JP6962834B2 - モノクローナル抗体および非特異反応抑制剤 - Google Patents
モノクローナル抗体および非特異反応抑制剤 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6962834B2 JP6962834B2 JP2018029072A JP2018029072A JP6962834B2 JP 6962834 B2 JP6962834 B2 JP 6962834B2 JP 2018029072 A JP2018029072 A JP 2018029072A JP 2018029072 A JP2018029072 A JP 2018029072A JP 6962834 B2 JP6962834 B2 JP 6962834B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- specific reaction
- sample
- immunoassay
- antibody
- immunochromatography
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000002683 reaction inhibitor Substances 0.000 title claims description 52
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 claims description 57
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 46
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 42
- 238000003317 immunochromatography Methods 0.000 claims description 40
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 37
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 9
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 9
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 claims description 9
- 241000282465 Canis Species 0.000 claims description 7
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 claims description 6
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 32
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 32
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 32
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 30
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 25
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 15
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 14
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 14
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 13
- 239000000463 material Substances 0.000 description 10
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N Titan oxide Chemical compound O=[Ti]=O GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- MCMNRKCIXSYSNV-UHFFFAOYSA-N Zirconium dioxide Chemical compound O=[Zr]=O MCMNRKCIXSYSNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- 239000003365 glass fiber Substances 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- 238000009739 binding Methods 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 6
- 238000011161 development Methods 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 6
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 5
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 5
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 5
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 5
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 5
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 5
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 5
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 5
- -1 sodium azide Chemical compound 0.000 description 5
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 4
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 4
- 206010029719 Nonspecific reaction Diseases 0.000 description 4
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 4
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 4
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 4
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 4
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 4
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 4
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 4
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 4
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 description 4
- CETPSERCERDGAM-UHFFFAOYSA-N ceric oxide Chemical compound O=[Ce]=O CETPSERCERDGAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910000422 cerium(IV) oxide Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000010419 fine particle Substances 0.000 description 4
