JP7140778B2 - ペプチド送達用の安定なエマルジョンを製造するための方法 - Google Patents
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Description
本発明は、すぐに使える（ready-to-use）ペプチドエマルジョンを工業規模で製造するための方法及びこの方法により得ることが可能なすぐに使えるエマルジョンに関する。本発明は、完全性を保持し、無菌医薬品に必要とされる要件を満たすスケーラブルなペプチドのエマルジョンの送達を可能にする。
新規のアプローチは、がんの処置を追求するものであり、これは、ペプチドの組合せを含む改善されたがんワクチンの開発を含む。
しかしながら、不溶性ペプチドの存在、ペプチド凝集のリスク及び免疫原性の低減を生じる可能性が、タンパク質薬物又はペプチド薬物の開発において繰り返される障害である。ペプチドが同じ製剤中で混合される場合、ペプチド間の凝集又は脱アミド化のリスクは、増加している。
多くの場合、低い溶解度又は凝集問題に関する難問のために、前臨床試験又は臨床試験の過程ですべてのペプチド薬物候補のおよそ95%が棄却される。凝集もタンパク質ベースの薬物の開発に対する最も重大な障害の1つであり、それは、凝集がバイオアベイラビリティ及び治療効果を損なうだけでなく、有害反応のリスクも増加させる可能性があるためである(Interpretation of the dissolution of insoluble peptide sequences based on the acid-base properties of the solvent、L Malavoltaら、2006、Protein Sci. 2006年6月;15(6):1476～1488ページ)。
全配列が疎水性アミノ酸(例えば、A、F、I、L、M、P、V、W、Y、アルファ-アミノ酪酸、b-アミノアラニン、ノルロイシン)からなる場合を除いて、5残基よりも短いペプチドは、通常、水又は水性バッファーに溶解できる。疎水性残基を50%以上含むペプチドは、水溶液に溶けないか、又は部分的にのみ溶けると予想される。高い割合(>75%)のD、E、H、K、N、Q、R、S、T、Yを含むペプチドは、分子間水素結合を構築する(すなわち、架橋する)ことが可能であり、したがって、水溶液中にゲルを形成する。
ペプチドの凝集体は、可溶性又は不溶性、並びに共有結合性(共有結合、多くの場合、ジスルフィド結合の形成を伴う)又は水素結合性(より弱い相互作用)と分類される。共有結合による治療用タンパク質の自己会合は一般に非可逆的であるが、より弱い相互作用により形成される凝集体は、タンパク質濃度、温度、及びpHの変化時に可逆的になる場合もある。結果として、凝集体の大きさは、極めて小さい見えないろ過不可能な粒子から肉眼で見える大きな沈殿物に及ぶ場合がある。更に、一部の凝集体は、静的である場合もあり、その他は動的である場合もある。
特定の製造段階は、物理的分解のリスク及び凝集体の形成を増加させる化学的分解のリスクに影響を与える。例えば、より高い濃度のタンパク質製剤又はペプチド製剤は、凝集の確率、並びに溶液pH、温度、バッファー選択の変化を増加させる可能性がある。更に、ワクチンの製造において行われる乳化工程もペプチド分解及び凝集の原因となる場合がある。油中水型(W/O)エマルジョンの形成を可能にするアジュバントを伴うワクチン製剤は、注射部位にデポーを形成することにより免疫応答を誘導し、実に極めて望ましい。ただし、ペプチドの組合せが可溶性ペプチド及び不溶性ペプチドの両方を含む場合、均質化及び乳化プロセスが問題である。乳化がペプチドの局所送達及び免疫提示に対して重要な要素であるため、エマルジョン中におけるそのようなペプチドの安定性は、安全性及び免疫原性に対して重要である。可溶性状態又は不溶性状態のペプチドは、温度及び撹拌の両方に影響されやすく、酸化に影響されやすく、不溶性ペプチド及び可溶性ペプチドの混合物は、保存の間に交差反応性の懸念を呈する可能性があり、そのような組合せを混合するために使用される機械力は、ペプチドを変化させる可能性がある。
これらの欠点を鑑み、ペプチドの組合せを含むワクチン製剤は、どちらかといえば必要に応じて調製される。
例えば、組み合わされたペプチドURLC19-177、CDCA1-56、TTK-567、VEGFR1-770及びVEGFR2-169を用いて、新しい研究が行われた。5つすべてのペプチドはHLA-A24分子と結合すると予想された。組み合わされたペプチドはすべて20mg/mlの濃度でDMSOに溶解し、-80℃で保存された。これらは、アジュバント(フロイント不完全アジュバントIFA又はMontanide(登録商標)ISA 51)と混合した後に、ベッドの場所で注射された(Suzuki Hら、2013年、「Multiple therapeutic peptide vaccines consisting of combined novel cancer testis antigens and anti-angiogenic peptides for patients with non-small cell lung cancer.」、Journal of Translational Medicine 2013年)。類似の組み合わされたペプチドが同じプロセスを用いて使用された(HLA-A*24分子と結合するTTK-567、URLC10-177、KOC1-508、VEGFR1-1084、VEGFR2-169)(Iinuma Hら、「Phase I clinical study of multiple epitope peptide vaccine combined with chemoradiation therapy in esophageal cancer patients」- Journal of Translational Medicine 2014年)。RNF43、TOMM34、KOC1、VEGFR1、及びVEGFR2由来の5つのHLA-A*2402拘束性ペプチドも組合せて使用された[RNF43-721、TOMM34-299、KOC1(IMP-3)-508、VEGFR1-1084及びVEGFR2-169](Hazama Sら、「A phase I study of combination vaccine treatment of five therapeutic epitope-peptides for metastatic colorectal cancer; safety、immunological response、and clinical outcome」、Journal of Translational Medicine 2014年)。
最近の文献において上で提示されたすべてのペプチドの組合せは、最初に可溶化された後、患者への注射の直前にアジュバントと混合される。このプロセスは、アジュバント中のペプチドの長期安定性が必要とされると予想されるエマルジョンの調製を回避した。
反対に、ペプチドの混合物を含むすぐに使えるワクチンの例がWO2004/094454に開示されている。この文献において、ペプチドの組合せは、逆エマルジョン(reverse emulsion)の形態で皮下投与される。前記エマルジョンを調製するために、さまざまな可溶性ペプチド及び不溶性ペプチドがさまざまな媒体中において可溶化され、3つの個別の溶液がもたらされ、それは、その後、冷却され、滅菌ろ過に供され、懸濁液を得るために一緒に混合され、そのpHが、その後、7に調節される。この懸濁液は、合成又は植物由来のマンニトール及び精製オレイン酸から得られるマンニドモノオレアート(mannide mono-oleate)を含む油中水型(W/O)乳化剤と混合される。この乳化剤は、中にペプチドが分散した微細な水滴を含有する油中水型エマルジョンを得ることを可能にする。このエマルジョン構造は、結果として強く、長く継続する免疫をもたらす。
ペプチドの乳化には強力なミキサーが必要とされる。均質化には、アジュバントからの油とペプチド溶液からの水滴を混合するために機械力を用いる。細かく分散した液滴を作り出すために高せん断及び機械力が重要である。ペプチドの化学的性質が混合プロセスに対して抵抗力を与えることを考えると、このエマルジョンは、多くの場合困難であることがわかる。高圧ホモジナイザーによって達成される高せん断は、抵抗力を克服することができる。したがって、アジュバントの供給業者は、高せん断を用いたペプチドの乳化を推奨する。例えば、Montanide(登録商標)ISA 50 V2として販売されるアジュバントについて記載している2007年4月付けのパンフレットにおいて、SEPPICは、安定で有効なワクチンを得るために、このアジュバントを水性の抗原性媒体とSilverson(登録商標)L4RT等の高せん断ミキサーを4000rpmで使用して混合することを勧めている。
上記と一致して、WO2004/094454では、ペプチド懸濁液のアジュバントとの混合が、8,000rpmで30分間回転するSilverson(登録商標)L4RTホモジナイザーを使用して行われた。この装置は、軸のまわりに放射状に配置された刃を備えた回転子を有し、回転子によって引き寄せられた流体を放射状に、回転子から同心円状に短い距離で配置された固定子に向ける混合ワークヘッド(mixing workhead)を備える。固定子は、格子状に設けられた穴を備える。そのような回転子-固定子システムは、WO2004/094454において高せん断により形成されるエマルジョンをもたらす。それは、それが、回転子の刃の末端と固定子の内壁との間でかき混ぜられ、固定子の穴を通って混合ワークヘッドの側へ高速で押し出されるためである。
しかしながら、本発明者らは、このプロセスのスケールアップがペプチドの長期安定性を提供するエマルジョンをもたらさないことを示した。具体的には、上記プロセスをスケールアップする場合、本出願人は、逆相HPLCによるそこに含まれるペプチドの量が、試験したバッチによって異なる値になることに気づいた。これは、すでにWO2004/094454において言及され、そこでは、ペプチド濃度の30%までの誤差が観察されたことが明記されている。意図される濃度の50%の規定が発売及び安定性基準として提言されたため、このばらつきは最終的な医薬製品に関して許容可能であった。このばらつきは早期臨床試験の許容範囲内に留まっていたが、更に先の臨床試験のためには、いくつかの薬事規則(pharmaceutical legislation)の厳しい要件に適合するよう、更に重要なことに安定な乳化状態のペプチドの送達を確実にするよう、更にそれぞれのペプチドの免疫原性を保証するよう、ばらつきを可能なかぎり低減することが必要と予想される。本発明者らは、この問題を克服するために大規模な研究を行った。
この状況において、がんワクチン中のペプチドのアジュバントとの有益な乳化を得るために必要とされる撹拌の速度及び継続時間が、特に組合せが可溶性ペプチド及び不溶性ペプチドによって生成される場合に、ペプチドの完全性を変化させ、その効力を低下させる可能性があることが本発明者らによって示された。
