JP7128514B2 - 害虫を防除するための組成物及び害虫を防除する方法 - Google Patents
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Description
すなわち、本発明は、以下に示す害虫を防除するための組成物及び害虫を防除する方法を提供するものである。
〔1〕害虫を防除するための組成物であって、クチナーゼ様酵素を含み、前記害虫が、殺虫剤の虫体への付着を阻害する虫体被覆物を有することを特徴とする、組成物。
〔2〕害虫において殺虫剤の殺虫作用を増強するための組成物であって、クチナーゼ様酵素を含み、前記害虫が、前記殺虫剤の虫体への付着を阻害する虫体被覆物を有することを特徴とする、組成物。
〔3〕殺虫剤をさらに含む、前記〔1〕又は〔2〕に記載の組成物。
〔4〕前記クチナーゼ様酵素が、シュードザイマ(Pseudozyma)属、モエジオマイセス属(Moesziomyces)、パラフォーマ(Paraphoma)属、クリプトコッカス(Cryptococcus)属、ムコール(Mucor)属、フミコラ(Humicola)属、テルモミセス(Thermomyces)属、タラロミセス(Talaromyces)属、ケトミウム(Chaetomium)属、トルラ(Torula)属、スポロトリクム(Sporotrichum)属、マルブランケア(Malbranchea)属、アルタナリア(Alternaria)属、クラドスポリウム(Cladosporium)属、ぺニシリウム(Penicillium)属、ペキロマイセス(Paecilomyces)属、シュードモナス(Pseudomonas)属、バクテロイデス(Bacteroides)属、及び、アシドボラックス(Acidovorax)属から成る群から選択される少なくとも1種の微生物に由来する、前記〔1〕~〔3〕のいずれか一項に記載の組成物。
〔5〕前記クチナーゼ様酵素が、シュードザイマ・アンタクティカ(Pseudozyma antarctica)が産生するエステラーゼ(PaE)、パラフォーマ属類縁菌クチナーゼ様酵素(PCLE)、及び、クリプトコッカス・マグナス(Cryptococcus magnus)又はその類縁菌により産生されるクチナーゼ様酵素1(CmCut1)からなる群から選択される少なくとも1種である、前記〔1〕~〔4〕のいずれか一項に記載の組成物。
〔6〕前記害虫が、ロウ状物質を含む虫体被覆物を有する昆虫である、前記〔1〕~〔5〕のいずれか一項に記載の組成物。
〔7〕害虫を防除する方法であって、
クチナーゼ様酵素を含む組成物を前記害虫に接触させる工程を含み、
前記害虫が、殺虫剤の虫体への付着を阻害する虫体被覆物を有することを特徴とする、方法。
〔8〕害虫において殺虫剤の殺虫作用を増強する方法であって、
クチナーゼ様酵素を含む組成物を前記害虫に接触させる工程を含み、
前記害虫が、前記殺虫剤の虫体への付着を阻害する虫体被覆物を有することを特徴とする、方法。
〔9〕前記クチナーゼ様酵素の接触工程と同時に又はその後に、殺虫剤を含む組成物を前記害虫に接触させる工程をさらに含む、前記〔6〕又は〔7〕に記載の方法。
本発明は、害虫を防除するための組成物又は害虫において殺虫剤の殺虫作用を増強するための組成物に関しており、当該組成物は、クチナーゼ様酵素を有効成分として含み、前記害虫が、殺虫剤の虫体への付着を阻害する虫体被覆物を有することを特徴としている。前記虫体被覆物は、ロウ状物質を含み得るものであり、殺虫剤が虫体に付着しにくいため、そのような虫体被覆物を有している害虫(特に昆虫)を従来の殺虫剤単独で防除することは難しい。前記ロウ状物質は、高級脂肪酸及び/又は高級アルコールなどの比較的鎖長の長い構成部分を有するエステルを含み得る。前記虫体被覆物を有する害虫は、特に限定されないが、例えば、ミカンコナカイガラムシ、ミカンヒメコナカイガラムシ、及びフジコナカイガラムシなどのコナカイガラムシ類、並びに、カラマツカサアブラムシ、ヒメカサアブラムシなどのカサアブラムシ類などであってもよい。
P.アンタクティカを常法により培養し、その培養ろ液から50%飽和硫安沈殿物、70%エタノール可溶性成分、そして90%エタノール沈殿物を順に回収することによって、クチナーゼ様酵素であるPaEを粗精製した(要すれば特願2018-052952号を参照)。このPaEを10U、50U、又は100U含む酵素液(20mM Tris-HCl(pH9.0))を、それぞれ1mLずつ調製した。シャーレ内にミカンコナカイガラムシ(雌)約15匹を入れ、ここへスプレーを用いて各酵素液を噴霧した。対照区では、緩衝液のみを1mL噴霧処理した。シャーレの蓋を閉めて室温で24時間置いた後、仰天などの状態で動かない又は動けなくなった虫体の割合をノックダウン(KD)活性として評価した。結果を表1に示す。
(1)ミカンコナカイガラムシの虫体被覆物への酵素液処理の影響
実施例1に記載のように粗精製したPaE(粗精製酵素)を10Uの濃度で含む酵素液(20mM Tris-HCl、pH9.0)又はPaEを含む培養ろ液(4U)を各2mLずつ用意し、その中にミカンコナカイガラムシ(雌)を室温で浸漬した。対照区は酵素液を調製する際に使用した緩衝液(20mM Tris-HCl、pH9.0)を用いた。浸漬24時間後にミカンコナカイガラムシの状態を実体顕微鏡で観察した。結果を図2に示す。
