JP6937329B2 - 切断可能なポリマー薬物コンジュゲート - Google Patents

Description

本発明は、式Ｉによるポリマー薬物コンジュゲート、このポリマー薬物コンジュゲートの調製方法、及び癌などの疾患の治療のためのそれらの使用に関する。

癌の治療に使用される化学療法剤は、ほとんどが細胞毒性である。これらの薬剤は、標的領域に加えて身体の組織に蓄積する可能性があり、それが治療利益の低下及び健康な身体組織全体への薬物の望ましくない分布を引き起こす。身体全体へのこれらの薬剤の制御されない分布は、患者に重篤な副作用を引き起こす。

化学療法剤が健康な組織を含む全身に分布するために、与えられた用量によって引き起こされる高い全体的毒性にもかかわらず、腫瘍組織に到達する化学療法剤の量は非常に少ない。この状況は、患者にとって治療上の利益が低いことにつながる。さらに、化学療法剤は溶解度が低いため、調剤し患者に投与することが困難になる。

上述の問題に対処するために、身体の標的領域に薬物を送達することができる薬物送達システムが開発されている。例えば、癌治療のいくつかのアプローチにおいて、これらのシステムは、増強された透過性及び保持効果（ＥＰＲ）を利用し、これは高分子量及び大きな流体力学的体積を有する薬物担体が固形腫瘍に蓄積することを意味し、それが腫瘍組織への薬物分子の受動的ターゲティングにつながり、健康な組織への化学療法剤のダメージを最小限に抑える。

発明の技術分野
ポリマー薬物コンジュゲートの調製に使用することができる多数のポリマーがある。

米国特許第６３１００３９号明細書には、トランスフェリン、アルブミン及びポリエチレングリコールと、ドキソルビシン、ダウノルビシン、エピルビシンなどの細胞増殖抑制化合物とのコンジュゲートが開示されている。この文献では、薬物分子はポリエチレングリコールポリマーの末端基に結合している。これらのシステムの１つの欠点は、それらが薬物コンジュゲーションのための限定された官能基を有し、その結果最終的な薬物ポリマーコンジュゲートにおいて低い薬物割合を有することである。さらに、この種のポリマー薬物コンジュゲートについて対処するのが難しい別の現象は凝集である。

例えば、国際公開第１９９８／０５６４２４号には、ポリマー薬物コンジュゲートが開示されており、デキストリンがポリマーの主鎖を形成し、薬物分子がポリマー主鎖に直接又は間接的に結合している。

別の例は、国際公開第２００７／０２８３４７号であり、抗癌薬分子であるドキソルビシンのポリマーコンジュゲートを調製する方法が開示されている。この文献には、ポリマー形成のためのＮ−（２−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド（ＨＰＭＡ）モノマーの使用が示されている。

米国特許出願公開第２００３／０２１５３９５号明細書には、リンカーで薬物にコンジュゲートするポリ（Ｌ−リシン）、ポリエチレンイミン及びキトサンなどのカチオン性ポリマーが開示されている。

上記のシステムは、ポリマー薬物コンジュゲートがその標的組織に到達した後にリンカーの切断を目的とするリンカーを介してポリマー主鎖に結合した薬物分子を使用し、それによって標的部位で薬物分子を放出する。しかしながら、これらのシステムの不利な点は、薬物とポリマーとの間の切断可能なリンカーが血流中で切断され、薬物分子がその標的組織に到達する前に放出されることである。

上記の最先端技術に照らして、より毒性が低く、望ましい薬物動態プロファイルを有する新規なポリマー薬物コンジュゲートが必要とされている。

本発明の別の目的は、ポリマー薬物コンジュゲートが標的組織に到達する前の薬物切断の問題に対処するポリマー薬物コンジュゲートを提供することである。

本発明者らは、驚くべきことに、本発明によるポリマー薬物コンジュゲートがかなり長い循環時間を有し、標的組織への活性剤の選択的分布をもたらし、分布体積が小さく、クリアランスが低く、最大濃度（Ｃｍａｘ）が高く、曲線下面積の合計（ＡＵＣ合計）の値が高いことを見出した。

本発明は、（メタ）アクリレート系ポリマー主鎖を含む治療剤送達用ポリマー薬物コンジュゲートに関し、ポリマーが少なくとも２種類の側鎖を含み、一方の側鎖が−ＣＯＯＣＨ_２ＣＨ_２（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｎＯＲ_３などのＰＥＧ鎖であり、式中、ｎは１〜２００の自然数であり、Ｒ_３はＨ又は−ＣＨ_３を含む群から選択され、他方の側鎖が、式Ｉに示すように切断可能なリンカーに共有結合した少なくとも１つの治療剤を含むことを特徴とする。

言い換えれば、本発明は、式Ｉのポリマー薬物コンジュゲートに関し、式中、
・Ｒ_１及びＲ_２はＨ又は−ＣＨ_３から独立に選択され、
・Ｒ_３は−Ｈ又は−ＣＨ_３から選択され、
・ｘは１〜１４０の自然数であり、
・ｙは１〜４０の自然数であり、
・ｎは１〜２００の自然数であり、
・Ｌは切断可能なリンカーであり、
・Ｄは少なくとも１つの治療剤であり、
・Ｚは−Ｏ又は−ＮＨから選択され、
・Ａは任意に重合開始剤又はそのフラグメントである末端基であるか、又はＡはヌルであってもよく、
・Ｂは任意に重合開始剤又はそのフラグメントである末端基であるか、又はＢはヌルであってもよい。

本発明者らは、驚くべきことに、本発明のポリマーは、ポリマー薬物コンジュゲートを含む先行技術の薬物送達システムの欠点を克服することに加えて、生分解性ＰＥＧ側鎖の存在により、他臓器への蓄積が減少していることを見出した。このことによって毒性がより低いポリマー薬物コンジュゲートが提供される。

ＰＥＧＭＥＭＡ−ＤＴＸコンジュゲート及び遊離ＤＴＸのパーセントヘモグラム値を示すグラフである。

「ポリマー薬物コンジュゲート」という用語は、ポリマーに共有結合している治療剤を有するポリマー構造を指す。

「ポリマーの主鎖」及び「ポリマー主鎖」という用語は互換的に使用することができ、側鎖又はペンダント基を有するポリマー鎖を指す。例えば、側鎖はオリゴエチレングリコール単位を有してもよく、ペンダント基は１つの治療剤を担持してもよく、或いは治療剤及び／又は診断剤又は標的基を結合するために利用され得る他の任意の基を担持してもよい。

「アクリレート」という用語は、アクリル酸の誘導体を指す。これらの誘導体は、親酸（ＣＨ_２ＣＨＣＯ_２Ｈ）及びエステルを含み、したがって、「アクリレート系」という用語は、上記のアクリレート誘導体のいずれかを有する官能基を定義する。

「メタクリレート」という用語は、メタクリル酸の誘導体を指す。これらの誘導体は、親酸（ＣＨ_２Ｃ（ＣＨ_３）ＣＯ_２Ｈ）及びエステルを含む。したがって、「メタクリレート系」という用語は、上述のメタクリレート誘導体のいずれかを有する官能基を定義する。

「（メタ）アクリレート」という用語は、用語「アクリレート」及び「メタクリレート」を指す。したがって、「（メタ）アクリレート」という用語は、「アクリレート」及び「メタクリレート」と互換的に使用することができ、上記のようにこれらの用語の全ての特徴を含む。「（メタ）アクリレート」という用語は、「メタクリレート及び／又はアクリレート」を意味すると解釈されるべきである。

本明細書を通して、「本発明のポリマー薬物コンジュゲート」という用語は、「式Ｉによるポリマー薬物コンジュゲート」又は「式Ｉのポリマー薬物コンジュゲート」若しくは「式Ｉ」を意味すると解釈されるべきであり、これらの用語は互換的に使用され得る。

「ＰＥＧ」という用語は、Ｈ−（Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_２）ｎ−ＯＲ_３の構造を有するポリエーテル化合物を指し、ｎは１〜２００の自然数であり、Ｒ_３はＨ又は−ＣＨ_３から選択される。ＰＥＧは、エチレンオキシドのオリゴマー又はポリマーとして定義される。「ＰＥＧ」、「ポリエチレングリコール」、「ポリエチレンオキシド」、「ＰＥＯ」、「ポリオキシエチレン」及び「ＰＯＥ」という用語は同じ構造を指し、本明細書内で互換的に使用され得る。

式Ｉによって示されるように、本発明のポリマー薬物コンジュゲートはＰＥＧ側鎖を含む。側鎖は、本発明のポリマー薬物コンジュゲートに重要な物理化学的性質を付与し、この側鎖を有さないコンジュゲートと比較してより良好な物理化学的性質を有するポリマー薬物コンジュゲートをもたらす。

上記のように、式Ｉ中の「Ｌ」は切断可能なリンカーを表す。「切断可能なリンカー」という用語は、薬物又は標的基を担体分子から空間的に分離する基を指す。「リンカー」、「Ｌ」及び「切断可能なリンカー」という用語は同じ実体を指し、互換的に使用され得る。

本明細書において、「短ペプチド」という用語は、１〜５０個のアミノ酸、好ましくは２〜４０個のアミノ酸、最も好ましくは２〜３０個のアミノ酸を含むペプチド鎖を意味すると解釈されるべきである。

一実施形態では、Ｒ_１＝Ｈ、Ｒ_２＝Ｈ、Ｒ_３＝Ｈであり、別の実施形態では、Ｒ_１＝Ｈ、Ｒ_２＝Ｈ、Ｒ_３＝−ＣＨ_３であり、別の実施形態では、Ｒ_１＝Ｈ、Ｒ_２＝−ＣＨ_３、Ｒ_３＝Ｈであり、別の実施形態では、Ｒ_１＝Ｈ、Ｒ_２＝−ＣＨ_３、Ｒ_３＝−ＣＨ_３であり、別の実施形態では、Ｒ_１＝−ＣＨ_３、Ｒ_２＝Ｈ、Ｒ_３＝Ｈであり、別の実施形態では、Ｒ_１＝−ＣＨ_３、Ｒ_２＝Ｈ、Ｒ_３＝−ＣＨ_３であり、別の実施形態では、Ｒ_１＝−ＣＨ_３、Ｒ２＝−ＣＨ_３、Ｒ_３＝Ｈであり、別の実施形態では、Ｒ_１＝−ＣＨ_３、Ｒ_２＝−ＣＨ_３、Ｒ_３＝−ＣＨ_３である。

