JP7274000B2

JP7274000B2 - ペラミビル三水和物の新規な製造方法及びその水系乾燥

Info

Publication number: JP7274000B2
Application number: JP2021578270A
Authority: JP
Inventors: ウンキム，ヒ; キュキム，イン; ソクイ，ミョン; モカン，フン; ジンキム，セ; ソクチェ，イン
Original assignee: CKD Bio Corp
Current assignee: CKD Bio Corp
Priority date: 2019-07-03
Filing date: 2020-07-02
Publication date: 2023-05-15
Anticipated expiration: 2040-07-02
Also published as: JP2022540078A; CN114040906A; CN114040906B; KR102077838B1; US20220380304A1; WO2021002689A1

Description

本特許出願は、２０１９年７月３日付で大韓民国特許庁に提出された大韓民国特許出願第１０－２０１９－００８０１８８号に対して優先権を主張し、該特許出願の開示事項は本明細書に援用により組み込まれる。

本発明は、抗インフルエンザー製剤としてノイラミニダーゼ感染阻害剤であるペラミビル三水和物の製造方法に関する。

インフルエンザーウイルス（Ｉｎｆｌｕｅｎｚａｖｉｒｕｓ）は、感染性ウイルス疾患であって、急性呼吸器疾患を発病させ、一般にインフルエンザと知られているウイルスである。インフルエンザーウイルスは、１９３１年にＳｈｏｐｅによって豚から初めて分離され、人からの分離は１９３３年にＳｍｉｔｈ、Ａｎｄｒｅｗｓ及びＬａｉｄｌｏｗによってなされて知られることになった。現在、インフルエンザーウイルスは、数回の変異を経て全世界的に人類の様々な急性呼吸器疾患を誘発しており、それによる有病率及び死亡率が増加するウイルスとして管理されている。最近では、インフルエンザーウイルスの様々な変異によって新しいウイルスが出現する場合には有病率及び死亡率が大きく増加すると予測され、インフルエンザーウイルスの重要性の認識及び深刻性から、全世界ではインフルエンザー監視体系を運営している。

インフルエンザーウイルスは、オルトミクソウイルス科（Ｏｒｔｈｏｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅ）に属するＲＮＡウイルスで、８個の切片で構成された多形性球形の形状を有し、直径は約８０～１２０ｎｍ程度である。これは、外皮に２つの糖タンパク質である血球凝集素（Ｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ；ＨＡ）タンパク質とノイラミン分解酵素（Ｎｅｕｒａｍｉｎｉｄａｓｅ；ＮＡ）、基質タンパク質（Ｍａｔｒｉｘ，Ｍ２）が存在し、外皮内側境界面に他の基質（Ｍ１）タンパク質が存在する。インフルエンザーウイルスは、抗原型によってＡ型、Ｂ型、Ｃ型に分類される。Ａ型インフルエンザーは、表面抗原であるＨＡとＮＡによって亜型（Ｓｕｂｔｙｐｅ）として決定され、ＨＡは、ウイルスが体細胞に付着する役割を担い、Ｈ１からＨ１８までの亜型が存在する。そして、ＮＡは、感染した細胞からウイルスが放出されて新しい呼吸器細胞に伝播されるのに重要な役割を担い、Ｎ１からＮ１１までの亜型が存在する。これに対し、Ｂ型インフルエンザーウイルスは、Ａ型に比べて抗原の変化が少なく、免疫学的に安定した形態を有する。また、前述したように、人だけが唯一の宿主として作用し、ビクトリア（Ｖｉｃｔｏｒｉａ）系列とヤマガタ（Ｙａｍａｇａｔａ）系列とに分けられる。最後に、Ｃ型インフルエンザーは、殆どが無症状であり、インフルエンザーの流行と関連がないと知られている。

