JP7133247B2 - 検査器具、検査キットおよび検査方法 - Google Patents

Description

本発明は、抗体検査が可能な検査器具、検査キットおよび検査方法に関する。

従来、免疫測定を行う検査器具として、イムノクロマトグラフィー法を応用した検査器具が知られている。

イムノクロマトグラフィー法は、セルロース膜などの多孔質の検査片上を被検体が試薬を溶解しながらゆっくりと流れる性質（毛細管現象）を応用した免疫測定法である。これを利用したイムノクロマト検査器具は、検体中の抗原（あるいは抗体）は検体滴下部にあらかじめ準備された金属コロイド等で標識された抗体（あるいは抗原）（標識抗体（あるいは抗原））と免疫複合体を形成しながらセルロース膜状を移動し、セルロース膜状上にあらかじめ用意されたキャプチャー抗体（あるいは抗原）上に免疫複合体がトラップされ程色し、それを目視により判定する。妊娠診断、インフルエンザ等で応用されている。

イムノクロマトグラフィー法による検査器具の一例としては、検体の滴下窓と検査片の状態を目視する検出窓を有する矩形状のケースに、予め標識抗体と捕捉抗体を固定化させた検査片を封入したものなどが知られている（例えば、特許文献１参照）。

また、現在では、新型コロナウィルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）を引き起こすウィルス（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）の、ヌクレオカプシドタンパク質（以下「Ｎ抗原」）とスパイクタンパク質（以下「Ｓ抗原」）に対して特異的に反応する血中の免疫グロブリンの一種であるＩｇＧ抗体やＩｇＭ抗体を検出する方法が確立されている。

これにより新型コロナウィルス感染症の感染歴の有無を判定する簡易迅速な検査器具として、イムノクロマトグラフィー法によりヒト全血、血清あるいは血漿中のＩｇＧ抗体および／またはＩｇＭ抗体を測定可能なキットも普及し始めている。

これらの抗体検査器具は、検査片の標識抗原としてＳ抗原のみが用いられるもの、Ｎ抗原のみが用いられるもの、またはＳ抗原とＮ抗原とが用いられるものなどがある。また、検査片には、検体中の抗体(例えばＩｇＧ抗体)と標識抗原との結合により形成された免疫複合体を捕捉するために、抗体（捕捉抗体、キャプチャー抗体、抗ＩｇＧ抗体）を塗布したライン（捕捉抗体ライン）が設けられる。

Ｓ抗原もＮ抗原もＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウィルス（以下、新型コロナウィルス）のタンパク質であるので、当該ウィルスの感染歴の有無を判定するには、検体中の抗体とＳ抗原とが結合して形成された免疫複合体、あるいは、検体中の抗体とＮ抗原とが結合して形成された免疫複合体のいずれかが捕捉抗体ラインで検出（捕捉）できれば、判定可能である。

特許第６２１７１４１号公報

しかしながら、従来のイムノクロマトグラフィー法による検査器具（以下、「イムノクロマト検査器具」という。）では、より細分化した判定が困難である。

具体的には、従来のイムノクロマト検査器具では、所定のウィルス（例えば、新型コロナウィルス）の感染力を失わせる中和作用のある抗体（中和抗体、例えばＩｇＧ抗体）について、自然感染により産生されたものであるか、ワクチン接種により産生されたものであるか、を判別することができない問題があった。

新型コロナウィルスに対する中和抗体は、ヒト細胞への侵入に必要なスパイクタンパク質（Ｓ抗原）を標的として当該ウィルスの感染を防ぐことが知られており、このことから、Ｓ抗原を標的とする（結合可能な）抗体（ＩｇＧ抗体など）を産生可能なワクチンの研究・開発が進んでいる。

そしてこのワクチンの接種が普及した場合には、その有効性を迅速かつ簡易に判定できるようにすることも望まれる。ここで、従来のイムノクロマト検査器具においてもＳ抗原を標識抗原に用いた検査片によれば、Ｓ抗原に結合可能なＩｇＧ抗体（中和抗体として機能するＩｇＧ抗体）の存在は検知可能である。

しかしこのような中和作用を有するＩｇＧ抗体は、ワクチンの接種だけでなく、ウィルスに感染（自然感染）した場合でも産生される。つまり、イムノクロマト検査器具の場合、Ｓ抗原を標識抗原に用いた検査片では、検体中の中和抗体（例えば、ＩｇＧ抗体）を検出することはできるが、それがワクチン接種と自然感染のいずれによって産生されたものであるか、を判別することができない問題があった。

なお、従来のイムノクロマト試験器具において、Ｓ抗原とＮ抗原とを標識抗原に用いた検査片の場合も同様の問題がある。すなわち、上述のごとく、捕捉抗体ラインで捕捉されるのは、Ｓ抗原とＮ抗原のいずれかと結合した免疫複合体（１種類の抗体）である。つまりこの場合も、捕捉抗体ラインが呈色した場合には、検体中にＳ抗原を捕捉する抗体（中和抗体として機能するＩｇＧ抗体）あるいは、Ｎ抗原を捕捉する抗体（例えば、ＩｇＧ抗体）の少なくともいずれかが含まれているか否かの判別ができるのみであり、これによってもワクチン接種により中和抗体が産生されたと判定することはできない問題があった。

このように現状では、所定のウィルス、例えば新型コロナウィルスに対するワクチン接種の有効性、あるいは接種の判断（自然感染による中和抗体の有無）を迅速かつ簡易に判定する検査器具および検査方法が実用的なレベル提供されているとは言えず、その実用化が切望されている。

本発明は、斯かる実情に鑑み、所定のウィルス、例えば新型コロナウィルスに対するワクチン接種の有効性あるいは接種の判断などを迅速かつ簡易に判定することが可能な、イムノクロマトグラフィー法による検査器具および検査方法を提供することを目的とする。