「ランダムコポリマー」という用語は、コポリマーを形成するモノマーが任意の順序で続くコポリマーを指す。「ブロックコポリマー」という用語は、１種類のモノマーの全てが一緒にまとめられ、他の種類のモノマーの全てが一緒にまとめられているコポリマーを指す。本発明のポリマー薬物コンジュゲートは、ブロックコポリマー又はランダムコポリマーの形態であり得る。本発明のポリマー薬物コンジュゲートは、ランダムコポリマーの形態である。

リンカーは、例えば還元条件下、酸化条件下で、又はエステル、アミド、ヒドラジド、又はリンカーと治療剤との間に共有結合を形成する類似の結合の加水分解によって、治療剤を放出することができるように切断可能である。さらに、リンカーの種類は、細胞に隣接して又は細胞内で治療剤の選択的放出を可能にすることによって、選択的細胞毒性の態様を増強し得る（したがって治療指数を改善する）。

切断可能なリンカーは、生理学的条件下で解離することができる任意の炭化水素又は置換炭化水素系化合物であり得る。好ましい実施形態では、リンカーは、腫瘍の酸性条件下で切断される化合物から選択するか（アセタール又はエステル官能基を含む任意のＣ_１〜Ｃ_１０置換炭化水素など）、又は腫瘍細胞の細胞間又は細胞内マトリックス中に存在する過剰発現酵素の助けを借りて切断される化合物から選択することができる。

リンカーは、ポリ（エチレングリコール）、アミノ酸、ポリ（アミノ酸）（例えば、ペプチド又はオリゴペプチド）、又はポリペプチド（例えば、タンパク質）など、ポリマー主鎖と薬物の両方に結合することができる任意の種類の実体であり得、その一方の端部がポリマー主鎖と共有結合を形成することができ、他方の端部が治療剤と共有結合を形成することができる。リンカーはまた、ＧＦＬＧとも呼ばれるＧｌｙ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ（配列番号１）、Ｖａｌ−Ｃｉｔ、Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ｖａｌ−Ａｌａ又はＡｌａ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｌｅｕ（配列番号２）など、カテプシンＢに不安定な特定のペプチド配列を有する短ペプチドを含み得る。

リンカーはまた、Ｃ_１〜Ｃ_１０炭化水素又はＣ_１〜Ｃ_１０置換若しくはヘテロ置換炭化水素であり得、生理学的条件下で解離する官能基、例えばアセタール、エステル、イミン、アミド、ジスルフィド、カルボナート、カルバマート、ヒドラゾンを含む。

「Ｃ_１〜Ｃ_１０炭化水素」という用語は、主鎖に１〜１０個のＣ原子を有する炭化水素鎖を指す。

「Ｃ_１〜Ｃ_１０置換炭化水素」という用語は、主鎖に１〜１０個のＣ原子を有し、その１個以上の水素原子がアルコール、アミン、カルボキシル、チオールなどの他の元素の基の原子で置き換えられた炭化水素鎖を指す。

「Ｃ_１〜Ｃ_１０ヘテロ置換炭化水素」という用語は、主鎖に１〜１０個のＣ原子を有する炭化水素鎖を指し、ここで、Ｃ原子の少なくとも１個は、窒素、酸素、リン、硫黄又はハロゲン原子などＣ以外の原子で置換される。これらの置換基には、メトキシ、エトキシ、ブトキシなどの低級アルコキシ、エーテル、アセタール、ケタール、エステル、ヘトロアリール、複素環、ヒドロキシル、保護されたヒドロキシル、アシル、アシルオキシ、アミノ、アミド、イミン、ジスルフィド、カルボナート、カルバマート、ハイドロゾーン、ヒドラジンが含まれるがこれらに限定されない。

本発明の一実施形態では、リンカー（Ｌ）はＧＦＬＧである。本発明の一実施形態では、リンカーはＶａｌ−Ｃｉｔである。本発明の一実施形態では、リンカーはＰｈｅ−Ｌｙｓである。本発明の一実施形態では、リンカーはＶａｌ−Ａｌａである。本発明の一実施形態では、リンカーはＡｌａ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｌｅｕである。

本発明の一実施形態では、リンカーは少なくとも１つのジスルフィド官能基を含むＣ_１〜Ｃ_１０ヘテロ置換炭化水素である。本発明の一実施形態では、リンカーは少なくとも１つのアセタール官能基を含むＣ_１〜Ｃ_１０ヘテロ置換炭化水素である。本発明の一実施形態では、リンカーは少なくとも１つのエステル官能基を含むＣ_１〜Ｃ_１０ヘテロ置換炭化水素である。本発明の一実施形態では、リンカーは少なくとも１つのイミン官能基を含むＣ_１〜Ｃ_１０ヘテロ置換炭化水素である。本発明の一実施形態では、リンカーは少なくとも１つのアミド官能基を含むＣ_１〜Ｃ_１０ヘテロ置換炭化水素である。本発明の一実施形態では、リンカーは少なくとも１つのカルボナート官能基を含むＣ_１〜Ｃ_１０ヘテロ置換炭化水素である。本発明の一実施形態では、リンカーは少なくとも１つのカルバマート官能基を含むＣ_１〜Ｃ_１０ヘテロ置換炭化水素である。本発明の一実施形態では、リンカーは少なくとも１つのヒドラゾン官能基を含むＣ_１〜Ｃ_１０ヘテロ置換炭化水素である。

本発明の別の実施形態では、リンカーは、アセタール、エステル、イミン、アミド、ジスルフィド、カルボナート、カルバマート、ヒドラゾンを含む群から選択される２つ以上の官能基を含むＣ_１〜Ｃ_１０置換又はヘテロ置換炭化水素を含み得る。

本発明の別の実施形態では、リンカーは、アセタール、エステル、イミン、アミド、ジスルフィド、カルボナート、カルバマート及びヒドラゾンを含む群から選択される少なくとも１つの官能基を含むＣ_１〜Ｃ_１０置換炭化水素と、ＧＦＬＧ、Ｖａｌ−Ｃｉｔ又はＰｈｅ−Ｌｙｓ又はＶａｌ−Ａｌａ又はＡｌａ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｌｅｕを含む群から選択されるペプチド鎖との組み合わせであり得る。

「治療剤」という用語は、疾患の治療における使用に適した任意の化合物を指す。「治療剤」、「化学療法剤」、「抗癌剤」及び「抗新生物剤」という用語は全て、疾患の治療における使用に適した化合物を指し、これらの用語は互換的に使用することができる。一実施形態では、疾患は癌である。

さらに、「治療剤」はまた、疾患、例えば癌の治療における使用に適した任意の薬剤を指す。本発明のポリマー薬物コンジュゲートに直接又は間接的に結合することができる任意の治療剤を使用することができる。米国特許第６６，３４２，２２１号明細書にも抗癌剤に関連する薬剤が記載されており、この文書は参照により本明細書に組み込まれる。抗癌剤は、限定されるものではないが化学療法剤、細胞毒、代謝拮抗剤、アルキル化剤、プロテインキナーゼ阻害剤、アントラサイクリン、抗生物質、抗有糸分裂剤（例えば抗チューブリン剤）、コルチコステロイド、放射性医薬品、及びタンパク質（例えばサイトカイン、酵素又はインターフェロン）として分類できる。抗癌剤の具体例としては、例えば、ドセタキセル、ゲムシタビン、イマチニブ、５−フルオロウラシル、９−アミノカンプトテシン、アミン修飾ゲルダナマイシン、ドキソルビシン、パクリタキセル、プロカルバジン、ヒドロキシウレア、メソｅ−クロリン、シスプラチン及び放射性核種（例えば１〜１３１、Ｙ−９０、Ｉｎ−１１１及びＴｃ−９９ｍ）が挙げられる。当該分野で公知の他の多くの抗癌剤があり、多くが開発され続けており、それらの薬剤もまた本発明の範囲内に含まれる。

治療剤（複数可）は、ヌクレオシド類似体、葉酸代謝拮抗薬、他の代謝産物、トポイソメラーゼＩ阻害剤、アントラサイクリン、ポドフィロトキシン、タキサン、ビンカアルカロイド、アルキル化剤、白金化合物、抗ホルモン剤、放射性医薬品、モノクローナル抗体、チロシンキナーゼ阻害剤、哺乳類ラパマイシン標的タンパク質（ｍＴＯＲ）阻害剤、レチノイド、免疫調節剤、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤及び他の薬剤を含むがこれらに限定されないサブグループから選択することもできる。

ヌクレオシド類似体は、限定されるものではないがアザシチジン、クラドリビン、クロファラビン、シタラビン、デシタビン、フロクスウリジン、フルダラビン、フルオロウラシル（５−ＦＵ）、ゲムシタビン、メルカプトプリン、ネララビン、ペントスタチン、チオグアニジン、トリフルリジン、チピラシルを含む群から選択することができる。

葉酸代謝拮抗薬は、メトトレキサート、ペメトレキセド、プララトレキセド、ラルチトレキセドを含むがこれらに限定されない群から選択することができる。他の代謝産物は、ヒドロキシカルバミドを含むがこれに限定されない群から選択することができる。トポイソメラーゼＩ阻害剤は、イリノテカン及びトポテカンを含むがこれらに限定されない群から選択することができる。アントラサイクリンは、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、イダルビシン、ミトキサントロン、バルルビシンを含むがこれらに限定されない群から選択することができる。ポドフィロトキシンは、エトポシド及びテニポシドを含むがこれらに限定されない群から選択することができる。タキサンは、カバジタキセル、ドセタキセル、パクリタキセルを含むがこれらに限定されない群から選択することができる。ビンカアルカロイドは、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビンフルニン、ビノレルビンを含むがこれらに限定されない群から選択することができる。アルキル化剤は、ベンダムスチン、クロラムブシル、ダカルバジン、メルファラン、ストレプトゾトシン、トラベクチンを含むがこれらに限定されない群から選択することができる。抗ホルモン化合物は、アビラテロン、ビカルタミド、シプロテロン、デガレリクス、エキセメスタン、フルベストラント、ゴセレリン、ヒストレリン、ロイプロリド、ミフェプリストン、トリプトレリンを含むがこれらに限定されない群から選択することができる。チロシンキナーゼ阻害剤は、アファチニブ、アキシチニブ、ボスチニブ、コビメチニブ、クリゾチニブ、ダサチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、イマチニブ、ラパチニブ、ニロチニブ、オシメルチニブ、ルキソリチニブ、スニチニブ、バンデタニブを含むがこれらに限定されない群から選択することができる。ラパマイシンの哺乳動物標的（ｍＴＯＲ）阻害剤は、エベロリムス、テムシロリムスを含むがこれらに限定されない群から選択することができる。レチノイドは、アリトレチノイン、ベキサロテン、イソトレチノイン、タミバロテン、トレチノインを含むがこれらに限定されない群から選択することができる。免疫調節剤は、レナリドマイド、ポマリドマイド、サリドマイドを含むがこれらに限定されない群から選択することができる。ヒストンデアセチラーゼ阻害剤は、ベリノスタット、パノビノスタット、バルプロエート、ボリノスタットを含むがこれらに限定されない群から選択することができる。他の薬剤は、限定されるものではないがアナグレリド、セリチニブ、ダブラフェニブ、イデラリシブ、イブルチニブ、パルボシクリブ、ベムラフェニブ、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、ダクチノマイシン、エリブリン、エストラムスチン、イクサベピロン、マイトマイシン、プロカルバジン、アレクチニブ、フルキシメステロン（ｆｌｕｘｙｍｅｓｔｅｒｏｎｅ）、イオベングアン、イミグイモド、インターフェロン、イクサゾミブ、ランレオチド、レンチナン、オクトレオチド、オマセタキシン、テガフール、ギメラジル、オテラシル、ウラシル、コンブレタスタチン、クロロキンを含む群から選択することができる。

