JP6961580B2 - 膨張剤(leavening agent) - Google Patents

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Description

発明の分野
本発明は、非従来型の膨張剤および前記膨張剤により得られるベークド製品(baked product)に関する。
発明の背景
今日、パンの消費者は、革新的なまたは改善された特性を有する新しい製品を常に求めている。これらの中で特に関連するのは香りおよび味である。
ベークド製品、例えば、パンの膨張は、酵母サッカロミセスセレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)を膨張剤として用いて通常行われる。ドウの発酵により、酵母はCO2を発生させ、ドウを膨らませる。これはまた、ベークド製品に気泡構造を与える。サッカロミセスセレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)の使用により得られるベークド製品は、とりわけ使用する加工時間が短いことにより、不良な味および香りを有しがちである。
サワードウ発酵は、パンの香りおよび味を改善するために用いられる、周知の別の焼成技法である。サワードウにより得られる典型的な味/香りとしては、乳酸(lactic)、酢酸(acetic)、トースト(toasted)、フルーティ(fruity)、発酵(fermented)または穀物(cereal)がある。サワードウは、乳酸菌および/またはパン酵母株による穀物または穀物粉の発酵により一般に得られる。サワードウから分離した乳酸菌としては、主にラクトバチルス(Lactobacillus)、リューコノストック(Leuconostoc)、ペディオコッカス(Pediococcus)およびストレプトコッカス(Streptococcus)があるが、大部分は、ラクトバチルス(Lactobacillus)群に属する。乳酸菌発酵は、サワードウを酸性にする乳酸および/または酢酸を生成する。サッカロミセスセレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)は、従来のサワードウにおいて最も多い酵母種である。他のサッカロミセス(Saccharomyces)属、カンジダ(Candida)属、ピチア(Pichia)属およびハンゼヌラ(Hansenula)属の種を分離して使用することもあった。
サワードウベースのパンの多くは、主に酸性環境による典型的な味および香りを有する。しかし、消費者は、このような典型的な味および香りを有するパンを常に受け入れる/食すとは限らない。
他の代替の焼成技法は、非従来型の基質、例えば、穀物加水分解物(cereal hydrolysate)の発酵により得られる膨張剤の使用に基づく。しかし、従来型の酵母、例えば、サッカロミセスセレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)を用いる膨張剤の調製での非従来型の基質、例えば、穀物加水分解物の使用により、不良な香りおよび不快な後味を有するパンになる。
したがって、改善された味および香りを有するパンを得るために別の組成物および方法を発見することが依然として必要とされている。
したがって、本発明の目的は、新しい典型的な香りおよび味を有するパンを提供することである。したがって、本発明は、新しい膨張剤および前記新しい膨張剤を使用する方法を提供する。
発明者らは、カザクスタニア(Kazachstania)および/またはラチャンセア(Lachancea)株、特に、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)、カザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)および/またはラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)を膨張剤として使用することにより、改善された味および香りを有するベーカリー製品(bakery product)、例えば、パンを得ることができることを驚くべきことに発見した。より具体的には、穀物加水分解物をカザクスタニア(Kazachstania)および/またはラチャンセア(Lachancea)、特にカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)、カザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)および/またはラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)で発酵させることにより、伝統的なパン酵母サッカロミセスセレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)で発酵させた穀物加水分解物ベースの膨張剤を使用したときに通常得られる、焼成中の不快な臭い(off-flavor)の出現を防止する膨張剤を調製できることを発見した。
第1の側面において、本発明は、カザクスタニア(Kazachstania)および/またはラチャンセア(Lachancea)属の1つ以上の株で発酵させた、穀物加水分解物を含む組成物に関する。
第2の側面において、本発明は、穀物加水分解物、ならびにカザクスタニア(Kazachstania)および/またはラチャンセア(Lachancea)属の1つ以上の株を含む液体を含む混合物を発酵させ、それにより組成物を得ること、ならびに前記組成物を任意に安定化させ、および/または梱包することを含む、組成物を製造する方法に関する。
特に、ここで記載する本発明の第1または第2の側面による組成物または方法各々は、カザクスタニア(Kazachstania)属の前記株の少なくとも1つが、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)もしくはカザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)株であり、および/またはラチャンセア(Lachancea)属の前記株の少なくとも1つが、ラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)株である組成物または方法を提供する。
特に、ここで記載する本発明の第1または第2の側面による組成物または方法各々は、カザクスタニア(Kazachstania)属の前記株の少なくとも1つが、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)MUCL54530もしくはカザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)ATCC22034であり、および/またはラチャンセア(Lachancea)属の前記株の少なくとも1つが、ラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)MUCL55817である組成物または方法を提供する。
特に、ここで記載する本発明の第1または第2の側面による組成物または方法各々は、前記組成物が、(a)約108〜1010cfu/mlの範囲の量のカザクスタニア(Kazachstania)および/もしくはラチャンセア(Lachancea)属の1つ以上の株を含み、(b)前記組成物のpHが、約3.8〜約6の範囲であり、ならびに/または(c)前記組成物の膨張力(leavening power)が、SJA分析(SJA analysis)で測定したとき、2時間で発生したCO2約300ml〜約1500mlの範囲である組成物または方法を提供する。
特に、ここで記載する本発明の第1または第2の側面による組成物または方法各々は、カザクスタニア(Kazachstania)および/またはラチャンセア(Lachancea)属の前記1つ以上の株と、1つ以上の他の微生物株、好ましくは他の酵母株および/または乳酸菌株とを組み合わせる組成物または方法を提供する。
特に、ここで記載する本発明の第1または第2の側面による組成物または方法各々は、カザクスタニア(Kazachstania)および/またはラチャンセア(Lachancea)属の前記1つ以上の株が、前記組成物中で本質的に唯一のCO2を発生させる微生物である組成物または方法を提供する。
特に、ここで記載する本発明の第1または第2の側面による組成物または方法各々は、前記組成物が、アミログルコシダーゼ、活性麦芽粉(malt active flour)およびα−アミラーゼの群から好ましくは選択されるアミラーゼ源を含み、アミラーゼ源が、前記組成物中で1〜30AGU/g液体酵母(liquid leaven)のアミログルコシダーゼ、1〜16DU/g液体酵母の活性麦芽粉、または10〜80SKB/g液体酵母のα−アミラーゼが得られる量で好ましくは添加される組成物または方法を提供する。
特に、ここで記載する本発明の第1または第2の側面による組成物または方法各々は、前記穀物加水分解物が、デュラム小麦粉もしくはデュラム小麦麦芽(durum wheat malt)、小麦粉もしくは小麦麦芽、ライ麦粉もしくはライ麦麦芽、またはこれらの組合せに基づくものである組成物または方法を提供する。
更なる側面において、本発明は、ここで記載する組成物の、膨張剤、好ましくは液体膨張剤(liquid leavening agent)としての使用に関する。
更なる側面において、本発明は、ここで記載する組成物の、食品、好ましくはベークド製品、より好ましくはベーカリーまたはパティスリー製品(patisserie product)の調製のための材料としての使用に関する。
更なる側面において、本発明は、本発明によるおよびここで記載する組成物を含むベークド製品、好ましくは本発明によるおよびここで記載する組成物を含むベーカリーまたはパティスリー製品に関する。
更なる側面において、本発明は、以下の工程
− 本発明によるおよびここで記載する組成物を提供する工程、
− 該組成物をドウまたはバッターに添加する工程、ならびに
− 前記ドウまたはバッターを焼成し、それによりベークド製品、例えば、ベーカリーまたはパティスリー製品を得る工程
を含む、ベークド製品、例えば、ベーカリーまたはパティスリー製品を得る方法に関する。
更なる側面において、本発明は、BCCM/MUCL(Agro)industrial Fungi&Yeasts Collectionに受託番号MUCL54530の下に寄託されたカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)株、またはBCCM/MUCL(Agro)industrial Fungi&Yeasts Collectionに受託番号MUCL55817の下に寄託されたラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)株、特に、BCCM/MUCL(Agro)industrial Fungi&Yeasts Collectionに受託番号MUCL54530の下に寄託されたカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)株に関する。