このようなインフルエンザーウイルスの予防及びウイルスの増殖を抑制する治療剤として、抗インフルエンザー感染阻害剤は、オセルタミビル（Ｏｓｅｌｔａｍｉｖｉｒ；タミフル^ＴＭ）、ザナミビル（Ｚａｎａｍｉｖｉｒ；リレンザ^ＴＭ）、そしてペラミビル（Ｐｅｒａｍｉｖｉｒ；ペラミフル^ＴＭ）が開発されており、それらはいずれもＡ型及びＢ型インフルエンザーに対する抗ウイルス効果がある。これに対し、Ｍ２抑制剤であるアマンタジン（Ａｍａｎｔａｄｉｎｅ）とリマンタジン（Ｒｉｍａｎｔａｄｉｎｅ）は、単にＡ型インフルエンザーウイルスにのみ効果があり、耐性のため現在は使用が勧告されていない実情である。Ａ型及びＢ型インフルエンザーウイルス感染阻害剤であるオセルタミビルは、ウイルスを増殖させる酵素の機能を防ぎ、インフルエンザーウイルスに対する効果を示し、症状発生後４８時間以内に服用してこそ最大効果が得られる。しかしながら、症状好転以降にも必ず５日間服用しなければならないという短所があり、最近では、オセルタミビルの服用後に、吐き気、嘔吐及び神経精神系異常症状による副作用が深刻であり、社会的にも問題になっている状況である。別のＡ型及びＢ型インフルエンザーウイルス感染阻害剤であるザナミビルは、経口用ではなく口中に噴霧して吸い込む治療剤であり、これもまた、ウイルス表面にある増殖酵素であるノイラミニダーゼを抑制し、ウイルスが他の細胞に広がることを阻害し、各種の変種流行性感冒類のウイルスのいずれにも効果を示す治療剤として知られている。しかし、ザナミビルもまた、下痢、吐き気、嘔吐、頭痛、目眩、鼻出血のような深刻な副作用があり、７歳以上にのみ投与が可能であるという短所を有する。それらの世界的な市場性は、ザナミビルは市場が蚕食中であり、オセルタミビルも、深刻な神経精神系異常現象のような深刻な副作用及び経口服用し難い患者への処方が難しく、必ず５日間１０回程度経口服用しなければならないという点で、その市場も蚕食される可能性が大きいと予測されている。これに対し、ペラミビルは、最も直近に開発されたノイラミニダーゼ阻害剤の系列で、Ａ型とＢ型に対するインフルエンザーウイルス感染治療剤として知られている。ペラミビルの場合、広範な流行性感冒ウイルス菌株の作用を抑制する作用機序を有しており、１回の静脈注射で処方が可能であるという長所がある。ペラミビルは、静脈注射処方により、経口服用するオセルタミビルと吸入服用するザナミビルに比べて、非常に効果的な治療剤として評価されており、経口服用が困難な患者、代謝疾患者、慢性呼吸器疾患者の処方も可能である。また、経口用処方に比べて解熱が速く、嘔吐、吐き気などの副作用が相対的に少ないという長所がある。インフルエンザー感染阻害剤としてペラミビルは、２０１４年度にＦＤＡ承認して以来、低い認知度を改善し、持続した成長の勢いを見せており、２０１８年０９月には大韓民国における適応症の拡大により需要層の拡大が次第に増加している趨勢である。

ペラミビルの製品名は、ペラミフル（Ｐｅｒａｍｉｆｌｕ^ＴＭ）であり、これは、化学式１のようなペラミビル水和物の形態を有する注射剤として完製される。より詳細には、ペラミフルは、化学式２のようなペラミビル三水和物の形態を有する。

［化学式１］

（式中、Ｘ＝１，２，３）
［化学式２］

ペラミビルの三水和物の製法特許は、元開発社の先行特許であるＫＲ１０２００１７０１６６５３／ＵＳ２００００１６０１３／ＷＯ２００１００５７１と、中国で出願した登録特許ＫＲ１０２０１０７００５４２７／ＣＮ２００８００１４５９／ＷＯ２００９０２１４０４、及びＫＲ１０２０１２７０２５５５１／ＣＮ２００８００１４５９／ＷＯ２００９０２１４０４として公開されている。

前記特許ＫＲ１０２００１７０１６６５３／ＵＳ２００００１６０１３／ＷＯ２００１００５７１に開示されたペラミビル三水和物製法は、下記製造工程図１に示され、ＫＲ１０２０１０７００５４２７／ＣＮ２００８００１４５９／ＷＯ２００９０２１４０４とＫＲ１０２０１２７０２５５５１／ＣＮ２００８００１４５９／ＷＯ２００９０２１４０４の三水和物製法は、下記製造工程図２に、より詳細に示されている。

［製造工程図１］

［製造工程図２］

元開発社で開示したＫＲ１０２００１７０１６６５３／ＵＳ２００００１６０１３／ＷＯ２００１００５７１の特許は、製造工程図１に示すように、活性炭の使用及び残留量を規制すべき溶媒のうち、医薬品溶媒分類２に該当する固有毒性を持つメタノールを使用してペラミビル三水和物を製造し、ペラミビル水和物の製造後に三水和物への乾燥において自然乾燥方法を用いるところ、産業的生産適用及び優秀医薬品製造及び品質管理基準（以下、ＧＭＰ）に適合しない乾燥工程で製造される。