本発明の好ましい実施形態では、治療剤（複数可）は、タキサン、葉酸代謝拮抗薬、チロシンキナーゼ阻害剤、アントラサイクリン、ヌクレオシド類似体又は他の薬剤から選択される。最も好ましくは、治療剤は、ドセタキセル、ペメトレキセド、クロロキン、コンブレタスタチン、ゲムシタビン、ドキソルビシン、フルオロウラシル（５−ＦＵ）、５’−デオキシ−５−フルオロシチジン（５’−ＤＦＣＲ）、ラパチニブ、及び上に列挙した任意の治療剤を含む群から選択される。治療剤はそのようなものである。

本明細書では、「薬剤（複数可）」という用語は、少なくとも１つ又は複数の治療剤を指す。

本発明の一実施形態では、治療剤はドセタキセルである。本発明の一実施形態では、治療剤はペメトレキセドである。本発明の一実施形態では、治療剤はクロロキンである。本発明の一実施形態では、治療剤はコンブレタスタチンである。本発明の一実施形態では、治療剤はゲムシタビンである。本発明の一実施形態では、治療剤はドキソルビシンである。本発明の一実施形態では、治療剤は５−ＦＵである。本発明の一実施形態では、治療剤は５’−デオキシ−５−フルオロシチジン（５’−ＤＦＣＲ）である。本発明の一実施形態では、治療剤はラパチニブである。

本発明の一実施形態では、治療剤は、ドセタキセル、ペメトレキセド、クロロキン、コンブレタスタチン、ゲムシタビン、ドキソルビシン、５−ＦＵ、５’−デオキシ−５−フルオロシチジン（５’−ＤＦＣＲ）及びラパチニブ並びに上に列挙した任意の他の薬剤を含む群から選択される２つ以上の治療剤の組み合わせである。このように、２つ以上の治療剤（複数可）の組み合わせである治療剤は、主群又は上に列挙した主群の特定の構成要素から選択することができる。

治療剤は、ポリマー薬物コンジュゲートの１〜４０重量％の量、好ましくは薬物ポリマーコンジュゲートの２〜３５重量％の量、最も好ましくは薬物ポリマーコンジュゲートの３〜３０重量％の量で存在することができる。治療剤は、例えば、薬物ポリマーコンジュゲートの４〜２５重量％、又は５〜２４重量％、又は６〜２３重量％、又は７〜２２重量％、又は８〜２０重量％の範囲の量で存在することができる。

「末端基」という用語は、ポリマーの末端にある官能基又は構成単位を指す。Ａ及びＢとして示される末端基は、互いに同一でも異なっていてもよい。

Ａ及びＢは任意に重合開始剤又はそのフラグメントであり得る。特に開始剤が重合反応において使用される場合、開始剤フラグメントはポリマーに対する末端基としてとどまることができる。本明細書で使用される開始剤は、当技術分野で公知の重合反応を開始するのに適した任意の材料であり得る。

一実施形態において、Ａ及び／又はＢは、４，４’−アゾビス（４−シアノ吉草酸）、４，４’−アゾビス（４−シアノ吉草酸）、１，１’−アゾビス（シクロヘキサンカルボニトリル）、２，２’−アゾビス（２−メチルプロピオンアミジン）ジヒドロクロリド、２，２’−アゾビス（２−メチルプロピオニトリル）（ＡＩＢＮとしても知られる）、過硫酸アンモニウム、ヒドロキシメタンスルフィン酸一ナトリウム塩二水和物、過硫酸カリウム、過硫酸ナトリウム、ｔｅｒｔ−ブチルヒドロペルオキシド、ｔｅｒｔ−ブチルペルアセタート、クメンヒドロペルオキシド、２，５−ジ（ｔｅｒｔ−ブチルペルオキシ）−２，５−ジメチル−３−ヘキシン、ジクミルペルオキシド、２，５−ビス（ｔｅｒｔ−ブチルペルオキシ）−２，５−ジメチルヘキサン、１，１−ビス（ｔｅｒｔ−ブチルペルオキシ）−３，３，５−トリメチルシクロヘキサン、１，１−ビス（ｔｅｒｔ−アミルペルオキシ）シクロヘキサン、過酸化ベンゾイル、２−ブタノンペルオキシド、ｔｅｒｔ−ブチルペルオキシド、ジ−ｔｅｒｔ−アミルペルオキシド、ラウロイルペルオキシド、ｔｅｒｔ−ブチルペルオキシベンゾアート、ｔｅｒｔ−ブチルペルオキシ−２−エチルヘキシルカルボナート、ｔｅｒｔ−ブチルヒドロペルオキシド、２−アジドエチル−２−ブロモイソブチレート、ビス［２−（２−ブロモイソブチリルオキシ）ウンデシル］ジスルフィド、ビス［２−（２’）−ブロモイソブチリルオキシ）エチル］ジスルフィド、２−ブロモイソブタン酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、２−ブロモイソ酪酸無水物、α−ブロモイソブチリルブロマイド、２−（２−ブロモイソブチリルオキシ）エチルメタクリレート、ｔｅｒｔ−ブチルα−ブロモイソブチレート、３−ブチニル２−ブロモイソブチレート、ジペンタエリスリトールヘキサキス（２−ブロモイソブチレート）、ドデシル２−ブロモイソブチレート、エチルα−ブロモイソブチレート、エチレンビス（２−ブロモイソブチレート）、２−ヒドロキシエチル２−ブロモイソブチレート、１−（ＤＬ−１，２−イソプロピリデングリセリル）２−ブロモイソブチレート、メチルα−ブロモイソブチレート、オクタデシル２−ブロモイソブチレート、ペンタエリスリトールテトラキス（２−ブロモイソブチレート）、１−（フタルイミドメチル）２−ブロモイソブチレート、ポリ（エチレングリコール）ビス（２−ブロモイソブチレート）、プロパルギル２−ブロモイソブチレート、１，１，１−トリス（２−ブロモイソブチリルオキシメチル）エタン、１０−ウンデセニル−２−ブロモイソブチレート、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｏ−［１−［４−（クロロメチル）フェニル］エチル］−Ｎ−（２−メチル−１−フェニルプロピル）ヒドロキシルアミン、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−（２−メチル−１−フェニルプロピル）−Ｏ−（１−フェニルエチル）ヒドロキシルアミン、ＴＥＭＰＯ、ＴＥＭＰＯメタクリレート、２，２，５−トリメチル−４−フェニル−３−アザヘキサン−３−ニトロキシド、３，５−ビス（２−ドデシルチオカルボノチオイルチオ−１−オキソプロポキシ）ベンゾアート、３−ブテニル−２−（ドデシルチオカルボノチオイルチオ）−２−メチルプロピオナート、４−シアノ−４−［（ドデシルスルファニルチオカルボニル）スルファニル］ペンタン酸、４−シアノ−４−［（ドデシルスルファニルチオカルボニル）スルファニル］ペンタノール、シアノメチルドデシル、シアノメチル［３−（トリメトキシシリル）プロピル］トリチオカルボナート、２−シアノ−２−プロピルドデシルトリチオカルボナート、Ｓ、Ｓ−ジベンジルトリチオカルボナート、２−（ドデシルチオカルボチオイルチオ）−２−メチルプロピオン酸、２−（ドデシルチオカルボチオイルチオ）−２−メチルプロピオン酸、３−アジド−１−プロパノールエステル、２−（ドデシルチオカルボノチオイルチオ）−２−メチルプロピオン酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、２−（ドデシルチオカルボノチオイルチオ）−２−メチルプロピオン酸ペンタフルオロフェニルエステル、２−（ドデシルチオカルボノチオイルチオ）プロピオン酸、メチル２−（ドデシルチオカルボノチオイルチオ）−２−メチルプロピオナート、ペンタエリスリトールテトラキス［２−（ドデシルチオカルボノチイルチオ）−２−メチルプロピオナート］、フタルイミドメチルブチルトリチオカルボナート、１，１，１−トリス［（ドデシルチオカルボノチオイルチオ）−２−メチルプロピオナート］エタン、ベンジルベンゾジチオエート、シアノメチルベンゾジチオエート、４−シアノ−４−（フェニルカルボノチオイルチオ）ペンタン酸、４−シアノ−４−（フェニルカルボノチオイルチオ）ペンタン酸Ｎ−スクシンイミジルエステル、２−シアノ−２−プロピルベンゾジチオエート、２−シアノ−２−プロピル４−シアノベンゾジチオエート、エチル２−（４−メトキシフェニルカルボノチオイルチオ）アセタート、エチル２−メチル−２−（フェニルチオカルボニルチオ）プロピオナート、エチル２−（フェニルカルボノチオイルチオ）−２−フェニルアセタート、エチル２−（フェニルカルボノチオイルチオ）プロピオナート、１−（メトキシカルボニル）エチルベンゾジチオエート、２−（４−メトキシフェニルカルボノチオイルチオ）エタン酸、２−ニトロ−５−（２−プロピニルオキシ）ベンジル、４−シアノ−４−（フェニルカルボノチオイルチオ）ペンタノアート、２−（フェニルカルボノチオイルチオ）プロパン酸、２−フェニル−２−プロピルベンゾジチオエート、シアノメチルメチル（４−ピリジル）カルバモジチオエート、シアノプロパン−２−イルＮ−メチル−Ｎ−（ピリジン−４−イル）カルバモジチオエート、メチル２−［メチル（４−ピリジニル）カルバモチオイルチオ］プロピオナート、１−スクシンイミジル−４−シアノ−４−［Ｎ−メチル−Ｎ−（４−ピリジル）カルバモチオイルチオ］ペンタノアート、又は本明細書に挙げた開始剤の任意のフラグメントで構成される群から選択される。

