JP6901731B2 - 膵臓癌の検査方法 - Google Patents

膵臓癌の検査方法 Download PDF

Info

Publication number
JP6901731B2
JP6901731B2 JP2018565640A JP2018565640A JP6901731B2 JP 6901731 B2 JP6901731 B2 JP 6901731B2 JP 2018565640 A JP2018565640 A JP 2018565640A JP 2018565640 A JP2018565640 A JP 2018565640A JP 6901731 B2 JP6901731 B2 JP 6901731B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
sugar chain
antibody
pancreatic cancer
compound
sialyllactose
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
JP2018565640A
Other languages
English (en)
Other versions
JPWO2018143336A1 (ja
Inventor
東　清史
清史 東
斉藤　幸一
幸一 斉藤
佳太 山田
佳太 山田
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
OHTANI GAKUEN
Sumitomo Chemical Co Ltd
Original Assignee
OHTANI GAKUEN
Sumitomo Chemical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by OHTANI GAKUEN, Sumitomo Chemical Co Ltd filed Critical OHTANI GAKUEN
Publication of JPWO2018143336A1 publication Critical patent/JPWO2018143336A1/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP6901731B2 publication Critical patent/JP6901731B2/ja
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G01N33/57407—Specifically defined cancers
    • G01N33/57438—Specifically defined cancers of liver, pancreas or kidney
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
    • A61B5/00—Measuring for diagnostic purposes; Identification of persons
    • A61B5/42—Detecting, measuring or recording for evaluating the gastrointestinal, the endocrine or the exocrine systems
    • A61B5/4222—Evaluating particular parts, e.g. particular organs
    • A61B5/425—Evaluating particular parts, e.g. particular organs pancreas
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/0005—Vertebrate antigens
    • A61K39/0011—Cancer antigens
    • A61K39/001169—Tumor associated carbohydrates
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/5436—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals with ligand physically entrapped within the solid phase
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/564—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for pre-existing immune complex or autoimmune disease, i.e. systemic lupus erythematosus, rheumatoid arthritis, multiple sclerosis, rheumatoid factors or complement components C1-C9
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G01N33/57484—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumor, cancer, neoplasia, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides, metabolites
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6854—Immunoglobulins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C07K16/303—Liver or Pancreas
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2400/00—Assays, e.g. immunoassays or enzyme assays, involving carbohydrates
    • G01N2400/02—Assays, e.g. immunoassays or enzyme assays, involving carbohydrates involving antibodies to sugar part of glycoproteins

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Rehabilitation Therapy (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Surgery (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

