JP7153332B2 - Hivワクチン接種および免疫療法 - Google Patents
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Description
本願は、2016年7月8日に出願され、「HIV VACCINATION AND IMMUNOTHERAPY」と題された米国仮特許出願第62/292,748号(その開示は、参照によって本明細書に組み込まれる)に対する優先権を主張する。
機能的治癒を達成するためにヒト免疫不全ウイルス(HIV)疾患を予防するための方法および組成物が、本明細書において開示される。本方法および組成物には、以下に記載される組み込みレンチウイルス、非組み込みレンチウイルス、および関連ウイルスベクター技術が含まれる。
本明細書中で別様に定義されていない限り、本開示に関して使用される科学用語および専門用語は、当業者により一般に理解される意味を有するものとする。さらに、状況により別様に求められない限り、単数形の用語は複数を含み、複数形の用語は単数を含むものとする。一般に、本明細書に記載されている細胞および組織培養、分子生物学、免疫学、微生物学、遺伝学、ならびにタンパク質および核酸化学、ならびにハイブリダイゼーションに関して使用される命名法および技術は、周知であり、当技術分野で一般に使用されているものである。本開示の方法および技術は、別様の指定がない限り、一般に、当技術分野で周知の従来法により、本明細書の全体にわたって引用および考察されている種々の一般的なおよびより専門的な参考文献に記載されているように実施される。例えば、Sambrook J.およびRussell D. Molecular Cloning: A Laboratory Manual、第3版、Cold Spring Harbor Laboratory Press、Cold Spring Harbor、N.Y.(2000年);Ausubelら、Short Protocols in Molecular Biology: A Compendium of Methods from Current Protocols in Molecular Biology、Wiley, John & Sons, Inc.(2002年);HarlowおよびLane、Using Antibodies: A Laboratory Manual、Cold Spring Harbor Laboratory Press、Cold Spring Harbor、N.Y.(1998年);ならびにColiganら、Short Protocols in Protein Science、Wiley, John & Sons, Inc.(2003年)を参照されたい。任意の酵素反応または精製技術は、製造業者の仕様に従って、当技術分野で一般に達成されるように、または本明細書に記載されているように実施される。本明細書に記載されている分析化学、合成有機化学、ならびに医学および医薬化学に関して使用される命名法、実験手順、および技術は、周知であり、当技術分野で一般に使用されているものである。
**本明細書で使用される場合、「プライム」という用語は、本明細書の表1に参照されている所与の臨床試験において免疫学的接種材料として最初に使用された組成物を指す。
本明細書に詳述されているように、一態様では、HIV感染に耐性の細胞を産生するための方法が提供される。方法は、一般に、HIV陰性対象から単離された末梢血単核細胞(PBMC)を、治療有効量の刺激性作用剤と接触させるステップであって、接触ステップが、ex vivoで実施されるステップ;ex vivoにおいて、少なくとも1つの遺伝的エレメントをコードするウイルス送達システムを用いてPBMCに形質導入するステップ;および形質導入されたPBMCをそのような形質導入を達成するのに十分な期間にわたって培養するステップを含む。実施形態では、形質導入されたPBMCは、約1日~約35日まで培養される。方法は、形質導入されたPBMCを対象に注入するステップをさらに含んでいてもよい。対象は、ヒトであってもよい。刺激性作用剤は、ペプチドまたはペプチドの混合物を含んでいてもよく、好ましい実施形態では、gagペプチドを含む。刺激性作用剤は、ワクチンを含んでいてもよい。ワクチンは、HIVワクチンであってもよく、好ましい実施形態では、HIVワクチンは、MVA/HIV62Bワクチンまたはその改変体である。実施形態では、ウイルス送達システムは、レンチウイルス粒子を含む。実施形態では、少なくとも1つの遺伝的エレメントは、ケモカイン受容体CCR5の産生を阻害することができるスモールRNAを含んでいてもよい。実施形態では、少なくとも1つの遺伝的エレメントは、HIV RNA配列を標的とすることができる少なくとも1つのスモールRNAを含む。他の実施形態では、少なくとも1つの遺伝的エレメントは、ケモカイン受容体CCR5の産生を阻害することができるスモールRNA、およびHIV RNA配列を標的とすることができる少なくとも1つのスモールRNAを含む。HIV RNA配列は、HIV Vif配列、HIV Tat配列、またはそれらの改変体を含んでいてもよい。少なくとも1つの遺伝的エレメントは、マイクロRNAまたはshRNAを含んでいてもよい。好ましい実施形態では、少なくとも1つの遺伝的エレメントは、マイクロRNAクラスターを含む。
一般に「HIV」とも呼ばれるヒト免疫不全ウイルスは、ヒトにおいて後天性免疫不全症候群(AIDS)を引き起こすレトロウイルスである。AIDSは、免疫システムの進行性の不全により、生命を脅かす日和見感染症およびがんが猛威を振るう状態である。治療なくしては、HIV感染後の平均生存期間は、HIVサブタイプに依存して9~11年と推測される。HIV感染は、血液、精液、膣液、前射精液、唾液、涙液、リンパ液もしくは脳脊髄液、または母乳を含むがそれらに限定されない体液の移入によって起きる。HIVは、感染した個体内に、遊離ウイルス粒子および感染した免疫細胞内の両方として、存在し得る。
ウイルスベクターは、疾患の療法または予防の目的ために宿主細胞に遺伝子構築物を送達するために使用される。
歴史的に、ワクチンは、天然痘、ポリオ、麻疹、黄熱病を含む、致命的な感染性疾患に対する頼りになる武器であった。残念ながら、現在のところ、HIVについては承認されているワクチンはない。HIVウイルスは、免疫システムを回避する独特の手段を持っており、人体はそれに対して有効な免疫応答を実装することができないようである。その結果、科学者はHIVに対する保護を提供するために何が必要であるかを明確に把握していない。
一態様では、本開示は、HIV疾患の機能的治癒を達成するためにウイルスベクターを使用する方法を提供する。この方法は、一般に、HIV特異的CD4 T細胞の割合を濃縮させるための免疫療法、続く、必要に応じてHIVおよびCCR5およびCXCR4の阻害剤を送達するためのレンチウイルス形質導入を含む。これらの方法は、HIV陰性個体およびHIV陽性個体の両方に関連して使用することができる。
種々の態様では、本開示は、感受性細胞のHIV侵入を阻害するために遺伝子構築物を送達することができるレンチウイルスベクターを提供する。例えば、本明細書による1つの作用メカニズムは、感受性細胞へのウイルス進入の速度を減少させるために、CCR5および/またはCXCR4ケモカイン受容体のmRNAレベルを減少させることである。
・RSV - ラウス肉腫ウイルス(Rous Sarcoma virus)末端反復配列;
・5’LTR - 染色体組み込み後にベクターの複製を阻止するために切断され得るHIV末端反復配列の一部;
・Psi - パッケージング中にベクターRNAゲノムをウイルス粒子に取り込むことを可能にするパッケージングシグナル;
・RRE - Rev反応性エレメントは、RNAを核から細胞の細胞質に移動することによって導入遺伝子からの発現を改善するために添加することができる;
・cPPT - 宿主細胞の染色体に導入遺伝子を組み込む前に、第2鎖DNA合成を促進するポリプリントラクト(poly purine tract);
・プロモーター - プロモーターとは、マイクロRNAクラスター(または構築物の他の遺伝子エレメント)を発現するために、組み込まれた導入遺伝子からRNA転写を開始するものであり、一部の実施形態では、ベクターはEF-1プロモーターを使用してもよい;
・Anti-CCR5 - 宿主細胞因子CCR5のメッセンジャーRNAを標的として、細胞表面上の発現を減少させるマイクロRNA;
・Anti-Rev/Tat - HIV Revコーディング領域とTatコーディング領域の間の接合部にあるHIVゲノムRNAまたはメッセンジャーRNAを標的とするマイクロRNAであり、時にはmiRNA Tatと称されるか、またはこの出願において同様の記載が与えられる;
・Anti-Vif - Vifコーディング領域内のHIVゲノムRNAまたはメッセンジャーRNAを標的とするマイクロRNA;
・WPRE - ウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント(woodchuckhepatitis virus post-transcriptional regulatory element)は、核のRNA輸送を促進するために使用することができる追加のベクター構成成分である;および
・deltaU3 3’LTR - ベクターの安全性を改善するためにU3領域の一部が欠失している、HIV 3’末端反復配列の改変バージョン。
本明細書の種々の態様および実施形態によるレンチウイルスビリオン(粒子)は、ビリオン(ウイルス粒子)の産生に必要なウイルスタンパク質をコードするベクターシステムによって発現される。種々の実施形態では、レンチウイルスpolタンパク質をコードする核酸配列を含む1つのベクターが、逆転写および組み込みのために提供されており、プロモーターに作動可能に連結されている。別の実施形態では、polタンパク質は、複数のベクターによって発現される。他の実施形態では、ウイルスカプシドを形成するためのレンチウイルスgagタンパク質をコードし、プロモーターに作動可能に連結した核酸配列を含むベクターが提供される。実施形態では、このgag核酸配列は、pol核酸配列の少なくともいくつかとは別個のベクターに存在する。他の実施形態では、gag核酸は、polタンパク質をコードする全てのpol核酸配列とは別個のベクターに存在する。