本発明者らは、自然乾燥ではなく、乾燥器内に水系がない状態で真空乾燥を実施した結果、三水和物ではなく無水物に近似する水分値が確認でき、このような理由から既存特許の製造方法に自然乾燥が選択されていると推定した。しかしながら、ペラミビル三水和物は、注射剤として完製される医薬品であって、自然乾燥では内部湿度によって乾燥条件が異なるため均質な水分値が維持し難く、自然乾燥の方法は産業的大量生産及びＧＭＰ基準に適合しない方法である。

また、製造工程図２に示しているＫＲ１０２０１０７００５４２７／ＣＮ２００８００１４５９／ＷＯ２００９０２１４０４とＫＲ１０２０１２７０２５５５１／ＣＮ２００８００１４５９／ＷＯ２００９０２１４０４の特許においても同様、メタノール溶媒を使用して三水和物を製造し、乾燥工程も、ＧＭＰ規定及び産業的生産に容易でない工程を用いてペラミビル三水和物を製造する。しかも、製造工程図１及び２はいずれも活性炭の存在下で三水和物を製造する。これらのペラミビルからペラミビル三水和物への工業収率はそれぞれ７３．１％及び９０％で、純度はそれぞれ９９．９１％及び９９．８６％と製造でき、これらの特許を用いた製造物は１４％レベルの水分値を有する。

そこで、本発明者らは、ペラミビル三水和物の製造において、活性炭及びメタノールのように毒性の溶媒を使用せず、優秀医薬品製造及び品質管理基準（ＧＭＰ）にも適合する製造方法を開発しようと鋭意研究努力した。

本発明は、注射剤として完製されるペラミビル三水和物製造において、残留量を規制すべき医薬品溶媒分類２に該当すると共に固有の毒性を持つメタノールの使用を止揚し、且つ活性炭の使用を排除した三水和物製造技術を提供しようとする。

本発明の目的は、ペラミビル三水和物を製造する際に、医薬品溶媒分類３に該当する１－プロパノール、２－プロパノール、１－ペンタノール、２－ブタノール、３－メチル－１－ブタノール、２－メチル－１－プロパノールのアルコール系溶媒を用いて、低毒性、及び従来技術に比べて向上した合成収率で製造された三水和物である前記化学式２を提供することである。

本発明の他の目的は、産業的生産が容易であり且つ優秀医薬品製造及び品質管理基準（以下ＧＭＰ）に適した乾燥工程で原料及び水系を共に真空乾燥させることによりペラミビル三水和物である前記化学式２を製造する方法を提供することである。

本発明の最終の目的は、前述の製造及び水系乾燥工程による、従来技術（メタノール）に比べてより高い高収率及び低いレベルの残留溶媒を有するペラミビル三水和物を提供することである。

本発明に係るペラミビル三水和物製造工程は、下記反応式１で表される。

［反応式１］

発明のペラミビル三水和物製造工程は、医薬品製造において規制すべき分類２に該当する固有毒性のメタノール溶媒の代わりに、分類３に該当する低毒性アルコール系溶媒を用いる。

医薬品製造において規制すべき分類２に該当する溶媒は、残留量を規制すべき溶媒であって、遺伝毒性を示さないが、動物試験において発癌性を示した溶媒、神経毒性と催奇形性などの発癌性以外の非可逆的な毒性を示した溶媒及びその他深刻であるものの可逆的な毒性が疑われる溶媒を意味する。

医薬品製造において規制すべき分類３に該当する溶媒は、低毒性の溶媒で、人に対して低毒性であるとされる溶媒であり、健康上の理由からは露出制限濃度を設定する必要がない溶媒を意味する。

本発明の一態様によれば、本発明は、次の段階を含む、化学式２で表示される（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）－３－［（Ｓ）－１－アセチルアミド－２－エチルブチル］－４－グアニジノ－２－ヒドロキシシクロペンタン－１－カルボキシル酸トリハイドレート（ペラミビル三水和物）の製造方法を提供する：
［化学式２］

（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）－３－［（Ｓ）－１－アセチルアミド－２－エチルブチル］－４－グアニジノ－２－ヒドロキシシクロペンタン－１－カルボキシル酸（ペラミビル）を水に溶解させて水溶液を製造する段階；及び
１－プロパノール、２－プロパノール、１－ペンタノール、２－ブタノール、３－メチル－１－ブタノール、２－メチル－１－プロパノール又はそれらの混合物から選択されるアルコール系溶媒を添加する段階。