本発明は、膵臓癌の検査方法、膵臓癌の検査薬などに関する。
膵臓癌の年間死亡者数は、癌の中で男性では5番目、女性では4番目に多く（2014年）、その数は増加傾向にある。膵臓癌の死亡者数の多さの一因として、早期発見が困難なことが挙げられる。膵臓癌は、初期に特徴的な症状が無く、早期発見が困難とされている。そのため、膵臓癌と診断されたときには既に癌が進行しており、治療が困難な場合が多い。
糖鎖抗原又はそれに対する抗体は、各種癌の検査指標として報告されている。膵臓癌の検査方法として、例えば糖鎖抗原の一種であるCA19-9（carbohydrate antigen 19-9）を用いる方法が報告されている（非特許文献１）。
Erxi W. Shuang Z. Kruttika B. Qingyong M. :CA19-9 and pancreatic cancer. Clin Adv Hematol Oncol. 2013 11(1):53-55.
本発明は、膵臓癌の検査方法を提供することを課題とする。さらには、本発明は、より早期の膵臓癌であっても判定可能な、膵臓癌の検査方法を提供することを課題とする。
本発明は、健常人に比して膵臓癌患者では、血清中の抗糖鎖抗体（抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体及び抗(LN)3糖鎖抗体）値が低い傾向にある、及び、該抗糖鎖抗体値を指標とすることにより膵臓癌の罹患の可能性を判定できる、との知見に基づく。
本発明は、一態様として下記の態様を包含する：
項１． 膵臓癌の罹患の可能性を検査する方法であって、（1）被検体から採取された生体試料における抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体及び抗(LN)3糖鎖抗体からなる群より選択される少なくとも1種の抗糖鎖抗体の量又は濃度を測定する工程を含み、前記抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体がNeu5Acα(2→3)Galβ(1→4)Glcで表される糖鎖に結合することができる抗体又は前記糖鎖を認識する抗体であり、且つ前記抗(LN)3糖鎖抗体がGalβ1→3GlcNAcβ1→3Galβ1→4GlcNAcで表される糖鎖に結合することができる抗体又は前記糖鎖を認識する抗体である、方法．
項２． 前記工程（1）が、（1a）3-シアリルラクトース糖鎖構造を含む化合物1及び(LN)3糖鎖構造を含む化合物2からなる群より選択される少なくとも1種の化合物と、前記生体試料とを接触させる工程、並びに（1b）前記化合物に結合した抗糖鎖抗体の量を測定する工程を含む、項１に記載の方法．
項３． さらに、（2a）前記工程（1）で測定された前記抗糖鎖抗体の量又は濃度の値が、予め設定されたカットオフ値以下である場合に、前記被検体が膵臓癌に罹患している可能性が高いと判定する工程を含む、項１又は２に記載の方法．
項４． 前記カットオフ値が、膵臓癌に罹患していない被検体から採取された生体試料における前記抗糖鎖抗体の量又は濃度の値の平均値、パーセンタイル値、又は最小値である、項３に記載の方法．
項５． さらに、（2c）前記工程（1）で測定された前記抗糖鎖抗体の量又は濃度の値が、予め設定されたカットオフ値以下である場合に、前記被検体が膵臓癌に罹患している可能性が高いと仮判定する工程、（3c）前記生体試料における糖鎖膵臓癌マーカーの量又は濃度を測定し、測定された前記糖鎖膵臓癌マーカーの量又は濃度の値が、予め設定されたカットオフ値以上である場合に、前記被検体が膵臓癌に罹患している可能性が高いと仮判定する工程、並びに（3d）前記工程（2c）の仮判定及び前記工程（3c）の仮判定に基づき、前記被検体が膵臓癌に罹患している可能性が高いと判定する工程を含む、項１又は２に記載の方法．
項６． 前記工程（3d）において、前記工程（2c）の仮判定及び前記工程（3c）の仮判定のいずれか又は両方で、前記被検体が膵臓癌に罹患している可能性が高いとの仮判定である場合に、前記被検体が膵臓癌に罹患している可能性が高いと判定する、項５に記載の方法．
項７． 前記抗糖鎖抗体の量又は濃度のカットオフ値が、膵臓癌に罹患していない被検体から採取された生体試料における前記抗糖鎖抗体の量又は濃度の値の平均値、パーセンタイル値、又は最小値である、項５又は６に記載の方法．
項８． 前記糖鎖膵臓癌マーカーが、CA19-9及びDUPAN-2からなる群より選択される少なくとも1種である、項５〜７のいずれかに記載の方法．
項９． 前記糖鎖膵臓癌マーカーがCA19-9である、項８に記載の方法．
項１０． 前記抗糖鎖抗体がIgGである、項１〜９のいずれかに記載の方法．
項１１． 前記生体試料が体液又は体液由来の試料である、項１〜１０のいずれかに記載の方法．
項１２． 前記体液が全血、血清、及び血漿からなる群より選択される少なくとも1種である、項１１に記載の方法．
項１３． 検査対象である前記膵臓癌がステージ0〜2の膵臓癌である、項１〜１２のいずれかに記載の方法．
項１４． 3-シアリルラクトース糖鎖構造を含む化合物1及び(LN)3糖鎖構造を含む化合物2からなる群より選択される少なくとも1種の化合物を含み、前記3-シアリルラクトース糖鎖構造がNeu5Acα(2→3)Galβ(1→4)Glcで表される糖鎖構造であり、且つ前記(LN)3糖鎖構造がGalβ1→3GlcNAcβ1→3Galβ1→4GlcNAcで表される糖鎖構造である、膵臓癌の検査薬。
また、本発明は、別の一態様として下記の態様も包含する：
項１５． 膵臓癌の罹患の可能性の判定を補助する方法であって、（1）被検体から採取された生体試料における抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体及び抗(LN)3糖鎖抗体からなる群より選択される少なくとも1種の抗糖鎖抗体の量又は濃度を測定する工程を含む、方法．
項１６． 被検体における抗糖鎖抗体の量又は濃度を測定する方法であって、（1）被検体から採取された生体試料における抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体及び抗(LN)3糖鎖抗体からなる群より選択される少なくとも1種の抗糖鎖抗体の量又は濃度を測定する工程を含む、方法．
項１７． 工程（1）において、抗糖鎖抗体として抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体及び抗(LN)3糖鎖抗体からなる群より選択される1種の抗糖鎖抗体のみの量又は濃度を測定する、項１６に記載の方法．
項１８． 工程（1）が、
3-シアリルラクトース糖鎖構造を含む化合物1及び(LN)3糖鎖構造を含む化合物2からなる群より選択される少なくとも1種の化合物を、固相に固定する工程、
固相に固定された化合物と、被検体から採取された生体試料とを接触させる工程、
生体試料と接触させた化合物が固定された固相を、トリスヒドロキシメチルアミノメタン及び／又はエーテル型非イオン界面活性剤を含む溶液で洗浄する工程、
洗浄された固相に、ウシ血清アルブミンを含み、さらにトリスヒドロキシメチルアミノメタン及び／又はエーテル型非イオン界面活性剤を含むブロッキング溶液を添加する工程、並びに
固相に固定された化合物に結合した抗体の量又は濃度を測定する工程を含む、項１６又は１７に記載の方法．
項１９． 被検体における膵臓癌を診断する方法であって、
（1）被検体から採取された生体試料における抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体及び抗(LN)3糖鎖抗体からなる群より選択される少なくとも1種の抗糖鎖抗体の量又は濃度を測定する工程、
（2a）前記工程（1）で測定された前記抗糖鎖抗体の量又は濃度の値が、予め設定されたカットオフ値以下である場合に、前記被検体が膵臓癌に罹患している可能性が高いと判定する工程、並びに
（3a）前記工程（2a）で膵臓癌に罹患している可能性が高いと判定された被験者に対して膵臓癌の診断方法を適用する工程を含む、方法．
項２０． 前記工程（3a）において適用される膵臓癌の診断方法が、生検法、PET検査法、CT検査法、及び超音波検査法からなる群より選択される少なくとも1種である、項１９に記載の方法．
項２１． 被検体における膵臓癌を診断及び治療する方法であって、
（1）被検体から採取された生体試料における抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体及び抗(LN)3糖鎖抗体からなる群より選択される少なくとも1種の抗糖鎖抗体の量又は濃度を測定する工程；
（2a）前記工程（1）で測定された前記抗糖鎖抗体の量又は濃度の値が、予め設定されたカットオフ値以下である場合に、前記被検体が膵臓癌に罹患している可能性が高いと判定する工程、又は
（3b）前記工程（1）で測定された前記抗糖鎖抗体の量又は濃度の値（被検抗糖鎖抗体値）が、予め設定されたカットオフ値以下である場合に、前記被検体が膵臓癌に罹患している可能性が高いと判定する工程、及び膵臓癌に罹患している可能性が高いと判定された被験者に対して膵臓癌の診断方法を適用する工程；並びに
（4）前記工程（2a）で膵臓癌に罹患している可能性が高いと判定された被験者、又は前記工程（3b）で膵臓癌に罹患していると診断された被験者に対して膵臓癌治療を行う工程、
を含む、方法．
項２２． 膵臓癌罹患の可能性の検査薬としての使用のための、3-シアリルラクトース糖鎖構造を含む化合物1及び(LN)3糖鎖構造を含む化合物2からなる群より選択される少なくとも1種の化合物．
項２３． 膵臓癌の罹患の可能性を検査するための、3-シアリルラクトース糖鎖構造を含む化合物1及び(LN)3糖鎖構造を含む化合物2からなる群より選択される少なくとも1種の化合物の使用．
項２４．膵臓癌罹患の可能性の検査薬の製造のための、3-シアリルラクトース糖鎖構造を含む化合物1及び(LN)3糖鎖構造を含む化合物2からなる群より選択される少なくとも1種の化合物の使用．
本発明によれば、膵臓癌の検査方法を提供することができる。本発明の検査方法によれば、より高い感度で膵臓癌（好適にはより初期の膵臓癌）の罹患の可能性を検査すること、さらには膵臓癌をより早期に発見することが可能になる。
参考例1（b）で測定及び算出された、健常人検体、及び膵臓癌患者検体の血清における、抗糖鎖抗体（抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体及び抗(LN)3糖鎖抗体）濃度（抗糖鎖抗体値）を示す。各グラフ縦軸が抗糖鎖抗体値を示す（単位は、蛍光強度値／IgG量（μg））。横軸中、「健常」は健常人検体の結果を示し、「膵臓癌」は膵臓癌患者検体の結果を示し、「N」は検体数を示す。 実施例1及び比較例1で行われた、ステージごとの膵臓癌罹患の判定結果を示す。縦軸は、判定指標を示す。横軸は、膵臓癌のステージを示す。グラフ中の横線は、予め設定されたカットオフ値を示す。グラフ中の分数は、（膵臓癌を罹患している可能性が高いと判定された検体数／膵臓癌患者検体数）＝感度を示す。 参考例2及び実施例2で測定された、健常人検体、及び膵臓癌患者検体の血清中の抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体濃度を示す。 参考例2及び実施例2で測定された、健常人検体、及び膵臓癌患者検体の血清中の抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体濃度（μg/mL）について、ROC曲線を示す。縦軸は、感度を示す。横軸は、100%から特異度％を減じた値（100%−特異度％）を示す。