種々の態様では、本発明は、機能的治癒を達成するためのHIV治療の成功を決定するためのバイオアッセイを含む。これらのアッセイは、患者における形質導入されたHIV特異的CD4 T細胞の頻度を測定することによって、開示された免疫化および治療の方法の有効性を測定するための方法を提供する。HIV特異的CD4 T細胞は、特に、増殖し、細胞表面マーカーの組成を改変させて、リン酸化を含むシグナル伝達経路および/または核成分を誘導するため、認識できる。特異的応答性CD4 T細胞は、例えば、またはフローサイトメトリー選別、磁気ビーズ分離または抗原特異的CD4 T細胞単離についての他の認識されている方法を使用して、HIV特異的細胞の選別を可能にする、標識モノクローナル抗体またはmRNA配列の特異的in situ増幅を使用して、認識される。単離したCD4 T細胞を試験して、組み込まれた療法用レンチウイルスを有する細胞の頻度を決定する。HIVに対する応答性および組み込まれた療法用レンチウイルスの存在を確認するための質量分析法、PCR、ELISA、または抗体染色と組み合わせた、個々の細胞のマイクロ流体分離を含む、単一細胞試験法もまた、使用してもよい。
開示された方法および組成物は、疾患の様々な段階の間にHIV+患者を治療するために使用することができる。したがって、投薬レジメンは、患者の状態および投与の方法に基づいて変化し得る。
種々の実施形態では、T細胞などの細胞をHIV感染患者から得て、培養する。培養は、マルチウェルプレートの、順化培地(「CM」)を含む培養培地中で行ってもよい。上清p24gag(「p24」)のレベルおよびウイルスRNAレベルは、標準的手段によって評価することができる。そのCM培養細胞が1ng/ml未満のピークp24上清レベルを有する患者は、さらなる抗ウイルス剤を使用してまたは使用せずにCM中での大規模なT細胞増殖のために適切な患者であってもよい。加えて、異なる目的の薬物または目的の薬物の組合せを、異なるウェルに添加し、試料中のウイルスレベルに対する影響を、標準的手段によって評価してもよい。適度なウイルス抑制を提供する薬物の組合せは、治療上有用な組合せである。特定の対象に関して何が適度なウイルス抑制を構成するかを決定するのは、適格な技術者の能力内にある。目的の薬物がウイルス増殖を制限する有効性を試験するために、抗CD3抗体などのさらなる因子を培養物に添加して、ウイルス産生を刺激してもよい。HIV感染細胞試料のための、当技術分野で公知の培養方法とは異なり、CMは、2か月間よりも長期間にわたってT細胞の培養を可能にし、それにより、長期的な薬物有効性をアッセイするための有効なシステムを提供する。
レンチウイルスベクターシステムを、図3(線形形態)および図4(環状化形態)に要約されているように開発した。まず図3の上段部分を参照すると、代表的な療法用ベクターを、以下のエレメントを左から右に向かって有するように設計および生成した:ハイブリッド5’末端反復配列(RSV/5’LTR)(配列番号34~35)、Psi配列(RNAパッケージング部位)(配列番号36)、RRE(Rev応答エレメント)(配列番号37)、cPPT(ポリプリントラクト)(配列番号38)、EF-1αプロモーター(配列番号4)、miR30CCR5(配列番号1)、miR21Vif(配列番号2)、miR185Tat(配列番号3)、ウッドチャック転写後調節エレメント(WPRE)(配列番号32または80)、およびΔU3 3’LTR(配列番号39)。図3に詳述されている療法用ベクターは、本明細書ではAGT103とも呼ばれる。
材料および方法:
ヘルパープラスミドの構築:ヘルパープラスミドは、Gag、Pol、およびインテグラーゼ遺伝子を含むpNL4-3 HIVプラスミド(NIH AIDS試薬プログラム)に由来するDNA断片の最初のPCR増幅により構築した。プライマーは、pCDNA3プラスミド(Invitrogen)の同じ部位に挿入するために使用することができるEcoRIおよびNotI制限部位を有する断片を増幅するように設計した。フォワードプライマーは、(5’-TAAGCAGAATTCATGAATTTGCCAGGAAGAT-3’)(配列番号81)であり、リバースプライマーは、(5’-CCATACAATGAATGGACACTAGGCGGCCGCACGAAT-3’)(配列番号82)であった。Gag、Pol、インテグラーゼ断片の配列は以下の通りであった:
隣接するEcoRI制限部位を有する水疱性口内炎インディアナウイルス糖タンパク質(VSV-G)配列が、MWG Operonによって合成された。その後、DNA断片を、pCDNA3.1プラスミド(Invitrogen)のEcoRI制限部位に挿入し、CMV特異的プライマーを使用して配列決定することにより、配向性が正しいことを決定した。DNA配列は以下の通りであった:
材料および方法:
Revを含まないヘルパープラスミドの構築:
Revを含まないヘルパープラスミドを、RREおよびウサギベータグロビンポリA配列を含むDNA断片を挿入することにより構築した。隣接するXbaIおよびXmaI制限部位を有するこの配列は、MWG Operonによって合成された。その後、RRE/ウサギポリAベータグロビン配列を、ヘルパープラスミドのXbaIおよびXmaI制限部位に挿入した。DNA配列は以下の通りである:
RSVプロモーターおよびHIV Rev配列が、隣接するMfeIおよびXbaI制限部位を有する単一DNA断片として、MWG Operonによって合成された。その後、DNA断片を、CMVプロモーターがRSVプロモーターに置換されているpCDNA3.1プラスミド(Invitrogen)のMfeIおよびXbaI制限部位に挿入した。DNA配列は以下の通りであった:
この実施例の目的は、抗HIVレンチウイルスベクターを開発することであった。
これらの実験のために開発されたベクターが必ずしもすべて予想通りに機能した訳ではなかったことに留意すべきである。より具体的には、HIVに対するレンチウイルスベクターは、3つの主要成分を含んでいてもよい:1)標的細胞表面のHIV結合タンパク質(受容体)のレベルを低減させて、初期ウイルス付着および侵入を遮断するための阻害性RNA;2)ウイルスTatタンパク質を隔離し、ウイルス遺伝子発現をトランス活性化するその能力を減少させることになるHIV TAR配列の過剰発現;および3)HIVゲノム内の重要な保存配列を攻撃する阻害性RNA。
AGTc120は、大量のCD4およびCCR5を安定して発現するHela細胞株である。LV-CMV-mCherry(CMV即時型初期プロモーターの制御下で発現される赤色蛍光タンパク質mCherry)またはAGT103/CMV-mCherryを用いて、または用いずに、AGTc120を用いて形質導入した。mCherry蛍光タンパク質の遺伝子発現は、CMV(サイトメガロウイルス即時型初期プロモーター)発現カセットによって制御された。AGT103/CMV-mCherryがCCR5、VifおよびTatに対する療法用miRNAを発現した一方で、LV-CMV-mCherryベクターはマイクロRNAクラスターを欠いていた。
阻害性RNA設計。ホモ・サピエンス(Homo sapiens)ケモカイン受容体CCR5(CCR5、NC000003.12)の配列を使用して、ヒト細胞のCCR5レベルをノックダウンするための潜在的なsiRNAまたはshRNA候補を探索した。潜在的RNA干渉配列は、Broad InstituteからなどのsiRNAまたはshRNA設計プログラムまたはThermo ScientificからのBLOCK-IT RNA iDesignerによって選択された候補から選択した。shRNA配列は、shRNA発現を調節するために、H1、U6、または7SKなどの、プラスミドのRNAポリメラーゼIIIプロモーターの直後に挿入してもよい。また、shRNA配列は、類似のプロモーターが使用されているレンチウイルスベクターに挿入してもよく、またはCMVもしくはEF-1アルファなどのRNAポリメラーゼIIプロモーターによる発現を可能にするために、マイクロRNA骨格内に埋め込んでもよい。RNA配列はまた、siRNAオリゴヌクレオチドとして合成され、プラスミドまたはレンチウイルスベクターとは独立して利用されてもよい。
阻害性RNA設計。
HIV1型Rev/Tat(5’-GCGGAGACAGCGACGAAGAGC-3’)(配列番号9)およびGag(5’-GAAGAAATGATGACAGCAT-3’)(配列番号11)の配列を使用して、
例示的ベクターAGT103/CMV-GFPを細胞にトランスフェクトした。AGT103および他の例示的ベクターは、以下の表3に定義される。
阻害性RNA設計。HIV-1 TatおよびVif遺伝子の配列を使用して、ヒト細胞においてTatまたはVifレベルをノックダウンする潜在的siRNAまたはshRNA候補を探索した。潜在的RNA干渉配列は、Broad InstituteからなどのsiRNAまたはshRNA設計プログラムまたはThermo ScientificからのBLOCK-IT RNA iDesignerによって選択された候補から選んだ。TatまたはVifノックダウンが最も強力な、選択されたshRNA配列を、CMVまたはEF-IアルファなどのRNAポリメラーゼIIプロモーターによる発現が可能になるように、マイクロRNA骨格内に埋め込んだ。また、RNA配列を、siRNAオリゴヌクレオチドとして合成し、プラスミドまたはレンチウイルスベクターとは独立して使用してもよい。
CEM-CCR5細胞に、CCR5の合成miR30配列を含むレンチウイルスベクター(AGT103:TGTAAACTGAGCTTGCTCTA(配列番号97)、AGT103-R5-1:TGTAAACTGAGCTTGCTCGC(配列番号98)、またはAGT103-R5-2:CATAGATTGGACTTGACAC(配列番号99))を形質導入した。6日後、CCR5発現を、APCコンジュゲートCCR5抗体でのFACS分析によって決定し、平均蛍光強度(MFI)によって定量化した。CCR5レベルは、LV-対照を100%とした場合のCCR5の%として表した。AGT103およびAGT103-R5-1の標的配列は、CCR5標的配列#5と同じ領域にある。AGT103-R5-2の標的配列は、CCR5標的配列#1と同じである。AGT103(全CCR5の2%)は、AGT103-R5-1(全CCR5の39%)、およびCCR5レベルを低減させなかったAGT103-R5-2と比較して、CCR5レベルの低減に最も有効である。データは、本明細書の図13に実証されている。
ベクター構築。レンチウイルスベクターは、治療用遺伝子または遺伝子構築物を最適に発現させるためのRNA調節エレメントを必要とすることが多い。一般的な選択は、ウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント(WPRE)を使用することである。本発明者らは、全長WPRE:
ベクター構築。CCR5発現のAGT103下方調節にWPREが必要か否かを試験するために、本発明者らは、WPREエレメント配列を含まない改変ベクターを構築した。