高せん断及び高速を用いた乳化方法は、大きな規模で使用される場合、ペプチド分解及び/又は凝集につながることがわかった。更に、先行技術で使用される高せん断ミキサーは、熱を生じたため、熱感受性ペプチド(heat-sensitive peptide)の分解の可能性を回避するためにミキサーの持続的な冷却が必要とされる。このプロセスをスケールアップする場合、ペプチドの酸化を回避するためのこの冷却工程の正確な制御が難題であると考えられ、この酸化は、ペプチドの機能的ドメイン又はエピトープ様ドメインに対する酸化したアミノ酸の位置によりその効力に悪影響を及ぼす可能性があった。酸化はまた、ペプチドの物理化学的特徴も変化させ、凝集につながることがある。この現象は、さらにはこうしたペプチドを含有する薬物の治療効果に必須の安全性及び送達を損ない、免疫原性反応(immunogenic reaction)のリスクも増加する可能性があった。
Interpretation of the dissolution of insoluble peptide sequences based on the acid-base properties of the solvent、L Malavoltaら、2006、Protein Sci. 2006年6月、15(6):1476～1488ページ
Suzuki Hら、2013年、「Multiple therapeutic peptide vaccines consisting of combined novel cancer testis antigens and anti-angiogenic peptides for patients with non-small cell lung cancer.」、Journal of Translational Medicine 2013年
Iinuma Hら、「Phase I clinical study of multiple epitope peptide vaccine combined with chemoradiation therapy in esophageal cancer patients」- Journal of Translational Medicine 2014年
Hazama Sら、「A phase I study of combination vaccine treatment of five therapeutic epitope-peptides for metastatic colorectal cancer; safety、immunological response、and clinical outcome」、Journal of Translational Medicine 2014年
したがって、本発明者らは、上記の課題を克服するための手段を探し、それにより、注入可能なペプチドエマルジョンを調製するために工業規模で容易に実施可能なプロセスを提供し、そのエマルジョンにおいて、それぞれのペプチドが安定した状態で送達されるよう、エマルジョンの物理的安定性に悪影響を与えることなく、ペプチドの化学的完全性が、特に、ペプチド分解(酸化及び/又は脱アミド化等)から保護され、凝集が予防又は低減される。更に、再現性のあるプロセスが必要とされる。
本出願人は、驚くべきことに、ペプチドエマルジョンが従来使用されている乳化条件よりも穏やかな条件下において調製されるプロセスによって、上記要件を満たすことが可能なことを発見した。具体的には、当該技術分野において推奨されたものとは反対に、高速及び高せん断が回避され、更に驚くべきことに、低速でも長い混合の継続時間を必要としない。したがって、異なる溶解度のペプチドは、混合と同時にエマルジョンを冷却する必要なく酸化ストレスから保護され、その凝集が予防される。それにより、ペプチド濃度のばらつきは、WO2004/094454等の先行技術と比較して劇的に低減される。したがって、本発明は、ペプチドの免疫提示に必要なデポー効果のために安定した免疫原性が必要とされるペプチドの最適な送達のための安定なエマルジョンを得ることを可能にする。このプロセスは、ペプチドエマルジョンの必要に応じた調製のための従来のプロセスよりもさらにより再現性があり、それは、後者は操作者に左右されるためである。これは、大きな体積のエマルジョンの製造を可能にするため、工業規模に適用できる。
したがって、本発明は、すぐに使えるペプチドエマルジョンを工業規模で製造するための方法であって、少なくとも2つのペプチドの懸濁液を、低せん断条件下で、100rpmから1000rpmの間の回転速度で2分間から15分間、少なくとも1つのアジュバントと乳化する工程を含む、方法を対象とする。
好ましくは、ペプチドは、少なくとも1つの可溶性ペプチド及び少なくとも1つの不溶性ペプチドを含む。特に、ペプチドは、ペプチドKVFGSLAFV(配列番号7)、ペプチドYLSGADLNL(配列番号8)、Bがα-アミノイソ酪酸を表すペプチドKLBPVQLWV(配列番号6)、ペプチドSMPPPGTRV(配列番号5)、ペプチドIMIGHLVGV(配列番号9)、ペプチドLLTFWNPPV(配列番号4)、ペプチドRLLQETELV(配列番号2)、X及びaがそれぞれシクロヘキシルアラニン及びd-アラニンを表すペプチドaKXVAAWTLKAAa(配列番号1)、ペプチドYLQLVFGIEV(配列番号3)並びにペプチドKVAEIVHFL(配列番号10)からなる群から選択される。特定の実施形態において、懸濁液が、ペプチドKVFGSLAFV(配列番号7)、ペプチドYLSGADLNL(配列番号8)、ペプチドKLBPVQLWV(配列番号6)、ペプチドSMPPPGTRV(配列番号5)、ペプチドIMIGHLVGV(配列番号9)、ペプチドLLTFWNPPV(配列番号4)、ペプチドRLLQETELV(配列番号2)、X及びaがそれぞれシクロヘキシルアラニン及びd-アラニンを表すペプチドaKXVAAWTLKAAa(配列番号1)、ペプチドYLQLVFGIEV(配列番号3)並びにペプチドKVAEIVHFL(配列番号10)の組合せを含む。
好ましくは、アジュバントは、炭化水素油と油中水型乳化剤の混合物からなる。特に、炭化水素油は、パラフィン油、植物油、スクアレン、スクアラン又は鉱油から選択され、油中水型乳化剤は、マンニドモノオレアート及びソルビタンモノオレアートから選択される。特定の実施形態において、炭化水素油は、鉱油であり、油中水型乳化剤は、マンニドモノオレアートから選択される。
好ましくは、アジュバントとペプチド懸濁液との質量比は、10:1から1:10、好ましくは5:1から1:5、より好ましくは2:1から1:2の範囲であり、更に好ましくは1:1である。
好ましくは、混合する工程のすべて又は一部が、不活性雰囲気下、好ましくは、窒素下において実施される。
好ましくは、エマルジョンの体積が、5Lよりも大きい、好ましくは10L以上である。
特定の実施形態において、ペプチド懸濁液は、
a)少なくとも3つの異なる溶液A、B及びCを準備する工程であって、
・溶液Aが、酸性の水性媒体であり、X及びaがそれぞれシクロヘキシルアラニン及びd-アラニンを表すペプチドaKXVAAWTLKAAa(配列番号1)を含み、
・溶液Bが、任意のペプチドを添加する前のpHが12.5から12.9の間である塩基性の水性媒体であり、ペプチドYLSGADLNL(配列番号8)を含み、
・溶液Cが、DMSOであり、ペプチドKVFGSLAFV(配列番号7)を含み、
・溶液A及び/又は溶液Bが、Bがα-アミノイソ酪酸を表すKLBPVQLWV(配列番号6)、SMPPPGTRV(配列番号5)、IMIGHLVGV(配列番号9)、LLTFWNPPV(配列番号4)、KVAEIVHFL(配列番号10)、RLLQETELV(配列番号2)及びYLQLVFGIEV(配列番号3)から選択される少なくとも3つの追加のペプチドを更に含む、工程と、
b)前記溶液を混合して懸濁液を形成する工程と、
c)前記懸濁液のpHを約7に調節する工程と
を含む方法によって調製される。
a)少なくとも3つの異なる溶液A、B及びCを準備する工程であって、
・溶液Aが、酸性の水性媒体であり、X及びaがそれぞれシクロヘキシルアラニン及びd-アラニンを表すペプチドaKXVAAWTLKAAa(配列番号1)を含み、
・溶液Bが、任意のペプチドを添加する前のpHが12.5から12.9の間である塩基性の水性媒体であり、ペプチドYLSGADLNL(配列番号8)を含み、
・溶液Cが、DMSOであり、ペプチドKVFGSLAFV(配列番号7)を含み、
・溶液A及び/又は溶液Bが、Bがα-アミノイソ酪酸を表すKLBPVQLWV(配列番号6)、SMPPPGTRV(配列番号5)、IMIGHLVGV(配列番号9)、LLTFWNPPV(配列番号4)、KVAEIVHFL(配列番号10)、RLLQETELV(配列番号2)及びYLQLVFGIEV(配列番号3)から選択される少なくとも3つの追加のペプチドを更に含む、工程と、
b)前記溶液を混合して懸濁液を形成する工程と、
c)前記懸濁液のpHを約7に調節する工程と
を含む方法によって調製される。
一態様において、溶液Aは、aKXVAAWTLKAAa(配列番号1)、SMPPPGTRV(配列番号5)、IMIGHLVGV(配列番号9)及びKVAEIVHFL(配列番号10)を含み、溶液Bは、YLSGADLNL(配列番号8)、KLBPVQLWV(配列番号6)、LLTFWNPPV(配列番号4)、RLLQETELV(配列番号2)及びYLQLVFGIEV(配列番号3)を含む。
本発明はまた、とりわけ、がん、好ましくは、HLA-2陽性がんの処置に使用するための本発明による方法によって得ることが可能な又は得られるすぐに使えるエマルジョンに関する。特に、エマルジョン中のそれぞれのペプチドの量は、0.1mg/mlから10mg/ml、好ましくは0.5mg/mlから1mg/mlの範囲であり、エマルジョンの調製に使用された量と10%を超えて異ならない。一実施形態において、エマルジョンのD50は、10±1μmである。
本発明は、少なくとも2つのペプチドを含むペプチド懸濁液からすぐに使えるエマルジョンを工業規模で製造するための方法に関する。これらのペプチドは、通常、同じ溶解度を有さず、少なくとも1つの可溶性ペプチド及び少なくとも1つの不溶性ペプチドの組合せを使用することが好ましい。
「不溶性ペプチド」という表現は、7.0±1.0のpHの水に60%w/v未満の量で溶解できるペプチドを指し、「可溶性ペプチド」は、7.0±1.0のpHの水に少なくとも60%w/vの量で溶解できるペプチドを指す。溶解度は、1mg/mlの濃度のペプチドの水溶液を0.45μmのフィルターを通過させ、フィルターに残るペプチドの量を測定することによって評価することができる。
「工業規模」とは、5Lより大きい、好ましくは10L以上の体積のエマルジョンが調製されることを意味する。一実施形態において、体積は、50L、100L、200L、500L又は1000Lが可能である。
ペプチド
本発明の好適な実施形態によると、ペプチドは、腫瘍関連抗原(TAA)エピトープ、好ましくはHLA-A2結合TAAエピトープ及び/又はその類似体から選択されてもよい。
本発明の好適な実施形態によると、ペプチドは、腫瘍関連抗原(TAA)エピトープ、好ましくはHLA-A2結合TAAエピトープ及び/又はその類似体から選択されてもよい。
