JP6869228B2 - 液体中の脆弱物の形状を保持する方法およびデバイス - Google Patents
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Description
これらの原因と重症度に応じて弁形成術や置換術、冠動脈バイパス術、左室形成術、機械的補助循環などが適用される。
重症心筋梗塞等においては、心筋細胞が機能不全に陥り、さらに線維芽細胞の増殖、間質の線維化が進行し心不全を呈するようになる。心不全の進行に伴い、心筋細胞は傷害されてアポトーシスに陥るが、心筋細胞は殆ど細胞分裂をおこさないため、心筋細胞数は減少し心機能の低下もさらに進む。
このような重症心不全患者に対する心機能回復には細胞移植法が有用とされ、既に自己骨格筋芽細胞による臨床応用が開始されている。
[1]容器内の液体中の脆弱物の形状を保持する方法であって、温度変化により融解および凝固する封止材を融解させて前記液体の液面を覆うこと、および該液面を覆う封止材を凝固させることを含む、前記方法。
[2]脆弱物が、シート状骨格筋芽細胞培養物である、[1]に記載の方法。
[3]封止材の融点が0℃〜45℃であり、凝固点が0℃〜45℃である、[1]または[2]に記載の方法。
[4]封止材が、脂肪酸エステル、ゼラチン、多糖類および高分子化合物からなる群から選択される少なくとも1つを含む、[1]〜[3]のいずれか一つに記載の方法。
[5]液体中の脆弱物の形状を保持するためのデバイスであって、脆弱物を収容するための容器、および温度変化により融解および凝固する封止材を含み、さらに前記容器の蓋を含んでもよく、凝固した状態の前記封止材が、前記容器および/または前記蓋に固定されている、前記デバイス。
[6]脆弱物を収容するための容器が、封止材を固定することができる溝部を有し、該溝部の内側の高さが外側の高さより低い、[5]に記載のデバイス。
[7]脆弱物を収容するための容器の縁部に固着可能な環状部材であって、温度変化により融解および凝固する封止材を載置することができる環状の溝部を有し、該環状の溝部の内側の高さが外側の高さより低い、前記環状部材。
とくに、本発明により、脆弱物を収容した容器を動かした際の揺動による脆弱物の皺、破れ、破損、変形などを防止することができ、物理的に安定させることができる。
さらに、本発明によると、液体中の脆弱物の形状を保持することができる、安価で簡便な方法、デバイス、および部材を提供することができる。
シート状細胞培養物は、任意の既知の手法によって製造されたものであってよい。
本明細書における液または液体とは、全体として流動性を有する流体であればよく、細胞足場などの固形物質や気泡などその他非液体成分を含んでもよい。
封止材としては、例えば、脂肪酸エステル(蝋(凝固点、35℃〜50℃)、動物性油脂(凝固点25℃〜50℃)、植物性油脂等)、ゼラチン(ゲル化温度、15℃〜30℃)、多糖類、高分子化合物などが挙げられ、多糖類および高分子化合物としては、例えば、ペクチン(ゲル化温度25℃〜45℃)、寒天(ゲル化温度25℃〜45℃)、カラギーナン(ゲル化温度25℃〜60℃)、セルロース(ゲル化温度30℃〜40℃)、ジェランガム(ゲル化温度30℃〜40℃)、メチルセルロース(ゲル化温度30〜55℃)、キサンタンガム+ローカストビーンガム(ゲル化温度35〜60℃)、カードラン(ゲル化温度30〜60℃)、高分子化合物(疎水性相互作用を利用してゾル−ゲルに変化するもの。例:テレキーレックPEG、ポリエチレン等)などが挙げられる。本発明において、これら封止材を1種単独で使用しても、2種以上併用してもよい。当業者は、用途に合わせて、適切な封止材を選択することができる。
〔第1実施態様〕
まず、本発明の第1実施態様に係るデバイス1について説明する。図1は、本発明の第1実施態様に係るデバイス1を示す、断面斜視図である。なお、本願における各図において、説明を容易とするため、各部材の大きさは、適宜強調されており、図示の各部材は、実際の大きさを示すものではない。
次に、本発明の第2実施態様に係るデバイス1Aについて説明する。図2は、本発明の第2実施態様に係るデバイス1Aを示す、断面斜視図である。なお、以下の説明では、第1実施態様に係るデバイス1の構成と同じ部分については、同じ符号を付してそれらの説明は省略する。
以上のように、本発明の第2実施態様に係るデバイス1Aは、容器内の液体の液面を適切に覆うことができ、さらに液面と封止材との間に空気が入らないため、容器の輸送中に振動が発生した場合であっても、容器内の液体が波打ったり揺動したりして、脆弱物が揺動することがなく、また、液体が外気に触れることがない。したがって、液体中の脆弱物の形状を保持して変形を防止しつつ、長期保存することができる。
第1変形例
図3Aに示されるように、本発明の第1変形例に係るデバイス1Aは、容器2Aの溝部4内、容器2Aの内側面および蓋5に封止材3が固定されている。本発明のデバイス1Aを使用する場合は、容器2Aに液体および脆弱物を入れ、容器2Aの溝部4に蓋5を載置して加熱する。融解された容器2Aの内側面の封止材3は、容器2Aの半径方向外側から液面に滴下され、蓋5の封止材3は、容器2Aの半径方向内側から液面に滴下され、容器2Aの溝部4内の封止材3は、溝部4と蓋5との隙間に入り込む。これにより、液面全面が迅速に覆われると共に、容器2Aと蓋5とが固定される。