本明細書中において、「含有」及び「含む」なる表現については、「含有」、「含む」、「実質的にからなる」及び「のみからなる」という概念を含む。
1．膵臓癌罹患の可能性の検査方法
本発明は、その一態様において、膵臓癌の罹患の可能性を検査する方法であって、（1）被検体から採取された生体試料における抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体及び抗(LN)3糖鎖抗体からなる群より選択される少なくとも1種の抗糖鎖抗体の量又は濃度を測定する工程（工程（1））を含む方法（本明細書において、「本発明の検査方法」と示すこともある。）に関する。以下、これについて説明する。
1-1．工程（1）
検査対象である膵臓癌は、特に制限されず、あらゆる種類、ステージなどの膵臓癌を包含する。検査対象である膵臓癌の種類としては、例えば膵管癌、膵内分泌腫瘍、膵管内乳頭粘液性腫瘍、粘液性嚢胞腫瘍、腺房細胞癌などが挙げられ、好ましくは膵管癌などが挙げられる。検査対象である膵臓癌のステージとしては、より早期のステージから順に、ステージ0、ステージ1、ステージ2、ステージ3、及びステージ4（ステージ4a、ステージ4b）が挙げられる。本発明の検査方法は、初期の膵臓癌であっても判定できる点で有用である。本発明の検査方法では、ステージ2又はステージ2より初期の膵臓癌、特にステージ1又は2の膵臓癌において公知の方法より高い精度で判定できる。
この観点から、検査対象である膵臓癌のステージは、好ましくはステージ0〜3、より好ましくはステージ0〜2、さらに好ましくはステージ1〜2である。
被検体は、本発明の検査方法の対照生物であり、その生物種は特に制限されない。被検体の生物種としては、例えばヒト、サル、マウス、ラット、イヌ、ネコ、ウサギなどの種々の哺乳類動物が挙げられ、好ましくはヒトが挙げられる。
被検体の膵臓癌に関する状態は、特に制限されない。被検体としては、例えば膵臓癌に罹患しているかどうか不明な検体、膵臓癌罹患歴の無い検体、膵臓癌罹患歴があり且つ膵臓癌治療を受けた検体、他の判定方法によって膵臓癌に罹患している（或いは罹患していない）と既に判定されている検体などが挙げられる。
生体試料は、抗糖鎖抗体を含有し得るものであれば特に制限されない。生体試料としては、例えば全血、血清、血漿、唾液、髄液、関節液、尿、組織液、汗、涙、唾液などの体液や、これらの体液由来の試料が挙げられる。体液由来の試料としては、体液から調製される試料である限り特に制限されず、例えば体液から、該体液に含まれる抗体（好ましくは抗糖鎖抗体、より好ましくは抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体及び抗(LN)3糖鎖抗体からなる群より選択される少なくとも1種の抗糖鎖抗体）を濃縮、精製などして得られる試料などが挙げられる。体液としては、好ましくは全血、血清、血漿などが挙げられる。生体試料は、1種単独で採用してもよいし、2種以上を組み合わせて採用してもよい。
生体試料は、当業者に公知の方法で被検体から採取することができる。例えば、全血は、注射器などを用いた採血によって採取することができる。なお、採血は、医師、看護師などの医療従事者が行うことが望ましい。血清は、血液から血球及び特定の血液凝固因子を除去した部分であり、例えば、血液を凝固させた後の上澄みとして得ることができる。
血漿は、血液から血球を除去した部分であり、例えば、血液を凝固させない条件下で遠心分離に供した際の上澄みとして得ることができる。
3-シアリルラクトース糖鎖とは、Neu5Acα(2→3)Galβ(1→4)Glcで表される糖鎖、すなわちノイラミン酸（Neu5Ac）の2位のヒドロキシ基とガラクトース（Gal）の3位のヒドロキシ基がαグリコシド結合によって連結され、且つ該ガラクトース（Gal）の1位のヒドロキシ基とグルコース（Glc）の4位のヒドロキシ基がβグリコシド結合によって連結されてなる糖鎖である。3-シアリルラクトース糖鎖の構造式の一例としては、下記式（A）［式中、Acはアセチル基を示す。］が挙げられる。
Figure 0006901731
(LN)3糖鎖とは、Galβ1→3GlcNAcβ1→3Galβ1→4GlcNAcで表される糖鎖、すなわちガラクトース（Gal、便宜上「ガラクトースA」と示すこともある。）の1位のヒドロキシ基とN-アセチルグルコサミン（GlcNAc、便宜上「N-アセチルグルコサミンA」と示すこともある）の3位のヒドロキシ基がβグリコシド結合によって連結され、該N-アセチルグルコサミンAの1位のヒドロキシ基とガラクトースAとは別のガラクトース（Gal、便宜上「ガラクトースB」と示すこともある）の3位のヒドロキシ基がβグリコシド結合によて連結され、且つ該ガラクトースBの1位のヒドロキシ基とN-アセチルグルコサミンAとは別のN-アセチルグルコサミンの4位のヒドロキシ基がβグリコシド結合によって連結されてなる糖鎖である。(LN)3糖鎖の構造式の一例としては、下記式（B）［式中、Acはアセチル基を示す。］が挙げられる。
Figure 0006901731
抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体は3-シアリルラクトース糖鎖に（好ましくは特異的に）結合することができる抗体及び／又は3-シアリルラクトース糖鎖を（好ましくは特異的に）認識する抗体であり、この限りにおいて特に制限されない。抗(LN)3糖鎖抗体は、(LN)3糖鎖に（好ましくは特異的に）結合することができる抗体及び／又は(LN)3糖鎖を（好ましくは）特異的に認識する抗体であり、この限りにおいて特に制限されない。本明細書においては、これらを総称して、「本発明の抗糖鎖抗体」と示すこともある。
工程（1）においては、抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体及び抗(LN)3糖鎖抗体からなる群より選択される少なくとも1種の抗体の量又は濃度を測定する。工程（1）においては、検査の効率性の観点から、抗糖鎖抗体として抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体及び抗(LN)3糖鎖抗体からなる群より選択される1種のみの量又は濃度を測定することが望ましい。
検出対象である本発明の抗糖鎖抗体のアイソタイプは、特に制限されない。該アイソタイプとしては、例えばIgG（IgG1、IgG2、IgG3、IgG4）、IgM、IgA、IgD、IgEなどが挙げられる。これらの中でも、より高い精度で膵臓癌の罹患の可能性を検査できるという観点から、好ましくはIgGなどが挙げられる。
本発明の検査方法に含まれる抗体量を測定する工程において、抗糖鎖抗体の量又は濃度を測定する方法は、該抗体の量及び／又は濃度を測定可能な方法である限りにおいて、特に制限されない。該方法としては、例えばイムノアッセイが挙げられる。イムノアッセイは、直接法、間接法、均一法、不均一法、競合法、非競合法などを問わず、広く採用することができる。イムノアッセイとして、より具体的には、例えばELISA（例えば直接法、間接法、サンドイッチ法、競合法など）、ラジオイムノアッセイ（RIA）、イムノラジオメトリックアッセイ（IRMA）、エンザイムイムノアッセイ（EIA）、サンドイッチEIA、イムノクロマト、ウェスタンブロット、免疫沈降、スロット或いはドットブロットアッセイ、免疫組織染色、蛍光イムノアッセイ、アビジン−ビオチン又はストレプトアビジン−ビオチン系を用いるイムノアッセイ、表面プラズモン共鳴（SPR）法を用いるイムノアッセイなどが挙げられる。検出方法は、1種単独で採用してもよいし、2種以上を組み合わせて採用してもよい。
抗体の量又は濃度を測定する工程において、抗体を検出する際に用いられる標識物（例えば標識抗体など）における標識の種類は特に制限されない。標識としては、例えば蛍光物質、発光物質、色素、酵素、金コロイド、放射性同位体などが挙げられる。これらの中でも、ペルオキシダーゼやアルカリホスファターゼなどの酵素標識は、安全性、経済性、検出感度などの観点から、好ましい。
工程（1）により、被検体から採取された生体試料における、本発明の抗糖鎖抗体の量又は濃度を測定、算出することができる。測定、算出方法の詳細については、工程（1）の下記好適な態様において説明する。
工程（1）の好適な一態様としては、（1a）3-シアリルラクトース糖鎖構造を含む化合物1及び(LN)3糖鎖構造を含む化合物2からなる群より選択される少なくとも1種の化合物と、被検体から採取された生体試料とを接触させる工程（工程（1a））、並びに（1b）前記化合物に結合した抗体量を測定する工程（工程（1b））を含む工程を例示することができる。
3-シアリルラクトース糖鎖構造を含む化合物1とは、3-シアリルラクトース糖鎖そのもの、或いは3-シアリルラクトース糖鎖を部分構造として含む化合物である。後者の場合、3-シアリルラクトース糖鎖構造以外の構造は、特に制限されず、抗原性を有しない構造であっても、抗原性を有する構造であってもよい。抗原性を有しない構造としては、例えば糖鎖アレイを作製する際にスペーサーとしてはたらく構造が挙げられる。抗原性を有する構造の場合、化合物1には抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体以外の抗体が比較的多く結合すると考えられ、これがバックグラウンドになることが予想されるが、バックグラウンドが大きい場合は、該「抗原性を有する構造」のみからなる化合物を用いた測定を別途行い、得られた測定値をバックグラウンド値として減じればよい。化合物1としては、好ましくは3-シアリルラクトース糖鎖構造を含む糖鎖（例えば糖残基数3〜30、好ましくは3〜10、より好ましくは3〜5、さらに好ましくは3）や、該「3-シアリルラクトース糖鎖構造を含む糖鎖」が合成ポリマー（例えばポリアクリルアミド、ポリリジン、ポリスチレン、ポリエチレン、ポリエステル、ポリ塩化ビニル、ポリウレタンなど）に共有結合してなる糖鎖ポリマー、該糖鎖が血清アルブミンやムチンに共有結合している糖タンパク、該糖鎖がペプチドに共有結合している糖ペプチド、糖鎖デンドリマー、還元的アミノ化反応を利用して標識された糖鎖などが挙げられる。化合物1は、公知の方法に従って合成したものを用いることもできるし、各種市販品、例えば3´-sialyl lactose-PAA（GlycoTech Corporation製、カタログ番号：08-038）を用いることもできる。
(LN)3糖鎖構造を含む化合物2とは、(LN)3糖鎖そのもの、或いは(LN)3糖鎖を部分構造として含む化合物である。後者の場合、(LN)3糖鎖構造以外の構造は、特に制限されず、抗原性を有しない構造であっても、抗原性を有する構造であってもよい。抗原性を有しない構造としては、例えば糖鎖アレイを作製する際にスペーサーとしてはたらく構造が挙げられる。抗原性を有する構造の場合、化合物2には抗(LN)3糖鎖抗体以外の抗体が比較的多く結合すると考えられ、これがバックグラウンドになることが予想されるが、バックグラウンドが大きい場合は、該「抗原性を有する構造」のみからなる化合物を用いた測定を別途行い、得られた測定値をバックグラウンド値として減じればよい。化合物2としては、好ましくは(LN)3糖鎖構造を含む糖鎖（例えば糖残基数4〜30、好ましくは4〜6、より好ましくは4〜5、さらに好ましくは4）や、該「(LN)3糖鎖構造を含む糖鎖」が合成ポリマー（例えばポリアクリルアミド、ポリリジン、ポリスチレン、ポリエチレン、ポリエステル、ポリ塩化ビニル、ポリウレタンなど）に共有結合してなる糖鎖ポリマー、該糖鎖が血清アルブミンやムチンに共有結合している糖タンパク、該糖鎖がペプチドに共有結合している糖ペプチド、糖鎖デンドリマー、還元的アミノ化反応を利用して標識された糖鎖などが挙げられる。化合物2は、公知の方法に従って合成したものを用いることもできるし、各種市販品、例えばGalβ1→3GlcNAcβ1→3Galβ1→4GlcNAc-PAA（GlycoTech Corporation製、カタログ番号：08-096）を用いることもできる。