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 4
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 4
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 4
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 4
- 229920002635 polyurethane Polymers 0.000 description 4
- 239000004814 polyurethane Substances 0.000 description 4
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 4
- 239000004800 polyvinyl chloride Substances 0.000 description 4
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 4
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 4
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 3
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 3
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 3
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 2
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 2
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 2
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 2
- 208000020329 Zika virus infectious disease Diseases 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000002082 metal nanoparticle Substances 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 239000004745 nonwoven fabric Substances 0.000 description 2
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XOJVVFBFDXDTEG-UHFFFAOYSA-N pristane Chemical compound CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C XOJVVFBFDXDTEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 230000001235 sensitizing effect Effects 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 2
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 2
- 238000004879 turbidimetry Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RDEIXVOBVLKYNT-VQBXQJRRSA-N (2r,3r,4r,5r)-2-[(1s,2s,3r,4s,6r)-4,6-diamino-3-[(2r,3r,6s)-3-amino-6-(1-aminoethyl)oxan-2-yl]oxy-2-hydroxycyclohexyl]oxy-5-methyl-4-(methylamino)oxane-3,5-diol;(2r,3r,4r,5r)-2-[(1s,2s,3r,4s,6r)-4,6-diamino-3-[(2r,3r,6s)-3-amino-6-(aminomethyl)oxan-2-yl]o Chemical compound OS(O)(=O)=O.O1C[C@@](O)(C)[C@H](NC)[C@@H](O)[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@H](CC[C@@H](CN)O2)N)[C@@H](N)C[C@H]1N.O1C[C@@](O)(C)[C@H](NC)[C@@H](O)[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@H](CC[C@H](O2)C(C)N)N)[C@@H](N)C[C@H]1N.O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N RDEIXVOBVLKYNT-VQBXQJRRSA-N 0.000 description 1
- WEEMDRWIKYCTQM-UHFFFAOYSA-N 2,6-dimethoxybenzenecarbothioamide Chemical compound COC1=CC=CC(OC)=C1C(N)=S WEEMDRWIKYCTQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Natural products N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 239000004105 Penicillin G potassium Substances 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 206010039101 Rhinorrhoea Diseases 0.000 description 1
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710120037 Toxin CcdB Proteins 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- LFYJSSARVMHQJB-QIXNEVBVSA-N bakuchiol Chemical compound CC(C)=CCC[C@@](C)(C=C)\C=C\C1=CC=C(O)C=C1 LFYJSSARVMHQJB-QIXNEVBVSA-N 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- IYNDLOXRXUOGIU-LQDWTQKMSA-M benzylpenicillin potassium Chemical compound [K+].N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C([O-])=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 IYNDLOXRXUOGIU-LQDWTQKMSA-M 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 235000021310 complex sugar Nutrition 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 230000036046 immunoreaction Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000010753 nasal discharge Diseases 0.000 description 1
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 1