本発明は、検体の滴下窓と検出窓を有するケースに検査片を収容したイムノクロマトグラフィー法による検査器具であって、前記検査片は、第一検出部と、第二検出部と、前記第一検出部および前記第二検出部に共通の滴下エリアと、を有し、前記滴下窓を介して前記滴下エリアに前記検体が滴下された場合、該検体を下流に向かって移動させて該第一検出部と該第二検出部のそれぞれに同じ該検体を到達させるように構成され、前記第一検出部は、第一標識体と前記検体に含まれる第一抗体との複合体を捕捉可能であり、前記第二検出部は、第二標識体と前記検体に含まれる第二抗体との複合体を捕捉可能であり、前記第一抗体は、ワクチンの接種または所定のウィルスの感染により産生される抗体であり、前記第二抗体は、前記ウィルスの感染により産生される抗体であり、前記検出窓から視認される前記第一検出部の検査結果と、前記第二検出部の検査結果とを同時並行的に判定可能に構成した、ことを特徴とする検査器具に係るものである。

また、本発明は、上記の検査器具と、前記第一検出部の検査結果と前記第二検出部の検査結果に基づき、前記ワクチンの接種による抗体の産生の可能性を含む前記検体の状態を判定可能な判定ガイドと、を備えた、ことを特徴とする検査キットに係るものである。

また、本発明は、上記の検査器具を用いた検査方法であって、前記滴下エリアに前記検体を滴下し、該検査片内を移動させて前記第一検出部と前記第二検出部のそれぞれに同じ該検体を到達させる工程と、前記検体中の前記第一抗体の有無を検出し、該検体中の前記第二抗体の有無を検出する工程と、前記第一抗体および前記第二抗体の検出結果を組み合わせて前記検体の状態を判定する工程と、を有し、前記検体の状態として、前記ワクチンの接種による抗体の産生の可能性の判定を含む複数の判定候補から一の判定を導出する、ことを特徴とする検査方法に係るものである。

また、本発明は、イムノクロマトグラフィー法により検体中の第一抗体および第二抗体の有無を判定する検査方法であって、前記第一抗体は、ワクチンの接種または所定のウィルスの感染により産生される抗体であり、前記第二抗体は、前記ウィルスの感染により産生される抗体であり、第一検出部と、第二検出部と、該第一検出部および該第二検出部に共通の滴下エリアと、を含む検査片の該滴下エリアに前記検体を滴下し、該検査片内を移動させて該第一検出部と該第二検出部のそれぞれに同じ該検体を到達させる工程と、前記第一検出部により前記検体中の前記第一抗体の有無を判定し、前記第二検出部により前記検体中の前記第二抗体の有無を判定する工程と、前記第一抗体および前記第二抗体の検出結果を組み合わせて、前記検体中の前記ワクチンの接種による該第一抗体の産生の可能性を含む判定候補から一の判定を導出する工程と、を有する、ことを特徴とする検査方法に係るものである。

本発明によれば、所定のウィルス、例えば新型コロナウィルスに対するワクチンの有効性を迅速かつ簡易に判定することが可能な、イムノクロマトグラフィー法による検査器具、検査キットおよび検査方法を提供することを目的とする。
提供することができる。

（Ａ）本発明の実施形態に係る検査器具の平面図、（Ｂ）検査片の平面図、（Ｃ）検査片の側面図である。 イムノクロマトグラフィー法による検査の原理を示す概略図である。 本実施形態の検査方法の一例を示すフローチャートである。 本実施形態の検査方法の一例を示す概要図である。 本実施形態の検査キット一例を示す概要図である。 本実施形態の検査キット一例を示す概要図である。

以下、本発明の実施形態について図面を参照して説明する。図１～図４は本発明の実施形態の一例を示す図であり、図中、同一の符号を付した部分は同一構成要素を表わす。なお、各図において一部の構成を適宜省略して、図面を簡略化する。そして、部材の大きさ、形状、厚みなどを適宜誇張して表現する。

＜検査器具＞
図１は、本実施形態の検査器具１０の概略を示す図であり、同図（Ａ）が平面図、同図（Ｂ）が検査器具１０の内部を抜き出して示す平面図、同図（Ｃ）が同図（Ｂ）の側面図である。

検査器具１０は、イムノクロマトグラフィー法による抗体検査を行うための器具である。この検査器具１０は、検体中の抗体と、抗原を含む標識体とを反応させ、生成した免疫複合体を毛細管現象により移動させ、あらかじめ固定化した抗体で捕捉し、目的とする抗体の有無を判定するものである。

具体的に、図１（Ａ）に示すように、本実施形態の検査器具１０は、第一検査片１１と、第二検査片１２と、ケース１３とを備える。

ケース１３は、例えば平面視において細長い矩形状の箱体であり、検体の滴下窓１３０と、第一検出窓１３１と第二検出窓１３２を有する。第一検査片１１と第二検査片１２は、いずれも帯状の多孔質部材（例えば、セルロース膜）であり、別体であるがケース１３内に一体的に収容される。第一検査片１１と第二検査片１２はいずれも帯長手方向がケース１３の長手方向（図示左右方向）に沿い、またこの例ではケース１３の短手方向（図示上下方向）に沿って並ぶように（並列配置して）ケース１３内に収容される。

第一検出窓１３１は、第一検査片１１の一部を外部から視認可能に設けられ、第二検出窓１３２は、第二検査片１２の一部を外部から視認可能に設けられる。

第一検査片１１は、滴下窓１３０を介して滴下される検体中の第一抗体の存在を検出可能であり、第二検査片１２は、第一検査片１１に滴下された検体と同じ検体中の、あるいはその検体と同じサンプルであって第一検査片１１とほぼ同時に滴下された検体中の第二抗体の存在を検出可能である。

そして、検査器具１０は第一検出窓１３１から視認される第一検査片１１における検出結果と、第二検出窓１３２から視認される第二検査片１２の結果とを同時並行的に判定可能に構成している。より詳細には、第一検査片１１と第二検査片１２の結果を略同じタイミングで並列的に視認することで、各種の判定をすることが可能に構成されている。なお、ここでの「同時並行的」や「並列的」との記載は、両検査片１１、１２およびそれらの検出結果を、纏めて（大きく視線移動をすることなく一覧で）認識可能という趣旨であり、両検査片１１，１２の検出結果が完全に一致したタイミングで同時に出ることや、両検査片１１，１２の結果が並行（並列）配置されることを限定するものではない。

