JP7153899B2 - Whitening agents and skin cosmetics - Google Patents

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Description

本発明は、グリチルリーザ・グラブラ(Glychyrrhiza glabra)抽出物のラクトバチルス・プランタラム(Lactobacillus plantarum)による発酵物、これを含む美白剤及び抗老化剤、並びに皮膚化粧料及び飲食品に関する。 TECHNICAL FIELD The present invention relates to a fermented product of a Glychyrrhiza glabra extract by Lactobacillus plantarum , a whitening agent, an anti-aging agent, a skin cosmetic, and a food and drink containing the same.

従来、皮膚色素沈着症、シミ、ソバカス等の予防、治療又は改善には、ハイドロキノン等の化学合成品を有効成分とする美白剤を外用する処置が行われてきた。しかしながら、ハイドロキノン等の化学合成品は、皮膚刺激、アレルギー等の副作用のおそれがある。そこで、安全性の高い天然原料を有効成分とする美白剤の開発が望まれており、チロシナーゼ活性阻害作用を有するものとしては、例えば、ヤナギタデ抽出物(例えば、特許文献1参照)等が知られている。 Conventionally, skin pigmentation, age spots, freckles, etc. have been prevented, treated or improved by externally applying a whitening agent containing a chemically synthesized product such as hydroquinone as an active ingredient. However, chemically synthesized products such as hydroquinone may cause side effects such as skin irritation and allergies. Therefore, it is desired to develop a whitening agent containing highly safe natural raw materials as active ingredients. ing.

フィラグリンは、皮膚の構成成分であり、皮膚におけるバリア機能に関与し、アレルゲン、毒素、感染性生物の侵入を防ぐ機能を有していると考えられている。フィラグリンの遺伝子の変異等による機能の低下は、アトピー性皮膚炎(湿疹、皮膚の炎症、皮膚のかゆみ等)、アレルギー、喘息等を包含するアトピー性疾患の発症リスクと関連し、さらに重篤な場合は尋常性魚鱗癬等の皮膚疾患につながることが知られている(例えば、非特許文献1参照)。 Filaggrin is a constituent of the skin, is involved in the barrier function of the skin, and is believed to have the function of preventing the invasion of allergens, toxins and infectious organisms. Decreased function due to mutations in the filaggrin gene, etc. is associated with the risk of developing atopic diseases including atopic dermatitis (eczema, skin inflammation, itchy skin, etc.), allergies, asthma, etc., and is even more serious. In some cases, it is known to lead to skin diseases such as ichthyosis vulgaris (see, for example, Non-Patent Document 1).

一方、天然保湿因子(Natural Moisturizing Factors;NMF)の主成分であるアミノ酸は、ケラトヒアリン顆粒に由来するフィラグリンが角質層内で分解されて産生される。このフィラグリンは、角質層直下の顆粒層に存在する表皮ケラチノサイトでプロフィラグリンとして発現する。その後、直ちにリン酸化し、ケラトヒアリン顆粒に蓄積され、脱リン酸、加水分解を経てフィラグリンへと分解され、角質層に移行して、ケラチンフィラメントの凝集効率を高め、角質細胞の内部構築に関与することが知られている(例えば、非特許文献2参照)。近年、このフィラグリンが、皮膚の水分保持に非常に重要かつ必要不可欠であること、及び乾燥等の条件によってフィラグリンの合成力が低下し、角質層におけるアミノ酸量が低下することが知られている(例えば、非特許文献3参照)。 On the other hand, amino acids, which are the main components of Natural Moisturizing Factors (NMF), are produced by decomposition of filaggrin derived from keratohyalin granules in the stratum corneum. This filaggrin is expressed as profilaggrin in epidermal keratinocytes present in the granular layer just below the stratum corneum. After that, it is immediately phosphorylated, accumulated in keratohyalin granules, dephosphorylated and hydrolyzed, decomposed into filaggrin, migrated to the stratum corneum, increases the efficiency of keratin filament aggregation, and participates in the internal construction of keratinocytes. is known (see, for example, Non-Patent Document 2). In recent years, it has been known that this filaggrin is very important and essential for retaining moisture in the skin, and that conditions such as dryness reduce the ability to synthesize filaggrin, resulting in a decrease in the amount of amino acids in the stratum corneum ( For example, see Non-Patent Document 3).

したがって、表皮ケラチノサイトにおいて、プロフィラグリンの発現を促進することにより、アトピー性皮膚炎(湿疹、皮膚の炎症、皮膚のかゆみ等)、アレルギー、喘息等を包含するアトピー性疾患を予防・治療又は改善できると考えられる。また、プロフィラグリンの発現を促進し、それにより角質層内のアミノ酸量を増大させることで、角質層の水分環境を本質的に改善できることが期待される。従来、プロフィラグリンmRNA発現促進作用を有するものとして、ガイヨウ抽出物(例えば、特許文献2参照)等が知られている。 Therefore, by promoting the expression of profilaggrin in epidermal keratinocytes, atopic diseases including atopic dermatitis (eczema, skin inflammation, skin itching, etc.), allergies, asthma, etc. can be prevented, treated or improved. it is conceivable that. It is also expected that the hydration environment of the stratum corneum can be essentially improved by promoting the expression of profilaggrin and thereby increasing the amount of amino acids in the stratum corneum. Conventionally, a guilla biloba extract (see, for example, Patent Document 2) and the like are known to have a profilaggrin mRNA expression-promoting effect.

皮膚の表皮及び真皮は、表皮細胞、線維芽細胞並びにこれらの細胞の外にあって皮膚構造を支持するコラーゲン、エラスチン、ヒアルロン酸等の細胞外マトリックスにより構成されている。若い皮膚においては線維芽細胞の増殖は活発であり、線維芽細胞、細胞外マトリックス成分等の皮膚組織の相互作用が恒常性を保つことにより水分保持、柔軟性、弾力性等が確保され、肌は外見的にも張りや艶があってみずみずしい状態に維持される。 The epidermis and dermis of the skin are composed of epidermal cells, fibroblasts, and extracellular matrices such as collagen, elastin, and hyaluronic acid that are outside these cells and support the skin structure. In young skin, the proliferation of fibroblasts is active, and the interaction of skin tissue such as fibroblasts and extracellular matrix components maintains homeostasis, ensuring moisture retention, flexibility, elasticity, etc. The appearance is maintained in a fresh state with tension and luster.

ところが、紫外線の照射、空気の著しい乾燥、過度の皮膚洗浄等、ある種の外的因子の影響があったり、加齢が進んだりすると、細胞外マトリックスの主要構成成分であるコラーゲン、エラスチン及びヒアルロン酸の産生量が減少するとともに、分解や変質を引き起こす。その結果、皮膚の保湿機能や弾力性が低下し、角質の異常剥離が生じるため、肌は張りや艶を失い、肌荒れ、シワ等の老化症状を呈するようになる。このように、皮膚の老化に伴う変化、すなわち、シワ、くすみ、きめの変化、弾力性の低下等には、コラーゲン、エラスチン、ヒアルロン酸等のマトリックス成分の減少・変性等が関与している。したがって、ヒアルロン酸等の産生を促進することは、皮膚の老化を予防、治療又は改善する上で重要である。 However, under the influence of certain external factors such as ultraviolet irradiation, extreme drying of the air, excessive skin washing, etc., or with aging, collagen, elastin, and hyaluron, which are the main constituents of the extracellular matrix, As the amount of acid produced decreases, it causes decomposition and alteration. As a result, the moisturizing function and elasticity of the skin are reduced, and abnormal exfoliation of keratin occurs, so that the skin loses its firmness and luster, and exhibits aging symptoms such as rough skin and wrinkles. Thus, changes associated with aging of the skin, ie, wrinkles, dullness, changes in texture, reduction in elasticity, etc., are associated with reduction or denaturation of matrix components such as collagen, elastin, and hyaluronic acid. Therefore, promoting the production of hyaluronic acid and the like is important in preventing, treating, or improving skin aging.

前述した細胞外マトリックス成分のうち、ヒアルロン酸は、ムコ多糖の一種であり、細胞間の間隙に充填されることにより細胞を保持する機能を有し、さらに細胞間隙への水分の保持、組織への潤滑性や柔軟性の付与、機械的障害等の外力に対する抵抗等、数多くの機能を有している。ヒアルロン酸の産生を促進することができれば、皮膚の荒れ、しわ、くすみ、きめの変化、弾力性の低下及び保湿機能の低下等といった皮膚の老化症状を予防、治療又は改善できると考えられる。また、表皮ヒアルロン酸の合成促進に関与するヒアルロン酸合成酵素3(HAS3)の発現を促進することで、皮膚の老化を予防、治療又は改善することができるものと考えられる。 Among the extracellular matrix components mentioned above, hyaluronic acid is a type of mucopolysaccharide and has the function of retaining cells by being filled in the intercellular spaces. It has many functions such as providing lubricity and flexibility, and resistance to external forces such as mechanical damage. If the production of hyaluronic acid can be promoted, skin aging symptoms such as rough skin, wrinkles, dullness, changes in texture, loss of elasticity and loss of moisturizing function can be prevented, treated or improved. In addition, by promoting the expression of hyaluronic acid synthase 3 (HAS3) involved in promoting the synthesis of epidermal hyaluronic acid, it is believed that skin aging can be prevented, treated or improved.

さらに、ヒアルロン酸は、皮膚組織の他にも、軟骨、関節液、臍帯、眼硝子体、その他の結合組織に存在する。このうち、関節液に含まれるヒアルロン酸は、関節軟骨の表面を覆い、ヒアルロン酸が有する潤滑機能、軟骨に対する被覆・保護機能等により、関節の円滑な作動に役立っている。一方、慢性関節リウマチ等の関節炎において、関節液におけるヒアルロン酸の濃度が低下していることが知られている。したがって、ヒアルロン酸の産生を促進することで、慢性関節リウマチ、変形性関節炎、化膿性関節炎、痛風性関節炎、外傷性関節炎、又は骨関節炎等の関節炎を予防又は治療することができると考えられる。さらに、創傷又は熱傷の治癒過程において、肉芽(組織)が形成するが、肉芽中にヒアルロン酸が著しく増加することが知られている。そのため、ヒアルロン酸の産生を促進することで、創傷又は熱傷の治癒を促進することができると考えられる。ヒアルロン酸産生促進作用を有するものとしては、クスノハガシワからの抽出物(例えば、特許文献3参照)等が知られている。 In addition to skin tissue, hyaluronic acid is present in cartilage, synovial fluid, umbilical cord, vitreous body of the eye, and other connective tissues. Among them, hyaluronic acid contained in synovial fluid covers the surface of articular cartilage and contributes to the smooth operation of joints due to its lubricating function, covering and protecting cartilage, and the like. On the other hand, in arthritis such as rheumatoid arthritis, it is known that the concentration of hyaluronic acid in synovial fluid is decreased. Therefore, by promoting the production of hyaluronic acid, it is possible to prevent or treat arthritis such as rheumatoid arthritis, osteoarthritis, septic arthritis, gouty arthritis, traumatic arthritis, or osteoarthritis. Furthermore, it is known that granulation (tissue) is formed during the healing process of wounds or burns, and hyaluronic acid is significantly increased in the granulation. Therefore, it is thought that the healing of wounds or burns can be promoted by promoting the production of hyaluronic acid. As a substance having a hyaluronic acid production-promoting effect, an extract from Camphorella camphorata (see, for example, Patent Document 3) is known.

