JP7136796B2 - Salmonella entericaを制御するためのバクテリオシン - Google Patents
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Description
(1)好ましくはSalmonellaに対して細胞傷害性作用を発揮することができるタンパク質であって、以下のアミノ酸配列セグメント(a-i)から(a-vi)または(b-i)から(b-vi)、(c-i)から(c-vi)もしくは(d-i)から(d-vi)で定義されるそれらの誘導体のうちの少なくともいずれか1つを含むタンパク質:
(a-i)ScolE2(配列番号1)のアミノ酸残基316~449のセグメント、
(a-ii)ScolE3(配列番号2)のアミノ酸残基315~483のセグメント、
(a-iii)ScolE7(配列番号3)のアミノ酸残基318~451のセグメント、
(a-iv)ScolE1a(配列番号4)のアミノ酸残基174~297のセグメント、
(a-v)ScolE1b(配列番号5)のアミノ酸残基198~322のセグメント、もしくは
(a-vi)配列番号6のSpstの少なくとも200個の連続的なアミノ酸残基を含むセグメント、
または
(b-i)ScolE2(配列番号1)のアミノ酸残基316~449のセグメントに対して少なくとも75%の配列同一性を有するセグメント、
(b-ii)ScolE3(配列番号2)のアミノ酸残基315~483のセグメントに対して少なくとも70%の配列同一性を有するセグメント、
(b-iii)ScolE7(配列番号3)のアミノ酸残基318~451のセグメントに対して少なくとも77%の配列同一性を有するセグメント、
(b-iv)ScolE1a(配列番号4)のアミノ酸残基174~297のセグメントに対して少なくとも70%の配列同一性を有するセグメント、
(b-v)ScolE1b(配列番号5)のアミノ酸残基198~322のセグメントに対して少なくとも70%の配列同一性を有するセグメント、もしくは
(b-vi)配列番号6のSpstの少なくとも200個の連続的なアミノ酸残基を含むセグメントに対して少なくとも70%の配列同一性を有するセグメント、
または
(c-i)ScolE2(配列番号1)のアミノ酸残基316~449のセグメントに対して少なくとも85%の配列類似性を有するセグメント、
(c-ii)ScolE3(配列番号2)のアミノ酸残基315~483のセグメントに対して少なくとも80%の配列類似性を有するセグメント、
(c-iii)ScolE7(配列番号3)のアミノ酸残基318~451のセグメントに対して少なくとも85%の配列類似性を有するセグメント、
(c-iv)ScolE1a(配列番号4)のアミノ酸残基174~297のセグメントに対して少なくとも80%の配列類似性を有するセグメント、
(c-v)ScolE1b(配列番号5)のアミノ酸残基198~322のセグメントに対して少なくとも80%の配列類似性を有するセグメント、もしくは
(c-vi)配列番号6のSpstの少なくとも200個の連続的なアミノ酸残基を含むセグメントに対して少なくとも80%の配列類似性を有するセグメント、
または
(d-i)ScolE2(配列番号1)のアミノ酸残基316~449のセグメントに対して1~25個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント、
(d-ii)ScolE3(配列番号2)のアミノ酸残基315~483のセグメントに対して1~40個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント、
(d-iii)ScolE7(配列番号3)のアミノ酸残基318~451のセグメントに対して1~30個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント、
(d-iv)ScolE1a(配列番号4)のアミノ酸残基174~297のセグメントに対して1~40個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント、
(d-v)ScolE1b(配列番号5)のアミノ酸残基198~322のセグメントに対して1~40個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント、もしくは
(d-vi)配列番号6のSpstの少なくとも200個の連続的なアミノ酸残基を含むセグメントに対して、1~40個のアミノ酸置換、付加、挿入または欠失を有するセグメント。
(2)以下の活性の任意の1つまたは複数を有する細胞傷害性ドメインまたは触媒ドメインを含む、(1)に記載のタンパク質:膜細孔形成活性、DNase活性、RNase活性または細胞壁分解活性、例えばムラミダーゼ活性。
(3)以下のアミノ酸配列セグメント(a-i)’から(a-vi)’、または(b-i)’から(b-vi)’、(c-i)’から(c-vi)’もしくは(d-i)’から(d-vi)’で定義されるそれらの誘導体もしくはアミノ酸配列セグメントのいずれか1つを含むか、それからなる細胞傷害性ドメインまたは触媒ドメインを含む、(1)または(2)に記載のタンパク質:
(a-i)’ScolE2(配列番号1)のアミノ酸残基453~582のセグメント、
(a-ii)’ScolE3(配列番号2)のアミノ酸残基501~584のセグメント、
(a-iii)’ScolE7(配列番号3)のアミノ酸残基455~584のセグメント、
(a-iv)’ScolE1a(配列番号4)のアミノ酸残基306~478のセグメント、
(a-v)’ScolE1b(配列番号5)のアミノ酸残基350~522のセグメント、もしくは
(a-vi)’Spst(配列番号6)のアミノ酸残基112~288のセグメント、
または
(b-i)’ScolE2(配列番号1)のアミノ酸残基453~582のセグメントに対して少なくとも70%の配列同一性を有するセグメント、
(b-ii)’ScolE3(配列番号2)のアミノ酸残基501~584のセグメントに対して少なくとも70%の配列同一性を有するセグメント、
(b-iii)’ScolE7(配列番号3)のアミノ酸残基455~584のセグメントに対して少なくとも70%の配列同一性を有するセグメント、
(b-iv)’ScolE1a(配列番号4)のアミノ酸残基306~478のセグメントに対して少なくとも70%の配列同一性を有するセグメント、
(b-v)’ScolE1b(配列番号5)のアミノ酸残基350~522のセグメントに対して少なくとも70%の配列同一性を有するセグメント、もしくは
(b-vi)’Spst(配列番号6)のアミノ酸残基112~288のセグメントに対して少なくとも70%の配列同一性を有するセグメント、
または
(c-i)’ScolE2(配列番号1)のアミノ酸残基453~582のセグメントに対して少なくとも80%の配列類似性を有するセグメント、
(c-ii)’ScolE3(配列番号2)のアミノ酸残基501~584のセグメントに対して少なくとも80%の配列類似性を有するセグメント、
(c-iii)’ScolE7(配列番号3)のアミノ酸残基455~584のセグメントに対して少なくとも80%の配列類似性を有するセグメント、
(c-iv)’ScolE1a(配列番号4)のアミノ酸残基306~478のセグメントに対して少なくとも80%の配列類似性を有するセグメント、
(c-v)’ScolE1b(配列番号5)のアミノ酸残基350~522のセグメントに対して少なくとも80%の配列類似性を有するセグメント、もしくは
(c-vi)’Spst(配列番号6)のアミノ酸残基112~288のセグメントに対して少なくとも80%の配列類似性を有するセグメント、
または
(d-i)’ScolE2(配列番号1)のアミノ酸残基453~582のセグメントに対して1~20個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント、
(d-ii)’ScolE3(配列番号2)のアミノ酸残基501~584のセグメントに対して1~20個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント、
(d-iii)’ScolE7(配列番号3)のアミノ酸残基455~584のセグメントに対して1~20個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント、
(d-iv)’ScolE1a(配列番号4)のアミノ酸残基306~478のセグメントに対して1~20個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント、
(d-v)’ScolE1b(配列番号5)のアミノ酸残基350~522のセグメントに対して1~20個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント、もしくは
(d-vi)’Spst(配列番号6)のアミノ酸残基112~288のセグメントに対して、1~20個のアミノ酸置換、付加、挿入または欠失を有するセグメント。
(4)以下のアミノ酸配列セグメント(a-i)’’から(a-v)’’、または(b-i)’’から(b-v)’’、(c-i)’’から(c-v)’’もしくは(d-i)’’から(d-v)’’で定義されるそれらの誘導体(もしくはアミノ酸配列セグメント)のいずれか1つを含む(または、それからなる)転移ドメインを含む、(1)、(2)または(3)のいずれか1つに記載のタンパク質:
(a-i)’’ScolE2(配列番号1)のアミノ酸残基43~313のセグメント、
(a-ii)’’ScolE3(配列番号2)のアミノ酸残基35~315のセグメント、
(a-iii)’’ScolE7(配列番号3)のアミノ酸残基43~316のセグメント、
(a-iv)’’ScolE1a(配列番号4)のアミノ酸残基1~170のセグメント、もしくは
(a-v)’’ScolE1b(配列番号5)のアミノ酸残基1~195のセグメント、
または
(b-i)’’ScolE2(配列番号1)のアミノ酸残基43~313のセグメントに対して少なくとも75%、好ましくは少なくとも80%、より好ましくは少なくとも85%、より好ましくは少なくとも90%、最も好ましくは少なくとも95%の配列同一性を有するセグメント、
(b-ii)’’ScolE3(配列番号2)のアミノ酸残基35~315のセグメントに対して少なくとも75%、好ましくは少なくとも80%、より好ましくは少なくとも85%、より好ましくは少なくとも90%、最も好ましくは少なくとも95%の配列同一性を有するセグメント、
(b-iii)’’ScolE7(配列番号3)のアミノ酸残基43~316のセグメントに対して少なくとも80%、好ましくは少なくとも85%、より好ましくは少なくとも90%、最も好ましくは少なくとも95%の配列同一性を有するセグメント、
(b-iv)’’ScolE1a(配列番号4)のアミノ酸残基1~170のセグメントに対して少なくとも70%、好ましくは少なくとも80%、より好ましくは少なくとも85%、より好ましくは少なくとも90%、最も好ましくは少なくとも95%の配列同一性を有するセグメント、もしくは
(b-v)’’ScolE1b(配列番号5)のアミノ酸残基1~195のセグメントに対して少なくとも70%、好ましくは少なくとも80%、より好ましくは少なくとも85%、より好ましくは少なくとも90%、最も好ましくは少なくとも95%の配列同一性を有するセグメント、
または
(c-i)’’ScolE2(配列番号1)のアミノ酸残基43~313のセグメントに対して少なくとも85%、好ましくは少なくとも90%、より好ましくは少なくとも95%の配列類似性を有するセグメント、
(c-ii)’’ScolE3(配列番号2)のアミノ酸残基35~315のセグメントに対して少なくとも85%、好ましくは少なくとも90%、より好ましくは少なくとも95%の配列類似性を有するセグメント、
(c-iii)’’ScolE7(配列番号3)のアミノ酸残基43~316のセグメントに対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも95%の配列類似性を有するセグメント、
(c-iv)’’ScolE1a(配列番号4)のアミノ酸残基1~170のセグメントに対して少なくとも80%、好ましくは少なくとも90、より好ましくは少なくとも95%の配列類似性を有するセグメント、もしくは
(c-v)’’ScolE1b(配列番号5)のアミノ酸残基1~195のセグメントに対して少なくとも80%、好ましくは少なくとも90%、より好ましくは少なくとも95%の配列類似性を有するセグメント、
または