ここで、本実施形態における検出対象である第一抗体と第二抗体は、種類が同一であり捕捉する抗原が異なる抗体である。具体的に、本実施形態の「第一抗体」とは、ヒトの血液のみに存在する免疫グロブリンであり、一例を挙げると、所定のウィルス（具体的には、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウィルス）のスパイクタンパク質の一部と結合する抗体である。より詳細には、当該スパイクタンパク質はＳ１ユニットとＳ２ユニットを含むが、本実施形態の第一抗体は、Ｓ１ユニットが有する受容体結合ドメイン（ＲＢＤ：receptor-binding domain）と結合する（捕捉する）抗体（例えば、ＩｇＧ抗体）である。以下、以下、スパイクタンパク質を「Ｓ抗原」、Ｓ１ユニットが有する受容体結合ドメイン（Ｓ１ユニットのうちＲＢＤ部分を抜き出したもの）を、「Ｓ１／ＲＢＤ抗原」と称し、Ｓ１／ＲＢＤ抗原と結合するＩｇＧ抗体（第一抗体）を「Ｓ１／ＲＢＤ－ＩｇＧ抗体」と称する。

また、本実施形態の「第二抗体」とは、ヒトの血液のみに存在する免疫グロブリンであり、一例を挙げると、所定のウィルス（具体的には、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウィルス）のヌクレオカプシドタンパク質と結合する（捕捉する）抗体（例えば、ＩｇＧ抗体）である。以下、ヌクレオカプシドタンパク質を、「ＮＰ抗原」と称し、これと結合するＩｇＧ抗体（第二抗体）を「ＮＰ－ＩｇＧ抗体」と称する。

このように、本実施形態における第一抗体（Ｓ１／ＲＢＤ－ＩｇＧ抗体）と第二抗体（ＮＰ－ＩｇＧ抗体）は、いずれもヒトの血液に存在する同種の抗体（例えばＩｇＧ抗体）であるが、捕捉する抗原が異なるものであり、この点において異なる種類のＩｇＧ抗体である。

同図（Ｂ）、（Ｃ）を参照して、第一検査片１１は、検体の滴下部となるサンプルパッド１１１、第一標識体を含有する第一標識体含有部１１２、第一検出部１１３、滴下した検体を吸い上げる吸収パッド１１４を、例えばその帯長手方向にそれぞれの端部が互いに重畳するように連結させた部材である。滴下窓１３０を介してサンプルパッド１１１に滴下された検体は吸収パッド１１４に向かって矢印の方向に（図示左側の上流から図示右側の下流に）移動する。なお、本実施形態の「検体」は採取したヒト（被検者）の全血液、血清あるいは血漿であるが、これに展開液を加えた検体液であってもよい。

より詳細には、第一標識体含有部１１２は、金コロイド等の着色粒子でそれぞれ標識された抗原（標識抗原）および抗体（標識抗体）を含有するコンジュゲートパッドである。この例では、第一標識体含有部１１２の標識抗原は、Ｓ１／ＲＢＤ－ＩｇＧ抗体と結合可能な（Ｓ１／ＲＢＤ－ＩｇＧ抗体を捕捉可能な）Ｓ１／ＲＢＤ抗原である。つまり、本実施形態における「第一標識体」とは、Ｓ１／ＲＢＤ－ＩｇＧ抗体と結合可能な標識抗原、すなわちＳ１／ＲＢＤ標識抗原である。第一標識体はＳ１／ＲＢＤ－ＩｇＧ抗体と結合して免疫複合体（以下、「第一免疫複合体ＩＣ１」という。）を形成し、上流側（図示左側）から下流側（図示右側）に向かって移動する。また、第一標識体含有部１１２の標識抗体は、標識された、ヒトではない動物の抗体（標識抗体ＬＢ１）である。

第一検出部１１３は、第一標識体含有部１１２の下流に設けられ、捕捉抗体Ｔ１を例えば帯の幅方向に線状に塗布・固定した捕捉抗体ラインＴＬ１と、コントロール用抗体Ｃ１例えば帯の幅方向に線状に塗布・固定したコントロール用抗体ラインＣＬ１を設けたメンブレンフィルターである。捕捉抗体Ｔ１は、第一免疫複合体ＩＣ１を捕捉可能な動物由来の抗体である。また、コントロール用抗体Ｃ１は、標識抗体ＬＢ１（第一免疫複合体ＩＣ１に関連しない抗体）を捕捉可能な抗体である。吸収パッド１１４は、第一検出部１１３のさらに下流に設けられる。

第二検査片１２は、検体の滴下部となるサンプルパッド１１１、第二標識体を含有する第二標識体含有部１２２、第二検出部１２３、滴下した検体を吸い上げる吸収パッド１１４を、その帯長手方向にそれぞれの端部が互いに重畳するように連結させた部材である。なお、第二検査片１２は第一検査片１１とは別体で、また第一検査片１１と離間してこれと並列に配置されるが、この例では、サンプルパッド１１１と吸収パッド１１４については、第一検査片１１と兼用としている。つまり、サンプルパッド１１１は、第一検査片１１と第二検査片１２の帯長手方向の一端部（この例では左端部）に重畳して設けられ、吸収パッド１１４は、第一検査片１１と第二検査片１２の帯長手方向の他端部（この例では右端部）に重畳して設けられる。サンプルパッド１１１に滴下された検体は吸収パッド１１４に向かって矢印の方向に（図示左側の上流から図示右側の下流に）移動する。

より詳細には、第二標識体含有部１２２は、金コロイド等の着色粒子でそれぞれ標識された抗原（標識抗原）および抗体（標識抗体）を含有するコンジュゲートパッドである。この例では、第二標識体含有部１２２の標識抗原は、ＮＰ－ＩｇＧ抗体と結合可能な（ＮＰ－ＩｇＧ抗体を捕捉可能な）ＮＰ抗原である。つまり、本実施形態における「第二標識体」とは、ＮＰ－ＩｇＧ抗体と結合可能な標識抗原、すなわちＮＰ標識抗原である。第二標識体はＮＰ－ＩｇＧ抗体と結合して免疫複合体（以下、「第二免疫複合体ＩＣ２」という。）を形成し、上流側（図示左側）から下流側（図示右側）に向かって移動する。また、第二標識体含有部１２２の標識抗体は、標識された、ヒトではない動物の抗体（標識抗体ＬＢ２）である。

