JP7044709B2 - グルコースデヒドロゲナーゼ - Google Patents
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Description
[1]以下の(a)又は(b)のアミノ酸配列を有する、グルコースデヒドロゲナーゼ:
(a)配列番号1のアミノ酸配列の354位リジンがバリン、イソロイシン、プロリン又はグルタミンに置換されたアミノ酸配列;
(b)(a)のアミノ酸配列との同一性が80%以上のアミノ酸配列であって、該アミノ酸配列からなるポリペプチドは、配列番号1のアミノ酸配列からなるポリペプチドに比較して、グルコースデヒドロゲナーゼ活性の低温反応性が向上している、アミノ酸配列。
[2]前記同一性が85%以上である、[1]に記載のグルコースデヒドロゲナーゼ。
[3]前記同一性が90%以上である、[1]に記載のグルコースデヒドロゲナーゼ。
[4]配列番号21~24のいずれかのアミノ酸配列からなる、[1]に記載のグルコースデヒドロゲナーゼ。
[5]以下の(A)~(C)からなる群より選択されるいずれかのDNAからなるグルコースデヒドロゲナーゼ遺伝子:
(A)配列番号21~24のいずれかのアミノ酸配列をコードするDNA;
(B)配列番号25~28のいずれかの塩基配列からなるDNA;
(C)配列番号25~28のいずれかの塩基配列と等価な塩基配列を有し、且つグルコースデヒドロゲナーゼ活性を有するタンパク質をコードするDNA。
[6][5]に記載のグルコースデヒドロゲナーゼ遺伝子を含む組換えDNA。
[7][6]に記載の組換えDNAを保有する微生物。
[8]以下のステップ(1)~(3)を含む、グルコースデヒドロゲナーゼの調製法:
(1)[5]に記載のグルコースデヒドロゲナーゼ遺伝子を用意するステップ;
(2)前記遺伝子を発現させるステップ、及び
(3)発現産物を回収するステップ。
[9][1]~[4]のいずれか一項に記載のグルコースデヒドロゲナーゼを用いて試料中のグルコースを測定することを特徴とする、グルコース測定法。
[10][1]~[4]のいずれか一項に記載のグルコースデヒドロゲナーゼを含む、グルコース測定用試薬。
[11][10]に記載のグルコース測定用試薬を含む、グルコース測定用キット。
[12][1]~[4]のいずれか一項に記載のグルコースデヒドロゲナーゼを含む、グルコースセンサ。
[13][1]~[4]のいずれか一項に記載のグルコースデヒドロゲナーゼを含有する酵素剤。
本明細書において用語「単離された」は「精製された」と交換可能に使用される。用語「単離された」は、人為的操作が介在することなく産生される物の場合、天然の状態、即ち、自然界において存在している状態のものと区別するために使用され、人為的操作が介在して生産される物の場合、単離工程又は精製工程を経ていないものと区別するために使用される。前者の場合、単離するという人為的操作によって、天然の状態とは異なる状態である「単離された状態」となり、単離されたものは天然物自体と明確且つ決定的に相違する。一方、後者の場合、典型的には、単離工程又は精製工程によって不純物が除去され又はその量が低減され、純度が高まる。
本発明の第1の局面はグルコースデヒドロゲナーゼ変異酵素(以下、本酵素とも呼ぶ)に関する。本酵素の一態様は、配列番号1のアミノ酸配列の354位リジン(K)がバリン(V)、イソロイシン(I)、プロリン(P)又はグルタミン(Q)に置換されたアミノ酸配列を有する。
本発明の第2の局面は本酵素に関連する核酸を提供する。即ち、本酵素をコードする遺伝子、本酵素をコードする核酸を同定するためのプローブとして用いることができる核酸、本酵素をコードする核酸を増幅又は突然変異等させるためのプライマーとして用いることができる核酸が提供される。
本発明の更なる局面は本酵素の調製法に関する。本発明の調製法では、本発明者らが取得に成功した変異酵素を遺伝子工学的手法で調製する。具体的には、まず本酵素をコードする遺伝子を用意する(ステップ(1))。具体的には、例えば、配列番号21~24のいずれかのアミノ酸配列をコードする核酸を用意する。ここで、「配列番号21~24のいずれかのアミノ酸配列をコードする核酸」は、それを発現させた場合に当該アミノ酸配列を有するポリペプチドが得られる核酸であり、当該アミノ酸配列に対応する塩基配列からなる核酸は勿論のこと、そのような核酸に余分な配列(アミノ酸配列をコードする配列であっても、アミノ酸配列をコードしない配列であってもよい)が付加されていてもよい。また、コドンの縮重も考慮される。「配列番号21~24のいずれかのアミノ酸配列をコードする核酸」は、本明細書又は添付の配列表が開示する配列情報を参考にし、標準的な遺伝子工学的手法、分子生物学的手法、生化学的手法などを用いることによって、単離された状態に調製することができる。ここで、配列番号21のアミノ酸配列、配列番号22のアミノ酸配列、配列番号23のアミノ酸配列、配列番号24のアミノ酸配列はいずれも、アスペルギルス・イイズカエNo.5453株由来GDHのアミノ酸配列に変異を施したものである。