また、表皮を構成する基底層、有棘層、顆粒層、及び角質層のうち、特に、顆粒層においては、細胞膜が肥厚して肥厚細胞膜を形成するとともに、トランスグルタミナーゼ-1の作用により、蛋白分子間がグルタミル-リジン架橋され、強靭なケラチン蛋白線維が形成される。さらに、その一部にセラミド等が共有結合し、疎水的な構造をとることで、細胞間脂質のラメラ構造の土台を供給し、角質バリア機能の基礎が形成される。 Among the stratum basale, stratum spinosum, stratum granulosum, and stratum corneum, which constitute the epidermis, the cell membrane of the stratum granulosum, in particular, thickens to form a thickened cell membrane. Intermolecular glutamyl-lysine cross-links form tough keratin protein fibers. Furthermore, ceramide or the like is covalently bonded to a part of it to form a hydrophobic structure, which provides a base for the lamellar structure of intercellular lipids and forms the basis for the stratum corneum barrier function.

セラミドは、表皮細胞の角化の過程においてセリンとパルミトイル-CoAとを基に、セラミド合成の律速酵素として知られるセリンパルミトイルトランスフェラーゼ(SPT)をはじめとする酵素の働きにより生成される。セラミドは、皮膚最外層を覆う角質細胞間脂質の主成分として特異的に存在し、皮膚本来が持つ生体と外界とのバリア膜としての機能維持に重要な役割を果たしている。 Ceramide is produced from serine and palmitoyl-CoA in the process of keratinization of epidermal cells through the actions of enzymes including serine palmitoyltransferase (SPT) known as the rate-limiting enzyme for ceramide synthesis. Ceramide exists specifically as a major component of intercorneocyte lipids that cover the outermost layer of the skin, and plays an important role in maintaining the skin's original function as a barrier film between the living body and the outside world.

角質層の構造は、レンガとモルタルとに例えられ、15層ほどに積み重なった角質細胞を細胞間脂質が繋ぎ止める形で強固なバリア膜を形成している。角質細胞は、アミノ酸を主成分とする天然保湿因子を細胞内に含有することによって水分を保持し、一方、角質細胞間脂質は、約50%のセラミドを主成分とし、コレステロール、脂肪酸等の両親媒性脂質から構成されており、疎水性部分と親水性部分とが交互に繰り返される層板構造、いわゆるラメラ構造を特徴としている。 The structure of the stratum corneum is likened to a brick and a mortar, and forms a strong barrier film in the form of intercellular lipids connecting corneocytes, which are piled up in about 15 layers. Corneocytes retain moisture by containing natural moisturizing factors whose main components are amino acids, while intercorneocyte lipids are mainly composed of about 50% ceramide, and contain cholesterol, fatty acids, and other parent substances. It is composed of lipophilic lipids and is characterized by a so-called lamellar structure in which hydrophobic and hydrophilic portions are alternately repeated.

様々な内的・外的要因による皮膚のバリア機能の低下は、経表皮水分蒸散量を増加させ、皮膚のかさつき、落屑、掻痒感等を惹き起こし、いわゆる乾燥肌に陥る。また、皮膚のバリア機能の低下は、皮膚の炎症を増大させ、外界からの様々な刺激に対する防御機能が低下するという悪循環に陥る。最近の研究において、加齢により、又はバリア障害として知られるアトピー性皮膚炎患者において、角質セラミド成分(いわゆる細胞間脂質)の減少や組成変化が報告されており(例えば、非特許文献4参照)、皮膚のバリア機能の維持、改善にセラミドが重要であることが広く知られるようになっている。皮膚のバリア機能を改善する方法として、セラミドを外部から補う方法(例えば、非特許文献5参照)や皮膚内部においてセラミド産生能を高める方法(例えば、非特許文献6参照)等が知られている。 Deterioration of the skin barrier function due to various internal and external factors increases transepidermal water loss, causing dry skin, desquamation, itching, and the like, resulting in so-called dry skin. In addition, the deterioration of the skin barrier function leads to a vicious cycle in which skin inflammation increases and the defense function against various external stimuli decreases. In recent studies, it has been reported that keratin ceramide components (so-called intercellular lipids) decrease or change in composition due to aging or in patients with atopic dermatitis known as barrier disorder (see, for example, Non-Patent Document 4). , it has become widely known that ceramide is important for maintaining and improving the skin barrier function. Known methods for improving the barrier function of the skin include a method of externally supplementing ceramide (see, for example, Non-Patent Document 5) and a method of increasing ceramide production within the skin (see, for example, Non-Patent Document 6). .

しかしながら、より優れた美白作用又は抗老化作用を有し、かつ安全性が高く、美白剤、抗老化剤、皮膚化粧料又は飲食品の有効成分として用いることができる物質に対する要望は依然として強く、その速やかな開発が求められているのが現状である。 However, there is still a strong demand for substances that have superior whitening or anti-aging effects, are highly safe, and can be used as whitening agents, anti-aging agents, skin cosmetics, or active ingredients in foods and beverages. At present, there is a demand for rapid development.

特開2004-083488号公報Japanese Patent Application Laid-Open No. 2004-083488 特開2012-219047号公報JP 2012-219047 A 特開2003-146837号公報JP-A-2003-146837

“Nat Genet.”,2006年,Vol.38,No.4,p.441-446"Nat Genet.", 2006, Vol. 38, No. 4, p. 441-446 「フレグランスジャーナル臨時増刊」,2000年,Vol.17,p.14-19"Fragrance Journal Extra Edition", 2000, Vol. 17, p. 14-19 “Arch. Dermatol. Res.”,1996年,Vol.288,p.442-446"Arch. Dermatol. Res.", 1996, Vol. 288, p. 442-446 J. Dermatol.,1993年,Vol.20,No.1,p.1-6J. Dermatol. , 1993, Vol. 20, No. 1, p. 1-6 「フレグランスジャーナル」,2004年,Vol.32,No.11,p.23-32"Fragrance Journal", 2004, Vol. 32, No. 11, p. 23-32 Br. J. Dermatol.,2000年,Vol.143,Issue 3,p.524-531Br. J. Dermatol. , 2000, Vol. 143, Issue 3, p. 524-531

本発明は、前記従来における諸問題を解決し、以下の目的を達成することを課題とする。即ち、本発明は、優れた美白作用及び抗老化作用の少なくともいずれかを有し、安全性の高い新規組成物を提供することを目的とする。
また、本発明は、優れた美白作用を有し、安全性の高い美白剤を提供することを目的とする。
また、本発明は、優れた抗老化作用を有し、安全性の高い抗老化剤を提供することを目的とする。
また、本発明は、優れた美白作用及び抗老化作用の少なくともいずれかを有し、安全性の高い皮膚化粧料を提供することを目的とする。
また、本発明は、優れた美白作用及び抗老化作用の少なくともいずれかを有し、安全性の高い飲食品を提供することを目的とする。
SUMMARY OF THE INVENTION An object of the present invention is to solve the above-mentioned conventional problems and to achieve the following objects. That is, an object of the present invention is to provide a novel composition that has at least one of excellent whitening action and anti-aging action and is highly safe.
Another object of the present invention is to provide a highly safe whitening agent having an excellent whitening action.
Another object of the present invention is to provide a highly safe anti-aging agent having excellent anti-aging activity.
Another object of the present invention is to provide a highly safe skin cosmetic having at least one of an excellent whitening effect and an anti-aging effect.
Another object of the present invention is to provide a highly safe food and drink that has at least one of an excellent whitening effect and an anti-aging effect.

前記課題を解決するために本発明者らが鋭意検討を重ねた結果、グリチルリーザ・グラブラ(Glychyrrhiza glabra)抽出物のラクトバチルス・プランタラム(Lactobacillus plantarum)による発酵物が、優れた美白作用及び抗老化作用を有することを知見し、本発明を完成したものである。 As a result of intensive studies by the present inventors in order to solve the above problems, the fermented product of Glychyrrhiza glabra extract with Lactobacillus plantarum has an excellent whitening effect and anti-aging effect. The present invention was completed based on the finding that it has an effect.