- 235000019368 penicillin G potassium Nutrition 0.000 description 1
- 229940056360 penicillin g Drugs 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 229960002385 streptomycin sulfate Drugs 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
- G01N33/54386—Analytical elements
- G01N33/54387—Immunochromatographic test strips
- G01N33/54388—Immunochromatographic test strips based on lateral flow
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/42—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins
- C07K16/4283—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins against an allotypic or isotypic determinant on Ig
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54393—Improving reaction conditions or stability, e.g. by coating or irradiation of surface, by reduction of non-specific binding, by promotion of specific binding
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6854—Immunoglobulins
- G01N33/686—Anti-idiotype
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
本発明は、モノクローナル抗体、それを含有する免疫測定法用の非特異反応抑制剤、イムノクロマトグラフ用テストストリップ及びイムノクロマトグラフ用テストキット、並びに、非特異反応抑制剤の存在下に免疫反応を行わせる免疫測定法に関するものである。
抗原抗体反応を利用した免疫測定法は、微量成分を特異的かつ高感度に測定できることから、臨床検査に広く利用されている。そのような免疫測定法としては、例えば、酵素免疫測定法（例えば、ＥＬＩＳＡ法）、凝集法、イムノクロマトグラフ法、放射免疫測定法、比濁法等が知られている。
抗原抗体反応は、ある抗原決定基に対して誘導された抗体の抗原結合部位が、その抗原決定基と高い相補性をもつことにより生ずる、特異性の高い結合反応である。ところが、抗原抗体反応を利用した免疫測定においては、本来の目的とする特異的な抗原抗体反応以外の非特異反応が生じ、測定値の信頼性が損なわれてしまうことがしばしば認められている。
このような現象が起こる原因の１つとして、被検出物質（抗原）以外の成分であるにもかかわらず、免疫測定に用いる抗体に結合する成分（以下、非特異因子という）が検体中に存在することが挙げられる。検体中に非特異因子が存在すると、被検出物質が存在しないにもかかわらず、被検出物質が存在することを示す測定結果が得られることとなる。
このような非特異因子は、被検出物質と特異的に反応する抗体のみならず、被検出物質と反応しない抗体とも結合する物質である。非特異因子としては、異好性抗体やリウマトイド因子が知られている。
異好性抗体は、ヒト血液等に存在するヒト以外の動物種由来の抗体に対する抗体であり、マウス抗体に対するヒト抗体（ＨＡＭＡ）をはじめ、ヤギ抗体に対するヒト抗体（ＨＡＧＡ）、ヒツジ抗体に対するヒト抗体（ＨＡＳＡ）、及びウサギ抗体に対するヒト抗体（ＨＡＲＡ）等がある。
リウマトイド因子は、ヒト血液等に存在するヒトの抗体に対する抗体であり、関節リウマチ患者に多く見られる自己抗体である。
さらに、上記異好性抗体やリウマトイド因子以外にも、いまだ成分が明らかになっていない非特異因子が多く存在するといわれている。
検体中の非特異因子の存在は、微量成分を特異的かつ高感度に測定できるという免疫測定法の利点を損ない、臨床検査分野においては、患者などの疾病の診断を誤らせることにもつながる重大な問題であるため、従来、非特異因子による非特異反応を抑制し正しい測定値を得るための様々な試みが行われてきた。
特許文献１には、試料中に存在する非特異因子であるＩｇＭ型またはＩｇＧ型の自然抗体に対して反応する抗ヒトＩｇＭ抗体や抗ヒトＩｇＧ抗体を免疫測定系に添加することにより、非特異因子による非特異反応を抑制し、抗原を正確に測定することができる、免疫学的測定法が開示されている。
しかしながら、従来の方法では、免疫測定法における非特異反応の抑制にある程度の効果を示すものの、必ずしもその効果は十分とは言えず、いまだ改良の余地があった。また、検体によっては、従来用いられてきた非特異反応抑制剤による効果がほとんど得られず、非特異因子による非特異反応を抑制できないものも少なからず存在し、実用上必ずしも満足できるものではなかった。
したがって、本発明では、非特異因子による非特異反応を十分に抑制することができるモノクローナル抗体、およびそれを含有する免疫測定法用の非特異反応抑制剤等を提供することを目的とする。
本発明者らは、鋭意研究を重ねた結果、イヌＩｇＭに反応するモノクローナル抗体のうち、特定のハイブリドーマにより産生されるモノクローナル抗体を用いて免疫測定法を実施した結果、非特異反応を十分に抑制することができることを見出し、本発明を完成させた。
したがって、本発明は以下の通りである。
１．受託番号ＮＩＴＥ ＢＰ−０２５５７のハイブリドーマにより産生される、イヌＩｇＭに対するモノクローナル抗体。
２．受託番号ＮＩＴＥ ＢＰ−０２５５７のハイブリドーマ。
３．前記１に記載のモノクローナル抗体を含有する、免疫測定法用の非特異反応抑制剤。
４．前記モノクローナル抗体の含有量が０．５μｇ以上２０μｇ以下である、前記３に記載の非特異反応抑制剤。
５．前記免疫測定法が、イムノクロマトグラフ法である前記３または４に記載の非特異反応抑制剤。
６．前記３〜５のいずれか１に記載の非特異反応抑制剤を含有する、イムノクロマトグラフ用テストストリップ。
７．前記３〜５のいずれか１に記載の非特異反応抑制剤を含有する、イムノクロマトグラフ用テストキット。
８．検体中の被検出物質を特異的に検出するための免疫測定法において、前記３〜５のいずれか１に記載の非特異反応抑制剤の存在下に免疫反応を行わせる、免疫測定法。
９．前記免疫測定法が、酵素免疫測定法、凝集法又はイムノクロマトグラフ法である前記８に記載の免疫測定法。
１０．前記免疫測定法が、イムノクロマトグラフ法である前記８に記載の免疫測定法。
１．受託番号ＮＩＴＥ ＢＰ−０２５５７のハイブリドーマにより産生される、イヌＩｇＭに対するモノクローナル抗体。
２．受託番号ＮＩＴＥ ＢＰ−０２５５７のハイブリドーマ。
３．前記１に記載のモノクローナル抗体を含有する、免疫測定法用の非特異反応抑制剤。
４．前記モノクローナル抗体の含有量が０．５μｇ以上２０μｇ以下である、前記３に記載の非特異反応抑制剤。
５．前記免疫測定法が、イムノクロマトグラフ法である前記３または４に記載の非特異反応抑制剤。
６．前記３〜５のいずれか１に記載の非特異反応抑制剤を含有する、イムノクロマトグラフ用テストストリップ。
７．前記３〜５のいずれか１に記載の非特異反応抑制剤を含有する、イムノクロマトグラフ用テストキット。
８．検体中の被検出物質を特異的に検出するための免疫測定法において、前記３〜５のいずれか１に記載の非特異反応抑制剤の存在下に免疫反応を行わせる、免疫測定法。
９．前記免疫測定法が、酵素免疫測定法、凝集法又はイムノクロマトグラフ法である前記８に記載の免疫測定法。
１０．前記免疫測定法が、イムノクロマトグラフ法である前記８に記載の免疫測定法。
本発明のモノクローナル抗体、およびそれを含有する非特異反応抑制剤を用いることにより、免疫測定法における非特異反応を抑制することができる。
以下、本発明について詳細に説明するが、本発明は以下の実施形態に何ら限定されるものではなく、本発明の目的の範囲内において、適宜変更を加えて実施することができる。