従って、アスペルギルス・イイズカエNo.5453株由来GDHをコードする遺伝子(配列番号2の塩基配列)に対して必要な変異を加えることによっても、配列番号21~24のいずれかのアミノ酸配列をコードする核酸(遺伝子)を得ることができる。位置特異的塩基配列置換のための方法は当該技術分野において数多く知られており(例えば、Molecular Cloning, Third Edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, New Yorkを参照)、その中から適切な方法を選択して用いることができる。位置特異的変異導入法として、位置特異的アミノ酸飽和変異法を採用することができる。位置特異的アミノ酸飽和変異法は、タンパクの立体構造を基に、求める機能の関与する位置を推定し、アミノ酸飽和変異を導入する「Semi-rational,semi-random」手法である(J.Mol.Biol.331,585-592(2003))。例えば、Quick change(ストラタジーン社)等のキット、Overlap extention PCR(Nucleic Acid Res. 16,7351-7367(1988))を用いて位置特異的アミノ酸飽和変異を導入することが可能である。PCRに用いるDNAポリメラーゼはTaqポリメラーゼ等を用いることができる。但し、KOD-PLUS-(東洋紡社)、Pfu turbo(ストラタジーン社)などの精度の高いDNAポリメラーゼを用いることが好ましい。
本発明の更なる局面は本酵素の用途に関する。この局面ではまず、本酵素を用いたグルコース測定法が提供される。本発明のグルコース測定法では本酵素による酸化還元反応を利用して試料中のグルコース量を測定する。この反応による変化が利用できる各種用途に本発明を適用可能である。
公的機関から入手した保存菌株や自然界から入手した菌株を含む13,000株を培養して得られた培養液を試料として、以下の条件、即ち、グルコースデヒドロゲナーゼ活性が高いこと、マルトースに反応しないこと、キシロースへの反応性が低いこと、及びグルコースオキシダーゼ活性を示さないこと、を満たすものを以下の方法で選出した。
(測定試液)
100 mmol/L PIPES cont. 0.1%(w/v) Triton X-100 pH 7.0: 24mL
3 mmol/L 1-Methoxy PMS(Phenazine methanesulfate): 2mL
6.6 mmol/L NTB(Nitrotetrazorium blue): 1mL
1 mol/L グルコース: 3mL
サンプルを20μLずつ96wellプレートに分注後、測定試液を1ウェルあたり200μLずつ添加し、37℃、60分後、570nmの吸光度をプレートリーダーで測定した。上記測定試液のうち、グルコースをマルトース又はキシロースへ変更して同様に測定し、マルトース、キシロースへの反応性も確認した。
(測定試液)
100 mmol/L PIPES cont. 0.1%(w/v) Triton X-100 pH 7.0: 23mL
5g/dL フェノール試液: 0.5mL
25u/mL PO“Amano”3(天野エンザイム株式会社)溶液: 3mL
0.5g/dL 4-アミノアンチピリン試液: 0.5mL
1 mol/L グルコース: 3mL
サンプルを20μLずつ96wellプレートに分注後、測定試液を1ウェルあたり200μLずつ添加し、37℃、60分後、500nmの吸光度をプレートリーダーで測定した。
以上の検討によって見出された、Aspergillus iizukae No.5453株の生産するグルコースデヒドロゲナーゼについて、その精製酵素を取得すべく、Aspergillus iizukae No.5453株を以下の培地で30℃、5日間培養した。得られた培養液から菌体を除去し、粗酵素液とした。
(培地)
グルコース: 15.0%(w/v)
酵母エキス: 3.0%(w/v)
大豆ペプトン: 6.0%(w/v)
KH2PO4: 0.3%(w/v)
K2HPO4: 0.2%(w/v)
ヒドロキノン(pH6.0): 4mM
目的の酵素の活性ピークであるフラクションNo.34をSDS-PAGEで分離して得られたバンドについて、常法に従い、PVDF膜へブロッティングした後、N末アミノ酸解析を実施したところ、約60KDaのタンパク質(図1、矢印)で「SSSYDYIVIGGGTSGLTVAN(配列番号3)」の配列情報が得られた。同配列を問い合わせ配列として、NCBIが提供するBLAST解析を実施したところ、グルコースデヒドロゲナーゼである可能性が高いことが判明した。BLAST解析結果を図2に示す。
(i)電気泳動後のゲル試料を適当な大きさに切断する。
(ii)2-メルカプトエタノール及び4-ビニルピリジンを用いて還元アルキル化処理。
(iii)緩衝液(0.1mol/L炭酸水素アンモニウム)中でプロメガ社製Sequencing Grade Modified Trypsinを用いて消化後、ゲルからペプチド断片を抽出する。