TAAエピトープは、1つ又はいくつかの標的に由来することが可能であり、特に、CEA(がん胎児性抗原)、p53、HER-2/neu、MAGE(メラノーマ抗原)、特に、MAGE-2及びMAGE-3、LY6K(リンパ球抗原6複合体、遺伝子座K)、CDCA1(細胞分裂周期関連(cell division cycle associated)1)(例えば、EP2186889を参照)、IMP3(インスリン様増殖因子-II mRNA結合タンパク質3)(例えば、WO2011/067920を参照)、KIF20A(キネシン様タンパク質)(例えば、WO2010/047062を参照)、FOXM1(フォークヘッドボックスタンパク質(Forkhead box protein)M1)(例えば、EP2186889を参照)、CDC45L(細胞分裂制御タンパク質(Cell division control protein)45ホモログ)、GPC3(グリピカン-3)(例えば、WO2015/173112を参照)、CDH3(カドヘリン3)、SPARC(酸性のシステインリッチの分泌タンパク質(Secreted Protein Acidic And Cysteine Rich))、DEPDC1(DEPドメイン含有(DEP domain containing)1)、MPHOSPH1(M期リンタンパク質(M-PHASE PHOSPHOPROTEIN)1)(例えば、WO2013/024582を参照)、ME-1(リンゴ酸酵素1)、ENDC3B、PRDX5(ペルオキシレドキシン-5)、GAS7(増殖停止特異的タンパク質(Growth arrest-specific protein)7)、HA-1(miHAg)(マイナー組織適合抗原(Minor histocompatibility antigen)HA-1)、GAPDH(グリセルアルデヒド3-リン酸デヒドロゲナーゼ)、HSP70(70kD 熱ショックタンパク質)、アクチニン、HAUS3(HAUSオーグミン様複合体サブユニット3)、CSNK1A1(カゼインキナーゼIアイソフォームアルファ)、CLPP(ATP依存性Clpプロテアーゼタンパク質分解サブユニット)及びCDK4(サイクリン依存性キナーゼ4)からなる群から選択される。好適な実施形態において、ペプチドは、選択され、CEA、p53、HER-2/neu、MAGE-2及びMAGE-3を標的とする。
例えば、ペプチドは、WO2004/094454、WO2014/141683、WO2015/173112、WO2015/160928、WO2015/155537、WO2014/162962、WO2014/141652、WO2014/136453、WO2014/127276、WO2014/047085、WO2014/041784、WO2013/024582、WO2012/073459、WO2013/061594、WO2012/169200、WO2011/111392、WO2012/053200、WO2012/053206、WO2010/137295、WO2008/047473、WO2008/102557、WO2009/109855、EP2186889、WO2010/047062、WO2011/067920等において開示されているペプチドから選択されるペプチドを含む(それらの開示は、参照によって本明細書に組み込まれる)。
本発明の特定の実施形態によると、ペプチドは、ペプチドKVFGSLAFV(配列番号7)、ペプチドYLSGADLNL(配列番号8)、Bがα-アミノイソ酪酸を表すペプチドKLBPVQLWV(配列番号6)、ペプチドSMPPPGTRV(配列番号5)、ペプチドIMIGHLVGV(配列番号9)、ペプチドLLTFWNPPV(配列番号4)、ペプチドRLLQETELV(配列番号2)、X及びaがそれぞれシクロヘキシルアラニン及びd-アラニンを表すペプチドaKXVAAWTLKAAa(配列番号1)、ペプチドYLQLVFGIEV(配列番号3)、ペプチドKVAEIVHFL(配列番号10)からなる群から選択される。これらのペプチドのうちの少なくとも2つ、好ましくは、aKXVAAWTLKAAa(配列番号1)、YLSGADLNL(配列番号8)及びKVFGSLAFV(配列番号7)等の少なくとも3つの、更に好ましくは、上記10個すべてのペプチドの組合せが本発明に使用することができる。特定の実施形態において、ペプチドは、1つ又はいくつかの追加のペプチドを更に含む。
特定の実施形態において、ペプチドは、FLDEFMEGV(配列番号11)、VVMSWAPPV(配列番号12)、LLLDDLLVSI(配列番号13)、SLADEAEVYL(配列番号14)、VLHDDLLEA(配列番号15)、GIVEGLITTV(配列番号16)、SLFEGIDIYT(配列番号17)、FIASNGVKLV(配列番号18)、ILNAMIAKI(配列番号19)、GLFGDIYLAI(配列番号20)、ILDKVLVHL(配列番号21)、及びACDPHSGHFV(配列番号22)からなる群から選択されるペプチドを含んでもよい。
本出願においてペプチドを記載するために使用される命名法は、各アミノ酸残基のアミノ基は左に(アミノ末端又はN末端)、カルボキシル基は右に(カルボキシ末端又はC末端)示す従来の実務に従う。アミノ末端基及びカルボキシル末端基は、特に示していないが、他に指定がないかぎり、それが生理学的なpH値にあると想定される形態である。アミノ酸構造式において、各残基は、一般に標準的な三文字又は一文字の呼称によって表される。L型のアミノ酸残基は、大文字の一文字又は三文字記号の大文字の最初の文字によって表され、D型を有するそれらのアミノ酸残基に関するD型は、小文字の一文字又は小文字の三文字記号によって表される。例えば、「a」という記号は、D-アラニンを指す。本明細書中に記載されているペプチドのアミノ酸配列は、一般に標準的な一文字記号を使用して指定される。(A、アラニン;C、システイン;D、アスパラギン酸;E、グルタミン酸;F、フェニルアラニン;G、グリシン;H、ヒスチジン;I、イソロイシン;K、リジン;L、ロイシン;M、メチオニン;N、アスパラギン;P、プロリン;Q、グルタミン;R、アルギニン;S、セリン;T、トレオニン;V、バリン;W、トリプトファン;及びY、チロシン)。こうした記号に加えて、本明細書中で使用される一文字略語において、「B」はa-アミノ酪酸を指し、「X」は、シクロヘキシルアラニンを示す。
懸濁液
本発明に使用されるペプチド懸濁液は、それぞれ少なくとも2つの異なるペプチドを含有する少なくとも2つの異なる溶液を準備する工程を含むプロセスにより調製することができる。本発明のある実施形態によると、それぞれが少なくとも1つの特定のペプチドを含む、3つの異なる溶液A、B及びCが調製される。特に、溶液Aは酸性の水性媒体であり、溶液Bは塩基性の水性媒体であり、溶液Cは有機媒体、特に、DMSO(ジメチルスルホキシド)である。好適な実施形態において、溶液A、B及びCは、それぞれ、少なくともaKXVAAWTLKAAa(配列番号1)、YLSGADLNL(配列番号8)及びKVFGSLAFV(配列番号7)を含む。
本発明に使用されるペプチド懸濁液は、それぞれ少なくとも2つの異なるペプチドを含有する少なくとも2つの異なる溶液を準備する工程を含むプロセスにより調製することができる。本発明のある実施形態によると、それぞれが少なくとも1つの特定のペプチドを含む、3つの異なる溶液A、B及びCが調製される。特に、溶液Aは酸性の水性媒体であり、溶液Bは塩基性の水性媒体であり、溶液Cは有機媒体、特に、DMSO(ジメチルスルホキシド)である。好適な実施形態において、溶液A、B及びCは、それぞれ、少なくともaKXVAAWTLKAAa(配列番号1)、YLSGADLNL(配列番号8)及びKVFGSLAFV(配列番号7)を含む。
更に好ましくは、溶液A及び/又は溶液Bは、上記一覧のペプチドのうちの少なくとも3つの追加のペプチド、好ましくは、少なくとも5つの追加のペプチドを更に含む。より好ましくは、溶液A及び/又は溶液Bは、これら7つすべての追加のペプチドを含む。これらの追加のペプチドのそれぞれは、その溶解度及びaKXVAAWTLKAAa(配列番号1)又はYLSGADLNL(配列番号8)に対するその親和性に応じて溶液A又は溶液Bに含まれることになる。
したがって、一態様において、本発明は、
a)少なくとも3つの異なる溶液A、B及びCを準備する工程であって、
・溶液Aが、X及びaがそれぞれシクロヘキシルアラニン及びd-アラニンを表すペプチドaKXVAAWTLKAAa(配列番号1)を含み、
・溶液Bが、ペプチドYLSGADLNL(配列番号8)を含み、
・溶液Cが、ペプチドKVFGSLAFV(配列番号7)を含み、
・溶液A及び/又は溶液Bが、Bがα-アミノイソ酪酸を表すKLBPVQLWV(配列番号6)、SMPPPGTRV(配列番号5)、IMIGHLVGV(配列番号9)、LLTFWNPPV(配列番号4)、KVAEIVHFL(配列番号10)、RLLQETELV(配列番号2)及びYLQLVFGIEV(配列番号3)から選択される少なくとも3つの追加のペプチドを更に含む、工程と、
b)前記溶液を混合して懸濁液を形成する工程と、
c)前記懸濁液のpHを約7に調節する工程と
を含む、ペプチド懸濁液を製造するための方法であって、
好ましくは、溶液BのpHは、任意のペプチドをそこに添加する前に12.5から12.9の間に調節される、方法に関する。
a)少なくとも3つの異なる溶液A、B及びCを準備する工程であって、
・溶液Aが、X及びaがそれぞれシクロヘキシルアラニン及びd-アラニンを表すペプチドaKXVAAWTLKAAa(配列番号1)を含み、
・溶液Bが、ペプチドYLSGADLNL(配列番号8)を含み、
・溶液Cが、ペプチドKVFGSLAFV(配列番号7)を含み、
・溶液A及び/又は溶液Bが、Bがα-アミノイソ酪酸を表すKLBPVQLWV(配列番号6)、SMPPPGTRV(配列番号5)、IMIGHLVGV(配列番号9)、LLTFWNPPV(配列番号4)、KVAEIVHFL(配列番号10)、RLLQETELV(配列番号2)及びYLQLVFGIEV(配列番号3)から選択される少なくとも3つの追加のペプチドを更に含む、工程と、
b)前記溶液を混合して懸濁液を形成する工程と、
c)前記懸濁液のpHを約7に調節する工程と
を含む、ペプチド懸濁液を製造するための方法であって、
好ましくは、溶液BのpHは、任意のペプチドをそこに添加する前に12.5から12.9の間に調節される、方法に関する。
溶液Aは、好ましくは、ペプチドを酢酸溶液等の酸性の水性媒体中において、好ましくは、室温で可溶化することによって調製される。酢酸溶液の濃度は、例えば、0.1Mから0.3Mの範囲であってもよい。したがって、酸性の水性媒体は、好ましくは、2から4の間、より好ましくは、2.5から3の間に含まれるpHを有する。溶液Aのそれぞれのペプチドは、0.3mg/mlから4mg/ml、好ましくは3mg/mlから4mg/mlの濃度で存在することが可能である。好ましくは、溶液A中においてすべてのペプチドは、同じ濃度で存在する。好ましくは、溶液Aは、aKXVAAWTLKAAa(配列番号1)、並びにSMPPPGTRV(配列番号5)、IMIGHLVGV(配列番号9)及びKVAEIVHFL(配列番号10)からなる群から選択される1つ、2つ又は3つのペプチドを含む。最も好適な実施形態において、溶液Aは、aKXVAAWTLKAAa(配列番号1)、SMPPPGTRV(配列番号5)、IMIGHLVGV(配列番号9)及びKVAEIVHFL(配列番号10)を含む。特定の実施形態において、溶液Aのペプチドは、aKXVAAWTLKAAa(配列番号1)、SMPPPGTRV(配列番号5)、IMIGHLVGV(配列番号9)及びKVAEIVHFL(配列番号10)で構成される。
更に、溶液Bは、塩基性の水性媒体、例えば、水酸化ナトリウム溶液中において、通常、室温でペプチドを可溶化することによって調製することができる。
上記プロセスをスケールアップする場合、本出願人は、塩基性溶液中に含まれるペプチドのうちの1つ(すなわち、YLSGADLNL(配列番号8))が工業規模におけるこの溶液の滅菌ろ過を可能にする程長い間、化学的に安定ではないことに気づいた。