本発明のモノクローナル抗体は、受託番号がＮＩＴＥ ＢＰ−０２５５７であるハイブリドーマ（Ａｎｔｉ−Ｄｏｇ ＩｇＭ Ｎｏ．６９）により産生される、イヌＩｇＭに対するモノクローナル抗体である。イヌＩｇＭとはイヌに由来するＩｇＭ型の免疫グロブリンを意味する。
本出願人は、後述する実施例に示す方法により得られた上記ハイブリドーマ（Ａｎｔｉ−Ｄｏｇ ＩｇＭ Ｎｏ．６９）を独立行政法人製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センターに寄託した。以下に寄託を特定する内容を記載する。
本出願人は、上記ハイブリドーマ（Ａｎｔｉ−Ｄｏｇ ＩｇＭ Ｎｏ．６９）を下記の条件で寄託した。
（１）寄託機関名：独立行政法人製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター
（２）連絡先：〒２９２−０８１８ 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８ １２２号室 電話番号０４３８−２０−５５８０
（３）受託番号：ＮＩＴＥ ＢＰ−０２５５７
（４）識別のための表示：Ａｎｔｉ−Ｄｏｇ ＩｇＭ Ｎｏ．６９
（５）原寄託日：２０１７年１０月１０日
（１）寄託機関名：独立行政法人製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター
（２）連絡先：〒２９２−０８１８ 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８ １２２号室 電話番号０４３８−２０−５５８０
（３）受託番号：ＮＩＴＥ ＢＰ−０２５５７
（４）識別のための表示：Ａｎｔｉ−Ｄｏｇ ＩｇＭ Ｎｏ．６９
（５）原寄託日：２０１７年１０月１０日
上記モノクローナル抗体は、非特異反応抑制剤に含有させて用いることにより、免疫測定法における非特異反応を十分に抑制することができる。
上記モノクローナル抗体を含有する非特異反応抑制剤は、上記モノクローナル抗体のみからなるものであってもよく、本発明の効果を妨げない範囲で上述のモノクローナル抗体以外の他の成分を含有するものであってもよい。他の成分としては、例えば、リン酸塩、トリスヒドロキシメチルアミノメタン等の緩衝剤、アジ化ナトリウム等の防腐剤、塩化ナトリウム、および塩化カリウム等の無機塩等が挙げられる。
本発明の非特異反応抑制剤の形態は、特に限定されるものではなく、固体であってもよく、液体であってもよい。液体の場合は、溶媒中に非特異反応抑制剤が含有する成分を溶解又は懸濁させることで調製することができる。溶媒としては、例えば、水、グリセロール等の有機溶媒、これらの混合溶媒等が挙げられる。
本発明の非特異反応抑制剤中の上述のモノクローナル抗体の含有量は、特に限定されるものではなく、検体の種類、検体の量、免疫測定法の測定条件等に基づいて適宜調整することができる。例えば、１検体あたりに使用する非特異反応抑制剤中の上述のモノクローナル抗体の含有量は、０．５μｇ以上２０μｇ以下が好ましく、１μｇ以上１５μｇ以下がより好ましく、２μｇ以上１０μｇ以下がさらに好ましい。
本発明の非特異反応抑制剤を適用できる免疫測定法としては、免疫反応を利用して、検体中の被検出物質を測定する方法であれば特に限定されず、その効果を発揮することができる。例えば、酵素免疫測定法（例えば、ＥＬＩＳＡ法）、凝集法、イムノクロマトグラフ法、放射免疫測定法、比濁法等が挙げられ、好ましくは、酵素免疫測定法、凝集法又はイムノクロマトグラフ法である。本発明の非特異反応抑制剤は、検体の採取の容易性から、取り扱いが容易とされているイムノクロマトグラフ法において特に有用である。
次に、本発明のイムノクロマトグラフ用テストストリップについて説明する。本発明のイムノクロマトグラフ用テストストリップは、上述の非特異反応抑制剤を含有する。
本発明のイムノクロマトグラフ用テストストリップは、イムノクロマトグラフ法を利用して、例えば、被検出物質の有無を判定したり、被検出物質の濃度を測定したりするために使用することができる。
本発明のイムノクロマトグラフ用テストストリップは、上述の非特異反応抑制剤を含有すること以外は特に限定されるものではなく、公知のイムノクロマトグラフ用テストストリップと同様の構成とすることができる。本発明においては、非特異反応抑制剤は、イムノクロマトグラフ用テストストリップを構成する部材のうち、検体を含む液相が毛細管現象によって展開する部材の中に免疫反応に関与し得る態様で含まれていればよい。このようにすることで、非特異反応抑制剤の存在下で免疫反応を行うことができ、非特異反応を十分に抑制できる。
以下、本発明のイムノクロマトグラフ用テストストリップの一実施形態を図面に基づいて説明するが、本発明のイムノクロマトグラフ用テストストリップは以下の実施形態に限定されるものではない。
図１に示す本発明のイムノクロマトグラフ用テストストリップの一実施形態は、サンプルパッド１と、コンジュゲートパッド２と、メンブレンパッド３と、吸収パッド５と、バッキングシート６とを備える。
サンプルパッド１は、検体を含む試料を添加し、毛細管現象によって試料を下流へ移動させるために設けられている部材である。サンプルパッド１の材料としては、公知の材料を用いることができ、例えば、シリカ、チタニア、ジルコニア、セリア、及びアルミナ等のセラミック微粒子、ポリウレタン、ポリエステル、ポリエチレン、ポリ塩化ビニル、ポリフッ化ビニリデン、ナイロン、ニトロセルロース、酢酸セルロース、ガラス繊維、綿等が挙げられる。また、サンプルパッド１の大きさ、形状は特に限定されるものではなく、実際の操作の点及び反応結果の観察の点において適切であればよい。サンプルパッド１には、後述のコンジュゲートパッドの機能を持たせることもできる。
コンジュゲートパッド２は、検体中の被検出物質と特異的に反応する抗体又は抗原を標識物質で標識した標識試薬を含有する部材である。検体を含む試料がコンジュゲートパッド２を通過すると、被検出物質と標識試薬との複合体が形成される。コンジュゲートパッド２の材料としては、公知の材料を用いることができ、例えば、シリカ、チタニア、ジルコニア、セリア、及びアルミナ等のセラミック微粒子、ポリウレタン、ポリエステル、ポリエチレン、ポリ塩化ビニル、ポリフッ化ビニリデン、ナイロン、ニトロセルロース、酢酸セルロース、ガラス繊維、綿等が挙げられる。また、コンジュゲートパッド２の大きさ、形状は特に限定されるものではなく、実際の操作の点及び反応結果の観察の点において適切であればよい。
標識物質としては、特に限定されるものではなく、例えば、金、銀、白金等の金属ナノ粒子、ラテックス粒子等の公知のものを使用することができる。金属ナノ粒子の平均粒径は、特に限定されるものではないが、好ましくは１０ｎｍ以上１５０ｎｍ以下、より好ましくは２０ｎｍ以上１００ｎｍ以下である。また、ラテックス粒子の平均粒径は、特に限定されるものではないが、好ましくは１００ｎｍ以上５００ｎｍ以下、より好ましくは１００ｎｍ以上２５０ｎｍ以下である。検体中の被検出物質の有無を目視で判定できることから、標識物質は、金ナノ粒子であることが好ましい。
標識試薬中の抗体又は抗原は、検体中の被検出物質と特異的に結合することができるものであれば市販されている抗体又は抗原を使用することができ、必要に応じて作製したものを使用することができる。被検出物質が抗原である場合には、それに特異的に結合することができる抗体が好ましい。抗体はモノクローナル抗体であってもポリクローナル抗体であってもよい。このような抗体は、例えば被検出物質である抗原で動物を感作することによる公知の方法で製造することができる。動物種の具体例としては、例えば、マウス、ラット、モルモット、イヌ、ヤギ、ヒツジ、ブタ、ウマ、ウシ及びヒト等を挙げることができるが、これらに限定されない。
標識試薬中の抗体又は抗原の含有量は、特に限定されるものではないが、１テストストリップあたり、好ましくは０．０１μｇ以上１０μｇ以下、より好ましくは０．０２μｇ以上５μｇ以下、さらに好ましくは０．０２μｇ以上１μｇ以下である。