(d-i)’’ScolE2(配列番号1)のアミノ酸残基43~313のセグメントに対して、1~50個、好ましくは1~40個、より好ましくは1~30個、さらにより好ましくは1~20個、最も好ましくは1~10個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント、
(d-ii)’’ScolE3(配列番号2)のアミノ酸残基35~315のセグメントに対して、1~50個、好ましくは1~40個、より好ましくは1~30個、さらにより好ましくは1~20個、最も好ましくは1~10個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント、
(d-iii)’’ScolE7(配列番号3)のアミノ酸残基43~316のセグメントに対して、アミノ酸残基35~315のセグメントのアミノ酸置換、付加、挿入または欠失に対して、1~30個、好ましくは1~20個、最も好ましくは1~10個のアミノ酸置換、付加、挿入または欠失を有するセグメント;
(d-iv)’’ScolE1a(配列番号4)のアミノ酸残基1~170のセグメントに対して、アミノ酸残基35~315のセグメントのアミノ酸置換、付加、挿入または欠失に対して、1~40個、好ましくは1~30個、より好ましくは1~20、最も好ましくは1~10個のアミノ酸置換、付加、挿入または欠失を有するセグメント、もしくは
(d-v)’’ScolE1b(配列番号5)のアミノ酸残基1~195のセグメントに対して、アミノ酸残基35~315のセグメントのアミノ酸置換、付加、挿入または欠失に対して、1~40個、好ましくは1~30個、より好ましくは1~20、最も好ましくは1~10個のアミノ酸置換、付加、挿入または欠失を有するセグメント。
(5)Salmonella、例えば、Salmonella enterica、好ましくはSalmonella enterica ssp.entericaによる感染または汚染を処置する方法で使用するための、(1)~(4)のいずれか1つに記載のタンパク質。
(6)Salmonella entericaに対する、請求項1、特に請求項1のクラス(b)から(d)に記載のタンパク質の毒性が、感受性Salmonella enterica株のcm2あたり1x107cfu/mLの0.14mL細菌溶液を接種した軟寒天重層プレート上に、5マイクロリットルのクラス(b)から(d)の前記タンパク質および配列番号1のタンパク質の溶液をスポッティングし、その後37℃で寒天プレートをインキュベートしてから12時間に、前記タンパク質および配列番号1のタンパク質が、同じ直径の、Salmonella enterica ssp.enterica血清型Newport株ATCC(登録商標)6962(商標)*の生存可能な細菌を含んでいないスポットを生成するというようなものであり、クラス(b)から(d)のタンパク質の濃度が、配列番号1のタンパク質の比較溶液のものの最大で5倍である、(1)~(5)のいずれか1つに記載のタンパク質。
(7)(1)~(6)のいずれか1つに記載の1種または複数のタンパク質を含む組成物。
(8)前記1種または複数のタンパク質がScolE1aもしくはScolE1bまたはScolE1aもしくはScolE1bの誘導体であるか、これらを含む、(7)に記載の組成物。
(9)請求項1で定義される少なくとも2つの異なるクラス(i)から(vi)から選択される2つ以上のタンパク質を含む、(7)または(8)に記載の組成物。
(10)(クラス(a)~(d)のいずれかの)サブクラス(i)のタンパク質および(クラス(a)~(d)のいずれかの)サブクラス(v)のタンパク質を少なくとも含む、(9)に記載の組成物。
(11)Salmonella、好ましくはSalmonella enterica、より好ましくはSalmonella enterica ssp.entericaによる感染を処置する方法で使用するための、(7)~(10)のいずれか1つに記載の組成物。
(12)前記組成物が植物材料またはその抽出物であり、植物材料が、前記タンパク質を発現した植物、好ましくは、前記タンパク質を発現した食用植物由来の材料である、(7)~(11)のいずれか1つに記載の組成物。
(13)前記植物材料がホウレンソウ、フダンソウ、ビートの根、ニンジン、サトウダイコン、リーフィービート、アマランス、Nicotianaからなる群から選択される植物由来の材料である、および/または前記植物材料が1つもしくは複数の葉、根、塊茎もしくは種子、もしくは前記葉、根、塊茎もしくは種子の破砕された、製粉された、もしくは粉砕された生成物である、(12)に記載の組成物。
(14)前記組成物が、前記タンパク質を含む水溶液である、(7)~(13)のいずれか1つに記載の組成物。
(15)前記タンパク質、または組成物が2つ以上の異なるタンパク質を含む場合は前記水溶液中の前記タンパク質の濃度が、0.0001~1mg/ml、好ましくは0.001~0.1mg/ml、より好ましくは0.005~0.05mg/mlである、または0.1~15mg/kg食品、好ましくは0.5~10mg/kg、より好ましくは0.1~5mg/kg食品である、(14)に記載の組成物。
(16)ScolE1aおよび/もしくはその誘導体、もしくはScolE1aもしくはその誘導体を含む、または項目(A-iv)、(B-iv)、(C-iv)、(D-iv)もしくは(E-iv)に記載のタンパク質、および/もしくは以下で定義される項目(A-v)、(B-v)、(C-v)、(D-v)もしくは(E-v)に記載のタンパク質を含む、または項目(A-iv)、(B-iv)、(D-iv)もしくは(E-iv)に記載のタンパク質、および/もしくは以下で定義される項目(A-v)、(B-v)、(D-v)もしくは(E-v)に記載のタンパク質を含む、または項目(A-iv)、(B-iv)、(D-iv)もしくは(E-iv)に記載のタンパク質、および以下で定義される項目(A-v)、(B-v)、(D-v)もしくは(E-v)に記載のタンパク質を含む、(7)~(15)のいずれか1つに記載の組成物であって、本明細書で定義される好ましい実施形態が本項目(16)で定義される実施形態と組み合わされてもよい、組成物。
(17)Salmonellaによる対象物の感染または汚染を予防するまたは減少させる方法であって、(1)~(6)のいずれか1つに記載のタンパク質または(7)~(16)のいずれか1つに記載の組成物と前記対象物を接触させることを含む方法。
(18)前記対象物が前記水溶液で噴霧される、または前記水溶液中に浸漬される、(17)に記載の方法。
(19)前記対象物が少なくとも10秒間、好ましくは少なくとも1分間、好ましくは少なくとも5分間、前記タンパク質の水溶液中に浸漬される、(17)~(18)に記載の方法。
(20)前記対象物が食品または動物飼料である、(17)~(19)のいずれか1つに記載の方法。
(21)前記食品が動物の死体全体、肉、卵、生の果物または野菜であり、好ましくは前記食品が肉、生の果物または野菜であり、より好ましくは前記食品が肉である、(20)に記載の方法。
(22)それらを必要とする対象のSalmonellaによる感染を処置する方法であって、(1)~(6)のいずれか1つに記載のタンパク質または(7)~(16)のいずれか1つに記載の組成物を前記対象に投与することを含む方法。
(23)前記SalmonellaがSalmonella enterica、好ましくはSalmonella enterica ssp.entericaである、(17)~(22)のいずれか1つに記載の方法。
(24)(1)~(6)のいずれか1つに記載のタンパク質を含む組成物を生成する方法であって、
(i)植物、好ましくは食用植物またはNicotiana中で前記タンパク質を発現させるステップ、
(ii)前記植物から発現タンパク質を含む植物材料を採取するステップ、
(iii)水性バッファーを使用して前記植物材料から前記タンパク質を抽出して、前記タンパク質を含む組成物を得るステップ、
(iv)場合により前記組成物から望ましくない混入物を除去するステップ
を含む方法。
(b-i)ScolE2(配列番号1)のアミノ酸残基316~449のセグメントに対して少なくとも80%、好ましくは少なくとも85%、より好ましくは少なくとも90%、最も好ましくは少なくとも95%の配列同一性を有するセグメント、
(b-ii)ScolE3(配列番号2)のアミノ酸残基315~483のセグメントに対して少なくとも75%、好ましくは80%、より好ましくは少なくとも85%、より好ましくは少なくとも90%、最も好ましくは少なくとも95%の配列同一性を有するセグメント、
(b-iii)ScolE7(配列番号3)のアミノ酸残基318~451のセグメントに対して少なくとも80%、好ましくは少なくとも85%、より好ましくは少なくとも90%、最も好ましくは少なくとも95%の配列同一性を有するセグメント、
(b-iv)ScolE1a(配列番号4)のアミノ酸残基174~297のセグメントに対して少なくとも80%、好ましくは少なくとも85%、より好ましくは少なくとも90%、最も好ましくは少なくとも95%の配列同一性を有するセグメント、
(b-v)ScolE1b(配列番号5)のアミノ酸残基198~322のセグメントに対して少なくとも80%、好ましくは少なくとも85%、より好ましくは少なくとも90%、最も好ましくは少なくとも95%の配列同一性を有するセグメント、もしくは
(b-vi)配列番号6のSpstの少なくとも200個の連続的なアミノ酸残基を含むセグメントに対して少なくとも80%、好ましくは少なくとも85%、より好ましくは少なくとも90%、最も好ましくは少なくとも95%の配列同一性を有するセグメント。一実施形態では、配列番号6のSpstの少なくとも250個の連続的なアミノ酸残基を含むセグメントに対して少なくとも80%、好ましくは少なくとも85%、より好ましくは少なくとも90%、最も好ましくは少なくとも95%の配列同一性を有するセグメント;さらなる実施形態では、さらなる実施形態では、タンパク質は、配列番号6の(全)アミノ酸配列に対して少なくとも80%、好ましくは少なくとも85%、より好ましくは少なくとも90%、最も好ましくは少なくとも95%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、それからなる;
または
(c-i)ScolE2(配列番号1)のアミノ酸残基316~449のセグメントに対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも95%の配列類似性を有するセグメント、
(c-ii)ScolE3(配列番号2)のアミノ酸残基315~483のセグメントに対して少なくとも85%、好ましくは少なくとも90%、より好ましくは少なくとも95%の配列類似性を有するセグメント、
(c-iii)ScolE7(配列番号3)のアミノ酸残基318~451のセグメントに対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも95%の配列類似性を有するセグメント、
(c-iv)ScolE1a(配列番号4)のアミノ酸残基174~297のセグメントに対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも95%の配列類似性を有するセグメント、
(c-v)ScolE1b(配列番号5)のアミノ酸残基198~322のセグメントに対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも95%の配列類似性を有するセグメント、もしくは
(c-vi)配列番号6のSpstの少なくとも200個の連続的なアミノ酸残基を含むセグメントに対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも95%の配列類似性を有するセグメント。一実施形態では、配列番号6のSpstの少なくとも250個の連続的なアミノ酸残基を含むセグメントに対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも95%の配列類似性を有するセグメント;さらなる実施形態では、タンパク質は、配列番号6の(全)アミノ酸配列に対して少なくとも80%、好ましくは少なくとも90%、最も好ましくは少なくとも95%の配列類似性を有するアミノ酸配列を含むか、それからなる;
または
(d-i)ScolE2(配列番号1)のアミノ酸残基316~449のセグメントに対して、1~20個、好ましくは1~15個、より好ましくは1~10個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント、
