JP6981013B2 - 細胞容器 - Google Patents

Description

本開示は、細胞または細胞塊を収容するための細胞容器と、その細胞容器に収容された細胞塊に関する。

従来から細胞塊を培養するための容器が知られている（下記特許文献１を参照）。特許文献１に記載された従来の細胞塊用培養容器は、前記細胞塊と培養液とを収容可能とする培養空間を有するウェルと、前記ウェルの開口を有する面上に配置され前記培養空間と連通した内腔を有する筒状体と、前記ウェルの開口よりも上方に突出して前記ウェルを囲う側壁とを含んでいる。また、前記側壁が前記筒状体の外側に配置されており、前記筒状体の筒壁に、前記筒状体の外側に前記細胞塊を通過させることなく前記培養液を排出させうる１個以上の連通部が形成されている（同文献、請求項１等を参照）。

また、細胞や組織片などの被培養物を培養してスフェロイド（細胞凝集塊）を作製する細胞培養容器に関する発明が知られている（下記特許文献２を参照）。特許文献２に記載された細胞培養容器は、被培養物が培養される隔室を形成する窪み部が複数形成された培養面と、前記培養面を底面に備える容器本体と、複数の窪み部の上部に載置され前記窪み部の開口を塞ぐ透液性蓋体とを備えている。また、前記培養面は、互いに近接する前記窪み部の間の頂部が非平坦面からなっている。また、前記透液性蓋体は、前記容器本体内の培養液中に浸漬された状態で前記窪み部の間の頂部との距離が、前記窪み部内で培養された前記被培養物の外径寸法よりも小さくなるよう配置されている（同文献、請求項１等を参照）。

また、付着性細胞を用いてスフェロイドを培養する方法、およびスフェロイド培養に好適な培養容器に関する発明が知られている（下記特許文献３を参照）。特許文献３に記載された培養容器は、細胞非接着性の底面と、当該底面を囲んで設けられた壁とを具備している。また、上記底面に細胞非接着性の表面で構成された複数の凹陥部が設けられ、上記各凹陥部が、重力方向における最下位置へ連続する斜面を有している（同文献、段落００２２等を参照）。

また、薬物などの効果判定やその毒性を試験する場合に、培養細胞を用いて行うバイオアッセイ法、および治療を目的とした細胞の培養方法に用いられる細胞培養容器に関する発明が知られている（下記特許文献４を参照）。特許文献４に記載された細胞培養容器は、少なくとも被培養物を収容する容器本体と、前記容器本体の開口部を覆う蓋体と、前記容器本体の底部に形成された貫通孔を覆う板状基板とを備えている。また、前記板状基板には、前記被培養物を培養するための微細凹凸パターンが形成されている（同文献、請求項１等を参照）。

特許第５９５００５５号公報 特開２０１５−７３５２０号公報 特許第５５７８７７９号公報 国際公開第２００６／１２３５７０号

前記特許文献１に記載された従来の細胞塊用培養容器では、細胞塊が培養液中を浮遊し筒状体の先端を越えて筒状体と側壁の間や、隣接する筒状体およびウェル内に移動することが起こらないよう、筒状体の高さが設定される（同文献、段落００２８および００９２等を参照）。そのため、培養容器への細胞塊の移設は、１つのウェル内に対して１つの細胞塊が配置されるように行う必要があり、操作が煩雑である（同文献、段落００５９等を参照）。

前記特許文献２に記載された細胞培養容器は、容器が大きく搖動した際に生じる細胞の隣接する窪み部への移動を抑制することで、所望の大きさのスフェロイドを均一に形成することを目的としている（同文献、段落０００８等を参照）。この目的を達成するためには、透液性蓋体を窪み部の間の頂部との距離が、窪み部内で培養された被培養物の外径寸法よりも小さくなるよう配置する必要がある。しかし、このような配置を実現するには、透液性蓋体を容器本体の窪み部側（すなわち、培養面側）に付勢した状態で保持するためのものである、保持具を必要とするなど（同文献、００１９段落等を参照）、容器の構成が複雑になり、コストが増加するだけでなく、培養操作も煩雑になる。

前記特許文献３に記載された細胞容器は、たとえば培地交換などの培養操作を行うときに、円筒形状の側壁の上端部によって画定された開口部から、内部空間に培地を導入することになる（同文献、段落００３０および図１から図４等を参照）。このとき、培地の流れは、上記開口部から底へ向かって流れるため、各凹陥部において形成されたスフェロイドが、培地の流れによって各凹陥部から流出するおそれがある。

また、前記特許文献３には、側壁を厚み方向（水平方向）へ貫通する孔が設けられて、流入口および流出口が形成されている、スフェロイド培養容器が記載されている（同文献、段落００４３および図９等を参照）。この場合、上記開口部から底へ向かう培地の流れは緩和される可能性があるが、容器の構成が複雑になり、コストが増加するだけでなく、流入口および流出口が側壁から突出して形成されているため、輸送時などに邪魔になるおそれがある。

また、前記特許文献４に記載された細胞培養容器において、微細凹凸パターンは、立体的な増殖が可能であることに加え、培養細胞の伸展方向が制御でき、かつ個々の空間構造で培養した細胞が連結することにより、生体組織と同様な組織を、所望の面積、厚さで得ることが可能となるように設けられている（同文献、段落００２１）。したがって、前記特許文献４の段落００５０および図１２Ａから図１２Ｃに記載された凹みは、個々の凹みにそれぞれ細胞や細胞塊を分離して収容する用途には適さない。

本開示は、前記課題に鑑みてなされたものであり、簡単な操作で効率よく複数の細胞塊を作成することができる細胞容器と、その細胞容器に収容された細胞塊を提供することを目的とする。

前記目的を達成すべく、本開示の細胞容器は、複数の細胞塊を収容可能な細胞容器であって、底壁と、該底壁の周囲に立設された側壁と、該側壁との間に間隔をあけて前記底壁の内表面に凹状に設けられた細胞収容部と、該細胞収容部の底面に凹状に設けられ個々の前記細胞塊を収容可能な複数のウェルと、を備えることを特徴とする。

本開示の細胞容器は、底壁の内表面に凹状に設けられた細胞収容部に、その細胞収容部の容積と同程度の体積の細胞懸濁液を収容してメニスカスの形成を抑制した状態で、その細胞懸濁液に含まれる細胞を沈降させることができる。そして、沈降させた細胞を、細胞収容部の底面に凹状に設けられた複数のウェルに、おおむね均等に分離して収容することができる。さらに、複数のウェルに分離して収容した細胞を培養することで、効率よく複数の細胞塊を作成することができる。

前記側壁と前記細胞収容部との間の前記底壁の内表面は、平坦面であってもよい。平坦面とは、たとえば、ウェルを含む凹部や細胞の三次元培養を目的とする凸部のような凹凸を有しない平らな面であり、細胞容器を水平な面の上に置いたときに、水平面におおむね平行になるような傾斜を有しない面である。これにより、細胞容器に培地等を導入するときに、側壁の上部の開口部から導入された培地を平坦面である底壁の内表面に沿って流し、細胞収容部およびウェルの深さ方向に対しておおむね垂直な方向に培地を流すことができる。

したがって、たとえば底壁の内表面におおむね垂直で細胞収容部およびウェルの深さ方向の培地の流れを抑制し、ウェルに収容された細胞や細胞塊が流出するのを防止できる。また、ウェルに収容された細胞や細胞塊を回収するときに、たとえば細胞容器を傾斜させ、ウェルに収容された細胞や細胞塊を培地とともに細胞収容部から平坦面である底壁の内表面に流出させて回収することで、細胞や細胞塊の回収を容易にすることができる。

また、前記側壁と前記細胞収容部との間の前記底壁の内表面は、前記細胞収容部の開口縁から前記側壁へ向けて、前記側壁の上端部によって画定された開口部から遠ざかるように傾斜した傾斜面であってもよい。これにより、細胞容器に培地等を導入するときに、側壁の上部の開口部から導入された培地を傾斜面である底壁の内表面に沿って流し、細胞収容部およびウェルの深さ方向において底部と反対方向へ向けて培地を流すことができる。

したがって、側壁の上部の開口部から導入された培地の流れによってウェルに収容された細胞や細胞塊が流出するのを防止できる。また、ウェルに収容された細胞や細胞塊を回収するときに、たとえば細胞容器を傾斜させ、ウェルに収容された細胞や細胞塊を培地とともに細胞収容部から傾斜面である底壁の内表面に流出させ、細胞容器を水平な面の上に置く。すると、底壁の内表面が前述のような傾斜面であるため、底壁の内表面に流出させた細胞や細胞塊が再び細胞収容部へ流入することが抑制され、細胞や細胞塊の回収を容易にすることができる。

本開示の細胞容器は、前記細胞収容部の開口部を覆うシート状の被覆部材を備え、該被覆部材の周縁部は前記底壁の内表面の上に支持されていてもよい。これにより、たとえば細胞、細胞塊、培地などが収容された細胞収容部を被覆部材によって覆い、細胞、細胞塊、培地などが細胞収容部の外に流出するのを防止できる。また、被覆部材の周縁部と底壁の内表面との間に培地が介在する場合には、培地の表面張力によって被覆部材の周縁部を底壁の内表面に保持し、細胞収容部の開口部を覆う被覆部材が外れて開口部が露出するのを防止できる。

前記底壁の内表面は、前記細胞収容部の開口部の周囲に、前記被覆部材の周縁部を嵌合させる凹状の嵌合部を有してもよい。これにより、被覆部材の周縁部を底壁の内表面の嵌合部に嵌合させ、細胞収容部の開口部を覆う被覆部材が外れて開口部が露出するのを、より確実に防止できる。