本発明の一具現例において、前記ペラミビル及び水は、ペラミビル重量対水重量が１：１～１：３０で添加され、具体的には、１：１～１：２０、１：１～１：１５、１：１～１：１０、１：１～１：８、１：３～１：１０、１：５～１：１０、１：８～１：１０、１：３～１：８、又は１：５～１：８の比率で添加され、最も具体的には、１：８で添加される。前記ペラミビル対水の重量を１：８の比率で添加する場合に、最終合成収率が最も高く現れる。

本発明の他の具現例において、前記溶解は加熱と共になされる。ペラミビルと水を混合する場合に、初めには懸濁液の状態であるから、加熱によって溶解度を上げることが好ましい。

本発明の具体的な具現例において、前記加熱は、５０～１００℃の温度でなされてよく、より具体的には、６０～１００℃、７０～１００℃、８０～１００℃、９０～１００℃、６０～９５℃、７０～９５℃、８０～９５℃の温度でなされてよく、最も具体的には、９０～９５℃の温度でなされる。前記加熱が９０～９５℃の温度でなされると、前記ペラミビルと水が懸濁液の状態からペラミビルを完全に溶解させ、蒸発する精製水の損失を最小化できる。前記加熱が９５℃以上の温度でなされると、投入された水（精製水）の一部が蒸発し、蒸発した分の水（精製水）を補充しなければならず、産業的大量生産に不適である。

上述したように、本発明の製造方法は、１－プロパノール、２－プロパノール、１－ペンタノール、２－ブタノール、３－メチル－１－ブタノール、２－メチル－１－プロパノール又はそれらの混合物から選択されるアルコール系溶媒を添加する段階を含む。

本発明の製造方法において、前記反応式１段階のアルコール系溶媒は、医薬品製造において規制すべき分類３に該当する低毒性の溶媒に該当する。

本発明の具体的な具現例において、前記アルコール系溶媒は、２－プロパノールを使用する場合に、最も高いペラミビル三水和物の合成収率を示し、好ましい。

本発明の他の具現例において、前記アルコール系溶媒は水と１：１～１０（アルコール系溶媒：水）の体積比で添加する。より具体的に、前記アルコール系溶媒は水と１：２～９、１：３～８、１：４～７の体積比で添加するが、これに限定されない。最も具体的に、前記アルコール系溶媒は水と１：５～６の体積比で添加する。本発明の実施例によれば、前記アルコール系溶媒は、水と１：５～６の体積比で添加する場合に、向上したペラミビル三水和物の合成収率を示す。

本発明の一具現例において、前記アルコール系溶媒は、７５～９０℃で添加される。本発明の実施例において、前記アルコール系溶媒は８５℃で添加されたが、これに限定されない。

本発明の他の具現例において、本発明の前記製造方法は、前記アルコール系溶媒が添加された水溶液を１５～３０℃の温度に冷却させる段階をさらに含む。前記１５～３０℃の冷却温度は、より具体的に、２０～３０℃、２５～３０℃、１５～２５℃、２０～２５℃でよく、最も具体的には、２５℃の温度でよい。前記冷却段階は、ペラミビル三水和物の結晶粒子が生成される段階である。本発明の実施例によれば、約４０℃からペラミビル三水和物の結晶粒子が生成し始まる。

本発明の一具現例において、前記製造方法は、上述したアルコール系溶媒の添加及び冷却後に、６～２４時間撹拌する段階をさらに含む。前記撹拌時間は、より具体的には、６～２４時間、８～２４時間、１０～２４時間、１２～２４時間、６～１８時間、８～１８時間、１０～１８時間、６～１２時間、８～１２時間、１０～１２時間でよく、最も具体的には、１２時間でよい。前記撹拌段階は、生成されたペラミビル三水和物の結晶をＡ型結晶型に相変化させるための段階である。上述した時間の持続撹拌による結晶化工程は、既存に公開された撹拌－静置－再撹拌を行う製造方法と比較して、静置及び再撹拌工程が省略されるので、工程がより簡単であり、最終生成された三水和物の結晶が均質となり、よって、結晶化物の濾過性が非常に改善する効果がある。

本発明において、前記製造方法は、前記Ａ型結晶型への相変化のための撹拌後に、１～１０℃の温度に冷却させつつ撹拌する段階をさらに含むことができる。

本発明において、前記製造方法は、生成されたペラミビル三水和物結晶を濾過する段階をさらに含む。前記濾過段階によってペラミビル三水和物結晶ケーキが生成される。

本発明の一具現例において、本発明の製造方法は、前記濾過によるペラミビル三水和物結晶ケーキをアルコール系水溶液で洗浄する段階をさらに含む。

本発明の具体的な具現例において、前記アルコール系水溶液は、１－プロパノール水溶液、２－プロパノール水溶液、１－ペンタノール水溶液、２－ブタノール水溶液、３－メチル－１－ブタノール水溶液及び２－メチル－１－プロパノール水溶液であってよい。