本出願人は、驚くべきことに、YLSGADLNL(配列番号8)ペプチドが添加されるべき塩基性溶液のpHのわずかな調節がその分解を回避させることができることを発見した。したがって、本発明の方法は、長期安定性及び良好な再現性を有する懸濁液を調製するのに適している。
実際に、溶液BのpHは、任意のペプチドをそこに添加する前に12.5から12.9の間、好ましくは、約12.7に調節される。それは、0.05Mの水酸化ナトリウムの溶液を使用することによって得ることができる。好ましくは、溶液B中のそれぞれのペプチドは、総量で0.4mg/mlから3mg/mlである。より好ましくは、溶液B中のそれぞれのペプチドは、2mg/mlから3mg/mlの濃度で存在することが可能である。好ましくは、溶液B中のすべてのペプチドは、同じ濃度で存在する。好ましくは、溶液Bは、YLSGADLNL(配列番号8)、並びにKLBPVQLWV(配列番号6)、LLTFWNPPV(配列番号4)、RLLQETELV(配列番号2)及びYLQLVFGIEV(配列番号3)からなる群から選択される1つ、2つ、3つ又は4つのペプチドを含む。最も好適な実施形態において、溶液Bは、YLSGADLNL(配列番号8)、KLBPVQLWV(配列番号6)、LLTFWNPPV(配列番号4)、RLLQETELV(配列番号2)及びYLQLVFGIEV(配列番号3)を含む。特定の実施形態において、溶液Bのペプチドは、YLSGADLNL(配列番号8)、KLBPVQLWV(配列番号6)、LLTFWNPPV(配列番号4)、RLLQETELV(配列番号2)及びYLQLVFGIEV(配列番号3)からなる。
最後に、溶液Cは、DMSO中においてKVFGSLAFVペプチド(配列番号7)を、好ましくは1mg/mlから11mg/mlの量で、より好ましくは10mg/mlから11mg/mlの量で、好ましくは35℃から40℃の間の温度において可溶化することによって調製することができる。好ましくは、溶液C中のペプチドは、5mg/mlから11mg/mlの濃度で存在することが可能である。特定の実施形態において、溶液C中のペプチドは、KVFGSLAFV(配列番号7)で構成される。
本発明の好適な実施形態によると、溶液Aは、aKXVAAWTLKAAa(配列番号1)、SMPPPGTRV(配列番号5)、IMIGHLVGV(配列番号9)及びKVAEIVHFL(配列番号10)を含み、溶液Bは、YLSGADLNL(配列番号8)、KLBPVQLWV(配列番号6)、LLTFWNPPV(配列番号4)、RLLQETELV(配列番号2)及びYLQLVFGIEV(配列番号3)を含む。
すべての上記ペプチドは、T細胞のヘルプの源として使用されるユニバーサル汎DR HTLエピトープ(universal pan-DR HTL epitope)であるPADRE以外のCEA、p53、HER-2/neu及びMAGE-2/3由来のエピトープである。
ただし、溶液A、B又はCは、追加の腫瘍関連抗原ペプチドを更に含んでもよい。
上述のとおり、溶液A、B及びCは、懸濁液を得るために組み合わされる。好適な実施形態において、溶液A、B及びCは、それぞれのペプチドに関して懸濁液中で同じ濃度を得ることを可能にする比で組み合わされる。好ましくは、溶液A、B及びCは、懸濁液を得るために2～4:3～4:1のA:B:C質量比で、より好ましくは2.9:3.6:1の質量比で組み合わされる。好ましくは、懸濁液中のそれぞれのペプチドの濃度は、0.2mg/mlから2mg/mlの間に含まれる。
好適な実施形態によると、この溶液は、懸濁液を形成する前に、2℃から8℃の間の温度に冷却され、滅菌ろ過に供される。
好ましくは、溶液Bは、その調製後8時間未満、好ましくは6時間未満、より好ましくは4時間を超えないうちに溶液A及びCと組み合わされる。
こうして得られた懸濁液のpHは、生理的なpH、したがって、約7のpHに、任意の適した手段によって調節されてもよい。ペプチド濃度は、水、生理食塩水、デキストロース水溶液又はグリセロール溶液等の適した希釈液を懸濁液に添加することによって更に調節されてもよい。
特定の実施形態において、溶液A、B及びCを混合する工程後及び/又はpHを約7に調節する工程後にろ過工程がない。
好適な実施形態において、ペプチド懸濁液を製造するための方法の各工程は、ペプチド、とりわけ、懸濁液の可溶性ペプチドを損なうと予想される酸化のあらゆるリスクを回避するよう飽和窒素条件下で行われる。
本発明はまた、本発明による方法によって調製された懸濁液を包含する滅菌容器に関する。好ましくは、滅菌容器は、ガラスバイアルである。
すぐに使えるエマルジョン
本発明は、その後、油中水型エマルジョンを得るようペプチド懸濁液をアジュバントと混合することで構成され、これは、樹状細胞へのペプチドの提示を促進すると考えられる。この種のエマルジョンでは、ペプチドを含有する水相は、油の連続相中に液滴の形態で閉じ込められ、これが、水中油型エマルジョンと比較した場合、デポーからの抗原のよりゆっくりとした放出、したがって、より強い長期免疫を可能にする。
本発明は、その後、油中水型エマルジョンを得るようペプチド懸濁液をアジュバントと混合することで構成され、これは、樹状細胞へのペプチドの提示を促進すると考えられる。この種のエマルジョンでは、ペプチドを含有する水相は、油の連続相中に液滴の形態で閉じ込められ、これが、水中油型エマルジョンと比較した場合、デポーからの抗原のよりゆっくりとした放出、したがって、より強い長期免疫を可能にする。
「アジュバント」とは、本明細書においては、ペプチドによって生じる免疫応答を高め、この免疫応答を、例えば、CTL(細胞傷害性Tリンパ球)応答に向けることができる化合物又は化合物の混合物を意味する。これらは、直接免疫系に対して作用するか、又はペプチドを免疫系に適切に送達することを可能にすることによって間接的に作用するかのいずれかの場合もある。本発明において、アジュバントは、好ましくは、炭化水素油及び油中水型乳化剤の両方を含む、油性アジュバントである。そのようなアジュバントは、いわゆる「堆積効果」によって作用する。炭化水素油は、例えば、パラフィン油、植物油、スクアレン、スクアラン又は鉱油であってもよい。適切なW/O乳化剤は、例えば、マンニドモノオレアート及びソルビタンモノオレアートから選択されてもよい。適切な油性アジュバントの例は、5～20%のマンニドモノオレアートと、80～95%の鉱油(SEPPIC社によって販売されているMontanide(登録商標)ISA 51)又はスクアレン(SEPPIC社によって販売されているMontanide(登録商標)ISA 720)の混合物及び類似の混合物である。特定の実施形態において、アジュバントは、鉱油及びマンニドモノオレアート、とりわけ、Montanide(登録商標)ISA 51の混合物である。
本発明において使用されるアジュバントは、上記油性アジュバントの代わりに、又はそれに加えて、PLG、PLA、PLGA又はその他の天然高分子、例えば、ゼラチン、コラーゲン及びキトサンのリポソーム及びマイクロスフェア等のマイクロ粒子及びナノ粒子から選択されてもよい。その他のアジュバントは、TLRリガンド、トール様受容体リガンド(TLR3及びTLR9)、IFN遺伝子刺激因子(STING)アゴニスト、GM-CSF及びIL2等のサイトカイン、炭水化物、細菌性誘導体、無機塩並びに免疫刺激複合体(ISCOM)を含んでもよい。
懸濁液及びアジュバントは、本発明に従い、低せん断条件下で、100rpmから1000rpmの回転速度で回転する混合デバイスによって混合される。例えば、回転速度は、100rpmから500rpm、好ましくは150rpmから250rpmの範囲内に含まれてもよく、とりわけ、200rpmであってもよい。「低せん断」とは、(以下に限定されるものではないが)商標名Silverson(登録商標)L4RT若しくはSilverson(登録商標)L5MとしてSILVERSON社によって販売されているもの又は商標名Ultra-Turrax(登録商標)としてIKA WERKE社によって販売されているもの等の回転子-固定子デバイスによって混合が行われないことを意味する。その後、乳化する工程は、低せん断条件下で、特に、100rpmから1000rpmの回転速度で、好ましくは2分間から20分間行われる。一実施形態において、乳化する工程は、低せん断条件下で、100rpmから1000rpmの回転速度で2分間から20分間行われる。好ましくは、混合する工程又は乳化する工程は、本発明においては、パドル型ミキサー又は軸流タービンによって行われる。例えば、ミキサーは、パドル型ミキサーが可能であり、4ピッチブレード撹拌翼、特に、水平な4ピッチブレード撹拌翼を有する。この種のデバイスは、回転子-固定子デバイスで見られるような半径流回転子ではなく、軸流撹拌翼であるミキシングヘッドを備える。したがって、一実施形態において、ミキサーは軸流撹拌翼である。別の実施形態において、ミキサーは、半径流撹拌翼である。更に、それは、穴の開いた固定子には入れられない。
好適な一実施形態において、すぐに使えるペプチドエマルジョンを製造するための方法は、高せん断を用いたいかなる乳化する工程も含まない。特に、本方法は、7000rpm、6000rpm又は5000rpmよりも高速でのいかなる乳化する工程、好ましくは、2000rpmよりも高速でのいかなる混合する工程も含まない。好ましくは、本方法は、回転子-固定子構成を有する高せん断ミキサー(Silverson(登録商標)Verso)を用いて行われるいかなる乳化する工程も含まない。
好適な一実施形態において、すぐに使えるペプチドエマルジョンを製造するための方法は、高せん断を用いたいかなる混合する工程も含まない。特に、本方法は、7000rpm、6000rpm又は5000rpmよりも高速でのいかなる混合する工程も、好ましくは、2000rpmよりも高速でのいかなる混合する工程も含まない。好ましくは、本方法は、回転子-固定子構成を有する高せん断ミキサー(Silverson(登録商標)Verso)を用いて行われるいかなる混合する工程も含まない。
好ましくは、エマルジョンを得るために、アジュバントは、ペプチド懸濁液と無菌条件下において混合される。アジュバント:懸濁液の質量比は、10:1から1:10、好ましくは5:1から1:5、より好ましくは2:1から1:2の範囲に含まれてもよく、更に好ましくは1:1である。
この混合する工程又は乳化する工程は、好ましくは、10℃から30℃、好ましくは20℃から25℃の温度において、2分間から30分間、例えば、5分間から15分間行われる。混合の継続時間は、すべてのアジュバントが混合チャンバーに添加された時点から算出され、この添加は、段階的に行われてもよいことに留意すべきである。例えば、アジュバントは、懸濁液に100rpmから1000rpm、好ましくは100rpmから500rpm、より好ましくは100rpmから200rpmの範囲の回転速度で30秒間から3分間、好ましくは1分間から2分間添加される。その後、本方法は、10℃から30℃の温度、10rpmから1000rpmの範囲の撹拌速度で30秒から3分の時間の間、アジュバントを混合チャンバー中の懸濁液に添加する工程と、10℃～30℃において、100rpmから1000rpmの速度で2分間から20分間混合する工程と、任意に、ペプチドエマルジョンの体積が5Lよりも大きい場合、ペプチドエマルジョンを回収する工程とを含んでもよい。上記混合する工程のすべて又は一部は、好ましくは、不活性雰囲気下、好ましくは、窒素下において行われる。
こうして、5Lよりも大きい、好ましくは10L以上の体積を有するすぐに使えるペプチドエマルジョンを得ることができる。これは、注射用の約8000のバイアルを調製するために使用することができる。