更なる側面において、本発明は、食品、好ましくはベークド製品、より好ましくはベーカリーまたはパティスリー製品の調製のための、BCCM/MUCL(Agro)industrial Fungi&Yeasts Collectionに受託番号MUCL54530の下に寄託されたカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)株、またはBCCM/MUCL(Agro)industrial Fungi&Yeasts Collectionに受託番号MUCL55817の下に寄託されたラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)株、特に、BCCM/MUCL(Agro)industrial Fungi&Yeasts Collectionに受託番号MUCL54530の下に寄託されたカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)株の使用に関する。
発明の詳細な説明
本発明で使用する本発明の組成物、方法、使用、ベークド製品および株について記載する前に、本発明は、記載した特定の組成物、方法、使用、ベークド製品および株に限定されず、このような組成物、方法、使用、ベークド製品および株が、当然ながら様々であってもよいことを理解されたい。本発明の範囲が、添付の特許請求の範囲によってのみ限定されるため、ここで使用する専門用語が限定を意図するものではないことも理解されたい。
別段の指示がない限り、ここで使用するすべての技術および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者の1人に一般に理解されるのと同じ意味を有する。ここで記載するものと類似または同等の任意の方法および材料は、本発明の実施または試験で使用してもよいが、好ましい方法および材料を以下に記載する。
本明細書および添付の特許請求の範囲において、単数形「1つの(a、an)」および「その(the)」は、別段の明確な指示がない限り、複数の指示対象を含む。
ここで使用する用語「含んでいる(comprising)」、「含む(comprises)」および「から構成される(comprised of)」は、「含んでいる(including)」、「含む(includes)」または「含有している(containing)」、「含有する(contains)」と同義であり、包括的またはオープンエンドであり、付加的な列挙されないメンバー、要素または方法工程を排除しない。用語「含んでいる(comprising)」、「含む(comprises)」および「から構成される(comprised of)」は、用語「からなる(consisting of)」も含む。
ここで使用する用語「約」は、測定可能な値、例えば、パラメーター、量、時間幅などを指すとき、特定の値の、および特定の値から+/−10%以下、好ましくは+/−5%以下、より好ましくは+/−1%以下、さらにより好ましくは+/−0.1%以下の変動を、開示する発明において実施するのにこのような変動が適切である限りにおいて、包含することを意味する。修飾語「約」が指す値自体も、具体的におよび好ましくは開示されると理解されたい。
エンドポイントによる数値範囲の記載は、各範囲内で包含されるすべての数字および分数、ならびに記載されたエンドポイントを含む。
発明者らは、カザクスタニア(Kazachstania)および/またはラチャンセア(Lachancea)株、特に、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)、カザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)および/またはラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)を膨張剤として使用することにより、改善された味および香りを有するベーカリー製品、例えば、パンを得ることができることを驚くべきことに発見した。より具体的には、穀物加水分解物をカザクスタニア(Kazachstania)および/またはラチャンセア(Lachancea)、特にカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)、カザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)および/またはラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)で発酵させることにより、伝統的なパン酵母サッカロミセスセレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)で発酵させた穀物加水分解物ベースの膨張剤を使用したときに通常得られる、焼成中の不快な臭いの出現を防止する膨張剤を調製できることを発見した。
発明者らは、カザクスタニア(Kazachstania)株、特に、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)および/またはカザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)を膨張剤として使用することにより、改善された味および香りを有するベーカリー製品、例えば、パンを得ることができることを発見した。より具体的には、穀物加水分解物をカザクスタニア(Kazachstania)、特にカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)および/またはカザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)で発酵させることにより、伝統的なパン酵母サッカロミセスセレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)で発酵させた穀物加水分解物ベースの膨張剤を使用したときに通常得られる、焼成中の不快な臭いの出現を防止する膨張剤を調製できることを発見した。
したがって、第1の側面において、本発明は、カザクスタニア(Kazachstania)および/またはラチャンセア(Lachancea)属の1つ以上の株、特に、カザクスタニア(Kazachstania)属の1つ以上の株を含む、組成物を提供する。
より特に、本発明による組成物は、穀物加水分解物を含み、前記組成物は、カザクスタニア(Kazachstania)および/またはラチャンセア(Lachancea)属の1つ以上の株で発酵させる。
ある種の態様において、ここで教示する組成物は、カザクスタニア(Kazachstania)属の少なくとも1つの株、例えば、カザクスタニア(Kazachstania)属の少なくとも2つの株、少なくとも3つの株、少なくとも4つの株、少なくとも5つの株、少なくとも6つの株、少なくとも7つの株、少なくとも8つの株、または少なくとも9つの株で発酵させてもよい。
ある種の態様において、ここで教示する組成物は、ラチャンセア(Lachancea)属の少なくとも1つの株、例えば、ラチャンセア(Lachancea)属の少なくとも2つの株、少なくとも3つの株、少なくとも4つの株、少なくとも5つの株、少なくとも6つの株、少なくとも7つの株、少なくとも8つの株、または少なくとも9つの株で発酵させてもよい。
ある種の態様において、ここで教示する方法は、カザクスタニア(Kazachstania)属の少なくとも1つの株、例えば、カザクスタニア(Kazachstania)属の少なくとも2つの株、少なくとも3つの株、少なくとも4つの株、少なくとも5つの株、少なくとも6つの株、少なくとも7つの株、少なくとも8つの株、または少なくとも9つの株による発酵を提供できる。
ある種の態様において、ここで教示する方法は、ラチャンセア(Lachancea)属の少なくとも1つの株、例えば、ラチャンセア(Lachancea)属の少なくとも2つの株、少なくとも3つの株、少なくとも4つの株、少なくとも5つの株、少なくとも6つの株、少なくとも7つの株、少なくとも8つの株、または少なくとも9つの株による発酵を提供できる。
ここで教示する組成物、方法、使用またはベークド製品のある種の態様において、カザクスタニア(Kazachstania)属の前記少なくとも1つの株は、カザクスタニアエアロビア(Kazachstania aerobia)、カザクスタニアアフリカーナ(Kazachstania africana)、カザクスタニアアクアティカ(Kazachstania aquatica)、カザクスタニアバルネッチ(Kazachstania barnettii)、カザクスタニアボビナ(Kazachstania bovina)、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)、カザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)、カザクスタニアガモスポラ(Kazachstania gamospora)、カザクスタニアヘレニカ(Kazachstania hellenica)、カザクスタニアヘテロジェニカ(Kazachstania heterogenica)、カザクスタニアヒューマティカ(Kazachstania humatica)、カザクスタニアジアイニカ(Kazachstania jiainica)、カザクスタニアクナシレンシス(Kazachstania kunashirensis)、カザクスタニアロッデラエ(Kazachstania lodderae)、カザクスタニアマルチニアエ(Kazachstania martiniae)、カザクスタニアナガニシ(Kazachstania naganishi)、カザクスタニアピセアエ(Kazachstania piceae)、カザクスタニアピントロペシイ(Kazachstania pintolopesii)、カザクスタニアロシニイ(Kazachstania rosinii)、カザクスタニアセルバッジ(Kazachstania servazzii)、カザクスタニアシアメンシス(Kazachstania siamensis)、カザクスタニアシネンシス(Kazachstania sinensis)、カザクスタニアスルーフィアエ(Kazachstania slooffiae)、カザクスタニアソリコラ(Kazachstania solicola)、カザクスタニアスペンセロルム(Kazachstania spencerorum)、カザクスタニアテルリス(Kazachstania telluris)、カザクスタニアトランスバアレンシス(Kazachstania transvaalensis)、カザクスタニアツリセンシス(Kazachstania turicensis)、カザクスタニアユニスポラ(Kazachstania unispora)、カザクスタニアビチコラ(Kazachstania viticola)、カザクスタニアウホンゲンシス(Kazachstania wufongensis)、カザクスタニアヤクシマエンシス(Kazachstania yakushimaensis)および/またはカザクスタニアゾナタ(Kazachstania zonata)からなる群から選択されてもよい。
