JP7152762B2 - 培養装置および培養方法 - Google Patents
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Description
1)培養装置が複雑で高価である。
2)操作が複雑で運転に技術を要する。
3)規模を変更して運転する場合は、各々の規模に合わせて装置を変えなければならない。
4)機械通気により雑菌汚染される危険性が高まる。
5)光を必要とする場合、特殊な構造と装置が必要となる。
6)機械通気にともなって生じる物理的ストレスに対して敏感な生物は培養できない。
水が貯留される水槽と、
前記水槽中に微細気泡を発生させる微細気泡発生装置と、
ガス透過性を有しかつ疎水性のフィルム部を有し、
被培養生物および培地が収納され、
前記フィルム部が前記水槽の水に接するように入れられる培養容器を
有し、
前記微細気泡は少なくともマイクロバブルを含み、
前記フィルム部は、ペルフルオロアルコキシフッ素樹脂(PFA)、四フッ化エチレン・六フッ化プロピレン共重合体(FEP)あるいはエチレン・四フッ化エチレン共重合体(ETFE)の少なくとも一種の樹脂で構成されたことを特徴とする。
水が貯留された水槽中に微細気泡発生装置でマイクロバブルを発生させる工程と、
ペルフルオロアルコキシフッ素樹脂(PFA)、四フッ化エチレン・六フッ化プロピレン共重合体(FEP)あるいはエチレン・四フッ化エチレン共重合体(ETFE)の少なくとも一種の樹脂で構成されたフィルム部を有する培養容器に被培養生物および培地を収納する工程と、
前記培養容器を前記水槽中の水に入れ前記フィルム部にマイクロバブルを接触させる工程を有することを特徴とする。
2)本発明に係る培養装置では、圧力容器は不要であるので、操作は簡単で無菌的に移植操作ができれば誰でも培養できる。
3)本発明に係る培養装置では、培養容器(フィルム製の袋)の数や大きさによって規模の変更が可能なので非常に容易である。
4)本発明に係る培養装置では、培養容器を入れる水槽には微細気泡を発生させるものの、培養容器内には、機械通気しないので、大規模な雑菌汚染の危険性はない。
5)また、被培養生物は培養容器内で培養され、直接通気を受けないので、被培養生物の通気に伴う物理的ストレスは完全に解消できる。
6)本発明に係る培養装置においては、光を必要とする場合は、水槽の周囲の適当な方向から光を照射すればよく、特別な採光の手立てを用意する必要がない。
7)培養容器(フィルム製の袋)の形状、内部に入れる培地量等は、自由に設定でき、それによって、培養途中で培地を追加したり、培養完了まで放置しておく等、いずれの方法も実施できる。
FEPフィルム製の筒(フィルム厚さ50μm、直径55mm)の一端をクリップで封じ、中に水200mLを入れ、窒素ガスを吹き込むことによって、溶存酸素濃度を十分に低下させた。もう一端からは溶存酸素濃度測定用の電極を差し込んでからきつく閉じた。なお、FEPフィルムはガス透過性を有しかつ疎水性のフィルムFである。
FEPフィルム製バッグ(フィルム厚さ50μm、1L容量、アズワン1-6334-01)にPichia pastoris培養液200μLおよびBM液体培地45.1mLを、50mLシリンジを用いて注入した。
透明アクリル製の水槽(50cm、50cm、50cm)に深さ約30cmまで水を満たした。微細気泡生成のためPao60C(森鉄工株式会社製)を入れ、通気量を約0.1L/minとし、室温が24℃に保たれた室内に設置した。この場合の、微細気泡は肉眼でわずかに気泡が継続して観察できる程度であった。
以上の通り、FEPフィルムからなる袋に液体を封じ、微細気泡水を満たした水槽に没しさせると、気相中よりも高い効率で袋内に酸素が移動することを見出した。袋内への酸素移動速度は、空気をバブリングした場合や空気中に置いた場合よりも高かった(図4)。その理由はすでに説明したが、以下のように説明できる。
10 水槽
10s 側面
10b 底面
12 微細気泡発生装置
12a 放出管
14 照明装置
16 保持手段
16-1a 枠
16-1b 押さえ具
16-2a 枠
16-2b アーム
16-2c 連結紐
16-3 ザル
20 培養容器
20a フィルム部
20b 採光部
20d 本体
20f 蓋
21 クリップ
BB 被培養生物
W 水
BL 微細気泡
WB 微細気泡水
F フィルム
S スペース
Claims (6)
- 水が貯留される水槽と、
前記水槽中に微細気泡を発生させる微細気泡発生装置と、
ガス透過性を有しかつ疎水性のフィルム部を有し、
被培養生物および培地が収納され、
前記フィルム部が前記水槽の水に接するように入れられる培養容器を
有し、
前記微細気泡は少なくともマイクロバブルを含み、
前記フィルム部は、ペルフルオロアルコキシフッ素樹脂(PFA)、四フッ化エチレン・六フッ化プロピレン共重合体(FEP)あるいはエチレン・四フッ化エチレン共重合体(ETFE)の少なくとも一種の樹脂で構成されたことを特徴とする培養装置。 - 前記培養容器を前記水槽中に保持する保持手段を有することを特徴とする請求項1に記載された培養装置。
- 前記水槽および前記培養容器は透明部分を有し、前記培養容器内に光線を照射する光源をさらに備えたことを特徴とする請求項1または2の請求項に記載された培養装置。
- 請求項1から3の何れか一の請求項に記載された培養装置を有するバイオリアクター。
- 水が貯留された水槽中に微細気泡発生装置でマイクロバブルを発生させる工程と、
ペルフルオロアルコキシフッ素樹脂(PFA)、四フッ化エチレン・六フッ化プロピレン共重合体(FEP)あるいはエチレン・四フッ化エチレン共重合体(ETFE)の少なくとも一種の樹脂で構成されたフィルム部を有する培養容器に被培養生物および培地を収納する工程と、
前記培養容器を前記水槽中の水に入れ前記フィルム部にマイクロバブルを接触させる工程を有することを特徴とする培養方法。 - 前記培養容器に培地を追加する工程をさらに含むことを特徴とする請求項5に記載された培養方法。
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JP2018232098A JP7152762B2 (ja) | 2018-12-12 | 2018-12-12 | 培養装置および培養方法 |
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Publication Number | Publication Date |
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JP2020092635A JP2020092635A (ja) | 2020-06-18 |
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JP2013087238A (ja) | 2011-10-20 | 2013-05-13 | Shin-Etsu Chemical Co Ltd | シリコーンゴムの親水性付与方法 |
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JPH0640813B2 (ja) * | 1988-02-17 | 1994-06-01 | ダイキン工業株式会社 | 培養器 |
JP3474208B2 (ja) * | 1991-04-03 | 2003-12-08 | 株式会社日立製作所 | 気体試料又は液体試料中の少なくとも1種の揮発性成分を測定する装置及び測定法 |
-
2018
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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Non-Patent Citations (1)
Title |
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水工学論文集, 2007, Vol.51, pp.1409-1414 |
Also Published As
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