高速液体クロマトグラフ(HPLC): LC-20Aシステム(株式会社島津製作所)
カラム: Cadenza CD-C18(2.0mmI.D.×150mm)(インタクト株式会社)
カラム温度: 50℃
検出波長: 214mm
注入量: 70μL
移動相流速: 0.2mL/min
移動相A: 水/トリフルオロ酢酸(1000/1)
移動相B: アセトニトリル/水/トリフルオロ酢酸(800/200/1)
上記3.で得られたN末アミノ酸解析結果とピークNo.5のアミノ酸解析結果に基づき、以下のプライマーを設計した。
プライマーGDH5453-F:TAYGAYTAYATHGTNATHGGNGGNGGNACNWSNGG(配列番号4)
プライマーGDH5453-5-1-R:NSWNGCDATRTGNACRTTNCC(配列番号5)
(反応液)
PrimeSTAR Max Premix(2×) 25μL
GDH5453-F 15 pmol
GDH5453-5-1-R 15 pmol
ゲノムDNA(1/1000希釈) 1μL
滅菌蒸留水で50μLに調整
(サイクル条件)
98℃で10秒、55℃で15秒、72℃で2分の条件で35サイクル
プライマーFS51R07F:AACCGTCTGTCTGAAGACCC(配列番号7)
プライマーFS51R07R:TACTTCCTTTTGCTCG(配列番号8)
Aspergillus iizukae No.5453株由来GDHの遺伝子配列(配列番号2)をもとに以下のプライマーを設計した。
5453K354_FW: cctgtctcctaccccaac(配列番号16)
5453K354V_R1: ggggtaggagacaggaactccaccggagagagt(配列番号17)
5453K354I_R2: ggggtaggagacagggattccaccggagagagt(配列番号18)
5453K354P_R3: ggggtaggagacaggaggtccaccggagagagt(配列番号19)
5453K354Q_R4: ggggtaggagacaggttgtccaccggagagagt(配列番号20)
(反応液)
PrimeSTAR Max Premix(2×) 25μL
FWプライマー 15 pmol
R1~4プライマー 15 pmol
プラスミドDNA 1μL
滅菌蒸留水で50μLに調整
(サイクル条件)
98℃で10秒、55℃で15秒、72℃で2分の条件で35サイクル
本GDHは、電子受容体存在下でグルコースの水酸基を酸化してグルコノ-δ-ラクトンを生成する反応を触媒する。GDH活性の検出は、下記の反応系で行った。
反応(1)において、グルコースの酸化に伴って還元型PMSが生成し、更に反応(2)において還元型PMSによるDCIPの還元により生成した還元型DCIPを600nmの波長で測定する。
K354V変異酵素:配列番号21(アミノ酸配列);配列番号25(遺伝子配列)
K354I変異酵素:配列番号22(アミノ酸配列);配列番号26(遺伝子配列)
K354P変異酵素:配列番号23(アミノ酸配列);配列番号27(遺伝子配列)
K354Q変異酵素:配列番号24(アミノ酸配列);配列番号28(遺伝子配列)
Aspergillus iizukae No.5453株由来GDHの遺伝子配列をもとに、以下のプライマーを設計した。
GD41F: ccacagaaggcatttatgttgggcaaactcacgttctt(配列番号29)
GD42R: gctttatctaccaaactacacagcagcagcatcgg(配列番号30)
(反応液)
PrimeSTAR Max Premix(2×) 25μL
GD41F 15 pmol
GD42R 15 pmol
ゲノムDNA(1/1000希釈) 1μL
滅菌蒸留水で50μLに調整
(サイクル条件)
98℃で10秒、55℃で15秒、72℃で2分の条件で35サイクル
本GDHは、電子受容体存在下でグルコースの水酸基を酸化してグルコノ-δ-ラクトンを生成する反応を触媒する。GDH活性の検出は、下記の反応系で行った。
配列番号5:人工配列の説明:プライマーGDH5453-5-1-R
配列番号6:人工配列の説明:PCR産物
配列番号7:人工配列の説明:プライマーFS51R07F
配列番号8:人工配列の説明:プライマーFS51R07R
配列番号16:人工配列の説明:プライマー5453K354_FW
配列番号17:人工配列の説明:プライマー5453K354V_R1
配列番号18:人工配列の説明:プライマー5453K354I_R2
配列番号19:人工配列の説明:プライマー5453K354P_R3
配列番号20:人工配列の説明:プライマー5453K354Q_R4
配列番号21:人工配列の説明:K354V変異酵素
配列番号22:人工配列の説明:K354I変異酵素
配列番号23:人工配列の説明:K354P変異酵素
配列番号24:人工配列の説明:K354Q変異酵素
配列番号25:人工配列の説明:K354V変異酵素
配列番号26:人工配列の説明:K354I変異酵素