第二検出部１２３は、第二標識体含有部１２２の下流に設けられ、捕捉抗体Ｔ２を例えば帯の幅方向に線状に塗布・固定した捕捉抗体ラインＴＬ２と、コントロール用抗体Ｃ２を帯の幅方向に線状に塗布・固定したコントロール用抗体ラインＣＬ２を設けたメンブレンフィルターである。捕捉抗体Ｔ２は、第二免疫複合体ＩＣ２を捕捉可能な動物由来の抗体である。捕捉抗体Ｔ２は、第一検出部１１３の捕捉抗体Ｔ１と同じ抗体であってもよい。

また、コントロール用抗体Ｃ２は、標識抗体ＬＢ２（第二免疫複合体ＩＣ２に関連しない抗体）を捕捉可能な抗体である。

なお、第一検査片１１は、同図（Ｃ）に示すようにサンプルパッド１１１、コンジュゲートパッド（第一標識体含有部）１１２、メンブレンフィルター（第一検出部）１１３、吸収パッド１１４のそれぞれの一部を重畳させた積層構造に限らず、例えば、単一の帯状の多孔質部材の帯長手方向に沿って、サンプルパッド１１１、コンジュゲートパッド１１２、メンブレンフィルター１１３、吸収パッド１１４のそれぞれに対応する領域が隣り合うように連続して配置される構成、あるいはこれらの構成のうち一部のみが積層される構成などであってもよい。以下の説明では、同図（Ｃ）に示す様な積層構造の第一検査片１１の場合を例にするが、単一の（又は一部の構成が重畳する）帯状の検査片１１の場合、サンプルパッド１１１、コンジュゲートパッド１１２、メンブレンフィルター１１３、吸収パッド１１４のそれぞれとして説明した構成は、それぞれの構成に対応する領域、と読み替えるものとする。例えば、「サンプルパッド１１１」と説明した場合には、「サンプルパッド１１１に対応する領域」と読み替えるものとする。これらは、第二検査片１２においても同様である。

＜検査器具の検出原理＞
図２を参照して検査器具１０の検出原理を説明する。検出原理については、第一検査片１１と第二検査片１２は同様であるので、図２においては第一検査片１１と第二検査片１２の抗原および抗体を総称して示す。すなわち図２においては標識抗原（Ｓ１／ＲＢＤ標識抗原およびＮＰ標識抗原）を総称して符号ＬＧで示し、標識抗体（標識抗体ＬＢ１，ＬＢ２）を総称して符号ＬＢで示し、検体中の検出対象の抗体（Ｓ１／ＳＢＤ－ＩｇＧ抗体およびＮＰ－ＩｇＧ抗体）を総称して符号ＡＢで示し、第一免疫複合体ＩＣ１および第二免疫複合体ＩＣ２）を総称して符号ＩＣで示し、捕捉抗体Ｔ１，Ｔ２を総称して符号Ｔで示し、コントロール用抗体Ｃ１，Ｃ２を総称して符号Ｃで示す。

まず、滴下窓１３０（図２では不図示）を介して検体Ｓを滴下すると、検体Ｓはサンプルパッド１１１から第一検査片１１の第一標識体含有部１１２、および第二検査片１２の第二標識体含有部１２２にそれぞれ(ほぼ同時に)浸透し、第一検査片１１および第二検査片１２の２つの経路をそれぞれ下流側に移動する。

第一検査片１１において、検体は、第一標識体含有部１１２の標識抗原（Ｓ１／ＲＢＤ標識抗原、同図において標識抗原ＬＧ）を溶解しながら第一検出部１１３へ移動する。ここで、検体Ｓ内に検査対象となるＳ１／ＲＢＤ－ＩｇＧ抗体（同図において抗体ＡＢ）が含まれていた場合、Ｓ１／ＲＢＤ－ＩｇＧ抗体（抗体ＡＢ）はＳ１／ＲＢＤ標識抗原（標識抗原ＬＧ）と結合して第一免疫複合体ＩＣ１（同図において免疫複合体ＩＣ）を形成して下流に移動する。そして第一免疫複合体ＩＣ１（免疫複合体ＩＣ）は、捕捉抗体ラインＴＬ１の捕捉抗体Ｔ１（同図において補足抗体Ｔ）と結合してここに捕捉される。この捕捉により、捕捉抗体ラインＴＬ１上では標識抗原由来の着色粒子が濃縮されたような状態となり、呈色する。第一検出窓１３１はこの呈色が視認可能に開口されており、呈色の状態を目視で確認することで、検体中のＳ１／ＲＢＤ－ＩｇＧ抗体の有無が判定可能となる。すなわち、捕捉抗体ラインＴＬ１が呈色された場合、検体中にはＳ１／ＲＢＤ－ＩｇＧ抗体が含まれる（陽性）と判定される。

また、検体の移動により、第一標識体含有部１１２の標識抗体ＬＢ１（同図において標識抗体ＬＢ）も下流に移動する。標識抗体ＬＢ１（標識抗体ＬＢ）は、Ｓ１／ＲＢＤ標識抗原（標識抗原ＬＧ）と結合せず（第一免疫複合体ＩＣ１に関与せず）、捕捉抗体ラインＴＬ１で捕捉されることはないが、その下流に固定されたコントロール用抗体Ｃ１（同図においてコントロール用抗体Ｃ）で捕捉される。この捕捉により、コントロール用抗体ラインＣＬ１上では標識抗体ＬＢ１由来の着色粒子が濃縮されたような状態となり、呈色する。第一検出窓１３１はこの呈色も視認可能に開口されており、呈色の状態を目視で確認することで、検体が捕捉抗体ラインＴＬ１を通過し、コントロール用抗体ラインＣＬ１に到達したことが確認される。つまり、捕捉抗体ラインＴＬ１が呈色せず、コントロール用抗体ラインＣＬ１のみが呈色した場合、当該検体には、Ｓ１／ＲＢＤ－ＩｇＧ抗体が存在していない（陰性）と判定される。