ベクター構築。改変バージョンのAGT103を構築して、CCR5、Vif、およびTat遺伝子発現を抑制するマイクロRNAクラスターを発現するために、代替的プロモーターを代用した場合の効果を試験した。本発明者らは、通常のEF-1プロモーターの代わりに、以下の配列を使用して、CD4糖タンパク質を発現させるためのT細胞特異的プロモーターを代用した:
細胞および試薬。生存凍結末梢血単核細胞(PBMC)を、ワクチン会社から得た。データは、候補HIV療法用ワクチンを試験する初期段階臨床試験(試験登録:clinicaltrials.gov NCT01378156)に登録されているHIV+個体に由来する代表的な検体を用いて得られた。「ワクチン接種前」および「ワクチン接種後」研究用に、2つの検体を得た。細胞培養産物、補充物、およびサイトカインは、商業的供給業者からのものであった。細胞を、Thompson, M.、S. L. Heath、B. Sweeton、K. Williams、P. Cunningham、B. F. Keele、S. Sen、B. E. Palmer、N. Chomont、Y. Xu、R. Basu、M. S. Hellerstein、S. Kwa、およびH. L. Robinson(2016年)。「DNA/MVA Vaccination of HIV-1 Infected Participants with Viral Suppression on Antiretroviral Therapy, followed by Treatment Interruption: Elicitation of Immune Responses without Control of Re-Emergent Virus.」PLoS One 11巻(10号):e0163164頁に記載されているように、Geovax Corporationの組換え改変Vaccinia Ankara 63Bに対する応答について試験した。HIV-1 Gagポリタンパク質全体を表す合成ペプチドを、GeoVaxから得た。または、HIV(GAG)Ultraペプチドセットを、JPT Peptide Technologies GmbH(www.jpt.com)、Berlin、Germanyから得た。HIV(GAG)Ultraは、各々長さが15アミノ酸であり、11個アミノ酸が重複している150個のペプチドを含む。それらは、化学的に合成された後、精製され、液体クロマトグラフィー-質量分析によって分析されていた。一緒にすると、これらのペプチドは、HIV Gagポリタンパク質の主要な免疫原領域を表し、公知HIV株の間での57.8%の平均カバレッジ(average coverage)のために設計されている。ペプチド配列は、ロスアラモス国立研究所(http://www.hiv.lanl.gov/content/sequence/NEWALIGN/align.html)のHIV配列データベースに基づく。ペプチドは、ペプチドあたり25マイクログラムの乾燥トリフルオロ酢酸塩として提供されている。それを、およそ40マイクロリットルのDMSOに溶解し、PBSで終濃度に希釈する。CD4および細胞質IFN-ガンマを検出するためのモノクローナル抗体を商業的供給源から得た。細胞内染色は、インターフェロン-ガンマ用のBD Pharmingen細胞内染色キットで実施した。ペプチドを、DMSOに再懸濁した。本発明者らは、DMSOのみの対照条件を含める。
PBMCを濃縮してHIV特異的CD4 T細胞の割合を増加させ、それらの細胞にAGT103を形質導入して細胞産物AGT103Tを産生するための方法の設計および試験。療法用HIVワクチンを受けたHIV陽性患者に由来するPBMC(末梢血単核細胞)をex vivo培養するためのプロトコールを設計した。この実施例では、療法用ワクチンは、HIV Gag、Pol、およびEnv遺伝子を発現する3用量のプラスミドDNA、その後の、同じHIV Gag、Pol、およびEnv遺伝子を発現する2用量のMVA 62-B(改変vaccinia Ankaraナンバー62-B)で構成されていた。プロトコールは、ワクチン産物に特定されず、免疫化後に十分なレベルのHIV特異的CD4+ T細胞を必要とするに過ぎない。静脈血を集め、PBMCを、Ficoll-Paque密度勾配遠心分離によって精製した。代替的には、PBMCまたは規定された細胞トラクション(traction)は、抗体カクテルおよび蛍光活性化または磁気ビーズ選別を使用して、ポジティブまたはネガティブ選択法によって調製してもよい。精製したPBMCを、洗浄し、補充物、抗生物質、およびウシ胎仔血清を含む標準的培地中で培養する。これらの培養物に、HIV Gagポリタンパク質内の考え得るT細胞エピトープを表す合成ペプチドのプールを添加した。インターロイキン-2およびインターロイキン-12、インターロイキン2およびインターロイキン-7、インターロイキン-2およびインターロイキン-15の組合せを試験した後で選択したサイトカイン、インターロイキン2およびインターロイキン-12を添加することにより培養物を補充する。ペプチド刺激を行い、その後およそ12日間の培養を行う。12日間の培養中、新鮮な培地および新鮮なサイトカイン補充物を、およそ4日に1回添加した。
ベクター構築。改変バージョンのAGT103を構築して、AGT103を増加させた際の用量応答、および細胞表面CCR5レベルに対するその効果を試験した。AGT103を、CMVプロモーターの制御下に緑色蛍光タンパク質(GFP)発現カセットを含むように改変した。形質導入された細胞は、miR30CCR5 miR21Vif miR185TatマイクロRNAクラスターを発現し、GFP発現による緑色光を放つ。
AGT103レンチウイルスベクターの初代CD4 T細胞への形質導入。緑色蛍光タンパク質マーカー(GFP)を含む改変AGT103ベクターを0.2~5の感染多重度で使用して、精製された初代ヒトCD4 T細胞に形質導入した。
細胞にAGT103を形質導入することによる、初代ヒトCD4陽性T細胞のHIV感染からの保護。療法用レンチウイルスAGT103を、細胞あたり0.2~5の感染多重度で使用して、初代ヒトCD4陽性T細胞に形質導入した。その後、形質導入された細胞に、侵入に細胞表面CCR5を必要としないCXCR4指向性HIV株NL4.3をチャレンジした。このアッセイでは、HIVのVifおよびTat遺伝子に対するマイクロRNAの効力が、初代CD4陽性T細胞における増殖性感染の予防の点で試験されるが、感染した初代ヒトCD4 T細胞から放出されるHIVの量を検出する間接法が使用される。
HIV媒介性細胞病理および細胞枯渇から保護するための初代ヒトCD4 T細胞のAGT103形質導入。PBMCを、健康なHIV陰性ドナーから取得し、CD3/CD28ビーズで刺激し、その後、インターロイキン-2を含む培地で1日間培養してから、0.2~5の感染多重度を使用してAGT103を形質導入した。
HIVに対する療法用ワクチン接種は、CD4+、CD8+、およびCD4+/CD8+ T細胞の分布に最小限の影響しか及ぼさなかった。図23Aに示されるように、CD4 T細胞集団は、分析フローサイトメトリードットプロットの左上の象限に示され、ワクチン接種系列後、全T細胞の52%から57%に変化する。これらは代表的なデータである。
AGT103Tは、AGT103レンチウイルスベクターを用いてさらに形質導入されている>5×107個のHIV特異的CD4 T細胞を含む遺伝子改変自己由来PBMCである。
組み入れ基準:
・年齢が18~60歳であること。
・研究登録前の1週間以内に血清学およびウイルスRNAアッセイによりHIV陰性であることが実証されていること。
・過去25年以内にMVAまたは他の天然痘ワクチンを用いた免疫化を先に受けていないこと。
・研究で義務付けられている評価に応じる意思があり、研究期間中はHIVの曝露前予防措置を使用しないことに合意しなければならない。
・CD4+ T細胞数が、立方ミリメートルあたり>600個(細胞/mm3)であること
除外基準:
・あらゆるウイルス性肝炎
・HIV感染
・少なくとも5年間寛解していないがんまたは悪性疾患、ただし治療に成功した皮膚の基底細胞癌は除く
・NYHAグレード3または4のうっ血性心不全またはコントロールされていない狭心症もしくは不整脈と現在診断されていること
・出血障害の病歴
・過去30日の慢性ステロイドの使用
・妊娠または授乳
・活性薬物またはアルコール乱用
・過去30日の重度疾病
・別の臨床試験に現在参加しているか、またはあらゆる以前の遺伝子治療
安全性評価
・急性注入反応
・注入後の安全性追跡調査
有効性評価-第I相
・改変CD4 T細胞の数および頻度。
・改変CD4 T細胞の持続性。
・メモリーT細胞機能の尺度としてのGagペプチド再刺激に対するin vitro応答(ICSアッセイ)。
・AGT103Tに関する自己免疫または慢性炎症状態の欠如。
・ワクチンに対する抗体応答に変化も改善もないこと。
J1.1細胞は、HIVプロウイルスDNAのサイレントコピーを有し、サイトカインTNF-アルファによる処理によって活性化されると、非常に大量の無細胞HIVを産生する。図24のパネル(A)は、形質導入した細胞の>99%で緑色蛍光として見られる、AGT-T-HIV1.0-GFP(別名LV-R5TatVif)またはGFPを有する対照レンチウイルスベクターを用いて形質導入されたJ1.1細胞を示す。図24のパネル(B)は、HIV産生を誘導するために、形質導入した細胞をTNF-アルファ(50ng/ml)で処理したことを示す。7日後に上清を集め、精製されたPHA/IL2刺激扁桃CD4 T細胞に感染させるために使用した。HIV感染を、細胞内p24染色(KC57-RD1、Beckman Coulter)およびフローサイトメトリーアッセイによって検出した。ベクターAGT-LV-HIV1.0は、活性化されたJ1.1細胞によるHIV産生を著しく低減した。このアッセイは、ウイルス産生および感染性にとって不可欠なHIV遺伝子TatおよびVifに対するmiRNAの活性を検証する。
特定の実施形態では、例えば以下の項目が提供される。
(項目1)
HIV感染に耐性の細胞を産生するための方法であって、
(a)HIV陰性の対象から単離された末梢血単核細胞(PBMC)を、治療有効量の刺激性作用剤と接触させるステップであって、前記接触がex vivoで実施される、ステップ;
(b)ex vivoにおいて、少なくとも1つの遺伝的エレメントをコードするウイルス送達システムを用いて前記PBMCに形質導入するステップであって、前記少なくとも1つの遺伝的エレメントが、ケモカイン受容体CCR5の産生を阻害することができるスモールRNA、またはHIV RNA配列を標的とすることができる少なくとも1つのスモールRNAを含む、ステップ;および