本開示の細胞容器は、前記側壁によって画定された開口部を覆う蓋部を有し、該蓋部と前記被覆部材との間に配置されて前記底壁との間に前記被覆部材の周縁部を挟持する支持部を有してもよい。開口部を覆う蓋部を有することで、開口部から細胞容器の内部への雑菌などの侵入を抑制することができ、細胞容器の内部に収容された培地や細胞塊等が開口部から外へ出るのを防止できる。また、蓋部と被覆部材の間に配置された支持部と底壁との間に被覆部材の周縁部を挟持することで、細胞収容部の開口部を覆う被覆部材が外れて開口部が露出するのを、より確実に防止できる。

本開示の細胞容器は、前記側壁によって画定された開口部を覆う蓋部を有し、該蓋部を前記側壁に取り外し可能に固定する蓋固定部を有してもよい。これにより、細胞容器の開口部を覆う蓋部が細胞容器から意図せず脱落するのを防止できる。

前記複数のウェルは、等間隔に配置されていてもよい。これにより、複数のウェルに細胞をより均等に収容することができる。また、複数のウェルの配置パターンは特に限定されないが、たとえば縦横に所定の間隔で配置することができる。

前記複数のウェルにおいて、互いに隣接するウェル同士の間隔は、前記ウェルの開口部の直径または最大幅より小さくてもよい。これにより、細胞懸濁液に含まれる細胞が互いに隣接するウェルとウェルとの間に沈降したときに、その細胞をウェルの開口部に導入して効率よくウェルに収容することができる。

前記複数のウェルにおいて、前記細胞収容部の側面と、該側面に隣接するウェルとの間隔は、前記ウェルの開口部の直径または最大幅より小さくてもよい。これにより、細胞懸濁液に含まれる細胞が細胞収容部の側面と、その側面に隣接するウェルとの間に沈降したときに、その細胞をウェルの開口部に導入して効率よくウェルに収容することができる。

前記細胞収容部は、前記底面、該底面の周囲の側面、および前記ウェルの内表面が、タンパク質低吸着処理が施された細胞低吸着面であってもよい。これにより、タンパク質低吸着処理が施されていない細胞容器の表面と比較して、細胞懸濁液に含まれる細胞が細胞収容部の底面および側面に吸着されることが抑制され、細胞をウェルに効率よく導入することができる。また、ウェルに導入された細胞がウェルの内表面に吸着されることを抑制して、ウェルの内部で細胞塊を効率よく培養することができる。

前記側壁の内表面および前記底壁の内表面は、タンパク質低吸着処理が施された細胞低吸着面であってもよい。これにより、細胞容器の側壁の内表面および底壁の内表面に細胞が吸着されるのを抑制して、細胞または細胞塊の回収を容易にすることができる。

本開示の細胞容器は、複数の前記細胞収容部を備えていてもよい。この場合、複数の細胞収容部において、均一な条件で細胞塊を作成することができる。

本開示の細胞容器は、分離可能に接続された複数の小容器を備え、前記複数の小容器は、それぞれ前記底壁と前記側壁と前記細胞収容部と前記複数のウェルとを有してもよい。この場合、複数の小容器において、均一な条件で細胞塊を作成することができる。

本開示の細胞塊は、上記いずれかの細胞容器に収容されていることを特徴とする。これにより、簡単な操作で効率よく複数の細胞塊を作成することができ、細胞塊の搬送および回収を容易にすることができる。

本開示によれば、簡単な操作で効率よく複数の細胞塊を作成することができる細胞容器と、その細胞容器に収容された細胞塊を提供することができる。

本開示の一実施形態に係る細胞容器を示す概略的な断面図。 図１Ａに示す細胞容器の別の例を示す概略的な断面図。 図１Ａに示す細胞容器の別の例を示す概略的な断面図。 図１Ａに示す細胞容器のウェルの拡大図。 図１Ａに示す細胞容器を用いた細胞塊の作成方法の一例を示すフロー図。 図３に示す懸濁液導入工程の説明図。 図３に示す細胞沈降工程の説明図。 図３に示す細胞塊形成工程の説明図。 図３に示す細胞塊形成工程の説明図。 図３に示す細胞塊形成工程の説明図。 図３に示す検査工程を説明する写真図。 図１に示す細胞容器を用いた細胞塊の搬送方法の一例を示すフロー図。 図１０に示す培地除去工程の説明図。 図１０に示すカバー設置工程の説明図。 図１０に示すカバー設置工程の他の例を示す説明図。 図１０に示すカバー設置工程の他の例を示す説明図。 図１２に示す細胞容器を用いた細胞塊の回収方法の一例を示すフロー図。 図１５に示すカバー除去工程の説明図。 図１５に示す細胞塊回収工程の説明図。 図１５に示す細胞塊回収工程の他の例を示す説明図。 図１５に示す細胞塊回収工程の他の例を示す説明図。 図１５に示す細胞塊回収工程の他の例を示す説明図。 図１５に示す細胞塊回収工程を説明する写真図。 図１５に示す細胞塊回収工程を説明する写真図。 図１５に示す細胞塊回収工程を説明する写真図。 図１Ａに示す細胞容器の変形例１を示す概略的な平面図。 図１Ａに示す細胞容器の変形例２を示す概略的な平面図。 図１Ａに示す細胞容器の変形例３を示す概略的な断面図。 図１Ａに示す細胞容器の変形例３を示す概略的な断面図。

以下、図面を参照して本開示の細胞容器および細胞塊について説明する。また、細胞容器および細胞塊と併せて、細胞塊の作成方法、搬送方法、回収方法、および評価方法についても説明する。

［細胞容器］
図１Ａは、本開示の一実施形態に係る細胞容器１００を示す概略的な断面図である。本実施形態の細胞容器１００は、後述する複数の細胞塊ＣＳ（図９参照）を収容可能な容器である。細胞容器１００は、主に、底壁１０と、この底壁１０の周囲に立設された側壁２０と、この側壁２０との間に間隔をあけて底壁１０の内表面１０ａに凹状に設けられた細胞収容部３０と、この細胞収容部３０の底面３１に凹状に設けられ個々の細胞塊ＣＳを収容可能な複数のウェル４０と、を備えている。

細胞容器１００は、細胞Ｃ（図５参照）または細胞塊ＣＳを収容して培養したり、培養した細胞Ｃまたは細胞塊ＣＳを収容して搬送したり、一定の期間に亘って保存したり、顕微鏡観察や所定の操作を行うために一時的に収容したりするための容器である。すなわち、細胞容器１００は、たとえば、細胞収容容器、細胞培養容器、細胞搬送容器、細胞保存容器、または細胞観察容器として用いることができる。

細胞容器１００に収容される細胞Ｃとしては、たとえば、受精卵、卵細胞、ＥＳ細胞（胚性幹細胞）およびｉＰＳ細胞（人工多能性幹細胞）等、哺乳動物および鳥類の細胞を挙げることができる。ここで、哺乳動物は、温血脊椎動物を指し、例えば、ヒトおよびサルなどの霊長類、マウス、ラットおよびウサギ等の齧歯類、イヌおよびネコ等の愛玩動物、ならびにウシ、ウマおよびブタ等の家畜が挙げられる。

細胞容器１００の素材は、特に限定されず、無機材料および有機材料のいずれも用いることができる。無機材料としては、たとえば、金属、ガラス、およびシリコン等を用いることができる。有機材料としては、たとえば、ポリスチレン樹脂、ポリエチレン樹脂、ポリプロピレン樹脂、ＡＢＳ樹脂、ナイロン、アクリル樹脂、フッ素樹脂、ポリカーボネート樹脂、ポリウレタン樹脂、メチルペンテン樹脂、フェノール樹脂、メラミン樹脂、エポキシ樹脂、塩化ビニル樹脂、ポリエステル樹脂等のプラスチック材料を用いることができる。なお、細胞容器１００に収容された細胞Ｃや細胞塊ＣＳを観察するために、細胞容器１００の素材は、可視光に対する透明性、すなわち透光性を有することが好ましい。

図１Ａに示す例において、細胞容器１００は、有底短円筒形状のディッシュ型である。なお、細胞容器１００の形状は、特に限定されず、たとえば、底壁１０に垂直な平面視で、矩形、多角形、円形、楕円形等、任意の形状にすることができる。細胞容器１００は、底壁１０とその周囲を取り囲む側壁２０とによって、細胞Ｃまたは細胞塊ＣＳを収容するための内部空間が画定されている。なお、細胞容器１００は、側壁２０によって画定され、底壁１０に接続された側壁２０の下端部と反対側の側壁２０の上端部に開口する開口部２１を覆う、蓋部５０（図１２参照）を有してもよい。

底壁１０は、細胞容器１００の内部空間に臨む内表面１０ａに凹部を有している。この底壁１０の内表面１０ａの凹部によって、底壁１０の内表面１０ａに開口する細胞収容部３０が画定されている。図１Ａに示す例において、底壁１０は、細胞容器１００の底面（外底面）１０ｂ側に配置された底壁下部１１と、底壁１０の内表面１０ａ側に配置された底壁上部１２とを有している。底壁上部１２は、底壁下部１１の上面に接合されていてもよいし、底壁下部１１の上面に取り外し可能に配置されていてもよい。また、底壁下部１１と底壁上部１２とは、たとえば、同一素材を一体成形することにより一体に設けられていてもよい。

図１Ａに示す例において、底壁下部１１は、周縁部に側壁２０が接続され、細胞容器１００の底面１０ｂと反対側の上面が、細胞収容部３０に露出し、細胞収容部３０の底面３１になっている。底壁下部１１の上面の一部である細胞収容部３０の底面３１には、複数の凹状のウェル４０が設けられている。また、図１Ａに示す例において、底壁上部１２は、側壁２０の内側にぴったりとはめ込まれた平板状の部材であり、細胞収容部３０に対応する位置に開口する貫通孔を有している。底壁上部１２の貫通孔の内壁面が、細胞収容部３０の側面３２になっている。

図１Ａに示す例において、側壁２０と細胞収容部３０との間の底壁１０の内表面１０ａは、平坦面とされている。平坦面とは、たとえば、ウェル４０を含む凹部や細胞の三次元培養を目的とする凸部のような凹凸を有しない平らな面である。すなわち、底壁１０の内表面１０ａは、底壁１０の底面１０ｂとおおむね平行であり、細胞容器１００を水平な面の上に置いたときに、水平面におおむね平行になるような傾斜を有しない面である。