本発明は、本発明者らの前記知見に基づくものであり、前記課題を解決するための手段としては、以下の通りである。即ち、
<1> カンゾウ抽出物の微生物による発酵物であって、
前記カンゾウが、グリチルリーザ・グラブラ(Glychyrrhiza glabra)であり、
前記微生物が、ラクトバチルス・プランタラム(Lactobacillus plantarum)であることを特徴とするカンゾウ抽出発酵物である。
<2> 前記<1>に記載のカンゾウ抽出発酵物を含有することを特徴とする美白剤である。
<3> チロシナーゼ活性阻害作用を有する前記<2>に記載の美白剤である。
<4> 前記<1>に記載のカンゾウ抽出発酵物を含有することを特徴とする抗老化剤である。
<5> プロフィラグリンmRNA発現促進作用、セリンパルミトイルトランスフェラーゼmRNA発現促進作用及びヒアルロン酸合成酵素3mRNA発現促進作用からなる群から選択される少なくとも1種を有する前記<4>に記載の抗老化剤である。
<6> 前記<1>に記載のカンゾウ抽出発酵物、前記<2>から<3>のいずれかに記載の美白剤及び前記<4>から<5>のいずれかに記載の抗老化剤からなる群から選択される少なくとも1種を含有することを特徴とする皮膚化粧料である。
<7> 前記<1>に記載のカンゾウ抽出発酵物、前記<2>から<3>のいずれかに記載の美白剤及び前記<4>から<5>のいずれかに記載の抗老化剤からなる群から選択される少なくとも1種を含有することを特徴とする飲食品である。
The present invention is based on the findings of the present inventors, and means for solving the above problems are as follows. Namely
<1> A fermentation product of licorice extract by microorganisms,
The licorice is Glychyrrhiza glabra ,
The fermented liquorice extract is characterized in that the microorganism is Lactobacillus plantarum .
<2> A whitening agent containing the fermented liquorice extract according to <1>.
<3> The whitening agent according to <2> above, which has a tyrosinase activity inhibitory action.
<4> An anti-aging agent comprising the fermented liquorice extract according to <1>.
<5> The anti-aging agent according to <4>, having at least one selected from the group consisting of profilaggrin mRNA expression promoting action, serine palmitoyltransferase mRNA expression promoting action and hyaluronic acid synthase 3 mRNA expression promoting action. .
<6> The fermented liquorice extract according to <1>, the whitening agent according to any one of <2> to <3>, and the anti-aging agent according to any one of <4> to <5> A skin cosmetic characterized by containing at least one selected from the group consisting of:
<7> The fermented liquorice extract according to <1>, the whitening agent according to any one of <2> to <3>, and the anti-aging agent according to any one of <4> to <5> A food or drink characterized by containing at least one selected from the group consisting of

本発明によると、従来における前記諸問題を解決し、優れた美白作用及び抗老化作用の少なくともいずれかを有し、安全性の高い新規組成物を提供することができる。
本発明の美白剤によると、従来における前記諸問題を解決し、優れた美白作用を有し、安全性の高い美白剤を提供することができる。
本発明の抗老化剤によると、従来における前記諸問題を解決し、優れた抗老化作用を有し、安全性の高い抗老化剤を提供することができる。
本発明の皮膚化粧料によると、従来における前記諸問題を解決し、優れた美白作用及び抗老化作用の少なくともいずれかを有し、安全性の高い皮膚化粧料を提供することができる。
本発明の飲食品によると、従来における前記諸問題を解決し、優れた美白作用及び抗老化作用の少なくともいずれかを有し、安全性の高い飲食品を提供することができる。
ADVANTAGE OF THE INVENTION According to this invention, the above-mentioned problems in the past can be solved, and a novel composition having at least one of excellent whitening action and anti-aging action and being highly safe can be provided.
ADVANTAGE OF THE INVENTION According to the whitening agent of this invention, the above-mentioned conventional problems can be solved, and the whitening agent which has the outstanding whitening action and is highly safe can be provided.
According to the anti-aging agent of the present invention, it is possible to solve the above-mentioned conventional problems and provide a highly safe anti-aging agent having an excellent anti-aging effect.
According to the skin cosmetic of the present invention, it is possible to solve the above-mentioned conventional problems, to provide a highly safe skin cosmetic having at least one of excellent whitening action and anti-aging action.
According to the food and drink of the present invention, it is possible to solve the above-mentioned conventional problems, have at least one of an excellent whitening effect and an anti-aging effect, and provide a highly safe food and drink.

(カンゾウ抽出発酵物)
本発明のカンゾウ抽出発酵物は、カンゾウからの抽出物の、微生物による発酵物である。
(Glycyrrhiza fermented extract)
The fermented licorice extract of the present invention is a fermented product of an extract from licorice using microorganisms.

<カンゾウ抽出物>
カンゾウ(甘草)は、マメ科グリチルリーザ(Glycyrrhiza)属に属する多年生草本であり、古代より薬用又は甘味料の原料として利用されている。
本発明におけるカンゾウは、グリチルリーザ・グラブラ(Glychyrrhiza glabra)である。
<Glycyrrhiza extract>
Glycyrrhiza ( Glycyrrhiza ) is a perennial herb belonging to the genus Glycyrrhiza of the legume family, and has been used for medicinal purposes or as a raw material for sweeteners since ancient times.
The licorice in the present invention is Glychyrrhiza glabra .

前記カンゾウ抽出物は、抽出原料として使用する抽出部位から調製したものを使用してもよいし、市販品を使用してもよい。
前記カンゾウの抽出部位としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、葉部、枝部、樹皮部、幹部、茎部、果実部、種子部、花部等の地上部、根部、根茎部又はこれらの部位の混合物などが挙げられる。これらの中でも、根部、葉部、根茎部が好ましい。
前記カンゾウの抽出部位の調製方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、各部位を乾燥させた後、そのまま又は粗砕機を用い粉砕して溶媒抽出に供することにより得ることができる。前記乾燥は、天日で行ってもよいし、通常使用されている乾燥機を用いて行ってもよい。
The licorice extract may be prepared from the extraction site used as the raw material for extraction, or may be a commercially available product.
The extracted part of the licorice is not particularly limited and can be appropriately selected according to the purpose. Aerial parts, root parts, rhizome parts, mixtures of these parts, and the like can be mentioned. Among these, roots, leaves and rhizomes are preferred.
The method for preparing the extracted part of the licorice is not particularly limited, and can be appropriately selected according to the purpose. For example, after drying each part, it is subjected to solvent extraction as it is or after crushing using a crusher. can be obtained by The drying may be performed in the sun, or may be performed using a commonly used dryer.

前記カンゾウ抽出物は、植物の抽出に一般に用いられる方法により容易に得ることができる。前記カンゾウ抽出物としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、抽出液の希釈液、濃縮液、抽出液の乾燥物、粗精製物、精製物などが挙げられる。 The licorice extract can be easily obtained by a method commonly used for plant extraction. The licorice extract is not particularly limited and can be appropriately selected depending on the intended purpose. .

前記カンゾウの抽出方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、抽出溶媒を満たした処理槽に抽出原料である前記カンゾウの前記抽出部位を投入し、必要に応じて適宜撹拌しながら可溶性成分を溶出した後、濾過して抽出残渣を除くことにより抽出液を得る方法などが挙げられる。
また、ヘキサン等の非極性溶媒によって脱脂等の前処理を施してから抽出原料として使用してもよい。脱脂等の前処理を行うことにより、極性溶媒による抽出処理を効率よく行うことができる。
The method for extracting the licorice is not particularly limited, and can be appropriately selected according to the purpose. A method of obtaining an extract by removing the extraction residue by filtration after eluting the soluble components with appropriate stirring may be mentioned.
In addition, it may be used as an extraction raw material after being subjected to pretreatment such as degreasing with a non-polar solvent such as hexane. By performing pretreatment such as degreasing, the extraction treatment with a polar solvent can be efficiently performed.

前記カンゾウの抽出における条件(抽出時間及び抽出温度)、抽出溶媒及びその使用量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。 The conditions (extraction time and extraction temperature), the extraction solvent, and the amount thereof used in the extraction of the licorice are not particularly limited, and can be appropriately selected according to the purpose.

前記抽出溶媒としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、水、親水性有機溶媒、又はこれらの混合溶媒などが挙げられる。 The extraction solvent is not particularly limited and can be appropriately selected depending on the intended purpose. Examples thereof include water, hydrophilic organic solvents, and mixed solvents thereof.

前記水としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水などが挙げられる。 The water is not particularly limited and can be appropriately selected depending on the purpose. Ion-exchanged water, physiological saline, phosphate buffer, phosphate-buffered physiological saline and the like are included.

前記親水性溶媒としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール等の炭素数1~5の低級アルコール;アセトン、メチルエチルケトン等の低級脂肪族ケトン;1,3-ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等の炭素数2~5の多価アルコールなどが挙げられる。 The hydrophilic solvent is not particularly limited and can be appropriately selected depending on the purpose. Examples include lower alcohols having 1 to 5 carbon atoms such as methanol, ethanol, propyl alcohol and isopropyl alcohol; lower aliphatic ketones; polyhydric alcohols having 2 to 5 carbon atoms such as 1,3-butylene glycol, propylene glycol and glycerin;

前記混合溶媒としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、低級アルコールを使用する場合は、水10質量部に対して1質量部~90質量部、低級脂肪族ケトンを使用する場合は、水10質量部に対して1質量部~40質量部、多価アルコールを使用する場合は、水10質量部に対して1質量部~90質量部添加することが好ましい。 The mixed solvent is not particularly limited and can be appropriately selected according to the purpose. When using a lower alcohol, 1 part by mass to 90 parts by mass with respect to 10 parts by mass of water, a lower aliphatic ketone When using 1 to 40 parts by mass per 10 parts by mass of water, and when using a polyhydric alcohol, it is preferable to add 1 to 90 parts by mass per 10 parts by mass of water.

前記カンゾウの抽出溶媒は、室温乃至溶媒の沸点以下の温度で用いることが好ましい。 The licorice extraction solvent is preferably used at a temperature between room temperature and the boiling point of the solvent.

得られた前記カンゾウ抽出物は、前記カンゾウ抽出物の希釈物、濃縮物、乾燥物、粗精製物、精製物などを得るために、常法に従って希釈、濃縮、乾燥、精製などの処理を施してもよい。 The obtained licorice extract is diluted, concentrated, dried, purified, etc., according to a conventional method in order to obtain a diluted product, a concentrate, a dried product, a crudely purified product, a purified product, etc. of the licorice extract. may

以上のようにして調製されたカンゾウ抽出物は、後述の微生物による発酵に付される。 The licorice extract prepared as described above is subjected to fermentation by microorganisms described below.

<発酵>
前記発酵の方法としては、ラクトバチルス・プランタラム(Lactobacillus plantarum)を用いる限り、特に制限はなく、公知の発酵方法の中から目的に応じて適宜選択することができる。
<Fermentation>
The fermentation method is not particularly limited as long as Lactobacillus plantarum is used, and can be appropriately selected from known fermentation methods according to the purpose.

-ラクトバチルス・プランタラム-
前記ラクトバチルス・プランタラムとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。ここで、ラクトバチルス・プランタラムは、乳酸菌の一種であるが、主として野菜漬物、キムチ、味噌などの植物性の発酵食品から分離されることから植物性乳酸菌に包含され、ヨーグルト等の発酵乳や乳酸菌飲料の製造に用いられる動物性乳酸菌とは異なるものである。前記ラクトバチルス・プランタラムは、1種単独で使用してもよいし、2種以上を併用してもよい。2種以上を併用する場合には、2種以上のラクトバチルス・プランタラムにより同時に発酵を行ってもよいし、別々に発酵を行ってもよい。
-Lactobacillus plantarum-
The Lactobacillus plantarum is not particularly limited and can be appropriately selected depending on the purpose. Here, Lactobacillus plantarum is a kind of lactic acid bacteria, but since it is mainly isolated from fermented vegetable foods such as vegetable pickles, kimchi, and miso, it is included in vegetable lactic acid bacteria, fermented milk such as yogurt, It is different from the animal lactic acid bacteria used in the production of lactic acid bacteria beverages. The said Lactobacillus plantarum may be used individually by 1 type, and may use 2 or more types together. When two or more types are used in combination, the two or more types of Lactobacillus plantarum may be fermented simultaneously or separately.