(d-ii)ScolE3(配列番号2)のアミノ酸残基315~483のセグメントに対して、1~30個、好ましくは1~29個、より好ましくは1~10個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント、
(d-iii)ScolE7(配列番号3)のアミノ酸残基318~451のセグメントに対して、1~20個、好ましくは1~15個、より好ましくは1~10個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント、
(d-iv)ScolE1a(配列番号4)のアミノ酸残基174~297のセグメントに対して、1~30個、好ましくは1~20個、より好ましくは1~15個、さらにより好ましくは1~10個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント、
(d-v)ScolE1b(配列番号5)のアミノ酸残基198~322のセグメントに対して、1~30個、好ましくは1~20個、より好ましくは1~15個、さらにより好ましくは1~10個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント、もしくは
(d-vi)配列番号6のSpstの少なくとも200個の連続的なアミノ酸残基を含むセグメントに対して、1~30個、好ましくは1~20個、より好ましくは1~15個、さらにより好ましくは1~10個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント。一実施形態では、配列番号6のSpstの少なくとも250個の連続的なアミノ酸残基を含むセグメントに対して、1~30個、好ましくは1~20個、より好ましくは1~15個、さらにより好ましくは1~10個のアミノ酸置換、付加、挿入または欠失を有するセグメント;さらなる実施形態では、タンパク質は、配列番号6の(全)アミノ酸配列に対して、1~30個、好ましくは1~20個、より好ましくは1~15個、さらにより好ましくは1~10個のアミノ酸置換、付加、挿入または欠失を有するアミノ酸配列を含むか、それからなる。
(b-i)’ScolE2(配列番号1)のアミノ酸残基453~582のセグメントに対して少なくとも80%、好ましくは少なくとも85%、より好ましくは少なくとも90%、最も好ましくは少なくとも95%の配列同一性を有するセグメント、
(b-ii)’ScolE3(配列番号2)のアミノ酸残基501~584のセグメントに対して少なくとも80%、好ましくは少なくとも85%、より好ましくは少なくとも90%、最も好ましくは少なくとも95%の配列同一性を有するセグメント、
(b-iii)’ScolE7(配列番号3)のアミノ酸残基455~584のセグメントに対して少なくとも80%、好ましくは少なくとも85%、より好ましくは少なくとも90%、最も好ましくは少なくとも95%の配列同一性を有するセグメント、
(b-iv)’ScolE1a(配列番号4)のアミノ酸残基306~478のセグメントに対して少なくとも80%、好ましくは少なくとも85%、より好ましくは少なくとも90%、最も好ましくは少なくとも95%の配列同一性を有するセグメント、
(b-v)’ScolE1b(配列番号5)のアミノ酸残基350~522のセグメントに対して少なくとも80%、好ましくは少なくとも85%、より好ましくは少なくとも90%、最も好ましくは少なくとも95%の配列同一性を有するセグメント、もしくは
(b-vi)’Spst(配列番号6)のアミノ酸残基112~288のセグメントに対して少なくとも80%、好ましくは少なくとも85%、より好ましくは少なくとも90%、最も好ましくは少なくとも95%の配列同一性を有するセグメント、
または
(c-i)’ScolE2(配列番号1)のアミノ酸残基453~582のセグメントに対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも95%の配列類似性を有するセグメント、
(c-ii)’ScolE3(配列番号2)のアミノ酸残基501~584のセグメントに対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも95%の配列類似性を有するセグメント、
(c-iii)’ScolE7(配列番号3)のアミノ酸残基455~584のセグメントに対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも95%の配列類似性を有するセグメント、
(c-iv)’ScolE1a(配列番号4)のアミノ酸残基306~478のセグメントに対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも95%の配列類似性を有するセグメント、
(c-v)’ScolE1b(配列番号5)のアミノ酸残基350~522のセグメントに対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも95%の配列類似性を有するセグメント、もしくは
(c-vi)’Spst(配列番号6)のアミノ酸残基112~288のセグメントに対して少なくとも90%、好ましくは少なくとも95%の配列類似性を有するセグメント、
または
(d-i)’ScolE2(配列番号1)のアミノ酸残基453~582のセグメントに対して1~20個、好ましくは1~15個、より好ましくは1~10個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント、
(d-ii)’ScolE3(配列番号2)のアミノ酸残基501~584のセグメントに対して1~20個、好ましくは1~15個、好ましくは1~10個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント、
(d-iii)’ScolE7(配列番号3)のアミノ酸残基455~584のセグメントに対して1~20個、好ましくは1~15個、好ましくは1~10個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント、
(d-iv)’ScolE1a(配列番号4)のアミノ酸残基306~478のセグメントに対して1~30個、好ましくは1~20個、より好ましくは1~15個、好ましくは1~10個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント、
(d-v)’ScolE1b(配列番号5)のアミノ酸残基350~522のセグメントに対して1~30個、好ましくは1~20個、より好ましくは1~15個、好ましくは1~10個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント、もしくは
(d-vi)’Spst(配列番号6)のアミノ酸残基112~288のセグメントに対して1~20個、好ましくは1~15個、より好ましくは1~10個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント。
(α-i)配列番号1のアミノ酸残基316~449のセグメントおよび配列番号1のアミノ酸残基453~582のセグメント、
(α-ii)配列番号2のScolE3のアミノ酸残基315~483のセグメントおよび配列番号2のアミノ酸残基501~584のセグメント、
(α-iii)配列番号3のアミノ酸残基318~451のセグメントおよび配列番号3のアミノ酸残基455~584のセグメント、
(α-iv)配列番号4のアミノ酸残基174~297のセグメントおよび配列番号4のアミノ酸残基306~478のセグメント、
(α-v)配列番号5のアミノ酸残基198~322のセグメントおよび配列番号5のアミノ酸残基350~522のセグメント、もしくは
(α-vi)配列番号6のアミノ酸残基112~288のセグメントを含む、配列番号6の少なくとも200個の連続的なアミノ酸残基を含むセグメント、
または
(β-i)配列番号1のアミノ酸残基316~449のセグメントに対して少なくとも75%の配列同一性を有するセグメントおよび配列番号1のアミノ酸残基453~582のセグメントに対して少なくとも70%の配列同一性を有するセグメント、
(β-ii)配列番号2のアミノ酸残基315~483のセグメントに対して少なくとも70%の配列同一性を有するセグメントおよび配列番号2のアミノ酸残基501~584のセグメントに対して少なくとも70%の配列同一性を有するセグメント、
(β-iii)配列番号3のアミノ酸残基318~451のセグメントに対して少なくとも77%の配列同一性を有するセグメントおよび配列番号3のアミノ酸残基455~584のセグメントに対して少なくとも70%の配列同一性を有するセグメント、
(β-iv)配列番号4のアミノ酸残基174~297のセグメントに対して少なくとも70%の配列同一性を有するセグメントおよび配列番号4のアミノ酸残基306~478のセグメントに対して少なくとも70%の配列同一性を有するセグメント、
(β-v)配列番号5のアミノ酸残基198~322のセグメントに対して少なくとも70%の配列同一性を有するセグメントおよび配列番号5のアミノ酸残基350~522のセグメントに対して少なくとも70%の配列同一性を有するセグメント、もしくは
(β-vi)配列番号6のアミノ酸残基112~288のセグメントに対して少なくとも70%の配列同一性を有するセグメントを含む、配列番号6の少なくとも200個の連続的なアミノ酸残基を含むセグメントに対して少なくとも70%の配列同一性を有するセグメント、
または
(χ-i)配列番号1のアミノ酸残基316~449のセグメントに対して少なくとも85%の配列類似性を有するセグメントおよび配列番号1のアミノ酸残基453~582のセグメントに対して少なくとも80%の配列類似性を有するセグメント、
(χ-ii)配列番号2のアミノ酸残基315~483のセグメントに対して少なくとも80%の配列類似性を有するセグメントおよび配列番号2のアミノ酸残基501~584のセグメントに対して少なくとも80%の配列類似性を有するセグメント、
(χ-iii)配列番号3のアミノ酸残基318~451のセグメントに対して少なくとも85%の配列類似性を有するセグメントおよび配列番号3のアミノ酸残基455~584のセグメントに対して少なくとも80%の配列類似性を有するセグメント、
(χ-iv)配列番号4のアミノ酸残基174~297のセグメントに対して少なくとも80%の配列類似性を有するセグメントおよび配列番号4のアミノ酸残基306~478のセグメントに対して少なくとも80%の配列類似性を有するセグメント、
(χ-v)配列番号5のアミノ酸残基198~322のセグメントに対して少なくとも80%の配列類似性を有するセグメントおよび配列番号5のアミノ酸残基350~522のセグメントに対して少なくとも80%の配列類似性を有するセグメント、もしくは
(χ-vi)配列番号6のアミノ酸残基112~288のセグメントに対して少なくとも80%の配列類似性を有するセグメントを含む、配列番号6の少なくとも200個の連続的なアミノ酸残基を含むセグメントに対して少なくとも80%の配列類似性を有するセグメント、
または
(δ-i)配列番号1のアミノ酸残基316~449のセグメントに対して1~25個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメントおよび配列番号1のアミノ酸残基453~582のセグメントに対して1~30個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント、
(δ-ii)配列番号2のアミノ酸残基315~483のセグメントに対して1~40個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメントおよび配列番号2のアミノ酸残基501~584のセグメントに対して1~30個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント、
(δ-iii)配列番号3のアミノ酸残基318~451のセグメントに対して1~30個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメントおよび配列番号3のアミノ酸残基455~584のセグメントに対して1~30個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント、
(δ-iv)配列番号4のアミノ酸残基174~297のセグメントに対して1~40個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメントおよび配列番号4のアミノ酸残基306~478のセグメントに対して1~40個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント、