本発明の他の具体的な具現例において、前記アルコール系水溶液は、１～３０％、１～２０％、１～１０％、５～３０％、５～２０％、５～１０％、又は１０％の濃度である。

本発明のさらに他の具体的な具現例において、前記洗浄に使用されるアルコール系水溶液の体積は、初期ペラミビル重量の０．１～２０倍、０．１～１５倍、０．１～１０倍、０．１～５倍、０．１～３倍、０．１～１倍、又は０．１～０．５倍の体積でよく、最も具体的には０．５倍の体積でよい。例えば、ペラミビルの重量が３０ｋｇである場合に、前記洗浄用アルコール系水溶液は、１５Ｌの体積が使用されてよい。

従来技術によれば、ペラミビル三水和物結晶ケーキは、自然乾燥時に４８時間以上放置してこそ、１４％レベルの均質な水分を有するペラミビル三水和物の生産が可能である。このような自然乾燥方法は、医薬品の産業的大量生産に適合せず、優秀医薬品製造及び品質管理基準（ＧＭＰ）にも適合しない乾燥工程である。

このため、本発明の一具現例において、本発明のペラミビル三水和物の製造方法は、上述した工程によって生成されたペラミビル三水和物結晶ケーキを真空乾燥又は減圧乾燥させる段階をさらに含む。

本発明の具体的な具現例において、前記乾燥は、２５～８０℃の温度条件でなされ、より具体的には、２５～７０℃、２５～６０℃、２５～５５℃、２５～５０℃、２５～４５℃、２５～４０℃、３０～７０℃、３０～６０℃、３０～５５℃、３０～５０℃、３０～４５℃、３０～４０℃、３５～７０℃、３５～６０℃、３５～５５℃、３５～５０℃、３５～４５℃、３５～４０℃でなされ、最も具体的には４０℃でなされる。

本発明の他の具体的な具現例において、前記２０～８０％の湿度条件で蒸湿乾燥し、より具体的には、２０～７０％、２０～６５％、２０～６０％、３０～８０％、３０～７０％、３０～６５％、３０～６０％、３０～５５％、３０～５０％、３０～４５％、３０～４０％、４０～８０％、４０～７０％、４０～６０％、４０～５５％、４０～５０％、４０～４５％の湿度で蒸湿乾燥してよい。好ましくは、４０～６０％の湿度で蒸湿乾燥することが、ペラミビル三水和物の水分値を一定に維持するのに適し、最も好ましくは４０％が適する。

本発明のさらに他の具体的な具現例において、本発明の洗浄工程で使用されたアルコール系溶媒が２－プロパノールである場合には、４０℃の温度で乾燥させることが、ペラミビル三水和物の水分値を１４％レベルに維持し、２－プロパノールの残留溶媒許容基準（５０ｍｇ／日、５，０００ｐｐｍ）を満たすのに適する。

本発明の実施例から立証されたように、本発明の水系と共に原料を真空乾燥させる工法で製造されたペラミビル三水和物は、水分１４．６％、及び許容基準に適する２６２ｐｐｍの非常に低いレベルの２－プロパノール残留量を有する。

先行技術特許ＫＲ第１０～２００１－７０１６６５３号、ＫＲ第１０－２０１０－７００５４２７号、及びＫＲ第１０－２０１２－７０２５５５１号においてメタノールを使用した三水和物製造方法の工業収率はそれぞれ、７３．１％及び９０％と報告された。しかし、本発明の実施例から立証されたように、本発明のアルコール系溶媒として２－プロパノールを使用する場合の工業収率は約９５％であり、飛び抜けて向上したペラミビル三水和物の合成収率を示す。

また、本発明におけるペラミビル三水和物の製造方法は、活性炭を使用する製造工程図１又は２とは違い、活性炭を使用しなくともペラミビル三水和物の製造が可能である。

本発明の具体的な具現例によるペラミビル三水和物の製造方法は、製造工程図３で示す。

［製造工程図３］

上述したように、本発明に係る製造方法は、医薬品の産業的生産に適合及び容易ながらも、優秀医薬品製造及び品質管理基準（ＧＭＰ）に適合するように製造が可能な製造方法であることが分かる。

本発明は、抗インフルエンザー製剤としてノイラミニダーゼ感染阻害剤であるペラミビル三水和物の製造方法に関し、本発明の製造方法によれば、毒性の強いメタノールと活性炭を使用しないながらも高い収率と安定性、そしてＧＭＰ基準に適した工程でペラミビル三水和物を製造することができる。