前記ラクトバチルス・プランタラムの中でも、ラクトバチルス・プランタラム 22A-1(FERM P-21409)、ラクトバチルス・プランタラム 22A-3(FERM P-21411)、及びラクトバチルス・プランタラム 22B-2(FERM P-21410)からなる群より選択される少なくとも1種を用いることが好ましく、ラクトバチルス・プランタラム 22A-3(FERM P-21411)を用いることが特に好ましい。前記ラクトバチルス・プランタラム 22A-1(FERM P-21409)、ラクトバチルス・プランタラム 22A-3(FERM P-21411)、及びラクトバチルス・プランタラム 22B-2(FERM P-21410)の3株は、本出願人により漬物から単離・同定された株であり、独立行政法人産業技術総合研究所 特許生物寄託センターに寄託申請し、平成19年10月22日に受託されている。 Among the Lactobacillus plantarum 22A-1 (FERM P-21409), Lactobacillus plantarum 22A-3 (FERM P-21411), and Lactobacillus plantarum 22B-2 (FERM P-21410), and particularly preferably Lactobacillus plantarum 22A-3 (FERM P-21411). The three strains of Lactobacillus plantarum 22A-1 (FERM P-21409), Lactobacillus plantarum 22A-3 (FERM P-21411), and Lactobacillus plantarum 22B-2 (FERM P-21410) , which is a strain isolated and identified from pickles by the applicant of the present application.

-発酵処理-
前記発酵処理は、例えば、濃縮乾固したカンゾウ抽出物を水に溶解し、またはカンゾウ抽出液を濃縮乾固せずにそのまま用い、前記ラクトバチルス・プランタラムを接種することにより行うことができる。
-Fermentation process-
The fermentation treatment can be performed, for example, by dissolving a concentrated and dried licorice extract in water, or by using the licorice extract as it is without concentrating and drying, and inoculating the Lactobacillus plantarum.

前記ラクトバチルス・プランタラムを用いた発酵処理は、例えば、カンゾウ抽出物水溶液と上記ラクトバチルス・プランタラムとを発酵槽に入れ、25℃~35℃、好ましくは28℃~32℃の温度範囲で、12時間~72時間、好ましくは18時間~48時間処理することにより、行うことができる。また、発酵処理の開始時において、反応液のpHが5.0~7.0に、好ましくは5.5~6.5に調整されていると、発酵処理が好適に進行する。かかる発酵処理は、発酵液を冷却、加熱殺菌、ろ過などの所望の手段に付し、発酵菌を不活性化させることで終了させる。 Fermentation treatment using the Lactobacillus plantarum is performed, for example, by placing an aqueous licorice extract solution and the Lactobacillus plantarum in a fermenter at a temperature of 25°C to 35°C, preferably 28°C to 32°C. , 12 hours to 72 hours, preferably 18 hours to 48 hours. Further, when the pH of the reaction solution is adjusted to 5.0 to 7.0, preferably 5.5 to 6.5 at the start of the fermentation process, the fermentation process proceeds favorably. Such fermentation treatment is completed by subjecting the fermented liquid to desired means such as cooling, heat sterilization, and filtration to inactivate the fermenting bacteria.

このようにして得られた発酵液は、そのまま発酵物として用いてもよく、または適宜希釈し若しくは濃縮して、発酵物として用いてもよい。さらには、濃縮物をさらに乾燥してもよく、粗精製、精製などを行ってもよい。 The fermented liquid thus obtained may be used as it is as a fermented product, or may be diluted or concentrated as appropriate and used as a fermented product. Furthermore, the concentrate may be further dried, and crude purification, purification, and the like may be performed.

なお、前述した抽出処理や発酵処理の前に、抽出原料や抽出物(発酵原料)に対し、抽出効率や発酵効率を高めるための処理を行ってもよい。このような処理としては、例えば、グルカナーゼ、セルラーゼ等を用いた酵素処理が好ましく例示される。例えば、抽出処理により得られた抽出物に酵素処理を行うと、その後の発酵処理の効率が高まるため、特に好ましい。 In addition, before the extraction process and fermentation process described above, the raw material for extraction or the extract (raw material for fermentation) may be subjected to a process for increasing the efficiency of extraction or fermentation. Preferred examples of such treatment include enzymatic treatment using glucanase, cellulase, and the like. For example, it is particularly preferable to subject the extract obtained by the extraction treatment to an enzyme treatment, since the efficiency of the subsequent fermentation treatment is increased.

このようにして得られるカンゾウ抽出発酵物は、優れた美白作用及び抗老化作用を示すため、後述する美白剤、抗老化剤の有効成分として、又は皮膚化粧料及び飲食品の配合成分として好適に用いることができる。
前記カンゾウ抽出発酵物は、そのままでも後述する美白剤、抗老化剤の有効成分として、又は皮膚化粧料及び飲食品の配合成分として使用することができるが、利用しやすい点で、前記濃縮液、前記乾燥物が好ましい。前記乾燥物を得るに当たって、吸湿性を改善するためにデキストリン、シクロデキストリンなどのキャリアーを加えてもよい。
The fermented licorice extract obtained in this manner exhibits excellent whitening and anti-aging effects, and is therefore suitable as an active ingredient for whitening agents and anti-aging agents described below, or as a compounding ingredient for skin cosmetics and foods and drinks. can be used.
The fermented licorice extract can be used as it is as an active ingredient of a whitening agent and an anti-aging agent described later, or as a compounding ingredient of skin cosmetics and food and drink. The dried product is preferred. In obtaining the dried product, a carrier such as dextrin or cyclodextrin may be added to improve hygroscopicity.

(美白剤及び抗老化剤)
本発明の美白剤及び抗老化剤は、上述した本発明のカンゾウ抽出発酵物を含有し、更に必要に応じてその他の成分を含有してなる。
(Whitening agent and anti-aging agent)
The whitening agent and anti-aging agent of the present invention contain the above-described fermented liquorice extract of the present invention and, if necessary, other ingredients.

前記美白剤は、チロシナーゼ活性阻害作用を有する。 The whitening agent has a tyrosinase activity inhibitory effect.

前記抗老化剤は、プロフィラグリンmRNA発現促進作用、セリンパルミトイルトランスフェラーゼmRNA発現促進作用及びヒアルロン酸合成酵素3mRNA発現促進作用からなる群から選択される少なくとも1種を有する。 The anti-aging agent has at least one selected from the group consisting of profilaggrin mRNA expression promoting action, serine palmitoyltransferase mRNA expression promoting action and hyaluronic acid synthase 3 mRNA expression promoting action.

前記カンゾウ抽出発酵物が含有する、チロシナーゼ活性阻害作用、プロフィラグリンmRNA発現促進作用、セリンパルミトイルトランスフェラーゼmRNA発現促進作用及びヒアルロン酸合成酵素3mRNA発現促進作用の少なくともいずれかを発揮する物質の詳細については不明であるが、前記カンゾウ抽出発酵物がこのような優れた作用を有し、美白剤及び抗老化剤として有用であることは、従来は全く知られておらず、本発明者らによる新たな知見である。 The details of the substance exhibiting at least one of tyrosinase activity inhibitory action, profilaggrin mRNA expression promoting action, serine palmitoyltransferase mRNA expression promoting action, and hyaluronic acid synthase 3 mRNA expression promoting action contained in the fermented liquorice extract are unknown. However, it has not been known at all that the licorice extract fermented product has such excellent effects and is useful as a whitening agent and an anti-aging agent. is.

<カンゾウ抽出発酵物>
前記カンゾウ抽出発酵物は、上述した本発明のカンゾウ抽出発酵物である。
前記カンゾウ抽出発酵物の美白剤及び抗老化剤における含有量としては、特に制限はなく、前記抽出物の生理活性等によって適宜調整することができる。前記美白剤及び抗老化剤は、前記カンゾウ抽出発酵物のみからなるものであってもよい。
<Glycyrrhiza fermented extract>
The fermented liquorice extract is the fermented liquorice extract of the present invention described above.
The content of the fermented liquorice extract in the whitening agent and anti-aging agent is not particularly limited, and can be appropriately adjusted depending on the physiological activity of the extract. The whitening agent and anti-aging agent may consist only of the fermented liquorice extract.

<その他の成分>
前記その他の成分としては、特に制限はなく、前記美白剤及び抗老化剤の利用形態に応じて適宜選択することができる。例えば、賦形剤、防湿剤、防腐剤、強化剤、増粘剤、乳化剤、酸化防止剤、甘味料、酸味料、調味料、着色料、香料、美白剤、保湿剤、油性成分、紫外線吸収剤、界面活性剤、アルコール類、粉末成分、色剤、水性成分、水、皮膚栄養剤等が挙げられる。これらは、1種単独で使用してもよいし、2種以上を併用してもよい。
前記その他の成分の含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
<Other ingredients>
The other ingredients are not particularly limited, and can be appropriately selected according to the application form of the whitening agent and anti-aging agent. For example, excipients, desiccants, preservatives, enhancers, thickeners, emulsifiers, antioxidants, sweeteners, acidulants, seasonings, coloring agents, fragrances, whitening agents, humectants, oily ingredients, UV absorbers. agents, surfactants, alcohols, powder components, coloring agents, aqueous components, water, skin nutrients and the like. These may be used individually by 1 type, and may use 2 or more types together.
The content of the other components is not particularly limited and can be appropriately selected depending on the purpose.

<用途>
本発明の美白剤及び抗老化剤の用途としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、医薬品、医薬部外品、化粧品、飲食品などが挙げられる。
<Application>
Applications of the whitening agent and anti-aging agent of the present invention are not particularly limited and can be appropriately selected according to the intended purpose.

本発明の美白剤及び抗老化剤は、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、それぞれの作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物(例えば、マウス、ラット、ハムスター、イヌ、ネコ、ウシ、ブタ、サルなど)に対して適用することもできる。 The whitening agent and anti-aging agent of the present invention are preferably applied to humans. It can also be applied to cats, cows, pigs, monkeys, etc.).