(δ-v)配列番号5のアミノ酸残基198~322のセグメントに対して1~40個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメントおよび配列番号5のアミノ酸残基350~522のセグメントに対して1~40個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント、もしくは
(δ-vi)配列番号6のアミノ酸残基112~288のセグメントに対して1~30個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメントを含む、配列番号6の少なくとも200個の連続的なアミノ酸残基を含むセグメントに対して1~40個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するセグメント。
(A-i)配列番号1、
(A-ii)配列番号2、
(A-iii)配列番号3、
(A-iv)配列番号4、
(A-v)配列番号5、もしくは
(A-vi)配列番号6、
または
(B-i)配列番号1のアミノ酸配列に対して、少なくとも75%、好ましくは少なくとも80%、より好ましくは少なくとも85%、より一層好ましくは少なくとも90%、より一層好ましくは少なくとも95%の配列同一性を有するアミノ酸配列、
(B-ii)配列番号2のアミノ酸配列に対して少なくとも80%、好ましくは少なくとも85%、より好ましくは少なくとも93%、より一層好ましくは少なくとも96%の配列同一性を有するアミノ酸配列、
(B-iii)配列番号3のアミノ酸配列に対して少なくとも80%、好ましくは少なくとも85%、より好ましくは少なくとも90%、より一層好ましくは少なくとも95%の配列同一性を有するアミノ酸配列、
(B-iv)配列番号4のアミノ酸配列に対して少なくとも70%、好ましくは少なくとも80%、より好ましくは少なくとも85%、より一層好ましくは少なくとも90%、より一層好ましくは少なくとも95%の配列同一性を有するアミノ酸配列、
(B-v)配列番号5のアミノ酸配列に対して少なくとも70%、好ましくは少なくとも80%、より好ましくは少なくとも85%、より一層好ましくは少なくとも90%、より一層好ましくは少なくとも95%の配列同一性を有するアミノ酸配列、もしくは
(B-vi)配列番号6のアミノ酸配列に対して少なくとも70%、好ましくは少なくとも80%、より好ましくは少なくとも85%、より一層好ましくは少なくとも90%、より一層好ましくは少なくとも95%の配列同一性を有するアミノ酸配列、
または
(C-i)配列番号1のアミノ酸配列に対して少なくとも85%、好ましくは少なくとも90%、より好ましくは少なくとも95%の配列類似性を有するアミノ酸配列、
(C-ii)配列番号2のアミノ酸配列に対して少なくとも85%、好ましくは少なくとも90%、より好ましくは少なくとも95%の配列類似性を有するアミノ酸配列、
(C-iii)配列番号3のアミノ酸配列に対して少なくとも85%、好ましくは少なくとも90%、より好ましくは少なくとも95%の配列類似性を有するアミノ酸配列、
(C-iv)配列番号4のアミノ酸配列に対して少なくとも80%、好ましくは少なくとも85%、より好ましくは少なくとも90%、より一層好ましくは少なくとも95%の配列類似性を有するアミノ酸配列、
(C-v)配列番号5のアミノ酸配列に対して少なくとも80%、好ましくは少なくとも85%、より好ましくは少なくとも90%、より一層好ましくは少なくとも95%の配列類似性を有するアミノ酸配列、もしくは
(C-vi)配列番号6のアミノ酸配列に対して少なくとも80%、好ましくは少なくとも85%、より好ましくは少なくとも90%、より一層好ましくは少なくとも95%の配列類似性を有するアミノ酸配列、
または
(D-i)配列番号1のアミノ酸配列に対して1~40個、好ましくは1~30個、より好ましくは1~20、最も好ましくは1~10個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するアミノ酸配列、
(D-ii)配列番号2のアミノ酸配列に対して1~40個、好ましくは1~30個、より好ましくは1~20、最も好ましくは1~10個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するアミノ酸配列、
(D-iii)配列番号3のアミノ酸配列に対して1~40個、好ましくは1~30個、より好ましくは1~20、最も好ましくは1~10個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するアミノ酸配列、
(D-iv)配列番号4のアミノ酸配列に対して1~40個、好ましくは1~30個、より好ましくは1~20、最も好ましくは1~10個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するアミノ酸配列、
(D-v)配列番号5のアミノ酸配列に対して1~40個、好ましくは1~30個、より好ましくは1~20、最も好ましくは1~10個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するアミノ酸配列、もしくは
(D-vi)配列番号6のアミノ酸配列に対して1~40個、好ましくは1~30個、より好ましくは1~20、最も好ましくは1~10個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するアミノ酸配列、
または
(E-i)配列番号1の少なくとも470個、好ましくは少なくとも525個、より好ましくは少なくとも555個の連続的なアミノ酸残基を含むか、それからなるアミノ酸配列、
(E-ii)配列番号2の少なくとも470個、好ましくは少なくとも525個、より好ましくは少なくとも555個の連続的なアミノ酸残基を含むか、それからなるアミノ酸配列、
(E-iii)配列番号3の少なくとも470個、好ましくは少なくとも525個、より好ましくは少なくとも555個の連続的なアミノ酸残基を含むか、それからなるアミノ酸配列、
(E-iv)配列番号4の少なくとも390個、好ましくは少なくとも435個、より好ましくは少なくとも460個の連続的なアミノ酸残基を含むか、それからなるアミノ酸配列、
(E-v)配列番号5の少なくとも425個、好ましくは少なくとも475個、より好ましくは少なくとも500個の連続的なアミノ酸残基を含むか、それからなるアミノ酸配列、もしくは
(E-vi)配列番号6の少なくとも250個、好ましくは少なくとも270個、より好ましくは少なくとも282個の連続的なアミノ酸残基を含むか、それからなるアミノ酸配列。
配列番号4の残基125はAsnもしくはSerである;
配列番号4の残基145はLysもしくはArgである;
配列番号4の残基151はAlaもしくはGlyである;
配列番号4の残基154はAla、SerもしくはGlyである;
配列番号4の残基155はPhe、LeuもしくはIleである;
配列番号4の残基158はAlaもしくはGlyである;
配列番号4の残基163はGlu、AspもしくはSerである;
配列番号4の残基165はAla、ThrもしくはValである;
配列番号4の残基167はArgである;
配列番号4の残基172はThr、AlaもしくはSerである;
配列番号4の残基175はGlnである;
配列番号4の残基176はValもしくはLeuである;
配列番号4の残基178はGlnである;
配列番号4の残基181はGluもしくはAsp、好ましくはGluである;
配列番号4の残基184はArgもしくはGln、好ましくはArgである;
配列番号4の残基192はAlaもしくはThrである;
配列番号4の残基195はAlaもしくはValである;
配列番号4の残基196はGluもしくはGln、好ましくはGluである;
配列番号4の残基198はAlaもしくはThrである;
配列番号4の残基209はLeuもしくはIle、好ましくはLeuである;
配列番号4の残基273はLeuもしくはIleである;
配列番号4の残基280はArgである;
配列番号4の残基283はLysである;
配列番号4の残基286はGlnもしくはLysである;
配列番号4の残基290はAlaもしくはThrである;
配列番号4の残基299はAsp、AsnもしくはGluである;
配列番号4の残基301はLeuである;
配列番号4の残基302はAsnもしくはAspである;
配列番号4の残基346はAsn、AspもしくはGluである;
配列番号4の残基363はLysもしくはAsnである;または
配列番号4の残基364はLysもしくはGlnである。
(i)上記の植物、好ましくは食用植物またはNicotiana中で前記タンパク質を発現させるステップ、
(ii)前記植物から発現タンパク質を含む植物材料を採取するステップ、
(iii)水性バッファーを使用して前記植物材料から前記タンパク質を抽出して、前記タンパク質を含む組成物を得るステップ、
場合により、前記組成物から望ましくない混入物を除去するステップ
を含む。
4つの活性群を代表する6種のサルモシンを選択した(表1)。
針なし注射器を使用して、サイトゾル性サルモシン発現のためのTMVベースのアセンブルしたベクターを保有する希釈したAgrobacterium tumefaciens培養物を6週齢のNicotiana benthamiana植物にインフィルトレートした。サルモシンScolE2およびScolE7の場合は、サルモシン発現のためのTMVベースのベクターを保有するAgrobacterium培養物を対応する免疫タンパク質の発現のためのPVXベースのベクターを保有する他の培養物と等比率で混合した。それぞれの一晩培養物をOD600=1.5に調整し、10mM MES、pH5.5および10mM MgSO4を含むインフィルトレーションバッファーでさらに1:100に希釈した。本実験で使用したプラスミドコンストラクトを表3に概説する。最適な採取時点を決定するために、インフィルトレーション後のいくつかの時点で植物材料を採取し、これを50mM HEPES(pH7.0)、10mM酢酸カリウム、5mM酢酸マグネシウム、10%(v/v)グリセロール、0.05%(v/v)Tween-20および300mM NaClを含む5倍容量のバッファーを用いるタンパク質抽出に使用した。ブラッドフォードアッセイを使用して全可溶性タンパク質(TSP)の濃度を決定し、クマシー染色を用いるSDS-PAGEを使用してTSP抽出物を解析した。本発明者らの実験では、試験したすべてのサルモシンは、ウシ血清アルブミン(BSA)タンパク質との比較によって決定した場合に、1.2から1.8mg組換えコリシン/g FWの間または18から47%のTSPの間で変動して、適度に高レベルで発現していた(表4)。
本発明者らは、S.enterica ssp.entericaの33の異なる血清型の36株に対して、植物で作られた組換えサルモシンの抗菌活性を解析した。本実験で使用した株の詳細を表5Aおよび5Bに示す。
半定量的な比較のために、任意単位(AU)での組換えコリシンの相対抗菌活性を示し、これは、放射拡散アッセイにおいて検出可能なクリアリング作用をもたらすタンパク質抽出物の最高の希釈に対する希釈係数として計算した。植物組織のmg FWあたりのAUで計算したSalmonella株に対するサルモシンの抗菌活性を、それぞれ、ScolE2、ScolE3、ScolE7、ScolE1aおよびScolE1bについて、図6、8、10、12および14に示す。これによって、バイオマスの単位あたりの特異的活性薬剤の収量、すなわち、宿主の特異的生産能力が反映される。
2つの活性群を代表する6種のコリシンを選択した(表6)。このリストは、コリシンcolS4、col5、col10、colIa、colIbおよびcolMを含む。それぞれのアミノ酸配列はGenBankから取得し、Nicotiana benthamianaについて最適化されたコドン使用頻度を有する対応するヌクレオチド配列は、Thermo Fisher Scientific Inc.が合成した。コリシンコード配列をTMVベースのアセンブルしたウイルスベクターpNMD035(WO2012/019660に詳しく記載されている)に挿入して、図16に描写するプラスミドコンストラクトを得た。コリシンMのコード配列を、cat1イントロン(カタラーゼCat1に対するRicinus communiscat1遺伝子の第1イントロン(GenBank:D21161.1、ヌクレオチド位置679から867))の挿入によって中断した。