工程（1a）における接触の態様は、特に制限されず、上述した抗糖鎖抗体の量又は濃度を測定する方法（例えば各種イムノアッセイなど）の種類に応じて、適切な態様を選択することができる。接触態様としては、例えば生体試料中の抗体及び糖鎖抗原（化合物1及び／又は化合物2）のいずれか一方のみを固相に固定した状態で接触させる態様、これらの両方とも固相に固定しない状態で接触させる態様などが挙げられる。これらの中でも、効率性などの観点から、好ましくは糖鎖抗原（化合物1及び／又は化合物2）のみを固相に固定した状態で接触させる態様が挙げられる。 工程（1a）における接触の態様において、生体試料中の抗体及び糖鎖抗原のいずれか一方のみを固相に固定する場合、固定後に、トリスヒドロキシメチルアミノメタン（Ｔｒｉｓ）及び／又はエーテル型非イオン界面活性剤を含む溶液で、抗体または抗体のいずれか一方が固定された固相を洗浄することが好ましい。
固相としては、生体試料中の抗体又は糖鎖抗原（化合物1及び／又は化合物2）を固定可能なものである限り特に制限されない。該固相としては、例えばポリスチレン、ガラス、ニトロセルロースなどを主成分として含むプレート、スライド、膜などが挙げられる。固相は、生体試料中の抗体又は糖鎖抗原（化合物1及び／又は化合物2）をより容易に固定させるための成分、例えば易反応性化合物（例えば易反応性基を有する化合物、金コロイドなど）でコーティングされたものであってもよい。易反応性基を有する化合物としては、糖鎖または糖鎖誘導体と共有結合を形成しうる基であって、例えば、(１Ｈ−イミダゾール−１−イル)カルボニル基、スクシンイミジルオキシカルボニル基、エポキシ基、アルデヒド基、アミノ基、チオール基、カルボキシル基、アジド基、シアノ基、活性エステル基（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシカルボニル基、ペンタフルオロフェニルオキシカルボニル基、パラニトロフェニルオキシカルボニル基等）、又はハロゲン化カルボニル基（塩化カルボニル基、フッ化カルボニル基、臭化カルボニル基、ヨウ化カルボニル基）等を有する化合物が挙げられる。
易反応性基を有する化合物としては、例えば、エポキシシラン、及びポリリジン等が挙げられる。
易反応性化合物でコーティングされた固相を用いる場合、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）緩衝液を用いて易反応性化合物をブロッキングすることが好ましく、ブロッキング時間は、６０分間以上であることが好ましい。
ブロッキング液は、さらにトリスヒドロキシメチルアミノメタン（Ｔｒｉｓ）及び／又はエーテル型非イオン界面活性剤を含むことが好ましい。
工程（1b）における抗体の量又は濃度の測定の態様は、特に制限されず、上述した抗糖鎖抗体の量又は濃度を測定する方法（例えば各種イムノアッセイなど）の種類に応じて、適切な態様を選択することができる。該測定は、例えば用いられた標識物の標識に由来するシグナルを定量することによって行うことができる。より具体的な態様としては、例えば糖鎖抗原（化合物1及び／又は化合物2）に結合した抗体に対して標識抗体を接触させ、結合した標識抗体の標識に由来するシグナルを定量することによって行うことができる。
その一例としてELISA法がある。ELISA法によれば、標準抗体を用いて標準曲線を作成し、本発明の抗糖鎖抗体の濃度を定量することができる。標準抗体は、例えば、ビオチン標識糖鎖抗原とストレプトアビジン-アガロース樹脂とを用いたアフィニティー精製によって、市販の抗体から調製できる。まず、適当なELISA用プレートのウエルを糖鎖抗原で被覆した後に、ＢＳＡ緩衝液でブロッキングする。次に、各濃度の標準抗体または検体をウエルに加えて一定時間静置後にウエルを洗浄し、ペルオキシダーゼで標識された二次抗体をウエルに加えて一定時間静置する。その後に、ウエルを洗浄し、ペルオキシダーゼの基質をウエルに加えて一定時間静置して発色させ、硫酸等の反応停止液を加えた後に、プレートリーダーを用いて吸光度を測定する。標準抗体の濃度とその吸光度とに基づいて標準曲線を作成した後、標準曲線に基づいて、検体中の抗糖鎖抗体の濃度を定量する。
得られたシグナル量に基づいて、本発明の抗糖鎖抗体の量を算出することができる。例えば、非競合法の場合であれば、得られたシグナル量をそのまま本発明の抗糖鎖抗体の量とすることができる。また、別の例として、競合法の場合であれば、得られたシグナル量と本発明の抗糖鎖抗体の量は、反比例の関係にあるので、この関係に基づいて得られたシグナル量から本発明の抗糖鎖抗体の量を算出することができる。
また、本発明の抗糖鎖抗体の量を、生体試料の量や、生体試料内の成分量（例えば抗体全量、検出対象の本発明の抗糖鎖抗体と同じアイソタイプの抗体全量など）で除することによって、本発明の抗糖鎖抗体の濃度を算出することができる。
工程（1）を含む本発明の検査方法によれば、膵臓癌罹患の検出指標である被検抗糖鎖抗体値を提供することができ、これにより膵臓癌の罹患の可能性の判定などを補助することができる。
1-2．工程（2a）
本発明の検査方法は、一態様として、さらに、（2a）工程（1）で測定された本発明の抗糖鎖抗体の量又は濃度の値が、予め設定されたカットオフ値以下である場合に、前記被検体が膵臓癌に罹患している可能性が高いと判定する工程（工程（2a））を含むことが好ましい。ここで、「膵臓癌に罹患している可能性」とは、「生体試料採取時に膵臓癌に罹患している可能性」を意味する。
該工程（2a）を含む本発明の検査方法によれば、膵臓癌に罹患している可能性を判定することが可能となる。また、本発明の検査方法はより高い感度で膵臓癌に罹患している可能性を判定できるので、この工程（2a）を含む本発明の検査方法により、真に膵臓癌に罹患している被検体を、より確実に「膵臓癌に罹患している」と判定できる（すなわち、「膵臓癌に罹患していない」と誤判定する可能性をより低減することができる）。
カットオフ値は、感度、特異度、陽性的中率、陰性的中率などの観点から当業者が適宜設定することができ、例えば、膵臓癌に罹患していない被検体から採取された生体試料における本発明の抗糖鎖抗体の量又は濃度の値の平均値、パーセンタイル値、又は最小値とすることができる。より具体的には、例えば、膵臓癌に罹患している被検体、及び膵臓癌に罹患している被検体から採取された生体試料における、本発明の抗糖鎖抗体の量又は濃度を測定し、該測定値を用いて、受信者操作特性（Receiver Operating Characteristic, ROC）曲線の解析などに基づいた統計解析（より具体的には、Youden indexを用いた方法が例示される。）を行うことにより、設定することができる。カットオフ値は、例えば、膵臓癌に罹患していない被検体から採取された生体試料における本発明の抗糖鎖抗体の量又は濃度の値の10〜90パーセンタイル値、好ましくは30〜70パーセンタイル値、より好ましくは40〜60パーセンタイル値、さらに好ましくは45〜55パーセンタイル値とすることができる。
同一の被検体から一定期間前に採取された生体試料における前記抗糖鎖抗体の量又は濃度の値をカットオフ値とすることもできる。「一定期間」とは、本発明の抗糖鎖抗体の量又は濃度が同一被検体内で変化し得る程度の期間であれば特に制限されない。例えば1カ月〜10年、2カ月〜5年、3カ月〜2年、4カ月〜1年程度の期間が挙げられる。
1-3．工程（2b）
本発明の検査方法の変法として、上記工程（2a）に代えて、（2b）工程（1）で測定された本発明の抗糖鎖抗体の量又は濃度の値が、同一の被検体から一定期間前に採取された生体試料における本発明の抗糖鎖抗体の量又は濃度の値よりも低い場合に、前記被検体が将来膵臓癌に罹患する可能性が高いと判定する工程（工程（2b））を含む方法が挙げられる。該工程（2b）を含む前記検査方法により、将来における膵臓癌罹患リスクを判定する。
「一定期間」とは、本発明の抗糖鎖抗体の量又は濃度が同一被検体内で変化し得る程度の期間であれば特に制限されない。例えば1カ月〜10年、2カ月〜5年、3カ月〜2年、4カ月〜1年程度の期間が挙げられる。
「低い」程度は、特に制限されないが、工程（1）で測定された本発明の抗糖鎖抗体の量又は濃度の値が、同一の被検体から一定期間前に採取された生体試料における本発明の抗糖鎖抗体の量又は濃度の値の90％以下、70％以下、50％以下、30％以下であることが例示される。
1-4．工程（2c）
本発明の検査方法の別の一態様として、上記工程（2a）に代えて、
（2c）前記工程（1）で測定された前記抗糖鎖抗体の量又は濃度の値が、予め設定されたカットオフ値以下である場合に、前記被検体が膵臓癌に罹患している可能性が高いと仮判定する工程（工程（2c））、
（3c）前記生体試料における糖鎖膵臓癌マーカーの量又は濃度を測定し、測定された前記糖鎖膵臓癌マーカーの量又は濃度の値が、予め設定されたカットオフ値以上である場合に、前記被検体が膵臓癌に罹患している可能性が高いと仮判定する工程（工程（3c））、並びに
（3d）前記工程（2c）の仮判定及び前記工程（3c）の仮判定に基づき、前記被検体が膵臓癌に罹患している可能性が高いと判定する工程（工程（3d））
を含む方法が挙げられる。該工程（2c）、（3c）、（3d）を含む前記検査方法により、膵臓癌の罹患の可能性を検査する。前記工程（2c）、（3c）、（3d）を含む本発明の検査方法は、初期の膵臓癌、具体的には、ステージ2又はステージ2より初期の膵臓癌、特にステージ1又は2の膵臓癌の罹患について、公知の方法より高い精度で判定できる。
前記工程（3d）において、例えば、前記工程（2c）の仮判定及び前記工程（3c）の仮判定のいずれか又は両方で、前記被検体が膵臓癌に罹患している可能性が高いとの仮判定である場合に、前記被検体が膵臓癌に罹患している可能性が高いと判定することにより、膵臓癌に罹患している被検体を、「膵臓癌に罹患していない」と誤判定する可能性をより低減することができる。
前記糖鎖膵臓癌マーカーとしては、CA19-9、DUPAN-2、Span-1、CA50、CA242、TAG-72、SLX、STN等が挙げられ、好ましくは、CA19-9、DUPAN-2等が挙げられ、より好ましくはCA19-9が挙げられる。前記糖鎖膵臓癌マーカーとしては、例えば、CA19-9及びDUPAN-2からなる群より選択される1種以上を組み合わせて採用してもよい。
2．膵臓癌のより高い精度での診断
工程（2a）を含む本発明の検査方法により、被検体が膵臓癌に罹患している可能性が高いと判定された場合、本発明の検査方法に、さらに（3a）工程（2a）で膵臓癌に罹患している可能性が高いと判定された被験者に対して膵臓癌の診断方法を適用する工程（工程（3a））を組み合わせることによって、より高い精度で膵臓癌の罹患を診断することができる。また、本発明の検査方法はより高い感度で膵臓癌に罹患している可能性を判断できるので、本発明の検査方法に工程（3a）を組み合わせることによって、真に膵臓癌に罹患している被検体を、より確実に「膵臓癌に罹患している」と診断できる（すなわち、「膵臓癌に罹患していない」と誤診断する可能性、及び工程（3a）の診断対象から除外する可能性をより低減することができる）。