本発明のペラミビル三水和物の製造工程の模式図である。本発明の実施例２で製造したペラミビル三水和物の液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）スペクトルである。本発明の実施例２で製造したペラミビル三水和物の液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）スペクトルである。本発明の実施例２で製造した化合物であるペラミビル三水和物の^１Ｈ－ＮＭＲスペクトルである。本発明の実施例２で製造した化合物であるペラミビル三水和物の^１３Ｃ－ＮＭＲスペクトルである。本発明の実施例２で製造した化合物であるペラミビル三水和物の液体クロマトグラフィー－質量分析（ＬＣ－ＭＳ）スペクトルである。本発明の実施例２で製造した化合物であるペラミビル三水和物の結晶型Ａ型のＸ線回折分析（ＸＲＤ）値を示す図である。検出可能な溶媒のそれぞれの許容基準に対する気体クロマトグラフィー（ＧＣ）スペクトルである。本発明の実施例２で製造した化合物であるペラミビル三水和物の気体クロマトグラフィー（ＧＣ）スペクトルである。

以下、実施例を用いて本発明をより詳細に説明する。これらの実施例は単に本発明をより具体的に説明するためのもので、本発明の要旨によって本発明の範囲がこれらの実施例に制限されないということは、当業界における通常の知識を有する者にとって明らかであろう。

実施例
本明細書全体を通じて、特定物質の濃度を示すために用いられる“％”は、特に言及しない限り、固体／固体は（重量／重量）％、固体／液体は（重量／体積）％、そして液体／液体は（体積／体積）％である。

試薬及び分析方法
ペラミビル（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）－３－［（Ｓ）－１－アセチルアミド－２－エチルブチル］－４－グアニジノ－２－ヒドロキシシクロペンタン－１－カルボキシル酸）、精製水、１－プロパノール（１－Ｐｒｏｐａｎｏｌ）、２－プロパノール（２－Ｐｒｏｐａｎｏｌ）、１－ペンタノール（１－Ｐｅｎｔａｎｏｌ）などを精製過程無しで使用した。また、本発明における反応工程の進行及び純度確認は、液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）などの機器を用いて分析及び測定を行い、構造究明、結晶型、水分及び残留溶媒に対する分析は、核磁気共鳴（^１ＨＮＭＲ、^１３ＣＮＭＲ）、液体クロマトグラフィー質量分析機（ＨＰＬＣ）、Ｘ線回折分析機（ＸＲＤ）、水分測定機（ＫａｒｌＦｉｓｃｈｅｒ）及び気体クロマトグラフィー（ＧＣ）を用いて行った。

実施例１：ペラミビル三水和物（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）－３－［（Ｓ）－１－アセチルアミド－２－エチルブチル］－４－グアニジノ－２－ヒドロキシシクロペンタン－１－カルボキシル酸トリハイドレート）の製造（１）

５００．０Ｌ容量の反応器に（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）－３－［（Ｓ）－１－アセチルアミド－２－エチルブチル］－４－グアニジノ－２－ヒドロキシシクロペンタン－１－カルボキシル酸（ペラミビル；Ｐｅｒａｍｉｖｉｒ）３０．０ｋｇを投入し、２４０．０Ｌの精製水で懸濁した。反応物を約９５℃に加熱して懸濁液を完全溶解した後に撹拌しつつ、自然冷却を行った。反応物の温度が８５℃の時に４５．０Ｌの１－プロパノール（１－Ｐｒｏｐａｎｏｌ）を徐々に投入しつつ撹拌と共に２５℃まで自然冷却させた。このとき、約４０℃でペラミビル三水和物の結晶粒子が生成された。自然冷却によって反応器の温度が２５℃に到達すると、結晶型Ａ型の相変化のために約１２時間撹拌した。また、反応器の温度を５℃に冷却させ、約３時間さらに撹拌を行い、反応完了後に濾過し、１０％の１－プロパノール溶媒１５．０Ｌで１回洗浄した。濾過された固体ケーキは、真空乾燥器の下部に精製水容器が置かれた、内部湿度約４０％レベルの真空乾燥器に入れ、固体ケーキを４０℃で約１２時間乾燥させた。乾燥完了後にペラミビル三水和物を得た（収率：９５．０％、純度：９９．９％、水分：１４．５％）。