針なし注射器を使用して、サイトゾル性コリシン発現のためのTMVベースのアセンブルしたベクターを保有する希釈したAgrobacterium tumefaciens培養液を6週齢のNicotiana benthamiana植物にインフィルトレートした。Agrobacterium一晩培養物をOD600=1.5に調整し、10mM MES、pH5.5および10mM MgSO4を含むインフィルトレーションバッファーでさらに1:100に希釈した。本実験で使用したプラスミドコンストラクトを表7に概説する。最適な採取時点を決定するために、インフィルトレーション後のいくつかの時点で植物材料を採取し、これを50mM HEPES(pH7.0)、10mM酢酸カリウム、5mM酢酸マグネシウム、10%(v/v)グリセロール、0.05%(v/v)Tween-20および300mM NaClを含む5倍容量のバッファーを用いるタンパク質抽出に使用した。ブラッドフォードアッセイを使用して全可溶性タンパク質(TSP)の濃度を決定し、クマシー染色を用いるSDS-PAGEを使用してTSP抽出物を解析した。本発明者らの実験では、試験したすべてのコリシンは、ウシ血清アルブミン(BSA)タンパク質との比較によって決定した場合に、1.5から4.7mg組換えコリシン/g FWの間または16から41%のTSPの間で変動して、適度に高レベルで発現していた(表8)。
本発明者らは、S.enterica ssp.entericaの32の異なる血清型の35株に対して、植物で作られた組換えコリシンの抗菌活性を解析した。本発明者ら実験で使用した株の詳細を表5Aおよび5B(株番号1~35)に示す。
6種の試験したコリシンの中で、1種は狭い抗菌活性を示し(colS4-25%の株を阻害した)、3種のコリシンは中間の活性スペクトルを有し(col5、col10およびcolM-それぞれ48%、46%および42%の株を阻害した)、2種のコリシンは広い活性スペクトルを有していた:colIaおよびcolIb-それぞれ96%および89%の株を阻害した(図17)。
植物で生成したコリシンを、病原性Salmonellaで汚染したニワトリ胸肉の切り身の試料に対する抗菌活性について試験した。
全CFU=実際のCFU×濃度係数×希釈係数×実際のmlペプトン水
g肉 0.1mlプレーティング量 実際のg試料
実験的に汚染させた肉試料中の生存可能な病原性Salmonellaの数の減少におけるコリシン処理の効果を、GraphPad Prism v.6.01を使用して一元配置ANOVA(チューキーの多重比較検定)および独立パラメトリックt検定によって、担体処理対照試料およびコリシン処理試料で得られたデータを比較することにより評価する。
サルモシン混合物またはサルモシン/コリシン混合物は、Salmonellaからの食品製品の汚染除去について試験され、食品産業においてSalmonella汚染を減少させるのに使用されることが計画される。サルモシンScolE1aおよびScolE1bは、試験したSalmonella株に対して最も広い抗菌活性を示す。したがって、これらは、Salmonellaの制御のためのサルモシンカクテルの主要成分として使用することができる。
サルモシン発現のために、T0世代トランスジェニック植物の切り離した葉のEtOH誘導性の導入遺伝子の発現および誘導のためのベクターを使用するAgrobacterium媒介性リーフディスク形質転換によって、N.benthamianaを形質転換した。これは、Schulzら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA.112、E5454~E5460(2015)に記載されているように行った。
Spinacia oleracea cv.Fruhes Riesenblatt植物を温室(それぞれ19~23℃および17~20℃の昼および夜の温度、12時間光および35~70%湿度)で生育させた。6週齢の植物を実施例2に記載されている注射器によるインフィルトレーションに使用した。組換えタンパク質の発現は、クマシー染色を用いるSDS-PAGEを使用して確認した(図23)。
本発明者らは、実施例6に記載されているように、Salmonellaの他の株に対して植物で作られた組換えサルモシンの抗菌活性をさらに解析した。サルモシンの抗菌活性スペクトルを決定するために、105種のS.enterica ssp.enterica血清型を代表する109株を選択し、スクリーニングした(表9)。スクリーニングは、2003年~2012年にヒトSalmonella感染の少なくとも100の発生を引き起こしたとして米国疾病管理予防センター(CDC)(www.cdc.gov/nationalsurveillance/pdfs/salmonella-annual-report-2013-508c.pdf)で記述されている、(血清型TyphiおよびI4,5:12:r:-を除いて)すべての血清型のそれぞれ1株、血清型Typhimurium、EnteritidisおよびJavianaの2株ならびに100未満の発生を引き起こした、またはCDCに報告されていない6血清型を含んでいた。
Salmonella汚染した肉表面の制御のための、植物で生成した個別のサルモシンScolE1aおよびサルモシン混合物の殺菌効果をシミュレーション研究で解析した。
植物TSP抽出物中に含まれる植物発現性組換えサルモシンの、翻訳後修飾を含めた一次構造を、マトリックス支援レーザー脱離/イオン化(MALDI)飛行時間型(TOF)質量解析(MS)によって解析した。
タンパク質末端のシーケンシングはISD解析によって行った。ISDフラグメントスペクトルのアノテーションは、BioTools(バージョン3.2、Bruker Daltonics、Bremen、Germany)を使用して、フラグメントイオンに対するm/z値のインシリコ生成および得られたISDスペクトル内に観察されるフラグメントシグナルのm/z値とのそれらの比較によって、行った。このアプローチは、末端アミノ酸配列の特定および存在する修飾の特定を可能にした。
アミノ酸およびヌクレオチド配列
配列番号1 サルモシンScolE2のアミノ酸配列
MSGGDGIGHN SGAHSTGGVN GSSSGRGGSS SGGGNNPNSG PGWGTTHTPD GHDIHNYNPG EFGGGGHKPG GNGGNHSGGT GDGQPPGAAM AFGFPALVPA GAGGLAVTVS GDALAAAIAD VLAVLKGPFK FGAWGIALYG ILPTEIAKDD PRMMSKIVTS LPADAVTESP VSSLPLDQAT VSVTKRVTDV VKDERQHIAV VAGVPASIPV VDAKPTTHPG VFSVSVPGLP DLQVSTVKNA PAMTALPRGV TDEKDRTVHP AGFTFGGSSH EAVIRFPKES GQAPVYVSVT DVLTPEQVKQ RQDEENRRQQ EWDATHPVEV AERNYRLASD ELNRANVDVA GKQERQIQAA QAVAARKGEL DAANKTFADA KEEIKKFERF AHDPMAGGHR MWQMAGLKAQ RAQNEVNQKQ AEFNAAEKEK ADADAALNVA LESRKQKEQK AKDASDKLDK ENKRNHPGKA TGKGQPVGDK WLEDAGKEAG APVPDRIADK LRDKEFKNFD DFRKKFWEEV SKDPELSKQF IPGNKKRMSQ GLAPRARNKD TVGGRRSFEL HHDKPISQDG GVYDMDNIRV TTPKLHIDIH RGK
配列番号2 サルモシンScolE3のアミノ酸配列
MSGGDGRGHN TGAHSTSGNI NGGPTGLGVS GGASDGSGWS SENNPWGGGS GSGIHWGGGS GRGNGGGNGN SGGGSGTGGN LSAVAAPVAF GFPALSTPGA GGLAVSISAS ELSAAIAGII AKLKKVNLKF TPFGVVLSSL IPSEIAKDDP NMMSKIVTSL PADDITESPV SSLPLDKATV NVNVRVVDDV KDERQNISVV SGVPMSVPVV DAKPTERPGV FTASIPGAPV LNISVNNSTP AVQTLSPGVT NNTDKDVRPA GFTQGGNTRD AVIRFPKDSG HNAVYVSVSD VLSPDQVKQR QDEENRRQQE WDATHPVEVA EREYENARAE LEAENKNVHS LQVALDGLKN TAEGLALSDA GRHPLTSSES RFVAVPGYSG GGVHFDATAT VDSRDRLNSL LSLGGAAYVN NVLELGEVSA PTEDGLKVGN AIKNAMIEVY DKLRQRLITR QNEINHAQVS LNTAIESRNK KEEKKRSAEN KLNEERNKPR KGTKDYGHDY HPAPETEEIK GLGDIKKGIP KTPKQNGGGK RKRWIGDKGR KIYEWDSQHG ELEGYRASDG QHLGSFDPKT GKQLKGPDPK RNIKKYL
配列番号3 サルモシンScolE7のアミノ酸配列
MSGGDGIGHN SGAHSTGGVN GSSSGSGGSS SGSGNNPNSG PGWGTTHTPN GDIHNYNPGE FGGGGNKPGG HGGNSGNHDG SSGNGQPSAA PMAFGFPALA PAGAGSLAVT VSGEALSAAI ADIFAALKGP FKFGAWGIAL YGIMPTEIAK DDPNMMSKIM TSLPADTVTD TPVSSLPLDQ ATVSVTKRVA DVVKDERQHI AVVAGVPMSV PVVDAKPTTR PGIFSATVPG LPALEVSTGK SIPASTALPR GITEDKDRTE HPAGFTFGGS SHDAVIRFPK ESGQAPVYVS VTDVLTPEQV KQRQDEESRR QQEWDATHPV EVAERNYRLA SDELNRVNAD VAGKQERQAQ AGQAVAARKG ELDAANKTFA DAKEEIKKFE HFARDPMAGG HRMWQMAGLK AQRAQNEVNQ KQAEFDAAEK EKADADAALN AALESRKQKE QKAKDTKERL DKENKRNQPG KATGKGQPVS DKWLEDAGKE SGSPIPDSIA DKLRDKEFRN FDDFRKKFWE EVSKDPELSK QFIKGNRDRM QVGKAPKSRK KDAAGKRTSF ELHHDKPVSQ DGGVYDMDNL RITTPKRHID IHRGQ
配列番号4 サルモシンScolE1aのアミノ酸配列
MADNTIAYYE DGVPHSADGK VVIVIDGKMP VDTGAGGTGG GGGGKVGGTS ESSAAIHATA KWSTAQLKKT LAEKAARERE TAAAMAAAKA KRDALTQHLK DIVNDVLRHN ASRTPSATDL AHANNMAMQA EAQRLGRAKA EEKARKEAEA AELAFQEAER QREEAVRQLA ETERQLKQAE EEKRLAALSD EARAVENARK NLDTAKSELA NVDSDIERQR SQLSSLDADV KKAEENLRLT MRIKGRIGRK MQAKSQAIVD DKKRIYSDAE NVLNTMTVNR NLKAQQVTDA ENELKVAIDN LNSSQMKNAV DATVSFYQTL TEKYGEKYSL IAQELAEKSK GKKIGNVDEA LAAFEKYKDV LDKKFSKADR DAIVNALKSF NYDDWAKHLD QFAKYLKITG HVSFGYDVVS DVLKASETGD WKPLFITLEQ KVLDTGMSYL VVLMFSLIAG TTLGIFGVAI ITAILCSFVD KYILNALNDA
LGI
配列番号5 サルモシンScolE1bのアミノ酸配列
MSDNTIAYYE DGVPYSADGQ VVIVIDGKMP VDTGAGGTGG GGGGKVGGTS ESSAAIHATA KWSKAQLQKS LEEKAARERE TAAAMAAAKA KRDALTQHLK DIVNDVLRYN ASRTPSATDL AHANNMAMQA EAQRLGRAKA EEKARKEAEA AEKSLQEAER QREEAARQRA EAERQLKQAE AEEKRLAALS EEARAVEITQ KNLAAAQSEL SKMDGEIKSL NVRLSTSIHA RDAEMNSLSG KRNELAQESA KYKELDELVK KLEPRANDPL QNRPFFDATS RRARAGDTLA EKQKEVTASE TRINELNTEI NQVRGAISQA NNNRNLKVQQ VTETENALKV AIDNLNSSQM KNAVDATVSF YQTLTAKYGE KYSLIAQELA EQSKGKKISN VDEALAAFEK YKDVLDKKFS KADRDAIVNA LKSVDYADWA KHLDQFSRYL KISGRVSTGY DIYSDIRKGM DTNDWRPLFL TLEKLAVDAG VGYIVALGFS VIASTALGIW GVAIITGVIC SFVDKKDLEK LNEALGI