本発明により得られるペプチドエマルジョンは、物理的に安定である。エマルジョンの物理的安定性は、-20.5℃及び25℃で3か月保存した後の水滴サイズを測定することによって評価することができ、これは、エマルジョンを製造した直後のそのサイズと実質的に異なるべきではない。液滴のサイズは、レーザー回折によって測定されてもよい。好適な実施形態によると、エマルジョンのD50は10±2μmである。更に、エマルジョンは、同じ保存条件下において2つの層が分離してはならない。
更に、ペプチドは、化学的にも安定であり、生物学的にも安定である。「化学的に安定な」とは、とりわけ、特に酸化及び/又は脱アミド化によってペプチドが実質的に分解せず、実質的に一緒になって凝集しないことを意味することが意図される。ペプチドの化学的安定性は、室温での3か月の保存後に、下記の実施例において示されるとおりに、マススペクトロメトリーと結合した液相クロマトグラフィーによって測定されてもよい。好ましくは、エマルジョン中のそれぞれのペプチドの量は、0.1mg/mlから10mg/ml、好ましくは0.5mg/mlから1mg/mlの範囲であり、エマルジョンの調製に使用された量と10%を超えて異ならない。ペプチドの生物学的安定性は、例えば、トランスジェニックインビボ力価試験によりペプチドの免疫原性を測定することによって評価されてもよい。
したがって、本発明のすぐに使える製剤は、ワクチン製品の一貫した製造及び品質管理に対する産業規制に適合している。
エマルジョンは、製造後2℃から8℃の温度で保存されるか、又はさらには凍結され、使用する前に室温にされてもよい。このエマルジョンは、1mlから50mlの体積を有する容器中で調整されてもよい。
本発明のすぐに使えるエマルジョンの利点の1つは、このエマルジョンが、特に、エマルジョンの構造へ全く影響がないか、又は限定された影響しかなく凍結及び解凍が可能であることである。したがって、本発明は、凍結及び解凍に適した、すなわち、エマルジョンを維持又は保護しながらの凍結及び解凍に適した本発明によるすぐに使えるエマルジョンに関する。
エマルジョンは、使用されるペプチドに対応するすべてのエピトープに対するTリンパ球応答を誘発するために、すぐに使えるワクチンとして非経口投与されてもよい。このワクチンは、さまざまながんの処置に使用することができる。がんはまた、肺がん、例えば、NSCLC(非小細胞肺がん)及び小細胞肺がん、メラノーマ、中皮腫、乳がん、原発性脳がん、脳転移がん、卵巣がん、子宮がん、とりわけ、子宮体がん及び/又は子宮頸がん、頭頸部がん、結腸がん、結腸直腸がん、胃腸がん、腎がん、肉腫、胚細胞腫瘍、白血病、リンパ腫、精巣がん、膵がん並びに膀胱がんから選択されてもよい。とりわけ、がんは、とりわけ、ステージIIIB若しくはIVの人及び/又はHLA-A2レセプターを発現する人の結腸がん及び非小細胞肺がん(NSCLC)が可能である。或いは、がんはまた、膵がん、膀胱がん又はペプチドによって標的とされる腫瘍抗原、とりわけCEA、p53、HER-2/neu、MAGE-2及びMAGE-3を発現したがんから選択されてもよい。本発明により調製されたエマルジョンによる処置に対して応答する患者は、RT-PCR等のさまざまな方法により血液サンプルにおいて測定されたHLA-2バイオマーカーによって特定することができる。
すぐに使える製品は、がんを処置するために単独で、又は別の療法、特に、化学療法、標的療法若しくはチェックポイント阻害剤等のその他の免疫療法と組み合わせて使用することができる。
例えば、化学療法は、シスプラチン、カルボプラチン、シクロホスファミド、エトポシド、テニポシド、マイトマイシン、イリノテカン、ビノレルビン、エトポシド、イホスファミド、テモゾロミド、フルオロウラシル(5FU)、ドセタキセル、ペメトレキセド、ナベルビン、腫瘍血管増殖(VEGF)を標的とする薬物、例えば、ベバシズマブ、ラムシルマブ;プレドニゾン;EGFRを標的とするチロシンキナーゼ阻害剤、例えば、ゲフィチニブ、エルロチニブ、アファチニブ;ALK阻害剤、例えば、クリゾチニブ;セリチニブ及び任意のそれらの組合せのうちから選択することができる。
好適な実施形態において、本発明のすぐに使えるワクチンは、チェックポイント阻害剤、とりわけ、CTLA-4阻害剤及び/又はPD-1若しくはPD-L1阻害剤;IDO阻害剤と組み合わせて使用される。チェックポイント阻害剤による処置は、本明細書中で開示されているすぐに使えるワクチンによる処置の前、それと同時に又はその後に行うことができる。
本発明は、(a)治療有効量の本明細書において開示されているすぐに使えるワクチンと、(b)チェックポイント阻害剤、好ましくはCTLA-4阻害剤及び/又はPD-1若しくはPD-L1阻害剤とを、特に、がんの処置に同時に、別々に、又は連続して使用するための組み合わされた調製物として含むキット或いは製品に関する。
好適な実施形態において、チェックポイント阻害剤による処置は、本明細書において開示されているすぐに使えるワクチンによる処置の後に行われる。
いくつかのPD-1/PD-L1阻害剤は、すでに入手可能であるか、又は臨床開発中である。例えば、PD-1/PD-L1阻害剤は、ペンブロリズマブ(Merk社)、ニボルマブ(Bristol Myers Squibb社)、ピジリズマブ(pidilizumab)(Cure Tech社)、BMS936559(Bristol Myers Squibb社)、MEDI4736(Astra Zeneca社)、AMP-224(Astra Zeneca社)、AMP-514(Astra Zeneca社)、MPDL328OA(Roche社)、アベルマブ(Merck KgA Serono/Pfizer社からのMSB0010718Cとしても知られている)を含む非網羅的な一覧のうちから選択することができる。例えば、PD-1/PD-L1阻害剤は、WO2013/079174において開示されているもののうちから選択することができる。
例えば、CTLA-4阻害剤は、トレメリムマブ(Pfizer Medimmune社)及びイピリムマブ(BMS社)を含む非網羅的な一覧のうちから選択することができる。
必要に応じて調製されるエマルジョン
本発明はまた、本発明による懸濁液の調製に続く、前記懸濁液の油中水型乳化剤との混合を含む、非経口投与用のエマルジョンを調製するためのプロセスに関する。
本発明はまた、本発明による懸濁液の調製に続く、前記懸濁液の油中水型乳化剤との混合を含む、非経口投与用のエマルジョンを調製するためのプロセスに関する。
本発明は、更に本発明による方法によって調製された懸濁液を包含する滅菌容器と、油中水型乳化剤を包含するバイアル等の容器と、任意にコネクターとを含む、キットに関する。適した乳化剤の例は、上で開示されているとおりであり、好ましくは、マンニドモノオレアート、ソルビタンモノオレアート及び5～20%のマンニドモノオレアート又はソルビタンモノオレアートと80～95%の鉱油(不完全フロイントアジュバント、Montanide(登録商標)ISA 51及びNH2エマルジョン)又はスクアレン(Montanide(登録商標)ISA 720)の混合物からなるアジュバントから選択される。好適な実施形態において、乳化剤は、マンニドモノオレアート(例えば、Montanide(登録商標)ISA 51)を含む。キットは、コネクターを更に含んでもよい。
上記のとおりに得られた懸濁液は、その後、油中水型エマルジョンを得るように油中水型乳化剤と混合されてもよく、これが、樹状細胞へのペプチドの提示を促進すると考えられる。この種のエマルジョンでは、ペプチドを含有する水相は、油の連続相中に液滴の形態で閉じ込められ、これが、水中油型エマルジョンと比較した場合、デポーからの抗原のよりゆっくりとした放出、したがって、より強い長期免疫を可能にする。そのような乳化剤の例は、マンニドモノオレアート、ソルビタンモノオレアート及び5～20%のマンニドモノオレアート又はソルビタンモノオレアートと80～95%の鉱油(不完全フロイントアジュバント、Montanide(登録商標)ISA 51及びNH2エマルジョン)又はスクアレン(Montanide(登録商標)ISA 720)の混合物からなるアジュバントである。本発明の好適な実施形態によると、乳化剤は、マンニドモノオレアート(8～12%)と鉱油(88～92%)の混合物であり、これは、SEPPIC社から商標名Montanide(登録商標)ISA 51として入手することができる。特に、弱い免疫源の場合に、鉱油が部分的にだけ代謝され、これが、それに非鉱油ベースのアジュバントよりも効率的に免疫応答を誘導させると考えられる。通常、エマルジョンを得るために、無菌条件下において、1体積の任意の上記の乳化剤が1体積のペプチド懸濁液と混合される。
得られるエマルジョンは、患者の処置の直前に必要に応じて調製される「ベッドサイド」製剤であってもよい。更に具体的には、エマルジョンは、エマルジョンを含有するシリンジ及び乳化剤を含有する別のシリンジに連結されたコネクターを使用して、以下の確認されたプロセスに従って、必要に応じて調製することができる:20回のゆっくりとしたサイクル(1サイクルあたり9s～180s)後の40回の速いサイクル(20s)。乳化剤及び懸濁液は、好ましくは、室温より低い温度で保存され、混合の直前に室温にされる。得られたエマルジョンは、エマルジョンの調製から8時間以内、好ましくは、4時間以内に患者に注射してもよい。
エマルジョンは、非経口投与され、使用されるペプチドに対応するすべてのエピトープに対するTリンパ球応答を誘発するためのワクチンとして使用することができる。このワクチンは、さまざまながん、とりわけ、ステージIIIB若しくはIVである人及び/又はHLA-A2レセプターを発現する人の、とりわけ、結腸がん及び非小細胞肺がん(NSCLC)の処置に使用することができる。がんはまた、膵がん、膀胱がん又はペプチドによって標的とされる腫瘍抗原、とりわけ、CEA、p53、HER-2/neu、MAGE-2及びMAGE-3を発現したがんから選択することができる。すぐに使える製品は、特に、上で開示されているとおり、がんを処置するために単独で、又は別の療法、特に、化学療法、標的療法若しくはチェックポイント阻害剤等のその他の免疫療法と組み合わせて使用することができる。
本発明は、以下の実施例を考慮すると更に良好に理解されると予想される。実施例は、説明のためだけに提供するものであり、本発明の範囲を限定する意図はなく、本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲によってのみ画定される。
(実施例1)
本発明による懸濁液の調製
標準的なBoc又はFmoc固相化学を使用してPolyPeptide社(サンディエゴ、CA)によって以下の10個のペプチドが合成された。
aKXVAAWTLKAAa(配列番号1)=MPS-7、
SMPPPGTRV(配列番号5)=MPS-103、
IMIGHLVGV(配列番号9)=MPS-214、
KVAEIVHFL(配列番号10)=MPS-215、
YLSGADLNL(配列番号8)=MPS-200、
KLBPVQLWV(配列番号6)=MPS-102、
LLTFWNPPV(配列番号4)=MPS-213、
RLLQETELV(配列番号2)=MPS-112、
YLQLVFGIEV(配列番号3)=MPS-106、及び
KVFGSLAFV(配列番号7)=MPS-216。
本発明による懸濁液の調製