本明細書で使用される「フラグメント」という用語は、開始剤分子を形成する１つ以上の共有結合の切断により形成される化合物を指す。

Ａ及び／又はＢは任意にヌルである。

本発明の一実施形態では、Ａはヌルであり、Ｂは重合開始剤又は重合開始剤のフラグメントである。別の実施態様では、Ｂはヌルであり、Ａは重合開始剤又は重合開始剤のフラグメントである。別の実施態様では、Ａ及びＢは両方とも重合開始剤のフラグメントであるが、それらは互いに構造的に異なる。言い換えれば、Ａ及びＢは同じ開始剤の異なるフラグメントである。別の実施形態では、Ａ及びＢは両方とも重合開始剤のフラグメントであり、それらは同じ化学構造を有する。

いくつかの好ましい実施形態では、本発明のポリマー薬物コンジュゲートは、
−リンカー（Ｌ）としてのＧＦＬＧ、並びにドセタキセル、ペメトレキセド、クロロキン、コンブレタスタチン、ゲムシタビン、ドキソルビシン、５−ＦＵ、５’−デオキシ−５−フルオロシチジン（５’−ＤＦＣＲ）及びラパチニブから選択される治療剤、
−リンカー（Ｌ）としてのＶａｌ−Ｃｉｔ、並びにドセタキセル、ペメトレキセド、クロロキン、コンブレタスタチン、ゲムシタビン、ドキソルビシン、５−ＦＵ、５’−デオキシ５−フルオロシチジン（５’−ＤＦＣＲ）及びラパチニブから選択される治療剤、
−リンカー（Ｌ）としてのＰｈｅ−Ｌｙｓ、並びにドセタキセル、ペメトレキセド、クロロキン、コンブレタスタチン、ゲムシタビン、ドキソルビシン、５−ＦＵ、５’−デオキシ−５−フルオロシチジン（５’−ＤＦＣＲ）及びラパチニブから選択される治療剤、
−リンカー（Ｌ）としてのＶａｌ−Ａｌａ、並びにドセタキセル、ペメトレキセド、クロロキン、コンブレタスタチン、ゲムシタビン、ドキソルビシン、５−ＦＵ、５’−デオキシ５−フルオロシチジン（５’−ＤＦＣＲ）及びラパチニブから選択される治療剤、
‐リンカー（Ｌ）としてのＡｌａ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｌｅｕ、並びにドセタキセル、ペメトレキセド、クロロキン、コンブレタスタチン、ゲムシタビン、ドキソルビシン、５−ＦＵ、５’−デオキシ５−フルオロシチジン（５’−ＤＦＣＲ）及びラパチニブから選択される治療剤、
−リンカー（Ｌ）としての少なくとも１つのジスルフィド官能基を含むＣ_１〜Ｃ_１０ヘテロ置換炭化水素、並びにドセタキセル、ペメトレキセド、クロロキン、コンブレタスタチン、ゲムシタビン、ドキソルビシン、５−ＦＵ、５’−デオキシ５−フルオロシチジン（５’−ＤＦＣＲ）及びラパチニブから選択される治療剤、
−リンカー（Ｌ）としての少なくとも１つのアセタール官能基を含むＣ_１〜Ｃ_１０ヘテロ置換炭化水素、並びにドセタキセル、ペメトレキセド、クロロキン、コンブレタスタチン、ゲムシタビン、ドキソルビシン、５−ＦＵ、５’−デオキシ５−フルオロシチジン（５’−ＤＦＣＲ）及びラパチニブから選択される治療剤、
−リンカー（Ｌ）としての少なくとも１つのエステル官能基を含むＣ_１〜Ｃ_１０ヘテロ置換炭化水素、並びにドセタキセル、ペメトレキセド、クロロキン、コンブレタスタチン、ゲムシタビン、ドキソルビシン、５−ＦＵ、５’−デオキシ５−フルオロシチジン（５’−ＤＦＣＲ）及びラパチニブから選択される治療剤、
−リンカー（Ｌ）としての少なくとも１つのイミン官能基を含むＣ_１〜Ｃ_１０ヘテロ置換炭化水素、並びにドセタキセル、ペメトレキセド、クロロキン、コンブレタスタチン、ゲムシタビン、ドキソルビシン、５−ＦＵ、５’−デオキシ５−フルオロシチジン（５’−ＤＦＣＲ）及びラパチニブから選択される治療剤、
−リンカー（Ｌ）としての少なくとも１つのアミン官能基を含むＣ_１〜Ｃ_１０ヘテロ置換炭化水素、並びにドセタキセル、ペメトレキセド、クロロキン、コンブレタスタチン、ゲムシタビン、ドキソルビシン、５−ＦＵ、５’−デオキシ５−フルオロシチジン（５’−ＤＦＣＲ）及びラパチニブから選択される治療剤、
−リンカー（Ｌ）としての少なくとも１つのカルボナート官能基を含むＣ_１〜Ｃ_１０ヘテロ置換炭化水素、並びにドセタキセル、ペメトレキセド、クロロキン、コンブレタスタチン、ゲムシタビン、ドキソルビシン、５−ＦＵ、５’−デオキシ５−フルオロシチジン（５’−ＤＦＣＲ）及びラパチニブから選択される治療剤、
−リンカー（Ｌ）としての少なくとも１つのカルバマート官能基を含むＣ_１〜Ｃ_１０ヘテロ置換炭化水素、並びにドセタキセル、ペメトレキセド、クロロキン、コンブレタスタチン、ゲムシタビン、ドキソルビシン、５−ＦＵ、５’−デオキシ５−フルオロシチジン（５’−ＤＦＣＲ）及びラパチニブから選択される治療剤、
−リンカー（Ｌ）としての少なくとも１つのヒドラゾン官能基を含むＣ_１〜Ｃ_１０ヘテロ置換炭化水素、並びにドセタキセル、ペメトレキセド、クロロキン、コンブレタスタチン、ゲムシタビン、ドキソルビシン、５−ＦＵ、５’−デオキシ５−フルオロシチジン（５’−ＤＦＣＲ）及びラパチニブから選択される治療剤、
−リンカー（Ｌ）としてアセタール、エステル、イミン、アミド、ジスルフィド、カルボナート、カルバマート、ヒドラゾンを含む群から選択される２つ以上の官能基を含むＣ_１〜Ｃ_１０置換又はヘテロ置換炭化水素、並びにドセタキセル、ペメトレキセド、クロロキン、コンブレタスタチン、ゲムシタビン、ドキソルビシン、５−ＦＵ、５’−デオキシ−５−フルオロシチジン（５’−ＤＦＣＲ）及びラパチニブの群から選択される治療剤、
−アセタール、エステル、イミン、アミド、ジスルフィド、カルボナート、カルバマート、ヒドラゾンを含む群から選択される少なくとも１つの官能基を含むＣ_１〜Ｃ_１０置換炭化水素と、リンカー（Ｌ）としてのＧＦＬＧ、Ｖａｌ−Ｃｉｔ、Ｖａｌ−Ａｌａ、Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｌｅｕ又はＰｈｅ−Ｌｙｓを含む群から選択されるペプチド鎖と、ドセタキセル、ペメトレキセド、クロロキン、コンブレタスタチン、ゲムシタビン、ドキソルビシン、５−ＦＵ、５’−デオキシ５−フルオロシチジン（５’−ＤＦＣＲ）及びラパチニブの群から選択される治療剤との組み合わせ
のうちの１つ以上を含む。

本発明のポリマーコンジュゲート中の薬物の量の測定は、例えばポリマー薬物コンジュゲートの^１Ｈ−ＮＭＲから薬物比を計算することによって、当技術分野において周知の従来の技術を用いて行われる。

他の実施形態では、本発明のポリマー薬物は、２０ｋＤａ〜３００ｋＤａの平均分子量を有する。好ましい実施形態では、本発明のポリマー薬物コンジュゲートは、３０Ｄａ〜２７０ｋＤａの平均分子量を有し、最も好ましい実施形態では、本発明のポリマー薬物コンジュゲートは、４０ｋＤａ〜２５０ｋＤａの平均分子量を有する。

本発明のポリマー薬物コンジュゲートの分子量は、当技術分野において公知の従来の技術を使用することによって、例えばゲル浸透クロマトグラフィー（ＧＰＣ）を使用することによって決定される。

本発明の別の実施形態は、本発明のポリマー薬物コンジュゲート（式Ｉ）の調製方法（方法Ｉ）であり、ＰＥＧ（メタ）アクリレートモノマー（式ＩＩ）と、

少なくとも１種類の（メタ）アクリレート−Ｌ−Ｄモノマー（式ＩＩＩａ）とを重合することを含み、

・式中、Ｒ_１及びＲ_２は、Ｈ又は−ＣＨ_３から独立に選択され、
・Ｒ_３は−Ｈ又は−ＣＨ_３から選択され、
・Ｌは切断可能なリンカーであり、
・Ｄは少なくとも１種の治療剤であり、
・ｎは１〜２００の自然数である。

別の態様において、本発明のポリマー薬物コンジュゲート（式Ｉ）の調製方法（方法ＩＩ）は、（ｉ）ＰＥＧ（メタ）アクリレートモノマー（式ＩＩ）と、

（メタ）アクリレート−Ｌモノマー（式ＩＩＩｂ）とを重合することを含み、

・式中、Ｒ_１及びＲ_２は、Ｈ又は−ＣＨ_３から独立に選択され、
・Ｒ３は−Ｈ又は−ＣＨ_３から選択され、
・Ｌは切断可能なリンカーであり、
・ｎは１〜２００の自然数である。