図１Ｂおよび図１Ｃは、図１Ａに示す細胞容器１００の別の例を示す概略的な断面図である。図１Ｂおよび図１Ｃに示すように、側壁２０と細胞収容部３０との間の底壁１０の内表面１０ａは、傾斜面であってもよい。たとえば、底壁１０の内表面１０ａは、細胞収容部３０の開口縁３３ｅから側壁２０へ向けて、細胞容器１００の開口部２１から遠ざかるように傾斜した傾斜面であってもよい。この場合、底壁１０の内表面１０ａは、細胞収容部３０の開口縁３３ｅに隣接する部分において、底壁１０の底面１０ｂから内表面１０ａまでの高さが最大になり、側壁２０に隣接する部分において、底壁１０の底面１０ｂから内表面１０ａまでの高さが最小になる。すなわち、底壁１０の内表面１０ａは、細胞容器１００を水平な面の上に置いたときに、細胞収容部３０の開口縁３３ｅから側壁２０へ向けて次第に低くなるように傾斜した傾斜面になっていてもよい。

図１Ｂに示す例において、細胞容器１００の底壁１０の内表面１０ａは、底面１０ｂに沿う一方向の片側だけが傾斜面になっている。このように、細胞容器１００の底壁１０の内表面１０ａは、上記一方向における中心に対して非対称の形状になっている。また、図１Ｃに示す例において、細胞容器１００の底壁１０の内表面１０ａは、細胞収容部３０の開口部３３の近傍の部分と、側壁２０の近傍の部分が、底面１０ｂに平行な平坦面になっている。そして、底壁１０の内表面１０ａは、細胞収容部３０に隣接する平坦面の外縁から側壁２０に隣接する平坦面の内縁までが、傾斜面になっている。なお、底壁１０の内表面１０ａにおける傾斜面の底面１０ｂに対する傾斜角度は、０°から９０°までの範囲で選択することができる。なお、細胞容器１００の底面１０ｂから細胞収容部３０の開口縁３３ｅまでの高さは、開口部３３の全周にわたって等しくなっている。

また、図示は省略するが、底壁１０の内表面１０ａは、細胞収容部３０の開口部３３を取り囲む凸部を有してもよい。凸部は、たとえば、細胞収容部３０の開口縁３３ｅの全周にわたって環状に連続して設けられ、底壁１０の内表面１０ａから細胞容器１００の開口部２１へ向けて突出した堤防状に設けることができる。底壁１０の内表面１０ａから凸部の先端までの高さは特に限定されないが、たとえば、細胞収容部３０の開口部３３から底面３１までの深さよりも低くすることができる。

また、底壁１０の内表面１０ａは、タンパク質低吸着処理が施された細胞低吸着面Ｆであってもよい。ここで、タンパク質低吸着処理は、細胞容器１００に対するタンパク質の吸着性を低下させ、細胞容器１００に対する細胞の吸着を防止することができる処理であれば、特に限定されない。具体的には、タンパク質低吸着処理は、たとえば、親水性ポリマーを用いた表面の親水化処理、ならびに、容器の原料に対する親水性ポリマーの配合および表面の平滑化処理などを含む。すなわち、細胞低吸着面Ｆは、タンパク質低吸着処理が施されていない細胞容器１００の表面と比較して、細胞の吸着性が低下されている。

側壁２０は、底壁１０の周縁部に接続され、たとえば底壁１０の底面１０ｂにおおむね垂直に設けられている。より具体的には、側壁２０は、底壁１０の底面１０ｂに対して、たとえば８０°から９０°程度の角度αを有している。側壁２０は、底壁１０に対して取り外し可能に取り付けられていてもよいし、下端が底壁１０の周縁部に接合されていてもよいし、底壁１０と一体に設けられていてもよい。図１Ａに示す例において、側壁２０は、たとえば同一素材を一体成形することで底壁下部１１と一体に設けられ、下端が底壁下部１１の周縁部に接続されている。細胞容器１００の内部空間に臨む側壁２０の内表面２２は、前述のタンパク質低吸着処理が施された細胞低吸着面Ｆであってもよい。

細胞収容部３０は、側壁２０との間に間隔をあけて底壁１０の内表面１０ａに凹状に設けられている。細胞収容部３０は、底面３１と側面３２によって画定された凹状の空間であり、細胞懸濁液Ｓ、培地Ｍ、細胞塊ＣＳ（図５参照）を収容することができるようになっている。細胞収容部３０の容積は、たとえば、細胞懸濁液Ｓの濃度調整を容易にするとともに、細胞懸濁液Ｓの収容時に細胞懸濁液Ｓに細胞Ｃが均一に分散した状態を維持する観点から、１０μＬ以上にすることができる。

図１Ａに示す例において、細胞収容部３０の底面３１は、前述のように、底壁下部１１の上面の一部であり、細胞収容部３０の側面３２は、前述のように、底壁上部１２の貫通孔の内側面である。細胞収容部３０の内表面、すなわち、底面３１と、この底面３１の周囲の側面３２は、前述のタンパク質低吸着処理が施された細胞低吸着面Ｆであってもよい。また、細胞収容部３０の側面３２は底面３１に対しておおむね垂直になっている。より具体的には、たとえば、細胞収容部３０の側面３２は、底面３１に対して８５°以上９５°以下の角度βを有することができる。なお、細胞収容部３０の側面３２は、底面３１に対する角度βが、可能な限り９０°に近いことが好ましい。

細胞収容部３０の底面３１から開口部３３までの深さは、取り扱う細胞Ｃに応じて適宜変更することができる。たとえば、細胞容器１００によってＨｅｐＧ２（ヒト肝癌由来細胞株）の細胞塊ＣＳを作成する場合には、細胞収容部３０の底面３１から開口部３３までの深さは、約１ｍｍ程度にすることができる。また、図１Ａに示す例において、細胞収容部３０は、細胞容器１００の底壁１０の中央に設けられているが、細胞容器１００の底壁１０の中央と側壁２０との間の一方向に偏った位置に設けられていてもよい。

図２は、図１Ａに示す細胞収容部３０の側面３２と底面３１の拡大図である。

複数のウェル４０は、細胞収容部３０の底面３１に凹状に設けられ、ひとつのウェル４０にひとつの細胞塊ＣＳを収容可能に構成されている。すなわち、複数のウェル４０のそれぞれに１つの細胞塊ＣＳを収容することによって、複数の細胞塊ＣＳを個々に分離して収容することができるようになっている。ウェル４０の開口部４１の形状は、特に限定されないが、たとえば円形である。ウェル４０の内表面、すなわちウェル４０の底面４２と側面４３は、前述のタンパク質低吸着処理が施された細胞低吸着面Ｆであってもよい。また、複数のウェル４０は、細胞収容部３０の底面３１に設けられた凸部と凸部の間に凹状に設けられていてもよい。

図２に示す例において、ウェル４０は、台形状の断面形状を有し、全体として円錐台形状の形状に形成されている。ウェル４０は、開口部４１から底面４２へ向けて内径が次第に減少するように、底面４２に垂直な方向に対して側面４３が傾斜している。ウェル４０の開口部４１の直径または開口幅は、複数の細胞を収容し、かつ、酸素不足等の細胞への悪影響を抑制する観点から、たとえば、１０μｍ以上かつ１ｍｍ以下の範囲にすることができる。

なお、ウェル４０の形状は、図２に示す円錐台形状の形状に限定されない。たとえば、ウェル４０は、断面形状が矩形の円筒状の形状を有してもよいし、断面形状がＶ字形または三角形の円錐状の形状を有してもよいし、底面４２が凹曲面とされてＵ字状の断面形状を有してもよい。ウェル４０は、開口部４１から底面４２までの深さが底面４２の中央部において最大になり、ウェル４０の底面４２の中央部に細胞を集め、または、ウェル４０の底面４２の中央部に細胞塊ＣＳを保持することができるように構成された傾斜面を有することが好ましい。

複数のウェル４０は、たとえば、等間隔に配置することができる。また、複数のウェル４０の配置パターンは特に限定されないが、たとえば縦横に所定の間隔で配置することができる。複数のウェル４０において、互いに隣接するウェル４０同士の間隔は、ウェル４０の開口部４１の直径または最大幅より小さくすることができる。また、複数のウェル４０において、細胞収容部３０の側面３２と、この側面３２に隣接するウェル４０との間隔は、ウェル４０の開口部４１の直径または最大幅より小さくすることができる。

より具体的には、細胞容器１００によってＨｅｐＧ２の細胞塊ＣＳを作成する場合には、ウェル４０の開口部４１の大きさは、たとえば約６００μｍ程度、ウェル４０の開口部４１から底面４２までの深さは、たとえば約４００μｍ程度、ウェル４０の間隔は、たとえば約１５０μｍ程度にすることができる。この場合、細胞収容部３０は、底面３１に、たとえば約１００個程度のウェル４０を有することができる。

図２に示す例において、ウェル４０とウェル４０との間の細胞収容部３０の底面３１は、図１Ａに示す細胞容器１００の底面１０ｂにおおむね平行な平坦面となっているが、ウェル４０の開口部４１から離れるほど細胞容器１００の底面１０ｂからの高さが高くなるように凸状に隆起させてもよい。このように細胞収容部３０の底面３１を隆起させることで、ウェル４０とウェル４０との間に、ウェル４０の開口部４１に近づくほど低くなるように傾斜した傾斜面を形成することができる。

また、ウェル４０の底面４２における細胞容器１００の底壁１０の厚さ、たとえば、底壁下部１１の最も薄い部分の厚さは、透光性を有する細胞容器１００の底壁１０を介して細胞または細胞塊ＣＳの観察を精度良く行う観点から、１ｍｍ以下であることが望ましい。また、細胞容器１００の強度を確保して破損を防止する観点から、ウェル４０の底面４２における細胞容器１００の底壁１０の厚さは、０．１ｍｍ以上であることが望ましい。