(c)形質導入された前記PBMCを、少なくとも1日間培養するステップ
を含む、方法。
(項目2)
形質導入された前記PBMCを対象に注入するステップをさらに含む、項目1に記載の方法。
(項目3)
前記対象がヒトである、項目2に記載の方法。
(項目4)
前記刺激性作用剤がペプチドを含む、項目1に記載の方法。
(項目5)
前記ペプチドが、gagペプチドを含む、項目4に記載の方法。
(項目6)
前記刺激性作用剤がワクチンを含む、項目1に記載の方法。
(項目7)
前記ワクチンが、HIVワクチンを含む、項目6に記載の方法。
(項目8)
前記HIVワクチンが、MVA/HIV62Bワクチンまたはその改変体を含む、項目7に記載の方法。
(項目9)
前記ウイルス送達システムが、レンチウイルス粒子を含む、項目1に記載の方法。
(項目10)
前記少なくとも1つの遺伝的エレメントが、ケモカイン受容体CCR5の産生を阻害することができるスモールRNA、およびHIV RNA配列を標的とすることができる少なくとも1つのスモールRNAを含む、項目1に記載の方法。
(項目11)
前記HIV RNA配列が、HIV Vif配列、HIV Tat配列、またはそれらの改変体を含む、項目1または10に記載の方法。
(項目12)
前記少なくとも1つの遺伝的エレメントが、マイクロRNAまたはshRNAを含む、項目1または10に記載の方法。
(項目13)
前記少なくとも1つの遺伝的エレメントが、マイクロRNAクラスターを含む、項目12に記載の方法。
(項目14)
前記少なくとも1つの遺伝的エレメントが、
と少なくとも80%、または少なくとも85%、または少なくとも90%、または少なくとも95%の同一性パーセントを有するマイクロRNAを含む、項目12に記載の方法。
(項目15)
前記少なくとも1つの遺伝的エレメントが、
を含む、項目12に記載の方法。
(項目16)
前記少なくとも1つの遺伝的エレメントが、
と少なくとも80%、もしくは少なくとも85%、もしくは少なくとも90%、もしくは少なくとも95%の同一性パーセントを有するか、または
と少なくとも80%、もしくは少なくとも85%、もしくは少なくとも90%、もしくは少なくとも95%の同一性パーセントを有するマイクロRNAを含む、項目12に記載の方法。
(項目17)
前記少なくとも1つの遺伝的エレメントが、
を含む、項目12に記載の方法。
(項目18)
前記マイクロRNAクラスターが、
と少なくとも80%、または少なくとも85%、または少なくとも90%、または少なくとも95%の同一性パーセントを有する配列を含む、項目13に記載の方法。
(項目19)
前記マイクロRNAクラスターが、
を含む、項目13に記載の方法。
(項目20)
HIV陰性対象のHIV感染を予防するための方法であって、
(a)有効量の第1の刺激性作用剤で前記対象を免疫化するステップ;
(b)前記対象から白血球を取り出し、末梢血単核細胞(PBMC)を精製するステップ;
(c)ex vivoにおいて、前記PBMCを治療有効量の第2の刺激性作用剤と接触させるステップ;
(d)ex vivoにおいて、少なくとも1つの遺伝的エレメントをコードするウイルス送達システムを用いて前記PBMCに形質導入するステップ;
(e)形質導入された前記PBMCを、少なくとも1日間培養するステップ;および
(f)形質導入された前記PBMCを前記対象に注入するステップ
を含む、方法。
(項目21)
前記第1の刺激性作用剤および前記第2の刺激性作用剤のうちの少なくとも1つが、gagペプチドを含む、項目20に記載の方法。
(項目22)
前記第1の刺激性作用剤および前記第2の刺激性作用剤のうちの少なくとも1つが、HIVワクチンを含む、項目20に記載の方法。
(項目23)
前記HIVワクチンが、MVA/HIV62Bワクチンまたはその改変体を含む、項目23に記載の方法。
(項目24)
前記少なくとも1つの遺伝的エレメントが、ケモカイン受容体CCR5の産生を阻害することができるスモールRNA、またはHIV RNA配列を標的とすることができる少なくとも1つのスモールRNAを含む、項目20に記載の方法。
(項目25)
前記少なくとも1つの遺伝的エレメントが、ケモカイン受容体CCR5の産生を阻害することができるスモールRNA、およびHIV RNA配列を標的とすることができる少なくとも1つのスモールRNAを含む、項目20に記載の方法。
Claims (22)
- HIV感染に耐性の細胞を産生するためのex vivoの方法であって、
(a)HIV陰性の対象から単離された末梢血単核細胞(PBMC)を、治療有効量の刺激性作用剤と接触させるステップであって、前記接触がex vivoで実施され、前記刺激性作用剤が、免疫応答を刺激することができるペプチドまたはペプチド混合物を含む、ステップ;
(b)ex vivoにおいて、少なくとも1つの遺伝的エレメントをコードするウイルス送達システムを用いて前記PBMCに形質導入するステップであって、前記少なくとも1つのコードされる遺伝的エレメントが、
配列番号31と少なくとも90%の配列同一性を有する配列;または
配列番号2と少なくとも90%の配列同一性を含む配列、および配列番号108と少なくとも90%の配列同一性を含む配列
を含み、
前記少なくとも1つの遺伝的エレメントは、発現した場合に、HIV RNA配列を標的とすることができ、および/または、ケモカイン受容体CCR5の産生を阻害することができ、前記HIV RNA配列がVif配列またはTat配列である、ステップ;および
(c)形質導入された前記PBMCを、少なくとも1日間培養するステップ
を含む、方法。 - 形質導入された前記PBMCが、約1日から約35日まで培養される、請求項1に記載の方法。
- 前記刺激性作用剤がgagペプチドを含む、請求項1に記載の方法。
- 前記刺激性作用剤がHIVワクチンを含む、請求項1に記載の方法。
- 前記HIVワクチンが、MVA/HIV62Bワクチンを含む、請求項4に記載の方法。
- 前記ウイルス送達システムが、レンチウイルス粒子を含む、請求項1に記載の方法。
- 前記少なくとも1つの遺伝的エレメントが、配列番号31を含む場合、前記少なくとも1つの遺伝的エレメントが、発現した場合にケモカイン受容体CCR5の産生を阻害することもできる、請求項1に記載の方法。
- 前記少なくとも1つの遺伝的エレメントが、マイクロRNAまたはshRNAを含む、請求項1または7に記載の方法。
- 前記少なくとも1つの遺伝的エレメントが、マイクロRNAクラスターを含む、請求項8に記載の方法。
- 前記マイクロRNAクラスターが、
配列番号31;または
配列番号2および配列番号108
を含む、請求項9に記載の方法。 - HIV陰性対象のHIV感染を予防するための方法において使用するための、形質導入された末梢血単核細胞(PBMC)を含む組成物であって、前記方法は、
(a)前記対象から白血球を取り出すステップであって、前記対象が、治療有効量の第1の刺激性作用剤で免疫化されている、ステップ;
(b)ex vivoにおいて、前記白血球からPBMCを精製するステップ;
(c)ex vivoにおいて、前記PBMCを治療有効量の第2の刺激性作用剤と接触させるステップ;
(d)ex vivoにおいて、少なくとも1つの遺伝的エレメントをコードするウイルス送達システムを用いて前記PBMCに形質導入するステップであって、前記少なくとも1つの遺伝的エレメントが、
配列番号31と少なくとも90%の配列同一性を有する配列;または
配列番号2と少なくとも90%の配列同一性を含む配列、および配列番号108と少なくとも90%の配列同一性を含む配列
を含み、
前記少なくとも1つの遺伝的エレメントは、発現した場合に、HIV RNA配列を標的とすることができ、および/または、ケモカイン受容体CCR5の産生を阻害することができ、前記HIV RNA配列がVif配列またはTat配列である、ステップ;
(e)形質導入された前記PBMCを、少なくとも1日間培養するステップ;および
(f)形質導入された前記PBMCを前記対象に注入するステップ
を含み、前記第1の刺激性作用剤および前記第2の刺激性作用剤の少なくとも一方が、免疫応答を刺激することができるペプチドまたはペプチド混合物を含む、組成物。 - 形質導入された前記PBMCが、約1日から約35日まで培養される、請求項11に記載の組成物。
- 前記対象がヒトである、請求項11または12に記載の組成物。
- 前記第1の刺激性作用剤および前記第2の刺激性作用剤の少なくとも1つがgapペプチドを含む、請求項11に記載の組成物。
- 前記第1の刺激性作用剤および前記第2の刺激性作用剤の少なくとも1つがHIVワクチンを含む、請求項11に記載の組成物。
- 前記HIVワクチンが、MVA/HIV62Bワクチンを含む、請求項15に記載の組成物。
- 前記第1の刺激性作用剤および前記第2の刺激性作用剤が同じである、請求項11に記載の組成物。
- 前記ウイルス送達システムが、レンチウイルス粒子を含む、請求項11に記載の組成物。
- 前記少なくとも1つの遺伝的エレメントが、配列番号31を含み、前記少なくとも1つの遺伝的エレメントが、ケモカイン受容体CCR5の産生を阻害することができるスモールRNAも含む、請求項11に記載の組成物。
- 前記少なくとも1つの遺伝的エレメントが、マイクロRNAまたはshRNAを含む、請求項11または19に記載の組成物。
- 前記少なくとも1つの遺伝的エレメントが、マイクロRNAクラスターを含む、請求項20に記載の組成物。
- 前記マイクロRNAクラスターが、
配列番号31;または
配列番号2および配列番号108
を含む、請求項21に記載の組成物。
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US11820999B2 (en) | 2017-04-03 | 2023-11-21 | American Gene Technologies International Inc. | Compositions and methods for treating phenylketonuria |
RU2666991C1 (ru) * | 2017-09-14 | 2018-09-13 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора) | Генетические конструкции и их смеси для антиВИЧ терапии |