また、本発明の美白剤及び抗老化剤は、美白作用や抗老化作用の作用機構に関する研究のための試薬としても用いることができる。 In addition, the whitening agent and anti-aging agent of the present invention can also be used as reagents for research on the mechanism of action of whitening action and anti-aging action.

(皮膚化粧料)
前記皮膚化粧料は、本発明のカンゾウ抽出発酵物、美白剤及び抗老化剤からなる群から選択される少なくとも1種を含有し、更に必要に応じてその他の成分を含有してなる。
(skin cosmetics)
The skin cosmetic contains at least one selected from the group consisting of the fermented licorice extract of the present invention, a whitening agent and an anti-aging agent, and further contains other ingredients as necessary.

前記カンゾウ抽出発酵物、美白剤及び抗老化剤からなる群から選択される少なくとも1種の皮膚化粧料における含有量としては、特に制限はなく、前記カンゾウ抽出発酵物の生理活性等によって適宜調整することができるが、前記カンゾウ抽出発酵物に換算して、0.0001質量%~20質量%が好ましく、0.0001質量%~10質量%がより好ましい。前記皮膚化粧料は、前記カンゾウ抽出発酵物、美白剤及び抗老化剤からなる群から選択される少なくとも1種のみからなるものであってもよい。 The content in at least one skin cosmetic selected from the group consisting of the fermented licorice extract, whitening agent and anti-aging agent is not particularly limited, and is appropriately adjusted depending on the physiological activity of the fermented licorice extract. However, it is preferably 0.0001% by mass to 20% by mass, more preferably 0.0001% by mass to 10% by mass, in terms of the fermented liquorice extract. The skin cosmetic may consist of at least one selected from the group consisting of the fermented licorice extract, a whitening agent and an anti-aging agent.

前記皮膚化粧料におけるその他の成分としては、特に制限はなく、通常の皮膚化粧料の製造に用いられる主剤、助剤又はその他の成分の中から目的に応じて適宜選択することができ、例えば、収斂剤、殺菌・抗菌剤、美白剤、紫外線吸収剤、保湿剤、細胞賦活剤、消炎・抗アレルギー剤、抗酸化・活性酸素除去剤、油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、香料などが挙げられる。これらは、1種単独で使用してもよいし、2種以上を併用してもよい。
前記その他の成分の含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
The other ingredients in the skin cosmetics are not particularly limited, and can be appropriately selected according to the purpose from main agents, auxiliaries and other ingredients used in the production of ordinary skin cosmetics. Astringent, bactericidal/antibacterial agent, whitening agent, UV absorber, moisturizing agent, cell activator, anti-inflammatory/anti-allergic agent, antioxidant/active oxygen remover, oils and fats, waxes, hydrocarbons, fatty acids, alcohol , esters, surfactants, fragrances, and the like. These may be used individually by 1 type, and may use 2 or more types together.
The content of the other components is not particularly limited and can be appropriately selected depending on the purpose.

本発明の皮膚化粧料は、日常的に使用することが可能であり、有効成分であるカンゾウ抽出発酵物の働きによって、美白作用や抗老化作用をはじめとする様々な生理活性作用を極めて効果的に発揮させることができるので、美白用途及び抗老化用途の少なくともいずれかの用途などに好適に用いることができる。 The skin cosmetic of the present invention can be used on a daily basis, and by the action of the fermented licorice extract, which is an active ingredient, it exhibits various physiologically active actions such as whitening action and anti-aging action. Therefore, it can be suitably used for at least one of whitening and anti-aging applications.

前記皮膚化粧料の種類としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、軟膏、クリーム、乳液、美容液、ローション、パック、ファンデーションなどが挙げられる。 The type of the skin cosmetic is not particularly limited and can be appropriately selected depending on the intended purpose.

本発明の皮膚化粧料は、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、それぞれの作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物(例えば、マウス、ラット、ハムスター、イヌ、ネコ、ウシ、ブタ、サルなど)に対して適用することもできる。 Although the skin cosmetic of the present invention is preferably applied to humans, it can be applied to animals other than humans (e.g., mice, rats, hamsters, dogs, cats, cows, etc.) as long as the effects of each are exhibited. , pigs, monkeys, etc.).

(飲食品)
前記飲食品は、本発明のカンゾウ抽出発酵物、美白剤及び抗老化剤からなる群から選択される少なくとも1種を含有し、更に必要に応じてその他の成分を含有してなる。
(food and drink)
The food or drink contains at least one selected from the group consisting of the fermented licorice extract of the present invention, a whitening agent and an anti-aging agent, and further contains other ingredients as necessary.

ここで、前記飲食品とは、人の健康に危害を加えるおそれが少なく、通常の社会生活において、経口又は消化管投与により摂取されるものをいい、行政区分上の食品、医薬品、医薬部外品などの区分に制限されるものではない。したがって、前記飲食品は、経口的に摂取される一般食品、健康食品(機能性飲食品)、保健機能食品(特定保健用食品,栄養機能食品,機能性表示食品)、医薬部外品、医薬品等を構成する飲食品を幅広く含むものを意味する。 Here, the above-mentioned food and drink means those that are less likely to harm human health and are taken orally or through digestive tract administration in normal social life. It is not limited to categories such as goods. Therefore, the food and drink include orally ingested general food, health food (functional food and drink), food with health claims (food for specified health use, food with nutrient function claims, food with function claims), quasi-drugs, pharmaceuticals means a wide range of foods and drinks that constitute

前記飲食品の種類としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、茶飲料、清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲料、乳酸飲料等の飲料;アイスクリーム、アイスシャーベット、かき氷等の冷菓;そば、うどん、はるさめ、ぎょうざの皮、しゅうまいの皮、中華麺、即席麺等の麺類;飴、キャンディー、ガム、チョコレート、錠菓、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、クリーム、焼き菓子、パン等の菓子類;カニ、サケ、アサリ、マグロ、イワシ、エビ、カツオ、サバ、クジラ、カキ、サンマ、イカ、アカガイ、ホタテ、アワビ、ウニ、イクラ、トコブシ等の水産物;かまぼこ、ハム、ソーセージ等の水産・畜産加工食品;加工乳、発酵乳等の乳製品;サラダ油、てんぷら油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシング等の油脂及び油脂加工食品;ソース、たれ等の調味料;カレー、シチュー、親子丼、お粥、雑炊、中華丼、かつ丼、天丼、うな丼、ハヤシライス、おでん、マーボドーフ、牛丼、ミートソース、玉子スープ、オムライス、餃子、シューマイ、ハンバーグ、ミートボール等のレトルトパウチ食品;サラダ、漬物等の惣菜;種々の形態の健康・美容・栄養補助食品;錠剤、顆粒剤、カプセル剤、ドリンク剤、トローチ等の医薬品、医薬部外品などが挙げられる。 The type of food and drink is not particularly limited and can be appropriately selected according to the purpose. Examples include tea drinks, soft drinks, carbonated drinks, nutritional drinks, fruit drinks, lactic acid drinks, Frozen desserts such as ice sherbet and shaved ice; Noodles such as soba, udon, vermicelli, gyoza skin, dumpling skin, Chinese noodles, instant noodles; candy, candy, gum, chocolate, tablets, snacks, biscuits, jelly, jam Confectionery such as cream, baked goods, and bread; Seafood such as crab, salmon, short-necked clam, tuna, sardine, shrimp, bonito, mackerel, whale, oyster, saury, squid, red clam, scallop, abalone, sea urchin, salmon roe, and Tokobushi; Fishery and livestock processed foods such as kamaboko, ham, and sausages; dairy products such as processed milk and fermented milk; oils and fats such as salad oil, tempura oil, margarine, mayonnaise, shortening, whipped cream, and dressings; sauces, sauces, etc. Curry, stew, oyakodon, rice porridge, rice porridge, Chinese rice bowl, katsudon, tempura rice bowl, eel rice bowl, hayashi rice, oden, mapo dofu, beef bowl, meat sauce, egg soup, omelet rice, dumplings, shumai, hamburger, meatballs side dishes such as salads and pickles; various forms of health/beauty/dietary supplements; tablets, granules, capsules, drinks, troches and other drugs, and quasi-drugs.

前記カンゾウ抽出発酵物、美白剤及び抗老化剤からなる群から選択される少なくとも1種の飲食品における含有量としては、特に制限はなく、使用目的、症状、性別等を考慮して適宜変更することができるが、例えば、添加対象となる飲食品の一般的な摂取量を考慮して、成人1日あたりの前記カンゾウ抽出発酵物摂取量が約1mg~1,000mgになるようにするのが好ましい。なお、添加対象飲食品が顆粒状、錠剤状またはカプセル状の飲食品の場合、前記カンゾウ抽出発酵物、美白剤及び抗老化剤からなる群から選択される少なくとも1種の添加量は、添加対象飲食品に対して通常0.1質量~100質量%であり、好ましくは5質量~100質量%である。 The content in at least one food or drink selected from the group consisting of the fermented licorice extract, whitening agent, and anti-aging agent is not particularly limited, and may be changed as appropriate in consideration of purpose of use, symptoms, gender, etc. However, for example, considering the general intake of the food and drink to be added, it is recommended that the intake of the fermented licorice extract per adult is about 1 mg to 1,000 mg. preferable. In addition, when the food and drink to be added is a granular, tablet-shaped or capsule-shaped food and drink, the amount of addition of at least one selected from the group consisting of the fermented liquorice extract, the whitening agent and the anti-aging agent is It is usually 0.1% by mass to 100% by mass, preferably 5% by mass to 100% by mass, based on the food and drink.

前記飲食品におけるその他の成分としては、特に制限はなく、通常の飲食品の製造に用いられる補助的原料又は添加物又はその他の成分の中から目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ブドウ糖、果糖、ショ糖、マルトース、ソルビトール、ステビオサイド、ルブソサイド、コーンシロップ、乳糖、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸、乳酸、L-アスコルビン酸、dl-α-トコフェロール、エリソルビン酸ナトリウム、グリセリン、プロピレングリコール、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、アラビアガム、カラギーナン、カゼイン、ゼラチン、ペクチン、寒天、ビタミンB類、ニコチン酸アミド、パントテン酸カルシウム、アミノ酸類、カルシウム塩類、色素、香料、保存剤などが挙げられる。これらは、1種単独で使用してもよいし、2種以上を併用してもよい。
前記その他の成分の配合量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
The other ingredients in the food and drink are not particularly limited, and can be appropriately selected according to the purpose from auxiliary raw materials or additives or other ingredients used in the production of ordinary food and drink. Glucose, fructose, sucrose, maltose, sorbitol, stevioside, rubusoside, corn syrup, lactose, citric acid, tartaric acid, malic acid, succinic acid, lactic acid, L-ascorbic acid, dl-α-tocopherol, sodium erythorbate, glycerin, Propylene glycol, glycerin fatty acid ester, polyglycerin fatty acid ester, sucrose fatty acid ester, sorbitan fatty acid ester, gum arabic, carrageenan, casein, gelatin, pectin, agar, vitamin B, nicotinamide, calcium pantothenate, amino acids, calcium Salts, dyes, fragrances, preservatives and the like are included. These may be used individually by 1 type, and may use 2 or more types together.
The blending amount of the other components is not particularly limited and can be appropriately selected according to the purpose.

