JP7133549B2 - 細胞凝集低減方法および細胞凝集が低減された治療用組成物 - Google Patents
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Description
本開示は、再生・細胞医療分野における細胞凝集低減方法および細胞凝集が低減された治療用組成物等に関する。
本発明は、さらなる態様において、約3%~約10%のブドウ糖水溶液または酢酸リンゲル液中、または前記ブドウ糖水溶液または酢酸リンゲル液と細胞保存液との混合液中に哺乳動物細胞を含む治療用組成物を提供する。
本発明は、さらなる態様において、哺乳動物細胞を含む細胞製剤であって、前記細胞を約3%~約10%のブドウ糖水溶液または酢酸リンゲル液で分散して哺乳動物に投与する治療用組成物を得るよう用いられる細胞製剤を提供する。
本発明は、さらなる態様において、哺乳動物において疾患を治療する方法であって、
哺乳動物細胞を約3%~約10%のブドウ糖水溶液または酢酸リンゲル液で分散させ治療用組成物を得ること、および
得られた治療用組成物を哺乳動物に投与すること
を含む、方法を提供する。
2.細胞が幹細胞である、前記1に記載の方法。
3.幹細胞が間葉系幹細胞である、前記2に記載の方法。
4.間葉系幹細胞が脂肪組織由来間葉系幹細胞である、前記3に記載の方法。
5.哺乳動物細胞がイヌまたはネコの細胞である、前記1~4のいずれかに記載の方法。
6.哺乳動物細胞がイヌの細胞である、前記5に記載の方法。
7.イヌがビーグルまたはゴールデンレトリバーである、前記6に記載の方法。
8.哺乳動物細胞が脂肪組織由来である、前記1~7のいずれかに記載の方法。
9.脂肪組織が皮下脂肪組織である、前記8に記載の方法。
10.ブドウ糖水溶液が約5%のブドウ糖水溶液である、前記1~9のいずれかに記載の方法。
11.治療用組成物の全量が30~50mlである、前記1~10のいずれかに記載の方法。
12.投与対象の哺乳動物の体重1kgあたり0.5×106個~1×106個の細胞を分散させる、前記1~11のいずれかに記載の方法。
13.0.5×106個~4×107個の細胞を分散させる、前記1~12のいずれかに記載の方法。
14.細胞の分散が、哺乳動物細胞を含む細胞製剤と約3%~約10%のブドウ糖水溶液または酢酸リンゲル液とを混合することを含む、前記1~13のいずれかに記載の方法。
15.細胞製剤が2.5×106個~5×106個/mlで細胞を含む、前記14に記載の方法。
16.細胞製剤が約2.5×106個/mlで細胞を含む、前記15に記載の方法。
17.細胞製剤が約5%のDMSOを含むリン酸緩衝生理食塩水中に哺乳動物細胞を含む、前記14~16のいずれかに記載の方法。
18.細胞製剤がブドウ糖水溶液または酢酸リンゲル液により2.5~100倍希釈される、前記14~17のいずれかに記載の方法。
19.治療用組成物が104個/ml~106個/mlで細胞を含む、前記1~18のいずれかに記載の方法。
20.治療用組成物が、99%~60%の、約3%~約10%のブドウ糖水溶液または酢酸リンゲル液と、1%~40%の、約5%のDMSOを含むリン酸緩衝生理食塩水との混合液中に哺乳動物細胞を含む、前記1~19のいずれかに記載の方法。
21.治療用組成物が哺乳動物において疾患を治療するためのものである、前記1~20のいずれかに記載の方法。
2’.細胞が幹細胞である、前記1’に記載の治療用組成物。
3’.幹細胞が間葉系幹細胞である、前記2’に記載の治療用組成物。
4’.間葉系幹細胞が脂肪組織由来間葉系幹細胞である、前記3’に記載の治療用組成物。
5’.哺乳動物細胞がイヌまたはネコの細胞である、前記1’~4’のいずれかに記載の治療用組成物。
6’.哺乳動物細胞がイヌの細胞である、前記5’に記載の治療用組成物。
7’.イヌがビーグルまたはゴールデンレトリバーである、前記6’に記載の治療用組成物。
8’.哺乳動物細胞が脂肪組織由来である、前記1’~7’のいずれかに記載の治療用組成物。
9’.脂肪組織が皮下脂肪組織である、前記8’に記載の方法。
10’.ブドウ糖水溶液が約5%のブドウ糖水溶液である、前記1’~9’のいずれかに記載の治療用組成物。
11’.治療用組成物の全量が30~50mlである、前記1’~10’のいずれかに記載の治療用組成物。
12’.治療用組成物が投与対象の哺乳動物の体重1kgあたり0.5×106個~1×106個の細胞を含む、前記1’~11’のいずれかに記載の治療用組成物。
13’.治療用組成物が0.5×106個~4×107個の細胞を含む、前記1’~12’のいずれかに記載の治療用組成物。