式ＩＶに示すようなコポリマーを得るために

・ｘは１〜１００の自然数であり、
・ｙは１〜１００の自然数であり、
・Ｚは−Ｏ又は−ＮＨから選択され、
・Ａは任意に重合開始剤又はそのフラグメントである末端基であるか、又はＡはヌルであってもよく、
・Ｂは任意に重合開始剤又はそのフラグメントである末端基であるか、又はＢはヌルであってもよく、
次いで、（ｉｉ）式ＩＶを少なくとも１種類の治療剤（Ｄ）と反応させて、式Ｉに示すポリマー複合体を得る。

別の態様において、本発明のポリマー薬物コンジュゲート（式Ｉ）の調製方法（方法ＩＩＩ）は、（ｉ）式ＩＩで示すＰＥＧ（メタ）アクリレートモノマーと、

式ＩＩＩｃで示す（メタ）アクリレートモノマーとを重合し、

・式中、ｎは１〜２００の自然数であり、
・Ｒ_１及びＲ_２はＨ又は−ＣＨ_３から独立に選択され、
・Ｒ_３は−Ｈ又は−ＣＨ_３から選択され、
・Ｒ_４は、ペルフルオロフェノキシ、マレイミド、カルボナート、チアゾリドン−２−チオン、Ｎ−オキシベンゾトリアゾール、イミダゾリル、ｏ／ｐ−ニトロフェノール、ペンタクロロフェノール、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、アセタート、ホルマート、２，３、５−トリクロロフェノール、８−ヒドロキシキノリン、−ＯＣＨ_３、−ＯＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ、Ｈ、−ＳＨ、−ＮＨ_２、−ＮＨＲ_５又は−ＯＲ_５などのカルボニル活性化基から選択され、
ここで、Ｒ_５はＣ_１−Ｃ_１０飽和又は不飽和炭化水素であり、式Ｖに示すコポリマーを与えるものであり、

・式中、ｘは１〜１００の自然数であり、ｙは１〜１００の自然数であり、
・Ｚは−Ｏ又は−ＮＨから選択され、
・Ａは任意に重合開始剤又はそのフラグメントである末端基であるか、又はＡはヌルであってもよく、
・Ｂは任意に重合開始剤又はそのフラグメントである末端基であるか、又はＢはヌルであってもよく、次に（ｉｉ）式Ｖとリンカー（ＬＤ）に結合した少なくとも一種の治療剤とを反応させて、式Ｉのポリマーコンジュゲートを得ることを含む。

本明細書において、「カルボニル活性化基」という用語は、入ってくる求核剤によって容易に置き換えられるカルボキシル誘導体の脱離基を指す。

別の態様において、本発明のポリマー薬物コンジュゲート（式Ｉ）の調製方法（方法ＩＶ）は、（ｉ）ＰＥＧ（メタ）アクリレートモノマー（式ＩＩ）と

（メタ）アクリレートモノマー（式ＩＩＩｃ）とを重合し、

・式中、ｎは１〜２００の自然数であり、
・Ｒ_１及びＲ_２はＨ又は−ＣＨ_３から独立に選択され、
・Ｒ_３は−Ｈ又は−ＣＨ_３から選択され、
・Ｒ_４は、ペルフルオロフェノキシ、マレイミド、カルボナート、チアゾリドン−２−チオン、Ｎ−オキシベンゾトリアゾール、イミダゾリル、ｏ／ｐ−ニトロフェノキシ、ペンタクロロフェノキシ、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、アセタート、ホルマート、２，３、５−トリクロロフェノール、８−ヒドロキシキノリン、−ＯＨ、−ＯＣＨ_３、−ＯＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ、Ｈ、−ＳＨ、−ＮＨ_２、−ＮＨＲ_５又は−ＯＲ_５などのカルボニル活性化基から選択され、ここで、Ｒ_５はＣ_１−Ｃ_１０飽和又は不飽和炭化水素であり、式Ｖに示すコポリマーを得、

・式中、ｘは１〜１００の自然数であり、ｙは１〜１００の自然数であり、
・Ｚは−Ｏ又は−ＮＨから選択され、
・Ａは任意に重合開始剤又はそのフラグメントである末端基であるか、又はＡはヌルであってもよく、
・Ｂは任意に重合開始剤又はそのフラグメントである末端基であるか、又はＢはヌルであってもよく、（ｉｉ）式Ｖをリンカー（Ｌ）と反応させて式ＩＶに示すようにコポリマーを得て、

式中、ｎ、ｘ、ｙ、Ｒ_１、Ｒ_２及びＲ_３は上記の通りであり、（ｉｉｉ）式ＩＶを少なくとも１種類の治療剤（Ｄ）と反応させて、式Ｉに示すポリマーコンジュゲートを得ることを含む。

本明細書内では、「少なくとも１つの治療剤」及び「少なくとも１種類の治療剤」という用語は、互換的に使用され、構造的に異なる治療剤の使用を指すか、又は言い換えれば２つ、３つ、４つなど１つ以上の異なる治療剤が本発明によるポリマー上に付着することを指し、この用語は、ポリマー構造において使用される定量的な量を指していない。同様に、「少なくとも１種類の（メタ）アクリレート−Ｌ−Ｄモノマー」という用語は、分子Ｄとして２つ、３つ又は４つなど１つ以上の異なる治療剤を有するモノマー構造を指す。

別の態様において、本発明は、方法Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ又はＩＶのいずれか１つによって調製された式Ｉのポリマー薬物コンジュゲートに関する。方法Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ又はＩＶによって調製された式Ｉのポリマー薬物コンジュゲートは、有利な技術的効果を有するランダムコポリマー構造を有する。

一実施形態では、ＰＥＧ（メタ）アクリレート（式ＩＩ）は、好ましくは、ポリエチレングリコールメチルエーテルメタクリレート（ＣＡＳ番号：２６９１５−７２−０）、ポリエチレングリコールメタクリレート（ＣＡＳ番号：２５７３６−８６−１）、ポリエチレングリコールメチルエーテルアクリレート（ＣＡＳ番号：３２１７１−３９−４）、及びポリエチレングリコールアクリレート（ＣＡＳ番号：９０５１−３１−４）を含む群から選択され、化合物の構造については表１を参照されたい。本発明の好ましい実施形態では、Ｒ_１及びＲ_３が両方とも−ＣＨ_３であるポリエチレングリコールメチルエーテルメタクリレートが使用される。

本発明の一実施形態では、ＰＥＧ（メタ）アクリレート（式ＩＩ）は２００〜２０００ｇ／ｍｏｌの平均分子量を有する。好ましい実施形態では、ＰＥＧ（メタ）アクリレート（式ＩＩ）は２５０〜１５００ｇ／ｍｏｌの平均分子量を有し、最も好ましい実施形態では、ＰＥＧ（メタ）アクリレート（式ＩＩ）は３００〜１１００ｇ／ｍｏｌの平均分子量を有する。本発明のＰＥＧ（メタ）アクリレート（式ＩＩ）は、例えば２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、１０００、１０５０、１１００、１１５０、１２００、１２５０、１３００、１３５０、１４００、１４５０、１５００、１５５０、１６００、１６５０、１７００、１７５０、１８００、１８５０、１９００、１９５０、２０００ｇ／ｍｏｌの平均分子量を有することができる。

本発明による切断可能なリンカーは、商業的供給源から入手することができ、又は文献に提供されている既知の方法に従って調製することができる。

別の態様において、本発明は、式Ｉのポリマー薬物コンジュゲートの合成に使用するための式ＩＶのコポリマーに関し、

式中、
−ｘは１〜１００の自然数であり、
−ｙは１〜１００の自然数であり、
−Ｒ_１及びＲ_２はＨ又は−ＣＨ_３から独立に選択され、
−Ｒ_３は−Ｈ、−ＣＨ_３、又は−ＣＨ_２ＣＨ_３から選択され、
−ｎは１〜２００の自然数であり、
−Ｌは切断可能なリンカーであり、
−Ｚは−Ｏ又は−ＮＨから選択され、
−Ａは任意に重合開始剤又はそのフラグメントである末端基であるか、又はＡはヌルであってもよく、
−Ｂは任意に重合開始剤又はそのフラグメントである末端基であるか、又はＢはヌルであってもよい。

別の態様において、本発明は、式Ｉのポリマー薬物コンジュゲートの合成に使用するための式Ｖのコポリマーに関し、

式中、
−ｘは１〜１００の自然数であり、
−ｙは１〜１００の自然数であり、
−Ｒ_１及びＲ_２はＨ又は−ＣＨ_３から独立に選択され、
−Ｒ_３は−Ｈ、−ＣＨ_３、又は−ＣＨ_２ＣＨ_３から選択され、
−Ｚは−Ｏ又は−ＮＨから選択され、
‐Ｒ_４は、ペルフルオロフェノキシ、マレイミド、カルボナート、チアゾリドン−２−チオン、Ｎ−オキシベンゾトリアゾール、イミダゾリル、ｏ／ｐ−ニトロフェノキシ、ペンタクロロフェノキシ、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、アセタート、ホルマート、２，３，５−トリクロロフェノール、８−ヒドロキシキノリン及び−ＯＨ、−ＯＣＨ_３、−ＯＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ、Ｈ、−ＳＨ、−ＮＨ_２、−ＮＨＲ_５又は−ＯＲ_５などのカルボニル活性化基から選択され、
−Ｒ_５は、Ｃ_１〜Ｃ_１０飽和又は不飽和炭化水素であり、
−ｎは１〜２００の自然数であり、
−Ａは任意に重合開始剤又はそのフラグメントである末端基であるか、又はＡはヌルであってもよく、
−Ｂは任意に重合開始剤又はそのフラグメントである末端基であるか、又はＢはヌルであってもよい。

上記で開示したように、式Ｉのポリマー薬物コンジュゲートの調製方法（方法Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ及びＩＶ）は、式ＩＩのモノマーと式ＩＩＩａ又はＩＩＩｂ又はＩＩＩｃのモノマーとを重合する少なくとも１つの重合工程を含む。本発明の一実施形態では、これらの重合工程は開始剤及び／又は溶媒をさらに含む。

本発明のポリマー薬物コンジュゲートは、任意の既知の重合方法によって調製することができる。当技術分野において公知の任意の適切な開始剤及び／又は触媒を、本発明のポリマー薬物コンジュゲートの調製に使用することができる。重合開始剤が使用される場合、開始剤又はそのフラグメントは、得られるポリマー薬物コンジュゲート中に存在し得る。