工程（3a）で採用される膵臓癌の診断方法としては、特に制限されず、公知の診断方法を各種採用することができる。該診断方法としては、例えば生検法、PET検査法、CT検査法、超音波検査法、膵臓癌マーカー（例えばCA19-9、DUPAN-2、CEA、CA50など）検査法などが挙げられる。これらの中でも、より高い精度で膵臓癌を診断できるという観点から、好ましくは生検法、PET検査法、CT検査法、超音波検査法などが挙げられる。診断方法は、1種単独で採用してもよいし、2種以上を組み合わせて採用してもよい。
3．膵臓癌の治療
工程（2a）を含む本発明の検査方法により被検体が膵臓癌に罹患している可能性が高いと判定された場合、又は工程（3a）により被検体が膵臓癌であると診断された場合、さらに（4）工程（2a）で膵臓癌に罹患している可能性が高いと判定された被験者、又は工程（3a）で膵臓癌に罹患していると診断された被験者に対して膵臓癌治療を行う工程（工程（4））を行うことによって、被検体の膵臓癌を治療することが可能となる。また、本発明の検査方法はより高い感度で膵臓癌に罹患している可能性を判断できるので、本発明の検査方法又は本発明の検査方法と工程（3a）との組み合わせに対してさらに工程（4）を組み合わせることによって、真に膵臓癌に罹患している被検体を、より確実に治療できる（すなわち、真に膵臓癌に罹患している被検体を治療対象から除外する可能性をより低減することができる）。
膵臓癌治療の方法としては、特に制限されず、公知の治療方法を各種採用することができる。治療方法としては、例えば化学療法、外科治療法、放射線治療法、免疫療法などが挙げられる。これらは公知の方法に従って実施することができる。
化学療法に用いられる治療薬としては、特に制限されず、各種抗がん剤を用いることができる。抗がん剤としては、例えばアルキル化剤、代謝拮抗剤、微小管阻害剤、抗生物質抗がん剤、トポイソメラーゼ阻害剤、白金製剤、分子標的薬、ホルモン剤、生物製剤などが挙げられる。アルキル化剤としては、例えばシクロホスファミド、イホスファミド、ニトロソウレア、ダカルバジン、テモゾロミド、ニムスチン、ブスルファン、メルファラン、プロカルバジン、ラニムスチンなどが挙げられる。代謝拮抗剤としては、例えば、エノシタビン、カルモフール、カペシタビン、テガフール、テガフール・ウラシル、テガフール・ギメラシル・オテラシルカリウム、ゲムシタビン、シタラビン、シタラビンオクホスファート、ネララビン、フルオロウラシル、フルダラビン、ペメトレキセド、ペントスタチン、メトトレキサート、クラドリビン、ドキシフルリジン、ヒドロキシカルバミド、メルカプトプリンなどが挙げられる。微小管阻害剤としては、例えば、ビンクリスチンなどのアルカロイド系抗がん剤、ドセタキセル、パクリタキセルなどのタキサン系抗がん剤が挙げられる。抗生物質抗がん剤としては、例えば、マイトマイシンC、ドキソルビシン、エピルビシン、ダウノルビシン、ブレオマイシン、アクチノマイシンD、アクラルビシン、イダルビシン、ピラルビシン、ペプロマイシン、ミトキサントロン、アムルビシン、ジノスタチンスチマラマーなどが挙げられる。トポイソメラーゼ阻害剤としてはトポイソメラーゼI阻害作用を有するCPT-11、イリノテカン、ノギテカン、トポイソメラーゼII阻害作用をもつエトポシド、ソブゾキサンが挙げられる。白金製剤としては、例えば、シスプラチン、ネダプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチンなどが挙げられる。ホルモン剤としては、例えば、デキサメタゾン、フィナステリド、タモキシフェン、アストロゾール、エキセメスタン、エチニルエストラジオール、クロルマジノン、ゴセレリン、ビカルタミド、フルタミド、ブレドニゾロン、リュープロレリン、レトロゾール、エストラムスチン、トレミフェン、ホスフェストロール、ミトタン、メチルテストステロン、メドロキシプロゲステロン、メピチオスタンなどが挙げられる。生物製剤としては、例えば、インターフェロンα、βおよびγ、インターロイキン2、ウベニメクス、乾燥BCGなどが挙げられる。分子標的薬としては、例えば、リツキシマブ、アレムツズマブ、トラスツズマブ、セツキシマブ、パニツムマブ、イマチニブ、ダサチニブ、ニロチニブ、ゲフィチニブ、エルロチニブ、テムシロリムス、ベバシズマブ、VEGF trap、スニチニブ、ソラフェニブ、トシツズマブ、ボルテゾミブ、ゲムツズマブ・オゾガマイシン、イブリツモマブ・オゾガマイシン、イブリツモマブチウキセタン、タミバロテン、トレチノインなどが挙げられる。ここに特定する分子標的薬以外にも、ヒト上皮性増殖因子受容体2阻害剤、上皮性増殖因子受容体阻害剤、Bcr-Ablチロシンキナーゼ阻害剤、上皮性増殖因子チロシンキナーゼ阻害剤、mTOR阻害剤、血管内皮増殖因子受容体2阻害剤（α-VEGFR-2抗体）などの血管新生を標的にした阻害剤、MAPキナーゼ阻害剤などの各種チロシンキナーゼ阻害剤、サイトカインを標的とした阻害剤、プロテアソーム阻害剤、抗体−抗がん剤配合体などの分子標的薬なども含めることができる。これら阻害剤には抗体も含む。
代表的な膵臓癌治療薬としては、ゲムシタビン、TS-1、エルロチニブ、ゲムシタビンとエルロチニブとの併用薬、ゲムシタビンとアルブミン結合型パクリタキセルとの併用薬、4種の薬剤（オキサリプラチン、レボホリナート、イリノテカン、及びフルオロウラシル）の併用薬などが挙げられる。
4．膵臓癌の検査薬
本発明は、その一態様において、3-シアリルラクトース糖鎖構造を含む化合物1及び(LN)3糖鎖構造を含む化合物2からなる群より選択される少なくとも1種の化合物を含む、膵臓癌の検査薬（本明細書において、「本発明の検査薬」と示すこともある。）に関する。以下、これについて説明する。
本発明の検査薬は、膵臓癌の罹患の可能性を検査する薬である。
本発明の検査薬は、3-シアリルラクトース糖鎖構造を含む化合物1及び(LN)3糖鎖構造を含む化合物2からなる群より選択される少なくとも1種の化合物を含む組成物の形態であってもよい。該組成物には、必要に応じて他の成分が含まれていてもよい。他の成分としては、例えば基剤、担体、溶剤、分散剤、乳化剤、緩衝剤、安定剤、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、増粘剤、保湿剤、着色料、香料、キレート剤等が挙げられる。
本発明の検査薬は、3-シアリルラクトース糖鎖構造を含む化合物1及び(LN)3糖鎖構造を含む化合物2からなる群より選択される少なくとも1種の化合物を含むキットの形態であってもよい。該キットには、本発明の検査方法の実施に用いられ得る器具、試薬などが含まれていてもよい。
器具としては、例えば試験管、マイクロタイタープレート、アガロース粒子、ラテックス粒子、精製用カラム、エポキシコーティングスライドガラス、金コロイドコーティングスライドガラスなどが挙げられる。
試薬としては、例えば標識抗体、標準試料（陽性対照、陰性対照）などが挙げられる。
標識抗体としては、検出対象である本発明の抗糖鎖抗体のアイソタイプに応じて、各種市販されているものを用いることができる。
標準試料としては、本発明の抗糖鎖抗体が用いられる。本発明の抗糖鎖抗体は、例えばハイブリドーマ技術を用い、3-シアリルラクトース糖鎖又は(LN)3糖鎖に結合する抗体を産生するハイブリドーマを取得した後に、その培養上清を精製して得ることができる。
より具体的には、例えば、次のようにして本発明の抗糖鎖抗体を得ることができる。まず、リンパ節又は脾臓からリンパ球を調製し、SPM4-0などの骨髄腫細胞と融合させて培養する。融合後4週間後にハイブリドーマ培養上清を採取し、3-シアリルラクトース糖鎖又は(LN)3糖鎖と反応する培養上清のハイブリドーマを選択する。選択されたハイブリドーマを大量に培養した上清から、塩析法及びProtein Gカラムなどを用いたアフィニティー精製法により、本発明の抗糖鎖抗体を取得することができる。
以下に、実施例に基づいて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例によって限定されるものではない。
参考例1．血清中の抗糖鎖抗体値
（a）糖鎖アレイの作製
3´-sialyl lactose-PAA（GlycoTech Corporation製、カタログ番号：08-038）及びGalβ1→3GlcNAcβ1→3Galβ1→4GlcNAc-PAA（GlycoTech Corporation製、カタログ番号：08-096）を、それぞれ精製水とSpotting Solution（松浪硝子工業製、カタログ番号：DSP0050）を等量に混和した溶液（以下「スポット溶液」と示すこともある。）で希釈して、0.5 mg/mLの希釈溶液を作製した。
次に、当該3´-sialyl lactose-PAAを含む希釈溶液1μL、及びGalβ1→3GlcNAcβ1→3Galβ1→4GlcNAc-PAAを含む希釈溶液1μLを、それぞれ直径1 mmになるように、エポキシシランでコートされたガラススライド（Schott AG製、カタログ番号：1066643）上に滴下し、室温で16時間静置した。
その後、各ガラススライドを洗浄液（25mM Tris-HCl（pH7.4）、0.8% NaCl、1% Triton-X 100）で3回洗浄することで、過剰なスポット溶液を除去し、ブロッキング溶液（25 mM Tris-HCL（pH7.4）、0.8％ NaCl、1％ Triton-X 100、4％ BSA）を加えて室温で1時間静置し、エポキシシランの未反応のエポキシ基を保護した。このように、それぞれ、3´-sialyl lactose-PAAを含む糖鎖アレイと、Galβ1→3GlcNAcβ1→3Galβ1→4GlcNAc-PAAを含む糖鎖アレイとを作製した。これらの糖鎖アレイは使用するまで冷蔵保存した。
（b）健常人検体、及び膵臓癌患者検体の血清中の抗糖鎖抗体値の測定
生体試料として、健常人25検体、及び膵臓癌患者16検体（ステージ1：1検体、ステージ2：6検体、ステージ3：2検体、ステージ4：7検体）の血清を、和光純薬工業を介して2箇所の病院から入手した。
各検体の血清1μLを検体希釈溶液（25 mM Tris-HCL（pH7.4）、0.8％ NaCl、1％ Triton-X 100、1 mM MnCl2、1 mM CaCl2、1% BSA）で100倍に希釈し、得られた希釈液の内の80μL（血清0.8μL相当を含む。）を参考例（a）で作製した各糖鎖アレイに添加し、室温で3時間静置した後に洗浄液で1回洗浄した。
次に、検体希釈溶液で希釈された血清が添加された各糖鎖アレイに、Cy3（登録商標）蛍光色素標識ヤギ抗ヒトIgG抗体（Jackson ImmunoResearch Laboratories社製）を加えて室温で1時間静置した後に、洗浄液で3回洗浄し、蛍光検出器FLA-5100を用いて蛍光画像を取得した。
各スポットの蛍光強度をImage J（http://imagej.nih.gov/ij/）を用いて測定し、各血清中の蛍光強度値を得た。
また、Immunoglobulin G ELISA kit（Immunodiagnostik社製、カタログ番号：K6510A）を用い、各検体の血清を200,901倍に希釈し、血清0.8μL相当に含まれるヒトIgG量を測定した。
上記測定値を以下の式に代入して、血清中の抗糖鎖抗体（抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体及び抗(LN)3糖鎖抗体）濃度（抗糖鎖抗体値）を算出した。