［細胞塊の作成方法］
以下、前述の細胞容器１００を用いた本開示の細胞塊の作成方法について説明し、併せて前述の細胞容器１００の作用についても説明する。

図３は、図１Ａに示す細胞容器１００を用いた本開示の細胞塊の作成方法Ｓ１００の一例を示すフロー図である。本開示の細胞塊の作成方法Ｓ１００は、前述の細胞容器１００を用いた細胞塊ＣＳの作成方法であって、たとえば、懸濁液導入工程Ｓ１０１と、細胞沈降工程Ｓ１０２と、細胞塊形成工程Ｓ１０３と、検査工程Ｓ１０４と、を有している。

（懸濁液導入工程）
図４は、図３に示す懸濁液導入工程Ｓ１０１の説明図である。懸濁液導入工程Ｓ１０１は、任意の細胞Ｃが懸濁された細胞懸濁液Ｓを、細胞容器１００の細胞収容部３０に導入する工程である。細胞懸濁液Ｓに含まれる細胞Ｃおよび培地Ｍは、作成する細胞塊ＣＳの種類によって適宜選択することができる。たとえば、細胞容器１００によってＨｅｐＧ２の細胞塊ＣＳを作成する場合には、細胞懸濁液Ｓとして、１００μＬあたり約２．５×１０^５個のＨｅｐＧ２が均一に分散された培地Ｍを用いることができる。培地Ｍとしては、たとえば、ＤＭＥＭ（Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium：ダルベッコ改変イーグル培地）を用いることができる。

懸濁液導入工程Ｓ１０１では、まず、細胞収容部３０の開口部３３が水平になるように、たとえば細胞容器１００を水平な面の上に配置する。次に、細胞懸濁液Ｓの液面Ｓａが細胞収容部３０の開口部３３に位置して水平になるように、細胞懸濁液Ｓを細胞収容部３０に導入する。すなわち、細胞懸濁液Ｓの液面Ｓａにメニスカスが形成されないように細胞収容部３０に細胞懸濁液Ｓを導入する。換言すると、細胞懸濁液Ｓの液面Ｓａが細胞収容部３０の開口部３３に位置して水平面になるように、複数のウェル４０を含む細胞収容部３０の容積とおおむね等しい体積の細胞懸濁液Ｓを細胞収容部３０に導入する。

より具体的には、まず、細胞収容部３０に、細胞収容部３０の容積よりも少ない体積の細胞懸濁液Ｓを導入する。すると、細胞懸濁液Ｓの液面Ｓａの周縁部は、細胞収容部３０の開口部３３よりも底面３１側の位置で細胞収容部３０の側面３２に接し、たとえば凹型のメニスカスが液面Ｓａに形成される。すなわち、細胞懸濁液Ｓの液面Ｓａは、細胞収容部３０の内部で凹曲面状に屈曲した状態になり、細胞収容部３０の側面３２に接する液面Ｓａの周縁部が、細胞収容部３０の側面３２から離れた液面Ｓａの中央部よりも、細胞収容部３０の開口部３３に近い上方側に位置した状態になる。

この状態で、細胞懸濁液Ｓの液面Ｓａが細胞収容部３０の開口部３３から外へ出ないように、少量の細胞懸濁液Ｓを細胞収容部３０に加えていくと、細胞懸濁液Ｓの液面Ｓａの周縁部が、やがて細胞収容部３０の開口部３３の位置、すなわち細胞収容部３０の開口縁３３ｅに達する。この状態では、まだ、細胞懸濁液Ｓの液面Ｓａに凹型のメニスカスが形成されている。

この状態から、さらに少量の細胞懸濁液Ｓを細胞収容部３０に加えていくと、細胞懸濁液Ｓの液面Ｓａのメニスカスの曲率が次第に減少していき、やがて、図４に示すように、細胞懸濁液Ｓの液面Ｓａが細胞収容部３０の開口部３３の位置で水平面になる。ここで、細胞容器１００の底面１０ｂから細胞収容部３０の開口縁３３ｅまでの高さは、開口部３３の全周にわたって等しくなっている。これにより、細胞懸濁液Ｓの液面Ｓａに歪みが発生するのを防止することができる。以上により、懸濁液導入工程Ｓ１０１が終了する。懸濁液導入工程Ｓ１０１の終了後は、図３に示すように、細胞沈降工程Ｓ１０２が行われる。

（細胞沈降工程）
図５は、図３に示す細胞沈降工程Ｓ１０２を説明する説明図である。細胞沈降工程Ｓ１０２は、懸濁液導入工程Ｓ１０１後に、細胞懸濁液Ｓに含まれる細胞Ｃを沈降させ、細胞収容部３０の底面３１の複数のウェル４０に細胞Ｃを導入する工程である。ここで、細胞収容部３０に収容された細胞懸濁液Ｓの液面Ｓａにメニスカスが形成されている場合には、細胞収容部３０の側面３２に近いウェル４０と、細胞収容部３０の側面３２から離れたウェル４０との間で、ウェル４０に収容される細胞Ｃの数にばらつきが生じるおそれがある。

たとえば、細胞沈降工程Ｓ１０２において、前述のように細胞収容部３０の内部で細胞懸濁液Ｓの液面Ｓａに凹状のメニスカスが形成されているとする。この場合、細胞収容部３０の側面３２の近傍の周縁部では、細胞収容部３０の底面３１から細胞懸濁液Ｓの液面Ｓａまでの高さが相対的に高くなり、細胞収容部３０の側面３２から離れた中央部では、細胞収容部３０の底面３１から細胞懸濁液Ｓの液面Ｓａまでの高さが相対的に低くなる。そのため、細胞収容部３０の底面３１の周縁部に位置するウェル４０の上には相対的に多くの細胞懸濁液Ｓが存在し、細胞収容部３０の底面３１の中央部に位置するウェル４０の上には相対的に少ない細胞懸濁液Ｓが存在する状態になる。

その結果、細胞Ｃが均一に分散した細胞懸濁液Ｓを細胞収容部３０に導入しても、細胞収容部３０の底面３１の周縁部に位置するウェル４０の内部には、相対的に多くの細胞Ｃが沈降して導入され、細胞収容部３０の底面３１の中央部に位置するウェル４０の内部には、相対的に少ない細胞Ｃが沈降して導入される。したがって、細胞沈降工程Ｓ１０２において、細胞収容部３０に収容された細胞懸濁液Ｓの液面Ｓａにメニスカスが形成されていると、細胞収容部３０の側面３２から離れたウェル４０と側面３２の近傍のウェル４０との間で、ウェル４０に収容される細胞Ｃの数にばらつきが生じるおそれがある。

これに対し、前述のように、懸濁液導入工程Ｓ１０１において、細胞懸濁液Ｓの液面Ｓａが細胞収容部３０の開口部３３に位置して水平になるように細胞懸濁液Ｓを細胞収容部３０に導入することで、細胞沈降工程Ｓ１０２において、ウェル４０に収容される細胞Ｃの数をより均一化することができる。具体的には、濁液導入工程において、細胞懸濁液Ｓの液面Ｓａを細胞収容部３０の開口部３３の位置で水平にすることで、細胞収容部３０の底面３１の周縁部と中央部において、ウェル４０の上に存在する細胞懸濁液Ｓの量を均一化することができる。

これにより、細胞Ｃが均一に分散した細胞懸濁液Ｓを細胞収容部３０に導入すると、細胞収容部３０の底面３１の周縁部と中央部において、ウェル４０の内部におおむね均等な数の細胞Ｃが沈降して導入される。したがって、細胞沈降工程Ｓ１０２において、細胞収容部３０の底面３１の周縁部と中央部との間で、ウェル４０に収容される細胞Ｃの数にばらつきが生じるのを防止し、複数のウェル４０の各々に分離して収容される細胞Ｃの数を均一化することができる。また、細胞容器１００は、底面１０ｂから細胞収容部３０の開口縁３３ｅまでの高さが開口部３３の全周にわたって等しく、細胞懸濁液Ｓの液面Ｓａの歪みが防止されている。したがって、複数のウェル４０の各々に分離して収容される細胞Ｃの数を、より均一化することができる。

さらに、細胞収容部３０の側面３２を底面３１に対しておおむね垂直にすることで、細胞収容部３０の側面３２から離隔した底面３１の中央部のウェル４０に収容される細胞Ｃの数と、細胞収容部３０の側面３２の近傍の底面３１の周縁部のウェル４０に収容される細胞Ｃの数との間のばらつきを低減することができる。逆に、細胞収容部３０の側面３２が底面３１に垂直ではなく、底面３１と側面３２とがなす角度βが、たとえば８５°よりも小さい場合には、細胞収容部３０の底面３１の中央部と周縁部において、個々のウェル４０に収容される細胞Ｃの数にばらつきが生じるおそれがある。細胞収容部３０の側面３２の底面３１に対する角度βが小さくなると、細胞収容部３０の側面３２は、開口部３３に近づくほど外側に広がるように傾斜し、細胞収容部３０の底面３１の周縁部において、底面３１の中央部よりも、上方に存在する細胞懸濁液Ｓの量が増加するためである。

また、複数のウェル４０を等間隔に配置することで、複数のウェル４０に細胞Ｃをより均等に収容することができる。また、複数のウェル４０において、前述のように、互いに隣接するウェル４０同士の間隔がウェル４０の開口部４１の直径または最大幅より小さい場合には、次のような効果が得られる。すなわち、この構成により、互いに隣接するウェル４０同士の間の細胞収容部３０の底面３１の面積を減少させ、沈降した細胞Ｃが細胞収容部３０の底面３１の上に留まるのを抑制し、細胞Ｃをウェル４０の開口部４１により効率よく導入してウェル４０に収容することができる。