配列番号6 サルモシンSpstのアミノ酸配列
MFIKSGGNLT IRTFGGLGVG GDFDSDTWRR RSTDSWVPYS EYIAIECIVA PNQLYQLLTD VAQVETVAAQ LAQVGYQYLQ GRLRLVREDG SCTDFSGKAM LDNLLNKSKD ILDLDFLHVS EGYRSEAYWP GQSSGITIGY GVDIGHQSEE GLHKWGVPQS IIDKIKDYFG ITGEAANTLL KGLKDKTLGL SDREIKQFSD IVKKQATADI INKYNAATKG ITFDKIPYNT RTAIIDLFYQ YSAPKGAPKS WGFIINNDWN GFYNELMNFG DKHTTRRERE AALVLSDIVN NQYIYK
配列番号7 サルモシンScolE2免疫タンパク質SImmE2のアミノ酸配列
MELKKSISDY TEAEFKKIIE AIINCEGDEK TQDDNLEFFI RVTEYPSGSD LIYYPEGDND GSTEAIIKEI KEWRAANGKP GFKQADSSYF VSFDYRDGDW
配列番号8 サルモシンScolE7免疫タンパク質SImmE7のアミノ酸配列
MELKNSISDY TEAEFIEFMK EIDKENVAET DDKLDLLLNH FEQVTEHPDG TDLIYYAASD AESTPEAITK KIKEWRAANG KPGFKQG
配列番号9 コリシンS4のアミノ酸配列
MAKELSVYGP TAGESMGGTG ANLNQQGGNN NSNSGVHWGG GSGSGNGGRE HGSQTGWGWS KTNNPDVPPY VDDNGQVRIT ITNGLVKTPV YGVPGAGGNS DVQGGYIPEN PNDEVARKWD KNNLPREIDV SIDGFKYRVT LNDNGRAIGI LRTGVRPYVG SEKAKAGIME KINHKTPEEI YEALGFNKDE SQRQEKAKQQ AEDAWDRLPP NVRKFDVDVE QFHYLVVLDD YGNVLSVTRT GVRPYVGSEK AKAGIMDKVD HKTPEEIYEA LGFNNEEPQR QNQAKKAAYD VFYSFSMNRD RIQSDVLNKA AEVISDIGNK VGDYLGDAYK SLAREIADDV KNFQGKTIRS YDDAMASLNK VLSNPGFKFN RADSDALANV WRSIDAQDMA NKLGNISKAF KFADVVMKVE KVREKSIEGY ETGNWGPLML EVESWVLSGI ASAVALGVFS ATLGAYALSL GAPAIAVGIV GILLAAVVGA LLDDKFADAL NKEIIKPAH
配列番号10 コリシン5のアミノ酸配列
MDKVTDNSPD VESTESTEGS FPTVGVDTGD TITATLATGT ENVGGGGGAF GGASESSAAI HATAKWSTAQ LKKHQAEQAA RAAAAEAALA KAKSQRDALT QRLKDIVNDA LRANAARSPS VTDLAHANNM AMQAEAERLR LAKAEQKARE EAEAAEKALR EAERQRDEIA RQQAETAHLL AMAEAAEAEK NRQDSLDEEH RAVEVAEKKL AEAKAELAKA ESDVQSKQAI VSRVAGELEN AQKSVDVKVT GFPGWRDVQK KLERQLQDKK NEYSSVTNAL NSAVSIRDAK KTDVQNAEIK LKEAKDALEK SQVKDSVDTM VGFYQYITEQ YGEKYSRIAQ DLAEKAKGSK FSSVDEALAA FEKYKNVLDK KISKVDRDAI FNALESVNYD ELSKNLTKIS KSLKITSRVS FLYDVGSDFK NAIETGNWRP LFVTLEKSAV DVGVAKIVAL MFSFIVGVPL GFWGIAIVTG IVSSYIGDDE LNKLNELLGI
配列番号11 コリシン10のアミノ酸配列
MDKVTDNSPD VESTESTEGS FPTVGVDTGD TITATLATGT ENVGGGGGAF GGASESSAAI HATAKWSTAQ LKKHQAEQAA RAAAAEAALA KAKSQRDALT QRLKDIVNDA LRANAARSPS VTDLAHANNM AMQAEAERLR LAKAEQKARE EAEAAEKALR EAERQRDEIA RQQAETAHLL AMAEAAEAEK NRQDSLDEEH RAVEVAEKKL AEAKAELAKA ESDVQSKQAI VSRVAGELEN AQKSVDVKVT GFPGWRDVQK KLERQLQDKK NEYSSVTNAL NSAVSIRDAK KTEVQNAEIK LKEAKDALEK SQVKDSVDTM VGFYQYITEQ YGEKYSRIAQ DLAEKAKGSK FNSVDEALAA FEKYKNVLDK KFSKVDRDDI FNALESITYD EWAKHLEKIS RALKVTGYLS FGYDVWDGTL KGLKTGDWKP LFVTLEKSAV DFGVAKIVAL MFSFIVGAPL GFWGIAIITG IVSSYIGDDE LNKLNELLGI
配列番号12 コリシンIaのアミノ酸配列
MSDPVRITNP GAESLGYDSD GHEIMAVDIY VNPPRVDVFH GTPPAWSSFG NKTIWGGNEW VDDSPTRSDI EKRDKEITAY KNTLSAQQKE NENKRTEAGK RLSAAIAARE KDENTLKTLR AGNADAADIT RQEFRLLQAE LREYGFRTEI AGYDALRLHT ESRMLFADAD SLRISPREAR SLIEQAEKRQ KDAQNADKKA ADMLAEYERR KGILDTRLSE LEKNGGAALA VLDAQQARLL GQQTRNDRAI SEARNKLSSV TESLNTARNA LTRAEQQLTQ QKNTPDGKTI VSPEKFPGRS STNHSIVVSG DPRFAGTIKI TTSAVIDNRA NLNYLLTHSG LDYKRNILND RNPVVTEDVE GDKKIYNAEV AEWDKLRQRL LDARNKITSA ESAVNSARNN LSARTNEQKH ANDALNALLK EKENIRNQLA GINQKIAEEK RKQDELKATK DAINFTTEFL KSVSEKYGAK AEQLAREMAG QAKGKKIRNV EEALKTYEKY RADINKKINA KDRAAIAAAL ESVKLSDISS NLNRFSRGLG YAGKFTSLAD WITEFGKAVR TENWRPLFVK TETIIAGNAA TALVALVFSI LTGSALGIIG YGLLMAVTGA LIDESLVEKA NKFWGI
配列番号13 コリシンIbのアミノ酸配列
MSDPVRITNP GAESLGYDSD GHEIMAVDIY VNPPRVDVFH GTPPAWSSFG NKTIWGGNEW VDDSPTRSDI EKRDKEITAY KNTLSAQQKE NENKRTEAGK RLSAAIAARE KDENTLKTLR AGNADAADIT RQEFRLLQAE LREYGFRTEI AGYDALRLHT ESRMLFADAD SLRISPREAR SLIEQAEKRQ KDAQNADKKA ADMLAEYERR KGILDTRLSE LEKNGGAALA VLDAQQARLL GQQTRNDRAI SEARNKLSSV TESLKTARNA LTRAEQQLTQ QKNTPDGKTI VSPEKFPGRS STNHSIVVSG DPRFAGTIKI TTSAVIDNRA NLNYLLTHSG LDYKRNILND RNPVVTEDVE GDKKIYNAEV AEWDKLRQRL LDARNKITSA ESAINSARNN VSARTNEQKH ANDALNALLK EKENIRSQLA DINQKIAEEK RKRDEINMVK DAIKLTSDFY RTIYDEFGKQ ASELAKELAS VSQGKQIKSV DDALNAFDKF RNNLNKKYNI QDRMAISKAL EAINQVHMAE NFKLFSKAFG FTGKVIERYD VAVELQKAVK TDNWRPFFVK LESLAAGRAA SAVTAWAFSV MLGTPVGILG FAIIMAAVSA LVNDKFIEQV NKLIGI
配列番号14 コリシンMのアミノ酸配列
METLTVHAPS PSTNLPSYGN GAFSLSAPHV PGAGPLLVQV VYSFFQSPNM CLQALTQLED YIKKHGASNP LTLQIISTNI GYFCNADRNL VLHPGISVYD AYHFAKPAPS QYDYRSMNMK QMSGNVTTPI VALAHYLWGN GAERSVNIAN IGLKISPMKI NQIKDIIKSG VVGTFPVSTK FTHATGDYNV ITGAYLGNIT LKTEGTLTIS ANGSWTYNGV VRSYDDKYDF NASTHRGIIG ESLTRLGAMF SGKEYQILLP GEIHIKESGK R
配列番号15 実施例でサルモシンScolE2の発現に使用したヌクレオチド配列
atgtctggtggtgatggtatcggtcacaatagcggtgctcattctactggtggtgtgaacggttcttcatctggtaggggtggtagttcttcaggtggtggtaacaaccctaactctggtcctggttggggtactactcatactcctgatggtcacgatatccacaactacaaccctggtgagtttggtggtggtggacataagcctggtggaaacggtggtaatcactctggtggtactggtgatggacaacctcctggtgctgctatggcttttggtttccctgctcttgttcctgctggtgctggtggtcttgctgttactgtttctggtgatgctctggctgctgcaattgctgatgtgcttgctgttctgaagggacctttcaagtttggtgcttggggtatcgctctgtacggtattcttcctaccgagatcgctaaggatgatccaaggatgatgagcaagatcgtgacctctttgcctgctgatgctgtgactgagtctcctgtgtcatctctgcctcttgatcaggctactgtgagcgttaccaagagggttaccgatgtggttaaggatgagaggcagcacattgctgttgttgctggtgtgcctgcttctatccctgttgttgatgctaagcctactacccaccctggtgtgttctctgtttctgttcctggtctgcctgatctgcaggtttcaactgtgaagaacgctcctgctatgactgctttgcctaggggtgttactgatgagaaggataggactgttcaccctgctggtttcaccttcggtggttcttctcatgaggctgtgatcaggttccctaaagagtctggtcaggctcctgtttacgtgtcagtgaccgatgttcttacccctgagcaggttaagcagagacaggatgaagagaatagaaggcagcaagagtgggatgctactcaccctgttgaagtggctgagaggaattacaggctggcttctgatgagctgaacagggctaatgtggatgtggctggtaagcaagagaggcagattcaagctgctcaagctgttgctgctagaaagggtgaactggatgctgctaacaagaccttcgctgatgctaaagaagagatcaagaagttcgagaggttcgctcacgatcctatggctggtggacacagaatgtggcaaatggctggtcttaaggctcagagggctcagaatgaggttaaccagaaacaagctgagttcaacgctgctgagaaagaaaaggctgatgcagatgctgctctgaacgtggcacttgagtctaggaagcagaaagaacaaaaggcaaaggatgctagcgataagctggataaggaaaacaagaggaaccaccctggaaaggctactggtaagggtcaacctgttggtgataagtggcttgaggatgctggtaaagaagctggagcacctgttccagataggatcgctgataagctgagagataaggaattcaagaacttcgatgattttaggaagaagttctgggaagaggtaaatttctagtttttctccttcattttcttggttaggacccttttctctttttatttttttgagctttgatctttctttaaactgatctattttttaattgattggttatggtgtaaatattacatagctttaactgataatctgattactttatttcgtgtgtctatgatgatgatgataactgcaggttagcaaggatcctgagctgagcaagcagttcatccctggtaacaagaaaaggatgagccagggtcttgctcctagggctagaaacaaggatactgtgggtggtagaagatccttcgagctgcatcacgataagccaatctctcaggatggtggtgtttacgatatggataacatcagggtgaccaccccaaagctgcacatcgatattcataggggaaagtaa