本発明のポリマー薬物コンジュゲートのポリマー主鎖は、例えば、当技術分野において公知の塊状重合、溶液重合及び／又は懸濁重合技術によって得ることができる。

本発明のポリマー薬物コンジュゲートの調製に使用される重合技術は、フリーラジカル重合又は制御／リビングフリーラジカル重合を介して伝播することができる。本明細書では、「制御／リビングフリーラジカル重合」という用語は、原子移動ラジカル重合（ＡＴＲＰ）、可逆付加フラグメンテーション連鎖移動（ＲＡＦＴ）重合、ヨウ素移動重合（ＩＴＰ）、セレン中心ラジカル媒介重合、テルリド媒介重合（ＴＥＲＰ）、及びニトロキシド媒介重合（ＮＭＰ）を指す。本発明の好ましい実施形態では、ＲＡＦＴ重合を用いて本発明のポリマー薬物コンジュゲートを調製する。

本明細書で使用する重合開始剤は、モノマーと反応して、多数の他のモノマーと連続的に結合してポリマー化合物にすることができる中間化合物を形成する化合物を指す。

本発明の一実施形態では、重合開始剤は４，４’−アゾビス（４−シアノ吉草酸）、４，４’−アゾビス（４−シアノ吉草酸）、１，１’−アゾビス（シクロヘキサンカルボニトリル）、２，２’−アゾビス（２−メチルプロピオンアミジン）ジヒドロクロリド、２，２’−アゾビス（２−メチルプロピオニトリル）（ＡＩＢＮとしても知られる）、過硫酸アンモニウム、ヒドロキシメタンスルフィン酸一ナトリウム塩二水和物、過硫酸カリウム、過硫酸ナトリウム、ｔｅｒｔ−ブチルヒドロペルオキシド、ｔｅｒｔ−ブチルペルアセタート、クメンヒドロペルオキシド、２，５−ジ（ｔｅｒｔ−ブチルペルオキシ）−２，５−ジメチル−３−ヘキシン、ジクミルペルオキシド、２，５−ビス（ｔｅｒｔ−ブチルペルオキシ）−２，５−ジメチルヘキサン、１，１−ビス（ｔｅｒｔ−ブチルペルオキシ）−３，３，５−トリメチルシクロヘキサン、１，１−ビス（ｔｅｒｔ−アミルペルオキシ）シクロヘキサン、過酸化ベンゾイル、２−ブタノンペルオキシド、ｔｅｒｔ−ブチルペルオキシド、ジ−ｔｅｒｔ−アミルペルオキシド、ラウロイルペルオキシド、ｔｅｒｔ−ブチルペルオキシベンゾアート、ｔｅｒｔ−ブチルペルオキシ−２−エチルヘキシルカルボナート、ｔｅｒｔ−ブチルヒドロペルオキシド、２−アジドエチル−２−ブロモイソブチレート、ビス［２−（２−ブロモイソブチリルオキシ）ウンデシル］ジスルフィド、ビス［２−（２’）−ブロモイソブチリルオキシ）エチル］ジスルフィド、２−ブロモイソブタン酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、２−ブロモイソ酪酸無水物、α−ブロモイソブチリルブロマイド、２−（２−ブロモイソブチリルオキシ）エチルメタクリレート、ｔｅｒｔ−ブチルα−ブロモイソブチレート、３−ブチニル２−ブロモイソブチレート、ジペンタエリスリトールヘキサキス（２−ブロモイソブチレート）、ドデシル２−ブロモイソブチレート、エチルα−ブロモイソブチレート、エチレンビス（２−ブロモイソブチレート）、２−ヒドロキシエチル２−ブロモイソブチレート、１−（ＤＬ−１，２−イソプロピリデングリセリル）２−ブロモイソブチレート、メチルα−ブロモイソブチレート、オクタデシル２−ブロモイソブチレート、ペンタエリスリトールテトラキス（２−ブロモイソブチレート）、１−（フタルイミドメチル）２−ブロモイソブチレート、ポリ（エチレングリコール）ビス（２−ブロモイソブチレート）、プロパルギル２−ブロモイソブチレート、１，１，１−トリス（２−ブロモイソブチリルオキシメチル）エタン、１０−ウンデセニル−２−ブロモイソブチレート、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｏ−［１−［４−（クロロメチル）フェニル］エチル］−Ｎ−（２−メチル−１−フェニルプロピル）ヒドロキシルアミン、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−（２−メチル−１−フェニルプロピル）−Ｏ−（１−フェニルエチル）ヒドロキシルアミン、ＴＥＭＰＯ、ＴＥＭＰＯメタクリレート、２，２，５−トリメチル−４−フェニル−３−アザヘキサン−３−ニトロキシド、３，５−ビス（２−ドデシルチオカルボノチオイルチオ−１−オキソプロポキシ）ベンゾアート、３−ブテニル−２−（ドデシルチオカルボノチオイルチオ）−２−メチルプロピオナート、４−シアノ−４−［（ドデシルスルファニルチオカルボニル）スルファニル］ペンタン酸、４−シアノ−４−［（ドデシルスルファニルチオカルボニル）スルファニル］ペンタノール、シアノメチルドデシル、シアノメチル［３−（トリメトキシシリル）プロピル］トリチオカルボナート、２−シアノ−２−プロピルドデシルトリチオカルボナート、Ｓ、Ｓ−ジベンジルトリチオカルボナート、２−（ドデシルチオカルボチオイルチオ）−２−メチルプロピオン酸、２−（ドデシルチオカルボチオイルチオ）−２−メチルプロピオン酸、３−アジド−１−プロパノールエステル、２−（ドデシルチオカルボノチオイルチオ）−２−メチルプロピオン酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、２−（ドデシルチオカルボノチオイルチオ）−２−メチルプロピオン酸ペンタフルオロフェニルエステル、２−（ドデシルチオカルボノチオイルチオ）プロピオン酸、メチル２−（ドデシルチオカルボノチオイルチオ）−２−メチルプロピオナート、ペンタエリスリトールテトラキス［２−（ドデシルチオカルボノチイルチオ）−２−メチルプロピオナート］、フタルイミドメチルブチルトリチオカルボナート、１，１，１−トリス［（ドデシルチオカルボノチオイルチオ）−２−メチルプロピオナート］エタン、ベンジルベンゾジチオエート、シアノメチルベンゾジチオエート、４−シアノ−４−（フェニルカルボノチオイルチオ）ペンタン酸、４−シアノ−４−（フェニルカルボノチオイルチオ）ペンタン酸Ｎ−スクシンイミジルエステル、２−シアノ−２−プロピルベンゾジチオエート、２−シアノ−２−プロピル４−シアノベンゾジチオエート、エチル２−（４−メトキシフェニルカルボノチオイルチオ）アセタート、エチル２−メチル−２−（フェニルチオカルボニルチオ）プロピオナート、エチル２−（フェニルカルボノチオイルチオ）−２−フェニルアセタート、エチル２−（フェニルカルボノチオイルチオ）プロピオナート、１−（メトキシカルボニル）エチルベンゾジチオエート、２−（４−メトキシフェニルカルボノチオイルチオ）エタン酸、２−ニトロ−５−（２−プロピニルオキシ）ベンジル、４−シアノ−４−（フェニルカルボノチオイルチオ）ペンタノアート、２−（フェニルカルボノチオイルチオ）プロパン酸、２−フェニル−２−プロピルベンゾジチオエート、シアノメチルメチル（４−ピリジル）カルバモジチオエート、シアノプロパン−２−イルＮ−メチル−Ｎ−（ピリジン−４−イル）カルバモジチオエート、メチル２−［メチル（４−ピリジニル）カルバモチオイルチオ］プロピオナート、１−スクシンイミジル−４−シアノ−４−［Ｎ−メチル−Ｎ−（４−ピリジル）カルバモチオイルチオ］ペンタノアート、又はその組み合わせの群から選択される。本発明の一実施形態では、ＡＩＢＮが開始剤として使用される。したがって、本発明の一実施形態では、式Ｉのポリマー−コンジュゲートを調製するために使用される方法Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ及び／又はＩＶは、重合反応における開始剤としてのＡＩＢＮの使用を含む。

本発明の一実施形態では、本発明のポリマー薬物コンジュゲートはさらに標的基を含むことができる。本明細書では、「標的基」という用語は、細胞、好ましくは相補的受容体を有する腫瘍細胞に特異的に結合する腫瘍特異的リガンドを指す。

「標的基」という用語は、所望の活性のために本発明のポリマー薬物コンジュゲートを特定の部位に送達するのに役立つ、すなわち化合物の局在化をもたらす分子を意味する。局在化は、分子決定基、ターゲティング剤又はコンジュゲートの分子サイズ、イオン相互作用、疎水性相互作用などの特異的認識によって媒介される。薬剤を特定の組織又は領域に標的化する他のメカニズムは当業者に知られている。標的リガンドには、例えば、標的細胞表面上の分子に結合する分子が含まれる。例示的なターゲティングリガンドには、抗体、抗体フラグメント、有機小分子、ペプチド、ペプトイド、タンパク質、ポリペプチド、オリゴ糖、トランスフェリン、ＨＳ−糖タンパク質、凝固因子、血清タンパク質、β−糖タンパク質、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｍ−ＣＳＦ、ＥＰＯなどが含まれる。本発明の例示的実施形態では、ターゲティングシステムは、ＲＧＤｆＫ、ＥＰＰＴｌペプチド、ビスホスホン酸又は葉酸などのターゲティングリガンドを、担体分子又はリンカーに共有結合させることを含む。

特定の実施形態では、本発明は、ターゲティングリガンドを含む又は含まないポリマー薬物コンジュゲートによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、ターゲティングリガンドは、ＲＧＤｆＫ、ＥＰＰＴ１、ビスホスホン酸又は葉酸であり得る。