メンブレンパッド３は、被検出物質を検出することにより、被検出物質の有無等を判定したり、被検出物質の濃度を測定したりするための検出部４を有する部材である。検出部４には、被検出物質を捕捉するための抗体又は抗原を含む捕捉試薬が固定されている。検出部４では、検体中に被検出物質が含まれると、標識試薬、被検出物質及び捕捉試薬からなる複合体が形成されて発色し、検体中に被検出物質が含まれないと、標識試薬、被検出物質及び捕捉試薬からなる複合体が形成されないため発色しない。メンブレンパッド３の材料としては、公知の材料を用いることができ、例えば、シリカ、チタニア、ジルコニア、セリア、及びアルミナ等のセラミック微粒子、ポリウレタン、ポリエステル、ポリエチレン、ポリ塩化ビニル、ポリフッ化ビニリデン、ナイロン、ニトロセルロース、酢酸セルロース、ガラス繊維、綿等が挙げられる。また、メンブレンパッド３の大きさ、形状は特に限定されるものではなく、実際の操作の点及び反応結果の観察の点において適切であればよい。
捕捉試薬に用いられる抗体又は抗原は、上記標識試薬に含有される抗体又は抗原と同一の抗体又は抗原であってもよく、異なる抗体又は抗原であってもよい。
捕捉試薬に用いられる抗体又は抗原は、検体中の被検出物質と特異的に結合することができるものであれば市販されている抗体又は抗原を使用することができ、必要に応じて作製したものを使用することができる。被検出物質が抗原である場合には、それに特異的に結合することができる抗体が好ましい。抗体はモノクローナル抗体であってもポリクローナル抗体であってもよい。このような抗体は、被検出物質である抗原で動物を感作することによる公知の方法で製造することができる。動物種の具体例としては、例えば、マウス、ラット、モルモット、イヌ、ヤギ、ヒツジ、ブタ、ウマ、ウシ及びヒト等を挙げることができるが、これらに限定されない。
捕捉試薬に用いられる抗体又は抗原の含有量は、特に限定されるものではないが、１テストストリップあたり、好ましくは０．１μｇ以上１０μｇ以下、より好ましくは０．２μｇ以上５μｇ以下、さらに好ましくは０．２μｇ以上４μｇ以下である。
検出部の形状としては、特に限定されるものではなく、例えば、線状、円状等が挙げられる。視認性、検出効率の観点から、線状が好ましい。
メンブレンパッド３は、非特異的な吸着により分析の精度が低下することを防止するため、必要に応じて、公知の方法でブロッキング処理を行うことができる。一般にブロッキング処理はウシ血清アルブミン、スキムミルク、カゼイン、及びゼラチン等のタンパク質が好適に用いられる。かかるブロッキング処理後に、必要に応じて、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００（登録商標）、及びＳＤＳ等の界面活性剤を１つ又は２つ以上組み合わせて洗浄してもよい。
吸収パッド５は、メンブレンパッド３を通過した余剰の試料等を吸収する部材である。吸収パッドの材料としては、公知の材料を用いることができ、例えば、シリカ、チタニア、ジルコニア、セリア、及びアルミナ等のセラミック微粒子、ポリウレタン、ポリエステル、ポリエチレン、ポリ塩化ビニル、ポリフッ化ビニリデン、ナイロン、ニトロセルロース、酢酸セルロース、ガラス繊維、綿等が挙げられる。また、吸収パッド５の大きさ、形状は特に限定されるものではなく、実際の操作の点及び反応結果の観察の点において適切であればよい。
バッキングシート６は、サンプルパッド１、コンジュゲートパッド２、メンブレンパッド３、吸収パッド５等の各部材を固定する支持体として用いられる部材である。バッキングシートの材料としては、特に限定されるものではなく、例えば、粘着剤によって試料に対して不透過性、非透湿性となるような、従来公知の種々の材料を用いることができる。また、バッキングシート６の大きさ、形状は特に限定されるものではなく、実際の操作の点及び反応結果の観察の点において適切であればよい。
本発明のイムノクロマトグラフ用テストストリップの一実施形態においては、非特異反応抑制剤は、サンプルパッド１、コンジュゲートパッド２及びメンブレンパッド３のうち少なくとも１つに含有されている。
本発明のイムノクロマトグラフ用テストストリップに含まれる非特異反応抑制剤中の上述のモノクローナル抗体の含有量は、特に限定されるものではないが、１テストストリップあたり、好ましくは０．５μｇ以上２０μｇ以下、より好ましくは１μｇ以上１５μｇ以下、さらに好ましくは２μｇ以上１０μｇ以下である。上記範囲であることによって、非特異反応を強く抑制できる。
次に、本発明のイムノクロマトグラフ用テストキットについて説明する。
本発明においてテストキットとは、免疫測定に必要な試薬等の２以上の物品を備えるキットをいう。本発明のイムノクロマトグラフ用テストキットは、上述の非特異反応抑制剤を含むこと以外は特に限定されるものではなく、公知のイムノクロマトグラフ用テストキットと同様の構成とすることができる。
本発明においては、非特異反応抑制剤は、免疫反応に関与し得る態様でイムノクロマトグラフ用テストキットに含まれていればよい。例えば、非特異反応抑制剤は、試薬として独立して含有されていてもよく、免疫測定に用いる検体希釈液等の試薬、テストストリップ等に予め含有されていてもよい。
本発明の一実施形態においては、イムノクロマトグラフ用テストキットは、テストストリップに加えて、免疫測定に必要な試薬を備える。テストストリップとしては、特に限定されるものではなく、例えば、上述のサンプルパッド、コンジュゲートパッド、メンブレンパッド、吸収パッド、バッキングシート等から構成されるものを使用することができる。免疫測定に必要な試薬としては、特に限定されるものではないが、例えば、検体希釈液、展開液等が挙げられる。
本発明の一実施形態においては、テストストリップ、試薬の少なくとも１つに非特異反応抑制剤が含有される。より具体的には、サンプルパッド、コンジュゲートパッド、メンブレンパッド、試薬の少なくとも１つに非特異反応抑制剤が含有される。このようにすることで、非特異反応抑制剤の存在下で抗原抗体反応を行うことができ、非特異反応を抑制することができる。
本発明のイムノクロマトグラフ用テストキットに含まれる非特異反応抑制剤中の上述のモノクローナル抗体の含有量は、特に限定されるものではないが、１テストキットあたり、好ましくは０．５μｇ以上２０μｇ以下、より好ましくは１μｇ以上１５μｇ以下、さらに好ましくは２μｇ以上１０μｇ以下である。上記範囲であることによって、溶液の粘度を増加させることなく非特異反応を効率的に抑制することができる。
次に、本発明の免疫測定法について説明する。
本発明の免疫測定法は、上述の非特異反応抑制剤の存在下で免疫反応を行うものである。本発明の免疫測定法は、非特異反応抑制剤の存在下で免疫反応を行うことにより、本来の目的とする免疫反応以外の非特異反応を抑制することができる。
本発明の免疫測定法としては、免疫反応を利用して、検体中の被検出物質を定量的若しくは定性的に測定する方法であれば特に限定されるものではなく、例えば、酵素免疫測定法（例えば、ＥＬＩＳＡ法）、凝集法、イムノクロマトグラフ法、放射免疫測定法、比濁法等が挙げられ、好ましくは、酵素免疫測定法、凝集法又はイムノクロマトグラフ法である。本発明の免疫測定法は、検体の採取の容易性から、取り扱いが容易とされているイムノクロマトグラフ法において特に有用である。
本発明の免疫測定法に用いられる検体としては、特に限定されるものではなく、例えば、血清、血漿、全血、尿、唾液、鼻汁等が挙げられる。
本発明の免疫測定法において測定することができる被検出物質としては、例えば、検体中に含まれるウイルス、細菌、寄生虫、代謝物等が挙げられ、より具体的にはそれらが有するタンパク質、ペプチド、多糖類、及び複合糖質等を挙げることができる。特に、検体中に微量に含まれる抗原が好適である。なぜなら、検体中に含まれる抗原の濃度が微量である程、相対的に非特異的反応の影響が大きくなるので、本発明の非特異反応抑制剤が有用となるからである。
本発明における免疫反応は、非特異反応抑制剤の存在下で行うものであれば特に限定されるものではなく、常法にしたがって行うことができる。例えば、免疫反応を行う前に予め検体と非特異反応抑制剤とを接触させ、続いて検体中の被検出物質に結合し得る抗体又は抗原と接触させて免疫反応を行うことができる。また、免疫反応を行う前に予め検体中の被検出物質に結合し得る抗体又は抗原と非特異反応抑制剤とを接触させ、続いて検体と接触させて免疫反応を行うことができる。
本発明に用いられる非特異反応抑制剤中の上述のモノクローナル抗体の含有量は、特に限定されるものではなく、検体の種類、検体の量、免疫測定法の測定条件等に基づいて適宜調整することができる。例えば、１検体あたりに使用する非特異反応抑制剤中の上述のモノクローナル抗体の含有量は、０．５μｇ以上２０μｇ以下が好ましく、１μｇ以上１５μｇ以下がより好ましく、２μｇ以上１０μｇ以下がさらに好ましい。