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US11884718B2 (en) | 2018-04-24 | 2024-01-30 | The Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine, Inc. | Potent zika virus-specific and cross-neutralizing monoclonal antibodies to zika and dengue viruses following ZIKV infection or vaccination |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2010520757A (ja) | 2007-03-08 | 2010-06-17 | カリフォルニア インスティテュート オブ テクノロジー | 細胞内で細胞毒性を低減して抗ウイルス性小rna分子を発現させる方法 |
WO2010117974A2 (en) | 2009-04-09 | 2010-10-14 | Stemcyte Inc. | Hiv-resistant stem cells and uses thereof |
WO2010127166A2 (en) | 2009-04-30 | 2010-11-04 | The Regents Of The University Of California | Combination anti-hiv vectors, targeting vectors, and methods of use |
JP2012533299A (ja) | 2009-07-15 | 2012-12-27 | カリミューン, インコーポレーティッド | ヒト免疫不全ウイルス阻害のための二重ベクター |
CN103184224A (zh) | 2013-04-03 | 2013-07-03 | 衡阳师范学院 | 一种抗艾滋病病毒感染的三联miRNA及构建方法 |
WO2015042308A2 (en) | 2013-09-18 | 2015-03-26 | City Of Hope | Rna-based hiv inhibitors |
Family Cites Families (114)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1994012629A1 (en) | 1992-12-02 | 1994-06-09 | Baylor College Of Medicine | Episomal vectors for gene therapy |
NZ269156A (en) | 1993-07-13 | 1996-03-26 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Defective recombinant adenovirus vector incapable of replicating autonomously in a target cell and its use in gene therapy |
EP1012236A1 (en) | 1997-08-15 | 2000-06-28 | Rubicon Laboratory Inc. | Retrovirus and viral vectors |
WO1999021979A1 (en) | 1997-10-28 | 1999-05-06 | Maxygen, Inc. | Human papillomavirus vectors |
JP2002506652A (ja) | 1998-03-20 | 2002-03-05 | トラステイーズ・オブ・ザ・ユニバーシテイ・オブ・ペンシルベニア | 組換えアデノ随伴ウイルスのヘルパーを含まない製造のための組成物及び方法 |
ES2323744T3 (es) | 1998-10-01 | 2009-07-23 | University Of Southern California | Sistema retroviral de suministro de genes y metodos de uso. |
US6156514A (en) | 1998-12-03 | 2000-12-05 | Sunol Molecular Corporation | Methods for making recombinant cells |
US6410013B1 (en) | 1999-01-25 | 2002-06-25 | Musc Foundation For Research Development | Viral vectors for use in monitoring HIV drug resistance |
WO2000072886A1 (en) | 1999-05-26 | 2000-12-07 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Episomally replicating lentiviral vectors |
AU2001257611A1 (en) | 2000-04-28 | 2001-11-12 | Avigen, Inc. | Polynucleotides for use in recombinant adeno-associated virus virion production |
WO2001087350A2 (en) | 2000-05-12 | 2001-11-22 | The Regents Of The University Of California | Treatment of human papillomavirus (hpv)-infected cells |
NO314588B1 (no) | 2000-09-04 | 2003-04-14 | Bionor Immuno As | HIV-peptider, antigener, vaksinesammensetning, immunoassay- testsett og en fremgangsmåte for å påvise antistoffer indusert av HIV |
US7122181B2 (en) | 2000-12-19 | 2006-10-17 | Research Development Foundation | Lentiviral vector-mediated gene transfer and uses thereof |
US20030119770A1 (en) | 2001-08-02 | 2003-06-26 | Zhennan Lai | Intercellular delivery of a herpes simplex virus VP22 fusion protein from cells infected with lentiviral vectors |
WO2003015708A2 (en) | 2001-08-18 | 2003-02-27 | Myriad Genetics, Inc | Composition and method for treating hiv infection |
US20070203333A1 (en) | 2001-11-30 | 2007-08-30 | Mcswiggen James | RNA interference mediated inhibition of vascular endothelial growth factor and vascular endothelial growth factor receptor gene expression using short interfering nucleic acid (siNA) |
AU2003224725A1 (en) | 2002-03-20 | 2003-10-08 | Brigham And Women's Hospital, Inc. | Hiv therapeutic |
WO2003093436A2 (en) | 2002-04-30 | 2003-11-13 | University Of Florida | Treatment for phenylketonuria |
US20040161412A1 (en) | 2002-08-22 | 2004-08-19 | The Cleveland Clinic Foundation | Cell-based VEGF delivery |
DK1545204T3 (en) | 2002-09-06 | 2016-11-14 | The Government Of The Us Secretary Dept Of Health And Human Services | Immunotherapy with in vitro selected antigen-specific lymphocytes following non-myeloablative lymphodepletive chemotherapy |
US20040192629A1 (en) | 2002-11-04 | 2004-09-30 | University Of Massachusetts | Allele-specific RNA interference |
AU2003283174A1 (en) | 2002-12-11 | 2004-06-30 | Cytos Biotechnology Ag | Method for protein production |
WO2004104591A2 (en) | 2003-05-23 | 2004-12-02 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale | Improvements to gamma delta t cell-mediated therapy |
EP1644508A1 (en) | 2003-07-11 | 2006-04-12 | Cytos Biotechnology AG | Gene expression system |
US20050019927A1 (en) | 2003-07-13 | 2005-01-27 | Markus Hildinger | DECREASING GENE EXPRESSION IN A MAMMALIAN SUBJECT IN VIVO VIA AAV-MEDIATED RNAi EXPRESSION CASSETTE TRANSFER |
US20050138677A1 (en) | 2003-09-16 | 2005-06-23 | Pfister Herbert J. | Transgenic animal model for the treatment of skin tumors |
US20070275010A1 (en) | 2003-09-18 | 2007-11-29 | Mark Feinberg | Mva Vaccines |