配列番号16 実施例でサルモシンScolE3の発現に使用したヌクレオチド配列
atgtctggtggtgatggtaggggtcataataccggtgctcatagcaccagcggtaacattaacggtggtcctactggtcttggtgtgtcaggtggtgcttctgatggttctggttggtcctctgagaacaatccttggggtggtggtagcggttctggtattcactggggaggtggaagtggtagaggtaatggtggtggaaacggtaacagtggtggtggttctggaactggtggtaacctttctgctgttgctgctcctgttgctttcggtttccctgctctttctactcctggtgctggtggtttggctgtgtctatttctgcttctgagctgagcgctgctatcgctggtattatcgctaagctgaagaaggtgaacctgaagttcacccctttcggtgtggtgctgtcctctttgattcctagcgagatcgctaaggatgatcctaacatgatgagcaagatcgtgaccagcctgcctgctgatgatattaccgagtctcctgtgtcctctctgcctcttgataaggctactgtgaatgtgaacgtgagggtggtggatgatgtgaaggatgagaggcagaacatcagcgttgtgtctggtgttcctatgtctgtgcctgttgtggatgctaagcctactgaaaggcctggtgtgttcaccgcttctattccaggtgctcctgtgctgaacatctccgtgaacaattctacccctgctgtgcagactctttctcctggtgtgactaacaacaccgataaggatgttaggcctgctggtttcactcagggtggtaataccagggatgctgtgatcaggttccctaaggattctggtcacaacgcagtgtacgtgtccgtgtctgatgtgttgtctccagatcaggttaagcagaggcaggatgaagagaatagaaggcagcaagagtgggatgctactcaccctgttgaagttgctgagagagagtacgagaacgctagagctgaacttgaggctgaaaacaagaacgtgcacagccttcaggtggcacttgatggtcttaagaataccgctgagggtctggctctttctgatgctggtagacatcctctgaccagcagcgagtctagatttgttgctgtgcctggttactccggtggtggtgttcattttgatgctaccgctaccgtggatagcagggataggcttaactctcttctgtctcttggtggtgctgcttacgtgaacaacgtgttggagcttggtgaggtgtcagctcctactgaggatggtttgaaggtgggaaacgctatcaagaacgctatgatcgaggtgtacgataagctgaggcagaggcttattaccaggcagaacgagatcaaccacgctcaggtgtcacttaacaccgctatcgagtctaggaacaagaaagaggaaaagaagaggtccgcagagaacaagctgaacgaagagagaaacaagcctagaaagggtactaaggattacggacacgattaccatcctgctccagagactgaagaaatcaagggtctgggtgatatcaagaagggtatccctaagacccctaagcagaacggtggtggtaagagaaagagatggatcggagataagggtagaaagatctacgagtgggatagccagcatggtgagcttgaaggtaaatttctagtttttctccttcattttcttggttaggacccttttctctttttatttttttgagctttgatctttctttaaactgatctattttttaattgattggttatggtgtaaatattacatagctttaactgataatctgattactttatttcgtgtgtctatgatgatgatgataactgcaggttatagggcttcagatggtcagcacctgggaagctttgatcctaagactggtaagcagctgaagggtcctgatccaaagaggaacatcaagaagtacctttaa
配列番号17 実施例でサルモシンScolE7の発現に使用したヌクレオチド配列
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配列番号18 実施例でサルモシンScolE1aの発現に使用したヌクレオチド配列
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配列番号19 実施例でサルモシンScolE1bの発現に使用したヌクレオチド配列
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配列番号20 実施例でサルモシンSpstの発現に使用したヌクレオチド配列
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配列番号21 実施例でサルモシンScolE2免疫タンパク質SImmE2の発現に使用したヌクレオチド配列
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配列番号22 実施例でサルモシンScolE7免疫タンパク質SImmE7の発現に使用したヌクレオチド配列
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配列番号23 実施例でサルモシンScolE1aの発現に使用したTMVベースのバイナリーベクターのヌクレオチド配列
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配列番号24 実施例でサルモシンScolE2免疫タンパク質ImmScolE2の発現に使用したPVXベースのバイナリーベクターのヌクレオチド配列
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Claims (25)
- Salmonellaによる対象物(ヒトを除く)の感染または汚染を予防するまたは減少させる方法であって、前記対象物を、以下のアミノ酸配列のいずれか1つを含むか、それからなるタンパク質と接触させることを含む方法:
(A-i)配列番号1、
(A-ii)配列番号2、
(A-iii)配列番号3、
(A-iv)配列番号4、
(A-v)配列番号5、もしくは
(A-vi)配列番号6、
または
(B-i)配列番号1のアミノ酸配列に対して少なくとも90%の配列同一性を有するアミノ酸配列、
(B-ii)配列番号2のアミノ酸配列に対して少なくとも90%の配列同一性を有するアミノ酸配列、
(B-iii)配列番号3のアミノ酸配列に対して少なくとも90%の配列同一性を有するアミノ酸配列、
(B-iv)配列番号4のアミノ酸配列に対して少なくとも90%の配列同一性を有するアミノ酸配列、
(B-v)配列番号5のアミノ酸配列に対して少なくとも90%の配列同一性を有するアミノ酸配列、もしくは
(B-vi)配列番号6のアミノ酸配列に対して少なくとも90%の配列同一性を有するアミノ酸配列、
または
(D-i)配列番号1のアミノ酸配列に対して1~40個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するアミノ酸配列、
(D-ii)配列番号2のアミノ酸配列に対して1~40個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するアミノ酸配列、
(D-iii)配列番号3のアミノ酸配列に対して1~40個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するアミノ酸配列、
(D-iv)配列番号4のアミノ酸配列に対して1~40個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するアミノ酸配列、
(D-v)配列番号5のアミノ酸配列に対して1~40個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するアミノ酸配列、もしくは
(D-vi)配列番号6のアミノ酸配列に対して1~20個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するアミノ酸配列、
または
(E-i)配列番号1の少なくとも525個の連続的なアミノ酸残基を含むか、それからなるアミノ酸配列、
(E-ii)配列番号2の少なくとも555個の連続的なアミノ酸残基を含むか、それからなるアミノ酸配列、
(E-iii)配列番号3の少なくとも555個の連続的なアミノ酸残基を含むか、それからなるアミノ酸配列、
(E-iv)配列番号4の少なくとも435個の連続的なアミノ酸残基を含むか、それからなるアミノ酸配列、
(E-v)配列番号5の少なくとも475個の連続的なアミノ酸残基を含むか、それからなるアミノ酸配列、もしくは
(E-vi)配列番号6の少なくとも270個の連続的なアミノ酸残基を含むか、それからなるアミノ酸配列。 - 前記タンパク質が、項目
-(A-iv)、(B-iv)、(D-iv)もしくは(E-iv)
または
-(A-v)、(B-v)、(D-v)もしくは(E-v)
のものである、請求項1に記載の方法。 - Salmonellaによる感染または汚染を処置する方法で使用するための、以下のアミノ酸配列のいずれか1つを含むか、それからなるタンパク質:
(A-i)配列番号1、
(A-iii)配列番号3、
(A-iv)配列番号4、
(A-v)配列番号5、もしくは
(A-vi)配列番号6、
または
(B-i)配列番号1のアミノ酸配列に対して少なくとも90%の配列同一性を有するアミノ酸配列、
(B-iii)配列番号3のアミノ酸配列に対して少なくとも90%の配列同一性を有するアミノ酸配列、
(B-iv)配列番号4のアミノ酸配列に対して少なくとも90%の配列同一性を有するアミノ酸配列、
(B-v)配列番号5のアミノ酸配列に対して少なくとも90%の配列同一性を有するアミノ酸配列、もしくは
(B-vi)配列番号6のアミノ酸配列に対して少なくとも90%の配列同一性を有するアミノ酸配列、
または
(D-i)配列番号1のアミノ酸配列に対して1~40個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するアミノ酸配列、
(D-iii)配列番号3のアミノ酸配列に対して1~40個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するアミノ酸配列、
(D-iv)配列番号4のアミノ酸配列に対して1~40個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するアミノ酸配列、