第二検査片１２は、第一検査片１１で判定した検体Ｓと同じ検体中のＮＰ－ＩｇＧ抗体の有無を判定する。この原理は第一検査片１１と同様であるので、一部説明は省略するが、検体は、第二標識体含有部１２２の標識抗原（ＮＰ標識抗原、標識抗原ＬＧ）を溶解しながら第二検出部１２３へ移動する。検体内に検査対象のＮＰ－ＩｇＧ抗体（抗体ＡＢ）が含まれていた場合、これがＮＰ標識抗原（標識抗原ＬＧ）と結合し、これにより形成された第二免疫複合体ＩＣ２（免疫複合体ＩＣ）は、捕捉抗体ラインＴＬ２上に捕捉される。この捕捉により、捕捉抗体ラインＴＬ２が呈色する。第二検出窓１３２からは呈色の状態を目視で確認可能であり、捕捉抗体ラインＴＬ２が呈色された場合、検体中にはＮＰ－ＩｇＧ抗体が含まれる（陽性）と判定される。一方、捕捉抗体ラインＴＬ２が呈色せず、コントロール用抗体ラインＣＬ２のみが呈色した場合、当該検体には、ＮＰ－ＩｇＧ抗体が存在していない（陰性）と判定される。

本実施形態では、検査器具１０の一つの滴下窓１３０から滴下された検体が、ほぼ同時に第一検査片１１と第二検査片１２のサンプルパッド１１１に吸収され、以降、それぞれの検査片１１，１２の２つの経路で下流に移動する。そして、第一検査片１１では検体中のＳ１／ＲＢＤ－ＩｇＧ抗体の有無が判定可能となり、第二検査片１２では検体中のＮＰ－ＩｇＧ抗体の有無が判定可能となる。

このように、本実施形態の検査器具１０は、１回の検査で、同一検体中に存在する同種の抗体（例えば、ＩｇＧ抗体）であって、捕捉する抗原が異なる二種類の抗体（Ｓ１／ＲＢＤ－ＩｇＧ抗体と検体中のＮＰ－ＩｇＧ抗体）の有無を同時並行的に検出可能なものである。このような構成により、同一の抗体中に含まれる、捕捉する抗原が異なる二種類の抗体についての検知結果を組み合わせて検体の状態を判定することができる。またこれにより、本実施形態の検査器具１０を、所定のワクチン接種の有効性の判定を含む各種判定に適用することができる。

＜検査方法＞
以下、本実施形態の抗体の検査方法について説明する。まず、上述の検査器具１０を用いた本実施形態の検査方法について説明する。この検査方法は、検体を検査器具１０の第一検査片１１に滴下し、該検体中の第一抗体の有無を検出する第一検査工程と、同一の検体を検査器具１０の第二検査片１２に滴下し、該検体中の第二抗体の有無を検出する第二検査工程と、第一検査工程と第二検査工程の結果、すなわち、第一検出窓１３１から視認可能な第一検出部１１３の検出状態と、第二検出窓１３２から視認可能な第二検出部１２３の検出状態とを組み合わせて検体の状態を判定する判定工程を有する。この判定工程では、Ｓ１／ＲＢＤ－ＩｇＧ抗体の有無と検体中のＮＰ－ＩｇＧ抗体の有無の結果を組み合わせて判断することで、ワクチンの接種による抗体産生の可能性の判定を含む複数の判定候補から一の判定を導出する。

上記の検査器具の検出原理でも述べたように、検査器具１０の滴下窓１３０を介して検体を滴下すると、第一検査片１１の第一検出部において検体中のＳ１／ＲＢＤ－ＩｇＧ抗体の有無が検出される。Ｓ１／ＲＢＤ－ＩｇＧ抗体は、新型コロナウィルスのスパイクタンパク質（Ｓ抗原）を標的とする抗体（中和抗体）である。また、第二検査片１２の第二検出部においては同一検体中のＮＰ－ＩｇＧ抗体の有無が検出される。そして本実施形態ではこれらの結果に基づき、検体の状態、具体的には、新型コロナウィルスの自然感染の有無、中和抗体産生の有無を判定する。

ここで、検査器具１０により、検体中の中和抗体の有無が検出できたとしても、それがウィルス感染によるものか、ワクチン接種によるものかを判定することができない。そこで本実施形態の検査方法では、第一検査片１１の結果（検体中のＳ１／ＲＢＤ－ＩｇＧ抗体の有無）と、第二検査片１２の結果（同一検体中のＮＰ－ＩｇＧ抗体の有無）とを組み合わせることで、検出されたＳ１／ＲＢＤ－ＩｇＧ抗体（中和抗体）について、ワクチン接種により産生された可能性がある、などの判定もさらに可能にする。

図３および図４を参照して、本実施形態の検査方法、およびそれに基づく中和抗体獲得の有無、あるいはワクチン接種の有効性についての判定（例えば、ワクチン接種により中和抗体が産生された可能性（検出されたＳ１／ＲＢＤ－ＩｇＧ抗体がワクチン接種により産生されたものである可能性）の判定）について説明する。図３は、本実施形態の検査方法の一例を示すフローチャートであり、図４は、第一検査片１１および第二検査片１２の検査結果の概略を示す平面図である。

＜＜第一のケース＞＞
本実施形態の検査方法を用いた、第一のケースの判定について説明する。まず、検査器具１０に検体を滴下し（ステップＳ０１）、第一検査片１１の第一検出窓１３１を目視により確認する。そして捕捉抗体ラインＴＬ１が呈色している、すなわち陽性の場合（ステップＳ０３でＹｅｓ）、検体中にＳ１／ＲＢＤ－ＩｇＧ抗体（中和抗体）が存在していると判定する（ステップＳ０５）。

次に、同時並列的に検出されている第二検査片１２の第二検出窓１３２を目視により確認する。そして捕捉抗体ラインＴＬ２が呈色している、すなわち陽性の場合（ステップＳ０７でＹｅｓ）、ＮＰ－ＩｇＧ抗体が存在していることになる（図４（Ａ）参照）。

第一検査片１１と第二検査片１２の検出結果を組み合わせると、第一のケースの判定は、「ウィルスの自然感染歴があり、中和抗体も産生されている（獲得済み）。：判定ａ」となる（ステップＳ０９）。

第一のケースでは、中和抗体は獲得しているもののそれがワクチン接種によるものであるか否かの特定はできないが、例えば被検者に検査前にワクチンの接種を受けた事実があれば、中和抗体はワクチン接種により獲得した可能性もあると考えられる。