14’.治療用組成物が哺乳動物細胞を含む細胞製剤と約3%~約10%のブドウ糖水溶液または酢酸リンゲル液とを混合することにより得られる、前記1’~13’のいずれかに記載の治療用組成物。
15’.細胞製剤が2.5×106個~5×106個/mlで細胞を含む、前記14’に記載の治療用組成物。
16’.細胞製剤が約2.5×106個/mlで細胞を含む、前記15’に記載の治療用組成物。
17’.細胞製剤が約5%のDMSOを含むリン酸緩衝生理食塩水中に細胞を含む、前記14’~16’のいずれかに記載の治療用組成物。
18’細胞製剤がブドウ糖水溶液または酢酸リンゲル液により2.5~100倍希釈される、前記14’~17’のいずれかに記載の治療用組成物。
19’.治療用組成物が104個/ml~106個/mlで細胞を含む、前記1’~18’のいずれかに記載の治療用組成物。
20’.治療用組成物が、99%~60%の、約3%~約10%のブドウ糖水溶液または酢酸リンゲル液と、1%~40%の、約5%のDMSOを含むリン酸緩衝生理食塩水との混合液中に哺乳動物細胞を含む、前記1’~19’のいずれかに記載の治療用組成物。
21’.哺乳動物において疾患を治療するための、前記1’~20’のいずれかに記載の治療用組成物。
2’’.細胞が幹細胞である、前記1’’に記載の細胞製剤。
3’’.幹細胞が間葉系幹細胞である、前記2’’に記載の細胞製剤。
4’’.間葉系幹細胞が脂肪組織由来間葉系幹細胞である、前記3’’に記載の細胞製剤。
5’’.哺乳動物細胞がイヌまたはネコの細胞である、前記1’’~4’’のいずれかに記載の細胞製剤。
6’’.哺乳動物細胞がイヌの細胞である、前記5’’に記載の細胞製剤。
7’’.イヌがビーグルまたはゴールデンレトリバーである、前記6’’に記載の細胞製剤。
8’’.哺乳動物細胞が脂肪組織由来である、前記1’’~7’’のいずれかに記載の細胞製剤。
9’’.脂肪組織が皮下脂肪組織である、前記8’’に記載の細胞製剤。
10’’.ブドウ糖水溶液が約5%のブドウ糖水溶液である、前記1’’~9’’のいずれかに記載の細胞製剤。
11’’.治療用組成物の全量が30~50mlである、前記1’’~10’’のいずれかに記載の細胞製剤。
12’’.哺乳動物の体重1kgあたり0.5×106個~1×106個の細胞が投与されるよう用いられる、前記1’’~11’’のいずれかに記載の細胞製剤。
13’’.細胞の分散が、哺乳動物細胞を含む細胞製剤と約3%~約10%のブドウ糖水溶液または酢酸リンゲル液とを混合することを含む、前記1’’~12’’のいずれかに記載の細胞製剤。
14’’.細胞製剤が2.5×106個~5×106個/mlで細胞を含む、前記1’’~13’’のいずれかに記載の細胞製剤。
15’’.細胞製剤が約2.5×106個/mlで細胞を含む、前記14’’に記載の細胞製剤。
16’’.細胞製剤が約5%のDMSOを含むリン酸緩衝生理食塩水中に細胞を含む、前記1’’~15’’のいずれかに記載の細胞製剤。
17’’細胞製剤がブドウ糖水溶液または酢酸リンゲル液により2.5~100倍希釈される、前記1’’~16’’のいずれかに記載の細胞製剤。
18’’.治療用組成物が104個/ml~106個/mlで細胞を含む、前記1’’~17’’のいずれかに記載の細胞製剤。
19’’.治療用組成物が、99%~60%の、約3%~約10%のブドウ糖水溶液または酢酸リンゲル液と、1%~40%の、約5%のDMSOを含むリン酸緩衝生理食塩水との混合液中に哺乳動物細胞を含む、前記1’’~18’’のいずれかに記載の細胞製剤。
20’’.哺乳動物において疾患を治療するための、前記1’’~19’’のいずれかに記載の細胞製剤。
哺乳動物細胞を約3%~約10%のブドウ糖水溶液または酢酸リンゲル液で分散させ治療用組成物を得ること、および
得られた治療用組成物を哺乳動物に投与すること
を含む、方法。
2’’’.細胞が幹細胞である、前記1’’’に記載の方法。
3’’’.幹細胞が間葉系幹細胞である、前記2’’’に記載の方法。
4’’’.間葉系幹細胞が脂肪組織由来間葉系幹細胞である、前記3’’’に記載の方法。
5’’’.哺乳動物細胞がイヌまたはネコの細胞である、前記1’’’~4’’’のいずれかに記載の方法。
6’’’.哺乳動物細胞がイヌの細胞である、前記5’’’に記載の方法。
7’’’.イヌがビーグルまたはゴールデンレトリバーである、前記6’’’に記載の方法。
8’’’.哺乳動物細胞が脂肪組織由来である、前記1’’’~7’’’のいずれかに記載の方法。
9’’’.脂肪組織が皮下脂肪組織である、前記8に記載の方法。