¹H NMR (500 MHz, D₂O, δ): 4.30-4.27 (m, 2H), 3.79-3.74 (m, 1H, -CH), 2.65-2.63 (m, 1H, -CH), 2.48-1.45 (m, 1H, -CH), 2.16-2.12 (m, 1H, -CH), 1.88 (s, 3H, -CH₃), 1.75-1.71 (m, 1H, -CH), 1.41-1.36 (m, 3H), 0.95-0.91 (m, 2H), 0.87-0.84 (t, 3H, -CH₃), 0.82-0.79 (t, 3H, -CH₃); ¹³C NMR (500 MHz, D₂O, δ): 181.671, 173.686, 155.584, 75.368, 55.201, 54.091, 50.314, 49.933, 43.409, 34.015, 22.780, 21.887, 20.942, 12.128, 11.276; LC-MS (m/z, C₁₅H₂₈N₄O₄): calcd for 329.21, found; 329.5.
実施例２：ペラミビル三水和物（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）－３－［（Ｓ）－１－アセチルアミド－２－エチルブチル］－４－グアニジノ－２－ヒドロキシシクロペンタン－１－カルボキシル酸トリハイドレート）の製造（２）

５００．０Ｌ容量の反応器に（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）－３－［（Ｓ）－１－アセチルアミド－２－エチルブチル］－４－グアニジノ－２－ヒドロキシシクロペンタン－１－カルボキシル酸（ペラミビル；Ｐｅｒａｍｉｖｉｒ）３０．０ｋｇを投入し、２４０．０Ｌの精製水で懸濁した。反応物を約９５℃に加熱して懸濁液を完全溶解した後に撹拌しつつ、自然冷却を行った。反応物の温度が８５℃の時に４５．０Ｌの２－プロパノール（２－Ｐｒｏｐａｎｏｌ）を徐々に投入しつつ撹拌と共に２５℃まで自然冷却させた。この時、約４０℃でペラミビル三水和物の結晶粒子が生成される。自然冷却によって反応器の温度が２５℃に到達すると、結晶型Ａ型の相変化のために約１２時間撹拌した。また、反応器の温度を５℃に冷却させて約３時間さらに撹拌を行い、反応完了後に濾過し、１０％の２－プロパノール溶媒１５．０Ｌで１回洗浄した。濾過された固体ケーキは、真空乾燥器の下部に精製水容器が置かれた、内部湿度約４０％レベルの真空乾燥器に入れ、固体ケーキを４０℃で約１２時間乾燥させた。乾燥完了後にペラミビル三水和物を得た（収率：９５．５％、純度：９９．９％、水分：１４．６％）。

¹H NMR (500 MHz, D₂O, δ): 4.30-4.27 (m, 2H), 3.79-3.74 (m, 1H, -CH), 2.65-2.63 (m, 1H, -CH), 2.48-1.45 (m, 1H, -CH), 2.16-2.12 (m, 1H, -CH), 1.88 (s, 3H, -CH₃), 1.75-1.71 (m, 1H, -CH), 1.41-1.36 (m, 3H), 0.95-0.91 (m, 2H), 0.87-0.84 (t, 3H, -CH₃), 0.82-0.79 (t, 3H, -CH₃); ¹³C NMR (500 MHz, D₂O, δ): 181.671, 173.686, 155.584, 75.368, 55.201, 54.091, 50.314, 49.933, 43.409, 34.015, 22.780, 21.887, 20.942, 12.128, 11.276; LC-MS (m/z, C₁₅H₂₈N₄O₄): calcd for 329.21, found; 329.5.
下記表１には、本発明の実施例２で製造した化合物であるペラミビル三水和物の結晶型Ａ型の２－ｔｈｅｔａ（ｄｅｇ）値を示す。

［表１］

また、反応のために投入する２－プロパノールの量を４０Ｌ又は４８Ｌに調節してペラミビル三水和物を製造した結果は、次の通りである（表２）。

［表２］

実施例３：ペラミビル三水和物（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）－３－［（Ｓ）－１－アセチルアミド－２－エチルブチル］－４－グアニジノ－２－ヒドロキシシクロペンタン－１－カルボキシル酸トリハイドレート）の製造（３）

５００．０Ｌ容量の反応器に（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）－３－［（Ｓ）－１－アセチルアミド－２－エチルブチル］－４－グアニジノ－２－ヒドロキシシクロペンタン－１－カルボキシル酸（ペラミビル；Ｐｅｒａｍｉｖｉｒ）３０．０ｋｇを投入し、２４０．０Ｌの精製水で懸濁した。反応物は約９５℃に加熱して懸濁液を完全溶解した後に撹拌しつつ、自然冷却を行った。反応物の温度が８５℃の時に４５．０Ｌの１－ペンタノール（１－Ｐｅｎｔａｎｏｌ）を徐々に投入しつつ撹拌と共に２５℃まで自然冷却させた。この時、約４０℃でペラミビル三水和物の結晶粒子が生成された。自然冷却によって反応器の温度が２５℃に到達すると、結晶型Ａ型の相変化のために約１２時間撹拌した。また、反応器の温度を５℃に冷却させて約３時間さらに撹拌を行い、反応完了後に濾過し、１０％の１－ペンタノール（１－Ｐｅｎｔａｎｏｌ）溶媒１５．０Ｌで１回洗浄した。濾過された固体ケーキは、真空乾燥器の下部に精製水容器が置かれた、内部湿度約４０％レベルの真空乾燥器に入れ、固体ケーキを４０℃で約１２時間乾燥させた。乾燥完了後にペラミビル三水和物を得た（収率：９５．１％、純度：９９．９％、水分：１４．１％）。