配列番号27:人工配列の説明:K354P変異酵素
配列番号28:人工配列の説明:K354Q変異酵素
配列番号29:人工配列の説明:プライマーGD41F
配列番号30:人工配列の説明:プライマーGD42R
Claims (11)
- 以下の(a)又は(b)のアミノ酸配列からなる、グルコースデヒドロゲナーゼ:
(a)配列番号1のアミノ酸配列の354位リジンがバリン、イソロイシン、プロリン又はグルタミンに置換されたアミノ酸配列;
(b)(a)のアミノ酸配列のうち、354位以外のアミノ酸配列との同一性が90%以上のアミノ酸配列であって、該アミノ酸配列からなるポリペプチドは、配列番号1のアミノ酸配列からなるポリペプチドに比較して、37℃でのグルコースデヒドロゲナーゼ活性に対する20℃でのグルコースデヒドロゲナーゼ活性が向上している、アミノ酸配列。 - 配列番号21~24のいずれかのアミノ酸配列からなる、請求項1に記載のグルコースデヒドロゲナーゼ。
- 以下の(A)又は(B)のDNAからなるグルコースデヒドロゲナーゼ遺伝子:
(A)配列番号21~24のいずれかのアミノ酸配列をコードするDNA;
(B)配列番号21~24のいずれかのアミノ酸配列をコードする塩基配列のうち、1060~1062位の塩基配列以外の塩基配列に対して90%以上の同一性を有する塩基配列からなり、且つ配列番号1のアミノ酸配列からなるポリペプチドに比較して37℃でのグルコースデヒドロゲナーゼ活性に対する20℃でのグルコースデヒドロゲナーゼ活性が向上しているポリペプチドのアミノ酸配列をコードするDNA。 - 請求項3に記載のグルコースデヒドロゲナーゼ遺伝子を含む組換えDNA。
- 請求項4に記載の組換えDNAを保有する微生物。
- 以下のステップ(1)~(3)を含む、グルコースデヒドロゲナーゼの調製法:
(1)請求項3に記載のグルコースデヒドロゲナーゼ遺伝子を用意するステップ;
(2)前記遺伝子を発現させるステップ、及び
(3)発現産物を回収するステップ。 - 請求項1又は2に記載のグルコースデヒドロゲナーゼを用いて試料中のグルコースを測定することを特徴とする、グルコース測定法。
- 請求項1又は2に記載のグルコースデヒドロゲナーゼを含む、グルコース測定用試薬。
- 請求項8に記載のグルコース測定用試薬を含む、グルコース測定用キット。
- 請求項1又は2に記載のグルコースデヒドロゲナーゼを含む、グルコースセンサ。
- 請求項1又は2に記載のグルコースデヒドロゲナーゼを含有する酵素剤。
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Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2019230614A1 (ja) * | 2018-05-29 | 2019-12-05 | 天野エンザイム株式会社 | グルコースデヒドロゲナーゼの改良 |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2004058958A1 (ja) | 2002-12-24 | 2004-07-15 | Ikeda Food Research Co., Ltd. | 補酵素結合型グルコース脱水素酵素 |
WO2007139013A1 (ja) | 2006-05-29 | 2007-12-06 | Amano Enzyme Inc. | フラビンアデニンジヌクレオチド結合型グルコース脱水素酵素 |
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WO2015060150A1 (ja) | 2013-10-21 | 2015-04-30 | 東洋紡株式会社 | 新規なグルコースデヒドロゲナーゼ |
JP2015146773A (ja) | 2014-02-06 | 2015-08-20 | 東洋紡株式会社 | 新規なグルコースデヒドロゲナーゼ |
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Family Cites Families (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
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Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2004058958A1 (ja) | 2002-12-24 | 2004-07-15 | Ikeda Food Research Co., Ltd. | 補酵素結合型グルコース脱水素酵素 |
WO2007139013A1 (ja) | 2006-05-29 | 2007-12-06 | Amano Enzyme Inc. | フラビンアデニンジヌクレオチド結合型グルコース脱水素酵素 |
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