同様に、複数のウェル４０において、前述のように、細胞収容部３０の側面３２とその側面３２に隣接するウェル４０との間隔が、ウェル４０の開口部４１の直径または最大幅より小さい場合には、次のような効果が得られる。すなわち、この構成により、細胞収容部３０の側面３２とその側面３２に隣接するウェル４０との間の細胞収容部３０の底面３１の面積を減少させ、沈降した細胞Ｃが細胞収容部３０の底面３１の上に留まるのを抑制し、細胞Ｃをウェル４０の開口部４１により効率よく導入してウェル４０に収容することができる。

また、ウェル４０とウェル４０との間の細胞収容部３０の底面３１を前述のように凸状に隆起させ、細胞収容部３０の底面３１にウェル４０の開口部４１に近づくほど低くなるように傾斜した傾斜面を形成することで、次のような効果が得られる。すなわち、この構成により、細胞収容部３０の底面３１に沈降した細胞Ｃを、細胞Ｃに作用する重力によって傾斜面に沿って移動させ、ウェル４０の内部に効率よく導入してウェル４０に収容することができる。

さらに、細胞収容部３０において、前述のように、底面３１、その底面３１の周囲の側面３２、およびウェル４０の内表面が、タンパク質低吸着処理が施された細胞低吸着面Ｆであれば、細胞懸濁液Ｓに含まれる細胞Ｃが細胞収容部３０の底面３１および側面３２に吸着されることが抑制される。したがって、細胞沈降工程Ｓ１０２において、細胞Ｃをウェル４０に効率よく導入することができる。以上のように、細胞沈降工程Ｓ１０２において、細胞懸濁液Ｓに含まれる細胞Ｃを沈降させ、細胞収容部３０の底面３１の複数のウェル４０に細胞Ｃを分離して収容した後、図３に示すように、細胞塊形成工程Ｓ１０３が行われる。

（細胞塊形成工程）
図６から図８は、図３に示す細胞塊形成工程Ｓ１０３の説明図である。細胞塊形成工程Ｓ１０３は、前述の細胞沈降工程Ｓ１０２によって細胞収容部３０の底面３１の複数のウェル４０に分離して収容された細胞Ｃを培養して細胞塊ＣＳを作成する工程である。このように、細胞沈降工程Ｓ１０２によって複数のウェル４０に分離して収容した細胞Ｃを、細胞塊形成工程Ｓ１０３によって培養することで、複数の細胞塊ＣＳを効率よく作成することができる。より詳細には、細胞沈降工程Ｓ１０２の終了後、細胞塊形成工程Ｓ１０３の開始前は、図４に示すように、細胞懸濁液Ｓに含まれる培地Ｍが細胞収容部３０に選択的に貯留されている。

細胞塊形成工程Ｓ１０３では、まず、細胞容器１００の開口部２１を介して、細胞収容部３０が形成されていない細胞容器１００の底壁１０の内表面１０ａの上に培地Ｍを供給する。これにより、図６に示すように、培地Ｍの液面Ｍａを上昇させ、培地Ｍの液面Ｍａの位置を細胞容器１００の底壁１０の内表面１０ａよりも開口部２１に近い上方側にして、細胞容器１００の内部空間における培地Ｍの量を増加させる。このように、細胞収容部３０が形成されていない細胞容器１００の底壁１０の内表面１０ａの上に培地Ｍを供給することで、細胞容器１００の開口部２１から内部空間に導入された培地Ｍの流れの方向を、細胞容器１００の底壁１０の内表面１０ａに向かう方向から、底壁１０の内表面１０ａに沿う方向に変えることができる。

すなわち、細胞容器１００の側壁２０の上端部によって画定された開口部２１から側壁２０の下端部に隣接する底壁１０の上に導入された培地Ｍは、慣性によって開口部２１から底壁１０の内表面１０ａへ向けて流れる傾向がある。このような上方から下方へ向けた培地Ｍの流れは、図５に示すように、細胞収容部３０の複数のウェル４０の内部に収容された細胞Ｃを、ウェル４０の外部へ流出させるおそれがある。

しかし、細胞塊形成工程Ｓ１０３では、図６の矢印に示すように、細胞収容部３０が形成されていない細胞容器１００の底壁１０の内表面１０ａの上に培地Ｍを供給することで、開口部２１から供給された培地Ｍの流れを底壁１０の内表面１０ａに沿う方向に変更することができる。これにより、細胞収容部３０の内部の培地Ｍも、図７に示すように、細胞収容部３０の底面３１に沿う方向に流れるようになる。したがって、培地Ｍの導入時や交換時に、細胞収容部３０の複数のウェル４０の内部に収容された細胞Ｃが、培地Ｍの流れによってウェル４０の外部へ流出するのを防止することができる。

このとき、前述のように、細胞容器１００の側壁２０と細胞収容部３０との間の底壁１０の内表面１０ａが平坦面であれば、底壁１０の内表面１０ａをおおむね水平な面にすることができる。これにより、細胞容器１００に培地Ｍ等を導入するときに、側壁２０の上部の開口部２１から導入された培地Ｍを底壁１０の内表面１０ａに沿う水平方向に流し、細胞収容部３０およびウェル４０の深さ方向に対しておおむね垂直な方向に培地Ｍを流すことができる。したがって、培地Ｍの導入時や交換時に、細胞収容部３０の底面３１に向かうようなウェル４０の深さ方向の培地Ｍの流れが生じるのを抑制し、細胞収容部３０の複数のウェル４０の内部に収容された細胞Ｃが、培地Ｍの流れによってウェル４０の外部へ流出するのを、より効果的に防止することができる。

また、前述のように側壁２０と細胞収容部３０との間の底壁１０の内表面１０ａが、細胞収容部３０の開口縁３３ｅから側壁２０へ向けて、細胞容器１００の開口部２１から遠ざかるように傾斜している傾斜面である場合や、細胞収容部３０の開口を取り囲む凸部を有している場合には、次のような効果が得られる。すなわち、この構成により、培地Ｍの導入時や交換時に、培地Ｍが細胞容器１００の底壁１０の内表面１０ａに沿って流れても、培地Ｍの流れが底壁１０の内表面１０ａの傾斜面や凸部によって細胞収容部３０から離れる方向へ向けられ、培地Ｍが細胞収容部３０の内部へ勢いよく流れ込むのを防止できる。したがって、培地Ｍの導入時や交換時に、細胞Ｃや細胞塊ＣＳが収容されたウェル４０から、培地Ｍの流れによって細胞Ｃや細胞塊ＣＳが流出するのを防止できる。

細胞塊形成工程Ｓ１０３は、たとえば、図８に示すような細胞培養システム２００を用いて行うことができる。細胞培養システム２００は、細胞容器１００の内部に新しい培地Ｍを供給するとともに、細胞容器１００の内部から使用済みの培地Ｍを回収する培地還流部２０１を備えている。培地還流部２０１は、新しい培地Ｍを供給するための培地供給管２０２と、使用済みの培地Ｍを回収するための培地回収管２０３に接続されている。培地供給管２０２の先端の培地供給口２０２ａと、培地回収管２０３の先端の培地回収口２０３ａは、それぞれ、細胞容器１００の底壁１０の内表面１０ａの細胞収容部３０が形成されていない領域の上に、細胞収容部３０を挟んで配置されている。

以上の構成により、細胞培養システム２００は、培地還流部２０１から培地供給管２０２を介して細胞容器１００の底壁１０の内表面１０ａの上に新しい培地Ｍを供給して、細胞収容部３０の底面３１のウェル４０に収容された細胞Ｃを培養して細胞塊ＣＳを形成することができる。また、細胞Ｃの培養に使用された使用済みの培地Ｍを、細胞容器１００の底壁１０の内表面１０ａの上から培地回収管２０３を介して培地還流部２０１に回収することができる。このように、細胞塊形成工程Ｓ１０３において細胞培養システム２００を用いることで、培地Ｍの追加と培地Ｍの廃液を自動的に行いながら、細胞塊ＣＳを形成することができる。

この細胞塊形成工程Ｓ１０３において、前述のように、ウェル４０の内表面が、タンパク質低吸着処理が施された細胞低吸着面Ｆである場合には、ウェル４０に導入された細胞がウェル４０の内表面に吸着されることを抑制して、ウェル４０の内部で細胞塊ＣＳを効率よく培養することができる。以上のように、細胞塊形成工程Ｓ１０３において細胞塊ＣＳを形成した後は、図３に示すように、検査工程Ｓ１０４が行われる。

（検査工程）
図９は、図３に示す検査工程Ｓ１０４を説明する写真図である。検査工程Ｓ１０４は、細胞塊形成工程Ｓ１０３において形成された細胞塊ＣＳを検査する工程である。具体的には、細胞容器１００の細胞収容部３０の底面３１に設けられた複数のウェル４０を、図１Ａに示す細胞容器１００の底面１０ｂに垂直な方向から顕微鏡によって観察して顕微鏡画像を撮影する。そして、撮影した画像に基づいて、各ウェル４０に分離して収容された個々の細胞塊ＣＳについて、異常の有無を判定する。細胞塊ＣＳの異常の有無の判定は、たとえば、基準となる画像と撮影した画像との比較によって行うことができる。ある細胞塊ＣＳが異常であると判定された場合には、その細胞塊ＣＳを取り除き、または、その細胞塊ＣＳと正常な細胞塊ＣＳとを入れ替える操作を行うようにしてもよい。

以上のように、前述の細胞容器１００を用いた本開示の細胞塊の作成方法Ｓ１００は、細胞容器１００の細胞収容部３０に細胞懸濁液Ｓを導入する懸濁液導入工程Ｓ１０１と、細胞懸濁液Ｓに含まれる細胞Ｃを沈降させ複数のウェル４０に導入する細胞沈降工程Ｓ１０２と、複数のウェル４０に分離して収容された細胞Ｃを培養して細胞塊ＣＳを形成する細胞塊形成工程Ｓ１０３と、形成された細胞塊ＣＳを検査する検査工程Ｓ１０４と、を有している。そのため、本開示の細胞塊の作成方法Ｓ１００によれば、簡単な操作で効率よく複数の細胞塊ＣＳを作成することができる。