標準的なBoc又はFmoc固相化学を使用してPolyPeptide社(サンディエゴ、CA)によって以下の10個のペプチドが合成された。
aKXVAAWTLKAAa(配列番号1)=MPS-7、
SMPPPGTRV(配列番号5)=MPS-103、
IMIGHLVGV(配列番号9)=MPS-214、
KVAEIVHFL(配列番号10)=MPS-215、
YLSGADLNL(配列番号8)=MPS-200、
KLBPVQLWV(配列番号6)=MPS-102、
LLTFWNPPV(配列番号4)=MPS-213、
RLLQETELV(配列番号2)=MPS-112、
YLQLVFGIEV(配列番号3)=MPS-106、及び
KVFGSLAFV(配列番号7)=MPS-216。
これらのペプチドをHPLCによって精製し、その正体をマススペクトロメトリーによって検証した。
Table 1(表1)に記載されるとおりに3つの溶液を調製した。
溶液1及び溶液2は、室温で、ボルテックス撹拌及び/又は超音波処理を数分間使用して調製した一方で、溶液3は、37℃の加熱下でボルテックス撹拌を使用して調製した。これらの溶液を、その後、それらの工業的製造プロセスにおいて起こりうる保持時間の間のそれらの分解を評価するために2℃～8℃で最大4時間保存した。
それらの分解は、UV検出及びマススペクトロメトリーと結合された液体クロマトグラフィーによって評価した。行われた分析の結果の概要をTable 2(表2)に示す。
上記溶液をこのように2℃～8℃において4時間未満保存した後、滅菌ろ過し、2.9:3.6:1のA:B:Cの質量比で一緒に混合して、懸濁液を得、そのpHを、そこに0.2mlの62.5mMリン酸ナトリウム溶液及び0.5M NaOH溶液を添加することによって7に調節した。
懸濁液を滅菌バイアルにおいて-20℃で保存した。
(実施例2)
比較実験
水酸化ナトリウムの量を(WO2004/094454に記載されている)0.10Mから0.013Mに変動させたことを除いて実施例1に記載されている溶液2と同一のペプチド溶液を調製した。
比較実験
水酸化ナトリウムの量を(WO2004/094454に記載されている)0.10Mから0.013Mに変動させたことを除いて実施例1に記載されている溶液2と同一のペプチド溶液を調製した。
2℃～8℃における2時間の保存後の分解を防ぎながらペプチドを可溶化するこれらの媒体の能力を評価した。その結果の概要をTable 3(表3)に示す。
この表から、12.4以下のpHはペプチドの適切に可溶化できない一方で、13以上のpHはペプチドのうちの1つの分解をもたらすことを導き出すことができる。形成された分解生成物を特定するために質量分析を行った。Asn又はGlnの側鎖がそれぞれAsp及びGluに加水分解されたことがわかった。
この実験は、溶液2のpHが12.5～12.9に調節されるべきであることを示す。
(実施例3)
懸濁液の安定性
以下に示されるとおり、ペプチド凝集の可能性を評価するためにさらなる試験を設定した。この方法は、ペプチド凝集を監視することができ、高感度で特異的で正確である。製造の間又は保存の間に起こる可能性のある構造的及び質量の改変又は変形を監視するのに適していた。液体クロマトグラフィー質量分析(LC-UV/MS)は、ペプチドの正体及びペプチド間の共有結合の不在を確実にするために行った。この方法は、いくらかのペプチド沈殿物が存在しているにもかかわらず、ペプチド間の凝集がないことを確認するために開発された。この目的は、さまざまな条件、-20℃、+5℃及び+25℃における9か月の保存の間に実施例1の懸濁液中に含まれるペプチド間にいくらか共有結合が構築され得るかを判断することであった。
懸濁液の安定性
以下に示されるとおり、ペプチド凝集の可能性を評価するためにさらなる試験を設定した。この方法は、ペプチド凝集を監視することができ、高感度で特異的で正確である。製造の間又は保存の間に起こる可能性のある構造的及び質量の改変又は変形を監視するのに適していた。液体クロマトグラフィー質量分析(LC-UV/MS)は、ペプチドの正体及びペプチド間の共有結合の不在を確実にするために行った。この方法は、いくらかのペプチド沈殿物が存在しているにもかかわらず、ペプチド間の凝集がないことを確認するために開発された。この目的は、さまざまな条件、-20℃、+5℃及び+25℃における9か月の保存の間に実施例1の懸濁液中に含まれるペプチド間にいくらか共有結合が構築され得るかを判断することであった。
それぞれのペプチドは、UVスペクトルの保持時間によって及び質量によって特定した。
クロマトグラフィー条件
カラム:Advance BioペプチドマッピングLCカラム、2.1×250mm、2.7μm、C18、120Å、Agilent参照番号651750-902
検出:215nm及び280nm
流量:0.3ml/分
注入量:5μl
ランタイム:100分
カラム温度:35℃±2℃
サンプル温度:5℃
ニードル洗浄:ジメチルスルホキシド(DMSO)中の0.1%トリフルオロ酢酸(TFA)
移動相:溶離液A:5%アセトニトリル中の0.2% TFA
溶離液B:95%アセトニトリル中の0.2% TFA
カラム:Advance BioペプチドマッピングLCカラム、2.1×250mm、2.7μm、C18、120Å、Agilent参照番号651750-902
検出:215nm及び280nm
流量:0.3ml/分
注入量:5μl
ランタイム:100分
カラム温度:35℃±2℃
サンプル温度:5℃
ニードル洗浄:ジメチルスルホキシド(DMSO)中の0.1%トリフルオロ酢酸(TFA)
移動相:溶離液A:5%アセトニトリル中の0.2% TFA
溶離液B:95%アセトニトリル中の0.2% TFA
サンプル溶液の調製
実施例1の懸濁液を含有する1バイアル(約1ml)の中身を10mlのメスフラスコに移し、DMSO中の0.1% TFAにより満杯にする。正確なサンプル質量を求めるためにサンプル採取の前後にバイアルを計量する。
実施例1の懸濁液を含有する1バイアル(約1ml)の中身を10mlのメスフラスコに移し、DMSO中の0.1% TFAにより満杯にする。正確なサンプル質量を求めるためにサンプル採取の前後にバイアルを計量する。
実施例1の懸濁液を液体クロマトグラフィー/質量分析(LC/MS)法によって分析した。
得られた結果は、すべての保存条件で、すべてのペプチドが検出されることを示している。どの保存条件でもクロマトグラム間に有意差はない。相対UVピーク面積は変化しなかった。MSフルスキャンでは、共有結合性凝集体に対応すると予想される高分子量の起こりうる質量を含むさらなる質量は検出されなかった。これは、こうした3か月の保存の間にペプチド間に共有結合が構築されなかったことを意味する。
この分析の結果は、懸濁液中においてペプチド間に、その後に化学的凝集を招くと予想される共有結合が観察されなかったことである。
3つの保存条件(-20℃、+5℃及び+25℃)における3か月後に、観察された保持時間及び分子量(MW)は、厳密に活性成分ペプチドに対応し、依然としてバッチ放出時に判定される規定レベル内に留まっている。この結果は、凝集の不在並びに製造及び保存の過程において懸濁液中でペプチド間の共有結合が生じないことを示す。
(実施例4)
本発明による必要に応じて調製されるW/Oエマルジョンの調製
注射可能な臨床上の生成物を調製するために、実施例1の懸濁液を、油中水型乳化混合物(SEPPIC社から供給されたMontanide(登録商標)ISA 51、バイアル中で暗所において2℃～8℃で保存された)と1:1の質量比で混合することによって油中水型エマルジョンを形成し、これは、0.9mlのペプチド懸濁液及び1.1mlの乳化剤に相当する。特に、懸濁液及び乳化剤は、混合する直前に室温にし、それぞれシリンジに移した。エマルジョンを、これらのシリンジに連結されたプラスチックコネクターによって必要に応じて調製した。シリンジのプランジャーを交互にゆっくりとそれぞれ20回、その後、高速でそれぞれ40回押した。任意のシリンジから、1mlのこのエマルジョンを皮下経由で患者に注射することができる。
本発明による必要に応じて調製されるW/Oエマルジョンの調製
注射可能な臨床上の生成物を調製するために、実施例1の懸濁液を、油中水型乳化混合物(SEPPIC社から供給されたMontanide(登録商標)ISA 51、バイアル中で暗所において2℃～8℃で保存された)と1:1の質量比で混合することによって油中水型エマルジョンを形成し、これは、0.9mlのペプチド懸濁液及び1.1mlの乳化剤に相当する。特に、懸濁液及び乳化剤は、混合する直前に室温にし、それぞれシリンジに移した。エマルジョンを、これらのシリンジに連結されたプラスチックコネクターによって必要に応じて調製した。シリンジのプランジャーを交互にゆっくりとそれぞれ20回、その後、高速でそれぞれ40回押した。任意のシリンジから、1mlのこのエマルジョンを皮下経由で患者に注射することができる。
(実施例5)
本発明によるすぐに使えるW/Oエマルジョンの調製
注射可能な臨床上の送達生成物を調製するために、実施例1の懸濁液を、油性アジュバント(SEPPIC社から供給されたMontanide(登録商標)ISA 51)と1:1の質量比で混合することによって油中水型エマルジョンを形成した。エマルジョンを調製するために、実行中に不活性ガスブランケットをもたらすよう、デバイスのミキサーバッグをまず窒素で膨らませた。5200gの乳化剤をろ過した後、無菌条件下において、軸流タービンを備えるAllegro(登録商標)ミキサーの混合チャンバーに移した。撹拌翼の回転速度を200rpmにセットした後、無菌条件下において、5200gの上記の懸濁液をゆっくりと(1分～2分以内に)混合チャンバーに添加した。撹拌を5分間続けた。
本発明によるすぐに使えるW/Oエマルジョンの調製
注射可能な臨床上の送達生成物を調製するために、実施例1の懸濁液を、油性アジュバント(SEPPIC社から供給されたMontanide(登録商標)ISA 51)と1:1の質量比で混合することによって油中水型エマルジョンを形成した。エマルジョンを調製するために、実行中に不活性ガスブランケットをもたらすよう、デバイスのミキサーバッグをまず窒素で膨らませた。5200gの乳化剤をろ過した後、無菌条件下において、軸流タービンを備えるAllegro(登録商標)ミキサーの混合チャンバーに移した。撹拌翼の回転速度を200rpmにセットした後、無菌条件下において、5200gの上記の懸濁液をゆっくりと(1分～2分以内に)混合チャンバーに添加した。撹拌を5分間続けた。
目に見える粒子がない白色のエマルジョンを得、それは280mPa.sの粘度を有し、26Gaの針を通って1mLのシリンジから容易に移動させることができた。
(実施例6)
さまざまな撹拌時間を使用したエマルジョンの調製
本発明によるエマルジョンを、さまざまな撹拌時間を使用して実施例5に記載されているとおりに調製した。各種ペプチドの最初の濃度を下の表に報告する。
さまざまな撹拌時間を使用したエマルジョンの調製
本発明によるエマルジョンを、さまざまな撹拌時間を使用して実施例5に記載されているとおりに調製した。各種ペプチドの最初の濃度を下の表に報告する。
上記表から、各種ペプチドの濃度が、どの撹拌時間でも0.49mg/ml～0.59mg/mlの範囲内に留まっていることを導き出すことができる。エマルジョンは、このように、わずか5分間の短い撹拌時間を使用して調製することができる。
(実施例7)
エマルジョンの化学的安定性
実施例5に従って調製したエマルジョンに含まれるペプチドの化学的安定性を以下の方法によって評価する。