10’’’.ブドウ糖水溶液が約5%のブドウ糖水溶液である、前記1’’’~9’’’のいずれかに記載の方法。
11’’’.治療用組成物の全量が30~50mlである、前記1’’’~10’’’のいずれかに記載の方法。
12’’’.哺乳動物の体重1kgあたり0.5×106個~1×106個の細胞が投与される、前記1’’’~11’’’のいずれかに記載の方法。
13’’’.細胞の分散が、哺乳動物細胞を含む細胞製剤と約3%~約10%のブドウ糖水溶液または酢酸リンゲル液とを混合することを含む、前記1’’’~12’’’のいずれかに記載の方法。
14’’’.細胞製剤が2.5×106個~5×106個/mlで細胞を含む、前記13’’’に記載の方法。
15’’’.細胞製剤が約2.5×106個/mlで細胞を含む、前記14’’’に記載の方法。
16’’’.細胞製剤が約5%のDMSOを含むリン酸緩衝生理食塩水中に細胞を含む、前記13’’’~15’’’のいずれかに記載の方法。
17’’’ 細胞製剤がブドウ糖水溶液または酢酸リンゲル液により2.5~100倍希釈される、前記13’’’~16’’’のいずれかに記載の方法。
18’’’.治療用組成物が104個/ml~106個/mlで細胞を含む、前記1’’’~17’’’のいずれかに記載の方法。
19’’’.治療用組成物が、99%~60%の、約3%~約10%のブドウ糖水溶液または酢酸リンゲル液と、1%~40%の、約5%のDMSOを含むリン酸緩衝生理食塩水との混合液中に哺乳動物細胞を含む、前記1’’’~18’’’のいずれかに記載の方法。
凍結細胞(ビーグル犬の脂肪組織由来幹細胞)(5×106細胞/ml、5%DMSO含有D-PBS中)を解凍し、表1に示すA)~G)の輸液またはDMEM培地と混合して細胞を懸濁して、表2の3種類の濃度の細胞溶液を作成した。この細胞懸濁液を、時々混和しつつ30~40分間放置後、凝集の有無を目視で確認した。この段階での目視での凝集結果を表3にまとめた。本実験を2回実施(表3の1回目、2回目)し、再現性を確認した。
Claims (15)
- 哺乳動物細胞を含む治療用組成物の製造方法であって、哺乳動物細胞を約3%~約10%のブドウ糖水溶液または酢酸リンゲル液で分散させることを含み、前記哺乳動物細胞がイヌの脂肪組織由来間葉系幹細胞である、方法。
- 細胞の分散が、哺乳動物細胞を含む細胞製剤と約3%~約10%のブドウ糖水溶液または酢酸リンゲル液とを混合することを含む、請求項1に記載の方法。
- 細胞製剤が約2.5×106個/mlで細胞を含む、請求項2に記載の方法。
- 細胞製剤が約5%のDMSOを含むリン酸緩衝生理食塩水中に哺乳動物細胞を含む、請求項2または3に記載の方法。
- 細胞製剤がブドウ糖水溶液または酢酸リンゲル液により2.5~100倍希釈される、請求項2~4のいずれかに記載の方法。
- 哺乳動物において疾患を治療する方法であって、
哺乳動物細胞を約3%~約10%のブドウ糖水溶液または酢酸リンゲル液で分散させ治療用組成物を得ること、および
得られた治療用組成物を哺乳動物に投与すること
を含み、前記哺乳動物がイヌであり、前記哺乳動物細胞がイヌの脂肪組織由来間葉系幹細胞である、方法。 - 細胞の分散が、哺乳動物細胞を含む細胞製剤と約3%~約10%のブドウ糖水溶液または酢酸リンゲル液とを混合することを含む、請求項6に記載の方法。
- 細胞製剤が約2.5×106個/mlで細胞を含む、請求項7に記載の方法。
- 細胞製剤が約5%のDMSOを含むリン酸緩衝生理食塩水中に細胞を含む、請求項7または8に記載の方法。
- 細胞製剤がブドウ糖水溶液または酢酸リンゲル液により2.5~100倍希釈される、請求項7~9のいずれかに記載の方法。
- 約3%~約10%のブドウ糖水溶液または酢酸リンゲル液、または前記ブドウ糖水溶液または酢酸リンゲル液と細胞保存液との混合液中に哺乳動物細胞を含み、前記哺乳動物細胞がイヌの脂肪組織由来間葉系幹細胞である、治療用組成物。
- 哺乳動物細胞を含む細胞製剤と約3%~約10%のブドウ糖水溶液または酢酸リンゲル液との混合物である、請求項11に記載の治療用組成物。
- 細胞製剤が約2.5×106個/mlで細胞を含む、請求項12に記載の治療用組成物。
- 細胞製剤が約5%のDMSOを含むリン酸緩衝生理食塩水中に哺乳動物細胞を含む、請求項12または13に記載の治療用組成物。
- 細胞製剤がブドウ糖水溶液または酢酸リンゲル液により2.5~100倍希釈された混合物である、請求項12~14のいずれかに記載の治療用組成物。
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