本発明の飲食品は、日常的に経口摂取することが可能であり、有効成分であるカンゾウ抽出発酵物の働きによって、美白作用や抗老化作用をはじめとする様々な生理活性作用を極めて効果的に発揮させることができるので、美白用途及び抗老化用途の少なくともいずれかの用途などに好適に用いることができる。 The food and drink of the present invention can be orally ingested on a daily basis, and by the action of the fermented licorice extract, which is an active ingredient, various physiologically active actions such as whitening action and anti-aging action are extremely effective. Therefore, it can be suitably used for at least one of whitening and anti-aging applications.

本発明の飲食品は、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、それぞれの作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物(例えば、マウス、ラット、ハムスター、イヌ、ネコ、ウシ、ブタ、サルなど)に対して適用することもできる。 Although the food and drink of the present invention are suitable for humans, they can be used in animals other than humans (e.g., mice, rats, hamsters, dogs, cats, cows, cows, etc.) as long as the respective effects are achieved. pigs, monkeys, etc.).

以下、本発明の製造例及び試験例を説明するが、本発明は、これらの製造例及び試験例に何ら限定されるものではない。 Production Examples and Test Examples of the present invention will be described below, but the present invention is not limited to these Production Examples and Test Examples.

(比較製造例1)
-グリチルリーザ・グラブラ(G. glabra)の水抽出物の製造-
抽出原料として、グリチルリーザ・グラブラ(G. glabra)の根の粉砕物30gを水1,000mLに投入した後、滅菌処理を行い、グリチルリーザ・グラブラ(G. glabra)抽出液(以下、「G. glabra発酵無液」と称することがある。)を得た(1,000g)。
(Comparative production example 1)
-Production of aqueous extract of Glycyrrhiza glabra-
As an extraction raw material, 30 g of the ground root of G. glabra ( G. glabra ) was added to 1,000 mL of water, and then sterilized to obtain a Glycyrrhiza glabra ( G. glabra ) extract (hereinafter referred to as " G. glabra "). (1,000 g).

(製造例1)
-グリチルリーザ・グラブラ(G. glabra)抽出発酵物の製造-
比較製造例1で得られたG. glabra発酵無液(1,000g)にラクトバチルス・プランタラム(Lactobacillus plantarum)22A-3株(受託番号:FERM P-21411)を植菌し、30℃で24時間発酵させた。得られた発酵液を濾過し、濾液を濃縮乾固することにより、グリチルリーザ・グラブラ(G. glabra)抽出発酵物(以下、「G. glabra発酵液」と称することがある。)を得た(11g)。
(Production example 1)
-Production of Glycyrrhiza glabra ( G. glabra ) extract-fermented product-
The G.I. Lactobacillus plantarum strain 22A-3 (accession number: FERM P-21411) was inoculated into glabra fermentation liquid-free (1,000 g) and fermented at 30° C. for 24 hours. The resulting fermentation liquid was filtered, and the filtrate was concentrated to dryness to obtain a Glycyrrhiza glabra ( G. glabra ) extract fermented product (hereinafter sometimes referred to as " G. glabra fermentation liquid") ( 11g).

(比較製造例2)
-グリチルリーザ・ウラレンシス(G. uralensis)の水抽出物の製造-
比較製造例1において、グリチルリーザ・グラブラ(G. glabra)の根の粉砕物をグリチルリーザ・ウラレンシス(G. uralensis)の根の粉砕物に代えた以外は同様にして、グリチルリーザ・ウラレンシス(G. uralensis)抽出液(以下、「G. uralensis発酵無液」と称することがある。)を得た。
(Comparative production example 2)
-Production of aqueous extract of Glycyrrhiza uralensis-
Glycyrrhiza uralensis ( G. uralensis ) was produced in the same manner as in Comparative Production Example 1, except that the crushed root of G. glabra was replaced with the crushed root of G. uralensis . An extract (hereinafter sometimes referred to as " G. uralensis fermentation-free liquid") was obtained.

(比較製造例3)
-グリチルリーザ・ウラレンシス(G. uralensis)抽出発酵物の製造-
製造例1において、G. glabra発酵無液を比較製造例2で得られたG. uralensis発酵無液に代えた以外は同様にして、グリチルリーザ・ウラレンシス(G. uralensis)抽出発酵物(以下、「G. uralensis発酵液」と称することがある。)を得た。
(Comparative Production Example 3)
-Production of Glycyrrhiza uralensis ( G. uralensis ) extract fermented product-
In Production Example 1, G. The G. glabra fermentation liquid-free mixture obtained in Comparative Production Example 2 was added. A Glycyrrhiza uralensis ( G. uralensis ) extract fermented product (hereinafter sometimes referred to as " G. uralensis fermented liquid") was obtained in the same manner except that the liquid-free G. uralensis fermentation was used.

(試験例1:チロシナーゼ活性阻害作用試験)
製造例1及び比較製造例1~3で得られた抽出物又は抽出発酵物を被験試料として用い、下記の試験方法により、チロシナーゼ活性阻害作用を試験した。
(Test Example 1: Tyrosinase activity inhibitory action test)
Using the extracts or fermented extracts obtained in Production Example 1 and Comparative Production Examples 1 to 3 as test samples, tyrosinase activity inhibitory activity was tested by the following test method.

48ウェルプレートに、Mcllvaine緩衝液(pH6.8)0.2mL、0.3mg/mLチロシン溶液0.06mL、25%DMSO溶液に溶解した被験試料(試料濃度は下記表1-1及び1-2を参照)0.18mLを加え、37℃で10分間静置した。これに、800units/mLチロシナーゼ溶液0.02mLを加え、引き続き37℃で15分間反応させた。反応終了後、波長475nmにおける吸光度を測定した。
また、ブランクとして、酵素溶液を添加しない場合についても同様の操作及び吸光度の測定を行った。さらに、コントロールとして、試料溶液を添加せずに蒸留水を添加した場合についても同様の測定を行った。得られた測定結果から、下記式1によりチロシナーゼ活性阻害率(%)を算出した。結果を表1-1及び1-2に示す。
<式1>
チロシナーゼ活性阻害率(%)={1-(A-B)/(C-D)}×100
式1中のA~Dは、それぞれ以下を表す。
A:被験試料添加・酵素添加での波長475nmにおける吸光度
B:被験試料添加・酵素無添加での波長475nmにおける吸光度
C:試料無添加・酵素添加での波長475nmにおける吸光度
D:試料無添加・酵素無添加での波長475nmにおける吸光度
48-well plate, Mcllvaine buffer (pH 6.8) 0.2 mL, 0.3 mg / mL tyrosine solution 0.06 mL, test sample dissolved in 25% DMSO solution (sample concentrations are shown in Tables 1-1 and 1-2 below See) 0.18 mL was added and allowed to stand at 37°C for 10 minutes. To this, 0.02 mL of 800 units/mL tyrosinase solution was added, followed by reaction at 37° C. for 15 minutes. After completion of the reaction, absorbance at a wavelength of 475 nm was measured.
In addition, as a blank, the same operation and absorbance measurement were performed in the case where the enzyme solution was not added. Furthermore, as a control, the same measurement was performed when distilled water was added without adding the sample solution. From the obtained measurement results, the tyrosinase activity inhibition rate (%) was calculated by the following formula 1. The results are shown in Tables 1-1 and 1-2.
<Formula 1>
Tyrosinase activity inhibition rate (%) = {1-(A-B)/(C-D)} x 100
A to D in Formula 1 each represent the following.
A: Absorbance at wavelength 475 nm with test sample added/enzyme added B: Absorbance at wavelength 475 nm with test sample added/enzyme added C: Absorbance at wavelength 475 nm with sample not added/enzyme added D: Sample not added/enzyme Absorbance at wavelength 475 nm without additive

Figure 0007153899000001
Figure 0007153899000001

Figure 0007153899000002
Figure 0007153899000002

表1-1及び1-2の結果から、グリチルリーザ・グラブラ(Glychyrrhiza glabra)抽出物をラクトバチルス・プランタラム(Lactobacillus plantarum)により発酵させることで、優れたチロシナーゼ活性阻害作用を有するカンゾウ抽出発酵物が得られることが確認された。 From the results of Tables 1-1 and 1-2, fermented Glycyrrhiza glabra extract with Lactobacillus plantarum produced a fermented licorice extract having excellent tyrosinase activity inhibitory action. confirmed to be obtained.

(試験例2:プロフィラグリンmRNA発現促進作用試験)
製造例1及び比較製造例1~3で得られた抽出物又は抽出発酵物を被験試料として用い、下記の試験方法により、プロフィラグリンmRNA発現促進作用を試験した。
(Test Example 2: Profilaggrin mRNA expression promoting action test)
Using the extracts or fermented extracts obtained in Production Example 1 and Comparative Production Examples 1 to 3 as test samples, profilaggrin mRNA expression-promoting activity was tested by the following test method.