エマルジョンの化学的安定性
実施例5に従って調製したエマルジョンに含まれるペプチドの化学的安定性を以下の方法によって評価する。
実施例5の0.9gのエマルジョンのサンプルを正確に計量し、5mLのメスフラスコを満たすようにDMSO中の0.1% TFAと混合する。その混合物を、その後、2分間ボルテックスし、4000rpmで7分間遠心分離する。その後、下層を、以下のクロマトグラフィー条件を使用して液体クロマトグラフィー/質量分析(LC/MS)によって分析する。
カラム:Advance BioペプチドマッピングLCカラム、2.1×250mm、2.7μm、C18、120Å、Agilent(登録商標)参照番号651750-902又は同等物
検出:215nm及び280nm
流量:0.3ml/分
注入量:5μl
ランタイム:100分
カラム温度:35℃±2℃
サンプル温度:5℃
ニードル洗浄:ジメチルスルホキシド(DMSO)中の0.1%トリフルオロ酢酸(TFA)
移動相:溶離液A:5%アセトニトリル中の0.2% TFA
溶離液B:95%アセトニトリル中の0.2% TFA
カラム:Advance BioペプチドマッピングLCカラム、2.1×250mm、2.7μm、C18、120Å、Agilent(登録商標)参照番号651750-902又は同等物
検出:215nm及び280nm
流量:0.3ml/分
注入量:5μl
ランタイム:100分
カラム温度:35℃±2℃
サンプル温度:5℃
ニードル洗浄:ジメチルスルホキシド(DMSO)中の0.1%トリフルオロ酢酸(TFA)
移動相:溶離液A:5%アセトニトリル中の0.2% TFA
溶離液B:95%アセトニトリル中の0.2% TFA
実施例1に記載されている0.9mLのバッチ懸濁液を1.1mLのMontanide ISA 51とともに10.0mLのメスフラスコに移した後、上記のとおりその混合物をボルテックスし、遠心分離することによって標準溶液を調製する。このように得た下層を上と同じ条件で分析する。
それぞれのペプチドの濃度を、下記式を使用してmg/g単位で表す:
濃度(mg/g)=A/S×0.9X/10×5×1/W
式中、
A:サンプル溶液中のそれぞれのペプチドのピーク面積である
S:標準溶液中のそれぞれのペプチドのピーク面積である
W:g単位で表されるサンプル質量である
濃度(mg/g)=A/S×0.9X/10×5×1/W
式中、
A:サンプル溶液中のそれぞれのペプチドのピーク面積である
S:標準溶液中のそれぞれのペプチドのピーク面積である
W:g単位で表されるサンプル質量である
さまざまな条件下において保存した実施例5のエマルジョンのサンプルに対して得られた結果は、すべての保存条件において、すべてのペプチドがクロマトグラム間で有意差なく検出されることを示しており、これは、エマルジョン中でペプチド間の共有結合が観察されないことを意味する。更に、相対UVピーク面積は変化しない。MSフルスキャンは、高分子量の起こりうる質量を含むさらなる質量を検出していない。これは、これらのさまざまな保存条件下においてペプチド間に共有結合又は凝集体が構築されないことを意味する。
特に、3つの保存条件(-20℃、+5℃及び+25℃)における1か月後に、観察された保持時間及び分子量(MW)は活性成分ペプチドに対応し、バッチ放出時に判定される規定レベル内に留まっており、下に示すとおり±10%である。
(実施例8)
エマルジョンの物理的安定性
実施例5に記載されているとおりに調製したエマルジョンのさまざまなサンプルの液滴のサイズを、粒度計(Malvernマスターサイザー3000E光学システム)を使用したレーザー回折によって測定した。これらのサンプルを、ミキサーのさまざまな領域から回収した。その結果を、最大サイズの液滴のx%、すなわちDxとして表した。それらの概要を下記表に示す。
エマルジョンの物理的安定性
実施例5に記載されているとおりに調製したエマルジョンのさまざまなサンプルの液滴のサイズを、粒度計(Malvernマスターサイザー3000E光学システム)を使用したレーザー回折によって測定した。これらのサンプルを、ミキサーのさまざまな領域から回収した。その結果を、最大サイズの液滴のx%、すなわちDxとして表した。それらの概要を下記表に示す。
この実験は、液滴のサイズが約10μmのD50でミキサー全体にわたって均一であることを示している。
液滴のサイズの変化をさまざまな条件下における1か月の保存後に測定した。下記表に示されるとおり、液滴のサイズは、実質的に一定のままであった。
(実施例9)
免疫原性
一部のペプチドは、実施例1に記載されているとおりに調製した懸濁液中で部分的に又は完全に沈殿すると確認した。
MPS-216 KVFGSLAFV(配列番号7)(33%の溶解度)
MPS-215 KVAEIVHFL(56%の溶解度)
MPS-106 YLQLVFGIEV(0%の溶解度)
免疫原性
一部のペプチドは、実施例1に記載されているとおりに調製した懸濁液中で部分的に又は完全に沈殿すると確認した。
MPS-216 KVFGSLAFV(配列番号7)(33%の溶解度)
MPS-215 KVAEIVHFL(56%の溶解度)
MPS-106 YLQLVFGIEV(0%の溶解度)
十分に可溶性でない状態又は不溶性の状態でも組合せに入る各ペプチドの免疫原性を、インビボでHLA A2.1/kトランスジェニックマウスにおいて試験した。
エリスポットアッセイによるCTL(細胞傷害性Tリンパ球)及びHLT(ヘルパーTリンパ球)誘導を行い、IFNガンマ産生を測定する。スポットは、コンピュータ支援の分析製品によって計数した。
正味のスポット/106個のCD8+細胞(CTL)又はCD4+細胞(HTL)を(関連するペプチドに対するスポットの数)-(関連のないペプチドを含むスポットの数)×2.5として算出した。
6回の独立した実験から蓄積したデータは、組合せがCTL応答の誘導を伴う免疫原性であることを実証した。
観察された範囲は、MPS 214等の極めて可溶性のペプチドに対して50から200標準単位であった。
予想外にも、3つの十分に可溶性でないペプチドでも同じ応答の範囲(50から200SU)が観察された[56%の溶解度のMPS-215(KVAEIVHFL);33%の溶解度のMPS-216(KVFGSLAFV(配列番号7));0%の溶解度のMPS-106(YLQLVFGIEV)]。
新規のエマルジョン中の可溶性のエピトープ、不溶性のエピトープ又は十分に可溶性でないエピトープは、強いCTL応答を誘導することができた。最終的なエマルジョン中における十分に可溶性でないペプチドの溶解度の状態は、HLA A2トランスジェニックモデルにおけるインビボでの免疫原性の特性に影響を及ぼさない。
(実施例10)
比較実験
混合が回転子-固定子構成を有する高せん断ミキサー(Silverson(登録商標)Verso)によって行われたことを除いて、実施例1に記載されているとおりに調製した懸濁液を同じアジュバントと同じ比で混合した。2000rpm及び8000rpmの撹拌速度は、それぞれ15分間及び2分間を使用した。非常に粘稠なクリームが得られ、これは、注射可能な製品として使用することができなかった。5000rpm及び8000rpmで同じミキサーを用いて得た他のバッチはペプチド分解を引き起こしていた。特に、4℃における6週間の保存後にペプチドSMPPPGTRV(配列番号5)の8.5%の酸化が認められ、-20℃でも依然として2%の酸化が認められた。更に、ペプチドIMIGHLVGV(配列番号9)に関しては、4℃における6週間の保存後に16.5%の酸化が認められ、-20℃でも依然として4%の酸化が認められた。
比較実験
混合が回転子-固定子構成を有する高せん断ミキサー(Silverson(登録商標)Verso)によって行われたことを除いて、実施例1に記載されているとおりに調製した懸濁液を同じアジュバントと同じ比で混合した。2000rpm及び8000rpmの撹拌速度は、それぞれ15分間及び2分間を使用した。非常に粘稠なクリームが得られ、これは、注射可能な製品として使用することができなかった。5000rpm及び8000rpmで同じミキサーを用いて得た他のバッチはペプチド分解を引き起こしていた。特に、4℃における6週間の保存後にペプチドSMPPPGTRV(配列番号5)の8.5%の酸化が認められ、-20℃でも依然として2%の酸化が認められた。更に、ペプチドIMIGHLVGV(配列番号9)に関しては、4℃における6週間の保存後に16.5%の酸化が認められ、-20℃でも依然として4%の酸化が認められた。
この実験は、高せん断ミキサーでは安定なペプチドの送達のための注射可能なエマルジョンの調製ができないことを示す。
Claims (15)
- すぐに使えるペプチドエマルジョンを工業規模で製造するための方法であって、少なくとも2つのペプチドの懸濁液を、低せん断条件下で、100rpmから1000rpmの間の回転速度で2分間から20分間、炭化水素油と油中水型乳化剤の混合物からなる、少なくとも1つのアジュバントと乳化する工程を含む、方法。
- 前記ペプチドが、少なくとも1つの可溶性ペプチド及び少なくとも1つの不溶性ペプチドを含むことを特徴とする、請求項1に記載の方法。
- 前記ペプチドが、ペプチドKVFGSLAFV(配列番号7)、ペプチドYLSGADLNL(配列番号8)、ペプチドKLBPVQLWV(配列番号6)（Bはα-アミノイソ酪酸を表す）、ペプチドSMPPPGTRV(配列番号5)、ペプチドIMIGHLVGV(配列番号9)、ペプチドLLTFWNPPV(配列番号4)、ペプチドRLLQETELV(配列番号2)、ペプチドaKXVAAWTLKAAa(配列番号1)（X及びaはそれぞれシクロヘキシルアラニン及びd-アラニンを表す）、ペプチドYLQLVFGIEV(配列番号3)並びにペプチドKVAEIVHFL(配列番号10)からなる群から選択されることを特徴とする、請求項1又は2に記載の方法。
- 前記懸濁液が、ペプチドKVFGSLAFV(配列番号7)、ペプチドYLSGADLNL(配列番号8)、ペプチドKLBPVQLWV(配列番号6)、ペプチドSMPPPGTRV(配列番号5)、ペプチドIMIGHLVGV(配列番号9)、ペプチドLLTFWNPPV(配列番号4)、ペプチドRLLQETELV(配列番号2)、ペプチドaKXVAAWTLKAAa(配列番号1)（X及びaはそれぞれシクロヘキシルアラニン及びd-アラニンを表す）、ペプチドYLQLVFGIEV(配列番号3)並びにペプチドKVAEIVHFL(配列番号10)の組合せを含むことを特徴とする、請求項3に記載の方法。
- 前記炭化水素油が、パラフィン油、植物油、スクアレン、スクアラン又は鉱油から選択され、前記油中水型乳化剤が、マンニドモノオレアート及びソルビタンモノオレアートから選択されることを特徴とする、請求項1から4のいずれか一項に記載の方法。
- 前記アジュバントと前記ペプチド懸濁液との質量比は、10:1から1:10、好ましくは5:1から1:5、より好ましくは2:1から1:2の範囲であり、更に好ましくは1:1であることを特徴とする、請求項1～5のいずれか一項に記載の方法。
- 混合する工程のすべて又は一部が、不活性雰囲気下、好ましくは窒素下において行われることを特徴とする、請求項1から6のいずれか一項に記載の方法。
- 前記エマルジョンの体積が、5Lよりも大きい、好ましくは10L以上であることを特徴とする、請求項1から7のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ペプチド懸濁液が、
a)少なくとも3つの異なる溶液A、B及びCを準備する工程であって、