ここで教示する組成物、方法、使用またはベークド製品のある種の態様において、ラチャンセア(Lachancea)属の前記少なくとも1つの株は、ラチャンセアシドリ(Lachancea cidri)、ラチャンセアダシエンシス(Lachancea dasiensis)、ラチャンセアファーメンタティ(Lachancea fermentati)、ラチャンセアクルイベリ(Lachancea kluyveri)、ラチャンセアランサロテンシス(Lachancea lanzarotensis)、ラチャンセアメエルシイ(Lachancea meyersii)、ラチャンセアノトファギ(Lachancea nothofagi)、ラチャンセア(Lachancea)種CFL−2008、ラチャンセア(Lachancea)種ES12S06、ラチャンセア(Lachancea)種FDE82、ラチャンセア(Lachancea)種GJ3L14、ラチャンセア(Lachancea)種MC−SPC2(7)、ラチャンセア(Lachancea)種PJ−2012a、ラチャンセア(Lachancea)種PJ−2012b、ラチャンセア(Lachancea)種SC5L02、ラチャンセア(Lachancea)種SC6L01、ラチャンセア(Lachancea)種SW109、ラチャンセア(Lachancea)種UCLM24A、ラチャンセア(Lachancea)種UCLM88.3C、ラチャンセア(Lachancea)種UWOPS79−139、ラチャンセア(Lachancea)種UWOPS99−807.3、ラチャンセア(Lachancea)種Y309、ラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)および/またはラチャンセアワルティイ(Lachancea waltii)からなる群から選択されてもよい。
より特に、ここで記載する組成物、方法、使用またはベークド製品は、カザクスタニア(Kazachstania)属の前記株の少なくとも1つが、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)もしくはカザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)株であるか、および/またはラチャンセア(Lachancea)属の前記株の少なくとも1つが、ラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)株である組成物、方法、使用またはベークド製品を提供する。特に、カザクスタニア(Kazachstania)属の前記株は、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)株である。特に、カザクスタニア(Kazachstania)属の前記株は、カザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)株である。
より特に、ここで記載する組成物、方法、使用またはベークド製品は、カザクスタニア(Kazachstania)属の前記株の少なくとも1つが、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)MUCL54530もしくはカザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)ATCC22034であるか、および/またはラチャンセア(Lachancea)属の前記株の少なくとも1つが、ラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)MUCL55817である組成物、方法、使用またはベークド製品を提供する。特に、カザクスタニア(Kazachstania)属の前記株は、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)MUCL54530である。特に、カザクスタニア(Kazachstania)属の前記株は、カザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)ATCC22034である。
カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)MUCL54530は、BCCM/MUCLに2013年1月8日に受託番号MUCL54530の下に寄託されたカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)株を指す(表A1参照)。
カザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)ATCC22034は、カタログ番号ATCC22034の下にAmerican Type Culture Collectionで入手可能なカザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)株を指す。
ラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)MUCL55817は、BCCM/MUCLに2015年8月18日に受託番号MUCL55817の下に寄託されたラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)株を指す(表A2参照)。
ここで使用する記述「で発酵させる(で発酵させた)」は、開示された株の存在下での発酵を指す。例えば、「で発酵させる(で発酵させた)」は、開示された株の存在下での少なくとも24時間、少なくとも48時間、少なくとも72時間、少なくとも96時間、少なくとも120時間、少なくとも144時間または少なくとも192時間の発酵を含んでいてもよい。
特定の態様において、ここで記載する組成物は、膨張剤、特に液体膨張剤である。
本発明の文脈で使用する用語「膨張剤」は、焼成前の発酵工程中にドウを良好に膨らませるのに必要とされるCO2の少なくとも一部、好ましくは本質的に全CO2を発生させることができる組成物を指す。膨張剤はまた、前発酵種(preferment)、中種(sponge)(酵母中種)、スターター(starter)(酵母ベースのスターター)、ビガ(biga)などと称されてもよい。
本発明に記載の組成物、好ましくは膨張剤は、穀物加水分解物の発酵により得られる。本発明の文脈で使用する用語「穀物加水分解物」は、穀物または穀物画分の水分散液の酵素加水分解から得られる生成物を指す。加水分解酵素としては、一般にアミラーゼ、β−アミラーゼ、β−グルカナーゼおよび/またはペントサナーゼ、ならびに任意にプロテアーゼがある。穀物加水分解物は、液体または粉末(乾燥)形態であってもよい。
本発明の文脈において、用語「穀物」は、イネ科(Poaceae)の植物群の植物の可食成分を指し、それだけに限らないが、種、例えば、小麦、デュラム小麦、大麦、エンバク、スペルト、ライ麦、モロコシ、トウモロコシ、トリチカレ(triticale)、キビ、テフおよび/またはコメが挙げられる。好ましくは、穀物は、コムギ、デュラム小麦またはライ麦からなる群から選択される。より好ましい穀物は、ライ麦またはデュラム小麦である。用語「穀物」は、麦芽入り穀物(malted cereal)も含む。
特定の態様において、ここで記載する組成物、方法、使用またはベークド製品は、前記穀物加水分解物が、デュラム小麦粉もしくはデュラム小麦麦芽、小麦粉もしくは小麦麦芽、ライ麦粉もしくはライ麦麦芽、またはこれらの組合せに基づく組成物、方法、使用またはベークド製品を提供する。
本発明の文脈において、用語「穀物画分」は、例えばそれだけに限らないが、篩分け、スクリーニング、篩過(sifting)、吹込み、吸引、遠心篩過、風力篩過、静電選別または電解選別による、分別ありまたはなしでの、例えば、それだけに限らないが、切断、圧延、粉砕、破砕または製粉による粒径の機械的縮小により得られる画分の全部または一部を指す。好ましい穀物画分としては、粉、全粒粉、ふすまおよび/またはこれらの任意の組合せがある。
好ましくは、本発明で使用する穀物加水分解物は、デュラム小麦粉もしくはデュラム小麦麦芽、小麦粉もしくは小麦麦芽、ライ麦粉もしくはライ麦麦芽、またはこれらの組合せに基づくものである。
特定の態様において、ここで記載する組成物、方法、使用またはベークド製品は、前記組成物が
(a)約108〜1010cfu/mlの範囲の量のカザクスタニア(Kazachstania)および/またはラチャンセア(Lachancea)属の1つ以上の株、好ましくは、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)、カザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)および/またはラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)、より好ましくはカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)MUCL54530、カザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)ATCC22034および/またはラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)MUCL55817を含み、
(b)前記組成物のpHが、約3.8〜約6の範囲であり、ならびに/または
(c)前記組成物の膨張力が、SJA分析で測定したとき、2時間で発生したCO2約300ml〜約1500ml、好ましくは約600ml〜約1300mlの範囲である
組成物、方法、使用またはベークド製品を提供する。
特定の態様において、ここで記載する組成物、方法、使用またはベークド製品は、前記組成物が
(a)約108〜1010cfu/mlの範囲の量のカザクスタニア(Kazachstania)属の1つ以上の株、好ましくは、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)および/またはカザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)、より好ましくはカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)MUCL54530および/またはカザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)ATCC22034を含み、
(b)前記組成物のpHが、約3.8〜約6の範囲であり、ならびに/または
(c)前記組成物の膨張力が、SJA分析で測定したとき、2時間で発生したCO2約300ml〜約1500ml、好ましくは約600ml〜約1300mlの範囲である
組成物、方法、使用またはベークド製品を提供する。
特に、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)の量は、本発明による組成物中で約108〜1010cfu/mlの範囲である。特に、カザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)の量は、本発明による組成物中で約108〜1010cfu/mlの範囲である。特に、ラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)の量は、本発明による組成物中で約108〜1010cfu/mlの範囲である。