（抗糖鎖抗体値）＝（蛍光強度値）／（血清0.8μL相当に含まれるヒトIgG量）
その結果、図１に示すように健常人に比して膵臓癌患者では、血清中の抗糖鎖抗体値が明らかに低く、膵臓癌の罹患とこれらの抗糖鎖抗体値とが相関していることが示された。
実施例1．抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体又は抗(LN)3糖鎖抗体の抗体値を指標とした膵臓癌の検査
参考例1（b）で求めた、膵臓癌患者16検体（ステージ1：1検体、ステージ2：6検体、ステージ3：2検体、ステージ4：7検体）の各血清中の各抗糖鎖抗体値と、カットオフ値とを比較して、カットオフ値よりも低値の検体を膵臓癌（陽性）と判断した。
ここで、カットオフ値は、参考例1で得られた、健常人25検体の抗糖鎖抗体値の50％パーセンタイル値とした。抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体のカットオフ値は、63.16（蛍光強度値／IgG量（μg））であり、抗(LN)3糖鎖抗体のカットオフ値は、13.09（蛍光強度値／IgG量（μg））であった。
膵臓癌のステージごとに結果を示した図を図２に示した。
初期の膵臓癌（ステージ1及び2）患者検体を陽性（膵臓癌に罹患している可能性が高い）と判定した割合は、抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体の抗体値を採用した場合では6/7、抗(LN)3糖鎖抗体の抗体値を採用した場合では6/7であった。
比較例1．既知マーカーを指標とした膵臓癌の検査
参考例1と同様に、膵臓癌患者16検体（ステージ1：1検体、ステージ2：6検体、ステージ3：2検体、ステージ4：7検体）の各血清中のCA19-9の濃度を、市販のキット（ALPCO製、カタログ番号：25-199HU-E01）を用いて測定した。
得られたCA19-9の濃度と、カットオフ値とを比較して、カットオフ値よりも高値の検体を膵臓癌（陽性）と判断した。
ここで、カットオフ値は、一般に用いられる値（37 U/mL）とした。
膵臓癌のステージごとに結果を示した図を図２に示した。
初期の膵臓癌（ステージ1及び2）患者検体を陽性（膵臓癌に罹患している可能性が高い）と判定した割合は、3/7であった。
実施例1及び比較例1の結果から、初期の膵臓癌（ステージ1及び2）の罹患を判定する精度は、CA19-9の濃度を用いた場合と比較して、抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体又は抗(LN)3糖鎖抗体の抗体値を用いた場合の方が高いことが示された。
参考例2．血清中の抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体濃度
（a）標準曲線の作製
ビオチン標識3´-sialyl lactose-PAA 0.5 mgを0.8 mLのPBS（リン酸緩衝生理食塩水）に溶解し、全量を0.8 mLのストレプトアビジン-アガロース樹脂（Thermo Scientific製、カタログ番号：20353）に添加し、4℃で12時間攪拌しながら反応させた。反応後、この樹脂をPoly-Prep（登録商標）エンプティーカラム(BIO-RAD製、カタログ番号：731-1550)に充填し、3´-sialyl lactose-PAA固定化カラムを作製した。50mgの健常人血清由来凍結乾燥IgG（和光純薬製、コード番号：289-95341、ロット番号：WDN9152）を5mLの0.1％Tween-20を含むPBSに溶解させ、3´-sialyl lactose-PAA固定化カラムに添加した。その後、カラムを密閉し、4℃で12時間攪拌しながら反応させた。反応後、カラムを解放し、非吸着成分を溶出させた。さらに、カラムを4 mLのPBSで洗浄後、3 mMの 3´-sialyl lactose（東京化成工業製、カタログ番号：S0885）PBS(-)溶液を1mL加えてカラムを密閉し、4℃で3時間攪拌しながら反応させた。反応後、カラムを解放し、抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体（ヒトIgG）を溶出させた。さらに、カラムに3mMの 3´-sialyl lactose PBS(-)溶液4mLを添加し、溶出液を回収後、前述の抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体溶出液と合わせた。この溶出液を、Amicon（登録商標） Ultra 15 mL(NMWL of 50 kDa, Millipore製、コード番号：UFC905024 )を用いて限外ろ過し、IgG濃度を測定後、抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体の標準品とした。
MaxiSorp 96ウエルプレート（Thermo Fisher製、カタログ番号：439454）の各ウエルに10μg/mlの3´-sialyl lactose-PAAを100μL加え、室温で16時間静置した。次に、各ウエルを300μLの1％ Triton-X 100を含むPBS(洗浄液) で3回洗浄し、200μLの5％ BSA及び1％ Triton-X 100を含むPBSを加えて室温で1時間静置した。各wellを300 μlの洗浄液で洗浄後、抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体溶液（0，6.25，12.5，25，50，100，250 ng/ml）を100μLずつ添加して室温で2時間静置した。その後、各wellを300μLの洗浄液で5回洗浄し200倍に希釈したペルオキシダーゼ標識ヤギ抗ヒトIgG抗体（SeraCare Life Sciences製、カタログ番号：04-10-06）を100μLずつ添加して室温で1時間静置した後に、300μLの洗浄液で3回洗浄し、ペルオキシダーゼ基質液（SeraCare Life Sciences製 Peroxidase Substrate Solution A (コード番号：5120-0034)及びB(コード番号：50-65-00)を等量の割合で混合したもの。）を100μLずつ添加して室温で20分静置した。反応後、反応停止液(SeraCare Life Sciences製、コード番号：5150-0017)を100μL添加し、各ウエルの450nmの吸光度をマイクロプレートリーダーで測定した。縦軸を吸光度、横軸を抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体溶液量とする標準曲線を作成した。
その結果、抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体濃度と吸光度に高い相関（R2=0.9949）が認められ、以下の式で、抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体濃度が算出された。
（抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体濃度）＝372.27x（吸光度）
（b）健常人検体、及び膵臓癌患者検体の血清中の抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体濃度の測定
生体試料として、健常人13検体、及び膵臓癌患者55検体（ステージ1：15検体、ステージ2：15検体、ステージ3：11検体、ステージ4：14検体）の血清を、和光純薬工業を介して米国の病院から入手した。
各検体の血清を検体希釈溶液（1%BSA 及び1% Triton-X 100）で750倍に希釈し、予め3´-sialyl lactose-PAAが吸着されているMaxiSorp 96ウエルプレートに、希釈血清100μLを添加した。参考例（a）に示した方法と同様にして450nmの吸光度を測定し、標準曲線に基づいて、各血清中の抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体濃度を算出した。
その結果、図３に示すように健常人検体に比して膵臓癌患者検体では、血清中の抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体の濃度が明らかに低く、膵臓癌の罹患と血清中の抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体濃度とが相関していることが示された。
実施例2．抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体濃度を指標とした膵臓癌の検査
前記参考例２の結果に基づき、縦軸を感度（陽性率）（％）とし、横軸を１００％から特異度（％）を減じた値（１００％−特異度（％））（偽陽性率）とするROC曲線を医学統計ソフトGraphPad Prismを用いて作成し、図４に示した。曲線下面積（Area Under the Curve, AUC）は0.87と高値を示し、Youden indexを指標とするカットオフ値は50.08μg/mL（感度＝７６．３６％、特異度＝９２．３１％）であった。ここで、感度とは、膵臓癌（ステージ１、２、３及び４）患者検体を陽性と判定する割合を示し、特異度とは、健常人検体を陰性と判定する割合を示す。この値を基に判定した結果、本検査法は感度76％、特異度92%であった。
実施例3．既知マーカーとの併用による初期の膵臓癌の検査
参考例2（b）と同様に、健常人13検体、及び膵臓癌患者55検体（ステージ1：15検体、ステージ2：15検体、ステージ3：11検体、ステージ4：14検体）の各血清中のCA19-9の濃度を、市販のキット（Abnova製、カタログ番号：KA0207）を用いて測定した。得られた測定値から、Youden indexを指標とするカットオフ値を算出したところ、24.80 U/mLであった。初期の膵臓癌（ステージ1及び2）患者検体について、この値を基にして陰性（膵臓癌に罹患していない可能性が高い）と判定した例数（偽陰性判定の例数）を数えた。一方、実施例2.で示した、抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体濃度を指標とした膵臓癌罹患の判定と前記CA19-9を指標とした膵臓癌罹患の判定のいずれか又は両方において陽性（膵臓癌に罹患している可能性が高い）と判定された例を「陽性」とし、抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体濃度を指標とした膵臓癌罹患の判定とCA19-9を指標とした膵臓癌罹患の判定のいずれにおいても陰性（膵臓癌に罹患していない可能性が高い）と判定された例数を偽陰性判定の例数として数えた。
その結果を表１に示す。初期の膵臓癌（ステージ1及び2）患者検体について、抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体濃度を指標とした膵臓癌罹患の判定とCA19-9を指標とした膵臓癌罹患の判定のいずれにおいても陰性（膵臓癌に罹患していない可能性が高い）と判定された例数（偽陰性判定の例数）は、CA19-9単独を指標とした検査で偽陰性と判定された例数よりも少なかった。
Figure 0006901731
本発明の検査方法は、既存の検査方法に比して、より高い精度で初期膵臓癌罹患の可能性を判定可能である。本発明の抗糖鎖抗体の抗体値を測定することにより、膵臓癌の進行や抗ガン剤の有効性をモニタリングすることも可能である。