本発明の別の実施形態は、式Ｉに示すポリマー薬物コンジュゲートの有効量を対象に投与することを含む、治療剤を送達する方法を提供する。

本発明の別の実施形態は、抗癌剤又は類似の薬剤の送達を必要とする様々な障害の治療に使用するための本発明のポリマー薬物コンジュゲートである。

好ましい実施形態では、本発明は、癌治療用の医薬品として使用するための式Ｉで示すポリマー薬物コンジュゲートに関する。

本明細書中で使用される場合、「治療する」又は「治療すること」は、その状態によって脅かされているか、又はその状態に苦しんでいる被験体において、病的状態を特徴付ける少なくとも１つの症状を阻害、軽減、調節、改善、又は阻止することを意味する。様々な種類の癌の非限定的なリストとしては、癌腫、固形組織の癌腫、扁平上皮癌腫、腺癌、肉腫、神経膠腫、高悪性度神経膠腫、芽細胞腫、神経芽細胞腫、形質細胞腫、組織球腫、黒色腫、腺腫、低酸素腫瘍、骨髄腫、転移性癌、又は一般的な癌が挙げられる。開示された組成物が治療に使用できる癌の具体例には、Ｂ細胞リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、菌状息肉腫、ホジキン病、膀胱癌、脳腫瘍、神経系癌、頭頸部癌、頭頸部扁平上皮癌、腎臓癌、小細胞肺癌及び非小細胞肺癌などの肺癌、神経芽細胞腫／膠芽腫、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、皮膚癌、肝臓癌、黒色腫、口腔、のど、喉頭の扁平上皮癌、大腸癌（ｃｏｌｏｎ ｃａｎｃｅｒ）、子宮頸癌（ｃｅｒｖｉｃａｌ ｃａｎｃｅｒ）、子宮頸癌（ｃｅｒｖｉｃａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、乳癌、及び上皮癌、腎臓癌、泌尿生殖器癌、肺癌、食道癌、頭頸部癌、大腸癌（ｌａｒｇｅ ｂｏｗｅｌ ｃａｎｃｅｒ）、造血系癌、精巣癌、大腸癌及び直腸癌、前立腺癌、又は膵癌が含まれる。

本発明のポリマー薬物コンジュゲートは、子宮頸部及び肛門の異形成、他の異形成、重度の異形成、過形成、異型過形成、及び新形成などの前癌状態の治療にも使用され得る。

本明細書で使用される「癌」及び「癌性」という用語は悪性腫瘍を指すか、又は無秩序な細胞増殖を特徴とする生理学的状態を表す。

本明細書中で考察されるように、本発明のポリマー薬物コンジュゲートは、癌の治療及び／又は予防において用途を見出す。そのような使用のために、本発明のポリマー薬物コンジュゲートは一般に医薬組成物の形態で投与されるであろう。

したがって、本発明によれば、式Ｉによるポリマー薬物コンジュゲートと少なくとも１つの薬学的に許容される希釈剤、賦形剤及び／又は担体とを含む医薬組成物が提供される。「治療」という用語は、治療的療法又は予防的療法のいずれかを含む。

本発明のポリマー薬物コンジュゲートを含む組成物は、それを患者に投与する所望の方法に応じて任意の適切な形態であり得る。本発明のポリマー薬物コンジュゲートを含む組成物は、例えば分散液又は水性懸濁液又は油性懸濁液の形態で経口投与されるように処方することができるか、或いは、例えば皮下、静脈内、筋肉内、胸骨内、腹腔内、皮内、経皮又は他の注入技術のために非経口投与用に処方することができる。本発明のポリマー薬物コンジュゲートを含む組成物はまた、エアロゾル又は共に投与するための溶液及び吸入器又はネブライザーの形態で、吸入による投与のために処方され得る。本発明のポリマー薬物コンジュゲートは、好ましくは、経皮的に、皮下に、鼻腔内に、静脈内に、筋肉内に、腫瘍内に、又は吸入によって被験体に投与される。任意の所与の場合における投与のための最も適切な経路は、本発明のポリマー薬物コンジュゲート中に存在する特定の治療剤、被験体、並びに疾患の性質及び重症度並びに被験体の健康状態に依存する。

本発明のポリマー薬物コンジュゲートは、抗癌剤であり得るか、又は免疫調節剤、抗ウイルス剤、抗感染剤、抗微生物剤、抗感染剤若しくは麻酔剤であるか、又はそれらの組み合わせであり得る１つ以上の治療的に活性の化合物と、例えば同時に、順次又は別々に組み合わせて投与することができる。

この第２の治療剤は、本発明のポリマー薬物コンジュゲート中に存在する治療剤とは異なるという条件で、上に列挙した治療剤から選択することができる。

本明細書の文脈で含まれる（Ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）とは、含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）ことを意味することが意図される。

技術的に適切な場合には、本発明の実施形態を組み合わせることができる。

実施形態は、特定の特徴／要素を含むものとして本明細書に記載されている。本開示はまた、この特徴／要素から構成されるか又は本質的に構成される別の実施形態にも及ぶ。

特許及び出願などの技術的参考文献は、参照により本明細書に組み込まれる。

本明細書に具体的且つ明示的に列挙された任意の実施形態は、単独で、又は１つ以上のさらなる実施形態と組み合わせて、免責事項の基礎を形成し得る。

以下の例を参照しながら本発明を説明するが、これらの例は単なる例示であり、決して本発明の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。

例
例１：メタクリレート官能基を有するグリシン−フェニルアラニン−ロイシン−グリシン（ＧＦＬＧ）切断可能リンカーの調製
ＧＦＧＬ−ＭＡリンカーは、Ｋ．Ｕｌｂｒｉｃｈ ｅｔ ａｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ、６４、２０００、６３−７９に記載された文献の方法に従って調製した。

例２：ドセタキセル−ＧＦＧＬ−メタクリレート（ＭＡ）モノマーの調製
Ｇｈａｎｄｅｈａｒｉ ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍ．２０１１、８（４）、１０９０−１０９９に記載された文献の方法に従って、ドセタキセル（ＤＴＸ）をＧＦＧＬ−ＭＡリンカーとカップリングさせてＤＴＸ−ＧＦＬＧ−ＭＡを得た。

ドセタキセル（０．３３５ｇ、４．１ｍｍｏｌ）、４−（ジメチルアミノ−）ピリジン（ＤＭＡＰ、０．０４９ｇ、４．０ｍｍｏｌ）及びＭＡ−ＧＦＬＧ−ＯＨ（０．１８８ｇ、４．０ｍｍｏｌ）を真空乾燥した。反応混合物を窒素下で無水Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ、５ｍＬ）に溶解し、＜０℃の氷浴（塩／氷）で冷却し、ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＰＣ、７６μＬ、４．８９ｍｍｏｌ）を滴加した。

続いて反応混合物を１時間撹拌した後、氷浴を取り外し、混合物を室温まで温め、一晩撹拌し、出発物質の消失及びＭＡ−ＧＦＬＧ−ドセタキセルの形成について薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ、溶離剤ジクロロメタン（ＤＣＭ）：メタノール（ＭｅＯＨ）（９５：５））で進行をモニターした。ロータリーエバポレーターを用いてＤＭＦを真空下で除去した。生成物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。

例３：側鎖にドセタキセル及びＰＥＧを含むポリマー薬物コンジュゲートの調製
ポリエチレングリコールメチルエーテルメタクリレート（ＰＥＧＭＥＭＡ）（Ｍｎ：３００）及びＤＴＸ−ＧＦＧＬ−ＭＡを、開始剤としてのＡＩＢＮ及び溶媒としてのＤＭＦの存在下で重合させて、ＰＥＧＭＥＭＡ−ＤＴＸを得た。

スキーム１：ＰＥＧＭＥＭＡ及びＤＴＸ−ＧＦＬＧ−ＭＡモノマーの共重合の概略図

上図において、（＊）はポリマー薬物コンジュゲートの末端基としてのＡＩＢＮフラグメントを表す。

ＰＥＧＭＥＭＡの比率を変えることによって、異なる分子量を有するＰＥＧＭＥＭＡ−ＤＴＸコンジュゲートを得ることが可能である。

本発明が様々な分子量のＰＥＧＭＥＭＡ−ＤＴＸコンジュゲートに適用可能であることを実証するために、本発明者らは５０ｋＤａ及び８５ｋＤａのＰＥＧＭＥＭＡ−ＤＴＸポリマー薬物コンジュゲートを調製し、それらを薬物動態試験にかけた。

例４：薬物動態研究の結果
５０ｋＤａ及び８５ｋＤａの分子量を有するＰＥＧＭＥＭＡ−ＤＴＸコンジュゲートを薬物動態試験にかけ、その薬物動態プロファイルを遊離ＤＴＸのものと比較した。

総ＤＴＸについての薬物動態パラメータは、ポリマー薬物コンジュゲート及び遊離ＤＴＸの血漿総ＤＴＸ濃度値を用いて計算した。半減期、分布容積（ＶＤβ）、クリアランス（ＣＬ）、及び曲線下の総面積（ＡＵＣ ｔｏｔａｌ）を計算した。

既知の従来技術と比較するために、出願人は、Ｇｈａｎｄｅｈａｒｉ ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍ．２０１１、８（４）、１０９０‐１０９９に開示された既知の従来技術の方法に従って、５２ｋＤａ及び８５ｋＤａの分子量を有するＮ−（２−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド（ＨＰＭＡ）−ＧＦＬＧ−ＤＴＸポリマーを調製した。類似性を提供するために、ＨＰＭＡ−ＧＦＬＧ−ＤＴＸポリマーはＲＧＤｆＫ標的基なしで調製した。

薬物動態試験の結果を表１に示す。

表１を考慮すると、両方のＰＥＧＭＥＭＡ−ＤＴＸコンジュゲートが遊離の治療剤及びＨＰＭＡ−ＤＴＸコンジュゲートと比較して優れた薬物動態特性を有することが分かる。この結果は、本発明のポリマー薬物コンジュゲートが、遊離ＤＴＸ及びＨＰＭＡポリマーに結合したＤＴＸに関して、より長い半減期、より低いクリアランス及びより大きなＡＵＣを有する優れたポリマー薬物コンジュゲートを提供するという事実を示している。

例５：ＢｘＰＣ３細胞に対するＰＥＧＭＥＭＡ−ＤＴＸコンジュゲート及び遊離ＤＴＸの細胞毒性結果
ヒト膵臓腺癌（ＢｘＰＣ３）細胞を、ＤＭＥＭ培地中で７２時間コンジュゲート及び遊離ＤＴＸで処理した。細胞生存率を測定するためにＣＣＫ−８アッセイを実施した。ＰＥＧＭＥＭＡ−ＤＴＸコンジュゲートは、望ましい遊離ＤＴＸコンジュゲートと比較して低い細胞毒性を示した。ポリマー薬物コンジュゲート及び遊離ＤＴＸのＥＣ_５０値を表２に示す。

例６：ＰＥＧＭＥＭＡ−ＤＴＸ及び遊離ＤＴＸの血液毒性
注射の２４時間前後に血液サンプル（２００μＬ）を採取した。全血計数器を用いてサンプルのヘモグラム値を測定した。注射前の値と比較した注射の２４時間後の相対的変化を図１に示した。白血球（ＷＢＣ）赤血球（ＲＢＣ）並びにヘモグロビン（ＨＧＢ）及びヘマトクリット（ＨＣＴ）値を評価した。低分子量コンジュゲートは、ＷＢＣ上の高分子量コンジュゲートと比較して毒性が低かった。全てのコンジュゲートは、遊離ＤＴＸと比較してＲＢＣに対してより低い毒性を示した。これらの結果は、ＨＧＢとＨＣＴでも検証された。