・溶液Aが、酸性の水性媒体であり、ペプチドaKXVAAWTLKAAa(配列番号1)（X及びaはそれぞれシクロヘキシルアラニン及びd-アラニンを表す）を含み、
・溶液Bが、任意のペプチドを添加する前のpHが12.5から12.9の間である塩基性の水性媒体であり、ペプチドYLSGADLNL(配列番号8)を含み、
・溶液Cが、DMSOであり、ペプチドKVFGSLAFV(配列番号7)を含み、
・溶液A及び/又は溶液Bが、KLBPVQLWV(配列番号6)（Bはα-アミノイソ酪酸を表す）、SMPPPGTRV(配列番号5)、IMIGHLVGV(配列番号9)、LLTFWNPPV(配列番号4)、KVAEIVHFL(配列番号10)、RLLQETELV(配列番号2)及びYLQLVFGIEV(配列番号3)から選択される少なくとも3つの追加のペプチドを更に含む、工程と、
b)前記溶液を混合して懸濁液を形成する工程と、
c)前記懸濁液のpHを約7に調節する工程と
を含む方法によって調製されることを特徴とする、請求項1から8のいずれか一項に記載の方法。 - 前記溶液Aが、aKXVAAWTLKAAa(配列番号1)、SMPPPGTRV(配列番号5)、IMIGHLVGV(配列番号9)及びKVAEIVHFL(配列番号10)を含み、前記溶液Bが、YLSGADLNL(配列番号8)、KLBPVQLWV(配列番号6)、LLTFWNPPV(配列番号4)、RLLQETELV(配列番号2)及びYLQLVFGIEV(配列番号3)を含む、請求項9に記載の方法。
- 請求項1から10のいずれか一項に記載の方法により得ることが可能なすぐに使えるエマルジョンであって、前記エマルジョンが、ペプチドKVFGSLAFV(配列番号7)、ペプチドYLSGADLNL(配列番号8)、ペプチドKLBPVQLWV(配列番号6)、ペプチドSMPPPGTRV(配列番号5)、ペプチドIMIGHLVGV(配列番号9)、ペプチドLLTFWNPPV(配列番号4)、ペプチドRLLQETELV(配列番号2)、ペプチドaKXVAAWTLKAAa(配列番号1)（X及びaはそれぞれシクロヘキシルアラニン及びd-アラニンを表す）、ペプチドYLQLVFGIEV(配列番号3)並びにペプチドKVAEIVHFL(配列番号10)の組合せを含み、前記エマルジョンのD50が10±2μmであることを特徴とする、すぐに使えるエマルジョン。
- 前記エマルジョン中のそれぞれのペプチドの量が、0.1mg/mlから10mg/ml、好ましくは0.5mg/mlから1mg/mlの範囲であり、前記エマルジョンの調製に使用された量と10%より大きく異ならないことを特徴とする、請求項11に記載のすぐに使えるエマルジョン。
- 単独で、又は化学療法、標的療法、放射線療法若しくはその他の免疫療法と組み合わせて、がんの処置において使用するための、請求項11又は12に記載のすぐに使えるエマルジョン。
- 前記その他の免疫療法が、チェックポイント阻害剤である、請求項13に記載のすぐに使えるエマルジョン。
- HLA-A2レセプターを発現する患者における、がんの処置において使用するための、請求項13に記載のすぐに使えるエマルジョン。
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| TWI610939B (zh) | 2007-02-21 | 2018-01-11 | 腫瘤療法 科學股份有限公司 | 表現腫瘤相關抗原之癌症的胜肽疫苗 |
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| US20110104101A1 (en) | 2008-03-06 | 2011-05-05 | University Of Medicine And Dentistry Of New Jersey | Immunotherapy for Unresectable Pancreatic Cancer |
| RU2532105C2 (ru) | 2008-10-22 | 2014-10-27 | Онкотерапи Сайенс, Инк. | Эпитопные пептиды rab6kifl/kif20a и содержащие их вакцины |
| TWI507204B (zh) | 2009-05-26 | 2015-11-11 | Oncotherapy Science Inc | Ｃｄｃ４５ｌ胜肽與含此胜肽之疫苗 |
| TW201124530A (en) | 2009-12-01 | 2011-07-16 | Oncotherapy Science Inc | IMP-3 oligopeptides and vaccines including the same |
| SG10201501857YA (en) | 2010-03-11 | 2015-05-28 | Oncotherapy Science Inc | Hjurp Peptides And Vaccines Including The Same |
| TW201216982A (en) | 2010-10-21 | 2012-05-01 | Oncotherapy Science Inc | WDHD1 peptides and vaccines including the same |
| AU2011319353A1 (en) | 2010-10-21 | 2013-06-13 | Oncotherapy Science, Inc. | C18orf54 peptides and vaccines including the same |
| UA110119C2 (xx) | 2010-12-02 | 2015-11-25 | Пептиди tomm34 та вакцини, що їх містять | |
| TW201302800A (zh) | 2011-06-10 | 2013-01-16 | Oncotherapy Science Inc | Ｓｅｍａ５ｂ胜肽及含其之疫苗 |
| CA2842887C (en) | 2011-08-12 | 2021-01-19 | Oncotherapy Science, Inc. | Mphosph1 peptides and vaccines including the same |
| MX355759B (es) | 2011-10-28 | 2018-04-27 | Oncotherapy Science Inc | Peptidos topk y vacunas que incluyen los mismos. |
| SI2785375T1 (sl) | 2011-11-28 | 2020-11-30 | Merck Patent Gmbh | Protitelesa proti PD-L1 in uporabe le-teh |
| MX362912B (es) | 2012-09-11 | 2019-02-22 | Oncotherapy Science Inc | Péptidos ube2t y vacunas que incluyen los mismos. |
| WO2014047085A2 (en) | 2012-09-20 | 2014-03-27 | Rongfu Wang | Prostate-specific tumor antigen and uses thereof |
| WO2014127276A1 (en) | 2013-02-14 | 2014-08-21 | Immunocellular Therapeutics, Ltd. | Ovarian cancer vaccines and vaccination methods |
| WO2014136453A1 (en) | 2013-03-08 | 2014-09-12 | Oncotherapy Science, Inc. | C12orf48 PEPTIDES AND VACCINES CONTAINING THE SAME |
| WO2014141652A1 (en) | 2013-03-11 | 2014-09-18 | Oncotherapy Science, Inc. | Smyd3 peptides and vaccines containing the same |
| TWI658049B (zh) | 2013-03-12 | 2019-05-01 | 腫瘤療法 科學股份有限公司 | Ｋｎｔｃ２胜肽及含此胜肽之疫苗 |
| WO2014162962A1 (ja) | 2013-04-01 | 2014-10-09 | 学校法人 久留米大学 | 腫瘍抗原ペプチド |
| GB2530236A (en) | 2014-04-11 | 2016-03-23 | Univ Nottingham Trent | PAP Peptide analogues |
| WO2015160928A2 (en) | 2014-04-15 | 2015-10-22 | University Of Virginia Patent Foundation | Isolated t cell receptors and methods of use therefor |
| EP2944652A1 (en) | 2014-05-13 | 2015-11-18 | Technische Universität München | Glypican-3-specific T-cell receptors and their uses for immunotherapy of hepatocellular carcinoma |
| BR112017027653A2 (pt) * | 2015-06-29 | 2018-08-28 | Ose Immunotherapeutics | método para induzir a resposta de memória t precoce com vacina anti-tumoral de peptídeos curtos |
| HRP20220605T1 (hr) | 2017-01-25 | 2022-07-08 | Ose Immunotherapeutics | Postupak za proizvodnju stabilne emulzije za isporuku peptida |
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Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006526628A (ja) | 2003-04-18 | 2006-11-24 | アイディーエム ファーマ，インコーポレイティド | Ｈｌａ−ａ２腫瘍関連抗原ペプチドおよび組成物 |
| US20120195962A1 (en) | 2009-08-18 | 2012-08-02 | Pevion Biotech Ag | Multiepitope Vaccine for Her2/Neu-Associated Cancers |
| WO2016070928A1 (en) | 2014-11-06 | 2016-05-12 | Orphan Synergy Europe - Pharma | Therapeutic multi-peptides t specific immune therapy for treatment of brain metastasis |
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