Claims (18)

  1. 体液又は体液由来の試料採取時に膵臓癌に罹患している可能性を検査する方法であって、
    （1）被検体から採取された体液又は体液由来の試料における抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体及び抗(LN)3糖鎖抗体からなる群より選択される少なくとも1種の抗糖鎖抗体の量又は濃度を測定する工程
    を含み、
    前記抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体がNeu5Acα(2→3)Galβ(1→4)Glcで表される糖鎖に結合することができる抗体又は前記糖鎖を認識する抗体であり、且つ
    前記抗(LN)3糖鎖抗体がGalβ1→3GlcNAcβ1→3Galβ1→4GlcNAcで表される糖鎖に結合することができる抗体又は前記糖鎖を認識する抗体である、方法。
  2. 前記工程（1）が、
    （1a）3-シアリルラクトース糖鎖構造を含む化合物1及び(LN)3糖鎖構造を含む化合物2からなる群より選択される少なくとも1種の化合物と、前記体液又は体液由来の試料とを接触させる工程、並びに
    （1b）前記化合物に結合した抗糖鎖抗体の量を測定する工程
    を含む、請求項１に記載の方法。
  3. さらに、（2a）前記工程（1）で測定された前記抗糖鎖抗体の量又は濃度の値を、予め設定されたカットオフ値と比較する工程
    を含む、請求項１又は２に記載の方法。
  4. 前記カットオフ値が、膵臓癌に罹患していない被検体から採取された体液又は体液由来の試料における前記抗糖鎖抗体の量又は濃度の値の平均値、パーセンタイル値、又は最小値である、請求項３に記載の方法。
  5. さらに、（2c）前記工程（1）で測定された前記抗糖鎖抗体の量又は濃度の値を、予め設定されたカットオフ値と比較する工程、及び
    （3c）前記体液又は体液由来の試料における糖鎖膵臓癌マーカーの量又は濃度を測定し、測定された前記糖鎖膵臓癌マーカーの量又は濃度の値を、予め設定されたカットオフ値と比較する工程を含む、請求項１又は２に記載の方法。
  6. 前記抗糖鎖抗体の量又は濃度のカットオフ値が、膵臓癌に罹患していない被検体から採取された体液又は体液由来の試料における前記抗糖鎖抗体の量又は濃度の値の平均値、パーセンタイル値、又は最小値である、請求項５に記載の方法。
  7. 前記糖鎖膵臓癌マーカーが、CA19-9及びDUPAN-2からなる群より選択される少なくとも1種である、請求項５又は６に記載の方法。
  8. 前記糖鎖膵臓癌マーカーがCA19-9である、請求項７に記載の方法。
  9. 前記抗糖鎖抗体がIgGである、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
  10. 前記体液が全血、血清、及び血漿からなる群より選択される少なくとも1種である、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
  11. 検査対象である前記膵臓癌がステージ0〜2の膵臓癌である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
  12. 被検体における抗糖鎖抗体の量又は濃度を測定する方法であって、
    （1）被検体から採取された体液又は体液由来の試料における抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体及び抗(LN)3糖鎖抗体からなる群より選択される少なくとも1種の抗糖鎖抗体の量又は濃度を測定する工程を含み、
    前記抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体がNeu5Acα(2→3)Galβ(1→4)Glcで表される糖鎖に結合することができる抗体又は前記糖鎖を認識する抗体であり、且つ
    前記抗(LN)3糖鎖抗体がGalβ1→3GlcNAcβ1→3Galβ1→4GlcNAcで表される糖鎖に結合することができる抗体又は前記糖鎖を認識する抗体である、方法。
  13. 工程（1）において、抗糖鎖抗体として抗3-シアリルラクトース糖鎖抗体及び抗(LN)3糖鎖抗体からなる群より選択される1種の抗糖鎖抗体のみの量又は濃度を測定する、請求項１２に記載の方法。
  14. 工程（1）が、
    3-シアリルラクトース糖鎖構造を含む化合物1及び(LN)3糖鎖構造を含む化合物2からなる群より選択される少なくとも1種の化合物を、固相に固定する工程、
    固相に固定された化合物と、被検体から採取された生体試料とを接触させる工程、
    生体試料と接触させた化合物が固定された固相を、トリスヒドロキシメチルアミノメタン及び／又はエーテル型非イオン界面活性剤を含む溶液で洗浄する工程、
    洗浄された固相に、ウシ血清アルブミンを含み、さらにトリスヒドロキシメチルアミノメタン及び／又はエーテル型非イオン界面活性剤を含むブロッキング溶液を添加する工程、並びに
    固相に固定された化合物に結合した抗体の量又は濃度を測定する工程を含む、請求項１２又は１３に記載の方法。
  15. 3-シアリルラクトース糖鎖構造を含む化合物1及び(LN)3糖鎖構造を含む化合物2からなる群より選択される少なくとも1種の化合物を含み、
    前記3-シアリルラクトース糖鎖構造がNeu5Acα(2→3)Galβ(1→4)Glcで表される糖鎖構造であり、
    前記(LN)3糖鎖構造がGalβ1→3GlcNAcβ1→3Galβ1→4GlcNAcで表される糖鎖構造であり、
    前記化合物1が3-シアリルラクトース糖鎖そのもの或いは3-シアリルラクトース糖鎖を部分構造として含む化合物であり、且つ
    前記化合物2が(LN)3糖鎖そのもの或いは(LN)3糖鎖を部分構造として含む化合物である、膵臓癌の検査薬。
  16. 生体試料採取時に膵臓癌に罹患している可能性の検査薬としての使用のための、
    Neu5Acα(2→3)Galβ(1→4)Glcで表される3-シアリルラクトース糖鎖構造を含む、3-シアリルラクトース糖鎖そのもの或いは3-シアリルラクトース糖鎖を部分構造として含む化合物である化合物1、及び
    Galβ1→3GlcNAcβ1→3Galβ1→4GlcNAcで表される(LN)3糖鎖構造を含む、(LN)3糖鎖そのもの或いは(LN)3糖鎖を部分構造として含む化合物である化合物2
    からなる群より選択される少なくとも1種の化合物。
  17. 生体試料採取時に膵臓癌に罹患している可能性を検査するための、
    Neu5Acα(2→3)Galβ(1→4)Glcで表される3-シアリルラクトース糖鎖構造を含む、3-シアリルラクトース糖鎖そのもの或いは3-シアリルラクトース糖鎖を部分構造として含む化合物である化合物1、及び
    Galβ1→3GlcNAcβ1→3Galβ1→4GlcNAcで表される(LN)3糖鎖構造を含む、(LN)3糖鎖そのもの或いは(LN)3糖鎖を部分構造として含む化合物である化合物2
    からなる群より選択される少なくとも1種の化合物の使用。
  18. 生体試料採取時に膵臓癌に罹患している可能性の検査薬の製造のための、
    Neu5Acα(2→3)Galβ(1→4)Glcで表される3-シアリルラクトース糖鎖構造を含む、3-シアリルラクトース糖鎖そのもの或いは3-シアリルラクトース糖鎖を部分構造として含む化合物である化合物1、及び
    Galβ1→3GlcNAcβ1→3Galβ1→4GlcNAcで表される(LN)3糖鎖構造を含む、(LN)3糖鎖そのもの或いは(LN)3糖鎖を部分構造として含む化合物である化合物2からなる群より選択される少なくとも1種の化合物の使用。
JP2018565640A 2017-02-03 2018-02-01 膵臓癌の検査方法 Expired - Fee Related JP6901731B2 (ja)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2017018215 2017-02-03
JP2017018215 2017-02-03
PCT/JP2018/003394 WO2018143336A1 (ja) 2017-02-03 2018-02-01 膵臓癌の検査方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPWO2018143336A1 JPWO2018143336A1 (ja) 2019-11-21
JP6901731B2 true JP6901731B2 (ja) 2021-07-14