WO2005033282A2 (en) | 2003-10-01 | 2005-04-14 | Pharmacia & Upjohn Company Llc | Polyamide compositions and therapeutic methods for treatment of human papilloma virus |
US20080039413A1 (en) | 2003-10-21 | 2008-02-14 | Morris David W | Novel compositions and methods in cancer |
EP1753777B1 (en) | 2004-02-25 | 2014-05-07 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | METHODS AND COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT AND PREVENTION OF HIV INFECTION USING TRIM5a |
TWI439284B (zh) | 2004-04-09 | 2014-06-01 | Abbvie Biotechnology Ltd | 用於治療TNFα相關失調症之多重可變劑量療法 |
WO2005118802A2 (en) | 2004-06-03 | 2005-12-15 | The Regents Of The University Of California | Targeting pseudotyped retroviral vectors |
WO2006012221A2 (en) | 2004-06-25 | 2006-02-02 | The Regents Of The University Of California | Target cell-specific short interfering rna and methods of use thereof |
ATE555202T1 (de) | 2004-08-16 | 2012-05-15 | Immune Disease Inst Inc | Verfahren zur lieferung von rna-interferenz und verwendungen damit |
EP1802641B8 (en) | 2004-10-08 | 2012-03-07 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Bisphosphonate compounds and methods for bone resorption diseases, cancer, bone pain, immune disorders, and infectious diseases |
EP1647595A1 (en) | 2004-10-15 | 2006-04-19 | Academisch Medisch Centrum bij de Universiteit van Amsterdam | Nucleic acids against viruses, in particular HIV |
WO2006048215A1 (en) | 2004-11-02 | 2006-05-11 | Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P Angeletti Spa | Adenoviral amplicon and producer cells for the production of replication-defective adenoviral vectors, methods of preparation and use thereof |
US7790446B2 (en) | 2005-02-11 | 2010-09-07 | Kosagen Cell Factory Oü | Vectors, cell lines and their use in obtaining extended episomal maintenance replication of hybrid plasmids and expression of gene products |
CA2597928A1 (en) | 2005-02-16 | 2006-08-24 | Lentigen Corporation | Lentiviral vectors and their use |
EP3002330A1 (en) | 2005-05-27 | 2016-04-06 | Ospedale San Raffaele S.r.l. | Gene vector |
WO2007056388A2 (en) | 2005-11-07 | 2007-05-18 | The General Hospital Corporation | Compositions and methods for modulating poly (adp-ribose) polymerase activity |
WO2007133674A2 (en) | 2006-05-12 | 2007-11-22 | Lentigen Corporation | Lentiviral vector compositions, methods and applications |
WO2007149476A2 (en) | 2006-06-19 | 2007-12-27 | Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Assays for non-apoptotic cell death and uses thereof |
US20080003225A1 (en) | 2006-06-29 | 2008-01-03 | Henri Vie | Method for enhancing the antibody-dependent cellular cytotoxicity (ADCC) and uses of T cells expressing CD16 receptors |
WO2008008719A2 (en) | 2006-07-10 | 2008-01-17 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for inhibiting expression of the myc gene |
EP1878440A1 (en) | 2006-07-13 | 2008-01-16 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Methods and compositions for increasing the efficiency of therapeutic antibodies using gamma delta cell activator compounds |
US20080199961A1 (en) | 2006-08-25 | 2008-08-21 | Avi Biopharma, Inc. | ANTISENSE COMPOSITION AND METHOD FOR INHIBITION OF miRNA BIOGENESIS |
US8338101B2 (en) | 2007-01-23 | 2012-12-25 | Virco Bvba | Method for designing a drug regime for HIV-infected patients |
US20080293142A1 (en) | 2007-04-19 | 2008-11-27 | The Board Of Regents For Oklahoma State University | Multiple shRNA Expression Vectors and Methods of Construction |
EP2008656A1 (en) | 2007-06-28 | 2008-12-31 | Bergen Teknologioverforing AS | Compositions for the treatment of hyperphenylalaninemia |
WO2009026328A2 (en) | 2007-08-21 | 2009-02-26 | Immune Disease Institute, Inc. | Methods of delivery of agents to leukocytes and endothelial cells |
EP2090659A1 (en) | 2008-02-14 | 2009-08-19 | Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. | Infectious particle, process for its preparation and use thereof |
GB0810209D0 (en) | 2008-06-04 | 2008-07-09 | Cambridge Entpr Ltd | Pluripotency associated epigenetic factor |
US8629334B2 (en) | 2008-07-16 | 2014-01-14 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Viral-based transient-expression vector system for trees |
WO2010022195A2 (en) | 2008-08-20 | 2010-02-25 | Virxsys Corporation | Non-integrating lenti/adeno-associated virus hybrid vector system |
EP2342321B1 (en) | 2008-09-17 | 2018-04-11 | Isogenis, Inc. | Construction of fully-deleted adenovirus-based gene delivery vectors and uses thereof |
US20100183558A1 (en) | 2008-10-17 | 2010-07-22 | Zhennan Lai | Safe lentiviral vectors for targeted delivery of multiple therapeutic molecules |
AU2009308707A1 (en) | 2008-10-31 | 2010-05-06 | Biogen Idec Ma Inc. | LIGHT targeting molecules and uses thereof |