全体として、薬物動態試験及び細胞毒性試験及び血液毒性試験の結果は、本発明のポリマー薬物コンジュゲートが既知の先行技術に関してより良好で予想外の特性を有し、したがって本発明が現在の最先端技術を超えることを示す。

配列表１〜２ ＜２２３＞合成ペプチド

Claims (14)

1. 式Ｉのポリマー薬物コンジュゲートであって、以下のもの：
   

   

   
   式中、
   ・Ｒ_１及びＲ_２はＨ又は−ＣＨ_３から独立に選択され、
   ・Ｒ_３は−Ｈ又は−ＣＨ_３から選択され、
   ・ｘは１〜１００の自然数であり、
   ・ｙは１〜１００の自然数であり、
   ・ｎは１〜２００の自然数であり、
   ・Ｌは切断可能なリンカーであり、
   ・Ｄは少なくとも１つの治療剤であり、
   ・Ｚは−Ｏ又は−ＮＨから選択され、
   ・Ａは任意に重合開始剤又はそのフラグメントである末端基であるか、又はＡはヌルであり、
   ・Ｂは任意に重合開始剤又はそのフラグメントである末端基であるか、又はＢはヌルである、ポリマー薬物コンジュゲート。
2. リンカーが、ポリ（エチレングリコール）、アミノ酸、ポリ（アミノ酸）、ポリペプチド及び短ペプチドを含む群から選択される、請求項１に記載のポリマー薬物コンジュゲート。
3. リンカーが、カテプシンＢに不安定な短ペプチドである、請求項２に記載のポリマー薬物コンジュゲート。
4. 短ペプチドが、Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ（配列番号１）、Ｖａｌ−Ｃｉｔ（配列番号２）、Ｐｈｅ−Ｌｙｓ（配列番号３）、Ｖａｌ−Ａｌａ（配列番号４）、Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｌｅｕ（配列番号５）を含む群から選択される、請求項３に記載のポリマー薬物コンジュゲート。
5. リンカーが、生理学的条件下で解離する官能基（好ましくはアセタール、エステル、イミン、アミド、ジスルフィド、カルボナート、ヒドラジン、カルバマートからなる群から選択される）を含む、Ｃ_１〜Ｃ_１０炭化水素又はＣ_１〜Ｃ_１０置換若しくはヘテロ置換炭化水素である、請求項１〜４のいずれかに記載のポリマー薬物コンジュゲート。
6. 治療剤（複数可）が、ヌクレオシド類似体、葉酸代謝拮抗薬、他の代謝産物、トポイソメラーゼＩ阻害剤、アントラサイクリン、ポドフィロトキシン、タキサン、ビンカアルカロイド、アルキル化剤、白金化合物、抗ホルモン剤、放射性医薬品、モノクローナル抗体、チロシンキナーゼ阻害剤、哺乳類ラパマイシン標的タンパク質（ｍＴＯＲ）阻害剤、レチノイド、免疫調節剤、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤及び他の薬剤を含む群から選択される、請求項１〜５のいずれかに記載のポリマー薬物コンジュゲート。
7. 治療剤が、ドセタキセル、ペメトレキセド、クロロキン、コンブレタスタチン、ゲムシタビン、ドキソルビシン、５−ＦＵ、５’−デオキシ−５−フルオロシチジン（５’−ＤＦＣＲ）、ラパチニブを含む群から選択される、請求項６に記載のポリマー薬物コンジュゲート。
8. 請求項１〜７のいずれかに記載の式Ｉのポリマー薬物コンジュゲートであって、
   

   

   
   式中、
   ・Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３は−ＣＨ_３であり、
   ・ｘは１〜１００の自然数であり、
   ・ｙは１〜１００の自然数であり、
   ・ｎは１〜２００の自然数であり、
   ・ＬはＧｌｙ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙであり、
   ・Ｄはコンブレタスタチンであり、
   ・Ｚは−ＮＨであり、
   ・Ａは任意に重合開始剤又はそのフラグメントである末端基であるか、又はＡはヌルであり、
   ・Ｂは任意に重合開始剤又はそのフラグメントである末端基であるか、又はＢはヌルであるもの。
9. 以下を含む、式Ｉのポリマー薬物コンジュゲートの調製方法：
   ＰＥＧ（メタ）アクリレートモノマー（式ＩＩ）と
   

   

   
   少なくとも１種類の（メタ）アクリレート−Ｌ−Ｄモノマー（式ＩＩＩａ）とを重合し、
   

   

   
   ここで、Ｒ_１及びＲ_２はＨ又は−ＣＨ_３から独立に選択され、Ｒ_３は−Ｈ又は−ＣＨ_３から選択され、Ｌは切断可能なリンカーであり、Ｄは治療剤であり、ｎは１〜２００の自然数であり、式Ｉのポリマー薬物コンジュゲートを得ること。
10. 以下を含む、式Ｉのポリマー薬物コンジュゲートの調製方法：
    （ｉ）ＰＥＧ（メタ）アクリレートモノマー（式ＩＩ）と（メタ）アクリレート−Ｌモノマー（式ＩＩＩｂ）とを重合し、
    

    

    
    式中、Ｒ_１及びＲ_２はＨ又は−ＣＨ_３から独立に選択され、Ｒ_３は−Ｈ又は−ＣＨ_３から選択され、Ｌは切断可能なリンカーであり、ｎは１〜２００の自然数であり、式ＩＶのコポリマーを得、
    

    

    
    ・式中、ｘは１〜１００の自然数であり、ｙは１〜１００の自然数であり、
    ・Ｚは−Ｏ又は−ＮＨから選択され、
    ・Ａは任意に重合開始剤又はそのフラグメントである末端基であるか、又はＡはヌルであってもよく、
    ・Ｂは任意に重合開始剤又はそのフラグメントである末端基であるか、又はＢはヌルであってもよく、次に（ｉｉ）式ＩＶのコポリマーを少なくとも１つの治療剤（Ｄ）と反応させて式Ｉのポリマー薬物コンジュゲートを得ること。
11. 以下を含む、式Ｉのポリマー薬物コンジュゲートの調製方法：
    （ｉ）ＰＥＧ（メタ）アクリレートモノマー（式ＩＩ）と（メタ）アクリレートモノマー（式ＩＩＩｃ）とを重合し、
    

    

    
    式中、Ｒ_１及びＲ_２はＨ又は−ＣＨ_３から独立に選択され、Ｒ_３は−Ｈ又は−ＣＨ_３から選択され、Ｒ_４は、ペルフルオロフェノキシ、マレイミド、カルボナート、チアゾリドン−２−チオン、Ｎ−オキシベンゾトリアゾール、イミダゾリル、ｏ／ｐ−ニトロフェノキシ、ペンタクロロフェノキシ、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、アセタート、ホルマート、２，３，５−トリクロロフェノール、８−ヒドロキシキノリン、及び−ＯＨ、−ＯＣＨ_３、−ＯＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ、Ｈ、−ＳＨ、−ＮＨ_２、−ＮＨＲ_５及び−ＯＲ_５のカルボニル活性化基から選択され、Ｒ_５は、Ｃ_１〜Ｃ_１０飽和又は不飽和炭化水素であり、ｎは１〜２００の自然数であり、式Ｖのコポリマーを得、
    

    

    
    ・式中、ｘは１〜１００の自然数であり、ｙは１〜１００の自然数であり、
    ・Ｚは−Ｏ又は−ＮＨから選択され、
    ・Ａは任意に重合開始剤又はそのフラグメントである末端基であるか、又はＡはヌルであってもよく、
    ・Ｂは任意に重合開始剤又はそのフラグメントである末端基であるか、又はＢはヌルであってもよく、次に（ｉｉ）式Ｖのコポリマーを、リンカー（Ｌ−Ｄ）に結合した少なくとも１種類の治療剤と反応させて式Ｉのポリマー薬物コンジュゲートを得ること。
12. 以下を含む、式Ｉのポリマー薬物コンジュゲートの調製方法：
    （ｉ）ＰＥＧ（メタ）アクリレートモノマー（式ＩＩ）と（メタ）アクリレートモノマー（式ＩＩＩｃ）とを重合し、
    

    

    
    式中、Ｒ_１及びＲ_２はＨ又は−ＣＨ_３から独立に選択され、Ｒ_３は−Ｈ又は−ＣＨ_３又は−ＣＨ_２ＣＨ_３から選択され、Ｒ_４は、ペルフルオロフェノキシ、マレイミド、カルボナート、チアゾリドン−２−チオン、Ｎ−オキシベンゾトリアゾール、イミダゾリル、ｏ／ｐ−ニトロフェノキシ、ペンタクロロフェノキシ、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、アセタート、ホルマート、２，３，５−トリクロロフェノール、８−ヒドロキシキノリン、及び−ＯＨ、−ＯＣＨ_３、−ＯＣＨ_２ＣＨ_３、Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ、Ｈ、−ＳＨ、−ＮＨ_２、−ＮＨＲ_５又は−ＯＲ_５などのカルボニル活性化基から選択され、Ｒ_５は、Ｃ_１〜Ｃ_１０飽和又は不飽和炭化水素であり、ｎは１〜２００の自然数であり、式Ｖのコポリマーを得、
    ・式中、ｘは１〜１００の自然数であり、ｙは１〜１００の自然数であり、
    ・Ａは任意に重合開始剤又はそのフラグメントである末端基であるか、又はＡはヌルであってもよく、
    ・Ｂは任意に重合開始剤又はそのフラグメントである末端基であるか、又はＢはヌルであってもよく、次に（ｉｉ）式Ｖのコポリマーをリンカー（Ｌ）と反応させて式ＩＶのコポリマーを得て、（ｉｉｉ）式ＩＶのコポリマーを少なくとも１種類の治療剤（Ｄ）と反応させて式Ｉのポリマーコンジュゲートを得ること。
13. 請求項１〜８のいずれかに記載の式Ｉのポリマー薬物コンジュゲートを含む医薬組成物。
14. 癌の治療及び／又は予防用の医薬品として使用するための、請求項１〜８のいずれかに記載の式Ｉのポリマー薬物コンジュゲート。
    

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