［細胞塊の搬送方法］
以下、前述の細胞容器１００を用いた細胞塊の搬送方法について説明し、併せて前述の細胞容器１００の作用および前述の細胞容器１００の他の例についても説明する。

図１０は、図１Ａに示す細胞容器１００を用いた細胞塊の搬送方法Ｓ２００の一例を示すフロー図である。本開示の細胞塊の搬送方法Ｓ２００は、前述の細胞容器１００に収容された細胞塊ＣＳの搬送方法であって、たとえば、培地除去工程Ｓ２０１と、カバー設置工程Ｓ２０２と、搬送工程Ｓ２０３と、を有している。前述の細胞容器１００を用いた細胞塊の作成方法Ｓ１００による細胞塊ＣＳの形成が終了すると、図６に示すように、細胞容器１００内の培地Ｍの液位は、底壁１０の内表面１０ａよりも開口部２１に近い上方側に位置している。

（培地除去工程）
図１１は、図１０に示す培地除去工程Ｓ２０１の説明図である。培地除去工程Ｓ２０１は、細胞収容部３０に収容された培地Ｍを除いて、細胞容器１００に収容された培地Ｍを除去する工程である。これにより、細胞容器１００は、細胞収容部３０およびその底面３１の複数のウェル４０が培地Ｍによって満たされ、複数のウェル４０のそれぞれに細胞塊ＣＳが収容された状態になっている。このとき、細胞収容部３０に収容される培地Ｍの液量を調節し、培地Ｍの表面張力によって、培地Ｍの液面Ｍａに、細胞収容部３０の開口部３３よりも上方に突出する凸状のメニスカスを形成してもよい。培地除去工程Ｓ２０１の終了後は、図１０に示すように、カバー設置工程Ｓ２０２が行われる。

（カバー設置工程）
図１２は、図１０に示すカバー設置工程Ｓ２０２の説明図である。カバー設置工程Ｓ２０２は、培地Ｍによって満たされた細胞収容部３０の開口部３３を覆う被覆部材３４を設置する工程である。被覆部材３４は、細胞収容部３０の開口部３３の全体を覆うとともに、被覆部材３４の周縁部が細胞容器１００の底壁１０の内表面１０ａの上方に配置される形状および寸法に形成することができる。被覆部材３４の素材としては、たとえば、カバーガラスや樹脂フィルムなどを用いることができる。なお、後述する搬送工程Ｓ２０３において、たとえば細胞容器１００内の二酸化炭素の濃度を５％以下にするなど、ガス濃度を制御する必要がある場合には、被覆部材３４はガス透過性を有することが好ましい。ガス透過性を有する被覆部材３４の素材としては、たとえば、多孔質フィルム、ポリジメチルシロキサン（ＰＤＭＳ樹脂）、ハイドロゲルシートなどを用いることができる。

前述の培地除去工程Ｓ２０１において、培地Ｍの液面Ｍａに、細胞収容部３０の開口部３３よりも上方に突出する凸状のメニスカスが形成されている場合には、カバー設置工程Ｓ２０２において、培地Ｍの表面張力を利用して、細胞容器１００の底壁１０の内表面１０ａに被覆部材３４を保持することができる。より詳細には、細胞収容部３０の開口部３３よりも上方に突出して凸状のメニスカスが形成された培地Ｍの液面Ｍａ上に被覆部材３４を配置する。すると、図１２に示すように、被覆部材３４の周縁部と細胞容器１００の底壁１０の内表面１０ａとの間に、培地Ｍが毛細管現象によって浸透する。これにより、培地Ｍの表面張力を利用して、細胞容器１００の底壁１０の内表面１０ａに被覆部材３４を保持することができる。

すなわち、図１Ａに示す前述の細胞容器１００は、図１２に示すように、細胞収容部３０の開口部３３を覆うシート状の被覆部材３４を備え、この被覆部材３４の周縁部が底壁１０の内表面１０ａの上に支持されていてもよい。これにより、細胞塊ＣＳおよび培地Ｍが収容された細胞収容部３０を被覆部材３４によって覆い、細胞塊ＣＳおよび培地Ｍが細胞収容部３０の外に流出するのを防止できる。また、被覆部材３４の周縁部と底壁１０の内表面１０ａとの間に培地Ｍが介在する場合には、培地Ｍの表面張力によって被覆部材３４の周縁部を底壁１０の内表面１０ａに保持し、細胞収容部３０の開口部３３を覆う被覆部材３４が外れて開口部３３が露出するのを防止できる。なお、被覆部材３４の大きさは、たとえば、被覆部材３４が底壁１０の内表面１０ａに沿う方向にずれて、被覆部材３４の一端が側壁２０に当接したときにも、細胞収容部３０の開口部３３の全体を覆うことができる程度の大きさを有することが好ましい。

図１３は、図１０に示すカバー設置工程Ｓ２０２の他の例を示す説明図である。図１３に示すカバー設置工程Ｓ２０２の他の例に用いられる細胞容器１００Ａは、図１Ａに示す細胞容器１００の一例とは異なる他の例である。図１３に示す細胞容器１００Ａにおいて、底壁１０の内表面１０ａは、細胞収容部３０の開口部３３の周囲に、被覆部材３４の周縁部を嵌合させる凹状の嵌合部３５を有している。図１３に示す細胞容器１００Ａのその他の構成は、図１Ａに示す細胞容器１００と同一である。

このように、細胞容器１００Ａが底壁１０の内表面１０ａに嵌合部３５を有する場合には、カバー設置工程Ｓ２０２において、培地Ｍによって満たされた細胞収容部３０の開口部３３を覆うときに、被覆部材３４の周縁部を底壁１０の内表面１０ａの嵌合部３５に嵌合させることができる。これにより、細胞収容部３０の開口部３３を覆う被覆部材３４が外れて開口部３３が露出するのを、より確実に防止できる。この場合、培地Ｍの液面Ｍａは、細胞収容部３０の開口部３３の位置よりも細胞収容部３０の底面３１に近い下方側に位置してもよい。

また、図１２および図１３に示すように、細胞容器１００，１００Ａは、側壁２０によって画定された開口部２１を覆う蓋部５０を有してもよい。細胞容器１００，１００Ａが開口部２１を覆う蓋部５０を有することで、開口部２１から細胞容器１００，１００Ａの内部への雑菌などの侵入を抑制することができる。また、細胞容器１００，１００Ａが開口部２１を覆う蓋部５０を有することで、内部に収容された培地Ｍや細胞塊ＣＳ等が開口部２１から外へ出るのを防止できる。

また、細胞容器１００，１００Ａは、蓋部５０を側壁２０に取り外し可能に固定する蓋固定部を有してもよい。蓋固定部の構成は、特に限定されないが、たとえば、蓋部５０と側壁２０のうち、いずれか一方に凸部を有し、他方に凸部を係合させる凹部を有することができる。また、蓋固定部は、蓋部５０と側壁２０に設けられて互いに螺合するねじ部によって構成することができる。また、蓋固定部として、蓋部５０を側壁２０に固定する治具を用いてもよい。蓋固定部を有することで、細胞容器１００，１００Ａの開口部２１を覆う蓋部５０が、細胞容器１００，１００Ａから意図せず脱落するのを防止できる。

図１４は、図１０に示すカバー設置工程Ｓ２０２の他の例を示す説明図である。このカバー設置工程Ｓ２０２の他の例において用いられる細胞容器１００Ｂは、図１Ａに示す細胞容器１００と同一の構成を有し、さらに、側壁２０によって画定された開口部２１を覆う蓋部５０Ｂを有している。この蓋部５０Ｂは、支持部５１を有している。支持部５１は、蓋部５０Ｂと被覆部材３４との間に配置されて底壁１０との間に被覆部材３４の周縁部を挟持するように、蓋部５０Ｂから底壁１０に向けて延在している。

このような構成の細胞容器１００Ｂを用いることで、カバー設置工程Ｓ２０２において、被覆部材３４を設置した後に細胞容器１００Ｂの開口部２１を蓋部５０Ｂによって覆うことにより、支持部５１と底壁１０との間に被覆部材３４の周縁部を挟持することができる。したがって、細胞収容部３０の開口部３３を覆う被覆部材３４が外れて開口部３３が露出するのを、より確実に防止できる。以上のように、カバー設置工程Ｓ２０２において、細胞収容部３０の開口部３３を覆う被覆部材３４を設置した後に、図１０に示すように、搬送工程Ｓ２０３が行われる。

（搬送工程）
搬送工程Ｓ２０３は、たとえば、図１２、図１３または図１４に示すように、複数のウェル４０のそれぞれに細胞塊ＣＳが収容され、その複数のウェル４０を含む凹状の細胞収容部３０に培地Ｍが満たされ、その細胞収容部３０の開口部３３が被覆部材３４によって覆われた細胞容器１００，１００Ａ，１００Ｂを搬送する工程である。これにより、細胞容器１００，１００Ａ，１００Ｂの搬送中に振動や衝撃が加わっても、細胞塊ＣＳが細胞容器１００，１００Ａ，１００Ｂの細胞収容部３０から外に出ることが防止され、細胞塊ＣＳを凍結保存することなく、安定して搬送することができる。また、蓋部５０，５０Ｂを備えた細胞容器１００，１００Ａ，１００Ｂを用いることで、細胞容器１００，１００Ａ，１００Ｂの開口部２１を蓋部５０，５０Ｂによって覆うことができ、雑菌等が細胞容器１００，１００Ａ，１００Ｂに侵入することを防止して、より安定して細胞容器１００，１００Ａ，１００Ｂを搬送することができる。

以上のように、前述の細胞容器１００，１００Ａ，１００Ｂを用いた本開示の細胞塊の搬送方法Ｓ２００は、細胞収容部３０に収容された培地Ｍを除いて細胞容器１００，１００Ａ，１００Ｂに収容された培地Ｍを除去する培地除去工程Ｓ２０１と、培地Ｍによって満たされた細胞収容部３０の開口部３３を覆う被覆部材３４を設置するカバー設置工程Ｓ２０２と、細胞収容部３０の開口部３３が被覆部材３４によって覆われた細胞容器１００，１００Ａ，１００Ｂを搬送する工程と、を有している。そのため、本開示の細胞塊の搬送方法Ｓ２００によれば、簡単な操作で効率よく複数の細胞塊ＣＳを搬送することができる。また、細胞容器１００，１００Ａ，１００Ｂに収容された細胞塊ＣＳを凍結することなく輸送することができるので、細胞塊ＣＳの冷凍および解凍を行う必要がなくなる。また、細胞塊ＣＳを培養しながら輸送することが可能になる。これにより、細胞塊ＣＳの供給サイクルを短縮することができる。

［細胞塊の回収方法］
以下、前述の細胞容器１００を用いた細胞塊の回収方法について説明し、併せて前述の細胞容器１００の作用についても説明する。

図１５は、図１２に示す細胞容器１００を用いた細胞塊の回収方法Ｓ３００の一例を示すフロー図である。本開示の細胞塊の回収方法Ｓ３００は、前述の細胞容器１００に収容された細胞塊ＣＳの回収方法であって、たとえば、カバー除去工程Ｓ３０１と、細胞塊回収工程Ｓ３０２と、検査工程Ｓ３０３と、を有している。前述の細胞容器１００を用いた細胞塊の搬送方法Ｓ２００による細胞塊ＣＳの搬送が終了すると、図１２に示すように、細胞容器１００は、培地Ｍによって満たされた細胞収容部３０が被覆部材３４で覆われた状態になっている。

（カバー除去工程）
図１６は、図１５に示すカバー除去工程Ｓ３０１の説明図である。カバー除去工程Ｓ３０１は、細胞容器１００の内部に培地Ｍを導入することで、細胞収容部３０の開口部３３を覆う被覆部材３４を取り外す工程である。より具体的には、まず、細胞容器１００の開口部２１を閉塞する蓋部５０を取り除いて開口部２１を開放する。次に、細胞容器１００の開口部２１から細胞容器１００内へ培地Ｍを供給して、底壁１０および被覆部材３４の上を培地Ｍによって満たす。

図１２に示すように、被覆部材３４と細胞容器１００の底壁１０との間に浸透した培地Ｍの表面張力によって底壁１０に保持された被覆部材３４は、その上に培地Ｍが満たされることで、被覆部材３４を底壁１０に保持する表面張力が作用しなくなる。また、被覆部材３４は、図１６に示すように、培地Ｍに浸漬されることで浮力が作用し、細胞収容部３０の開口部３３を覆う位置から容易に取り除くことができる。カバー除去工程Ｓ３０１の後は、図１５に示す細胞塊回収工程Ｓ３０２または以下に説明する薬剤スクリーニング工程が行われる。

（薬剤スクリーニング工程）
図１５に示す細胞塊の回収方法Ｓ３００は、カバー除去工程Ｓ３０１の後で、細胞塊回収工程Ｓ３０２の前に、薬剤スクリーニング工程を有してもよい。薬剤スクリーニング工程は、複数のウェル４０にそれぞれ細胞塊ＣＳが収容された細胞容器１００に薬剤を投入し、細胞塊ＣＳの反応性を評価することで、薬剤の性能を評価する工程である。細胞塊ＣＳの反応性を評価する方法としては、たとえば、細胞塊ＣＳの顕微鏡像による画像評価、毒性評価、代謝活性評価、ＲＮＡ発現量評価、細胞電位測定などを例示することができる。薬剤スクリーニング工程の後は、図１５に示す細胞塊回収工程Ｓ３０２が行われる。

（細胞塊回収工程）
図１７は、図１５に示す細胞塊回収工程Ｓ３０２の説明図である。細胞塊回収工程Ｓ３０２は、たとえば、細胞塊ＣＳを細胞収容部３０に満たされた培地Ｍとともに細胞容器１００の底壁１０の内表面１０ａ上に流出させて回収する工程である。より具体的には、まず、カバー除去工程Ｓ３０１において細胞容器１００の内部へ追加した培地Ｍを除去し、培地Ｍが細胞収容部３０の内部だけに残存した状態にする。次に、細胞容器１００の底壁１０を水平に対して傾斜させ、細胞収容部３０の複数のウェル４０に収容された細胞塊ＣＳを、細胞収容部３０に満たされた培地Ｍとともに細胞容器１００の底壁１０の内表面１０ａ上に流出させて回収する。このとき、たとえばピペットＰなどを用いて細胞収容部３０の底面３１に培地Ｍを流し込むことで、細胞収容部３０の底面３１に設けられた複数のウェル４０からの細胞塊ＣＳの排出を促進させるようにしてもよい。

また、前述のように、細胞容器１００の側壁２０と細胞収容部３０との間の底壁１０の内表面１０ａは、平坦面である。この場合、ウェル４０に収容された細胞や細胞塊ＣＳを回収するときに、細胞容器１００を傾斜させ、ウェル４０に収容された細胞や細胞塊ＣＳを培地Ｍとともに細胞収容部３０から平坦面である底壁１０の内表面１０ａに流出させて回収することで、細胞や細胞塊ＣＳの回収を容易にすることができる。さらに、前述のように、細胞容器１００の側壁２０の内表面２２および底壁１０の内表面１０ａが、タンパク質低吸着処理が施された細胞低吸着面Ｆである場合には、細胞容器１００の側壁２０の内表面２２および底壁１０の内表面１０ａに細胞Ｃおよび細胞塊ＣＳが吸着されるのを抑制して、細胞Ｃまたは細胞塊ＣＳの回収を容易にすることができる。

また、前述のように、細胞容器１００の側壁２０と細胞収容部３０との間の底壁１０の内表面１０ａは、細胞収容部３０の開口縁３３ｅから側壁２０へ向けて、側壁２０の上端部によって画定された開口部２１から遠ざかるように傾斜した傾斜面である場合がある。この場合、ウェル４０に収容された細胞Ｃや細胞塊ＣＳを回収するときに、細胞容器１００を傾斜させ、ウェル４０に収容された細胞Ｃや細胞塊ＣＳを培地Ｍとともに細胞収容部３０から傾斜面である底壁１０の内表面１０ａに流出させ、細胞容器１００を水平な面の上に置く。すると、底壁１０の内表面１０ａが前述のような傾斜面であるため、底壁１０の内表面１０ａに流出させた細胞Ｃや細胞塊ＣＳが再び細胞収容部３０へ流入することが抑制され、細胞Ｃや細胞塊ＣＳの回収を容易にすることができる。

たとえば、図１Ｂに示す例のように、底面１０ｂに沿う一方向における片側だけが傾斜面になっている底壁１０の内表面１０ａを有する細胞容器１００の場合、底壁１０の内表面１０ａの片側の最も低くなっている場所だけに細胞Ｃや細胞塊ＣＳが集積する。これにより、細胞Ｃや細胞塊ＣＳの回収を容易にすることができる。また、図１Ｃに示す例のように、細胞容器１００の底壁１０の内表面１０ａにおいて、細胞収容部３０の開口部３３の近傍の部分と、側壁２０の近傍の部分が、底面１０ｂに平行な平坦面になっている場合、前述のカバー設置工程Ｓ２０２における被覆部材３４の設置を容易にすることができ、被覆部材３４による被覆効果を向上させることができる。

なお、前述のように、細胞容器１００の底壁１０が底壁下部１１と底壁上部１２とを有し、底壁上部１２が底壁下部１１の上に取り外し可能に配置されている場合には、たとえば細胞塊ＣＳの作成後に底壁上部１２を取り外してもよい。これにより、細胞塊ＣＳの培養時に細胞容器１００の底壁１０の内表面１０ａに設けられた凹状の細胞収容部３０によって培地Ｍの流れによる細胞塊ＣＳの流出を抑制しつつ、細胞塊回収工程Ｓ３０２において、細胞収容部３０をなくして、細胞塊ＣＳの回収を容易にすることができる。また、前述のように、細胞収容部３０が細胞容器１００の底壁１０の中央部ではなく、細胞容器１００の底壁１０の中央と側壁２０との間の一方向に偏った位置に設けられている場合には、当該一方向において細胞塊ＣＳを回収するスペースを広く確保することができる。したがって、細胞容器１００の底壁１０上の細胞塊ＣＳの回収を容易にすることができる。

図１８から図２０は、図１５に示す細胞塊回収工程Ｓ３０２の他の例を示す説明図である。細胞塊回収工程Ｓ３０２は、たとえば、細胞容器１００の複数のウェル４０に収容された細胞塊ＣＳを選択的に回収する工程である。より具体的には、図１８に示すように、複数のウェル４０のそれぞれに収容された細胞塊ＣＳのうちのいずれかを、たとえば顕微鏡像に基づいて選択する。次に、図１９に示すように、たとえば、選択された細胞塊ＣＳが収容されたウェル４０の開口部４１に、シリンジ状の吸引具ＭＳの先端の開口を近づけて、選択された細胞塊ＣＳを培地Ｍとともに吸引して回収する。回収した細胞塊ＣＳは、たとえば、図２０に示すように、シリンジ状の吸引具ＭＳを用いて他の細胞容器１００のウェル４０に配置される。

図２１から図２３は、図１５に示す細胞塊回収工程Ｓ３０２を説明する写真図である。図２１に示すように、細胞塊回収工程Ｓ３０２を行う前は、細胞収容部３０の底面３１に設けられた複数のウェル４０に、それぞれ、細胞塊ＣＳが分離して収容されている。そして、前述の細胞塊回収工程Ｓ３０２を行った後は、図２２に示すように、細胞収容部３０の底面３１に設けられた複数のウェル４０は空になっている。また、前述のように、細胞塊回収工程Ｓ３０２において、細胞塊ＣＳを培地Ｍとともに細胞容器１００の底壁１０の内表面１０ａ上に流出させることで、図２３に示すように、細胞容器１００の底壁１０の内表面１０ａ上の細胞塊ＣＳを容易に回収することができる。細胞塊回収工程Ｓ３０２の後は、図１５に示す検査工程Ｓ３０３が行われる。