WO2010051521A1 (en) | 2008-10-31 | 2010-05-06 | Lentigen Corporation | Cell therapy product for the treatment of hiv infection |
WO2011071476A2 (en) | 2008-11-14 | 2011-06-16 | Life Technologies Corporation | Compositions and methods for engineering cells |
EP2191834A1 (en) | 2008-11-26 | 2010-06-02 | Centre National De La Recherche Scientifique (Cnrs) | Compositions and methods for treating retrovirus infections |
US9434925B2 (en) | 2009-04-13 | 2016-09-06 | Apceth Gmbh & Co. Kg | Genetically modified mesenchymal stem cell that express an exogenous cytotoxic protein |
US20120027725A1 (en) | 2009-11-30 | 2012-02-02 | Galvin Jeffrey A | Safe lentiviral vectors for targeted delivery of multiple therapeutic molecules to treat liver cancer |
CN101805750B (zh) | 2009-12-29 | 2011-11-30 | 浙江大学 | 法呢基焦磷酸合成酶rna干扰重组慢病毒载体构建及用途 |
WO2011103417A2 (en) | 2010-02-18 | 2011-08-25 | Emory University Of Technology Transfer | Vectors expressing hiv antigens and gm-csf and related methods for generating an immune response |
WO2011119942A1 (en) | 2010-03-25 | 2011-09-29 | Vistagen Therapeutics, Inc. | Induction of ips cells using transient episomal vectors |
US20130090371A1 (en) | 2010-04-20 | 2013-04-11 | President And Fellows Of Harvard College | Methods and compositions for inhibition of beta2-adrenergic receptor degradation |
EP3502254A1 (en) | 2010-04-23 | 2019-06-26 | Cold Spring Harbor Laboratory | Novel structurally designed shrnas |
ES2536791T3 (es) | 2010-05-28 | 2015-05-28 | Oxford Biomedica (Uk) Ltd | Administración de vectores lentivirales al cerebro |
US9670459B2 (en) | 2010-08-10 | 2017-06-06 | Takara Bio Inc. | Production method for cell populations |
US20130281493A1 (en) | 2010-10-07 | 2013-10-24 | The Trustees Of The University Of Columbia In The City Of New York | Method for Treating Cancer Harboring a p53 Mutation |
WO2012061075A2 (en) * | 2010-10-25 | 2012-05-10 | The Regents Of The University Of California | Hiv resistant and functional hematopoietic stem/progenitor cells and macrophages from induced pluripotent stem cells |
JP6091435B2 (ja) | 2011-02-22 | 2017-03-08 | カリフォルニア インスティチュート オブ テクノロジー | アデノ随伴ウイルス(aav)ベクターを用いたタンパク質の送達 |
WO2012145624A2 (en) | 2011-04-21 | 2012-10-26 | University Of Massachusetts | Raav-based compositions and methods for treating alpha-1 anti-trypsin deficiencies |
JP6348064B2 (ja) | 2011-11-22 | 2018-06-27 | ザ チルドレンズ ホスピタル オブ フィラデルフィア | 効率の高いトランスジーン送達のためのウイルスベクター |
WO2013096455A1 (en) | 2011-12-20 | 2013-06-27 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Methods for diagnosing and treating oncogenic kras-associated cancer |
US9821114B2 (en) | 2012-02-07 | 2017-11-21 | Global Bio Therapeutics, Inc. | Compartmentalized method of nucleic acid delivery and compositions and uses thereof |
US20150174235A1 (en) | 2012-06-06 | 2015-06-25 | Bionor Immuno As | Vaccine |
US9556433B2 (en) | 2012-07-17 | 2017-01-31 | Université De Genève | Nucleic acids for down-regulation of gene expression |
CA2922005A1 (en) | 2012-09-27 | 2014-04-03 | Population Diagnostics, Inc. | Methods and compositions for screening and treating developmental disorders |
AU2013355327A1 (en) | 2012-12-05 | 2015-06-11 | Sangamo Therapeutics, Inc. | Methods and compositions for regulation of metabolic disorders |
US9642921B2 (en) | 2012-12-20 | 2017-05-09 | Tocagen Inc. | Cancer combination therapy and recombinant vectors |
WO2014117050A2 (en) | 2013-01-26 | 2014-07-31 | Mirimus, Inc. | Modified mirna as a scaffold for shrna |
US10501803B2 (en) | 2013-05-21 | 2019-12-10 | Max-Planck Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | Isoforms of GATA6 and NKX2-1 as markers for diagnosis and therapy of cancer and as targets for anti-cancer therapy |
AU2014296059B2 (en) | 2013-08-02 | 2020-12-10 | The Regents Of The University Of California | Engineering antiviral T cell immunity through stem cells and chimeric antigen receptors |
WO2015061491A1 (en) | 2013-10-22 | 2015-04-30 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | Mrna therapy for phenylketonuria |
EP2878674A1 (en) | 2013-11-28 | 2015-06-03 | Fundación Centro Nacional de Investigaciones Cardiovasculares Carlos III (CNIC) | Stable episomes based on non-integrative lentiviral vectors |
CN113046312A (zh) | 2014-04-23 | 2021-06-29 | 朱诺治疗学股份有限公司 | 分离、培养和遗传工程改造用于过继治疗的免疫细胞群的方法 |
CN106536549B (zh) | 2014-04-25 | 2020-01-17 | 蓝鸟生物公司 | Mnd启动子嵌合抗原受体 |
AU2015250770B2 (en) | 2014-04-25 | 2020-10-01 | Genethon | Treatment of hyperbilirubinemia |
WO2016033163A1 (en) | 2014-08-29 | 2016-03-03 | Immunomedics, Inc. | Identification of cancer genes by in-vivo fusion of human cancer cells and animal cells |