本発明の免疫測定法がイムノクロマトグラフ法である場合には、例えば、抗原を含む検体に予め非特異反応抑制剤を添加して得られた試料を固相に添加し、固相中で免疫複合体を形成することで抗原を検出することができる。また、予め非特異反応抑制剤を添加したサンプルパッド、コンジュゲートパッド等の固相に抗原を含む検体を展開し、固相中で免疫複合体を形成することで抗原を検出することができる。
本発明の免疫測定法が酵素免疫測定法（例えば、ＥＬＩＳＡ法）である場合には、例えば、抗原を含む検体に予め非特異反応抑制剤を添加し、その後、常法にしたがって抗原抗体反応を行うことで抗原の濃度を測定することができる。
本発明の免疫測定法が凝集法である場合には、例えば、ラテックス凝集比濁法の場合、抗原を含む検体中に予め非特異反応抑制剤を添加しておいてもよいし、ラテックス混濁液中に添加しておいてもよい。ラテックス凝集比濁法は常法により行うことができる。
以下、本発明を実施例に基づいて詳細に説明するが、本発明は以下の実施例に何ら限定されるものではない。
［抗体の作製］
イヌＩｇＭ（Ｒｏｃｋｌａｎｄ社製、製品名ＤＯＧ ＩｇＭ Ｗｈｏｌｅ ｍｏｌｅｃｕｌｅ）を免疫原として抗イヌＩｇＭ抗体のモノクローナル抗体を、次のように常法に従って作製した。１００μｇの上記イヌＩｇＭと等量のＡｄｊｕｖａｎｔ Ｃｏｍｐｌｅｔｅ Ｆｒｅｕｎｄ（Ｄｉｆｃｏ）を混合して、マウス（ＢＡＬＢ／ｃ、５週齢、日本ＳＬＣ）に３回免疫し、その脾臓細胞を細胞融合に用いた。細胞融合には、マウスの骨髄腫細胞であるＳｐ２／０−Ａｇ１４細胞（Ｓｈｕｌｍａｎら、Ｎａｔｕｒｅ，２７６，２６９−２７０，１９７８）を用いた。細胞の培養には、Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ Ｍｅｄｉｕｍ（Ｇｉｂｃｏ）にＬ−グルタミン ０．３ｍｇ／ｍｌ、ペニシリンＧカリウム １００単位／ｍｌ、硫酸ストレプトマイシン １００μｇ／ｍｌ、Ｇｅｎｔａｃｉｎ ４０μｇ／ｍｌを添加し（ＤＭＥＭ）、これに牛胎児血清（ＪＲＨ）を１０％となるように加えた培養液を用いた。細胞融合は、免疫マウスの脾臓細胞とＳｐ２／０−Ａｇ１４細胞を混合し、そこにＰｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅ ｇｌｙｃｏｌ ｓｏｌｕｔｉｏｎ（Ｓｉｇｍａ）を添加することにより行った。融合細胞はＨＡＴ−ＤＭＥＭ［０．１ｍＭ Ｓｏｄｉｕｍ Ｈｙｐｏｘａｎｔｉｎｅ、０．４μＭ Ａｍｉｎｏｐｔｅｒｉｎおよび０．０１６ｍＭ Ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ（Ｇｉｂｃｏ）を含む血清加ＤＭＥＭ］で培養し、酵素免疫測定法（ＥＬＩＳＡ法）により培養上清中の抗体産生を確認した。抗体産生陽性の細胞をＨＴ−ＤＭＥＭ［０．１ｍＭ Ｓｏｄｉｕｍ Ｈｙｐｏｘａｎｔｉｎｅおよび０．１６ｍＭ Ｔｈｙｍｉｄｉｎｅを含む血清加ＤＭＥＭ］で培養し、さらに血清加ＤＭＥＭで培養を続けた。
イヌＩｇＭ（Ｒｏｃｋｌａｎｄ社製、製品名ＤＯＧ ＩｇＭ Ｗｈｏｌｅ ｍｏｌｅｃｕｌｅ）を免疫原として抗イヌＩｇＭ抗体のモノクローナル抗体を、次のように常法に従って作製した。１００μｇの上記イヌＩｇＭと等量のＡｄｊｕｖａｎｔ Ｃｏｍｐｌｅｔｅ Ｆｒｅｕｎｄ（Ｄｉｆｃｏ）を混合して、マウス（ＢＡＬＢ／ｃ、５週齢、日本ＳＬＣ）に３回免疫し、その脾臓細胞を細胞融合に用いた。細胞融合には、マウスの骨髄腫細胞であるＳｐ２／０−Ａｇ１４細胞（Ｓｈｕｌｍａｎら、Ｎａｔｕｒｅ，２７６，２６９−２７０，１９７８）を用いた。細胞の培養には、Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ Ｍｅｄｉｕｍ（Ｇｉｂｃｏ）にＬ−グルタミン ０．３ｍｇ／ｍｌ、ペニシリンＧカリウム １００単位／ｍｌ、硫酸ストレプトマイシン １００μｇ／ｍｌ、Ｇｅｎｔａｃｉｎ ４０μｇ／ｍｌを添加し（ＤＭＥＭ）、これに牛胎児血清（ＪＲＨ）を１０％となるように加えた培養液を用いた。細胞融合は、免疫マウスの脾臓細胞とＳｐ２／０−Ａｇ１４細胞を混合し、そこにＰｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅ ｇｌｙｃｏｌ ｓｏｌｕｔｉｏｎ（Ｓｉｇｍａ）を添加することにより行った。融合細胞はＨＡＴ−ＤＭＥＭ［０．１ｍＭ Ｓｏｄｉｕｍ Ｈｙｐｏｘａｎｔｉｎｅ、０．４μＭ Ａｍｉｎｏｐｔｅｒｉｎおよび０．０１６ｍＭ Ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ（Ｇｉｂｃｏ）を含む血清加ＤＭＥＭ］で培養し、酵素免疫測定法（ＥＬＩＳＡ法）により培養上清中の抗体産生を確認した。抗体産生陽性の細胞をＨＴ−ＤＭＥＭ［０．１ｍＭ Ｓｏｄｉｕｍ Ｈｙｐｏｘａｎｔｉｎｅおよび０．１６ｍＭ Ｔｈｙｍｉｄｉｎｅを含む血清加ＤＭＥＭ］で培養し、さらに血清加ＤＭＥＭで培養を続けた。
クローニングした細胞は、２，６，１０，１４−Ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｐｅｎｔａｄｅｃａｎｅ（Ｓｉｇｍａ）を接種しておいたマウス（ＢＡＬＢ／ｃ、リタイア、日本ＳＬＣ）に腹腔内接種し、腹水を採取した。この腹水をプロテインＧカラムに供し、モノクローナル抗体を精製した。得られた抗体のうち、４種のモノクローナル抗体（Ｎｏ．６９、３２、７０、８０）を後述する試験に用いた。これらのアイソタイプはＩｇＧ型であった。このうちＮｏ．６９は、上述した受託番号ＮＩＴＥ ＢＰ−０２５５７のハイブリドーマにより産生される、イヌＩｇＭに対するモノクローナル抗体である。
［非特異反応抑制試験］
検体として、非特異反応を示すヒト血清を用い、上記作製したモノクローナル抗体、及び、従来公知の異好性阻止試薬ＨＢＲによる免疫測定法の非特異反応抑制効果を評価した。
具体的には、図１に示すように、バッキングシート６上に、検出部４を有するメンブレンパッド３と、サンプルパッド１と、コンジュゲートパッド２と、吸収パッド５とを形成したテストストリップ、及び展開試料を以下のとおり作製し、イムノクロマトグラフ法により測定を行い、非特異反応抑制効果を評価した。
検体として、非特異反応を示すヒト血清を用い、上記作製したモノクローナル抗体、及び、従来公知の異好性阻止試薬ＨＢＲによる免疫測定法の非特異反応抑制効果を評価した。
具体的には、図１に示すように、バッキングシート６上に、検出部４を有するメンブレンパッド３と、サンプルパッド１と、コンジュゲートパッド２と、吸収パッド５とを形成したテストストリップ、及び展開試料を以下のとおり作製し、イムノクロマトグラフ法により測定を行い、非特異反応抑制効果を評価した。
（１）サンプルパッドの作製
サンプルパッドとして、グラスファイバーからなる不織布（ミリポア社製：３００ｍｍ×３０ｍｍ）を用いた。
（２）コンジュゲートパッドの作製
金コロイド懸濁液（田中貴金属工業社製：ＬＣ４０ｎｍ）０．５ｍｌに、リン酸緩衝液（ｐＨ７．４）で０．０５ｍｇ／ｍｌの濃度になるように希釈した抗ジカウイルスＮＳ１抗体（Ａａｌｔｏｂｉｏｒｅａｇｅｎｔｓ社製、製品名Ａｎｔｉ−Ｚｉｋａ ｖｉｒｕｓＮＳ１ Ａｎｔｉｂｏｄｙ）を０．１ｍｌ加え、室温で１０分間静置した。
次いで、１質量％のウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を含むリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）を０．１ｍｌ加え、更に室温で１０分間静置した。その後、十分撹拌した後、８０００×ｇで１５分間遠心分離を行い、上清を除去した後、１質量％のＢＳＡを含むリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）を０．１ｍｌ加えた。以上の手順で標識試薬を作製した。
上記作製した標識試薬３００μＬに３００μＬの１０質量％トレハロース水溶液と１．８ｍＬの蒸留水を加えたものを１２ｍｍ×３００ｍｍのグラスファイバーパッド（ミリポア社製）に均一になるように添加した後、真空乾燥機にて乾燥させ、コンジュゲートパッドを作製した。
サンプルパッドとして、グラスファイバーからなる不織布（ミリポア社製：３００ｍｍ×３０ｍｍ）を用いた。
（２）コンジュゲートパッドの作製
金コロイド懸濁液（田中貴金属工業社製：ＬＣ４０ｎｍ）０．５ｍｌに、リン酸緩衝液（ｐＨ７．４）で０．０５ｍｇ／ｍｌの濃度になるように希釈した抗ジカウイルスＮＳ１抗体（Ａａｌｔｏｂｉｏｒｅａｇｅｎｔｓ社製、製品名Ａｎｔｉ−Ｚｉｋａ ｖｉｒｕｓＮＳ１ Ａｎｔｉｂｏｄｙ）を０．１ｍｌ加え、室温で１０分間静置した。