本発明による組成物の膨張力は、SJA分析で有利に測定できる。この方法において、ドウは、小麦粉280g、酵母乾物1.37gに相当する量の膨張剤または酵母、NaCl5.04g、アミログルコシダーゼ0.75AGU/g粉および総ドウ水和レベル(total dough hydration level)最大35%の水で作られている。ドウを、ファリノグラフ(SCHMERSAL)で30℃にて6分間混合する。次いで、ドウ300gを、37℃でSJAファーメントグラフ(Mekab機、Mekab i Nassjo AB)チャンバー(fermentograph chamber)に入れる。分析を2時間続ける。分析結果は、最初の1時間で発生したCO2の体積と次の1時間で発生したCO2の体積とを足すことにより示される。
特定の態様において、ここで記載する組成物、方法、使用またはベークド製品は、カザクスタニア(Kazachstania)および/またはラチャンセア(Lachancea)属の前記1つ以上の株、好ましくは、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)、カザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)および/またはラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)、より好ましくはカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)MUCL54530、カザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)ATCC22034および/またはラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)MUCL55817と、1つ以上の他の微生物株、好ましくは他の酵母株および/または乳酸菌株とを組み合わせた組成物、方法、使用またはベークド製品を提供する。
特定の態様において、ここで記載する組成物、方法、使用またはベークド製品は、カザクスタニア(Kazachstania)属の前記1つ以上の株、好ましくは、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)および/またはカザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)、より好ましくはカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)MUCL54530および/またはカザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)ATCC22034と、1つ以上の他の微生物株、好ましくは他の酵母株および/または乳酸菌株とを組み合わせた組成物、方法、使用またはベークド製品を提供する。
特定の態様において、ここで記載する組成物、方法、使用またはベークド製品は、カザクスタニア(Kazachstania)および/またはラチャンセア(Lachancea)属の前記1つ以上の株、好ましくは、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)、カザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)および/またはラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)、より好ましくはカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)MUCL54530、カザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)ATCC22034および/またはラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)MUCL55817が、前記組成物中で本質的に唯一のCO2を発生させる微生物である組成物、方法、使用またはベークド製品を提供する。
特定の態様において、ここで記載する組成物、方法、使用またはベークド製品は、カザクスタニア(Kazachstania)属の前記1つ以上の株、好ましくは、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)および/またはカザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)、より好ましくはカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)MUCL54530および/またはカザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)ATCC22034が、前記組成物中で本質的に唯一のCO2を発生させる微生物である組成物、方法、使用またはベークド製品を提供する。
特定の態様において、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)、カザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)および/またはラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)株と、1つ以上の他の微生物株とを組み合わせてもよい。好ましくは、これらの他の微生物株は、他の酵母株または乳酸菌株から選択される。より好ましくは、これらの他の微生物株は、当技術分野で公知の株である。
特定の態様において、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)、カザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)および/またはラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)株は、本発明による組成物中で唯一の生存微生物または唯一のCO2を発生させる微生物である。
特定の態様において、本発明による組成物は、液体、圧縮したものまたは乾燥したものであってもよい。好ましくは、組成物は、液体組成物、好ましくは液体前発酵種または液体中種である。液体組成物の好ましい乾物は、6〜13.5重量%である。
特定の態様において、ここで記載する組成物、方法、使用またはベークド製品は、前記組成物が、アミラーゼ源を含むことを提供する。好ましくは、アミラーゼ源は、アミログルコシダーゼ、活性麦芽粉およびα−アミラーゼ、より好ましくは、アミログルコシダーゼまたは活性麦芽粉、さらにより好ましくはアミログルコシダーゼを含む群から選択される。
特定の態様において、アミラーゼ源は、前記組成物中で
− 1〜30AGU/g液体酵母のアミログルコシダーゼ、好ましくは3〜15AGU/g液体酵母のアミログルコシダーゼ、より好ましくは3〜7.5AGU/g液体酵母のアミログルコシダーゼ、
− 1〜16DU/g液体酵母の活性麦芽粉、好ましくは2〜8DU/g液体酵母の活性麦芽粉、または
− 10〜80SKB/g液体酵母のα−アミラーゼ、好ましくは20〜40SKB/g液体酵母のα−アミラーゼ
が得られる量で添加される。
当業者であれば、様々な種類の様々な酵素の組合せ、例えば、アミログルコシダーゼと活性麦芽粉、アミログルコシダーゼとα−アミラーゼ、活性麦芽粉とα−アミラーゼ、またはアミログルコシダーゼと活性麦芽粉とα−アミラーゼも、本発明の目的に特に適していることを理解するであろう。
第2の側面によれば、本発明は、穀物加水分解物、ならびにカザクスタニア(Kazachstania)および/またはラチャンセア(Lachancea)属の1つ以上の株、好ましくは、カザクスタニア(Kazachstania)属の1つ以上の株を含む液体を含む混合物を発酵させ、それにより組成物を得ること、ならびに前記組成物を任意に安定化させ、および/または梱包することを含む、組成物を製造する方法に関する。
特に、ここで記載するように組成物を、例えば、膨張剤として製造する方法は、以下の工程
(a)穀物加水分解物を含む発酵基質、好ましくは本質的に穀物加水分解物、水、ならびにカザクスタニア(Kazachstania)および/またはラチャンセア(Lachancea)属の1つ以上の株、好ましくは、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)、カザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)および/またはラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)、より好ましくはカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)MUCL54530、カザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)ATCC22034および/またはラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)MUCL55817を含む混合物を調製する工程、好ましくは、穀物加水分解物を含む発酵基質、好ましくは本質的に穀物加水分解物、水、ならびにカザクスタニア(Kazachstania)属の1つ以上の株、好ましくは、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)および/またはカザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)、より好ましくはカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)MUCL54530および/またはカザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)ATCC22034を含む混合物を調製する工程、
(b)前記混合物を発酵させる工程、
(c)前記発酵させた混合物を任意に安定化させる工程、
(d)前記発酵させた混合物を任意に乾燥する工程、ならびに
(e)前記発酵させた混合物を任意に梱包する工程
を典型的には含む。
発酵基質は、本質的に穀物加水分解物を含むかまたはこれからなる。好ましくは、穀物加水分解物を5〜10%(発酵終了時、発酵性糖(DP1およびDP2)の重量/混合物の重量で計算)の量で添加する。
ここで使用する用語「糖」は、重合度(DP)1または2の発酵性糖質、例えば、スクロース、グルコース、ならびにスクロースまたはグルコースを含有する化合物/生成物、例えば、糖蜜、テンサイ糖、甘蔗糖および加水分解デンプンを指すが、これらに限定されない。本発明において、糖の量は、当技術分野で公知の方法、例えば、HPLCで測定したときのDP1とDP2の合計を指す。