HRP20211601T1 (hr) | 2014-09-22 | 2022-01-21 | Tanea Medical Ab | Rekombinantni proteini bez fenilalanina (phe) za liječenje fenilketonurije |
CN107405357B (zh) * | 2014-10-14 | 2021-12-31 | 德克萨斯科技大学系统 | 多重shRNAs及其应用 |
WO2016069716A1 (en) | 2014-10-30 | 2016-05-06 | The Scripps Research Institute | Compositions and methods comprising tyrosyl-trna synthetases and resveratrol compounds |
GB201509202D0 (en) | 2015-05-28 | 2015-07-15 | Ge Healthcare Bio Sciences Ab | Semi-static cell culture |
US20180161455A1 (en) | 2015-06-10 | 2018-06-14 | American Gene Technologies International, Inc. | Non-integrating viral delivery system and methods of use therof |
JP6890831B2 (ja) | 2015-07-08 | 2021-06-18 | アメリカン ジーン テクノロジーズ インターナショナル インコーポレイテッド | Hiv予備免疫化および免疫療法 |
WO2017068077A1 (en) | 2015-10-20 | 2017-04-27 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) | Methods and products for genetic engineering |
WO2017100551A1 (en) | 2015-12-09 | 2017-06-15 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | HETEROLOGOUS UTR SEQUENCES FOR ENHANCED mRNA EXPRESSION |
US10137144B2 (en) | 2016-01-15 | 2018-11-27 | American Gene Technologies International Inc. | Methods and compositions for the activation of gamma-delta T-cells |
DK3402483T3 (da) | 2016-01-15 | 2024-01-02 | American Gene Tech Int Inc | Fremgangsmåder og sammensætninger til aktivering af gamma-delta-T-celler |
US10888613B2 (en) | 2016-02-08 | 2021-01-12 | American Gene Technologies International Inc. | Method of producing cells resistant to HIV infection |
WO2017156311A2 (en) | 2016-03-09 | 2017-09-14 | American Gene Technologies International Inc. | Combination vectors and methods for treating cancer |
WO2017173453A1 (en) | 2016-04-01 | 2017-10-05 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Stimuli-responsive nanoparticles for biomedical applications |
EP3468617A4 (en) | 2016-06-08 | 2020-01-22 | American Gene Technologies International Inc. | INTEGRATED VIRAL ADMINISTRATION SYSTEM AND RELATED METHODS |
JP6971492B2 (ja) | 2016-07-08 | 2021-11-24 | アメリカン ジーン テクノロジーズ インターナショナル インコーポレイテッド | Hiv予備免疫化および免疫療法 |
JP7176756B2 (ja) | 2016-07-21 | 2022-11-22 | アメリカン ジーン テクノロジーズ インターナショナル インコーポレイテッド | パーキンソン病を処置するためのウイルスベクター |
KR20190100318A (ko) | 2016-12-30 | 2019-08-28 | 더 트러스티스 오브 더 유니버시티 오브 펜실바니아 | 페닐케톤뇨증을 치료하기 위한 유전자 치료 |
JP7260170B2 (ja) | 2017-01-09 | 2023-04-18 | アメリカン ジーン テクノロジーズ インターナショナル インコーポレイテッド | 事前の免疫化ステップのないhiv免疫療法 |
CA3053008A1 (en) | 2017-02-08 | 2018-08-16 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Tunable endogenous protein degradation with heterobifunctional compounds |
US11820999B2 (en) | 2017-04-03 | 2023-11-21 | American Gene Technologies International Inc. | Compositions and methods for treating phenylketonuria |
CN110770338A (zh) | 2017-06-16 | 2020-02-07 | 美国基因技术国际有限公司 | 由人γ-δ T细胞激活肿瘤细胞毒性的方法和组合物 |
WO2019070674A2 (en) | 2017-10-02 | 2019-04-11 | American Gene Technologies International Inc. | VECTORS COMPRISING PROMOTER AND ACTIVATOR COMBINATIONS FOR THE TREATMENT OF PHENYLCETONURIA |
WO2020097049A1 (en) | 2018-11-05 | 2020-05-14 | American Gene Technologies International Inc. | Vector system for expressing regulatory rna |
-
2017
- 2017-01-11 US US16/076,655 patent/US10888613B2/en active Active
- 2017-01-11 WO PCT/US2017/013024 patent/WO2017139065A1/en active Application Filing
- 2017-01-11 JP JP2018541270A patent/JP7153332B2/ja active Active
- 2017-01-11 EP EP17750547.6A patent/EP3413926A4/en active Pending
-
2020
- 2020-11-04 US US17/089,468 patent/US20210121561A1/en active Pending
-
2022
- 2022-04-25 JP JP2022071538A patent/JP2022101658A/ja active Pending
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2010520757A (ja) | 2007-03-08 | 2010-06-17 | カリフォルニア インスティテュート オブ テクノロジー | 細胞内で細胞毒性を低減して抗ウイルス性小rna分子を発現させる方法 |
WO2010117974A2 (en) | 2009-04-09 | 2010-10-14 | Stemcyte Inc. | Hiv-resistant stem cells and uses thereof |
WO2010127166A2 (en) | 2009-04-30 | 2010-11-04 | The Regents Of The University Of California | Combination anti-hiv vectors, targeting vectors, and methods of use |
JP2012533299A (ja) | 2009-07-15 | 2012-12-27 | カリミューン, インコーポレーティッド | ヒト免疫不全ウイルス阻害のための二重ベクター |
CN103184224A (zh) | 2013-04-03 | 2013-07-03 | 衡阳师范学院 | 一种抗艾滋病病毒感染的三联miRNA及构建方法 |
WO2015042308A2 (en) | 2013-09-18 | 2015-03-26 | City Of Hope | Rna-based hiv inhibitors |
Non-Patent Citations (5)
Title |
---|
AIDS Res Hum Retroviruses,2000年,Vol. 16, No. 3,pp. 259-271 |
CLINICAL AND VACCINE IMMUNOLOGY,2007年,Vol. 14, No. 9,pp. 1196-1202 |
Molecular Therapy,2015年,Vol. 23, No. 2,pp. 310-320 |
The Journal of Infectious Diseases,2014年,Vol. 210,pp. 99-110 |
ウイルス,第55巻, 第1号,pp. 1-8 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP3413926A4 (en) | 2019-10-09 |
US10888613B2 (en) | 2021-01-12 |
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