正常ヒト新生児表皮角化細胞(NHEK)を、正常ヒト表皮角化細胞用増殖培地(KGM)を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を、KGMを用いて35mmシャーレに2mLずつ播き(40×10細胞/シャーレ)、37℃、5%COの条件下で一晩培養した。
培養後、正常ヒト表皮角化細胞基礎培地(KBM、上記KGM培地に増殖因子(hEGF、BPE、インスリン)を添加していないもの)に交換した。24時間後に培養液を捨て、KBMに溶解した被験試料(試料濃度は下記表2を参照)を各シャーレに2mLずつ添加し、37℃、5%COの条件下で24時間培養した。なお、コントロールとして、被験試料無添加のKBM培地を用いて同様に培養した。
培養後、培養液を捨て、ISOGEN II(ニッポンジーン社製,Cat. No. 311-07361)にて総RNAを抽出し、それぞれのRNA量を分光光度計にて測定し、200ng/μLになるように総RNAを調製した。
この総RNAを鋳型とし、プロフィラグリン及び内部標準であるGAPDHのmRNAの発現量を測定した。検出はリアルタイムPCR装置Smart Cycler(登録商標)(Cepheid社製)を用いて、TaKaRa SYBR(登録商標) Prime Script(商標) RT-PCR kit(Perfect Real Time)(タカラバイオ社製、code No. RR063A)によるリアルタイム2ステップRT-PCR反応により行った。プロフィラグリンmRNAの発現量は、「被験試料添加」及び「被験試料無添加」にてそれぞれ培養した細胞から調製した総RNA標品を基にして、GAPDH mRNAの値で補正値を求めた。得られた値から、下記式2によりプロフィラグリンmRNA発現促進率(%)を算出した。結果を表2に示す。
<式2>
プロフィラグリンmRNA発現促進率(%)=A/B×100
式2中のA~Bは、それぞれ以下を表す。
A:被験試料添加時の補正値
B:被験試料無添加時の補正値
After culturing normal human neonatal epidermal keratinocytes (NHEK) using a normal human epidermal keratinocyte growth medium (KGM), the cells were collected by trypsinization. Using KGM, 2 mL of the recovered cells were seeded in each 35 mm petri dish (40×10 4 cells/dish) and cultured overnight at 37° C. and 5% CO 2 .
After culturing, the medium was replaced with a normal human epidermal keratinocyte basal medium (KBM, the KGM medium without addition of growth factors (hEGF, BPE, insulin)). After 24 hours, the culture medium was discarded, 2 mL of the test sample dissolved in KBM (see Table 2 below for sample concentrations) was added to each petri dish, and cultured for 24 hours at 37° C. and 5% CO 2 . As a control, KBM medium containing no test sample was cultured in the same manner.
After culturing, the culture medium was discarded, total RNA was extracted with ISOGEN II (manufactured by Nippon Gene, Cat. No. 311-07361), and the amount of each RNA was measured with a spectrophotometer so as to reach 200 ng/μL. Total RNA was prepared at .
Using this total RNA as a template, the expression levels of profilaggrin and internal standard GAPDH mRNA were measured. Detection was performed using a real-time PCR device Smart Cycler (registered trademark) (manufactured by Cepheid) and TakaRa SYBR (registered trademark) Prime Script (trademark) RT-PCR kit (Perfect Real Time) (manufactured by Takara Bio Inc., code No. RR063A ) by a real-time two-step RT-PCR reaction. The expression level of profilaggrin mRNA was corrected with the value of GAPDH mRNA based on total RNA preparations prepared from cells cultured with "test sample added" and "test sample not added". From the obtained values, profilaggrin mRNA expression promotion rate (%) was calculated by the following formula 2. Table 2 shows the results.
<Formula 2>
Profilaggrin mRNA expression promotion rate (%) = A/B x 100
A to B in formula 2 represent the following respectively.
A: Correction value when test sample is added B: Correction value when test sample is not added

Figure 0007153899000003
Figure 0007153899000003

表2の結果から、グリチルリーザ・グラブラ(Glychyrrhiza glabra)抽出物をラクトバチルス・プランタラム(Lactobacillus plantarum)により発酵させることで、優れたプロフィラグリンmRNA発現促進作用を有するカンゾウ抽出発酵物が得られることが確認された。 From the results in Table 2, it was confirmed that a fermented licorice extract having an excellent profilaggrin mRNA expression-promoting effect can be obtained by fermenting the Glycyrrhiza glabra extract with Lactobacillus plantarum . confirmed.

(試験例3:セリンパルミトイルトランスフェラーゼ(SPT)mRNA発現促進作用試験)
製造例1及び比較製造例1~3で得られた抽出物又は抽出発酵物を被験試料として用い、下記の試験方法により、セリンパルミトイルトランスフェラーゼ(SPT)mRNA発現促進作用を試験した。
(Test Example 3: Serine palmitoyltransferase (SPT) mRNA expression promoting action test)
Using the extracts or fermented extracts obtained in Production Example 1 and Comparative Production Examples 1 to 3 as test samples, serine palmitoyltransferase (SPT) mRNA expression promoting activity was tested by the following test method.

正常ヒト新生児表皮角化細胞(NHEK)を、正常ヒト表皮角化細胞用増殖培地(KGM)を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を、KGMを用いて35mmシャーレに2mLずつ播き(40×10細胞/シャーレ)、37℃、5%COの条件下で一晩培養した。
培養後、正常ヒト表皮角化細胞基礎培地(KBM、上記KGM培地に増殖因子(hEGF、BPE、インスリン)を添加していないもの)に交換した。24時間後に培養液を捨て、KBMに溶解した被験試料(試料濃度は下記表3を参照)を各シャーレに2mLずつ添加し、37℃、5%COの条件下で24時間培養した。なお、コントロールとして、被験試料無添加のKBM培地を用いて同様に培養した。
培養後、培養液を捨て、ISOGEN II(ニッポンジーン社製,Cat. No. 311-07361)にて総RNAを抽出し、それぞれのRNA量を分光光度計にて測定し、200ng/μLになるように総RNAを調製した。
この総RNAを鋳型とし、SPT及び内部標準であるGAPDHのmRNAの発現量を測定した。検出はリアルタイムPCR装置Smart Cycler(登録商標)(Cepheid社製)を用いて、TaKaRa SYBR(登録商標) Prime Script(商標) RT-PCR kit(Perfect Real Time)(タカラバイオ社製、code No. RR063A)によるリアルタイム2ステップRT-PCR反応により行った。SPT mRNAの発現量は、「被験試料添加」及び「被験試料無添加」にてそれぞれ培養した細胞から調製した総RNA標品を基にして、GAPDH mRNAの値で補正値を求めた。得られた値から、下記式3によりSPT mRNA発現促進率(%)を算出した。結果を表3に示す。
<式3>
SPT mRNA発現促進率(%)=A/B×100
式3中のA~Bは、それぞれ以下を表す。
A:被験試料添加時の補正値
B:被験試料無添加時の補正値
After culturing normal human neonatal epidermal keratinocytes (NHEK) using a normal human epidermal keratinocyte growth medium (KGM), the cells were collected by trypsinization. Using KGM, 2 mL of the recovered cells were seeded in each 35 mm petri dish (40×10 4 cells/dish) and cultured overnight at 37° C. and 5% CO 2 .
After culturing, the medium was replaced with a normal human epidermal keratinocyte basal medium (KBM, the KGM medium without addition of growth factors (hEGF, BPE, insulin)). After 24 hours, the culture medium was discarded, 2 mL of the test sample dissolved in KBM (see Table 3 below for sample concentration) was added to each petri dish, and cultured for 24 hours at 37° C. and 5% CO 2 . As a control, KBM medium containing no test sample was cultured in the same manner.
After culturing, the culture medium was discarded, total RNA was extracted with ISOGEN II (manufactured by Nippon Gene, Cat. No. 311-07361), and the amount of each RNA was measured with a spectrophotometer so as to reach 200 ng/μL. Total RNA was prepared at .
Using this total RNA as a template, the expression levels of SPT and internal standard GAPDH mRNA were measured. Detection was performed using a real-time PCR device Smart Cycler (registered trademark) (manufactured by Cepheid) and TakaRa SYBR (registered trademark) Prime Script (trademark) RT-PCR kit (Perfect Real Time) (manufactured by Takara Bio Inc., code No. RR063A ) by a real-time two-step RT-PCR reaction. The expression level of SPT mRNA was corrected with the value of GAPDH mRNA based on total RNA preparations prepared from cells cultured with "test sample added" and "test sample not added". From the obtained values, the SPT mRNA expression promotion rate (%) was calculated by the following formula 3. Table 3 shows the results.
<Formula 3>
SPT mRNA expression promotion rate (%) = A/B x 100
A to B in Formula 3 each represent the following.
A: Correction value when test sample is added B: Correction value when test sample is not added

Figure 0007153899000004
Figure 0007153899000004

表3の結果から、グリチルリーザ・グラブラ(Glychyrrhiza glabra)抽出物をラクトバチルス・プランタラム(Lactobacillus plantarum)により発酵させることで、優れたセリンパルミトイルトランスフェラーゼ(SPT)mRNA発現促進作用を有するカンゾウ抽出発酵物が得られることが確認された。 From the results in Table 3, fermenting the extract of Glychyrrhiza glabra with Lactobacillus plantarum produced a fermented licorice extract having an excellent serine palmitoyltransferase (SPT) mRNA expression promoting effect. confirmed to be obtained.

(試験例4:ヒアルロン酸合成酵素3(HAS3)mRNA発現促進作用試験)
製造例1及び比較製造例1で得られた抽出物又は抽出発酵物を被験試料として用い、下記の試験方法により、ヒアルロン酸合成酵素3(HAS3)mRNA発現促進作用を試験した。
(Test Example 4: Hyaluronic acid synthase 3 (HAS3) mRNA expression promoting action test)
Using the extracts or fermented extracts obtained in Production Example 1 and Comparative Production Example 1 as test samples, the hyaluronic acid synthase 3 (HAS3) mRNA expression promoting action was tested by the following test method.