(D-v)配列番号5のアミノ酸配列に対して1~40個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するアミノ酸配列、もしくは
(D-vi)配列番号6のアミノ酸配列に対して1~20個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するアミノ酸配列、
または
(E-i)配列番号1の少なくとも525個の連続的なアミノ酸残基を含むか、それからなるアミノ酸配列、
(E-iii)配列番号3の少なくとも555個の連続的なアミノ酸残基を含むか、それからなるアミノ酸配列、
(E-iv)配列番号4の少なくとも435個の連続的なアミノ酸残基を含むか、それからなるアミノ酸配列、
(E-v)配列番号5の少なくとも475個の連続的なアミノ酸残基を含むか、それからなるアミノ酸配列、もしくは
(E-vi)配列番号6の少なくとも270個の連続的なアミノ酸残基を含むか、それからなるアミノ酸配列。 - 前記タンパク質が、項目
-(A-iv)、(B-iv)、(D-iv)もしくは(E-iv)または
-(A-v)、(B-v)、(D-v)もしくは(E-v)
のものである、請求項3に記載のタンパク質。 - SalmonellaがSalmonella entericaである、請求項3または4に記載のタンパク質。
- SalmonellaがSalmonella enterica ssp.entericaである、請求項3または4に記載のタンパク質。
- 請求項1または2に記載の方法であって、Salmonella entericaに対する、前記タンパク質の毒性が以下である:感受性Salmonella enterica株のcm2あたり1x107cfu/mLの0.14mL細菌溶液を接種した軟寒天重層プレート上に、5マイクロリットルのクラス(b)から(d)の前記タンパク質および配列番号1のタンパク質の溶液をスポッティングし、その後37℃で寒天プレートをインキュベートしてから12時間に、前記タンパク質および配列番号1のタンパク質が、同じ直径の、Salmonella enterica ssp.enterica血清型Newport株ATCC(登録商標)6962(商標)*の生存可能な細菌を含んでいないスポットを生成し、ここでクラス(b)から(d)のタンパク質の濃度が、配列番号1のタンパク質の比較溶液のものの最大で5倍である;
前記方法。 - 請求項3~6のいずれか一項に記載のタンパク質であって、Salmonella entericaに対する、前記タンパク質の毒性が以下である:感受性Salmonella enterica株のcm2あたり1x107cfu/mLの0.14mL細菌溶液を接種した軟寒天重層プレート上に、5マイクロリットルのクラス(b)から(d)の前記タンパク質および配列番号1のタンパク質の溶液をスポッティングし、その後37℃で寒天プレートをインキュベートしてから12時間に、前記タンパク質および配列番号1のタンパク質が、同じ直径の、Salmonella enterica ssp.enterica血清型Newport株ATCC(登録商標)6962(商標)*の生存可能な細菌を含んでいないスポットを生成し、ここでクラス(b)から(d)のタンパク質の濃度が、配列番号1のタンパク質の比較溶液のものの最大で5倍である、
前記タンパク質。 - 以下のアミノ酸配列のいずれか1つを有する1種または複数のタンパク質を含む組成物:
(A-i)配列番号1、
(A-iii)配列番号3、
(A-iv)配列番号4、
(A-v)配列番号5、もしくは
(A-vi)配列番号6、
または
(B-i)配列番号1のアミノ酸配列に対して少なくとも90%の配列同一性を有するアミノ酸配列、
(B-iii)配列番号3のアミノ酸配列に対して少なくとも90%の配列同一性を有するアミノ酸配列、
(B-iv)配列番号4のアミノ酸配列に対して少なくとも90%の配列同一性を有するアミノ酸配列、
(B-v)配列番号5のアミノ酸配列に対して少なくとも90%の配列同一性を有するアミノ酸配列、もしくは
(B-vi)配列番号6のアミノ酸配列に対して少なくとも90%の配列同一性を有するアミノ酸配列、
または
(D-i)配列番号1のアミノ酸配列に対して1~40個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するアミノ酸配列、
(D-iii)配列番号3のアミノ酸配列に対して1~40個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するアミノ酸配列、
(D-iv)配列番号4のアミノ酸配列に対して1~40個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するアミノ酸配列、
(D-v)配列番号5のアミノ酸配列に対して1~40個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するアミノ酸配列、もしくは
(D-vi)配列番号6のアミノ酸配列に対して1~20個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するアミノ酸配列、
または
(E-i)配列番号1の少なくとも525個の連続的なアミノ酸残基を含むか、それからなるアミノ酸配列、
(E-iii)配列番号3の少なくとも555個の連続的なアミノ酸残基を含むか、それからなるアミノ酸配列、
(E-iv)配列番号4の少なくとも435個の連続的なアミノ酸残基を含むか、それからなるアミノ酸配列、
(E-v)配列番号5の少なくとも475個の連続的なアミノ酸残基を含むか、それからなるアミノ酸配列、もしくは
(E-vi)配列番号6の少なくとも270個の連続的なアミノ酸残基を含むか、それからなるアミノ酸配列。 - -項目(A-iv)、(B-iv)、(D-iv)もしくは(E-iv)に記載の、および/または項目(A-v)、(B-v)、(D-v)もしくは(E-v)に記載のタンパク質;ならびに
-項目(A-i)、(B-i)、(D-i)または(E-i)に記載のタンパク質
を含む、請求項9に記載の組成物。 - 項目(A-iii)、(B-iii)、(D-iii)または(E-iii)に記載のタンパク質をさらに含む、請求項10に記載の組成物。
- Salmonellaによる感染を処置する方法で使用するための、請求項9から11のいずれか一項に記載の組成物。
- SalmonellaがSalmonella entericaである、請求項12に記載の組成物。
- SalmonellaがSalmonella enterica ssp.entericaである、請求項12に記載の組成物。
- 前記組成物が植物材料またはその抽出物であり、植物材料が、前記タンパク質を発現した植物由来の材料であり、または前記組成物が、前記タンパク質を含む水溶液である、請求項9から14のいずれか1項に記載の組成物。
- 前記植物材料が、前記タンパク質を発現した食用植物由来の材料である、請求項15に記載の組成物。
- 前記対象物が前記タンパク質の水溶液で噴霧される、もしくは前記タンパク質の水溶液中に浸漬される、または前記対象物が少なくとも10秒間、前記タンパク質の水溶液中に浸漬される、請求項1に記載の方法。
- 前記対象物が少なくとも1分間、前記タンパク質の水溶液中に浸漬される、請求項17に記載の方法。
- 前記対象物が食品もしくは動物飼料である、または前記食品が動物の死体全体、肉、卵、生の果物もしくは野菜である、請求項1、17、または18のいずれか1項に記載の方法。
- 前記SalmonellaがSalmonella entericaである、請求項1、2、および17~19のいずれか1項に記載の方法。
- 前記SalmonellaがSalmonella enterica ssp.entericaである、請求項20に記載の方法。
- 以下のアミノ酸配列:
(A-i)配列番号1、
(A-iii)配列番号3、
(A-iv)配列番号4、
(A-v)配列番号5、もしくは
(A-vi)配列番号6、
または
(B-i)配列番号1のアミノ酸配列に対して少なくとも90%の配列同一性を有するアミノ酸配列、
(B-iii)配列番号3のアミノ酸配列に対して少なくとも90%の配列同一性を有するアミノ酸配列、
(B-iv)配列番号4のアミノ酸配列に対して少なくとも90%の配列同一性を有するアミノ酸配列、
(B-v)配列番号5のアミノ酸配列に対して少なくとも90%の配列同一性を有するアミノ酸配列、もしくは
(B-vi)配列番号6のアミノ酸配列に対して少なくとも90%の配列同一性を有するアミノ酸配列、
または
(D-i)配列番号1のアミノ酸配列に対して1~40個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するアミノ酸配列、
(D-iii)配列番号3のアミノ酸配列に対して1~40個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するアミノ酸配列、
(D-iv)配列番号4のアミノ酸配列に対して1~40個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するアミノ酸配列、
(D-v)配列番号5のアミノ酸配列に対して1~40個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するアミノ酸配列、もしくは
(D-vi)配列番号6のアミノ酸配列に対して1~20個のアミノ酸置換、付加、挿入もしくは欠失を有するアミノ酸配列、
または
(E-i)配列番号1の少なくとも525個の連続的なアミノ酸残基を含むか、それからなるアミノ酸配列、
(E-iii)配列番号3の少なくとも555個の連続的なアミノ酸残基を含むか、それからなるアミノ酸配列、
(E-iv)配列番号4の少なくとも435個の連続的なアミノ酸残基を含むか、それからなるアミノ酸配列、
(E-v)配列番号5の少なくとも475個の連続的なアミノ酸残基を含むか、それからなるアミノ酸配列、もしくは
(E-vi)配列番号6の少なくとも270個の連続的なアミノ酸残基を含むか、それからなるアミノ酸のいずれか1つを含むか、それからなるタンパク質を含む組成物を生成する方法であって、
(i)植物中で前記タンパク質を発現させるステップ、
(ii)前記植物から発現タンパク質を含む植物材料を採取するステップ、
(iii)水性バッファーを使用して前記植物材料から前記タンパク質を抽出して、前記タンパク質を含む組成物を得るステップ、
を含む方法。 - 前記タンパク質が、項目
-(A-iv)、(B-iv)、(D-iv)もしくは(E-iv)または
-(A-v)、(B-v)、(D-v)もしくは(E-v)
のものである、請求項22に記載の方法。 - ステップ(i)の植物が、食用植物またはNicotianaである、請求項22または23に記載の方法。
- ステップ(iii)に続いて
(iv)前記組成物から望ましくない混入物を除去するステップ
をさらに含む、請求項22~24のいずれか一項に記載の方法。
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colicin, partial [Escherichia coli],GenBank[online],2016年12月08日,[retrieved on 2021-04-26],Retrieved from the Internet:,https://www.ncbi.nlm.nih.gov/protein/1112732966 |
FOOD RESEARCH INTERNATIONAL,2012年,VOL:45, NR:2,PAGE(S):735 - 744,http://dx.doi.org/10.1016/j.foodres.2011.08.024 |
JOURNAL OF MICROBIOLOGY, BIOTECHNOLOGY AND FOOD SCIENCES,2013年08月,VOL:3, NR:1,PAGE(S):26 - 29,https://pdfs.semanticscholar.org/12e1/d9f283d440a1176da65d3b9af777b0766e33.pdf?_ga=2.76214486.2131355217.1596068608-2143307032.1524705385 |
NATURE REVIEWS | MICROBIOLOGY,2012年12月24日,VOL:11, NR:2,PAGE(S):95 - 105,http://dx.doi.org/10.1038/nrmicro2937 |
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