用語「発酵(fermentation)または(fermenting)」は、細菌(例えば、カザクスタニア(Kazachstania)および/またはラチャンセア(Lachancea)属の1つ以上の株、好ましくは、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)、カザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)および/またはラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)、より好ましくはカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)MUCL54530、カザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)ATCC22034および/またはラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)MUCL55817)により、糖質が二酸化炭素、有機酸および/またはアルコールに変換される、微生物作用を指す。ある種の態様において、発酵は、好気性発酵であってもよい。ここで使用する用語「好気性発酵」は、酸素の存在下での発酵を指す。ある種の態様において、酸素は、(液体)混合物を混合することにより、例えば、連続して混合することにより、もしくは間隔をおいて混合することにより、または空気もしくは酸素を(液体)混合物中でバブリングすることにより、例えば、空気もしくは酸素を(液体)混合物中で連続してバブリングすることにより、もしくは空気もしくは酸素を(液体)混合物中で間隔をおいてバブリングすることにより、(液体)混合物に添加されてもよい。
ある種の態様において、発酵またはインキュベーション中、(液体)混合物を、混合、例えば、連続してまたは様々な間隔をおいて混合してもよい。ある種の態様において、発酵またはインキュベーション中、空気または酸素を(液体)混合物中で、例えば、連続してまたは様々な間隔でバブリングしてもよい。
ある種の態様において、発酵は、15〜50℃、好ましくは25〜45℃、より好ましくは25〜35℃の温度で行われてもよい。これらの範囲は、25℃、28℃、30℃、32℃、35℃、40℃、45℃および50℃の温度を含む。
本発明の組成物を得るための発酵条件は、従来の発酵条件である。発酵は、少なくとも温度、pHおよびO2レベル制御を備えた発酵槽で好ましくは行われる。pHは3.9〜6、好ましくは約4.8で保持され、発酵終了時は約3.9に設定される。温度は約30℃で保持される。発酵は、バッチ、供給バッチまたは連続モードで、好ましくは約15時間の穀物加水分解物の段階的添加を含む供給バッチモードで行われてもよい。方法の終了時に所望のバイオマスが得られるように発酵培地および発酵条件を適合させる方法は、当業者に知られている。これは、所望のバイオマスを得るために、ビタミン、ミネラルまたは他の添加物を添加することを含んでいてもよい。発酵終了時、組成物は、好ましくは0℃〜7℃、より好ましくは4℃に冷却される。
組成物のデカンテーションは、組成物を定期的にまたは連続して混合することにより、回避できることに注意されるべきである。
ここで記載する方法による特定の工程において、発酵後、組成物をアミラーゼ源の添加により安定化させてもよい。
ここで記載する方法による特定の工程において、発酵後、組成物をガムおよび/または親水コロイドの添加によりさらに安定化させてもよい。好ましい態様において、前記ガムは、好ましくは0.1〜0.4%、より好ましくは約0.2%の量のキサンタンガムである。
ここで記載する方法による特定の工程において、発酵後、組成物を、当技術分野の従来の方法、例えば、流動層乾燥(加圧濾過、ドラム濾過および/または押出などの液体除去の工程が最終的には先行する)、凍結乾燥により乾燥してもよい。
固体または粉末組成物の好ましい乾物は、85%(w/w)超、好ましくは90%超、より好ましくは92%超である。
ここで記載する方法による特定の工程において、発酵後、組成物は、製品の保護および安定を確保する任意の包装材料で液体形態または乾燥形態で梱包されてもよい。乾燥形態について、真空または改善雰囲気(modified atmosphere)包装が、酸化を回避するために一般に用いられる。
ここで教示する組成物、方法、使用またはベークド製品のある種の態様において、組成物は液体組成物または乾燥組成物であってよい。
ここで教示する組成物、方法、使用またはベークド製品のある種の態様において、前記組成物は膨張剤、好ましくは液体膨張剤である。
ここで教示する組成物、方法、使用またはベークド製品のある種の態様において、本発明は、ここで教示する液体組成物を乾燥することにより得られる乾燥組成物に関する。液体組成物の乾燥は、当業者が利用できる典型的な乾燥技法を用いて行われてもよい。好ましくは、乾燥組成物は、液体組成物の流動化噴霧乾燥(fluidization, spray-drying)によりまたはドラム乾燥により得られる。
更なる側面によれば、本発明は、ここで記載する組成物の膨張剤、好ましくは液体膨張剤としての使用に関する。
更なる側面によれば、本発明は、ここで記載する組成物の、食品、好ましくはベークド製品、より好ましくはベーカリーまたはパティスリー製品の調製のための材料としての使用に関する。組成物の本発明の使用により、ベークド製品の味が改善されると同時に、十分な物理的性質、例えば、十分な体積を有するベークド製品が得られる。
ある種の態様において、ここで教示する組成物は、ベークド製品、好ましくはベーカリーまたはパティスリー製品の調製のための改良剤(improver)、プレミックスまたは完全ミックス(complete mix)の一部として使用されてもよい。
より特に、ある種の態様において、本発明は、ベークド製品の調製のための改良剤、プレミックスまたは完全ミックスの一部としての、ここで定義する組成物の使用を提供する。
ここで使用する「改良剤」は、ベークド製品の調製中および/または焼成後の有益な特性のために使用される材料および/または技術的助剤を含む、組成物を指す。これらの特性は、それだけに限らないが、ベークド製品の外観、体積、鮮度、日持ち(conservation)、色、構造またはサクサクした噛み応え(short bite)を含む。
ここで使用する用語「プレミックス」は、「活性」成分の濃度が、ベーカリー改良剤よりも低い、改良剤組成物を典型的には指す。典型的には、プレミックスは、改良剤よりも多い用量(重量/粉の重量)で用いられる。
ここで使用する用語「完全ミックス」は、ベークド製品を得るために焼成され得るドウを調製するのに必要とされる、一般に液体、例えば、水を除くすべての材料を含む組成物を典型的には指す。
更なる側面によれば、本発明は、以下の工程、
− 本発明による組成物を提供する工程、
− 該組成物をドウまたはバッターに添加する工程、ならびに
− ドウまたはバッターを焼成し、それによりベークド製品、例えば、ベーカリーまたはパティスリー製品を得る工程
を含む、ベークド製品、例えば、ベーカリーまたはパティスリー製品を得る方法に関する。
したがって、更なる側面は、カザクスタニア(Kazachstania)および/またはラチャンセア(Lachancea)属の少なくとも1つ以上の株、好ましくは、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)、カザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)および/またはラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)、より好ましくはカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)MUCL54530、カザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)ATCC22034および/またはラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)MUCL55817、特に、カザクスタニア(Kazachstania)属の1つ以上の株、好ましくは、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)および/またはカザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)、より好ましくはカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)MUCL54530および/またはカザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)ATCC22034で発酵させた、穀物加水分解物を含む発酵基質を含む組成物を提供する工程、該組成物をドウまたはバッターに添加する工程、ならびにドウまたはバッターを焼成し、それによりベークド製品、例えば、ベーカリーまたはパティスリー製品を得る工程を含む、ベークド製品、例えば、ベーカリーまたはパティスリー製品を得る方法を提供する。ドウの組成は当技術分野で公知の通りであってもよい。バッターの組成は当技術分野で公知の通りであってもよい。ドウまたはバッターは、穀物粒、水、脂肪もしくは脂肪代替物、糖、卵、グルテン、デンプン、親水コロイド、酵素、乳化剤、酸化もしくは還元化合物、プレバイオティクス化合物および/または改良剤を含んでいてもよい。
ドウまたはバッターを焼成する工程は、当技術分野で公知のように行われてもよい。例えば、ドウまたはバッターの焼成は、ドウまたはバッターを加熱オーブンに用途の種類に応じて、例えば、160℃〜400℃で10分間〜4時間入れることにより行われてもよいが、これに限定されない。
別の態様において、以下の工程
− 以下を含む、ドウを調製する工程、
○ 穀物および/または穀物画分
○ 水、ならびに
○ 穀物加水分解物を含む膨張剤であって、前記穀物加水分解物を、カザクスタニア(Kazachstania)および/またはラチャンセア(Lachancea)属の少なくとも1つ以上の株、好ましくは、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)、カザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)および/またはラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)、より好ましくはカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)MUCL54530、カザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)ATCC22034および/またはラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)MUCL55817、特に、カザクスタニア(Kazachstania)属の1つ以上の株、好ましくは、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)および/またはカザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)、より好ましくはカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)MUCL54530および/またはカザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)ATCC22034で発酵させ、好ましくは前記膨張剤が、アミログルコシダーゼを1〜30AGU/g、好ましくは3〜15AGU/g、より好ましくは3〜7.5AGU/gの活性が得られる量で含有する、膨張剤、または