正常ヒト新生児表皮角化細胞(NHEK)を、正常ヒト表皮角化細胞用増殖培地(KGM)を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を、KGMを用いて35mmシャーレに2mLずつ播き(40×10細胞/シャーレ)、37℃、5%COの条件下で一晩培養した。
培養後、正常ヒト表皮角化細胞基礎培地(KBM、上記KGM培地に増殖因子(hEGF、BPE、インスリン)を添加していないもの)に交換した。24時間後に培養液を捨て、KBMに溶解した被験試料(試料濃度は下記表4を参照)を各シャーレに2mLずつ添加し、37℃、5%COの条件下で24時間培養した。なお、コントロールとして、被験試料無添加のKBM培地を用いて同様に培養した。
培養後、培養液を捨て、ISOGEN II(ニッポンジーン社製,Cat. No. 311-07361)にて総RNAを抽出し、それぞれのRNA量を分光光度計にて測定し、200ng/μLになるように総RNAを調製した。
この総RNAを鋳型とし、HAS3及び内部標準であるGAPDHのmRNAの発現量を測定した。検出はリアルタイムPCR装置Smart Cycler(登録商標)(Cepheid社製)を用いて、TaKaRa SYBR(登録商標) Prime Script(商標) RT-PCR kit(Perfect Real Time)(タカラバイオ社製、code No. RR063A)によるリアルタイム2ステップRT-PCR反応により行った。HAS3 mRNAの発現量は、「被験試料添加」及び「被験試料無添加」にてそれぞれ培養した細胞から調製した総RNA標品を基にして、GAPDH mRNAの値で補正値を求めた。得られた値から、下記式4によりHAS3 mRNA発現促進率(%)を算出した。結果を表4に示す。
<式4>
HAS3 mRNA発現促進率(%)=A/B×100
式4中のA~Bは、それぞれ以下を表す。
A:被験試料添加時の補正値
B:被験試料無添加時の補正値
After culturing normal human neonatal epidermal keratinocytes (NHEK) using a normal human epidermal keratinocyte growth medium (KGM), the cells were collected by trypsinization. Using KGM, 2 mL of the recovered cells were seeded in each 35 mm petri dish (40×10 4 cells/dish) and cultured overnight at 37° C. and 5% CO 2 .
After culturing, the medium was replaced with a normal human epidermal keratinocyte basal medium (KBM, the KGM medium without addition of growth factors (hEGF, BPE, insulin)). After 24 hours, the culture medium was discarded, 2 mL of the test sample dissolved in KBM (see Table 4 below for sample concentration) was added to each petri dish, and cultured for 24 hours at 37° C. and 5% CO 2 . As a control, KBM medium containing no test sample was cultured in the same manner.
After culturing, the culture medium was discarded, total RNA was extracted with ISOGEN II (manufactured by Nippon Gene, Cat. No. 311-07361), and the amount of each RNA was measured with a spectrophotometer so as to reach 200 ng/μL. Total RNA was prepared at .
Using this total RNA as a template, expression levels of HAS3 and internal standard GAPDH mRNAs were measured. Detection was performed using a real-time PCR device Smart Cycler (registered trademark) (manufactured by Cepheid) and TakaRa SYBR (registered trademark) Prime Script (trademark) RT-PCR kit (Perfect Real Time) (manufactured by Takara Bio Inc., code No. RR063A ) by a real-time two-step RT-PCR reaction. The expression level of HAS3 mRNA was corrected with the value of GAPDH mRNA based on total RNA preparations prepared from cells cultured with "test sample added" and "test sample not added". From the obtained values, the HAS3 mRNA expression promotion rate (%) was calculated by the following formula 4. Table 4 shows the results.
<Formula 4>
HAS3 mRNA expression promotion rate (%) = A/B x 100
A to B in formula 4 each represent the following.
A: Correction value when test sample is added B: Correction value when test sample is not added

Figure 0007153899000005
Figure 0007153899000005

表4の結果から、グリチルリーザ・グラブラ(Glychyrrhiza glabra)抽出物をラクトバチルス・プランタラム(Lactobacillus plantarum)により発酵させることで、優れたヒアルロン酸合成酵素3(HAS3)mRNA発現促進作用を有するカンゾウ抽出発酵物が得られることが確認された。 From the results of Table 4, by fermenting the Glycyrrhiza glabra extract with Lactobacillus plantarum , licorice extract fermentation having excellent hyaluronic acid synthase 3 (HAS3) mRNA expression promoting action It was confirmed that something was obtained.

(配合例1)
下記組成の乳液を常法により製造した。
G. glabra抽出発酵物(製造例1) 0.01g
・ ホホバオイル 4.00g
・ 1,3-ブチレングリコール 3.00g
・ アルブチン 3.00g
・ ポリオキシエチレンセチルエーテル(20E.O.) 2.50g
・ オリーブオイル 2.00g
・ スクワラン 2.00g
・ セタノール 2.00g
・ モノステアリン酸グリセリル 2.00g
・ オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(20E.O.) 2.00g
・ パラオキシ安息香酸メチル 0.15g
・ グリチルリチン酸ステアリル 0.10g
・ 黄杞エキス 0.10g
・ グリチルリチン酸ジカリウム 0.10g
・ イチョウ葉エキス 0.10g
・ コンキオリン 0.10g
・ オウバクエキス 0.10g
・ カミツレエキス 0.10g
・ 香料 0.05g
・ 精製水 残部(全量を100gとする)
(Composition example 1)
A milky lotion having the following composition was prepared by a conventional method.
G. Fermented glabra extract (manufacturing example 1) 0.01 g
・ Jojoba oil 4.00g
・ 1,3-butylene glycol 3.00 g
・ Arbutin 3.00g
- Polyoxyethylene cetyl ether (20 E.O.) 2.50 g
・ Olive oil 2.00g
・ Squalane 2.00g
・ Cetanol 2.00g
・ 2.00 g of glyceryl monostearate
・ 2.00 g of polyoxyethylene sorbitan oleate (20E.O.)
・ 0.15 g of methyl paraoxybenzoate
・ Stearyl glycyrrhizinate 0.10g
・ Huangji extract 0.10g
・ Dipotassium glycyrrhizinate 0.10g
・ Ginkgo biloba extract 0.10g
・ Conchiolin 0.10g
・ Phellodendron bark extract 0.10g
・ Chamomile extract 0.10g
・ Perfume 0.05g
・ Remainder of purified water (the total amount shall be 100 g)

(配合例2)
下記組成のクリームを常法により製造した。
G. glabra抽出発酵物(製造例1) 0.05g
・ クジンエキス 0.1g
・ オウゴンエキス 0.1g
・ 流動パラフィン 5.0g
・ サラシミツロウ 4.0g
・ スクワラン 10.0g
・ セタノール 3.0g
・ ラノリン 2.0g
・ ステアリン酸 1.0g
・ オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(20E.O.) 1.5g
・ モノステアリン酸グリセリル 3.0g
・ 油溶性甘草エキス 0.1g
・ 1,3-ブチレングリコール 6.0g
・ パラオキシ安息香酸メチル 1.5g
・ 香料 0.1g
・ 精製水 残部(全量を100gとする)
(Formulation example 2)
A cream having the following composition was produced by a conventional method.
G. glabra extract fermented product (manufacturing example 1) 0.05g
・ Kujin extract 0.1g
・ Scutellaria root extract 0.1g
・ Liquid paraffin 5.0g
・ White beeswax 4.0g
・ Squalane 10.0g
・ Cetanol 3.0g
・ Lanolin 2.0g
・ 1.0 g of stearic acid
・ 1.5 g of polyoxyethylene sorbitan oleate (20 E.O.)
・ 3.0 g of glyceryl monostearate
・Oil-soluble licorice extract 0.1g
・ 1,3-butylene glycol 6.0 g
・ 1.5 g of methyl paraoxybenzoate
・ Perfume 0.1g
・ Remainder of purified water (the total amount shall be 100 g)

(配合例3)
下記組成の美容液を常法により製造した。
G. glabra抽出発酵物(製造例1) 0.01g
・ カミツレエキス 0.1g
・ ニンジンエキス 0.1g
・ キサンタンガム 0.3g
・ ヒドロキシエチルセルロース 0.1g
・ カルボキシビニルポリマー 0.1g
・ 1,3-ブチレングリコール 4.0g
・ グリチルリチン酸ジカリウム 0.1g
・ グリセリン 2.0g
・ 水酸化カリウム 0.25g
・ 香料 0.01g
・ 防腐剤(パラオキシ安息香酸メチル) 0.15g
・ エタノール 2.0g
・ 精製水 残部(全量を100gとする)
(Composition example 3)
A beauty essence having the following composition was prepared by a conventional method.
G. Fermented glabra extract (manufacturing example 1) 0.01 g
・ Chamomile extract 0.1g
・ Carrot extract 0.1g
・Xanthan gum 0.3g
・ 0.1 g of hydroxyethyl cellulose
・ Carboxyvinyl polymer 0.1 g
・ 4.0 g of 1,3-butylene glycol
・ Dipotassium glycyrrhizinate 0.1g
・ 2.0 g of glycerin
・ Potassium hydroxide 0.25g
・ Perfume 0.01g
・ Preservative (methyl parahydroxybenzoate) 0.15g
・ Ethanol 2.0g
・ Remainder of purified water (the total amount shall be 100 g)

(配合例4)
下記組成の錠剤を常法により製造した。
G. glabra抽出発酵物(製造例1) 5.0mg
・ ドロマイト(カルシウム20%、マグネシウム10%含有) 83.4mg
・ カゼインホスホペプチド 16.7mg
・ ビタミンC 33.4mg
・ マルチトール 136.8mg
・ コラーゲン 12.7mg
・ ショ糖脂肪酸エステル 12.0mg
(Composition example 4)
Tablets having the following composition were produced by a conventional method.
G. Fermented glabra extract (manufacturing example 1) 5.0 mg
・ Dolomite (containing 20% calcium and 10% magnesium) 83.4 mg
・ Casein phosphopeptide 16.7 mg
・Vitamin C 33.4mg
・ Maltitol 136.8 mg
・ Collagen 12.7mg
・ Sucrose fatty acid ester 12.0 mg

(配合例5)
下記組成の経口液状製剤を常法により製造した。
G. glabra抽出発酵物(製造例1) 0.3質量%
・ ソルビット 12.0質量%
・ 安息香酸ナトリウム 0.1質量%
・ 香料 1.0質量%
・ 硫酸カルシウム 0.5質量%
・ 精製水 残部(100質量%)
(Composition example 5)
An oral liquid preparation having the following composition was prepared by a conventional method.
G. Fermented glabra extract (Production Example 1) 0.3% by mass
・ Sorbit 12.0% by mass
・ Sodium benzoate 0.1% by mass
・ Perfume 1.0% by mass
・ Calcium sulfate 0.5% by mass
・ Remainder of purified water (100% by mass)

FERM P-21409
FERM P-21411
FERM P-21410
FERM P-21409
FERM P-21411
FERM P-21410

Claims (3)

カンゾウ抽出発酵物を含有し、 Contains licorice extract fermented product,
前記カンゾウ抽出発酵物が、カンゾウ抽出物の微生物による発酵物であって、 The fermented licorice extract is a fermented licorice extract by microorganisms,
前記カンゾウが、グリチルリーザ・グラブラ(Glychyrrhiza glabra)であり、 The licorice is Glychyrrhiza glabra,
前記微生物が、ラクトバチルス・プランタラム(Lactobacillus plantarum)であることを特徴とする美白剤。 A whitening agent, wherein the microorganism is Lactobacillus plantarum.
チロシナーゼ活性阻害作用を有する請求項1に記載の美白剤。 2. The whitening agent according to claim 1, which has a tyrosinase activity inhibitory action. 請求項1から2のいずれかに記載の美白剤を含有することを特徴とする皮膚化粧料。 A skin cosmetic comprising the whitening agent according to any one of claims 1 and 2.
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