Family

ID=63040733

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2018565640A Expired - Fee Related JP6901731B2 (ja) 2017-02-03 2018-02-01 膵臓癌の検査方法

Country Status (7)

Country Link
US (1) US20190353659A1 (ja)
EP (1) EP3578983A4 (ja)
JP (1) JP6901731B2 (ja)
KR (1) KR20190110127A (ja)
CN (1) CN110268268A (ja)
CA (1) CA3052553A1 (ja)
WO (1) WO2018143336A1 (ja)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA3128467A1 (en) * 2019-02-01 2020-08-06 Sumitomo Chemical Company, Limited Antibody and functional fragment thereof

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE69233654D1 (de) * 1991-04-19 2006-10-19 Univ Leland Stanford Junior Zusammensetzungen und methoden für die verknüpfung von endothelzellen
JP2005069926A (ja) * 2003-08-26 2005-03-17 Jsr Corp 免疫検査用磁性粒子
WO2005088310A2 (en) * 2004-03-05 2005-09-22 The Scripps Research Institute High throughput glycan microarrays
JP2007298334A (ja) * 2006-04-28 2007-11-15 Mitsubishi Chemicals Corp 糖類固定化体及びその利用
US20070265170A1 (en) * 2006-05-15 2007-11-15 Ola Blixt Detection, prevention and treatment of ovarian cancer
US20080154639A1 (en) * 2006-12-21 2008-06-26 Shadduck John H Bioanalytic System Business Methods
JP5615509B2 (ja) * 2009-03-31 2014-10-29 北海道公立大学法人 札幌医科大学 フコシル化糖鎖産生細胞用物質送達担体
JP2013100233A (ja) * 2010-02-26 2013-05-23 Osaka Prefectural Hospital Organization 腫瘍マーカー、それに対する抗体、その検出キット及びその検出方法
JP2013006801A (ja) * 2011-06-24 2013-01-10 Ritsumeikan マンナン結合タンパク質のがん組織診断及び治療用途
CN104334722A (zh) * 2012-03-30 2015-02-04 第一三共株式会社 具有修饰的cdr的抗-涎免凝集素15抗体
JP6236864B2 (ja) * 2012-06-11 2017-11-29 東ソー株式会社 癌の検出方法及び膵臓特異的リボヌクレアーゼ１を認識する抗体
EP3084443B1 (en) * 2013-12-20 2018-08-22 Metanomics Health GmbH Means and methods for diagnosing pancreatic cancer in a subject based on a metabolite panel
JP2016205827A (ja) * 2015-04-15 2016-12-08 東ソー株式会社 癌を検出する方法

Also Published As

Publication number Publication date
JPWO2018143336A1 (ja) 2019-11-21
EP3578983A4 (en) 2020-12-09
EP3578983A1 (en) 2019-12-11
KR20190110127A (ko) 2019-09-27
US20190353659A1 (en) 2019-11-21
CA3052553A1 (en) 2018-08-09
WO2018143336A1 (ja) 2018-08-09
CN110268268A (zh) 2019-09-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2015265870A1 (en) PD-L1 antibodies and uses thereof
JP6634287B2 (ja) 免疫療法の臨床効果の予測法
WO2019065747A1 (ja) 抗ｃｋａｐ４モノクローナル抗体
JP7401460B2 (ja) レンバチニブ及びｐｄ－１アンタゴニストを含む組み合わせ療法のためのバイオマーカー
JP6639408B2 (ja) デオキシハイプシン・シンターゼ遺伝子を指標として用いる動脈硬化及びがんの検出方法
US20170097352A1 (en) Immunoglobulin-bound extracellular vesicles and uses thereof
JP6901731B2 (ja) 膵臓癌の検査方法
EP2834640B1 (en) Cd247 as a biomarker for assessing the effect of chemotherapeutic and biological drugs
US12319749B2 (en) Antibody and functional fragment thereof
JP2014057582A (ja) 細胞傷害活性を予測するための方法及びキット
EP2568286B1 (en) Method for analysing mucin 1 having sia-alpha-2-8-sia-alpha-2-3-gal-beta glycans
JP2020509374A (ja) 早期膵がん検出アッセイ
US10753935B2 (en) Prognostic method and kits useful in said method
KR20130052923A (ko) 나노 물질에 의한 세포 독성 검출용 조성물, 키트 및 나노물질에 의한 세포 독성 검출방법

Legal Events

Date Code Title Description
A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20190730

A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20200917

A871 Explanation of circumstances concerning accelerated examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A871

Effective date: 20200917

A975 Report on accelerated examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971005

Effective date: 20201001

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20201020

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20201214

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20210209

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20210406

TRDD Decision of grant or rejection written
A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

Effective date: 20210511

A61 First payment of annual fees (during grant procedure)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61

Effective date: 20210609

R150 Certificate of patent or registration of utility model

Ref document number: 6901731

Country of ref document: JP

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150

LAPS Cancellation because of no payment of annual fees