・ 穀物加水分解物を含む膨張剤であって、前記穀物加水分解物を、カザクスタニア(Kazachstania)および/またはラチャンセア(Lachancea)属の少なくとも1つ以上の株、好ましくは、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)、カザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)および/またはラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)、より好ましくはカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)MUCL54530、カザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)ATCC22034および/またはラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)MUCL55817、特に、カザクスタニア(Kazachstania)属の1つ以上の株、好ましくは、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)および/またはカザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)、より好ましくはカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)MUCL54530および/またはカザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)ATCC22034で発酵させる、膨張剤と
・ 1〜3%(w/w粉)、より好ましくは約2%(w/w粉)の量の糖、および/または0.1〜3AGU/g粉、より好ましくは0.30〜1.5AGU/g粉、さらにより好ましくは0.3〜0.75AGU/g粉の量のアミログルコシダーゼ
との組合せ

− ドウを膨張させる工程、ならびに
− ドウを焼成する工程
を含む、新種のパンを得る方法が提供される。
好ましくは、ドウは、粉の重量に対して107〜109cfu/g、より好ましくは108〜109cfu/gのカザクスタニア(Kazachstania)および/またはラチャンセア(Lachancea)属の前記株、特にカザクスタニア(Kazachstania)属株を含有する。
糖は、膨張剤に存在する酵母株で発酵可能な任意の糖である。好ましくは、糖はスクロースまたはグルコース、より好ましくはスクロースである。
特定の態様において、カザクスタニア(Kazachstania)および/またはラチャンセア(Lachancea)属株を、液体膨張剤または乾燥膨張剤の形態でドウに添加する。
好ましくは、ドウは、
− 約108〜1010cfu/mlの量のカザクスタニア(Kazachstania)および/またはラチャンセア(Lachancea)細胞、
− 約3.9〜約4.8のpH
− SJA分析で測定したとき、2時間で発生したCO2約300ml〜約1500ml、好ましくは約600ml〜約1300mlの膨張力
を有することを特徴とする、液体膨張剤を0.3〜2%(液体膨張剤の乾燥重量/粉の重量で計算)含有する。
好ましくは、膨張剤は、アミログルコシダーゼを1〜30AGU/g、好ましくは3〜15AGU/g、より好ましくは3〜7.5AGU/gの活性が得られる量で含有する。
更なる側面によれば、本発明は、ここで記載する組成物を含む、ベークド製品に関する。好ましくは、前記ベークド製品は、本発明による組成物を含むベーカリーまたはパティスリー製品である。
本発明の方法により、新しい好ましい香りおよび味を有するパンを得ることができる。したがって、本発明の別の態様は、本発明の方法により得られるベークド製品を提供するものである。ベークド製品は膨張ベークド製品(leavened baked product)であり、その主な材料は、穀物粒由来の粉である。ベークド製品は、脂肪または脂肪代替物、糖、卵、グルテン、デンプン、親水コロイド、酵素、乳化剤、酸化または還元化合物、プレバイオティクス化合物および/または改良剤を含有していてもよい。ベークド製品の非限定的な例としては、パン、バケット、ロール、ソフトロール、ドーナツ、バンズ、電子レンジ加熱可能なバンズ(microwavable buns)、デニッシュペストリー、ハンバーガーロール、ピザおよびピタパンがある。
パンの香りおよび味は、幾つかの技法により評価できる。
パンの香りを評価する方法では、SPME−GC/MS(ガスクロマトグラフィーと質量分析とを組み合わせた固相マイクロ抽出)を行うことにより、揮発性化合物のその含有量を分析する。典型的には、本発明によるまたは本発明の方法により得られるパンは、スイート、フルーティ、フローラル、ナッティ(nutty)および/または酸性の香りに関与する分子の含有量が多い。このような分子の例としては、酢酸エチル;エタノール;イソ酪酸エチル;ブタン酸エチル;酢酸イソアミル;ペンタン酸、エチルエステル;ペンタン酸、4−メチル−、エチルエステル;イソアミルアルコール;ヘキサン酸、エチルエステル;3−ブテン−1−オール、3−メチル;ブタン酸、ペンチルエステル;ブタン酸、4−ペンテニルエステル;メチルピラジン;ヘキサ−4−エノン酸エチルエステル;2−ブテン−1−オール、3−メチル;ピラジン、2−エチル−6−メチル;ピラジン、2−エチル−5−メチル;ピラジン、2−エチル−3−メチル;オクタン酸、エチルエステル;酢酸;アセチルフラン;2−メチルプロピオン酸;ソルビン酸;ブタン酸;2−フランメタノール;3−メチルブタン酸;ペンタン酸;4−メチルペンタン酸;酢酸、2−フェニルエチルエステル;ヘキサン酸;フェニルエチルアルコール;マルトールがある。
ベークド製品の香り、風味および/または味を評価する別の方法としては、味覚パネル(taste panel)にこれらを評価させる方法がある。この方法は、ベークド製品の香り、風味および味を表現および識別する訓練を受けた専門家の集団を使用する。特に、専門家の集団には、不快な臭いを感知および表現することが求められる。
さらに更なる側面において、本発明は、BCCM/MUCL(Agro)industrial Fungi&Yeasts Collectionに受託番号MUCL54530の下に寄託されたカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)株、またはBCCM/MUCL(Agro)industrial Fungi&Yeasts Collectionに受託番号MUCL55817の下に寄託されたラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)株を提供する。
表A1:寄託された微生物カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)MUCL54530に関する表示
Figure 0006961580
表A2:寄託された微生物ラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)MUCL55817に関する表示
Figure 0006961580
さらに更なる側面において、本発明は、食品、好ましくはベークド製品、より好ましくはベーカリーまたはパティスリー製品の調製のための、ここで記載する株のいずれか1つの使用を提供する。
本発明を以下の非限定的実施例で説明する。
[実施例]
例1
膨張剤
株:カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)(MUCL54530)、カザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)(ATCC22034)、ラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)(MUCL55817)およびサッカロミセスセレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)の2つの株(通常のパン酵母および通常の有機パン酵母)
接種材料:酵母株を−70℃で保存し、固体YPD培地(ペプトン20g/l、酵母抽出物10g/l、寒天20g/l)上で保持する。各株の単離コロニーを、液体YPD培地(ペプトン20g/l、酵母抽出物10g/l)25mLを含有する第1のフラスコに接種し、100rpmおよび30℃で24時間保持する。この培養物5mlを、液体培地200mL(細菌学的ペプトン(bacteriological peptone)3.5g/l、酵母抽出物3g/l、KH2PO42g/l、MgSO47H2O1.83g/l、(NH42SO41g/l、D−グルコース20g/l、スクロース55g/l、ペニシリン0.0004g/l、pH=4.8)を含有する2つのフラスコに接種し、撹拌しながら室温で48時間保持する。
15lの発酵槽(C10−3K Biostat C−DCU(Sartorius))で行われる3つの連続発酵工程後、液体膨張剤を得る。
1. 第1の工程:G3滅菌培地10l(麦芽抽出物50g/l、テンサイ糖蜜(sugar beet molasse)60g/l、MgSO47H2O0.0915g/l、(NH42SO40.5g/l、pH=4.7)に、107細胞/ml発酵培地で前記フラスコの酵母を接種した。発酵は、気流17l/分、pH4.7および30℃のバッチ培養モードで約15〜20時間経過させる。バイオマスの量は、酵母株およびその増殖能力に依存する。カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)バイオマスの典型的な量は、4〜10g乾物/lである。
発酵後、発酵ブロスをAvantiTM J−20遠心分離機(Beckman Coulter)で5000rpmにて5分間遠心分離し、冷水で2回洗浄する。ペレット(新鮮な酵母乾物約30%)を多量の水に再懸濁し、乾物約20%のクリーム酵母を得る。
2. 第2の工程:第1の発酵工程のクリーム酵母(約3.7〜4.6g酵母乾物/lに相当する量)を、次の発酵の接種に使用する。第2の発酵は、酵母株の特性に従って選択された気流7.5l/分、30℃およびpH3.9〜6の供給バッチ培養モードで約15時間経過させる。発酵中、糖源(穀物加水分解物)、窒素源NH4(OH)(6.25%溶液)およびリン源H3PO4(17.8%溶液)をバイオリアクターに徐々に供給する。ビタミンおよびミネラルの量を、酵母株の要件に従って調整する。H2SO4(5%)、NaOH(29%)および消泡剤の溶液は各々pHの調整および発泡の防止を可能にする。発酵の終了時のバイオマスの量は、株の種類およびその増殖能力に依存する。第2の工程終了時のカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)バイオマスの典型的な量は、25〜35g酵母乾物/lである。発酵終了時、細胞を上記のように回収および洗浄する。