（検査工程）
検査工程Ｓ３０３は、細胞塊回収工程Ｓ３０２において回収された細胞塊ＣＳを検査する工程である。具体的には、回収された細胞塊ＣＳを顕微鏡によって観察して顕微鏡画像を撮影する。そして、撮影した画像に基づいて、回収された個々の細胞塊ＣＳについて、異常の有無を判定する。細胞塊ＣＳの異常の有無の判定は、たとえば、基準となる画像と撮影した画像との比較によって行うことができる。

以上のように、本開示の細胞塊の回収方法Ｓ３００は、カバー除去工程Ｓ３０１と、細胞塊回収工程Ｓ３０２と、検査工程Ｓ３０３と、を有している。したがって、本開示の細胞塊の回収方法Ｓ３００によれば、簡単な操作で効率よく複数の細胞塊ＣＳを回収することができる。

［細胞塊の評価方法］
次に、前述の細胞容器１００を用いた本開示の細胞塊の評価方法について説明する。本開示の細胞塊の評価方法は、前述の細胞容器１００を用いた細胞塊ＣＳの評価方法であって、細胞塊ＣＳが収容された細胞収容部３０に薬剤を投入する薬剤投入工程と、その薬剤による細胞の反応を評価する評価工程とを有している。

より具体的には、本開示の細胞塊の評価方法は、たとえば、前述の細胞塊の回収方法Ｓ３００において、カバー除去工程Ｓ３０１の後のスクリーニング工程として行うことができる。また、本開示の細胞塊の評価方法は、たとえば、前述の細胞塊の作成方法Ｓ１００の後に、前述のスクリーニング工程と同様に行うことができる。本開示の細胞塊の評価方法によれば、前述の細胞容器１００を用いることで、細胞塊ＣＳの薬剤に対する反応の評価を容易に行うことができる。

［細胞塊］
次に、前述の細胞容器１００に収容された本開示の細胞塊ＣＳについて説明する。本開示の細胞塊ＣＳは、たとえば、図１２、図１３または図１４に示す細胞容器１００，１００Ａ，１００Ｂに収容された細胞塊ＣＳであって、細胞収容部３０の底面３１の複数のウェル４０に収容されている。細胞収容部３０は、培地Ｍが収容され、開口部３３が被覆部材３４によって覆われている。本開示の細胞塊ＣＳは、前述の細胞容器１００，１００Ａ，１００Ｂに収容されているので、簡単な操作で効率よく複数の細胞塊ＣＳを作成、搬送、回収、および評価することができる。

［細胞容器の変形例］
最後に、図１Ａに示す細胞容器１００の変形例について説明する。図２４は、図１Ａに示す細胞容器１００の変形例１に係る１００Ｃを示す概略的な平面図である。図２５は、図１Ａに示す細胞容器１００の変形例２に係る細胞容器１００Ｄを示す概略的な平面図である。細胞容器１００Ｃおよび細胞容器１００Ｄは、複数の細胞収容部３０を備える点で共通している。なお、図２４および図２５では、細胞収容部３０の底面３１の複数のウェル４０の図示を省略している。このように、細胞容器１００Ｃ，１００Ｄが複数の細胞収容部３０を備えることで、複数の細胞収容部３０において、均一な条件で細胞塊ＣＳを作成することができる。

また、図２５に示す変形例２に係る細胞容器１００Ｄは、分離可能に接続された複数の小容器１を備えている。複数の小容器１は、それぞれ底壁１０と側壁２０と細胞収容部３０と複数のウェル４０とを有している。これにより、複数の小容器１を連結させた状態で、各小容器１において均一な条件で細胞塊ＣＳを作成することができるだけでなく、各小容器１を分離して形成した細胞塊ＣＳを個別に取り扱うことが可能なる。また、各小容器１において、細胞収容部３０の平面形状が矩形であり、細胞収容部３０の位置が中心から偏って配置されている。これにより、各小容器１の底壁１０の内表面１０ａに、培地Ｍの供給や細胞の回収を行うための広いスペースを確保することができる。

図２６Ａおよび図２６Ｂは、図１Ａに示す細胞容器１００の変形例３に係る細胞容器１００Ｅを示す概略的な断面図である。変形例３の細胞容器１００Ｅは、セルカルチャーインサート６０を備えている点で、図１Ａに示す細胞容器１００と異なっているが、その他の構成は細胞容器１００と同一である。

図２６Ａに示すように、変形例３の細胞容器１００Ｅでは、セルカルチャーインサート６０の内部に培地Ｍや薬剤を投入することで、セルカルチャーインサート６０の多孔質膜６１を通して細胞収容部３０に培地Ｍを供給し、または薬剤を投入することができる。また、セルカルチャーインサート６０の内部の培地Ｍを除去することで、多孔質膜６１を通して細胞収容部３０の内部の培地Ｍを除去することができる。

このように、セルカルチャーインサート６０を用いることで、多孔質膜６１を通して培地Ｍが浸透するので、ウェル４０への培地の流れをより抑制できる。また、細胞塊ＣＳを回収するときには、セルカルチャーインサート６０を細胞容器１００Ｅから取り外すことができる。

また、図２６Ｂに示すように、セルカルチャーインサート６０は、細胞収容部３０の開口部３３を覆う被覆部材として用いることもできる。この場合、前述のカバー除去工程Ｓ３０１を省略して、その後のスクリーニング工程において、セルカルチャーインサート６０の内部に薬剤を添加して薬剤スクリーニング行うことも可能である。

以上、図面を用いて本開示の実施の形態を詳述してきたが、具体的な構成はこの実施形態に限定されるものではなく、本開示の要旨を逸脱しない範囲における設計変更等があっても、それらは本開示に含まれるものである。たとえば、本開示は、前述の薬剤スクリーニング用途に加えて、次の用途に適用することも可能である。すなわち、本開示は、再生医療用途として、作成した細胞塊を回収して移植に用いる用途に適用することができる。また、本開示は、幹細胞の分化制御のために、細胞塊を作製する用途に適用することもできる。

１ 小容器、１０ 底壁、１０ａ 内表面、２０ 側壁、２１ 開口部、２２ 内表面、２１ 開口部、３０ 細胞収容部、３１ 底面、３２ 側面、３３ 開口部、３３ｅ 開口縁、３４ 被覆部材、３５ 嵌合部、４０ ウェル、４２ 底面（内表面）、４３ 側面（内表面）、５０ 蓋部、５０Ｂ 蓋部、５１ 支持部、１００ 細胞容器、１００Ａ細胞容器、１００Ｂ細胞容器、１００Ｃ細胞容器、１００Ｄ細胞容器、ＣＳ 細胞塊、Ｆ 細胞低吸着面

Claims (13)

1. 複数の細胞塊を収容可能な細胞容器であって、
   底壁と、該底壁の周囲に立設された側壁と、該側壁との間に間隔をあけて前記底壁の内表面に凹状に設けられた細胞収容部と、該細胞収容部の底面に凹状に設けられ個々の前記細胞塊を収容可能な複数のウェルと、を備え、
   前記底壁は、前記細胞容器の外底面側に配置された底壁下部と、該底壁下部の上面に取り外し可能に配置された底壁上部とを有し、
   前記底壁上部は、前記細胞収容部に対応する位置に開口する貫通孔を有し、該貫通孔の内壁面が前記細胞収容部の側面となり、
   前記底壁下部は、前記上面の一部が前記貫通孔に露出して前記細胞収容部の前記底面となることを特徴とする細胞容器。
2. 前記側壁と前記細胞収容部との間の前記底壁の内表面は、平坦面であることを特徴とする請求項１に記載の細胞容器。
3. 前記側壁と前記細胞収容部との間の前記底壁の内表面は、前記細胞収容部の開口縁から前記側壁へ向けて、前記側壁の上端部によって画定された開口部から遠ざかるように傾斜した傾斜面であることを特徴とする請求項１に記載の細胞容器。
4. 前記細胞収容部の開口部を覆うシート状の被覆部材を備え、該被覆部材の周縁部は前記底壁の内表面の上に支持されていることを特徴とする請求項１に記載の細胞容器。
5. 前記底壁の内表面は、前記細胞収容部の開口部の周囲に、前記被覆部材の周縁部を嵌合させる凹状の嵌合部を有していることを特徴とする請求項４に記載の細胞容器。
6. 前記側壁によって画定された開口部を覆う蓋部を有し、該蓋部と前記被覆部材との間に配置されて前記底壁との間に前記被覆部材の周縁部を挟持する支持部を有していることを特徴とする請求項４に記載の細胞容器。
7. 前記側壁によって画定された開口部を覆う蓋部を有し、該蓋部を前記側壁に取り外し可能に固定する蓋固定部を有していることを特徴とする請求項１に記載の細胞容器。
8. 前記複数のウェルにおいて、互いに隣接するウェル同士の間隔は、前記ウェルの開口部の直径または最大幅より小さいことを特徴とする請求項１に記載の細胞容器。
9. 前記複数のウェルにおいて、前記細胞収容部の側面と、該側面に隣接するウェルとの間隔は、前記ウェルの開口部の直径または最大幅より小さいことを特徴とする請求項１に記載の細胞容器。
10. 前記細胞収容部において、前記底面、前記底面の周囲の側面、および前記ウェルの内表面は、細胞低吸着面であることを特徴とする請求項１に記載の細胞容器。
11. 前記側壁の内表面および前記底壁の内表面は、細胞低吸着面であることを特徴とする請求項１に記載の細胞容器。
12. 複数の前記細胞収容部を備えることを特徴とする請求項１に記載の細胞容器。
13. 分離可能に接続された複数の小容器を備え、
    前記複数の小容器は、それぞれ前記底壁と前記側壁と前記細胞収容部と前記複数のウェルとを備えることを特徴とする請求項１に記載の細胞容器。

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