミン酸塩、グルタル酸塩、グリセロリン酸塩、グリコール酸塩、ヘキシルレゾルシン酸塩、馬尿酸塩、ヒドラバミン（Ｎ，Ｎ’－ジ（デヒドロアビエチル）－エチレンジアミン）、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化水素酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、イソ酪酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メタンスルホン酸塩（メシル酸塩）、メチル硫酸塩、ムチン酸塩、ナフタレン－１，５－ジスルホン酸塩（ナパジシル酸塩）、ナフタレン－２－スルホン酸塩（ナプシル酸塩）、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、パルミチン酸塩、ｐ－アミノベンゼンスルホン酸塩、ｐ－アミノサリチル酸塩、パモ酸塩（エンボン酸塩）、パントテン酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、フェニル酢酸塩、フェニルエチルバルビツール酸塩、リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、プロピオン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩（トシル酸塩）、ピログルタミン酸塩、ピルビン酸塩、サリチル酸塩、セバシン酸塩、ステアリン酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、スルファミン酸塩、硫酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩（８－クロロテオフィリネート）、チオシアン酸塩、トリエチオジド、ウンデカン酸塩、ウンデシレン酸塩、及び吉草酸塩が挙げられる。薬学的に許容し得る塩は、とりわけ、Berge, J. Pharm. Sci., 1977, 66, 1-19に記載されているもの、又はP H Stahl and C G Wermuth, editors, Handbook of Pharmaceutical Salts; Properties, Selection and Use, Second Edition Stahl/Wermuth: Wiley- VCH/VHCA, 2011（http://www.wiley.com/WileyCDA/WileyTitle/productCd-3906390519.htmlを参照）に列挙されているものを含む。

塩は、式（Ｉ）の化合物の最終的な単離及び精製中にその場で調製され得る。あるいは、塩は、無機酸又は有機酸で処理することを含む、当技術分野で公知の方法によって調製することもできる。

式（Ｉ）の化合物が２つ以上の塩基性部分を含有する場合、塩形成の化学量論組成は、１当量、２当量、又はそれ以上の酸を含んでいてもよいことが理解されるであろう。このような塩は、１、２、又はそれ以上の酸対イオンを含有するであろう（例えば二塩酸塩）。

例えば、対イオンが１超の酸性プロトンを含有する場合の準化学量論的塩を含む、式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容し得る塩の化学量論的及び非化学量論的な形態は、本発明の範囲内に含まれる。

最後の脱保護段階の前に作製され得る、第１の態様で定義された化合物の特定の保護された誘導体は、それ自体は薬理学的活性を有していない場合もあるが、特定の実施形態では、経口的又は非経口的に投与され、その後体内で代謝されて、薬理学的に活性のある、第１の態様で定義された化合物を形成することができることを、当業者であれば理解するであろう。したがって、このような誘導体は、「プロドラッグ」と記載される場合もある。第１の態様で定義された化合物の保護された誘導体及びプロドラッグは全て、本発明の範囲内に含まれる。本発明の化合物のための好適なプロドラッグの例は、Drugs of Today, Volume 19, Number 9, 1983, pp 499 - 538、及びTopics in Chemistry, Chapter 31, pp 306 - 316、及び“Design of Prodrugs” by H. Bundgaard, Elsevier, 1985, Chapter 1に記載されている（これら文書における開示は、参照により本明細書に組み入れられる）。更に、第１の態様において定義された化合物内に適切な官能基が存在する場合、そのような官能基に、当業者には「プロ部分」として知られている特定の部分（例えば、“Design of Prodrugs”（この文書における開示は、参照により本明細書に組み入れられる）においてH. Bundgaardによって記載されているもの）を配置してもよいことを、当業者であれば理解するであろう。したがって、更なる態様において、本発明は、第１の態様で定義された化合物のプロドラッグを提供する。

第１の態様で定義された化合物、その薬学的に許容し得る塩又はプロドラッグは、溶媒和又は水和の形態で存在していてもよい。したがって、更なる態様では、本発明は、第１の態様で定義された化合物、又はその薬学的に許容し得る塩の溶媒和物若しくは水和物を提供する。

第１の態様で定義された化合物、その薬学的に許容し得る塩、又は溶媒和物若しくは水和物は、１つ以上の多形の形態で存在していてもよい。したがって、更なる態様では、本発明は、第１の態様で定義された化合物又はその薬学的に許容し得る塩の多形、あるいは第１の態様で定義された化合物又はその薬学的に許容し得る塩の、溶媒和物若しくは水和物の多形を提供する。

以下、第１の態様で定義された化合物、その塩及びプロドラッグ、任意の塩又はプロドラッグの任意の溶媒和物又は水和物、並びに任意の化合物、塩、溶媒和物、又は水和物の任意の多形を「本発明の化合物」と呼ぶ。「本発明の化合物」という用語は、第１の態様について記載された全ての実施形態も含む。

本発明の化合物は、１つ以上の不斉中心を有している場合があるので、いくつかの立体異性体形態で存在し得る。立体異性体及びその混合物は全て、本発明の範囲に含まれる。ラセミ化合物は、分取HPLC又は分取SFCとキラル固定相を有するカラムとを用いて分離することもでき、当業者に公知の方法を利用して分割し、個々の鏡像異性体を得ることもできる。更に、ラセミ中間体化合物を分割し、本発明のキラル化合物を調製するために使用してもよい。更に、本発明のキラル化合物は、キラル合成により調製することもできる。

一実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、（Ｒ）－４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンズイミドアミド

又はその薬学的に許容し得る塩である。

一実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、（Ｓ）－４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンズイミドアミド

又はその薬学的に許容し得る塩である。

本発明の化合物は、１つ以上の互変異性体形態で存在していてもよい。互変異性体及びその混合物は全て、本発明の範囲に含まれる。例えば、２－ヒドロキシキノリニルに関する請求項は、その互変異性体形態であるα－キノリノニルも包含するであろう。

本発明はまた、本発明の化合物の全ての好適な同位体変化型を含む。本発明の化合物の同位体変化型とは、少なくとも１つの原子が、同じ原子番号を有するが、自然界に通常見られる原子質量とは異なる原子質量を有する原子によって置換されているものと定義される。本発明の化合物に取り込むことができる同位体の例は、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素、及び塩素の同位体を含み、例えば、それぞれ、^２Ｈ、^３Ｈ、^１１Ｃ、^１３Ｃ、^１４Ｃ、^１５Ｎ、^１７Ｏ、^１８Ｏ、^３５Ｓ、^１８Ｆ、及び^３６Ｃｌ等である。本発明の特定の同位体変化型、例えば、^３Ｈ又は^１４Ｃ等の放射性同位体が組み込まれているものは、薬物及び／又は基質の組織分布研究において有用である。トリチウム化、すなわち^３Ｈ及び炭素－１４、すなわち^１４Ｃの同位体は、調製が容易であり、検出可能であるため特に好ましい。更に、ジュウテリウム、すなわち^２Ｈ等の同位体で置換すると、より高い代謝安定性から得られる特定の処置上の利点、例えば、in vivoにおける半減期の延長又は投与量要件の低減等を与えることができるので、状況によっては好ましい場合がある。本発明の化合物の同位体変化型は、一般に、好適な試薬の適切な同位体変化型を用い、従来の手順、例えば、例示的な方法によって、又は以下の実験の章に記載される調製によって、調製することができる。

本発明の化合物は、様々な方法で調製することができる。以下の反応スキーム及び下記において、Ｒ^１～Ｒ^３は、特に断りのない限り、第１の態様で定義された通りである。これらプロセスは、本発明の更なる態様を形成する。

本明細書全体を通して、一般式は、ローマ数字（Ｉ）、（II）、（III）、（IV）等で表記される。これら一般式のサブセットは、（Ia）、（Ib）、（Ic）等...（IVa）、（IVb）、（IVc）等と定義される。

一般式（Ｉ）の化合物は、反応スキーム１に従って式（II）の化合物から調製することができる。好適な反応条件は、式（II）の化合物を低温（例えば－７８℃）において塩化水素ガスで処理し、続いて、メタノールアンモニアで処理することを含む。

式（Ｉ）の化合物の塩酸塩は、式（Ｉ）の化合物をメタノール塩酸で処理することによって調製することができる。

一般式（II）の化合物は、反応スキーム２に従って一般式（III）の化合物から調製することができる。好適な反応条件は、式（III）の化合物を、１，４－ジオキサン中、１３０℃で５，５，５’，５’－テトラメチル－２，２’－ビ（１，３，２－ジオキサボリナン）、酢酸カリウム、及びPdCl₂（dppf）と混合することを含む。

一般式（III）の化合物は、反応スキーム３に従って一般式（IV）の化合物から調製することができる。好適な条件は、エタノール中水素化ホウ素ナトリウムで処理することを含む。