＜＜第二のケース＞＞
次に、第二のケースの判定について説明する。第一検査片１１の捕捉抗体ラインＴＬ１が呈色している、すなわち陽性の場合（ステップＳ０３でＹｅｓ）、Ｓ１／ＲＢＤ－ＩｇＧ抗体（中和抗体）が存在（獲得）していると判定する。ただしこの段階では、当該中和抗体がワクチン接種により産生された（獲得した）ものかウィルス感染（自然感染）によるものかは不明である。

また、第二検査片１２について、捕捉抗体ラインＴＬ２が呈色していない、すなわち陰性である場合（ステップＳ０７でＮｏ）にはＮＰ－ＩｇＧ抗体が存在していないと判定する（図４（Ｂ）参照）。

ここで、ＮＰ－ＩｇＧ抗体が存在していないということのみからするとウィルスの自然感染は低いと判定できる。つまりこの場合、第一検査片１１における陽性の結果は、被検者にワクチン接種の事実がない場合には、自然感染により中和抗体が産生されたと判断し、ワクチン接種の事実があれば、ワクチン接種により中和抗体が産生されたと判断する。

このように第一検査片１１と第二検査片１２の検出結果を組み合わせると、第二のケースの判定は、「中和抗体が産生されている（獲得済みである）。当該中和抗体は、ワクチン接種により獲得した可能性もある。：判定ｂ」となる（ステップＳ１１）。繰り返しになるが、この場合、特に、検査前において被検者にワクチン接種の事実があれば、検体内の中和抗体は、ワクチン接種により獲得したものである可能性がより高いといえる。

＜＜第三のケース＞＞
次に、第三のケースの判定について説明する。第一検査片１１の捕捉抗体ラインＴＬ１が呈色していない、すなわち陰性の場合（ステップＳ０３でＮｏ）、Ｓ１／ＲＢＤ－ＩｇＧ抗体（中和抗体）が存在（獲得）していないと判定する（ステップＳ１３）。また、第二検査片１２の捕捉抗体ラインＴＬ２が呈色している、すなわち陽性である場合（ステップＳ１５でＹｅｓ）、ＮＰ－ＩｇＧ抗体が存在していると判定する（図４（Ｃ）参照）。

この場合、第一検査片１１と第二検査片１２の検出結果を組み合わせると、第三のケースの判定は、「ウィルスの自然感染歴があるが、中和抗体は産生されていない。：判定ｃ」となる（ステップＳ１７）。第三のケースにおいて、例えば検査前において被検者にワクチン接種の事実があれば、ワクチン接種の効果がなかった（未だ効果が出ていない）と判断することができる。

＜＜第四のケース＞＞
次に、第四のケースの判定について説明する。第一検査片１１の捕捉抗体ラインＴＬ１が呈色していない、すなわち陰性の場合（ステップＳ０３でＮｏ）、Ｓ１／ＲＢＤ－ＩｇＧ抗体（中和抗体）は存在（獲得）していないと判定する。また、第二検査片１２の捕捉抗体ラインＴＬ２も呈色していない、すなわち陰性である場合（ステップＳ１５でＮｏ）、ＮＰ－ＩｇＧ抗体も存在していないと判定する（図４（Ｄ）参照）。

この場合、第一検査片１１と第二検査片１２の検出結果を組み合わせると、第四のケースの判定は「ウィルスの自然感染歴はなく、中和抗体も産生されていない。：判定ｄ」となる（ステップＳ１９）。第四のケースにおいて、例えば検査前において被検者にワクチン接種の事実があれば、ワクチン接種の効果がなかった（未だ効果が出ていない）と判断することができる。

このように本発明の検査器具１０および検査方法によれば、所定のワクチンの有効性を含む複数の判定候補（図３のステップＳ０９、図４（Ｅ）に示す判定ａ、図３のステップＳ１１、図４（Ｆ）に示す判定ｂ，図３のステップＳ１７、図４（Ｇ）に示す判定ｃ，図３のステップＳ１９、図４（Ｇ）判定ｄ）のうちから一の判定を導き出すことができる。これにより、所定のウィルス（例えば、新型コロナウィルス）に対するワクチンの有効性、例えば、ワクチンを接種した事実はあるが中和抗体を獲得していないこと（第三のケース、第四のケース）、あるいは検体中に中和抗体が存在していた場合には、それがウィルスの自然感染により産生されたものか、ワクチン接種により産生されたものか（第二のケース）、などを簡便・迅速な方法で検査・判定することができる。

なお、本実施形態の検査方法は、以下の方法によって抗体の各種判断を行うものである。この場合、上述の検査器具１０を用いるものに限らない。

すなわち、イムノクロマトグラフィー法により検体中の第一抗体および第二抗体の有無を判定する検査方法であって、第一抗体は、ワクチンの接種または所定のウィルスの感染により産生される抗体であり、第二抗体は、ウィルスの感染により産生される抗体であり、検体を第一検査片１１に滴下して該検体中の第一抗体の有無を判定し、同一の検体を第一検査片１１とは異なる第二検査片１２に滴下して該検体中の第二抗体の有無を判定し、第一検査片１１による検査結果と第二検査片１２による検査結果を組み合わせて、検体中のワクチンの接種による第一抗体の産生の可能性を含む判定候補から一の判定を導出する、するものである。

またこの場合特に、第一検査片１１による検査結果が陽性であり、且つ第二検査片１２による検査結果が陰性である場合に、検体中に前記ワクチンの接種により第一抗体が産生されている可能性があると判定するものである。

＜検査キット＞
次に図５を参照して本実施形態の検査キット３０について説明する。本実施形態の検査キット３０は、検査器具１０と判定ガイド２０を備えている。判定ガイド２０とは、第一検査片１１による検査結果と第二検査片１２による検査結果に基づき、所定のワクチンの接種による抗体の産生の可能性を含む検体の状態を判定可能なガイドである。

判定ガイド２０は、例えば、同図(Ａ)に示すように、紙面など検査器具１０とは別体の印刷物でもよいし、同図（Ｂ）に示すように検査器具１０に直接表示（印字）等されるものであってもよい。例えば、紙面の判定ガイド２０の場合には、図３に示すようなフローチャートが印刷等されたものであってもよい。また、図４に示すような、第一検査片１１及び第二検査片１２の検査結果、すなわち呈色状態（の模式図）（同図（Ａ）～同図（Ｄ））とそれに基づく判定（同図（Ｅ）～同図（Ｅ）、判定ａ～判定ｄ）をセットにして印刷等したものであってもよい。

また、図示は省略するが、判定ガイド２０は例えばスマートフォンまたはパソコンなどのアプリケーションとして提供されてもよい。この場合、アプリケーションを起動すると、例えば、図３に示すフローチャートのような質問が順次表示され、これに従って回答を入力することで判定ａ～判定ｄのいずれかが表示されるようなものであってもよい。またアプリケーションを起動すると、図４に示す第一検査片１１及び第二検査片１２の呈色状態（の模式図）とそれに基づく判定（判定ａ～判定ｄのいずれか）がセットで表示されるものであってもよい。さらには、アプリケーションを起動すると撮影モードなどに移行するように構成され、実際の第一検査片１１及び第二検査片１２の検査結果を撮影して送信することで図４（Ｅ）～同図（Ｈ）に示すような判定ａ～判定ｄのいずれかが表示されるようなものであってもよい。

なお、判定ガイド２０は、検査者が、第一検査片１１及び第二検査片１２の検査結果に基づき、容易に、所定のワクチンの接種による抗体の産生の可能性を含む検体の状態（具体的には、図４（Ｅ）～同図（Ｈ）に示すような判定ａ～判定ｄのいずれか）を一義的に取得できるようなものであればどのような形態であってもよく、上記の例に限らない。

図６は、判定ガイド２０の他の例を示す図である。上述の判定ａ～判定ｄは、被検者におけるワクチン接種の有無について特定しない（できない）段階での判定であるが、図６に示すこの例の判定ガイド２０は、上述の判定ａ～判定ｄと、更に被検者のワクチン接種の有無（ワクチン接種を受けたか否かの事実）に基づき、より詳細な判定を可能にするものである。

すなわち、上記判定ａにおいて、被検者にワクチン接種の事実があれば、「ワクチン接種または自然感染により中和抗体が産生されている」という判定になる。当該検査キット３０のユーザには例えば「ワクチン接種または自然感染により中和抗体ができています。（判定ａ－１）」などと表示する。

また、上記判定ａにおいて、被検者にワクチン接種の事実がなければ、「自然感染により中和抗体が産生されている」という判定できる。ユーザには例えば「自然感染により中和抗体ができている可能性があります。（判定ａ－２）」などと表示する。

また、上記判定ｂにおいて、被検者にワクチン接種の事実があれば、「（第二検査片１２の結果が陰性であるため）ワクチン接種により中和抗体が産生された可能性が高い」という判定になる。ユーザには例えば「ワクチンにより中和抗体ができている可能性が高いです。（判定ｂ－１）」などと表示する。

また、上記判定ｂにおいて、被検者にワクチン接種の事実がなければ、「（第一検査片１１が陽性であることから）中和抗体は自然感染によりが産生されている可能性がある」という判定になる。ユーザには例えば「自然感染により中和抗体ができている可能性があります。（判定ｂ－２）」などと表示する。

また、上記判定ｃにおいて、被検者にワクチン接種の事実があれば、「ワクチンを接種したものの、中和抗体が産生されていない可能性が高い。一方、自然感染歴はあるがこれによっても中和抗体は産生されていない。」という判定になる。ユーザには例えば「（ワクチンによる）中和抗体ができていない様です。自然感染歴があります。（判定ｃ－１）」などと表示する。

また、上記判定ｃにおいて、被検者にワクチン接種の事実がなければ、「自然感染歴はあるが、（自然感染による）中和抗体は産生されていない」という判定になる。ユーザには例えば「自然感染歴はありますが、中和抗体ができていません。（判定ｃ－２）」などと表示する。

また、上記判定ｄにおいて、被検者にワクチン接種の事実があれば、「ワクチンを接種したものの、中和抗体が産生されていない可能性が高い。自然感染歴はない。」という判定になる。ユーザには例えば「ワクチンによる中和抗体ができてない様です。自然感染歴はありません。（判定ｄ－１）」などと表示する。

また、上記判定ｄにおいて、被検者にワクチン接種の事実がなければ、「自然感染歴はなく、中和抗体は産生されていない」という判定になる。ユーザには例えば「自然感染歴はなく、中和抗体もできていません。（判定ｄ－２）」などと表示する。また中和抗体の未獲得者については、例えば、「ワクチンを接種しましょう。」などの案内を表示してもよい。

なお図６に示した判定の流れは、判定ガイド２０としての例えば、図３に示すフローチャート（ステップＳ０９、Ｓ１１，Ｓ１７，Ｓ１９）に続くフローとして表示してもよいし、例えば判定ガイド２０としての図４に示した判定結果からワクチン接種の有無をユーザに選択させ、図６に示す最終判定ａ－１～ｄ－２を導出するようにしてもよいし、アプリケーションなどにより図６に示す最終判定ａ－１～ｄ－２を導出するようにしてもよい。

図６に示すような判定ガイド２０を用いれば、ユーザは最終判定ａ－１～ｄ－２の結果を得ることになるので、より簡易且つ一義的に、被検者の状態を把握することができる。

以上、本発明の実施形態の一例を説明したが、上記の例に限らない。
例えば、１つの検査器具１０において、滴下窓１３０を複数設けてもよい。すなわち、第一検査片１１用と、第二検査片１２用にそれぞれ滴下窓１３０を設け、同一の検体をそれぞれの滴下窓１３０から滴下するようにしてもよい。

また、第一検査片１１と第二検査片１２はケース１３の短手方向に沿って並列に配置した例を示したが、これに限らず、ケース１３の長手方向に沿って両者が直列的に並ぶ（互いに分離はしている）ように配置してもよい。しかしながら、検査片１１，１２を直列的に配置すると、それぞれの呈色状態の視認がしにくくなる可能性がある。また、検体の滴下も２回行う必要がある。一方、並列に配置する場合には、例えば図４に示すように、各検査片１１，１２の呈色状態を纏まったパターンとして認識しやすくなり、判定ガイド２０などとの比較も容易となる。また、図１に示すようにサンプルパッド１１１を共用でき、１回の検体の滴下で第一検査片１１と第二検査片１２に検体を供給できる。

また、上記の実施形態では、検出する抗体がＩｇＧ抗体である場合を例示したが、ＩｇＭ抗体であってもよいし、その他の免疫グロブリンでもよい。

また、サンプルパッド１１１と吸収パッド１１４は、第一検査片１１と第二検査片１２で兼用する構成に限らず、それぞれの検査片１１，１２毎に設けられてもよい。

また、第一標識体含有部１１２の標識抗体ＬＢ１、第二標識体含有部１２２の標識抗体ＬＢ２、コントロール用抗体Ｃ１，Ｃ２は、それぞれ異なる抗体であってもよいし、これらのうち少なくとも一組が同じ抗体であってもよい。

尚、本発明の検査器具１０は、上記した実施の形態に限定されるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲内において種々変更を加え得ることは勿論である。

１０ 検査器具
１１ 第一検査片
１２ 第二検査片
２０ 判定ガイド
３０ 検査キット
１１１ サンプルパッド
１１２ 第一標識体含有部(コンジュゲートパッド)
１１３ 第一検出部(メンブレンフィルター)
１１４ 吸収パッド
１２２ 第二標識体含有部(コンジュゲートパッド)
１２３ 第二検出部(メンブレンフィルター)
１３０ 滴下窓
１３１ 第一検出窓
１３２ 第二検出窓
Ｃ１，Ｃ２ コントロール用抗体
ＣＬ１ コントロール用抗体ライン
ＣＬ２ コントロール用抗体ライン
Ｔ１，Ｔ２ 捕捉抗体
ＴＬ１ 捕捉抗体ライン
ＴＬ２ 捕捉抗体ライン

Claims (13)

1. 検体の滴下窓と検出窓を有するケースに検査片を収容したイムノクロマトグラフィー法による検査器具であって、
   前記検査片は、
   第一検出部と、
   第二検出部と、
   前記第一検出部および前記第二検出部に共通の滴下エリアと、
   を有し、
   前記滴下窓を介して前記滴下エリアに前記検体が滴下された場合、該検体を下流に向かって移動させて該第一検出部と該第二検出部のそれぞれに同じ該検体を到達させるように構成され、
   前記第一検出部は、第一標識体と前記検体に含まれる第一抗体との複合体を捕捉可能であり、
   前記第二検出部は、第二標識体と前記検体に含まれる第二抗体との複合体を捕捉可能であり、
   前記第一抗体は、ワクチンの接種または所定のウィルスの感染により産生される抗体であり、
   前記第二抗体は、前記ウィルスの感染により産生される抗体であり、
   前記検出窓から視認される前記第一検出部の検査結果と、前記第二検出部の検査結果とを同時並行的に判定可能に構成した、
   ことを特徴とする検査器具。
2. 前記滴下窓は１つである、
   ことを特徴とする請求項１に記載の検査器具。
3. 前記第一抗体と前記第二抗体は、ヒト由来且つ免疫グロブリンのタイプが同種であって捕捉する抗原が異なる抗体である、
   ことを特徴とする請求項１または請求項２に記載の検査器具。
4. 前記第一標識体を含有する第一標識体含有部と、前記第二標識体を含有する第二標識体含有部とを有する、
   ことを特徴とする請求項１から請求項３のいずれか一項に記載の検査器具。
5. 前記第一標識体は、前記ウィルスのスパイクタンパク質の一部を抗原として含むものであり、
   前記第二標識体は、前記ウィルスのヌクレオカプシドタンパク質を抗原として含むものである、
   ことを特徴とする請求項１から請求項４のいずれか一項に記載の検査器具。
6. 前記第一検出部と前記第二検出部を並列配置した、
   ことを特徴とする請求項１から請求項５のいずれか一項に記載の検査器具。
7. 前記ウィルスは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウィルスである、
   ことを特徴とする請求項１から請求項６のいずれか一項に記載の検査器具。
8. 請求項１から請求項７のいずれか一項に記載の検査器具と、
   前記第一検出部の検査結果と前記第二検出部の検査結果に基づき、前記ワクチンの接種による抗体の産生の可能性を含む前記検体の状態を判定可能な判定ガイドと、
   を備えた、
   ことを特徴とする検査キット。
9. 請求項１から請求項７のいずれか一項に記載の検査器具を用いた検査方法であって、
   前記滴下エリアに前記検体を滴下し、該検査片内を移動させて前記第一検出部と前記第二検出部のそれぞれに同じ該検体を到達させる工程と、
   前記検体中の前記第一抗体の有無を検出し、該検体中の前記第二抗体の有無を検出する工程と、
   前記第一抗体および前記第二抗体の検出結果を組み合わせて前記検体の状態を判定する工程と、を有し、
   前記検体の状態として、前記ワクチンの接種による抗体の産生の可能性の判定を含む複数の判定候補から一の判定を導出する、
   ことを特徴とする検査方法。
10. 前記第一抗体の検出結果が陽性であり、且つ前記第二抗体の検出結果が陰性である場合に、前記検体中に前記ワクチンの接種により前記第一抗体が産生されている可能性があると判定する、
    ことを特徴とする請求項９に記載の検査方法。
11. イムノクロマトグラフィー法により検体中の第一抗体および第二抗体の有無を判定する検査方法であって、
    前記第一抗体は、ワクチンの接種または所定のウィルスの感染により産生される抗体であり、
    前記第二抗体は、前記ウィルスの感染により産生される抗体であり、
    第一検出部と、第二検出部と、該第一検出部および該第二検出部に共通の滴下エリアと、を含む検査片の該滴下エリアに前記検体を滴下し、該検査片内を移動させて該第一検出部と該第二検出部のそれぞれに同じ該検体を到達させる工程と、
    前記第一検出部により前記検体中の前記第一抗体の有無を判定し、前記第二検出部により前記検体中の前記第二抗体の有無を判定する工程と、
    前記第一抗体および前記第二抗体の検出結果を組み合わせて、前記検体中の前記ワクチンの接種による該第一抗体の産生の可能性を含む判定候補から一の判定を導出する工程と、を有する、
    ことを特徴とする検査方法。
12. 前記第一抗体の検出結果が陽性であり、且つ前記第二抗体の検出結果が陰性である場合に、前記検体中に前記ワクチンの接種により該第一抗体が産生されている可能性があると判定する、
    ことを特徴とする請求項１１に記載の検査方法。
13. 前記ウィルスは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウィルスである、
    ことを特徴とする請求項１１または請求項１２に記載の検査方法。

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