3. 第3の工程:第2の発酵工程のクリーム酵母(約8.3g酵母乾物/lに相当する量)を、最終発酵の接種に使用する。発酵は、酵母株の特性に従って選択された気流7.5l/分、30℃およびpH3.9〜6の供給バッチ培養モードで約15時間経過させる。発酵中、糖源(穀物加水分解物)、窒素源NH4(OH)およびリン源H3PO4をバイオリアクターに徐々に供給する。ビタミンおよびミネラルの量を、酵母株の要件に従って調整する。H2SO4(5%)、NaOH(29%)および消泡剤の溶液は各々pHの調整および発泡の防止を可能にする。発酵の終了時のバイオマスの量は、株の種類およびその増殖能力に依存する。カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)バイオマスの典型的な量は、40〜75g酵母乾物/lである。
液体膨張剤の酵母バイオマスを、次の通り測定する。公知の質量または体積の液体酵母を7000rpmおよび4℃にて15分間遠心分離する(Avanti(商標)J−20、BECKMAN COULTER)。上清を廃棄する。ペレットの表面の酵母層を、スクラッピングにより回収し、秤量して、湿潤バイオマスを測定する。回収した酵母をオーブンで150℃にて24時間乾燥した後、乾物を測定する。
膨張力
試料の膨張力を、SJA方法により測定する。ドウは小麦粉(DUO、Ceres、Belugium)280g、酵母乾物1.37gに相当する量の膨張剤または酵母、NaCl5.04gおよび総ドウ水和レベル最大35%の水で作られている。カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)を用いる膨張剤について、0.75AGU/g粉のアミログルコシダーゼをドウに添加する。ドウを30℃にてファリノグラフ(SCHMERSAL)で6分間混合する。ドウ300gを、37℃でSJAファーメントグラフ(Mekab機、Mekab i Nassjo AB)チャンバーに入れる。1時間後の中間混合工程を含む2時間でのCO2発生量を測定する。
SJA(ml CO2で示す)を以下の式
Figure 0006961580
(式中、V1は、1時間後に発生したCO2の体積であり、V2は、2時間で発生したCO2の体積であり、Prは、実際の気圧(mb/hPa)である)
に従って計算する。
表1:SJA結果
Figure 0006961580
カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)株による穀物加水分解物の発酵により得られる膨張剤は、サッカロミセスセレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)株による穀物加水分解物の発酵により得られる膨張剤と同等の発酵力を有する。
例2
焼成試験
田舎パン(country bread)を、例1の方法で得られる様々な液体膨張剤を使用して製造した。膨張剤の特性を表2に示し、パンドウの組成を表3に示す。
表2:液体膨張剤の組成
Figure 0006961580
表3:ドウの組成
Figure 0006961580
材料を、ドウミキサー(dough mixer)(Diosna SP24)で低速にて5分間および高速にて6分間混合した。製パン機(bakery)の温度は約25℃および湿度は約55%であった。水温は約12℃であり、ドウの温度は約27℃であった。室温で20分間のバルク発酵後、ドウを800gずつに分け、円形に形成し、Koma発酵室(fermentation room)で最後のプルーフィング工程(proofing step)(70分、30℃、相対湿度90%)を行った後、Miwe Condoオーブンで230℃にて35分間蒸気焼成した。
パンの体積
焼成後、パンの体積を、菜種置換法で測定する。得られた値は、4つの測定値の平均値である。
表3:
Figure 0006961580
サッカロミセスセレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)の代わりにカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)をベースとした液体膨張剤の使用は、パンの体積に影響を与えない。
パンの風味
ベークド製品の味および風味を評価する訓練を受けた5人の専門評価者(expert judge)の集団に、パン1〜4を与えた。評価者は、パンの風味を表現することが求められた。
評価者全員が、パン3および4と比較してパン1と2の風味の違いを知覚した。
さらに、評価者全員が、サッカロミセスセレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)による穀物加水分解物の発酵に基づく液体膨張剤で調製および焼成したパン(ライ麦麦芽粉または小麦粉加水分解物−パン3および4)の不快な臭いを感知した。この不快な臭いは、ビター(bitter)および湿ったワラ(wet straw)の風味を有すると表現された。
カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)による穀物加水分解物の発酵に基づく液体膨張剤では、不快な臭いは認められない。
例3
香りの特性
一連の液体膨張剤を、様々な酵母株および様々な炭素源を使用する例1の方法に従って調製した。表4には、その組成および特性が要約されている。
表4:液体膨張剤の組成
Figure 0006961580
例2のこれらの膨張剤を使用してパンを調製した。
MS嗅覚検査(MS-nose)法による風味の比較
液体膨張剤およびパンの香りをMS嗅覚検査法により分析した。MS嗅覚検査構成は、MPS−2Wオートサンプラー(Gerstel(登録商標))を備えたガスクロマトグラフ質量分析計HP7890A/5975C(Agilent Technologies(登録商標))からなった。ChemSensor(登録商標)ソフトウェア(G1701BA、バージョンB.01.00、Agilent Technologies(登録商標))およびThe Unscrambler(登録商標)多変量解析ソフトウェア(9.8、Camo(登録商標)、Oslo、Norway)をGC−MSシステムに搭載した。
各膨張剤および各パン1gの試料重量を20mlのガラスバイアルに秤量し、それをシリコン/PTFEセプタム付き磁気キャップで密閉した。試料を40℃で10分間予熱し、揮発性分子をSPME(繊維DVB/CAR/PDMS Supelco Gray(登録商標)57329−U)により同等の温度で30分間抽出した。HP−SPME分離後、繊維からの膨張剤およびパンの揮発性物質のスプリットレス熱脱離(splitless thermal desorption)を、GC注入器で250℃にて5分間行った。GCカラム(RESTEK Stabilwaxカラム(溶融シリカ))を250℃で保持し(揮発性物質の分離なし)、ヘリウムを搬送ガス(1ml/分)として使用した。分析は1試料当たり2回行われる。各試料のTIC(全イオン電流)からは、ChemSensor(登録商標)ソフトウェアによりマスフィンガープリントに変換される全質量スペクトルが得られ、これはThe Unscrambler9.8(Camo(登録商標)Oslo、Norway)に簡単にインポートできた。
PCA(主成分分析)をMS嗅覚検査結果に基づき行い、その全データを100に正規化した。
液体膨張剤とパンの両方を個別に分析した。さらに、試料を、香りに対する株の作用を得るために使用した炭素源に基づき比較した。
各種の試料に対して、3群の株を同定した。表5(液体膨張剤)および表6(パン)各々には、結果が要約されている。
表5:液体膨張剤で得られるMS嗅覚検査プロファイルのPCA分析により得られる群
Figure 0006961580
表6:パンで得られるMS嗅覚検査プロファイルのPCA分析により得られる群
Figure 0006961580
本発明による膨張剤でのカザクスタニア(Kazachstania)株、特にカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)株の使用により、新しい特定の香りを得ることができる。
SPME−GC−MSによる香りの比較
液体膨張剤の2つの試料の揮発性分子の含有量を、SPME−GC−MS(固相マイクロ抽出(SPME)およびガスクロマトグラフィー質量分析(GS−MS))で比較した。2つの試料はKb2(カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)MUCL54530で発酵させたライ麦麦芽粉加水分解物)およびSc2(サッカロミセスセレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)で発酵させたライ麦麦芽粉加水分解物)であった。
HS−SPME−GC−MS構成は、MPS−2Wオートサンプラー(Gerstel(登録商標))を備えたガスクロマトグラフ質量分析計HP7890A/5975C(Agilent Technologies(登録商標))からなった。ChemSensor(登録商標)ソフトウェア(G1701BA、バージョンB.01.00、Agilent Technologies(登録商標))およびThe Unscrambler(登録商標)多変量解析ソフトウェア(9.8、Camo(登録商標)、Oslo、Norway)をGC−MSシステムに搭載した。
各膨張剤1gの試料重量を20mlのガラスバイアルに秤量し、それをシリコン/PTFEセプタム付き磁気キャップで密閉した。試料を40℃で10分間予熱し、揮発性分子をSPME(繊維DVB/CAR/PDMS Supelco Gray(登録商標)57329−U)により同等の温度で30分間抽出した。HP−SPME分離後、繊維からの膨張剤のスプリットレス熱脱離を、GC注入器(SPMEライナー0.75mm i.d.)で250℃にて5分間行った。GCカラム(RESTEK Stabilwaxカラム(溶融シリカ))を40℃で7分間保持し、次いで230℃の温度に16℃/分の速度でセットし、これを8分間保持した。ヘリウムを搬送ガス(1ml/分)として使用した。注入器および検出器(MS源)を240℃および230℃で各々保持した。質量スペクトルを、70eVの電子衝撃で測定した。TIC(全イオン電流)を、40〜180amuの質量対電荷比(m/z)範囲でモニターして記録した。様々な成分の質量スペクトルと、Mass Spectral Library Wiley275(登録商標)(J.Wiley&Sons LTD(登録商標))の質量スペクトルとを比較することにより、揮発性物質を同定した。
分析結果を図1に示す。これは、2つの液体膨張剤の香りのプロファイルが非常に異なることを示している。表7は、Kb2に存在し、Sc2には存在しないかまたはごく少量存在するいくつかの分子を示している。分子のこのカクテルは、フルーティな印象(note)を与える混合物に典型的である。
表7:
Figure 0006961580
本発明による液体膨張剤で得られるパンの香りのプロファイル
膨張剤としてKb2(カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)MUCL54530で発酵させたライ麦麦芽粉加水分解物)またはSc2(サッカロミセスセレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)で発酵させたライ麦麦芽粉加水分解物)で調製したパンの揮発性分子の含有量をSPME−GC−MSで測定した。
試料を調製し、液体膨張剤について分析した。