式（IIIa）の化合物、すなわち、ヒドロキシ基に結合している炭素原子がキラルである一般式（III）の化合物は、スキーム４に示す３段階手順に従って調製することができる。適切な不斉水素化剤で処理して、鏡像異性的に濃縮されたアルコールの混合物（IIIb）を与える。（IIIb）をキラル酸（Ｖ）で処理して、クロマトグラフィー又は結晶化によって分離することができるエステル（VI）のジアステレオマー混合物を与える。脱エステル化により、所望のキラルアルコール（IIIa）が出現する（reveals）。

式（IV）の化合物は、いくつかの方法を介して調製することができる。例えば、式（IV）の化合物は、反応スキーム５に従って式（VII）及び（VIII）の化合物から調製することができる。好適な反応条件は、（VII）、（VIII）、キサントホス、Pd₂(dba)₃、及び塩基（例えば、ナトリウムtert－ブトキシド又は炭酸セシウム）の乾燥１，４－ジオキサン溶液を、高温で加熱することを含む。

あるいは、式（IV）の化合物は、反応スキーム６に従って式（IX）及び（Ｘ）の化合物から調製することもできる。好適な条件は、THF中NaHMDSで処理することを含む。

式（Xa）の化合物、すなわち、Ｒ^３が３－クロロベンジルオキシ又は３－ピリジルメトキシである一般式（Ｘ）の化合物は、反応スキーム７に従って式（XI）の化合物から調製することができる。好適な条件は、３－クロロベンジルアルコール又は３－ピリジルメチルアルコール（それぞれ）を、好適な溶媒（例えば、DMF）中低温（例えば、０℃）にて水素化ナトリウムで処理し、続いて、好適な溶媒中の（XI）を滴下することを含む。

化合物（XI）は、反応スキーム８に従って式（XII）の化合物から調製することができる。好適な反応条件は、（XII）、シアン化亜鉛、テトラメチルエチレンジアミン、Pd₂(dba)₃、及びキサントホスを高温（例えば、１２０℃）で反応させることを含む。

化合物（XII）は、反応スキーム９に従って化合物（XIII）から調製することができる。好適な反応条件は、好適な溶媒（例えば、THF）中、（XIII）を０℃で塩化メチルマグネシウムと反応させることを含む。

化合物（XIII）は、反応スキーム１０に従って化合物（XIV）から調製することができる。好適な反応条件は、（XIV）を塩化オキサリル／DMFと反応させて対応する塩化アシルを形成し、続いて、Ｎ，Ｏ－ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩及びトリメチルアミンと反応させることを含む。

化合物（XIV）は、当技術分野において公知であり、市販されている。

あるいは、式（Xa）の化合物は、反応スキーム１１に従って化合物（XV）から調製することもできる。好適な条件は、トリフェニルホスフィン及び（Ｅ）－ビス（２－メトキシエチル）ジアゼン－１，２－ジカルボキシラートの存在下で（XV）を３－クロロベンジルアルコール若しくは３－ピリジルメチルアルコールと反応させるか、又は、例えば炭酸カリウム等の塩基の存在下で、（XV）を３－クロロベンジルブロミド若しくは３－ピリジルメチルブロミドと反応させることを含むアルキル化条件を介することを含む。

化合物（XV）は、反応スキーム１２に従って化合物（XVI）から調製することができる。好適な反応条件は、（XVI）をジメチルアセトアミド中高温（例えば、１４０℃）にてフェロシアン化カリウム三水和物、炭酸ナトリウム、及び酢酸パラジウム（II）で処理することを含む。

化合物（XVI）は、当技術分野において公知であり、市販されている。

本発明の化合物は、KLK-5経路によって媒介される疾患又は病態の処置において有用であり得る。

本明細書で使用するとき、疾患又は病態についての「治療する」、「治療すること」、又は「治療」とは、（１）疾患若しくは病態、又は該疾患若しくは病態の生物学的徴候のうちの１つ以上を寛解させること、（２）（ａ）疾患若しくは病態につながる、又は該疾患若しくは病態に関与する生物学的カスケードにおける１つ以上のポイント、あるいは（ｂ）疾患若しくは病態の生物学的徴候のうちの１つ以上に干渉すること、（３）疾患又は病態に関連する症状又は作用のうちの１つ以上を緩和すること、（４）疾患若しくは病態、又は疾患又は病態の生物学的徴候のうちの１つ以上の進行を遅らせること、及び／あるいは（５）疾患若しくは病態、又は疾患若しくは病態の生物学的徴候の重症度（severity）の可能性を減少させることを意味する。

本発明の化合物は、通常（ただし必ずではない）、適切な経路で患者に投与する前に医薬組成物に製剤化される。したがって、別の態様では、本発明は、本発明の化合物及び１つ以上の薬学的に許容し得る賦形剤を含む医薬組成物を提供する。

本明細書で使用するとき、「薬学的に許容し得る賦形剤」とは、本発明の化合物以外の、医薬組成物又は剤形中に存在する任意の薬学的に許容し得る材料を意味する。典型的には、該材料は、医薬組成物に形態、稠度、及び性能を与える。

本発明の医薬組成物は、典型的には、１つの本発明の化合物を含有する。しかし、特定の実施形態では、本発明の医薬組成物は、１つを超える本発明の化合物を含有する。更に、本発明の医薬組成物は、１つ以上の追加の薬学的に活性な化合物を含んでいてもよい。

本発明のこのような医薬組成物は、安全且つ有効な量の本発明の化合物を調剤することができるバルク形態で調製及び包装され、次いで、散剤又はシロップ剤等で患者に与えられてよい。あるいは、本発明の医薬組成物は、物理的に別個の各剤形が安全且つ有効な量の本発明の化合物を含有する剤形として調製及び包装されてもよい。したがって、別の態様では、本発明は、本発明の医薬組成物を含む剤形を提供する。各別個の剤形は、典型的には、本発明の化合物０．１mg～３０００mgを含有する。

本発明の組成物は、典型的には、所望の投与経路による患者への投与に適合した剤形に製剤化される。例えば、剤形としては、（１）錠剤、カプセル剤、カプレット剤、丸剤、ロゼンジ剤、散剤、シロップ剤、エリキシル剤、懸濁剤、液剤、乳剤、サシェ剤、及びカシェ剤等の経口投与；（２）滅菌液剤、懸濁剤、植込錠、及び再構成用の粉末等の非経口投与；（３）経皮パッチ等の経皮投与；（４）座剤、膣坐剤、フォーム剤等の直腸内及び膣内への投与；（５）乾燥散剤、エアゾール剤、懸濁剤、及び液剤（スプレー剤及び滴下剤）等の吸入及び経鼻；（６）クリーム剤、軟膏剤、ローション剤、液剤、ペースト剤、スプレー剤、フォーム剤、及びゲル剤等の局所投与；（７）ロゼンジ剤、パッチ剤、スプレー剤、滴下剤、チューインガム、及び錠剤等の頬側及び舌下への投与に適合したものが挙げられる。

好適な薬学的に許容し得る賦形剤は、選択された具体的な剤形に応じて異なる。更に、好適な薬学的に許容し得る賦形剤は、それが組成物中で発揮し得る具体的な機能について選択してよい。例えば、特定の薬学的に許容し得る賦形剤は、均一な剤形の製造を容易にする能力について選択され得る。特定の薬学的に許容し得る賦形剤は、安定な剤形の製造を容易にする能力について選択され得る。特定の薬学的に許容し得る賦形剤は、患者に投与されたときの、本発明の化合物の身体のある器官又は部分から身体の別の器官又は部分への運搬又は輸送を容易にする能力について選択され得る。特定の薬学的に許容し得る賦形剤は、患者のコンプライアンスを高める能力について選択され得る。特定の薬学的に許容し得る賦形剤は、病態を処置するのに適切な速度で本発明の化合物の放出させるのを容易にする能力について選択され得る。

好適な薬学的に許容し得る賦形剤としては、以下の種類の賦形剤が挙げられる：希釈剤、充填剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、流動促進剤、造粒剤、コーティング剤、湿潤剤、溶媒、共溶媒、懸濁剤、乳化剤、甘味料、着香剤、匂いマスキング剤、着色剤、固化防止剤、保水剤、キレート剤、可塑剤、増粘剤、速度調節剤、酸化防止剤、防腐剤、安定剤、界面活性剤、及び緩衝剤。当業者は、特定の薬学的に許容し得る賦形剤が１超の機能を発揮し得、また製剤中に存在する賦形剤の量がどの程度か及び製剤中に存在する他の成分が何であるかに応じて、別の機能を発揮し得ることを理解するであろう。

当業者は、本発明の化合物と共に使用するのに適切な量の、好適な薬学的に許容し得る賦形剤を決定することができる、当技術分野における知識及び技能を有している。更に、薬学的に許容し得る賦形剤について記載しており、好適な薬学的に許容し得る賦形剤を選択するのに有用であり得る、当業者が利用可能な多くの資源が存在する。例としては、Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company)、The Handbook of Pharmaceutical Additives (Gower Publishing Limited)、及びThe Handbook of Pharmaceutical Excipients (the American Pharmaceutical Association and the Pharmaceutical Press)が挙げられる。本発明の医薬組成物は、当業者に公知の技術及び方法を用いて調製することができる。当技術において一般的に使用されている方法のいくつかは、Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company)に記載されている。

一実施形態では、剤形は、クリーム剤、軟膏剤、ローション剤、液剤、ペースト剤、スプレー剤、フォーム剤、及びゲル剤等の、局所投与に適合しているものである。

局所投与に好適な製剤は、皮膚への投与に好適なリニメント剤、ローション剤、クリーム剤、軟膏剤、及びペースト剤等の、皮膚を通して炎症部位に浸透するのに好適な液体又は半液体の調製品を含む。

本発明に係るローションは、皮膚への塗布に好適なものを含む。皮膚に塗布するためのローション剤又はリニメント剤は、乾燥を促進し、皮膚を冷却するための薬剤、例えば、アルコール若しくはアセトン、及び／又はグリセロール等の保湿剤、又はヒマシ油若しくはラッカセイ油等の油を含み得る。

本発明に係るクリーム剤、軟膏剤、又はペースト剤は、外用するための活性成分の半固体製剤である。これらは、微粉化又は粉末化された形態の活性成分を、単独で、又は水性若しくは非水性流体中の溶液若しくは懸濁液として、好適な機械を用いて、脂肪性又は非脂肪性の基剤と混合することによって製造することができる。基剤は、硬質、軟質、又は流動パラフィン等の炭化水素、グリセロール、蜜蝋、金属石鹸；植物粘液質（mucilage）；アーモンド油、トウモロコシ油、ラッカセイ油、ヒマシ油、又はオリーブ油等の天然由来の油；羊毛脂若しくはその誘導体、又はステアリン酸若しくはオレイン酸（steric or oleic acid）等の脂肪酸を、プロピレングリコール等のアルコール又はマクロゲルと共に含み得る。製剤には、ソルビタンエステル又はそのポリオキシエチレン誘導体等のアニオン性、カチオン性、又は非イオン性の界面活性剤等の、任意の好適な表面活性剤を組み込んでもよい。また、天然ガム等の懸濁剤、セルロース誘導体、又は珪質（silicaceous）シリカ等の無機物、及びラノリン等の他の成分を含んでいてもよい。

局所投与の場合、本発明の化合物は、製剤の０．００１％w/w～１０％w/w、例えば１重量％～２重量％を構成し得る。しかし、製剤の最大１０％w/wを構成してもよいが、好ましくは、５％w/w未満、より好ましくは、０．１％～３％w/wを構成する。

本発明は、以下の更なる態様を含むことが理解されるであろう。上述の疾患及び病態は、適切であれば、これら更なる態様にも及ぶ。更に、第１の態様に関連して上で定義された実施形態は、これら更なる態様にも及ぶ。
ｉ）KLK-5経路によって媒介される疾患又は病態を処置するための医薬の製造における、本発明の化合物の使用。一実施態様では、該疾患又は状態は、ネザートン症候群、酒さ、アトピー性皮膚炎、乾癬、及び掻痒からなる群から選択される。
ii）有効量の本発明の化合物を投与することを含む、ヒトにおけるKLK-5受容体によって媒介される疾患又は病態を処置する方法。一実施態様では、該疾患又は状態は、ネザートン症候群、酒さ、アトピー性皮膚炎、乾癬、及び掻痒からなる群から選択される。
iii）ａ）本発明の化合物及びｂ）１つ以上の薬学的に許容し得る賦形剤を含む医薬組成物。
iv）ａ）本発明の化合物０．０５～３０００mg及びｂ）１つ以上の薬学的に許容し得る賦形剤０．１～１００ｇを含む医薬組成物。
ｖ）KLK-5経路によって媒介される疾患又は病態を処置するための医薬組成物。一実施態様では、該疾患又は状態は、ネザートン症候群、酒さ、アトピー性皮膚炎、乾癬、及び掻痒からなる群から選択される。
vi）治療において使用するための本発明の化合物。
vii）KLK-5経路によって媒介される疾患又は病態の処置において使用するための、本発明の化合物。一実施態様では、該疾患又は状態は、ネザートン症候群、酒さ、アトピー性皮膚炎、乾癬、及び掻痒からなる群から選択される。

支持化合物（supporting compounds）
本発明の化合物および中間体は、ａ）ACD/Name PRO 6.02化学命名ソフトウェア（Advanced Chemistry Development Inc., Toronto, Ontario, M5H2L3, Canada）；又はｂ）MarvinSketch.NET.5.11.4（ChemAxon Kft. Zahony u. 7, Building HX 1031 Budapest, Hungary）のいずれかを使用して命名された。

略称
ACN －アセトニトリル
CHAPS －コラミドプロピル）ジメチルアンモニオ］－１－プロパンスルホナート）
DMAP －Ｎ，Ｎ－ジメチルピリジン－４－アミン
DMF －Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド
DMSO －ジメチルスルホキシド
DMAP －４－ジメチルアミノピリジン
EDC －１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
ES －エレクトロスプレー
GCMS －ガスマトグラフィー－質量分析
HPLC －高圧液体クロマトグラフィー
IPA －イソプロピルアルコール
LCMS －液体クロマトグラフィー－質量分析
MS －質量分析
rt －保持時間
SFC －超臨界流体クロマトグラフィー
TFA －トリフルオロ酢酸；
THF －テトラヒドロフラン
UPLC －超高性能液体クロマトグラフィー

LCMS法：
方法１：
分析HPLCは、X-Select CSH C18 XPカラム（２．５μm ３０×４．６mm id）にて、水中０．１％ギ酸（溶媒Ａ）及びアセトニトリル中０．１％ギ酸（溶媒Ｂ）で、以下の溶出勾配：０～３分：５％→１００％Ｂ、３～４分：１００％Ｂを使用して溶出して、４０℃において流速１．８mL／分で実施した。質量スペクトル（MS）は、Waters ZQ質量分析計（スキャン２００～９００uma）にて、２０Ｖコーン電圧で、エレクトロスプレー陽イオン化［ES+、MH+分子イオンを与える］、又はエレクトロスプレー陰イオン化［ES-、(M-H)-分子イオンを与える］モードを使用して記録した。

方法２：
分析HPLCは、X-Select CSH C18 XPカラム（２．５μm ３０×４．６mm id）にて、水中０．１％ギ酸（溶媒Ａ）及びアセトニトリル中０．１％ギ酸（溶媒Ｂ）で、以下の溶出勾配：０～６分：５％→１００％Ｂ、６～７分：１００％Ｂを使用して溶出して、４０℃において流速１．８mL／分で実施した。質量スペクトル（MS）は、Waters ZQ質量分析計（スキャン２００～９００uma）にて、２０Ｖコーン電圧で、エレクトロスプレー陽イオン化［ES+、MH+分子イオンを与える］、又はエレクトロスプレー陰イオン化［ES-、(M-H)-分子イオンを与える］モードを使用して記録した。

支持化合物／中間体
以下の手順では、典型的には、各出発物質の後に中間体に言及される。これは単に、化学分野の当業者を支援するために提供されるものである。出発物質は、必ずしも言及されるバッチから調製されたものでなくてもよい。

化合物１
４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンズイミドアミド塩酸塩

４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリル（中間体１、１５０mg、０．３５４mmol）を封管内のエタノール（２０mL）に溶解させ、－７８℃まで冷却した。この溶液に塩化水素（ｇ）を１０分間ゆっくりと吹き込んだ。反応物を周囲温度まで上昇させ、その温度で一晩静置した。得られた溶液を、３０℃で加熱した水浴を用いて減圧下で濃縮した。イミダートをメタノールアンモニア（７N、過剰）に溶解させ、封管内で一晩撹拌した。反応物を減圧下で濃縮し、残渣を水、メタノール、及び酢酸エチルに取り、副生成物を排除した。残留白色粉状物を塩酸（１M）に溶解させ、減圧下で濃縮した。残渣を減圧下、４０℃で３時間乾燥させて、表記化合物（２０mg）を与えた。¹H NMR (D₆-DMSO): δH 9.26 (s, 2H), 9.12 (s, 2H), 8.91 (s, 1H), 8.78 (d, J = 4.6Hz, 1H), 8.31 (d, J = 7.2Hz, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.80 (d, J = 6.6Hz, 2H), 7.59 (d, J = 8.0Hz, 1H), 7.49 (m, 2H), 7.29 (d, J = 8.0Hz, 1H), 5.41 (m, 3H), 3.27 (m, 1H), 3.18 (m, 1H). LCMS：保持時間１．５９分、MH⁺４４２（方法１）。

中間体１
４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリル

４－（２－（２－ブロモ－４－（トリフルオロメチル）フェニル）－１－ヒドロキシエチル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリル（中間体２、２００mg、０．４１９mmol）５，５，５’，５’－テトラメチル－２，２’－ビ（１，３，２－ジオキサボリナン）（２８４mg、１．２５７mmol）、及びPdCl2(dppf)（３．６８mg、５．０３μmol）を、封管内の１，４－ジオキサン（１５mL）中で混合した。この懸濁液を脱気し、窒素でバックフィルした。酢酸カリウム（８２mg、０．８３８mmol）を添加し、反応容器を密閉し、マイクロ波照射下、１３０℃で２５分間加熱した。反応混合物をセライト床で濾過し、濾液を真空中で濃縮した。残渣を４０ｇシリカカラムに直接ロードし、シクロヘキサン中０→３０％（酢酸エチル／エタノール３：１）で溶出した。適切な画分を合わせ、減圧下で濃縮した。残渣をアセトニトリルに取り、濾過して、表記化合物を白色の固形物（１５０mg）として与えた。¹H NMR (D₆-DMSO): δH 9.15 (s, 1H), 8.74 (d, J = 1.7Hz, 1H), 8.60 (dd, J = 4.7Hz, J = 1.5Hz, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.93 (dt, J = 7.8Hz, J = 1.9Hzx2, 1H), 7.80 (m, 2H), 7.56 (m, 1H), 7.48 (m, 2H), 7.26 (d, J = 8.0Hz, 1H), 5.38 (m, 3H), 3.25 (m, 1H)を含む. LCMS：保持時間２．４６分、MH⁺４２５（方法１）。

中間体２
４－（２－（２－ブロモ－４－（トリフルオロメチル）フェニル）－１－ヒドロキシエチル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリル

４－（２－（２－ブロモ－４－（トリフルオロメチル）フェニル）アセチル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリル（中間体３、４８０mg、１．０１０mmol）のエタノール溶液に、水素化ホウ素ナトリウム（３８．２mg、１．０１mmol）を添加し、反応物を２０℃で１時間撹拌した。実験を塩酸（１M）でクエンチした。混合物を周囲温度で５分間撹拌した後、pHが８に達するまで水酸化ナトリウム溶液（１M）を添加した。得られた溶液を酢酸エチルで抽出し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。濾液を真空中で濃縮した。残渣を４０ｇシリカカラムにロードし、シクロヘキサン中０→３０％（酢酸エチル／エタノール３：１）の勾配で溶出した。適切な画分を合わせ、真空中で濃縮して、表記化合物をクリーム色の固形物（２００mg）として与えた。¹H NMR (D₆-DMSO): δH 8.72 (d, J = 1.7Hz, 1H), 8.59 (dd, J = 4.8Hz, J = 1.6Hz, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.91 (dt, J = 7.9Hz, J = 1.9Hz x2, 1H), 7.71 (m, 2H), 7.53 (d, J = 8.0Hz, 1H), 7.48 (dd, J = 7.9Hz, J = 4.8Hz, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.08 (d, J = 8.0Hz, 1H), 5.77 (d, J = 5.1Hz, 1H), 5.35 (d, J = 11.8Hz, 1H), 5.28 (d, J = 12.0Hz, 1H), 3.08 (m, 2H).LCMS：保持時間２．５５分、MH⁺４７７／４７９（方法１）。

中間体３
４－（２－（２－ブロモ－４－（トリフルオロメチル）フェニル）アセチル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリル

等分量の２本の封管（それぞれに４－アセチル－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリル４５０mg）内で反応を実施した。２－ブロモ－１－ヨード－４－（トリフルオロメチル）ベンゼン（１３９１mg、３．５７mmol）、４－アセチル－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリル（中間体４、９００mg、３．５７mmol）、キサントホス（７４．３mg、０．１２８mmol）、Pd2(dba)3（４９．０mg、０．０５４mmol）、及びナトリウムtert－ブトキシド（１０２９mg、１０．７０mmol）の乾燥１，４－ジオキサン（８mL）溶液を、Biotage Initiatorマイクロ波中、８０℃で６０分間加熱した。反応物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶解させ、水で洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。濾液を真空中で濃縮した。残渣を８０ｇシリカカラムにロードし、シクロヘキサン中０→２０％（酢酸エチル／エタノール３：１）の勾配で溶出した。適切な画分を合わせ、真空中で濃縮して、表記化合物をクリーム色の固形物（５１０mg）として与えた。¹H NMR (D₆-DMSO): δH 8.75 (s, 1H), 8.60 (d, J = 3.8Hz, 1H), 8.03 (m, 2H), 7.94 (m, 2H), 7.86 (d, J = 8.0Hz, 1H), 7.80 (d, J = 7.6Hz, 1H), 7.66 (d, J = 7.8Hz, 1H), 7.49 (dd, J = 7.6 Hz, J = 4.9Hz, 1H), 5.49 (s, 2H), 4.80 (s, 2H).LCMS：保持時間２．７１分、MH⁺４７５／４７７（方法１）。

中間体４
４－アセチル－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリル

４－アセチル－２－ヒドロキシベンゾニトリル（中間体５、１０００mg、６．２１mmol）をピリジン－３－イルメタノール（７４５mg、６．８３mmol）、トリフェニルホスフィン（２４４１mg、９．３１mmol）、及び（Ｅ）－ビス（２－メトキシエチル）ジアゼン－１，２－ジカルボキシラート（２１８０mg、９．３１mmol）に添加した。反応物を２０℃で３日間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮し、残渣を酢酸エチルに溶解させ、水酸化ナトリウム（１N）溶液及び水で洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。濾液を真空中で濃縮し、残渣を８０ｇシリカカラムにロードし、シクロヘキサン中０→２０％（酢酸エチル／エタノール３：１）の勾配で溶出した。適切な画分を合わせ、真空中で濃縮して、表記化合物を白色の固形物（９００mg）として与えた。¹H NMR (D₆-DMSO): δH 8.74 (s, 1H), 8.60 (d, J = 3.4Hz, 1H), 7.95 (m, 2H), 7.79 (s, 1H), 7.70 (d, J = 8.0Hz, 1H), 7.49 (dd, J = 7.7Hz, J = 4.8Hz, 1H), 5.45 (s, 2H), 2.66 (s, 3H).LCMS：保持時間１．４８分、MH⁺２５３（方法１）。

中間体５
４－アセチル－２－ヒドロキシベンゾニトリル

不活性条件下で、フェロシアン化カリウム三水和物（１．１７９ｇ、２．７９mmol）及び炭酸ナトリウム（１．９７１ｇ、１８．６０mmol）を微粉末に粉砕し、６０℃で３時間、真空下で乾燥させた。フラスコに１－（４－ブロモ－３－ヒドロキシフェニル）エタノン（２ｇ、９．３０mmol）、ジメチルアセトアミド（２０mL、９．３０mmol）、及びフェロシアン化カリウム／炭酸ナトリウム混合物を仕込み、次いで、排気し、窒素（×２）を充填した。酢酸パラジウム（II）（０．１０４ｇ、０．４６５mmol）を添加し、反応物を１４０℃で２時間加熱した。反応混合物を周囲温度まで冷却し、酢酸エチル（２０mL）で希釈した。得られたスラリーを濾過し、濾液を酢酸エチルで洗浄した。塩酸（１M）を濾液に添加し、生成物を酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。この溶液を活性炭（charcoal）で処理し、シリカ床で濾過して黄色の液状物を与えた。溶媒を蒸発させ、残った淡黄色の固形物（１．１ｇ）を、更に精製することなく次の反応に使用した。¹H NMR (D₆-DMSO): δH 11.48 (s, 1H), 7.79 (d, J= 8.0Hz, 1H), 7.50 (m, 2H), 2.58 (s, 3H).LCMS：保持時間１．７３分、MH⁺１６０（方法１）。

化合物２
（Ｒ）－４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンズイミドアミド塩酸塩

（Ｒ）－４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンズイミドアミド（化合物３、２１ｇ、４７．５１mmol）の撹拌されているメタノール（４２mL）懸濁液に、不活性雰囲気下、０℃でメタノール中４N HCl（４２mL）を添加した（透明な溶液が観察された）。３０分間撹拌した後、減圧下でメタノールを蒸発させ、残渣を９日間凍結乾燥した。残渣をアセトニトリル（２００mL）中で２４時間撹拌し、濾過により固形物を単離した。固形物をメタノール（５０mL）に溶解させ、ジエチルエーテル（８００mL）をゆっくりと加えた。濾過及び４８時間の凍結乾燥によって固形物を単離して、表記化合物（２０．３ｇ；９９．４％ ee）をオフホワイトの固形物として与えた。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ ppm 9.25 (br s, 2 H; D₂O exchangeable), 9.16 (br s, 2 H; D₂O exchangeable), 8.93 (s, 1 H), 8.78 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 8.36 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 8.08 (s, 1 H), 7.88 - 7.75 (m, 2 H), 7.58 (d, J = 7.7 Hz, 1 H), 7.52 - 7.44 (m, 2 H), 7.28 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 5.45 - 5.34 (m, 3 H), 3.33 - 3.23 (m, 1 H), 3.21 - 3.11 (m, 1 H).LCMS（ESI）：保持時間２．４５分、MH⁺４４２；９９．３％（方法Ｎ）。UPLC：保持時間３．５６分、９８．９０％（方法Ｃ）。キラルHPLC：保持時間３．７７分、９９．７１％（方法Ｃ）。SOR＝＋８０．４２（ｃ＝０．５、MeOH中）。

化合物３
（Ｒ）－４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンズイミドアミド

新たに調製したアンモニアのメタノール溶液（溶液中約７M；１．５Ｌ）を、０℃で粗メチル（Ｒ）－４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンズイミダート（中間体６、５０ｇ）に添加した。反応物を室温で撹拌した。２４時間後、アンモニアのメタノール水溶液（５００mL）を添加し、室温で４８時間撹拌した。濾過により固形物を単離し、アンモニアのメタノール溶液（３００mL）で洗浄し、真空下で乾燥させた。固形物を水（１Ｌ）に取り、３時間撹拌した。固形物を濾別し、真空下で乾燥させて、表記化合物（２１ｇ）をオフホワイトの固形物として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6; VT-90 °C): δ ppm 8.69 (s, 1 H), 8.54 - 8.53 (d, J = 3.5 Hz, 1 H), 8.04 (s, 1 H), 7.86 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 7.71 (d, J = 7.0 Hz, 1 H), 7.51 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 7.47 - 7.34 (m, 2 H), 7.29 (s, 1 H) 7.10 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 5.30 (dd, J = 10.1, 3.7 Hz, 1 H), 5.21 (s, 2 H), 3.19 - 3.29 (m, 1 H), 3.14 - 3.09 (m, 1 H). LCMS（ESI）：保持時間３．６０分；MH⁺４４２；９５．５％（方法Ｍ）。UPLC：保持時間３．６３分、９７．８８％（方法Ｃ）。

中間体６
メチル（Ｒ）－４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンズイミダート

（Ｒ）－４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリル（中間体７、４０ｇ、９４．３３mmol）の撹拌されているメタノール（１．６Ｌ）溶液を、完全な飽和が観察されるまで、－１０℃で乾燥HClガスをパージした（乾燥HClガスを～９時間パージした）。反応物を室温で１６時間撹拌した。反応溶液を不活性雰囲気条件下、減圧下（～３５℃未満）で濃縮して、粗表記化合物（５０ｇ）を淡黄色の粘着性固形物として与え、これをそのまま次の反応に供した。LCMS（ESI）：保持時間１．４６分；MH⁺４５７；７８．２％（方法Ｋ）。

中間体７
（Ｒ）－４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリル

（Ｒ）－４－（２－（２－ブロモ－４－（トリフルオロメチル）フェニル）－１－ヒドロキシエチル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリル（中間体８、１２５ｇ、０．２６２mol）及びビス（ネオペンチルグリコラト）ジボロン（２９６ｇ、１．３１mol）の、撹拌されている脱気１，４－ジオキサン（３．１２５Ｌ、２５vol）溶液に、tert－ブチルジフェニルホスフィン（６．４８ｇ、２６．２mmol）及びPd(OAc)₂（８．８２ｇ、１３．１０mmol）を逐次添加し、混合物を１０分間脱気した。最後に、酢酸カリウム（１０３ｇ、１．０４８mol）を添加し、混合物を１０分間脱気した。反応物を７５℃で３時間撹拌した。酢酸エチル（２．５Ｌ）を用い、セライトパッドを通して反応混合物を濾過した。濾液を水（５×２Ｌ）、ブライン（２×２Ｌ）で洗浄し、Na₂SO₄で乾燥させ、濾過し、１２時間放置した。沈殿した固形物を濾過により単離し、真空下で乾燥させて、表記化合物（純度９６％）８５ｇをオフホワイトの固形物として与えた。

Pdスカベンジャー処理：酢酸エチル（３Ｌ）中３％メタノール中の、（Ｒ）－４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリル（１０６ｇ）の透明な溶液に、６５℃で、Siliamet（登録商標）-DMT（１０．６ｇ；０．１w/w）を添加し、同温度で３時間撹拌した。得られた高温の不均一混合物を、セライトパッドで濾過した。濾液を減圧下で濃縮した。得られた残渣をアセトニトリル（１Ｌ）中で一晩撹拌し、濾過により固形物を単離し、乾燥させて、表記化合物（８５ｇ）をオフホワイトの固形物として与えた。

HNMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ ppm 9.12 (s, 1 H), 8.73 (s, 1 H), 8.59 (d, J = 4.6 Hz, 1 H), 8.06 (s, 1 H), 7.92 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 7.79 - 7.77 (m, 2 H), 7.54 (s, 1 H), 7.51 - 7.44 (m, 2 H), 7.26 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 5.42 - 5.30 (m, 3 H), 3.28 - 3.22 (m, 1 H), 3.17 - 3.09 (m, 1 H). LCMS（ESI）：保持時間１．８７分；MH⁺４２５；９９．６３％（方法Ｋ）。UPLC：９９．１５％保持時間４．４８分（方法Ｃ）。キラルHPLC：９９．９９％保持４．２８分（方法Ｂ）。

中間体８
（Ｒ）－４－（２－（２－ブロモ－４－（トリフルオロメチル）フェニル）－１－ヒドロキシエチル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリル

（Ｒ）－２－（２－ブロモ－４－（トリフルオロメチル）フェニル）－１－（４－シアノ－３－（ピリジン－３－イルメトキシ）フェニル）エチル（Ｓ）－２－アセトキシ－２－フェニルアセテート（中間体９、２３０ｇ、３５２．２mmol）の撹拌されているメタノール（２．３Ｌ）溶液に、炭酸カリウム（２４．３ｇ、１７６mmol）を添加し、反応混合物を３５℃で３０分間撹拌した。反応溶媒を減圧下で蒸発させた。残渣を酢酸エチル(２．５Ｌ）に溶解させ、水（２Ｌ）、ブライン（２Ｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。残渣をｎ－ペンタン（５００mL）を用いて１時間トリチュレートし、濾過により固形物を単離し、真空下で乾燥させて、表記化合物（１５５ｇ、９２％収率；９９．３５％ ee）を淡黄色の固形物として与えた。¹HNMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ ppm 8.71 (d, J = 1.8 Hz, 1 H), 8.58 (dd, J = 4.7, 1.4 Hz, 1 H), 7.95 (s, 1 H), 7.91 - 7.89 (m, 1 H), 7.74 - 7.65 (m, 2 H), 7.52 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 7.48 - 7.46 (m, 1 H), 7.32 (s, 1 H), 7.08 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 5.75 (br s, 1 H), 5.37 - 5.25 (m, 2 H), 4.93 (br s, 1 H), 3.12 - 3.06 (m, 2 H). LCMS（ESI）：保持時間２．２７分；MH⁺４７７；９８．６２％（方法Ｂ）。キラルHPLC：９９．６７％、保持時間９．１３分（方法Ａ）。

中間体９
（Ｒ）－２－（２－ブロモ－４－（トリフルオロメチル）フェニル）－１－（４－シアノ－３－（ピリジン－３－イルメトキシ）フェニル）エチル（Ｓ）－２－アセトキシ－２－フェニルアセタート

（Ｒ）－４－（２－（２－ブロモ－４－（トリフルオロメチル）フェニル）－１－ヒドロキシエチル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリル（中間体１０、３００ｇ、０．６２８mol）の撹拌されているTHF（３Ｌ）溶液に、室温で（Ｓ）－（＋）－Ｏ－アセチル－マンデル酸（２２０ｇ、１．１３２mol）、EDC.HCl（２６４ｇ、１．３８２mol）、及びDMAP（２３ｇ、１８８．６mmol）を添加し、４時間撹拌を続けた。反応物を酢酸エチル（２Ｌ）で希釈し、水（２×２Ｌ）、ブライン（２Ｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。石油エーテル中４５％酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカ１００～２００メッシュ）によって残渣を精製して、ジアステレオマー混合物（３４０ｇ）を淡黄色の固形物として与えた。HPLC：所望のジアステレオマー６１．８％（保持時間５．８５分、方法Ｃ）及び他のジアステレオマー１８．９％（保持時間５．７４分、方法Ｃ）。イソプロパノール（１０．２Ｌ、３０体積）中のジアステレオマー混合物（３４０ｇ）を６８℃で加熱して、透明な溶液を得た。次いで、溶液を室温に冷却し、所望の生成物（前のバッチから得られた）を用いて種晶添加を行い（seeded）、１８時間放置した。沈殿した固形物を濾過により単離し、イソプロパノール（３×３００mL）、ｎ－ペンタン（３×３００mL）で洗浄し、真空下で乾燥させて、ジアステレオマー的に純粋な表記化合物（１９０ｇ）を淡黄色の固形物として与えた。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ ppm 8.73 (s, 1 H), 8.61 - 8.60 (m, 1 H), 7.92 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 7.84 - 7.76 (m, 2 H), 7.49 (dd, J = 7.7, 4.8 Hz, 1 H), 7.44 - 7.25 (m, 8 H), 7.18 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 6.05 - 6.03 (m, 1 H), 5.94 (s, 1 H), 5.42 - 5.29 (m, 2 H), 3.27 - 3.25 (m, 2 H), 2.07 (s, 3 H). LCMS（ESI）：保持時間２．４６分、MH⁺６５３；９７％（方法Ｌ）。HPLC：９５．６７％保持時間５．８７分（方法Ｃ）。

中間体１０
（Ｒ）－４－（２－（２－ブロモ－４－（トリフルオロメチル）フェニル）－１－ヒドロキシエチル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリル

DMF：イソプロパノール：H₂O（３Ｌ：３Ｌ：３００mL）混合物中の、４－（２－（２－ブロモ－４－（トリフルオロメチル）フェニル）アセチル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリル（中間体１１、３００ｇ、０．６３２mol）の撹拌されている溶液に、ギ酸カリウム（２６６ｇ、３．１６０mol）及びRuCl[(R,R)-Tsdpen]メシチレン（７．０８ｇ、１１．３９mmol）を添加し、反応物を窒素雰囲気下、室温で１６時間撹拌した。イソプロパノールを減圧下で除去した。得られた反応混合物を氷冷水に注いだ。得られたガム状固形物を濾過により単離し、冷水（６×１Ｌ）で洗浄し、乾燥させた。得られた遊離固形物をペンタン中１０％ジエチルエーテル（３×４００mL）で洗浄し、乾燥させて、表記化合物（３００ｇ、収率９９％、６９．２７％ ee）を黄色の固形物として与えた。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ ppm 8.71 (d, J = 1.8 Hz, 1 H), 8.58 (dd, J = 4.7, 1.4 Hz, 1 H), 7.95 (s, 1 H), 7.91 - 7.89 (m, 1 H), 7.74 - 7.65 (m, 2 H), 7.52 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 7.48 - 7.46 (m, 1 H), 7.32 (s, 1 H), 7.08 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 5.75 (br s, 1 H), 5.37 - 5.25 (m, 2 H), 4.93 (br s, 1 H), 3.12 - 3.06 (m, 2 H). LCMS (ESI): 保持時間２．２１分；MH⁺４７７、９３．１％（方法Ｂ）。キラルHPLC：保持時間１６．４分；８４．５４％（方法Ａ）。

中間体１１
４－（２－（２－ブロモ－４－（トリフルオロメチル）フェニル）アセチル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリル

４－アセチル－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリル（中間体１２、７０ｇ、２７８mmol）及び２－ブロモ－１－ヨード－４－（トリフルオロメチル）ベンゼン（１１６．３ｇ、３３３mmol）の撹拌されている１，４－ジオキサン（１．０５Ｌ）溶液に、炭酸セシウム（１８１ｇ、５５６mmol）を添加し、混合物を１０分間脱気した。これにキサントホス（８．６４ｇ、１６．７mmol）を添加し、混合物を１０分間脱気した。Pd₂(dba)₃（７．６３ｇ、８．３３mmol）を添加し、混合物を１０分間脱気した。反応混合物を９０℃で４時間加熱した。反応混合物をセライトパッドで濾過し、酢酸エチル（２００mL）で洗浄した。濾液を水（２００mL)で希釈し、酢酸エチル（２×１Ｌ)で抽出した。有機相をNa₂SO₄で乾燥させ、濃縮した。石油エーテル中４０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカ１００～２００メッシュ）によって、得られた粗生成物を精製して、黄色の固形物（５５ｇ）を与えた。４－アセチル－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリル（中間体１２、３５０ｇ、１．３８mol）及び２－ブロモ－１－ヨード－４－（トリフルオロメチル）ベンゼン（５８１．６ｇ、１．６６mol）の撹拌されている１，４－ジオキサン（５．２５Ｌ）溶液に、炭酸セシウム（９０５．２ｇ、２．７７mol）を添加し、混合物を１０分間脱気した。これにキサントホス（４３．２ｇ、８３．３mmol）を添加し、混合物を１０分間脱気した。Pd₂(dba)₃（３８．１ｇ、４１．６mmol）を添加し、混合物を１０分間脱気した。反応混合物を９０℃で４時間加熱した。反応混合物をセライトパッドで濾過し、酢酸エチル（３Ｌ）で洗浄した。濾液を水（２Ｌ)で希釈し、酢酸エチル（２×４Ｌ)で抽出した。合わせた有機層を無水Na₂SO₄で乾燥させ、真空下で濃縮した。得られた粗生成物を、石油エーテル中４０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカ１００～２００メッシュ）によって精製して、黄色の固形物（３２５ｇ）を与えた。固形物を合わせ、ジエチルエーテル（５００mL）で洗浄して、表記化合物（３７０ｇ、合計収率４６％）を淡黄色の固形物として与えた。

¹HNMR (400 MHz, CDCl₃):δ ppm 8.71 (d, J = 1.8 Hz, 1 H), 8.63 (dd, J = 4.7, 1.2 Hz, 1 H), 7.92 -7.83 (m, 2 H), 7.78 - 7.75 (m, 1 H), 7.73 - 7.69 (m, 1 H), 7.67 (s, 1 H), 7.58 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 7.40 - 7.34 (m, 2 H), 5.30 (s, 2 H), 4.49 (s, 2 H)；LCMS（ESI）：保持時間２．２５分、MH⁺４７５、９９．１％（方法Ｋ）。

中間体１２
４－アセチル－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリル

水素化ナトリウム（鉱油中６０％；２１５ｇ、５．３６mol）の撹拌されているDMF（３Ｌ）懸濁液に、０℃で、ピリジン－３－イルメタノール（６２７mL、６．４４mol）を３０分間かけて滴下した。得られた混合物を室温で３０分間撹拌した。この混合物に、４－アセチル－２－フルオロベンゾニトリル（中間体１３、３５０ｇ、２．１５mol）のDMF（５００mL）溶液を０℃で滴下した。次いで、反応物を室温で３時間撹拌した。冷水（７Ｌ）を添加した。形成された固形物を濾過により単離し、ジエチルエーテル（２．５Ｌ）で洗浄し、真空下で乾燥させて、表記化合物（４５０ｇ）を淡褐色の固形物として与え、これを更に精製することなく次の反応にそのまま供した。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ ppm 8.71 (s, 1 H), 8.63 - 8.62 (m, 1 H), 7.89 - 7.87 (m, 1 H), 7.72 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 7.64 (s, 1 H), 7.61 - 7.59 (m, 1 H), 7.38 - 7.36 (m, 1 H), 5.29 (s, 2 H), 2.63 (s, 3 H).LCMS（ESI）：保持時間１．７８分、MH⁺２５３、７６％（方法Ｊ）。

中間体１３
４－アセチル－２－フルオロベンゾニトリル

オートクレーブ内で、１－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）エタン－１－オン（４５０ｇ、２．０７mol）の撹拌されているDMF（３．６Ｌ）溶液に、シアン化亜鉛（６０７．５ｇ、５．１８mol）、次いで、テトラメチルエチレンジアミン（TMEDA、３４２mL、２．０７mol）を添加し、混合物をアルゴンで１０分間脱気した。これにPd₂(dba)₃（５６．７ｇ、６２．１mmol）及びキサントホス（３６ｇ、６２．１mmol）を添加し、再びアルゴンで１０分間脱気した。反応混合物を１２０℃に加熱し、４時間撹拌した。反応物をセライトパッドで濾過した。濾液を水（６Ｌ)で希釈し、酢酸エチル（２×５Ｌ)で抽出した。合わせた有機層をブライン（２Ｌ)で洗浄し、減圧下で濃縮して、褐色のガム状物として粗生成物を与えた。オートクレーブ内で、１－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）エタン－１－オン（４３０ｇ、１．９８mol）の撹拌されているDMF（３．４４Ｌ）溶液に、シアン化亜鉛（５８０．６ｇ、４．９５mol）及びテトラメチルエチレンジアミン（TMEDA、３２７mL、１．９８mol）を添加し、混合物をアルゴンで１０分間脱気した。これにPd₂(dba)₃（５４．２ｇ、５９．４mmol）及びキサントホス（３４．４ｇ、５９．４mmol）を添加し、混合物を再びアルゴンで脱気した。反応混合物を１２０℃に加熱し、４時間撹拌した。反応物をセライトパッドで濾過した。濾液を冷水（５Ｌ)で希釈し、酢酸エチル（２×３Ｌ)で抽出した。合わせた有機層をブライン（１．５Ｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して、粗生成物を与えた。

両バッチの粗物質を合わせ、石油エーテル中酢酸エチル（２５→５０％酢酸エチル）の勾配で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカ１００～２００メッシュ）によって精製して、表記化合物（６３０ｇ、９４％）を黄色の固形物として与えた。

¹HNMR (400 MHz, CDCl₃): δ ppm 7.84 - 7.80 (m, 1 H), 7.79 - 7.73 (m, 2 H), 2.64 (s, 3 H).GCMS：保持時間７．３３分、Ｍ^＋１６３、９２％（方法Ａ）。

中間体１４
１－（４－ブロモ－３－フルオロフェニル）エタン－１－オン

４－ブロモ－３－フルオロ－Ｎ－メトキシ－Ｎ－メチルベンズアミド（中間体１５、１．１７kg、４．４６mol）の撹拌されているTHF（１１．７Ｌ）溶液に、０℃でMeMgCl（３M THF溶液；２．５３Ｌ、７．５９mol）を滴下した。反応物を室温で２時間撹拌した。飽和塩化アンモニウム溶液（２００mL）を滴下することによって、反応混合物をクエンチした。得られた溶液を水（６Ｌ)で希釈し、酢酸エチル（２×５Ｌ)で抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。石油エーテル中８％酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカ１００～２００メッシュ）によって残渣を精製して、表記化合物（８９０ｇ、９１．８％）を淡黄色の固形物として与えた。¹HNMR (400 MHz, CDCl₃): δ ppm 7.72 - 7.65 (m, 2 H), 7.63 - 7.59 (m, 1 H), 2.59 (s, 3 H).GCMS：保持時間７．３８分、Ｍ^＋２１６、９６％（方法Ａ）。

中間体１５
４－ブロモ－３－フルオロ－Ｎ－メトキシ－Ｎ－メチルベンズアミド

４－ブロモ－３－フルオロ安息香酸（１．０kg、４．５６６mol）の撹拌されているジクロロメタン（５Ｌ）溶液に、０℃で塩化オキサリル（５８７．２mL、６．８４９mol）を添加し、続いて、０℃で乾燥DMF（２０mL、０．０２vol）を滴下した。反応物を室温で３時間撹拌した。減圧下及びアルゴン雰囲気下で反応溶媒を蒸発させて、黄色の液状物（１．０８Kg）を与え、これを次の反応にそのまま供した。Ｎ，Ｏ－ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（０．５３２kg、５．４６mol）の撹拌されているジクロロメタン（１０Ｌ）溶液に、０℃でトリエチルアミン（２．５３Ｌ、１８．１９mol）を添加し、反応物を１５分間撹拌した。この混合物に、上記で調製した液状物（１．０８Kg）のジクロロメタン（１Ｌ）溶液を滴下した。反応物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を水（４Ｌ）で希釈し、ジクロロメタン（２×４Ｌ）で抽出した。合わせた有機抽出物を１N 塩酸（５Ｌ）、次いで、飽和NaHCO₃溶液（５Ｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して、表記化合物（１．１７kg、９８％）を淡褐色の液状物として与え、これを更に精製することなく使用した。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ ppm 7.61 - 7.59 (m, 1 H), 7.51 -7.49 (m, 1 H), 7.42 - 7.40 (m, 1 H), 3.55 (s, 3 H), 3.36 (s, 3 H)；LCMS（ESI）：保持時間３．２９分、MH⁺２６２、９３．３％（方法Ｉ）。

化合物２（別の調製法）
（Ｒ）－４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンズイミドアミド塩酸塩

（Ｒ）－４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンズイミドアミド（化合物３、１．７ｇ、３．８５mmol）の撹拌されているメタノール（５mL）溶液に、０℃でメタノール（４mL）中３N HClを添加し、２０分間撹拌した。減圧下、２５℃で溶媒を蒸発させた。残渣をmilliQ超純水（５mL）に溶解させ、凍結乾燥によって乾燥させた。残留ギ酸のため塩形成を繰り返して、表記化合物をオフホワイトの固形物として与えた（１．７４５ｇ、１００％）。LCMS（ESI）：保持時間１．９９分、MH⁺４４２；９９．５％（方法Ａ）。キラルHPLC：保持時間３．６７分、e.e.９９．８５％（方法Ｃ）。

化合物３（別の調製法）
（Ｒ）－４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンズイミドアミド

（Ｒ）－４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリル（中間体６、２．６ｇ、５．７０mmol）に、０℃でメタノールアンモニア（１５０mL）を添加した。反応物を室温で２４時間撹拌した。反応溶液を、窒素雰囲気下２５℃で濃縮した。残渣を分取HPLC（カラム：Atlantis T3 C18（２５０×１９mm、５μ、溶出液：水中０．１％ギ酸（Ａ）／アセトニトリル（Ｂ）、勾配：０／１０、１０／４５、１２．２／４５、１３／１００、１６／１００、１６．５／１０、２０／１０、流速：１８mL／分）によって精製して、表記化合物を白色の固形物（１．７ｇ、６３％）として与えた。LCMS（ESI）：保持時間１．９９分；MH+４４２；９９．１％（方法Ｏ）。

中間体６（別の調製法）
メチル（Ｒ）－４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンズイミダート

（Ｒ）－４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリル（中間体７、２．５ｇ、５．８９mmol）の撹拌されているメタノール（１．６Ｌ）溶液を、－１０℃にてHClガスで飽和させた。反応物を室温で２４時間撹拌した。反応溶液を減圧下及びアルゴン雰囲気下２５℃で濃縮して、粗表記化合物（２．７ｇ）を淡黄色の粘着性固形物として与え、これをそのまま次の反応に供した。
LCMS（ESI）：保持時間２．０６分；MH⁺４５７；７８％（方法Ｏ）。

中間体７（別の調製法）
（Ｒ）－４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリル

４－（２－（２－ブロモ－４－（トリフルオロメチル）フェニル）－１－ヒドロキシエチル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリル（中間体２、５ｇ、１０．４７mmol）の撹拌されている１，４－ジオキサン（１５０mL）溶液に、tert－ブチルジフェニルホスフィン（２５３mg、１．０４mmol）を添加し、混合物を脱気した。Pd(OAc)₂（３５２mg、０．５２mmol）を添加し、混合物を脱気した。ビス（ネオペンチルグリコラト）ジボロン（１１．７８ｇ、５２．３８mmol）を添加し、混合物を脱気した。最後に、酢酸カリウム（４．１１ｇ、４１．９mmol）を添加し、混合物を脱気した。反応物を封管内において７５℃で２時間撹拌した。反応混合物をセライトパッドで濾過し、活性炭で処理し、セライトで濾過した。濾液を水（５×２Ｌ）、ブライン（２×５０mL）で洗浄し、Na₂SO₄で乾燥させ、濃縮して、オフホワイトの固形物としてラセミ化合物（５．２ｇ）を与えた。

この物質を、同様に調製した更なる粗ラセミ化合物８．０ｇと合わせた。合わせたサンプルをエーテルで洗浄し、濾過により単離し、乾燥させた（６．１３ｇ）。

２つの鏡像異性体をキラルSFC（カラム：CHIRALCEL OD-H ２８０×４．６mm、５μ、溶媒：CO2 ７５％、３０mmメタノールアンモニア２５％、流速：３．０ｇ／分、背圧：１００bar、温度：３０℃、紫外線検出２１０nm）によって分離した。サンプルを真空下２０℃で蒸留することによって単離した。

ピーク１：（Ｒ）－４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリル、オフホワイトの固形物（２．５ｇ）、LCMS保持時間２．７４分；MH⁺４２５；７８％（方法Ｏ）；キラルHPLC保持時間４．２７分、９９．９％ e.e.（方法Ｄ）。ピーク２：（Ｓ）－４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリル、オフホワイトの固形物（２．５ｇ）、LCMS保持時間２．７３分；MH⁺４２５；７８％（方法Ｏ）；キラルHPLC保持時間６．１９分、９８．９％ e.e.（方法Ｄ）。

一般的な反応スキーム１～１２を用いて、化合物４～８（表を参照）を調製した。化合物４～８は、対応する出発物質から、化合物１～３の調製について記載した手順（又は類似の手順）を用いて調製することもできる。

例えば、化合物４は、（Ｓ）－４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリルから、化合物３（別の調製法）と類似の方法で調製することができる［中間体７（別の調製法）の調製を参照］。

例えば、化合物５は、中間体３の調製において、４－アセチル－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリルを４－アセチル－２－（３－クロロベンズオキシ）ベンゾニトリルに置き換えることにより、化合物１と類似の方法で調製することができる。

例えば、化合物６は、中間体３の調製において、４－アセチル－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンゾニトリルを４－アセチルベンゾニトリルに置き換えることにより、化合物１と類似の方法で調製することができる。

例えば、化合物７は、中間体３の調製において、２－ブロモ－１－ヨード－４－（トリフルオロメチル）ベンゼンを２－ブロモ－５－クロロ－４－フルオロ－１－ヨードベンゼンに置き換えることにより、化合物１と類似の方法で調製することができる。

例えば、化合物８は、中間体３の調製において、２－ブロモ－１－ヨード－４－（トリフルオロメチル）ベンゼンを２－ブロモ－１－ヨードベンゼンに置き換えることにより、化合物１と類似の方法で調製することができる。

反応条件、反応時間、及び後処理手順の任意の必要な変形例は、化学分野の当業者にはよく知られているであろう。表中の化合物は、指定されている場合を除き、鏡像異性体のラセミ混合物として単離された。

生物学的アッセイ
KLK5タンパク質の調製
BAC-TO-BAC系（INVITROGEN）（pFastBac_hKLK5_6His-Q-FLAG）を用いて、ウイルス感染率１．０のヨトウガ（Spodoptera frugiperda）Super 9昆虫細胞５Ｌで発現させた組換えKLK5タンパク質を、組換えバキュロウイルスから生成させた。タンパク質をHYCLONE SFX増殖培地（GE HEALTHCARE）に分泌させ、そこから５mL HISTRAP EXCELカラム（GE HEALTHCARE）に抽出した。カラムを５００mM NaCl、２０mM Tris pH７．４バッファで洗浄し、２５０mM NaCl、２０mM Tris pH７．４バッファ中の５００mM イミダゾールを用いてタンパク質を溶出させた。溶出液を５mL ANTI-FLAG M2 Affinity Gelカラム（SIGMA）で捕捉した。５０mM NaCl、２０mM Tris-HCl pH７．４バッファ中の０．２mg/mL FLAGペプチド（SIGMA）を用いて、結合したタンパク質から競合によりKLK5を溶出させた。プールされた画分に１M CaCl₂を最終濃度２mMになるように添加し、これらを標的タンパク質１μgあたり０．１Uのエンテロキナーゼ（NOVAGEN）で処理した。タンパク質を室温で約４８時間インキュベーションした。次いで、切断されたタンパク質を、２０mM MOPS、pH６．８バッファ中の１mL Heparin HP HITRAPカラム（GE HEALTHCARE）で更に精製し、２０mM MOPS、pH６．８バッファ中１００mM NaClで洗浄し、このバッファ中の７００mM NaClで溶出させた。KLK5を含有する画分をプールし、分子量カットオフ１００００DaのAMICON濃縮器を用いて濃縮した。凍結保護のために、最終濃度５０％になるようにグリセロールを添加した。全ての精製は、GE HEALTHCARE製の半自動化されたAKTAシステムを用いて実施した。

カイネティックFLINT KLK5アッセイ
各支持化合物の１１点３倍連続希釈液をDMSO中で調製し、これら溶液５０nLを、ECHO555アコースティックディスペンサー（LABCYTE, Sunnnyvale, CA）を用いて黒色LV３８４ウェルプレート（GREINER BIO-ONE、Stonehouse、UK）に分注した。これにより、最終アッセイ体積５μL中に１０μM～０．５nMの最終アッセイ濃度範囲が得られた。高対照及び低対照のために、DMSO ５０nLをそれぞれカラム６及び１８に分注した。アッセイプレートを密閉し、必要になるまで４℃で保存した。

ヒトカリクレイン５組換え酵素（KLK5）のアッセイのための条件は、総反応体積５μL中、１００mM リン酸ナトリウム、pH８、１mM CHAPS、７．５nM KLK5酵素（調製については上記を参照）、９μM ペプチド基質（（Tos-Gly-Pro-Arg)_2[R110].2TFA）であった。

最初に酵素溶液（リン酸ナトリウム、pH８、１mM CHAPS中１５nM KLK5）２．５μLをアッセイプレートの全てのウェル（カラム１８を除く）に分注した後、（低対照を生成するため）バッファ２．５μLをカラム１８に分注することによって、アッセイを行った。基質溶液［リン酸ナトリウム、pH８、１mM CHAPS中１８μM （Tos-Gly-Pro-Arg)₂[R110].2TFA（Cambridge Research Biochemicals）］２．５μLを全ウェルに添加することにより、反応を開始させた。プレートを直ちに１０００rpmに達するまで遠心分離した後、リーダーに移した。全ての添加は、MULTIDROP COMBIディスペンサー（THERMO FISHER SCIENTIFIC）を使用して行った。アッセイプレートをPERKIN ELMER VIEWLUXに移した。KLK5による基質の切断に続いて、プレートを４８５nmで励起し、５３５nmでRhodamine 110蛍光発光の変化量（rates）を測定した。読み取り間隔３０秒間で５分間にわたって１０回測定を行った。

データ解析
データ解析はACTIVITYBASE（ID BUSINESS SOLUTIONS LTD, Surrey, UK）内で行った。

生データから、相対蛍光単位（RFU）として酵素反応速度を計算した。１ウェルあたり１０個の収集した読み取り値（reads）を使用して、直線をデータにフィッティングさせた。反応進行曲線の傾きから初期速度を算出した。速度データを、カラム６の高対照（０％阻害）とカラム１８の低対照（１００％阻害）との間の阻害率％に対して正規化した。IDBS Primaryモジュールフィッティングを用いて用量応答曲線をフィッティングさせた。４パラメータフィットロジスティックによってデータをフィッティングさせた。

式中、ｘは阻害剤濃度であり、ｙは阻害率（％）であり、Ａは最小応答であり、Ｄは最大応答であり、Ｃは曲線のIC50であり、Ｂはヒル勾配である。-log(IC50)からpIC50が得られる。

全ての支持化合物を上記アッセイで試験した。各化合物を１回超試験した。各化合物の平均pIC50は以下の通りである：
化合物１は、pIC50 ８．５を与えた。
化合物２は、pIC50 ８．４を与えた。
化合物３は、pIC50 ７．４を与えた。
化合物４は、pIC50 ８．４を与えた。
化合物５は、pIC50 ８．１を与えた。
化合物６は、pIC50 ８．０を与えた。
化合物７は、pIC50 ８．１を与えた。
化合物８は、pIC50 ８．２を与えた。

Claims

式（Ｉ）：

（式中、
Ｒ^１はＨであり、Ｒ^２はＣＦ_３であり、Ｒ^３は３－ピリジルメトキシ、３－クロロベンジルオキシ、若しくはＨである；
Ｒ^１はＣｌであり、Ｒ^２はＦであり、Ｒ^３は３-ピリジルメトキシである；又は
Ｒ^１はＨであり、Ｒ^２はＨであり、Ｒ^３は３－ピリジルメトキシである）
の化合物、又はその薬学的に許容し得る塩。
４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンズイミドアミド；
２－（（３－クロロベンジル）オキシ）－４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）ベンズイミドアミド；
４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）ベンズイミドアミド；
４－（６－クロロ－７－フルオロ－１－ヒドロキシ－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンズイミドアミド；及び
４－（１－ヒドロキシ－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンズイミドアミド；
からなる群から選択される、請求項１記載の化合物、又はその薬学的に許容し得る塩。
４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンズイミドアミド

である、請求項１記載の化合物、又はその薬学的に許容し得る塩。
２－（（３－クロロベンジル）オキシ）－４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）ベンズイミドアミド

である、請求項１記載の化合物、又はその薬学的に許容し得る塩。
４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）ベンズイミドアミド

である、請求項１記載の化合物、又はその薬学的に許容し得る塩。
４－（６－クロロ－７－フルオロ－１－ヒドロキシ－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンズイミドアミド

である、請求項１記載の化合物、又はその薬学的に許容し得る塩。
４－（１－ヒドロキシ－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンズイミドアミド

である、請求項１記載の化合物、又はその薬学的に許容し得る塩。
（Ｒ）－４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンズイミドアミド

である、請求項１記載の化合物、又はその薬学的に許容し得る塩。
（Ｓ）－４－（１－ヒドロキシ－７－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボリニン－３－イル）－２－（ピリジン－３－イルメトキシ）ベンズイミドアミド

である、請求項１記載の化合物、又はその薬学的に許容し得る塩。
KLK-5経路によって媒介される疾患又は病態を処置するための医薬の製造における、請求項１～９のいずれか一項記載の化合物又はその薬学的に許容し得る塩の使用。
前記疾患又は病態が、ネザートン症候群、酒さ、アトピー性皮膚炎、乾癬、及び掻痒からなる群から選択される、請求項１０記載の使用。
ａ）請求項１～９のいずれか一項記載の化合物、又はその薬学的に許容し得る塩、及びｂ）１つ以上の薬学的に許容し得る賦形剤を含む医薬組成物。
治療において使用するための、請求項１～９のいずれか一項記載の化合物、又はその薬学的に許容し得る塩。
KLK-5経路によって媒介される疾患又は病態の処置において使用するための、請求項１２記載の医薬組成物。
ネザートン症候群、酒さ、アトピー性皮膚炎、乾癬、及び掻痒からなる群から選択される疾患又は病態の処置において使用するための、請求項１２記載の医薬組成物。