次いで、１質量％のウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を含むリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）を０．１ｍｌ加え、更に室温で１０分間静置した。その後、十分撹拌した後、８０００×ｇで１５分間遠心分離を行い、上清を除去した後、１質量％のＢＳＡを含むリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）を０．１ｍｌ加えた。以上の手順で標識試薬を作製した。
上記作製した標識試薬３００μＬに３００μＬの１０質量％トレハロース水溶液と１．８ｍＬの蒸留水を加えたものを１２ｍｍ×３００ｍｍのグラスファイバーパッド（ミリポア社製）に均一になるように添加した後、真空乾燥機にて乾燥させ、コンジュゲートパッドを作製した。
（３）検出部の作製
メンブレンとしてニトロセルロースからなるシート（ミリポア社製、商品名：ＨＦ１２０、３００ｍｍ×２５ｍｍ）を用いた。
次に、５質量％のイソプロピルアルコールを含むリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）で１．０ｍｇ／ｍｌの濃度になるように、抗ジカウイルスＮＳ１抗体（Ａａｌｔｏｂｉｏｒｅａｇｅｎｔｓ社製、製品名Ａｎｔｉ−Ｚｉｋａ ｖｉｒｕｓＮＳ１ Ａｎｔｉｂｏｄｙ）を希釈した溶液１５０μＬを、乾燥されたメンブレン上の検出部に１ｍｍの幅でイムノクロマト用ディスペンサー「ＸＹＺ３０５０」（ＢＩＯＤＯＴ社製）を用いて１μＬ／ｍｍの量（１シートあたり２５μＬ）でライン状に塗布した。
また、金ナノ粒子標識試薬の展開の有無や展開速度を確認するために検出部の下流に、金ナノ粒子標識物質と広く親和性を有するヤギ由来抗血清をリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）で希釈した液をコントロール部位（コントロールライン）に塗布した。その後、５０℃で３０分間乾燥させ、室温で一晩乾燥させた。
（４）テストストリップの作製
検出部を有するメンブレンパッドに、サンプルパッド、コンジュゲートパッド、及びグラスファイバー製の不織布からなる吸収パッドを順次貼り合わせた。そして、裁断機で幅が５ｍｍとなるように裁断し、バッキングシート（倉本産業社製、製品名イムノクロマト用バッキングシート）上に貼り付け、テストストリップとした。なお、コンジュゲートパッドの試料展開方向の長さを１２ｍｍとした。
（５）展開試料の調製
非特異反応を示すヒト血清（ＳＣＩＰＡＣ社製、製品名Ｎｏｒｍａｌ Ｆｅｍａｌｅ Ｓｅｒｕｍ）を検体とし、検体３０μＬ、０．５％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００を含むＰＢＳ溶液６０μＬ、及び上記作製した実施例または比較例のモノクローナル抗体各４μｇ、あるいはＨＢＲ（Ｓｃａｎｔｉｂｏｄｙ社製）４μｇを混合し、展開試料を調製した。また、上記抗体の代わりにＰＢＳ１０μＬを使用したものをコントロールとした。
（６）測定
上記作製したテストストリップ及び展開試料を用いて、以下の方法で非特異反応抑制効果を試験した。
展開試料１５０μＬをテストストリップのサンプルパッドに添加し展開させ、１５分後にイムノクロマトリーダーを用いて、検出部の発色強度（４５０ｎｍの吸光度）を測定した。その結果を表１に示す。
また、判定方法を以下に示す。
○：検出部の発色が目視で認識されない
×：検出部の発色が目視で認識される
メンブレンとしてニトロセルロースからなるシート（ミリポア社製、商品名：ＨＦ１２０、３００ｍｍ×２５ｍｍ）を用いた。
次に、５質量％のイソプロピルアルコールを含むリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）で１．０ｍｇ／ｍｌの濃度になるように、抗ジカウイルスＮＳ１抗体（Ａａｌｔｏｂｉｏｒｅａｇｅｎｔｓ社製、製品名Ａｎｔｉ−Ｚｉｋａ ｖｉｒｕｓＮＳ１ Ａｎｔｉｂｏｄｙ）を希釈した溶液１５０μＬを、乾燥されたメンブレン上の検出部に１ｍｍの幅でイムノクロマト用ディスペンサー「ＸＹＺ３０５０」（ＢＩＯＤＯＴ社製）を用いて１μＬ／ｍｍの量（１シートあたり２５μＬ）でライン状に塗布した。
また、金ナノ粒子標識試薬の展開の有無や展開速度を確認するために検出部の下流に、金ナノ粒子標識物質と広く親和性を有するヤギ由来抗血清をリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）で希釈した液をコントロール部位（コントロールライン）に塗布した。その後、５０℃で３０分間乾燥させ、室温で一晩乾燥させた。
（４）テストストリップの作製
検出部を有するメンブレンパッドに、サンプルパッド、コンジュゲートパッド、及びグラスファイバー製の不織布からなる吸収パッドを順次貼り合わせた。そして、裁断機で幅が５ｍｍとなるように裁断し、バッキングシート（倉本産業社製、製品名イムノクロマト用バッキングシート）上に貼り付け、テストストリップとした。なお、コンジュゲートパッドの試料展開方向の長さを１２ｍｍとした。
（５）展開試料の調製
非特異反応を示すヒト血清（ＳＣＩＰＡＣ社製、製品名Ｎｏｒｍａｌ Ｆｅｍａｌｅ Ｓｅｒｕｍ）を検体とし、検体３０μＬ、０．５％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００を含むＰＢＳ溶液６０μＬ、及び上記作製した実施例または比較例のモノクローナル抗体各４μｇ、あるいはＨＢＲ（Ｓｃａｎｔｉｂｏｄｙ社製）４μｇを混合し、展開試料を調製した。また、上記抗体の代わりにＰＢＳ１０μＬを使用したものをコントロールとした。
（６）測定
上記作製したテストストリップ及び展開試料を用いて、以下の方法で非特異反応抑制効果を試験した。
展開試料１５０μＬをテストストリップのサンプルパッドに添加し展開させ、１５分後にイムノクロマトリーダーを用いて、検出部の発色強度（４５０ｎｍの吸光度）を測定した。その結果を表１に示す。
また、判定方法を以下に示す。
○：検出部の発色が目視で認識されない
×：検出部の発色が目視で認識される
コントロールの結果からもわかるように、検体として使用したヒト血清（ＳＣＩＰＡＣ社製、製品名Ｎｏｒｍａｌ Ｆｅｍａｌｅ Ｓｅｒｕｍ）は、非特異反応が生じる検体であることがわかる。そして、本発明における抗体を用いた実施例では、比較例の抗体や異好性阻止試薬ＨＢＲと比較しても顕著に非特異反応を抑制できた。
１ サンプルパッド
２ コンジュゲートパッド
３ メンブレンパッド
４ 検出部
５ 吸収パッド
６ バッキングシート
２ コンジュゲートパッド
３ メンブレンパッド
４ 検出部
５ 吸収パッド
６ バッキングシート
Claims (10)
- 受託番号ＮＩＴＥ ＢＰ−０２５５７のハイブリドーマにより産生される、イヌＩｇＭに対するモノクローナル抗体。
- 受託番号ＮＩＴＥ ＢＰ−０２５５７のハイブリドーマ。
- 請求項１に記載のモノクローナル抗体を含有する、免疫測定法用の非特異反応抑制剤。
- 前記モノクローナル抗体の含有量が０．５μｇ以上２０μｇ以下である、請求項３に記載の非特異反応抑制剤。
- 前記免疫測定法が、イムノクロマトグラフ法である請求項３または４に記載の非特異反応抑制剤。
- 請求項３〜５のいずれか１項に記載の非特異反応抑制剤を含有する、イムノクロマトグラフ用テストストリップ。
- 請求項３〜５のいずれか１項に記載の非特異反応抑制剤を含有する、イムノクロマトグラフ用テストキット。
- 検体中の被検出物質を特異的に検出するための免疫測定法において、請求項３〜５のいずれか１項に記載の非特異反応抑制剤の存在下に免疫反応を行わせる、免疫測定法。
- 前記免疫測定法が、酵素免疫測定法、凝集法又はイムノクロマトグラフ法である請求項８に記載の免疫測定法。
- 前記免疫測定法が、イムノクロマトグラフ法である請求項８に記載の免疫測定法。
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2018029072A JP6962834B2 (ja) | 2018-02-21 | 2018-02-21 | モノクローナル抗体および非特異反応抑制剤 |
| PCT/JP2019/006664 WO2019163923A1 (ja) | 2018-02-21 | 2019-02-21 | モノクローナル抗体および非特異反応抑制剤 |