分析結果を図2に示す。Kb2で製造したパンの香りのプロファイルは、Sc2で製造したパンの香りのプロファイルよりリッチで複雑である。表8は、Kb2で製造したパンに存在し、Sc2で製造したパンには存在しないかまたはごく少量存在するいくつかの分子を示している。これらの分子は、スイート、フルーティ、フローラル、ナッティおよび/または酸性の香りに典型的に関与する。
表8:
Figure 0006961580
Figure 0006961580
Figure 0006961580
以下に、出願当初の請求項を実施の態様として付記する。
[1] カザクスタニア(Kazachstania)および/またはラチャンセア(Lachancea)属の1つ以上の株で発酵させた、穀物加水分解物を含む組成物。
[2] 穀物加水分解物、ならびにカザクスタニア(Kazachstania)および/またはラチャンセア(Lachancea)属の1つ以上の株を含む液体を含む混合物を発酵させ、それにより組成物を得ること、ならびに前記組成物を任意に安定化させ、および/または梱包することを含む、組成物を製造する方法。
[3] カザクスタニア(Kazachstania)属の前記株の少なくとも1つが、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)もしくはカザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)株であり、および/またはラチャンセア(Lachancea)属の前記株の少なくとも1つが、ラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)株である、[1]に記載の組成物または[2]に記載の方法。
[4] カザクスタニア(Kazachstania)属の前記株の少なくとも1つが、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)MUCL54530もしくはカザクスタニアエキシグア(Kazachstania exigua)ATCC22034であり、および/またはラチャンセア(Lachancea)属の前記株の少なくとも1つが、ラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)MUCL55817である、[1]または[3]に記載の組成物または[2]または[3]に記載の方法。
[5] 前記組成物が(a)約10 8 〜10 10 cfu/mlの範囲の量のカザクスタニア(Kazachstania)および/もしくはラチャンセア(Lachancea)属の1つ以上の株を含み、(b)前記組成物のpHが、約3.8〜約6の範囲であり、ならびに/または(c)前記組成物の膨張力が、SJA分析で測定したとき、2時間で発生したCO 2 約300ml〜約1500mlの範囲である、[1]、[3]もしくは[4]のいずれか一項に記載の組成物、または[2]〜[4]のいずれか一項に記載の方法。
[6] カザクスタニア(Kazachstania)および/またはラチャンセア(Lachancea)属の前記1つ以上の株と、1つ以上の他の微生物株、好ましくは他の酵母株および/または乳酸菌株とを組み合わせる、[1]、[3]〜[5]のいずれか一項に記載の組成物、または[2]〜[5]のいずれか一項に記載の方法。
[7] カザクスタニア(Kazachstania)および/またはラチャンセア(Lachancea)属の前記1つ以上の株が、前記組成物中で本質的に唯一のCO2を発生させる微生物である、[1]、[3]〜[5]のいずれか一項に記載の組成物、または[2]〜[5]のいずれか一項に記載の方法。
[8] 前記組成物が、アミログルコシダーゼ、活性麦芽粉およびα−アミラーゼの群から好ましくは選択されるアミラーゼ源を含み、前記アミラーゼ源が、前記組成物中で1〜30AGU/g液体酵母のアミログルコシダーゼ、1〜16DU/g液体酵母の活性麦芽粉、または10〜80SKB/g液体酵母のα−アミラーゼが得られる量で好ましくは添加される、[1]、[3]〜[7]のいずれか一項に記載の組成物、または[2]〜[7]のいずれか一項に記載の方法。
[9] 前記穀物加水分解物が、デュラム小麦粉もしくはデュラム小麦麦芽、小麦粉もしくは小麦麦芽、ライ麦粉もしくはライ麦麦芽、またはこれらの組合せに基づくものである、[1]、[3]〜[8]のいずれか一項に記載の組成物、または[2]〜[8]のいずれか一項に記載の方法。
[10] 膨張剤、好ましくは液体膨張剤としての、[1]、[3]〜[9]のいずれか一項に記載の組成物の使用。
[11] 食品、好ましくはベークド製品、より好ましくはベーカリーまたはパティスリー製品の調製のための材料としての、[1]、[3]〜[9]のいずれか一項に記載の組成物の使用。
[12] [1]、[3]〜[9]のいずれか一項に記載の組成物を含むベークド製品、好ましくは、[1]、[3]〜[9]のいずれか一項に記載の組成物を含む、ベーカリーまたはパティスリー製品。
[13] 以下の工程、
[1]、[3]〜[9]のいずれか一項に記載の組成物を提供する工程、
前記組成物をドウまたはバッターに添加する工程、ならびに
前記ドウまたはバッターを焼成し、それによりベークド製品、例えば、ベーカリーまたはパティスリー製品を得る工程
を含む、ベークド製品、例えば、ベーカリーまたはパティスリー製品を得る方法。
[14] BCCM/MUCL(Agro)industrial Fungi&Yeasts Collectionに受託番号MUCL54530の下に寄託されたカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)株、またはBCCM/MUCL(Agro)industrial Fungi&Yeasts Collectionに受託番号MUCL55817の下に寄託されたラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)株。
[15] 食品、好ましくはベークド製品、より好ましくはベーカリーまたはパティスリー製品の調製のための、[14]に記載の株のいずれか1つの使用。
Kb2(カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)MUCL54530で発酵させたライ麦麦芽粉加水分解物)およびSC2(サッカロミセスセレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)で発酵させたライ麦麦芽粉加水分解物)の香りのプロファイル。 Kb2(カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)MUCL54530で発酵させたライ麦麦芽粉加水分解物)およびSc2(サッカロミセスセレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)で発酵させたライ麦麦芽粉加水分解物)で調製したパンの香りのプロファイル。

Claims (14)

  1. 膨張剤を製造する方法であって、前記方法は、(a)穀物加水分解物、液体およびカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)株を含む発酵基質を含む混合物を準備し、かつ、(b)前記穀物加水分解物、液体およびカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)株を含む混合物を少なくともカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)株で発酵させ、それにより膨張剤を得ることを含み;ここで、前記膨張剤の膨張力が、SJA分析で測定したとき、2時間で発生したCO約300ml〜約1500mlの範囲である方法。
  2. 前記カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)株が、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)MUCL54530である、請求項に記載の方法。
  3. (a)前記膨張剤は約10 〜10 10 cfu/mlのカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)株を含み;および/または(b)前記膨張剤のpHが、約3.8〜約6の範囲である、請求項1または2に記載の方法。
  4. 前記カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)株と、1つ以上の他の微生物とを組み合わせる、請求項1〜3のいずれか一項に記載の方法。
  5. 前記カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)株と、他の酵母株および/または乳酸菌株とを組み合わせる、請求項に記載の方法。
  6. 前記カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)株が、前記膨張剤中で本質的に唯一のCOを発生させる微生物である、請求項1〜5のいずれか一項に記載の方法。
  7. 前記膨張剤がアミラーゼ源を含む、請求項1〜6のいずれか一項に記載の方法。
  8. 前記アミラーゼ源が、アミログルコシダーゼ、活性麦芽粉およびα-アミラーゼの群から選択される、請求項に記載の方法。
  9. 前記アミラーゼ源が、前記膨張剤中で、1〜30AGU/g液体酵母のアミログルコシダーゼ;1〜16DU/g液体酵母の活性麦芽粉;または10〜80SKB/g液体酵母のα-アミラーゼが得られる量で添加される、請求項7または8に記載の方法。
  10. 前記穀物加水分解物が、デュラム小麦粉もしくはデュラム小麦麦芽、小麦粉もしくは小麦麦芽、ライ麦粉もしくはライ麦麦芽、またはこれらの組合せに基づくものである、請求項1〜9のいずれか一項に記載の方法。
  11. 前記穀物加水分解物液体およびカザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)株を含む発酵基質を含む混合物が、ラチャンセア(Lachancea)属の1つ以上の株をさらに含み、前記混合物が前記ラチャンセア(Lachancea)属の1つ以上の株でさらに発酵させた、請求項1〜10のいずれか一項に記載の方法。
  12. 前記ラチャンセア(Lachancea)属の株の少なくとも1つが、ラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)株である、請求項11に記載の方法。
  13. 前記ラチャンセア(Lachancea)属の株の少なくとも1つが、ラチャンセアサーモトレランス(Lachancea thermotolerans)MUCL55817である、請求項12に記載の方法。
  14. 前記組成物が(a)約10〜1010cfu/mlの範囲の量の、カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)株および前記ラチャンセア(Lachancea)属の1つ以上の株を含み;ならびにもしくは(b)前記膨張剤のpHが、約3.8〜約6の範囲であり、ならびに/または、前記カザクスタニアブルデリ(Kazachstania bulderi)株および前記ラチャンセア(Lachancea)属の1つ以上の株が、前記膨張剤中で本質的に唯一のCOを発生させる微生物である、請求項11〜13のいずれか一項に記載の方法。
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