PaE処理によって体表が露わになったミカンコナカイガラムシについて、外部から添加した溶液の浸潤のしやすさを検討するために、上記(1)と同様に各処理を行ったミカンコナカイガラムシに対し、水溶性染色試薬であるメチレンブルー(0.1%水溶液)を添加した。ロウ状の物質に覆われた対照区のミカンコナカイガラムシは、メチレンブルー水溶液を弾き、青色には呈色しなかった。一方、粗精製酵素を含む酵素液又は培養ろ液を用いた酵素処理によって体表の露わとなったミカンコナカイガラムシは、メチレンブルーによって青色に呈色した(図3)。したがって、ミカンコナカイガラムシの虫体被覆物をPaE処理によって分解すると、外部から添加された溶液が虫体内に浸潤しやすくなることがわかった。
上記(2)の結果から、ミカンコナカイガラムシのPaE処理により、殺虫剤も虫体に付着して虫体内に浸潤しやすくなる効果が期待された。そこで、緩衝液又は粗精製PaEを含む酵素液と住化スミチオン乳剤(住友化学株式会社製)(一般名フェニトロチオン、MEP)とを混合して、その混合液によるKD活性を調べた。PaEについては、終濃度4U/mLとなるように、緩衝液(20mM Tris-HCl、pH9.0)で調製した。住化スミチオン乳剤については、使用時に1000倍希釈液となるような通常使用される濃度で調製した処理区と、そこから段階的にさらに希釈した処理区とを用意した。このようにして調製した混合液1mLを、シャーレに採集したミカンコナカイガラムシ(雌)10匹に対して噴霧処理し、その24時間後に、ミカンコナカイガラムシのKD活性を測定した。4回試行した結果の平均値を図4に示す。
クチナーゼ様酵素であるPaE、PCLE(パラフォーマ属類縁菌由来)、及びCmCut1(クリプトコッカス・マグナス類縁菌由来)について、ミカンコナカイガラムシの体表を覆うロウ状の物質に対する影響を評価した。対照としては、クチナーゼ様酵素ではないリパーゼであるCalB(シュードザイマ・アンタクティカ由来)を使用した。
Claims (9)
- 害虫を防除するための組成物であって、クチナーゼ様酵素を害虫防除の有効成分として含み、前記害虫が、殺虫剤の虫体への付着を阻害する虫体被覆物を有することを特徴とする、組成物。
- 害虫において殺虫剤の殺虫作用を増強するための組成物であって、クチナーゼ様酵素を含み、前記害虫が、前記殺虫剤の虫体への付着を阻害する虫体被覆物を有し、前記虫体被覆物が、高級脂肪酸及び/又は高級アルコールのエステルを含むロウ状物質を含む、組成物。
- 殺虫剤をさらに含む、請求項1又は2に記載の組成物。
- 前記クチナーゼ様酵素が、シュードザイマ(Pseudozyma)属、モエジオマイセス属(Moesziomyces)、パラフォーマ(Paraphoma)属、クリプトコッカス(Cryptococcus)属、ムコール(Mucor)属、フミコラ(Humicola)属、テルモミセス(Thermomyces)属、タラロミセス(Talaromyces)属、ケトミウム(Chaetomium)属、トルラ(Torula)属、スポロトリクム(Sporotrichum)属、マルブランケア(Malbranchea)属、アルタナリア(Alternaria)属、クラドスポリウム(Cladosporium)属、ぺニシリウム(Penicillium)属、ペキロマイセス(Paecilomyces)属、シュードモナス(Pseudomonas)属、バクテロイデス(Bacteroides)属、及び、アシドボラックス(Acidovorax)属から成る群から選択される少なくとも1種の微生物に由来する、請求項1~3のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記クチナーゼ様酵素が、シュードザイマ・アンタクティカ(Pseudozyma antarctica)が産生するエステラーゼ(PaE)、パラフォーマ属類縁菌クチナーゼ様酵素(PCLE)、及び、クリプトコッカス・マグナス(Cryptococcus magnus)又はその類縁菌により産生されるクチナーゼ様酵素1(CmCut1)からなる群から選択される少なくとも1種である、請求項1~4のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記害虫が、ロウ状物質を含む虫体被覆物を有する昆虫である、請求項1に記載の組成物。
- 害虫を防除する方法であって、
クチナーゼ様酵素を害虫防除の有効成分として含む組成物を前記害虫に接触させる工程を含み、
前記害虫が、殺虫剤の虫体への付着を阻害する虫体被覆物を有することを特徴とする、方法。 - 害虫において殺虫剤の殺虫作用を増強する方法であって、
クチナーゼ様酵素を含む組成物を前記害虫に接触させる工程を含み、
前記害虫が、前記殺虫剤の虫体への付着を阻害する虫体被覆物を有し、前記虫体被覆物が、高級脂肪酸及び/又は高級アルコールのエステルを含むロウ状物質を含む、方法。 - 前記クチナーゼ様酵素の接触工程と同時に又はその後に、殺虫剤を含む組成物を前記害虫に接触させる工程をさらに含む、請求項7又は8に記載の方法。
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