¹H NMR (500 MHz, D₂O, δ): 4.30-4.27 (m, 2H), 3.79-3.74 (m, 1H, -CH), 2.65-2.63 (m, 1H, -CH), 2.48-1.45 (m, 1H, -CH), 2.16-2.12 (m, 1H, -CH), 1.88 (s, 3H, -CH₃), 1.75-1.71 (m, 1H, -CH), 1.41-1.36 (m, 3H), 0.95-0.91 (m, 2H), 0.87-0.84 (t, 3H, -CH₃), 0.82-0.79 (t, 3H, -CH₃); ¹³C NMR (500 MHz, D₂O, δ): 181.671, 173.686, 155.584, 75.368, 55.201, 54.091, 50.314, 49.933, 43.409, 34.015, 22.780, 21.887, 20.942, 12.128, 11.276; LC-MS (m/z, C₁₅H₂₈N₄O₄): calcd for 329.21, found; 329.5.

Claims

次の段階を含む、化学式２で表示される（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）－３－［（Ｓ）－１－アセチルアミド－２－エチルブチル］－４－グアニジノ－２－ヒドロキシシクロペンタン－１－カルボキシル酸トリハイドレート（ペラミビル三水和物）の製造方法：
［化学式２］

（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）－３－［（Ｓ）－１－アセチルアミド－２－エチルブチル］－４－グアニジノ－２－ヒドロキシシクロペンタン－１－カルボキシル酸（ペラミビル）を水に溶解させて水溶液を製造する段階；及び
１－プロパノール、２－プロパノール、１－ペンタノール、２－ブタノール、３－メチル－１－ブタノール、２－メチル－１－プロパノール又はそれらの混合物から選択されるアルコール系溶媒を添加する段階。
前記ペラミビル及び水は、ペラミビル重量対水重量を１：１～１：３０で添加する、請求項１に記載の製造方法。
前記溶解は加熱と共に行い、前記加熱は９０～９５℃の温度で行う、請求項１に記載の製造方法。
前記アルコール系溶媒は、７５～９０℃で添加する、請求項１に記載の製造方法。
前記アルコール系溶媒は水と１：１～１０（アルコール系溶媒：水）の体積比で添加することである、請求項１に記載の製造方法。
前記アルコール系溶媒が添加された水溶液を、１５～３０℃の温度に冷却させる段階をさらに含む、請求項１に記載の製造方法。
前記冷却後に６～２４時間撹拌する段階をさらに含む、請求項６に記載の製造方法。
前記撹拌後に１～１０℃の温度に冷却させつつ撹拌する段階をさらに含む、請求項７に記載の製造方法。
前記冷却によって生成されたペラミビル三水和物結晶を濾過してペラミビル三水和物結晶ケーキを製造する段階をさらに含む、請求項６～８のいずれかに記載の製造方法。
前記ペラミビル三水和物結晶ケーキをアルコール系水溶液で洗浄する段階をさらに含む、請求項９に記載の製造方法。
前記アルコール系水溶液は、１－プロパノール水溶液、２－プロパノール水溶液、１－ペンタノール水溶液、２－ブタノール水溶液、３－メチル－１－ブタノール水溶液、２－メチル－１－プロパノール水溶液、又はそれらの混合物である、請求項１０に記載の製造方法。
前記アルコール系水溶液の濃度は、１～３０（ｖ／ｖ）％である、請求項１０に記載の製造方法。
前記アルコール系水溶液の体積（Ｌ）は、初期ペラミビル重量（ｋｇ）の０．１～２０倍である、請求項１０に記載の製造方法。
前記アルコール系溶媒を添加する段階によって生成された結果物を、真空乾燥又は減圧乾燥させる段階をさらに含む、請求項１に記載の製造方法。
前記乾燥は、２５～８０℃の温度条件で行う、請求項１４に記載の製造方法。
前記乾燥は、２０～８０％の湿度条件で蒸湿乾燥させる、請求項１４に記載の製造方法。