図3Bに示されるように、本発明の第2変形例に係るデバイス1Bは、容器2Bの縁部に容器2Bの蓋5が嵌合する溝部4Bを有し、溝部4Bの内側42が容器2Bの内側面に沿うように形成されている。また、溝部4Bの内側42の高さは、外側41の高さより低い。本発明のデバイス1Bを使用する場合は、溝部4Bの内側42の高さより大きな高さを有する封止材3Bを溝部4B内に固定する。そして、容器2Bに液体Lおよび脆弱物を入れて加熱する。封止材3Bが溝部4B内で融解すると、溝部4Bの内側42の高さより上側の封止材3Bが、容器2Bの内側面に沿って滴下されて、液体Lの液面を覆う(図3C)。液面を覆った封止材3Bを凝固させると、封止材3Bの半径方向外側は容器2Bの内側面に固定されるため、液面が揺れにくくなる。また、封止材3Bの下側は溝部4B内に留まるため、蓋5を溝部4B内に固定することができる。
本発明の第3実施態様に係る部材について説明する。図4は、本発明の第3実施態様に係る部材を示す、断面斜視図である。なお、以下の説明では、第1実施態様および第2実施態様に係るデバイスの構成と同じ部分については、同じ符号を付してそれらの説明は省略する。
図5Aに示されるように、本発明の第1変形例に係る部材6Aにおいて、封止材3は、溝部4内および部材6の内側面に固定されている。嵌合部7Aは環状溝ではなく、部材6Aの基部61の下面から下方に突出する環状壁である。嵌合部7Aは、容器2の内側面に嵌合部7Aの外側面が密着するように形成されている。また、嵌合部7Aの長さは、勘合部7Aの下端が、容器2内に収容される液体Lに浸漬するように設定されている。加熱すると、融解した状態の封止材3は、封止材3の内側面に沿って液面に到達し、液面の中心方向に流れていくため、封止材3の半径方向外側は部材6の内側面に固定される(図5B)。したがって、部材6Aを容器から取り外すだけで、封止材3を液面から簡単に除去することができる。
図5Cに示されるように、本発明の第2変形例に係る部材6Cにおいて、溝部4Cには封止材が固定されていない。本変形例において、溝部4Cは環状の溝ではなく、部材6Cの基部61の上面から上方に突出する環状壁である。本変形例において、溝部4Cの内側42の高さは、溝部4Cの外側41の高さより低く、基部61からは突出していない。本発明の部材6Cを使用する場合は、部材6Cを容器(図示せず)に固着し、環状の封止材3Cを溝部4Cに載置して加熱する。本変形例において、封止材3Cは、部材6Cの溝部4Cに載置可能な環状の封止材3C’と、部材6Cの内側面に設置可能な環状の封止材3C’’とが一体成型されたものである。封止材6Cは、部材6Cの溝部4Cおよび内側面において融解し、嵌合部7Cの内側面に沿って滴下される。
図5Dに示されるように、本発明の部材6の第3変形例に係る部材6Dにおいて、溝部4Dには封止材が固定されていない。嵌合部7Dは、部材6Dの基部61の下面から下方に突出しており、嵌合部7Dの長さは、容器2の側面の高さより長くなるように設定されている。これにより、容器2の内側面を嵌合部7Dによって完全に覆うことができる。本変形例において、溝部4Dは、部材6Dの基部61の上面から上方に突出する2つの環状壁である。当該2つの環状壁の内、内側の環状壁42の高さは、外側の環状壁41の高さより低い。封止材3Dの高さは、内側の環状壁42の高さより高く、また、外側の環状壁41の高さより低く設定されている。
また、嵌合部7Dの長さは、容器の高さや容器内の液面の高さに合わせて適宜設定可能である。嵌合部7Dの長さは、とくに限定されないが、例えば、16mm〜25mm、好ましくは16mm〜22mm、より好ましくは16mm〜19mmとすることできる。
本発明においては、各構成は、同様の機能を発揮し得る任意のものと置換することができ、あるいは、任意の構成を付加することもできる。
例1
直径10cmのシャーレ(Nunc(登録商標))の側面およびシャーレの蓋の内面に、溶解した状態のゼラチンをコートし、1時間冷蔵してゲル化させた。図6は、シャーレの側面に固定されたゲル化した状態のゼラチンを、図7は、蓋の内面に固定されたゲル化した状態のゼラチンを示す。次に、シャーレ内に水を入れて蓋をした後、ゼラチンが溶解するまで約40℃で加温した。溶解した状態のゼラチンがシャーレ内の水を覆った後、再び1時間冷蔵してゲル化させた。図8に示されるように、ゲル化した状態のゼラチンがシャーレ内の水を覆い、シャーレ内の水が波打ったり揺動したりしないことが確認できた。
2、2A、2B 容器
3、3B、3C、3D 封止材
4、4B、4C、4D 溝部
5 蓋
6、6A,6C、6D 部材
7、7A、7C、7D 嵌合部
Claims (2)
- 液体中のシート状細胞培養物の形状を保持するためのデバイスであって、シート状細胞培養物を収容するための容器、および温度変化により融解および凝固する封止材を含み、さらに前記容器の蓋を含んでもよく、凝固した状態の前記封止材が、前記容器および/または前記蓋に固定されており、シート状細胞培養物を収容するための容器が、封止材を固定することができる溝部を有し、該溝部の内側の高さが外側の高さより低い、前記デバイス。
- シート状細胞培養物を収容するための容器の縁部に固着可能な環状部材であって、温度変化により融解および凝固する封止材を載置することができる環状の溝部を有し、該環状の溝部の内側の高さが外側の高さより低い、前記環状部材。
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