| US16/971,488 US20200378965A1 (en) | 2018-02-21 | 2019-02-21 | Monoclonal antibody and non-specific reaction inhibitor |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2018029072A JP6962834B2 (ja) | 2018-02-21 | 2018-02-21 | モノクローナル抗体および非特異反応抑制剤 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2019140988A JP2019140988A (ja) | 2019-08-29 |
| JP2019140988A5 JP2019140988A5 (ja) | 2020-11-12 |
| JP6962834B2 true JP6962834B2 (ja) | 2021-11-05 |
Family
ID=67687305
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2018029072A Active JP6962834B2 (ja) | 2018-02-21 | 2018-02-21 | モノクローナル抗体および非特異反応抑制剤 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20200378965A1 (ja) |
| JP (1) | JP6962834B2 (ja) |
| WO (1) | WO2019163923A1 (ja) |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP4554472B2 (ja) * | 2005-08-26 | 2010-09-29 | 国立大学法人鳥取大学 | パルボウイルス抗原検出用キット |
| EP2322562B1 (en) * | 2008-09-05 | 2016-03-30 | Sekisui Medical Co., Ltd. | Monoclonal antibody, and immunoassay using same |
| JP5992703B2 (ja) * | 2012-03-22 | 2016-09-14 | 田中貴金属工業株式会社 | イムノクロマトグラフィー検出方法 |
| JP6005705B2 (ja) * | 2014-09-25 | 2016-10-12 | ヤマサ醤油株式会社 | 非特異的反応阻害剤、それを用いた免疫学的測定法 |
| JP6270781B2 (ja) * | 2015-06-30 | 2018-01-31 | 田中貴金属工業株式会社 | クロマト分析装置およびクロマト分析方法 |
| WO2018203572A1 (ja) * | 2017-05-02 | 2018-11-08 | 田中貴金属工業株式会社 | 非特異反応抑制剤 |
-
2018
- 2018-02-21 JP JP2018029072A patent/JP6962834B2/ja active Active
-
2019
- 2019-02-21 US US16/971,488 patent/US20200378965A1/en not_active Abandoned
- 2019-02-21 WO PCT/JP2019/006664 patent/WO2019163923A1/ja active Application Filing
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2019163923A1 (ja) | 2019-08-29 |
| JP2019140988A (ja) | 2019-08-29 |
| US20200378965A1 (en) | 2020-12-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP6452644B2 (ja) | ジカウイルス検出用免疫クロマト分析装置 | |
| JP7051824B2 (ja) | 非特異反応抑制剤 | |
| JP7479135B2 (ja) | 抗ｒｓウイルスを認識する抗体、並びに該抗体を用いた免疫測定方法及び免疫測定器具 | |
| JP7153545B2 (ja) | イムノクロマトグラフィー試験片、並びに、それを用いる被験物質測定方法及びイムノクロマトグラフィー試験キット | |
| JP2006522736A (ja) | アシアロα１−酸性糖タンパクに対するモノクロナール抗体、モノクロナール抗体からなる免疫クロマトグラフィ用帯状片及びこの免疫クロマトグラフィ用帯状片を用いる肝疾患診断法 | |
| JP6962834B2 (ja) | モノクローナル抗体および非特異反応抑制剤 | |
| JP6943789B2 (ja) | モノクローナル抗体および非特異反応抑制剤 | |
| EP3306319B1 (en) | Test object detection method, and immunoassay instrument and monoclonal antibody for same | |
| WO2022024925A1 (ja) | シグナルの低下を改善した検査試薬 | |
| JP7498556B2 (ja) | 免疫測定方法及び免疫測定器具 | |
| IE903439A1 (en) | Agglutination assay | |
| JP2019207248A (ja) | 被検対象の検出方法並びにそのための免疫測定器具及びモノクローナル抗体 | |
| JP7372196B2 (ja) | マイコプラズマ・ニューモニエの免疫測定方法及び免疫測定器具 | |
| JP7157061B2 (ja) | ジカウイルスを検出する方法及びキット | |
| EP3951388A1 (en) | Human metapneumovirus detection reagent | |
| WO2024166920A1 (ja) | 抗ｓａｒｓ－ｃｏｖ－２モノクローナル抗体並びにそれを用いたｓａｒｓ－ｃｏｖ－２の免疫測定方法及び免疫測定器具 | |
| JP2024003083A (ja) | Ｒｓウイルスを検出するための検出用試薬又はキット及びｒｓウイルスを検出する方法 | |
| WO2024166922A1 (ja) | ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の検出方法及びそのためのキット | |
| WO2024166923A1 (ja) | ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の検出方法及びそのためのキット | |
| WO2024166921A1 (ja) | ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の検出方法及びそのためのキット | |
| AU633633B2 (en) | Agglutination assay | |
| JP2019140988A5 (ja) | ||
| JP2019140987A5 (ja) | ||
| JPH1048209A (ja) | ヒトラクトフェリンの分析方法、感染症のスクリーニング方法及びスクリーニング用キット |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20180223 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20201002 |
|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20201002 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20210914 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20211014 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6962834 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |