JP6834098B2

JP6834098B2 - Ｓ１ｐｒ２拮抗薬及びその使用

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Publication number: JP6834098B2
Application number: JP2017562325A
Authority: JP
Inventors: クリストファーマクマスター，; ゴードンシムス，
Original assignee: Dalhousie University
Current assignee: Dalhousie University
Priority date: 2015-06-01
Filing date: 2016-06-01
Publication date: 2021-02-24
Anticipated expiration: 2036-06-01
Also published as: US20190127372A1; US20200347058A1; AU2016273436A1; AU2016273436B2; JP2018516924A; WO2016191872A1; CN107849038A; EP3298014A1; US20180141942A1; EP3298014A4; CA2987796A1; HK1246288A1

Description

本技術は、概してＳ１ＰＲ２阻害を介した遺伝的な失明性の障害である家族性滲出性硝子体網膜症（ＦＥＶＲ）の治療に関する。本技術はまた、ＪＴＥ−０１３の尿素基の生物学的に等価な置換を含む化合物及びその類縁体、並びに網膜症及び不十分な血管形成によって特徴付けられる疾患の治療におけるこれらの使用に関する。

網膜は、視覚的刺激を感知する責任を果たす、眼の後部を覆う神経組織の薄い層である。発生中に、網膜血管系(vasculature)は、視神経乳頭から網膜周辺部へと放射状に外へと突出する一次動脈及び静脈を設ける内皮スプラウトにより開始し、ここで一対の毛細血管床は神経の中心層の各サイドに位置してさらに網膜を貫通する。一度場所が決まると、一次脈管構造は動脈及び静脈を定めるように成熟し、初期のネットワークが取り除かれ、血液網膜関門が形成される。血管平滑筋細胞及び周皮細胞（壁細胞としても知られており、毛細血管の内皮細胞を取り巻く収縮細胞）を動員することは、新たに形成される血管の安定化を助ける。眼における血管のマイグレーション及びパターニングを制御する分子メカニズムはよく分かっていない。

ヒトにおいて、網膜血管の発生は通常満期出産ごとに達成されるが、ＦＥＶＲにおいては遅れ又は停止する。ＦＥＶＲは、周辺網膜血管形成不全のための網膜の過少血管形成、及び続く二次的な異常血管新生により特徴付けられる。重篤な形のＦＥＶＲは、両側先天性網膜ひだ又は網膜剥離と一緒に示される（図１）。現在、ＦＥＶＲの管理はレーザ又は手術による。介入は視力を保つ可能性を向上させる一方、現在の最良の努力にもかかわらず７５％を超える眼が法律上の盲目のままである。現在のレーザ及び手術治療にもかかわらず、視力の喪失が大部分のＦＥＶＲ患者に起こる。この状態の理想的な治療は、事態が全体的に進行することを防ぐ治療による初期の介入を伴う早期発見を含むだろう。

本開示の追加の特徴及び利点は、続く説明において述べられ、及び、部分的にはこの説明から自明であるか若しくは本明細書で開示された原理を実践することにより知ることができる。本開示の特徴及び利点は、添付の請求の範囲で特に示されている手段及び組み合わせによって実現し及び得るこどかできる。本開示のこれらの及び他の特徴は、続く説明及び添付の請求の範囲からより完全に明らかとなり、又は本明細書で述べられる原理を実践することにより知ることができる。

変異した際にＦＥＶＲを引き起こす遺伝子の発見は、網膜血管の発生を制御する分子経路の理解を向上させた。現在までに、ＦＺＤ４、ＬＲＰ５、ＴＳＰＡＮ１２、ＮＤＰ、及びＺＮＦ４０８という５つの遺伝子がＦＥＶＲを引き起こすものとして特定されている。５つの既知のＦＥＶＲを引き起こす遺伝子のうち、４つがｆｒｉｚｚｌｅｄ受容体シグナリング複合体を形成する（図２）。ＦＺＤ４は、Ｗｎｔファミリーのリガンドによって通常活性化される、７回膜貫通型受容体のｆｒｉｚｚｌｅｄファミリーの一部である。ＦＺＤ４は、ＮＤＰ遺伝子の産物である非Ｗｎｔリガンドｎｏｒｒｉｎによって特異的に活性化されるという点において、ｆｒｉｚｚｌｅｄ受容体ファミリーの中でも独特である。Ｎｏｒｒｉｎは、ミュラーグリア細胞から分泌され、血管内皮細胞に位置するＦＺＤ４受容体に結合する。ＬＲＰ５は、ＦＺＤ４についての共同受容体であり、ＦＺＤ４が機能するために必要とされる。ＦＺＤ４、ＮＤＰ、及びＬＲＰ５の変異は、ＦＥＶＲを引き起こすことが示されてきた。(Mutant frizzled-4 disrupts retinal angiogenesis in familial exudative vitreoretinopathy.Robitaille J, MacDonald ML, Kaykas A, Sheldahl LC, Zeisler J, Dube MP, Zhang LH, Singaraja RR, Guernsey DL, Zheng B, Siebert LF, Hoskin-Mott A, Trese MT, Pimstone SN, Shastry BS, Moon RT, Hayden MR, Goldberg YP, Samuels ME.Nature Genetics, 32, 326-30 (2002)) (Autosomal recessive familial exudative vitreoretinopathy is associated with mutations in LRP5.Xiaodong Jiao, Valerio Ventruto, Michael T. Trese, Barkur S. Shastry, J.Fielding Hejtmancik.Am J Hum Genet 75, p878-884 (2004)) (A mutation in the Norrie disease gene (NDP) associated with X-linked familial exudative vitreoretinopathy.Z-Y. Chen, E.M.Battinelli, A. Fielder, S. Bundey, K. Sims, X.O.Breakefield & I.W.Craig.Nature Genetics 5, 180-183 (1993))

ＴＳＰＡＮ１２は内皮細胞で発現し、ＦＤＺ４に直接結合し、ｎｏｒｒｉｏｎ、ＦＺＤ４、及びＬＲＰ５の間の相互作用を向上させる。ＦＺＤ４が標準Ｗｎｔ経路（図２）を介してシグナル伝達するのか、非標準Ｗｎｔ経路を介してシグナル伝達するのかは明確でない。ＴＳＰＡＮ１２における変異もまたＦＥＶＲを引き起こすことが示されてきた。(Recessive Mutations in TSPAN12 Cause Retinal Dysplasia and Severe Familial Exudative Vitreoretinopathy (FEVR). James A. Poulter; Alice E. Davidson; Manir Ali; David F. Gilmour; David A. Parry; Helen A. Mintz-Hittner; Ian M. Carr; Helen M. Bottomley; Vernon W. Long; Louise M. Downey; Panagiotis I. Sergouniotis; Genevieve A. Wright; Robert E. MacLaren; Anthony T. Moore; Andrew R. Webster; Chris F. Inglehearn; Carmel Toomes. IOVS 53, 2873-2879 (2012).)(Mutations in TSPAN12 cause autosomal-dominant familial exudative vitreoretinopathy.Poulter JA1, Ali M, Gilmour DF, Rice A, Kondo H, Hayashi K, Mackey DA, Kearns LS, Ruddle JB, Craig JE, Pierce EA, Downey LM, Mohamed MD, Markham AF, Inglehearn CF, Toomes C. Am J Hum Genet 86, 248-53 (2010))

Ｆｚｄ４、Ｔｓｐａｎ１２、Ｌｒｐ５、及びＮｄｐについてのマウスノックアウトモデルは、ＦＥＶＲ患者において観察される眼の表現型の正確なミミックとして働く。これらのモデルは、ＦＥＶＲ表現型の詳細な解析を可能にしてきた。マウス研究からの重要な観察結果は、ＦＥＶＲのマウスモデルでは網膜血管系に障害があるにもかかわらず、網膜自体は形態学的に正常に見えることであって、これは視覚の喪失を防止しうる介入のための好機を提供する。

スフィンゴシン−１−リン酸（Ｓ１Ｐ）は、スフィンゴミエリナーゼ、セラミダーゼ、及びスフィンゴシンキナーゼの作用を介したスフィンゴミエリンの代謝から生成される、血液媒介性の脂質セカンドメッセンジャーである（図３）。Ｓ１Ｐ生成の主要な場所は、内皮細胞および赤血球である。Ｓ１Ｐは、Ｓ１ＰＲ１−５（以前はＥｄｇ１−５）と名付けられたＧタンパク質共役受容体の内皮分化ファミリーを活性化する。Ｓ１ＰＲは様々な種々の細胞型において発現され、数多くの生物学的プロセスを制御する。Ｓ１ＰＲ１、−２、及び−３は、血管内皮細胞において発現され、血管の発生および安定性を制御するため、これらの機能は特に興味深い。(Sphingosine 1-phosphate receptor signaling.Rosen H, Gonzalez-Cabrera PJ, Sanna MG, Brown S. Annu Rev Biochem.78, 743-68 (2009).)(Sphingosine 1-phosphate and cancer.Pyne, NJ, Pyne, S. Nat Rev Cancer 10, 489-503 (2010)).

Ｓ１ＰＲ１は、血管の安定化に不可欠であり、血管の移動を増進する。Ｓ１ＰＲ１はＧ_ｉに結合してホスファチジルイノシトール３−キナーゼ経路を活性化し、これはＲａｃを介してアクチン重合及び細胞の移動に影響を与える。同様の重複する機能が、Ｇ_ｑに結合するＳ１ＰＲ３について報告されている。対照的に、Ｓ１ＰＲ２はＳ１ＰＲ１及び−３のシグナル伝達と拮抗する。Ｓ１ＰＲ２は主にＧ_{１２／１３}を活性化し、及びＲｈｏ−Ｒｈｏキナーゼ経路を活性化し、及びＲａｃの機能を阻害する（図４）。これらの拮抗するＳ１ＰＲ経路間のバランスがＳ１Ｐに対する内皮細胞の応答を決定する。(Sphingosine 1-phosphate receptor signaling.Rosen H1, Gonzalez-Cabrera PJ, Sanna MG, Brown S. Annu Rev Biochem.78, 743-68 (2009).)(Sphingosine 1-phosphate receptor signaling.Rosen H1, Gonzalez-Cabrera PJ, Sanna MG, Brown S.Annu Rev Biochem.78, 743-68 (2009).)

本技術は、治療的有効量のＳ１ＰＲ２阻害剤を投与することを介して、ＦＥＶＲに苦しむ個人を安全に及び効果的に治療する組成物及び方法を提供する。

さらなる態様において、本技術は、小分子又は生物製剤を含んでもよいＳ１ＰＲ２阻害剤を含む薬学的組成物と、ＦＥＶＲに苦しんでいる対象を治療するためにこの組成物を対象に投与するための指示と、を含むキットを提供する。

本明細書において用いられる場合、「阻害」という用語は、たんぱく質の生物学的活性の低下、好ましくはヒトたんぱく質であるＳ１ＰＲ２の活性の低下を指す。

本明細書において用いられる場合、「遺伝子」という用語は、特定のたんぱく質、又は特定の場合には機能的又は構造的ＲＮＡ分子、をコードする核酸分子を意味する。

本明細書において用いられる場合、「たんぱく質」又は「ポリペプチド」は、長さ又は例えばグリコシル化若しくはリン酸化のような翻訳後修飾とは無関係に、アミノ酸のペプチド結合鎖を意味するように類義的に用いられる。

核酸分子又はポリペプチドに言及する場合、「野生型」という用語は、自然に発生する（例えば、ネイティブ、ＷＴ）核酸又はポリペプチドを意味する。

本明細書において用いられる場合、「治療」及び「療法」(treatment and therapy)という用語は、不調若しくは病気、不調若しくは病気の症状、若しくは不調若しくは病気の素因を、治療し、癒し、軽減し、緩和し、治し、解決し、改良し、改善し、若しくは影響を与える目的で、不調若しくは病気、不調若しくは病気の症状、若しくは不調若しくは病気の素因を有する患者若しくは対象に治療薬を適用若しくは投与すること、又はこれらの患者若しくは対象から単離された組織若しくは細胞系に治療薬を適用若しくは投与することとして定義される。

本明細書において用いられる場合、「治療的有効量」という用語は、所望の治療効果又は応答をもたらすであろうＳ１ＰＲ２阻害剤の量を意味する。

「患者」、「対象」、及び「個人」という用語は、本明細書において交換可能に使用され、治療され、診断され、及び／又は生物学的資料が採取される、哺乳類（例えば、ヒト、げっ歯類、ヒト以外の霊長類、イヌ、ウシ、ヒツジ、ウマ、ネコ等）を意味する。

本明細書において用いられる場合、「キット」という用語は、コンポーネントを含み、このコンポーネントを用いてＦＥＶＲの治療のために治療的有効量のＳ１ＰＲ２阻害剤を投与するための、パッケージされた製品のことを指す。このキットは、好ましくは、このキットのコンポーネントを保持する箱又はコンテナを含む。この箱又はコンテナには、ラベル又は米国食品医薬品局が承認したプロトコルが貼られている。この箱又はコンテナは、好ましくはプラスチック、ポリエチレン、ポリプロピレン、エチレン、又はプロピレン容器内に格納されている、本技術のコンポーネントを保持している。この容器は、キャップされた管又はびんである。このキットはまた、Ｓ１ＰＲ２阻害剤を投与するための指示を含んでいてもよい。

本発明は、部分的に、（例えばＳ１ＰＲ２拮抗薬の投与を介した）Ｓ１ＰＲ２活性の阻害が、例えばＦＥＶＲを有する対象の網膜のような、さもなければ網膜の発生において過少血管形成又は無血管形成を示し続いて網膜の完全性及び機能を損なうかもしれない異常な眼の血管新生が生じるであろう対象の網膜の血管形成を改善することができるという発見に基づく。特に、本明細書に示されるように、Ｓ１ＰＲ２拮抗薬の投与は、この発育異常疾患において生じる発生における過少血管形成又は無血管形成を改善することができ、網膜の発生中における血管床の確立を可能とし、これによってこのような病気に罹患した対象において通常続くであろう有害な異常血管新生を避けることができ、Ｓ１ＰＲ２拮抗薬の全体的な効果は網膜血管形成の改善である。

さらに、本発明は、後述するように、Ｚが−（Ｃ＝Ｏ）−ではない一般式（ＩＸ）のＳ１ＰＲ２拮抗薬、及び一般式（Ｘ）のＳ１ＰＲ２拮抗薬に関し、これらは特に網膜症又は不十分な血管新生によって特徴付けられる疾患の治療に用いることができる。Ｓ１ＰＲ２拮抗薬はそれを必要とする対象に投与されてもよく、及び本明細書に記載される医薬組成物に含まれてもよい。網膜症は、糖尿病性網膜症、黄斑変性症、高血圧性網膜症、放射線網膜症、日光網膜症、未熟児網膜症（ＲＯＰ）、ノリエ病（ＮＤ）、家族性滲出性硝子体網膜症（ＦＥＶＲ）、コーツ病、鎌状赤血球網膜症、網膜色素変性症、又は類似のものでありうる。不十分な血管新生によって特徴付けられる疾患は、粥状動脈硬化症、高血圧症、糖尿病、再狭窄、子癇前症、月経過多、新生児呼吸窮迫症、肺線維症、腎症、骨粗鬆症、筋萎縮性側索硬化症、脳卒中、アルツハイマー病、又は類似のものでありうる。

本明細書に記載される１ＰＲ２拮抗薬の１つの態様において、本発明は網膜の過少血管形成又は無血管形成のリスクがある対象において正常な網膜の血管床の確立を促す方法であって、この対象に治療的有効量のＳ１ＰＲ２拮抗薬を投与することを含む方法を提供する。一実施形態において、この対象は結果として生じる異常な血管新生のリスクを有する。一実施形態において、この対象は結果として生じる網膜完全性の喪失又は網膜剥離のリスクを有する。一実施形態において、この対象はＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある。

１つの態様において、本発明は、網膜血管系において低下したＦｚｄ４活性を有する対象の網膜の血管形成を正常化する方法であって、この対象に治療的有効量のＳ１ＰＲ２拮抗薬を投与することを含む方法を提供する。一実施形態において、この対象は結果として生じる異常な血管新生のリスクを有する。一実施形態において、この対象は結果として生じる網膜完全性の喪失又は網膜剥離のリスクを有する。一実施形態において、この対象はＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある。

１つの態様において、本発明は、網膜血管系において低下したＦｚｄ４活性を有する対象において正常な網膜の血管床を確立することを促す方法であって、この対象に治療的有効量のＳ１ＰＲ２拮抗薬を投与することを含む方法を提供する。一実施形態において、この対象は結果として生じる異常な血管新生のリスクを有する。一実施形態において、この対象は結果として生じる網膜完全性の喪失又は網膜剥離のリスクを有する。一実施形態において、この対象はＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある。

１つの態様において、本発明は、網膜血管系において低下したＮＤＰ活性を有する対象の網膜の血管形成を正常化する方法であって、この対象に治療的有効量のＳ１ＰＲ２拮抗薬を投与することを含む方法を提供する。一実施形態において、この対象は結果として生じる異常な血管新生のリスクを有する。一実施形態において、この対象は結果として生じる網膜完全性の喪失又は網膜剥離のリスクを有する。一実施形態において、この対象はＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある。

１つの態様において、本発明は、網膜血管系において低下したＮＤＰ活性を有する対象において正常な網膜の血管床を確立することを促す方法であって、この対象に治療的有効量のＳ１ＰＲ２拮抗薬を投与することを含む方法を提供する。一実施形態において、この対象は結果として生じる異常な血管新生のリスクを有する。一実施形態において、この対象は結果として生じる網膜完全性の喪失又は網膜剥離のリスクを有する。一実施形態において、この対象はＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある。

１つの態様において、本発明は、網膜血管系において低下したＴＳＰＡＮ１２活性を有する対象の網膜の血管形成を正常化する方法であって、この対象に治療的有効量のＳ１ＰＲ２拮抗薬を投与することを含む方法を提供する。一実施形態において、この対象は結果として生じる異常な血管新生のリスクを有する。一実施形態において、この対象は結果として生じる網膜完全性の喪失又は網膜剥離のリスクを有する。一実施形態において、この対象はＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある。

１つの態様において、本発明は、網膜血管系において低下したＴＳＰＡＮ１２活性を有する対象において正常な網膜の血管床を確立することを促す方法であって、この対象に治療的有効量のＳ１ＰＲ２拮抗薬を投与することを含む方法を提供する。一実施形態において、この対象は結果として生じる異常な血管新生のリスクを有する。一実施形態において、この対象は結果として生じる網膜完全性の喪失又は網膜剥離のリスクを有する。一実施形態において、この対象はＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある。

１つの態様において、本発明は、網膜血管系において低下したＬＲＰ５活性を有する対象の網膜の血管形成を正常化する方法であって、この対象に治療的有効量のＳ１ＰＲ２拮抗薬を投与することを含む方法を提供する。一実施形態において、この対象は結果として生じる異常な血管新生のリスクを有する。一実施形態において、この対象は結果として生じる網膜完全性の喪失又は網膜剥離のリスクを有する。一実施形態において、この対象はＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある。

１つの態様において、本発明は、網膜血管系において低下したＬＲＰ５活性を有する対象において正常な網膜の血管床を確立することを促す方法であって、この対象に治療的有効量のＳ１ＰＲ２拮抗薬を投与することを含む方法を提供する。一実施形態において、この対象は結果として生じる異常な血管新生のリスクを有する。一実施形態において、この対象は結果として生じる網膜完全性の喪失又は網膜剥離のリスクを有する。一実施形態において、この対象はＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある。

１つの態様において、本発明は、ＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある対象における網膜の正常な血管形成を促す方法であって、この対象に治療的有効量のＳ１ＰＲ２拮抗薬を投与することを含む方法を提供する。

１つの態様において、本発明は、ＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある対象における網膜の血管形成を増進する方法であって、この対象に治療的有効量のＳ１ＰＲ２拮抗薬を投与することを含む方法を提供する。

１つの態様において、本発明は、ＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある対象における網膜の過少血管形成又は無血管形成を抑制する方法であって、この対象に治療的有効量のＳ１ＰＲ２拮抗薬を投与することを含む方法を提供する。

１つの態様において、本発明は、ＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある対象における正常な網膜の血管床の確立を促す方法であって、この対象に治療的有効量のＳ１ＰＲ２拮抗薬を投与することを含む方法を提供する。

１つの態様において、本発明は、ＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある対象における周辺部網膜の過少血管形成又は無血管形成を抑制する方法であって、この対象に治療的有効量のＳ１ＰＲ２拮抗薬を投与することを含む方法を提供する。

本明細書に記載されるいくつかの実施形態において、治療的有効量のＳ１ＰＲ２拮抗薬の投与は、異常な過少血管又は無血管の網膜領域の確立／出現の前に行われうる。

１つの態様において、本発明は、ＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある対象における周辺部網膜の正常な血管形成を促す方法であって、この対象に治療的有効量のＳ１ＰＲ２拮抗薬を投与することを含む方法を提供する。

１つの態様において、本発明は、ＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある対象における周辺部網膜の血管形成を増進する方法であって、この対象に治療的有効量のＳ１ＰＲ２拮抗薬を投与することを含む方法を提供する。

１つの態様において、本発明は、ＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある対象における網膜の異常な血管新生を阻害する方法であって、この対象に治療的有効量のＳ１ＰＲ２拮抗薬を投与することを含む方法を提供する。

１つの態様において、本発明は、ＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある対象における網膜完全性の喪失を抑制する方法であって、この対象に治療的有効量のＳ１ＰＲ２拮抗薬を投与することを含む方法を提供する。

１つの態様において、本発明は、ＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある対象における視覚の喪失を抑制する方法であって、この対象に治療的有効量のＳ１ＰＲ２拮抗薬を投与することを含む方法を提供する。

１つの態様において、本発明は、ＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある対象における網膜剥離を抑制する方法であって、この対象に治療的有効量のＳ１ＰＲ２拮抗薬を投与することを含む方法を提供する。

加えて、１つの態様において、本発明は、網膜の過少血管形成又は無血管形成のリスクがある対象における網膜の血管形成を正常化するために有用な組成物を提供する。一実施形態において、この対象は結果として生じる異常な血管新生のリスクを有する。一実施形態において、この対象は結果として生じる網膜完全性の喪失又は網膜剥離のリスクを有する。一実施形態において、この対象はＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある。

一実施形態において、この組成物はＳ１ＰＲ２拮抗薬を含む薬学的組成物であって、この薬学的組成物はＳ１ＰＲ２拮抗薬の硝子体内投与のために有用である。

１つの態様において、本発明は、網膜の過少血管形成又は無血管形成のリスクがある対象における正常な網膜の血管床の確立を促すために有用な組成物を提供する。一実施形態において、この対象は結果として生じる異常な血管新生のリスクを有する。一実施形態において、この対象は結果として生じる網膜完全性の喪失又は網膜剥離のリスクを有する。一実施形態において、この対象はＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある。

１つの態様において、本発明は、網膜血管系において低下したＦｚｄ４活性を有する対象における網膜の血管形成を正常化するために有用な組成物を提供する。一実施形態において、この対象は結果として生じる異常な血管新生のリスクを有する。一実施形態において、この対象は結果として生じる網膜完全性の喪失又は網膜剥離のリスクを有する。一実施形態において、この対象はＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある。

１つの態様において、本発明は、網膜血管系において低下したＦｚｄ４活性を有する対象における正常な網膜の血管床の確立を促すために有用な組成物を提供する。一実施形態において、この対象は結果として生じる異常な血管新生のリスクを有する。一実施形態において、この対象は結果として生じる網膜完全性の喪失又は網膜剥離のリスクを有する。一実施形態において、この対象はＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある。

１つの態様において、本発明は、網膜血管系において低下したＮＤＰ活性を有する対象における網膜の血管形成を正常化するために有用な組成物を提供する。一実施形態において、この対象は結果として生じる異常な血管新生のリスクを有する。一実施形態において、この対象は結果として生じる網膜完全性の喪失又は網膜剥離のリスクを有する。一実施形態において、この対象はＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある。

１つの態様において、本発明は、網膜血管系において低下したＮＤＰ活性を有する対象における正常な網膜の血管床の確立を促すために有用な組成物を提供する。一実施形態において、この対象は結果として生じる異常な血管新生のリスクを有する。一実施形態において、この対象は結果として生じる網膜完全性の喪失又は網膜剥離のリスクを有する。一実施形態において、この対象はＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある。

１つの態様において、本発明は、網膜血管系において低下したＬＲＰ５活性を有する対象における網膜の血管形成を正常化するために有用な組成物を提供する。一実施形態において、この対象は結果として生じる異常な血管新生のリスクを有する。一実施形態において、この対象は結果として生じる網膜完全性の喪失又は網膜剥離のリスクを有する。一実施形態において、この対象はＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある。

１つの態様において、本発明は、網膜血管系において低下したＬＲＰ５活性を有する対象における正常な網膜の血管床の確立を促すために有用な組成物を提供する。一実施形態において、この対象は結果として生じる異常な血管新生のリスクを有する。一実施形態において、この対象は結果として生じる網膜完全性の喪失又は網膜剥離のリスクを有する。一実施形態において、この対象はＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある。

１つの態様において、本発明は、網膜血管系において低下したＴＳＰＡＮ１２活性を有する対象における網膜の血管形成を正常化するために有用な組成物を提供する。一実施形態において、この対象は結果として生じる異常な血管新生のリスクを有する。一実施形態において、この対象は結果として生じる網膜完全性の喪失又は網膜剥離のリスクを有する。一実施形態において、この対象はＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある。

１つの態様において、本発明は、網膜血管系において低下したＴＳＰＡＮ１２活性を有する対象における正常な網膜の血管床の確立を促すために有用な組成物を提供する。一実施形態において、この対象は結果として生じる異常な血管新生のリスクを有する。一実施形態において、この対象は結果として生じる網膜完全性の喪失又は網膜剥離のリスクを有する。一実施形態において、この対象はＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある。

１つの態様において、本発明は、ＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある対象において網膜の正常な血管形成を促すために有用な組成物を提供する。

１つの態様において、本発明は、ＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある対象において網膜の血管形成を増進するために有用な組成物を提供する。

１つの態様において、本発明は、ＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある対象において網膜の過少血管形成又は無血管形成を抑制するために有用な組成物を提供する。

１つの態様において、本発明は、ＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある対象の網膜における正常な網膜の血管床の確立に有用な組成物を提供する。

１つの態様において、本発明は、ＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある対象において周辺部網膜の過少血管形成を抑制するために有用な組成物を提供する。

１つの態様において、本発明は、ＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある対象において周辺部網膜の正常な血管形成を促すために有用な組成物を提供する。

１つの態様において、本発明は、ＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある対象において周辺部網膜の血管形成を増進するために有用な組成物を提供する。

１つの態様において、本発明は、ＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある対象における網膜の異常な血管新生の阻害に有用な組成物を提供する。

１つの態様において、本発明は、ＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある対象において網膜完全性の喪失を抑制するために有用な組成物を提供する。

１つの態様において、本発明は、ＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある対象において視覚の喪失を抑制するために有用な組成物を提供する。

１つの態様において、本発明は、ＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある対象において網膜剥離を抑制するために有用な組成物を提供する。

１つの態様において、本発明は、ＦＥＶＲのリスクを有するか又はＦＥＶＲのリスクがある対象を治療する方法であって、この対象に治療的有効量のＳ１ＰＲ２拮抗薬を投与することを含む方法を提供する。

１つの態様において、本発明は、ＦＥＶＲの治療に有用な薬学的組成物であって、治療的有効量のＳ１ＰＲ２拮抗薬を含む薬学的組成物を提供する。

一実施形態において、この薬学的組成物はＳ１ＰＲ２拮抗薬の硝子体内送達のために有用である。

さらなる態様において、本発明は、本発明の薬学的組成物を含み、この薬学的組成物をこれを必要とする対象に投与するための指示を含んでいてもよい、キットを提供する。一実施形態において、このキットはＦＥＶＲの治療のために有用である。一実施形態において、このキットは網膜の過少血管形成又は無血管形成のリスクがある対象において正常な網膜の血管床の確立を促す治療であって、この対象に治療的有効量のＳ１ＰＲ２拮抗薬を投与することを含む治療のために有用である。一実施形態において、このキットは結果として生じる異常な血管新生の治療のために有用である。一実施形態において、このキットは結果として生じる網膜完全性の喪失又は網膜剥離の治療のために有用である。

本開示のさらなる特徴及び有利な点が続く説明及び添付の請求の範囲において述べられるだろう。

本開示の上記の及び他の利点及び特徴が得られうる態様を説明するために、前に簡単に記述された原理のより詳細な記述が、添付の図面に示されているその特定の実施形態を参照して与えられるだろう。これらの図面は本開示の典型的な実施形態のみを表しているためその範囲を限定するものとしては考えられないことを理解して、本明細書の原理が以下の添付の図面を用いながらさらなる具体性及び詳細をもって記述及び説明される。

ヒトの眼の血管形成を表す。（Ａ）通常は、網膜血管系は視神経乳頭から網膜周辺部へと外に突出している。家族性滲出性硝子体網膜症（ＦＥＶＲ）は、網膜の過少血管形成をもたらす遺伝性障害であり（Ｂ）、続いて起こる異常な血管新生は網膜剥離をもたらしうる（Ｃ）。

Ｎｏｒｒｉｎ経路と比較して標準Ｗｎｔ経路を表す。Ｆｒｉｚｚｌｅｄ−４受容体を介したＮｏｒｒｉｎシグナル伝達は、網膜における血管の発生を制御し、これはベータカテニンを介してシグナル伝達するものと仮説が立てられている。Ｎｏｒｒｉｎ、Ｆｒｉｚｚｌｅｄ−４、ＬＲＰ５、及びＴＳＰＡＮ１２をコードする遺伝子における変異は、家族性滲出性硝子体網膜症（ＦＥＶＲ）を引き起こす。Cell 139, 227-29 (2009)を参照。

スフィンゴシン−１−リン酸（Ｓ１Ｐ）の生成経路を表す。

スフィンゴシン−１−Ｐ受容体（Ｓ１ＰＲ）シグナル伝達経路を表す。Ｓ１ＰＲ１、２、及び３は、血管内皮細胞にみられる。Ｓ１ＰＲ１及びＳ１ＰＲ３は血管の移動を駆動し、一方でＳ１ＰＲ２はそれらの作用に対抗する。この点で、Ｓ１ＰＲ２の阻害（血管の移動の阻害剤を阻害すること）は、網膜血管の発生障害である家族性滲出性硝子体網膜症（ＦＥＶＲ）に関して正常な網膜の血管新形成の回復をもたらすだろう。（Nat. Rev. Cancer 10, 489-503 (2010)からの図）

Ｓ１ｐｒ２遺伝子を不活性化した際の、ＦＥＶＲのＴｓｐａｎ１２^−／−マウスモデルにおける血管系パターン形成の改善を表す。網膜はＰ１７において平らに載せられ、ｉｓｏｌｅｃｔｉｎＢ４、ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ５９４で染色した後で血管系が共焦点顕微鏡で可視化された。

Ｓ１ｐｒ２遺伝子を不活性化した際の、ＦＥＶＲのＦｚｄ４^−／−マウスモデルにおける血管系パターン形成の改善を表す。網膜はＰ１７において平らに載せられ、ｉｓｏｌｅｃｔｉｎＢ４、ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ５９４で染色した後で血管系が共焦点顕微鏡で可視化された。

Ｓ１ＰＲ２拮抗薬であるＪＴＥ−０１３によるＦｚｄ４^−／−マウスの治療により、ＦＥＶＲ表現型が改善したことを表す。Ｆｚｄ４^−／−マウスは、０．５ｍｇ／ｋｇのＪＴＥ−０１３をＰ７からＰ２５まで２日おきに腹腔内に注入された。網膜はＰ２５において平らに載せられ、ｉｓｏｌｅｃｔｉｎＢ４、ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ５９４で染色した後で血管系が共焦点顕微鏡で可視化された。ＪＴＥ−０１３で治療されたマウスにおいては正常な網膜血管パターン形成のかなりの回復がみられた。

スフィンゴシン−１−リン酸受容体２（Ｓ１ＰＲ２）の結合ポケットを表す。タンパク質の細胞外表面に位置する３４アミノ酸で構成されたポケットが特定された。これを、対応するスフィンゴシン−１−リン酸受容体と対応付ける。アミノ酸は以下のとおり、Tyr18、Lys22、Glu23、Leu25、Glu26、Gln28、Glu29、Thr30、Arg33、Ala36、Ser37、Ile40、Phe86、Asn89、Thr90、Leu92、Ser93、Gly94、Ser95、Thr97、Leu98、Trp105、Arg108、Glu109、Val182、Leu183、Pro184、Tyr268、Lys269、Ala270、His271、Tyr272、Phe274、及びAla275である。これらのアミノ酸は、タンパク質の膜貫通領域Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、及びＶＩＩに位置する。ヒトのＳ１ＰＲ２リガンドの結合ポケットが、結合したＪＴＥ−０１３とともに示されている。ＪＴＥ−０１３は、Ｓ１ＰＲ２に対して１８ｎＭの親和性を有し、他のＳ１ＰＲと比べてＳ１ＰＲ２に１００倍大きい特異性を有する化合物である。Ｓ１ＰＲ２結合ポケットの分子モデリングが、Ｓ１ＰＲ２拮抗薬を特定するために用いられた。

スフィンゴシン−１−リン酸受容体２及びその特定された標的領域を表す。これらの特定された化合物は、その既知の受容体よりも強く結合ポケットと相互作用し、このようにＳ１Ｐが結合することを防ぐ。この同定された化合物は購入可能である。

成体ゼブラフィッシュにおけるｆｚｄ４遺伝子の不活性化が、ヒト及びマウスで観察される異常な血管新生をもたらすことを表す。ｆｚｄ４遺伝子をターゲットするために、１対のＴＡＬＥＮヌクレアーゼが作製された。変異のかなりの部分を持つ創始者（ｆｏｕｎｄｅｒ）はｆｌｉ１：ＥＧＦＰトランスジェニック魚（血管系に対するＧＦＰマーカー）と交配され、得られたＦ１魚は成体にまで育てられた。ｆｚｄ４遺伝子のオープンリーディングフレームにおいて１０ヌクレオチドの挿入が確認された。ホモ接合変異体を含む子孫を得るために、ｆｚｄ４ヘテロ接合の魚のペアが交配された。ホモ接合性変異体魚は、明確な胚の表現型を全く有さず、成体にまで育てられた。網膜血管系がｆｚｄ４変異によって影響を受けているかどうかを確認するために、野生型及び変異体の魚からの網膜が切除されて平らに載せられ、共焦点顕微鏡で可視化された。ホモ接合ｆｚｄ４^−／−変異体は、広範囲の無血管性領域、及び血管形成された領域における異常な血管パターンを有していた。

、、、実施可能な新しいＳ１ＰＲ２拮抗薬として特定された２１個の化合物を表す。

本開示の様々な実施形態が以下に詳細に議論される。特定の実装例が議論されるが、これは説明の目的でのみなされていることを理解すべきである。本開示において引用された全ての文献は本明細書に組み込まれる。当業者は、本開示の精神及び範囲から離れることなく、他の構成要素及び構成が用いられてもよいことを理解するだろう。

記載されるのは、治療的有効量のＳ１ＰＲ２拮抗薬の投与により網膜血管障害を治療するための組成物及び方法である。好ましい実施形態において、治療レジメンはＦＥＶＲの治療に向けて適合される。

Ｓ１ＰＲ２拮抗薬は以下の一般式（ＩＸ）で特徴付けられる化合物であってもよい。
ここで、
Ｒ_１はＣ_１−Ｃ_１２アルキルであり、
Ｒ_２、Ｒ_３、及びＲ４_は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシ、Ｃ_１−Ｃ_６ペルハロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_４ペルハロアルコキシ、アミノ、モノ若しくはジＣ_１−Ｃ_４アルキルアミノ、Ｃ_３−Ｃ_７シクロアルキル、又はＣ_３−Ｃ_７シクロアルキルオキシであり、
Ｒ_３及びＲ_４は、ｈ、ｉ、又はｊに位置することができるが、同じ箇所には同時に位置せず、
それぞれのＲ_５は、独立して、水素、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシ、Ｃ_１−Ｃ_６ペルハロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_４ペルハロアルコキシ、アミノ、モノ若しくはジＣ_１−Ｃ_４アルキルアミノ、Ｃ_３−Ｃ_７シクロアルキル、及びＣ_３−Ｃ_７シクロアルキルオキシから選択され、
ｎは０、１、２、３、又は４であり、
ＸはＮＲ_ａ、ＣＨ_２、又は−Ｃ（＝Ｏ）−であり、ここでそれぞれのＲ_ａは独立して水素及びＣ_１−Ｃ_３アルキルから選択され、
Ｙ_１及びＹ_２はそれぞれ独立してＮＲ_ａ、ＣＨ_２、又はＯから選択され、
Ｚは以下のうちの１つから選択される、基の任意の幾何異性体である。

一実施形態において、Ｘは−ＮＨ−ではなく、及び／又は、Ｒ_３及びＲ_４はイソプロピルではない。さらなる実施形態において、Ｚが−Ｃ（＝Ｏ）−であってかつＲ_３又はＲ_４がイソプロピルである場合Ｘは−ＮＨ−ではなく、及び、Ｚが−Ｃ（＝Ｏ）−であってかつＸが−ＮＨ−である場合Ｒ_３又はＲ_４はイソプロピルではない。他の実施形態において、Ｓ１ＰＲ２拮抗薬は化合物１−７のうちの１つであってもよい。以下に示される化合物１−７は、Ｓ１ＰＲ２を阻害するＪＴＥ−０１３の類縁体であり、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０４０６３７号（ＷＯ２０１１／１５９８６４）に記載されたＪＴＥ−０１３と比較して向上した安定性を有している。

ある実施形態においては、したがって、開示された組成物、方法、及びキットで用いられるＳ１ＰＲ２拮抗薬は、以下から選択される。

他の実施形態において、Ｓ１ＰＲ２拮抗薬はＺが−Ｃ（＝Ｏ）−ではない一般式ＩＸの化合物であってもよく、特に、Ｓ１ＰＲ２拮抗薬はＪＴＥ−０１３又はその類縁体の尿素結合の生物学的に等価な置換を含んでいてもよい。

Ｓ１ＰＲ２拮抗薬は以下の一般式（Ｘ）で特徴付けられる化合物であってもよい。
ここで、
Ｒ_１はＣ_１−Ｃ_１２アルキルであり、
Ｒ_２、Ｒ_３、及びＲ４_は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシ、Ｃ_１−Ｃ_６ペルハロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_４ペルハロアルコキシ、アミノ、モノ若しくはジＣ_１−Ｃ_４アルキルアミノ、Ｃ_３−Ｃ_７シクロアルキル、又はＣ_３−Ｃ_７シクロアルキルオキシであり、
Ｒ_３及びＲ_４は、ｈ、ｉ、又はｊに位置することができるが、同じ箇所には同時に位置せず、
それぞれのＲ_５は、独立して、水素、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシ、Ｃ_１−Ｃ_６ペルハロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_４ペルハロアルコキシ、アミノ、モノ若しくはジＣ_１−Ｃ_４アルキルアミノ、Ｃ_３−Ｃ_７シクロアルキル、及びＣ_３−Ｃ_７シクロアルキルオキシから選択され、
ｎは０、１、２、３、又は４であり、
Ｘ及びＹは、それぞれ独立して、ＮＲ_ａ、Ｏ、及びＣＨ_２から選択され、ここでそれぞれのＲ_ａは独立して水素及びＣ_１−Ｃ_３アルキルから選択され、
及び、Ｚは以下のうちの１つから選択される、基の任意の幾何異性体である。

一実施形態において、Ｚは−Ｃ（＝Ｏ）ではない。特に、開示された組成物、方法、及びキットで用いられるＳ１ＰＲ２拮抗薬は、以下に示される化合物８及び９のうちの１つから選択されてもよい。

いくつかの実施形態によれば、治療的有効量のＳ１ＰＲ２拮抗薬は以下の化合物から選択される化学式を有する：２−［３−［（４−アミノ−２−メチルピリミジン−５−イル）メチル］−４−メチル−１，３−チアゾール−３−イウム−５−イル］エチルハイドロジェンホスフェート(PubChem ID No. 3382778)、［（２Ｓ，３Ｒ）−２−アザニウミル−３−ヒドロキシオクタデシル］ハイドロジェンホスフェート(PubChem No. 44317142), (also as 520 and 644260)、（５ａＲ，６Ｒ，９Ｓ，９ａＳ）−２−カルボキシ−６−ヒドロキシ−６−メチル−３−ペンチル−９−プロパ−１−エン−２−イル−７，８，９，９ａ−テトラヒドロ−５ａＨ−ジベンゾフラン−１−オレート (PubChem ID No. 54736865)、２−（１−アミノ−２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ−デシル−１，３−オキサゾール−４−カルボキサミド(PubChem ID No. 3866342)、［（２Ｓ，３Ｒ）−２−アザニウミル−３−ヒドロキシヘプタデシル］ハイドロジェンホスフェート(PubChem ID. No. 46891770 (also as 3247041)、［（１Ｓ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−（４−メチルピペラジン−４−イウム−１−イル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−２−イル］−（キノリン−３−イルメチル）アザニウム(PubChem ID No. 51624406)、５−［（２Ｅ）−２−（３−カルボキシ−４−オキソシクロヘキサ−２，５−ジエン−１−イリデン）ヒドラジニル］−２−スルホオキシ安息香酸(PubChem ID. No. 9578291)、５，７−ジヒドロキシ−３−［３−ヒドロキシ−４−メトキシ−５−（３−メチルブタ−２−エニル）フェニル］−２，３−ジヒドロクロメン−４−オン(Pubchem ID No. 9864156)、５−ヒドロキシ−２−（１−ヒドロキシ−１１−フェニルウンデシリデン）シクロヘキサン−１，３−ジオン(PubChem ID No. 365015)、３−［（３Ｓ）−３−アザニウミル−３−（２−ヒドロキシナフタレン−１−イル）プロパノイル］−１−メチル−４−オキソキノリン−２−オレート(PubChem ID No. 28094480)、２−［（Ｅ）−２−アントラセン−9−イル−１−シアノエテニル］−６−メチルキナゾリン−４−オレート(PubChem ID No. 40592676)、［（Ｅ，２Ｓ，３Ｒ）−２−アザニウミル−３−ヒドロキシオクタデカ−４−エニル］ハイドロジェンホスフェート(PubChem ID No. 10883396)、２−クロロ−３，６−ジヒドロキシ−５−ウンデシルシクロヘキサ−２，５−ジエン−１，４−ジオン(PubChem ID No. 342302)、（２Ｓ）−２−アミノ−２−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−４−メチルペンタン酸(PubChem ID No. 56923845)、（５ａＲ，６Ｓ，９Ｓ，９ａＳ）−２−カルボキシ−６−ヒドロキシ−６−メチル−３−ペンチル−９−プロパ−１−エン−２−イル−７，８，９，９ａ−テトラヒドロ−５ａＨ−ジベンゾフラン−１−オレート(PubChem ID. No. 54734912)、［（１Ｓ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−（４−メチルフェニル）スルホニルオキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−２−イル］−プロパン−２−イルアザニウム(PubChem ID. No. 18390590)、２−アミノ−２−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニル）−３−ヒドロキシ−３−メチルブタン酸(PubChem ID No. 56923928)、［（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−（２−メトキシエチルアミノ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−２−イル］−［（４−フェニルフェニル）メチル］アザニウム(PubChem ID No. 51508548)、（２−ヒドロキシフェニル）メチル−［（１Ｓ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルスルファニル−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−２−イル］アザニウム(PubChem ID. No. 28960354)、［（１Ｓ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−（４−メチルピペラジン−４−イウム−１−イル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−２−イル］−［（２−ヒドロキシフェニル）メチル］アザニウム(PubChem ID. No. 51624683）、（１３−メチル−１７−オキソ−９，１１，１２，１４，１５，１６−ヘキサヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−イル）ハイドロジェンサルフェート(PubChem ID No. 27993)。

本明細書に開示される組成物、方法、及びキットのために適した化合物は、Ｓ１ＰＲ２と拮抗する化合物である。Ｓ１ＰＲ２拮抗薬の非限定的な例は、Ｓ１ＰＲ２結合ポケットと相互作用する本明細書で特定された化合物（例えば図８、９、及び１１を参照）に加えて、従来技術において公知のもの及び記載されたものを含む（例えば、国際特許出願ＰＣＴ／ＵＳ２０１３／０３３２８９号（国際公開第２０１３／１４８４６０号）及びＰＣＴ／ＵＳ２０１４／０１１０３号（国際公開第２０１４／１５８３０２号）、米国特許第８７０３７９７号、国際公開第２０１１／１５９８６４号、国際公開第２００８／１５４４７０号、並びに国際公開第２０１１／０９８３０１号を参照）。Ｓ１ＰＲ２に拮抗する化合物の類縁体もまた、ある実施形態における開示された組成物、方法、及びキットで用いることが意図されている。Ｓ１ＰＲ２の拮抗作用は、本明細書に記載されたものや技術分野において公知であるような方法を用いて容易に試験できる。

いくつかの実施形態によれば、Ｓ１ＰＲ２拮抗薬は以下の化学構造を有する１−（２，６−ジクロロ−４−ピリジル）−３−［（４−イソプロピル−１，３−ジメチル−ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）アミノ］尿素でありうる。

いくつかの実施形態によれば、Ｓ１ＰＲ２拮抗薬は以下の一般式（Ｉ）で特徴付けられる化合物でありうる。
ここで、
−Ｒ１はＣ１−Ｃ１２アルキルであり、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ペルハロアルキル、Ｃ１−Ｃ４ペルハロアルコキシ、アミノ、モノ−若しくはジＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル、又はＣ３−Ｃ７シクロアルキルオキシであり、及び、Ｒ３及びＲ４は、任意的にｈ、ｉ、又はｊに位置するが、同じ箇所には同時に位置せず、
−Ｒ５は、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ペルハロアルキル、Ｃ１−Ｃ４ペルハロアルコキシ、アミノ、モノ−若しくはジＣ１−Ｃ４アルキルアミノ、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル、又はＣ３−Ｃ７シクロアルキルオキシであり、及び、ｎは０、１、２、３、又は４である。

いくつかの実施形態によれば、Ｓ１ＰＲ２拮抗薬は以下の一般式にＩＩで特徴付けられる化合物でありうる。
ここで、
−ＸはＮＲ^ａＲ^ｂ、ＳＲ^ｂ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、又はＩであり、及び、
−Ｒ１はＨ又はＲ^ｂであり、
−Ｒ２はＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、又はＲ^ｂであり、
−Ｒ^ａはＨ又はＲ^ｂであり、Ｒ^ｂは１〜１２の炭素原子を有する分岐鎖又は直鎖のアルキルであり、ここで１以上、好ましくは１〜７の水素原子はＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＲ^ａ、ＣＯＯＲ^３、ＣＮ、Ｎ（Ｒ^ａ）_２で置換されていてもよく、及び、ここで１以上、好ましくは１〜７の隣接していないＣＨ２基はＯ、ＮＲ^ａ、Ｓ、若しくはＳＯ_２で、及び／又は−ＣＨ＝ＣＨ−基で置換されていてもよく、又は、３〜７の環炭素原子を有するシクロアルキル又はシクロアルキルアルキレンであり、
−ＷはＣ＝Ｏ、Ｃ＝Ｓ、ＳＯ２、又はＳＯであり、
−ＱはＮＲ３、−Ｏ−、又は−Ｓ−であり、
Ｒは水素、Ｒｂ、Ａｒ、又はＨｅｔであり、Ａｒは、単環又は二環式の、飽和、不飽和、又は芳香族の、６〜１４の炭素原子を有する炭素環であって、置換されていなくても、又はＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｒ^ｂ、ＯＲ３、−［Ｃ（Ｒ_３）_２］ｎ−ＯＲ^３、Ｎ（Ｒ^３）_２、−［Ｃ（Ｒ^３）２］ｎ−Ｎ（Ｒ^３）_２、ＮＯ_２、ＣＮ、ＣＯＯＲ^３、ＣＦ_３、ＯＣＦ_３、ＣＯＮ（Ｒ^３）、ＮＲ^３ＣＯＡ、ＮＲ^３ＣＯＮ（Ｒ^３）_２、−［Ｃ（Ｒ^３）_２］ｎ−Ｈｅｔ、−［Ｃ（Ｒ^３）_２］ｎ−Ａｒ、−［Ｃ（Ｒ^３）_２］ｎ−シクロアルキル、−［Ｃ（Ｒ^３）_２］ｎ−ＣＯＮ（Ｒ^３）_２、−［（Ｒ^３）_２］ｎ−ＣＯＯＲ^３、−［Ｃ（Ｒ^３）_２］ｎ−ＮＲ^３−［Ｃ（Ｒ^３）_２］ｎ−ＣＯ^２Ｒ^３、−［Ｃ（Ｒ^３）_２］ｎ−ＮＲ^３−［Ｃ（Ｒ^３）２］ｎ−ＯＲ^３、−ＳＯ_２−［Ｃ（Ｒ^３）２］ｎ−ＣＯ^２Ｒ^３，−ＳＯ_２−Ｎ（Ｒ^３）_２］ｎ−［ＣＯ_２Ｒ^３、−［Ｃ（Ｒ^３）_２］Ｎ−ＳＯ_２−［Ｃ（Ｒ^３）］ｎ−ＣＯ_２Ｒ３、−ＳＯ２［Ｃ（Ｒ^３）_２］ｎ−ＯＲ^３、−ＳＯ_２Ｎ（Ｒ^３）_２−［Ｃ（Ｒ^３）_２］ｎ−ＯＲ^３、−［Ｃ（Ｒ^３）_２］Ｎ−ＳＯ_２−［Ｃ（Ｒ^３）_２］ｎ−ＯＲ^３、ＮＲ^３ＣＯＮ（Ｒ^３）_２、ＮＲ^３ＳＯ_２Ｒ^ｂ、ＣＯＲ^３、ＳＯ^２Ｎ（Ｒ^３）_２、ＳＯ２Ｎ（Ｒ３）Ｒｂ、ＳＯＲｂ、ＳＯＮＲ^３Ｒ^ｂ、ＳＯ_２Ｒ^ｂ、及び／又は−Ｏ［Ｃ（Ｒ^３）_２］ｎ−ＣＯＯＲ^３で１置換され、２置換され、又は３置換されていてもよく、Ｈｅｔは、単環又は二環式の、飽和、不飽和、又は芳香族の、１〜４のＮ、Ｏ、及び／又はＮを有する複素環であって、置換されていなくても、又はＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｒ^ｂ、ＯＲ３、−［Ｃ（Ｒ_３）_２］ｎ−ＯＲ^３、Ｎ（Ｒ^３）_２、−［Ｃ（Ｒ^３）２］ｎ−Ｎ（Ｒ^３）_２、ＮＯ_２、ＣＮ、ＣＯＯＲ^３、ＣＦ_３、ＯＣＦ_３、ＣＯＮ（Ｒ^３）、ＮＲ^３ＣＯＡ、ＮＲ^３ＣＯＮ（Ｒ^３）_２、−［Ｃ（Ｒ^３）_２］ｎ−Ｈｅｔ、−［Ｃ（Ｒ^３）_２］ｎ−Ａｒ、−［Ｃ（Ｒ^３）_２］ｎ−シクロアルキル、−［Ｃ（Ｒ^３）_２］ｎ−ＣＯＮ（Ｒ^３）_２、−［（Ｒ^３）_２］ｎ−ＣＯＯＲ^３、−［Ｃ（Ｒ^３）_２］ｎ−ＮＲ^３−［Ｃ（Ｒ^３）_２］ｎ−ＣＯ_２Ｒ^３、−［Ｃ（Ｒ^３）_２］ｎ−ＮＲ^３−［Ｃ（Ｒ^３）_２］ｎ−ＯＲ^３、−ＳＯ_２−［Ｃ（Ｒ^３）２］ｎ−ＣＯ_２Ｒ^３，−ＳＯ_２−Ｎ（Ｒ^３）_２］ｎ−［ＣＯ_２Ｒ^３、−［Ｃ（Ｒ^３）_２］Ｎ−ＳＯ_２−［Ｃ（Ｒ^３）］ｎ−ＣＯ_２Ｒ３、−ＳＯ_２［Ｃ（Ｒ^３）_２］ｎ−ＯＲ^３、−ＳＯ_２Ｎ（Ｒ^３）_２−［Ｃ（Ｒ^３）_２］ｎ−ＯＲ^３、−［Ｃ（Ｒ^３）_２］Ｎ−ＳＯ_２−［Ｃ（Ｒ^３）_２］ｎ−ＯＲ^３、ＮＲ^３ＣＯＮ（Ｒ^３）_２、ＮＲ^３ＳＯ_２Ｒ^ｂ、ＣＯＲ^３、ＳＯ_２Ｎ（Ｒ^３）_２、ＳＯ２Ｎ（Ｒ３）Ｒｂ、ＳＯＲｂ、ＳＯＮＲ^３Ｒ^ｂ、ＳＯ_２Ｒ^ｂ、及び／又は−Ｏ［Ｃ（Ｒ^３）_２］ｎ−ＣＯＯＲ^３で１置換され、２置換され、又は３置換されていてもよく、
−Ｒ^１はＨ又はＲｂであり、
−Ｒ^２はＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、又はＲｂであり、
−Ｒ³はＨ又はＲｂであり、
−ｎは０、１、２、３、４、５、６、７、又は８である。

ある実施形態において、化合物は以下から選択された化合物であってもよい：
２−［１−［２−（５−クロロ−２，４−ジメトキシ−アニリノ）−２−オキソ−エチル］−２，４−ジオキソ−キナゾリン−３−イル］酢酸、−Ｎ−（５−クロロ−２，４−ジメトキシ−フェニル）−２−［２，４−ジオキソ−３−［２−オキソ−２−［２−（３−ピリジル(3- pridyl)）エチルアミノ］エチル］キナゾリン−１−イル］、２−［４−［１−［２−（５−クロロ−２，４−ジメトキシ−アニリノ）−２−オキソ−エチル］−２，４−ジオキソ−キナゾリン−３−イル］フェニル］−Ｎ−フェネチル−アセトアミド、４−［６−クロロ−１−［２−（３−クロロ−４−エトキシ−フェニル）−２−オキソ−エチル］−２，４−ジオキソ−キナゾリン−３−イル］−Ｎ−シクロペンチル−ブタンアミド、Ｎ−（５−クロロ−２，４−ジメトキシ−フェニル）−２−［２，４−ジオキソ−３−［２−（フェネチルアミノ）エチル］キナゾリン−１−イル］アセトアミド、−ｔｅｒｔ−ブチル２−［１−［２−（５−クロロ−２，４−ジメトキシ−アニリノ）−２−オキソ−エチル］−２，４−ジオキソ−キナゾリン−３−イル］アセテート、−ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［２−［１−［２−（５−クロロ−２，４−ジメトキシ−アニリノ）−２−オキソ−エチル］−２，４−ジオキソ−キナゾリン−３−イル］エチル］カルパメート、−２−［１−［２−（５−クロロ−２，４−ジメトキシ−アニリノ）−２−オキソ−エチル］−２，４−ジオキソ−ピリド［３，２−ｄ］ピリミジン−３−イル］酢酸、−２−［１−［２−（５−クロロ−２，４−ジメトキシ−アニリノ）−２−オキソ−エチル］−２−オキソ−４Ｈ−キナゾリン−３−イル酢酸、Ｎ−（５−クロロ−２，４−ジメトキシ−フェニル）−２−［３−（３−メトキシベンゾイル）−７−メチル−４−４ａ，８ａ−ジヒドロ−１，８−ナフチリジン−１−イル］アセトアミド、２−［１−［２−［（２，６−ジクロロ−４−ピリジル）アミノ］−２−オキソ−エチル］−５−メチル−２，４−ジオキソ−キナゾリン−３−ｌ］酢酸、４−メチル−８−（２，４，６−トリメチルアニリノ）−２Ｈ−フタラジン−１−オン、４−メチル−８−（２，４，６−トリメチルアニリノ）−２Ｈ−イソキノリン−１−オン、８−（２，６−ジメチルアニリノ）−２Ｈ−イソキノリン−１−オン、８−（４−フルオロ−２，６−ジメチル−アニリノ）−４−メチル−２Ｈ−フタラジン−１−オン、−４−エチル−８−（２，４，６−トリメチルアニリノ）−２Ｈ−フタラジン−１−オン、４−イソプロピル−８−（２，４，６−トリメチルアニリノ）−２Ｈ−フタラジン−１−オン、−４−（２−ヒドロキシエチル）−８−（２，４，６−トリメチルアニリノ）−２Ｈ−フタラジン−１−オン、−８−（２，６−ジエチル−４−フルオロ(fluro)−アニリノ）−４−メチル−２Ｈ−フタラジン−１−オン、８−（４−クロロ−２，６−ジメチル−アニリノ）−４−メチル−２Ｈ−フタラジン−１−オン、−４−エチル−８−（４−フルオロ−２，６−ジメチル−アニリノ）−２Ｈ−フタラジン−１−オン、−５−（２−プロピルピラゾール−３イル）２−２（２，４，６−トリメチルアニリノ）ベンズアミド、−５−メトキシ−２−（２，４，６−トリメチルアニリノ）ベンズアミド、５−クロロ−２−（２，４，６−トリメチルアニリノ）ベンズアミド。

ある実施形態において、化合物は以下から選択された化合物であってもよい：
２−アミノ−２−［２−（４−オクチルフェニル）エチル］プロパン−１，３−ジオール、
５−［［３−クロロ−４−（２，３ジヒドロキシプロポキシ）フェニル］メチル］−３−（ｏ−トリル）−２−（プロピルアミノ）チアゾリジン−４−オン、
２−アミノ−２−［２−［４−（３−ベンジルオキシフェニル）スルファニル−２−クロロ−フェニル］エチル］プロパン−１，３−ジオール、
１−［５−［（３Ｒ）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−３−メチル−ブチル］−１−メチル−ピロール−２−イル］−４−（ｐ−トリル）ブタン−１−オン、
３−アミノ−４−（３−オクチルアニリノ）−４−オキソ−ブチル］ホスホン酸、及び
５−［４−フェニル−５−（トリフルオロメチル）−２−チエニル］−３−［３−（トリフルオロメチル）オキサジアゾール。

他の実施形態において、Ｓ１ＰＲ２拮抗薬は一般式（ＩＩＩ）を有する化合物でありうる。
ここで、
Ａｒ^１は任意的に複素環又は芳香族複素環で置換され、
Ａｒ^２は任意的に複素環又は芳香族複素環で置換され、
ＷはＮＲ^ａ−、Ｏ、又は−ＣＨ_２−であり、ここでＲ^ａは水素又はＣ１−Ｃ３アルキルであり、
Ｚは−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−、Ｏ、−ＣＨ_２−、＝Ｎ−、又は＝ＣＨ−であり、
Ｙは−ＮＲ^ａ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｎ＝、−ＣＨ＝、＝Ｎ−、又は＝ＣＨ−であり、
Ｘは−ＮＲ^ａ−、−Ｎ＝、−ＣＨ＝、又は−ＣＨ_２−である。

他の実施形態において、Ｓ１ＰＲ２拮抗薬は一般式ＩＶを有する化合物でありうる。
ここで、
Ａｒ^１は芳香族複素環であり、
ＷはＮＲ^ａ−、Ｏ、又は−ＣＨ_２−であり、ここでＲ^ａは水素又はＣ１−Ｃ３アルキルであり、
Ｚは−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−、Ｏ、−ＣＨ_２−、＝Ｎ−、又は＝ＣＨ−であり、
Ｙは−ＮＲ^ａ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｎ＝、−ＣＨ＝、＝Ｎ−、又は＝ＣＨ−であり、
Ｘは−ＮＲ^ａ−、−Ｎ＝、−ＣＨ＝、又は−ＣＨ_２−であり、
Ｒ^１はＣ_１−Ｃ_１２アルキルであり、
Ｒ^２、Ｒ^３、及びＲ^４は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシ、Ｃ_１−Ｃ_６ペルハロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_４ペルハロアルコキシ、アミノ、モノ若しくはジＣ_１−Ｃ_４アルキルアミノ、Ｃ_３−Ｃ_７シクロアルキル、又はＣ_３−Ｃ_７シクロアルキルオキシであり、
Ｒ^３及びＲ^４は、ｈ、ｉ、又はｊに位置することができるが、同じ箇所には同時に位置せず、
Ｘ^２はＮ又は−ＣＲ^ｂ−であり、ここでＲ^ｂは、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシ、Ｃ_１−Ｃ_６ペルハロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_４ペルハロアルコキシ、アミノ、モノ若しくはジＣ_１−Ｃ_４アルキルアミノ、Ｃ_３−Ｃ_７シクロアルキル、又はＣ_３−Ｃ_７シクロアルキルオキシである。

他の実施形態において、Ｓ１ＰＲ２拮抗薬は一般式Ｖを有する化合物でありうる。
ここで、
Ｒ^１はＣ_１−Ｃ_１２アルキルであり、
Ｒ^２、Ｒ^３、及びＲ^４は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシ、Ｃ_１−Ｃ_６ペルハロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_４ペルハロアルコキシ、アミノ、モノ若しくはジＣ_１−Ｃ_４アルキルアミノ、Ｃ_３−Ｃ_７シクロアルキル、又はＣ_３−Ｃ_７シクロアルキルオキシであり、
Ｒ^３及びＲ^４は、ｈ、ｉ、又はｊに位置することができるが、同じ箇所には同時に位置せず、
それぞれのＲ^５は、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシ、Ｃ_１−Ｃ_６ペルハロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_４ペルハロアルコキシ、アミノ、モノ若しくはジＣ_１−Ｃ_４アルキルアミノ、Ｃ_３−Ｃ_７シクロアルキル、及びＣ_３−Ｃ_７シクロアルキルオキシであり、
ｎは０、１、２、３、又は４である。

ある実施形態において、一般式（ＩＩＩ）の化合物において、
Ｒ^１はＣ_１−Ｃ_３アルキルであり、
Ｒ^２はＣ_１−Ｃ_３アルキルであり、
Ｒ^３はｈに位置し、Ｃ_１−Ｃ_６アルキルであり、
Ｒ^４は水素であり、
Ｒ^５はハロゲンであり、
ｎは２である。

以下に示す一般式（ＶＩ）、（ＶＩＩ）、又は（ＶＩＩＩ）の、Ｓ１ＰＲ２拮抗薬としての活性を有するさらなるＪＴＥ−０１３類縁体が、その内容が本明細書に参照により組み込まれる米国特許第８７０３７９７号に記載されている。

他の実施形態において、Ｓ１ＰＲ２拮抗薬は一般式ＶＩを有する化合物でありうる。
ここで、
Ａは直接結合又は（ＣＲ）であり、Ｂ、Ｃ、及びＤは独立して（ＣＲ）及びＮからなる群から選択され、ここでＲはＨ又はアルキルであり、しかしながらＢ、Ｃ、及びＤの全てがＮであることはなく、またＡが直接結合である場合Ｄは（ＣＲ）であり、
Ｒ^３はアルキルからなる群から選択され、
Ｘは、Ｏ、ＮＲ^４、及びＣＲ^４Ｒ^５からなる群から選択され、ここでＲ^４及びＲ^５は独立してＨ及びアルキルからなる群から選択され、
ＹはＯ又はＳからなる群から選択され、
Ｚは置換されたアリール環である。

他の実施形態において、Ｓ１ＰＲ２拮抗薬は一般式ＶＩＩを有する化合物でありうる。
ここで、
Ｒ^１及びＲ^２は、独立して、Ｈ、アルキル、メトキシ、ヒドロキシル、ハロゲン、ニトリル、及びトリフルオロメチルからなる群から選択され、
Ｒ^３は、独立して、アルキル、メトキシ、ヒドロキシル、ハロゲン、ニトリル、及びトリフルオロメチルからなる群から選択され、
ＤはＣＲ又はＮであり、
ＲはＨ又はアルキルであり、
ＸはＯ、ＮＲ^４、ＣＲ^４Ｒ^５であり、ここでＲ^４及びＲ^５は独立してＨ、アルキル（例えば低級アルキルであって１〜１０の炭素を有してもよく、及び、３〜１０の炭素を有する環状又は分岐鎖アルキルであってもよい）、メトキシ、ヒドロキシル、Ｆ、Ｂｒ、Ｉ、ニトリル、及びトリフルオロメチルからなる群から選択され、
ＹはＯ又はＳであり、
Ｚは置換されたアリール環であって以下の構造を有し、
ここでＲ^６及びＲ⁷は独立して、アルキルであって１〜１０の炭素を含んでもよく及び３〜１０の炭素を有する環状又は分岐鎖アルキルであってもよいアルキル、メトキシ、ヒドロキシル、ハロゲン、ニトリル、及びトリフルオロメチルからなる群から選択され、
ＥはＮ又はＣＲである、

又は、ここで、
Ｒ^１、Ｒ^２、及びＲ^３は、独立してＨ、ハロゲン、メチル、又はイソプロピルであり、
ＸはＮＲ^４であり、
Ｒ^４はＨであり、
ＹはＯであり、
Ｒ^６及びＲ^７は独立してＨ又はクロロであり、
ＥはＮ又はＣＲであり、
ＲはＨである。

他の実施形態において、Ｓ１ＰＲ２拮抗薬は以下からなる群から選択される小分子でありうる：Ｎ−（３，５−ジクロロフェニル）−２−（４−メチル−１，８−ナフチリジン−２−イル）ヒドラジンカルボキサミド、Ｎ−（３，５−ジクロロフェニル）−２−（４−イソプロピル−１，８−ナフチリジン−２−イル）ヒドラジンカルボキサミド、Ｎ−（３，５−ジクロロフェニル）−２−（４−イソプロピル−５，８−ジメチルキノリン−２−イル）ヒドラジンカルボキサミド、Ｎ−（３，５−ジクロロフェニル）−２−（４−イソプロピルキノリン−２−イル）ヒドラジンカルボキサミド、Ｎ−（２，６−ジクロロピリジン−４−イル）−２−（４，８−ジメチルキノリン−２−イル）ヒドラジンカルボキサミド、Ｎ−（３，５−ジクロロフェニル）−２−（４，８−ジメチルキノリン−２−イル）ヒドラジンカルボキサミド、Ｎ−（２，６−ジクロロピリジン−４−イル）−２−（４−メチルキノリン−２−イル）ヒドラジンカルボキサミド、及びＮ−（３，５−ジクロロフェニル）−２−（４，５，８−トリメチルキノリン−２−イル）ヒドラジンカルボキサミド。

他の実施形態において、Ｓ１ＰＲ２拮抗薬は一般式ＶＩＩＩを有する化合物でありうる。
ここで、
Ｒ^１、Ｒ^２は、独立して、Ｈ、アルキル、メトキシ、ヒドロキシル、ハロゲン、ニトリル、及びトリフルオロメチルからなる群から選択され、
Ｒ^３は、独立して、アルキル、メトキシ、ヒドロキシル、ハロゲン、ニトリル、及びトリフルオロメチルからなる群から選択され、
ＸはＯ、ＮＲ^４、ＣＲ^４Ｒ^５であり、ここでＲ^４及びＲ^５は独立してＨ、アルキル（例えば低級アルキルであって１〜１０の炭素を有してもよく、及び、３〜１０の炭素を有する環状又は分岐鎖アルキルであってもよい）、メトキシ、ヒドロキシル、Ｆ、Ｂｒ、Ｉ、ニトリル、及びトリフルオロメチルからなる群から選択され、
ＹはＯ又はＳであり、
ＲはＨ、メトキシ、又はアルキルであり、
Ｚは置換されたアリール環であって以下の構造を有し、
ここでＲ^６及びＲ^７は独立して、アルキルであって１〜１０の炭素を含んでもよく及び３〜１０の炭素を有する環状又は分岐鎖アルキルであってもよいアルキル、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ヒドロキシル、ハロゲン、ニトリル、及びトリフルオロメチルからなる群から選択され、ＥはＮ又はＣＲであり、

又は、ここで、
Ｒ^１、Ｒ^２、及びＲ^３は、独立してメチル又はイソプロピルであり、
ＸはＮＲ^４又はＣＲ^４Ｒ^５であり、
Ｒ^４はＨであり、
Ｒ⁵はＨであり、
ＹはＯであり、
Ｒ⁶及びＲ^７は、独立して、アルキルであって１〜５の炭素を含んでもよいアルキル、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、クロロ、及びトリフルオロメチルからなる群から選択され、
ＥはＮ又はＣＲであり、
ＲはＨ又はメトキシである。

他の実施形態において、Ｓ１ＰＲ２拮抗薬は以下からなる群から選択される小分子でありうる：Ｎ−（３，５−ジクロロフェニル）−２−（７−イソプロピル−１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｂ］ピリジン−５−イル）ヒドラジンカルボキサミド、１−（２，６−ジクロロピリジン−４−イル）−３−（（７−イソプロピル−１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｂ］ピリジン−５−イル）メチル）尿素、Ｎ−（２−ブチル−６−クロロピリジン−４−イル）−２−（７−イソプロピル−１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｂ］ピリジン−５−イル）ヒドラジンカルボキサミド、Ｎ−（２−クロロ−６−エトキシピリジン−４−イル）−２−（７−イソプロピル−１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｂ］ピリジン−５−イル）ヒドラジンカルボキサミド、１−（３，５−ジクロロフェニル）−３−（（１，３，７−トリメチル−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｂ］ピリジン−５−イル）メチル）尿素、Ｎ−（２，６−ジクロロピリジン−４−イル）−２−（７−イソプロピル−１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｂ］ピリジン−５−イル）ヒドラジンカルボキサミド、Ｎ−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−２−（７−イソプロピル−１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｂ］ピリジン−５−イル）ヒドラジンカルボキサミド、Ｎ−（３−クロロ−５−メトキシピリジン−４−イル）−２−（７−イソプロピル−１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｂ］ピリジン−５−イル）ヒドラジンカルボキサミド、１−（２，６−ジクロロフェニル）−３−（（７−イソプロピル−１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｂ］ピリジン−５−イル）メチル）尿素、１−（２−クロロ−６−メトキシピリジン−４−イル）−３−（（７−イソプロピル−１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｂ］ピリジン−５−イル）メチル）尿素、Ｎ−（２−クロロ−６−プロピルピリジン−４−イル）−２−（７−イソプロピル−１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｂ］ピリジン−５−イル）ヒドラジンカルボキサミド、１−（２−クロロ−６−プロピルピリジン−４−イル）−３−（（７−イソプロピル−１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｂ］ピリジン−５−イル）メチル）尿素、１−（２−クロロ−６エトキシピリジン−４−イル）−３−（（７−イソプロピル−１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｂ］ピリジン−５−イル）メチル）尿素、１−（２−クロロ−６−プロポキシピリジン−４−イル）−３−（（７−イソプロピル−１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｂ］ピリジン−５−イル）メチル）尿素、Ｎ−（２−クロロ−６−プロポキシピリジン−４−イル）−２−（７−イソプロピル−１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｂ］ピリジン−５−イル）ヒドラジンカルボキサミド、Ｎ−（２−ブトキシ−６−クロロピリジン−４−イル）−２−（７−イソプロピル−１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｂ］ピリジン−５−イル）ヒドラジンカルボキサミド、１−（２−ブトキシ−６−クロロピリジン−４−イル）−３−（（７−イソプロピル−１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｂ］ピリジン−５−イル）メチル）尿素、Ｎ−（２−エトキシピリジン−４−イル）−２−（７−イソプロピル−１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｂ］ピリジン−５−イル）ヒドラジンカルボキサミド、及びＮ−（５−クロロ−２，４−ジメトキシフェニル）−２−（７−イソプロピル−１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｂ］ピリジン−５−イル）ヒドラジンカルボキサミド。

投与
Ｓ１ＰＲ２拮抗性化合物は、典型的には治療用途のために処方される。ある実施形態において、本発明は、Ｓ１ＰＲ２拮抗性化合物、並びに薬学的に許容される担体、希釈剤、若しくは賦形剤を含む、薬学的組成物に関する。この薬学的組成物は、よく知られており容易に利用可能な成分を用いて、既知の手順で調製されてもよい（例えば、Remington: The Science and Practice of Pharmacy (20th ed.), ed. A. R. Gennaro, Lippincott Williams & Wilkins, (2000)、及びEncyclopedia of Pharmaceutical Technology, eds.J. Swarbrick and J. C. Boylan, Marcel Dekker, New York (1988-1999)を参照）。

この薬学的組成物は、例えば静脈注射により全身に、眼内注射により直接、点眼により、経口で、又は同様のもののような、任意の経路により、対象へ投与されてもよい。この組成物は、例えば内部又は外部の標的部位への外科的送達、又は血管でアクセス可能な部位へのカテーテルによって、標的部位へと直接投与されてもよい。

例えば、ＦＥＶＲのようなＳＩＰＲ２に関連する眼の状態を治療する方法において、本明細書に記載された組成物が、眼内注射、点眼、経口、又は静脈内投与により、送達されてもよい。この組成物は、単一ボーラスとして、複数回注射として、又は持続注入（例えば、静脈内、腹膜透析による髄腔内、ポンプ注入）により、投与されてもよい。非経口投与のために、組成物は好ましくは滅菌された発熱物質不含有の形態で処方される。上に示した通り、本明細書に記載された組成物は、無菌注射に適した形態であってもよい。このような組成物を調製するためには、適した治療有効成分が非経口的に許容される液体担体に溶解又は懸濁される。採用されてもよい許容される担体及び溶媒には水、１，３−ブタンジオール、リンゲル液、等張塩化ナトリウム溶液、及びデキストロース溶液が含まれ、水は適切な量の塩酸、水酸化ナトリウム、又は適した緩衝剤の添加により適したｐＨに調製される。この水性組成物は、１以上の保存剤（例えば、メチル、エチル、若しくはｎ−プロピルヒドロキシ安息香酸塩）も含んでいてもよい。このような組成物のうち１つが少しだけ又はわずかに水に溶ける場合、溶解促進剤又は可溶化剤が添加されてもよく、又は、溶媒が１０〜６０％ｗ／ｗのプロピレングリコール等を含んでいてもよい。本明細書に記載された組成物は、従来の薬学的慣習（例えば、本分野における標準的教科書である、Remington: The Science and Practice of Pharmacy (20th ed.)、ed. A. R. Gennaro, Lippincott Williams & Wilkins (2000)、及びEncyclopedia of Pharmaceutical Technology, eds. J Swarbrick and J. C. Boylan, Marcel Dekker, New York (1988-1999)、並びにアメリカ薬局方／国民医薬品集を参照）に従う任意の適した剤形で、哺乳類（例えば、げっ歯類、ヒト、ヒト以外の霊長類、イヌ、ネコ、ヒツジ、ウシ）に投与されることができる。例示的な薬学的に許容可能な担体及び希釈剤、並びに薬学的組成物の記載を、Remington（上述）に見つけることができる。組成物を安定化させ及び／又は保存するために、他の物質が組成物に添加されてもよい。

本明細書に記載される治療方法は、概して、治療的有効量の本明細書に記載される組成物を、哺乳類を含み、特にヒトである、必要とする患者（例えば動物、ヒト）に投与することを含む。このような治療は、病気、不調、又はその症状に苦しんでいる、これらを有している、これらになりやすい、又は少なくともリスクがある、患者、特にヒト、に好適に施されるだろう。「リスクがある」患者の判断は、診断テスト又は患者若しくはヘルスケア提供者の意見による任意の客観的若しくは主観的判断によりなされることができる。本明細書に記載される方法及び組成物は、貧血に関する任意の不調又は病気の治療に用いられてもよい。

有効投与量
本明細書に記載される組成物は、有効量、すなわち治療される哺乳類（例えば、Ｓ１ＰＲ２拮抗薬の投与によりＦＥＶＲを治療している）において望ましい結果を生み出すことができる量で、哺乳類（例えばヒト）に投与されることが好ましい。このような治療的有効量は標準的な方法に従って決定できる。

本技術の方法で用いられる組成物の毒性および治療的有効性は、標準的な薬学的手順により判定することができる。医学及び獣医学の分野でよく知られているように、任意の１つの対象に対する投与量は、対象の大きさ、体表面積、年齢、投与される特定の組成物、投与時間及び経路、一般的な健康、及び同時に投与される他の薬を含む、多くの要素に依存する。本明細書に記載された組成物の投与量は、前臨床における有効性及び安全性に基づいて決定してもよい。

実施例
本技術が、続く特定の実施例によりさらに説明される。これらの実施例は説明のみのために与えられ、どのような方法にしろ本技術の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。

Ｓ１ＰＲ２活性の遺伝学的阻害によるＦＥＶＲモデルにおける網膜血管系の正常化
Ｓ１ｐｒ２^−／−Ｔｓｐａｎ１２^−／−ダブルノックアウトマウスが作製され、マウス網膜血管系のパターン形成の顕著な改善が観察された（図５）。(TSPAN12 regulates retinal vascular development by promoting Norrin- but not Wnt-induced FZD4/beta-catenin signaling.Junge HJ, Yang S, Burton JB, Paes K, Shu X, French DM, Costa M, Rice DS, Ye W.Cell 139, 299-311 (2009).)

Ｆｚｄ４^−／−Ｓ１ｐｒ２^−／−マウスもまた作製され、これらのマウスもまた網膜血管系パターン形成の改善を示した（図６）。(Vascular development in the retina and inner ear: control by Norrin and Frizzled-4, a high-affinity ligand-receptor pair..Xu Q, Wang Y, Dabdoub A, Smallwood PM, Williams J, Woods C, Kelley MW, Jiang L, Tasman W, Zhang K, Nathans J.Cell 116, 883-95 (2004).)このように、Ｓ１ＰＲ２の阻害はＦＥＶＲに対する重要な治療アプローチである。

Ｓ１ＰＲ２拮抗薬活性の投与によるＦＥＶＲモデルにおける網膜血管系の正常化
Ｆｚｄ４^−／−マウスのＳ１ＰＲ２拮抗薬であるＪＴＥ−０１３による出生後における治療は、ＦＥＶＲの網膜血管形成における欠陥を改善することが可能であった（図７）。Ｆｚｄ４^−／−マウスは、０．５ｍｇ／ｋｇのＪＴＥ−０１３をＰ７からＰ２５まで２日おきに腹腔内に注入された。標準的な手順を用いて、網膜はＰ２５において平らに載せられ、ｉｓｏｌｅｃｔｉｎＢ４、ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ５９４で染色した後で血管系が共焦点顕微鏡で可視化された。(Vascular development in the retina and inner ear: control by Norrin and Frizzled-4, a high-affinity ligand-receptor pair..Xu Q, Wang Y, Dabdoub A, Smallwood PM, Williams J, Woods C, Kelley MW, Jiang L, Tasman W, Zhang K, Nathans J.Cell 116, 883-95 (2004).)

Ｓ１ＰＲ２拮抗薬のコンピュータ支援ドラッグデザイン
一般に、Ｇタンパク質共役受容体は非常に新薬の開発につながりやすいと考えられており、Ｓ１ＰＲ１−３及び−５を同時に標的とする広特異性拮抗薬（Ｆｉｎｇｏｌｉｍｏｄ、商品名Ｇｉｌｅｎｙａ）が、多発性硬化症の治療用途で市販されている。過去にはコンピュータ支援ドラッグデザインが用いられ、現在のところ続く第１／２ａ相臨床試験のための前臨床評価の後期段階にある、脂質酵素の小分子阻害剤の設計及び合成に成功してきた。

計算的手段によりＳ１ＰＲ２の拮抗薬を特定するために、Ｓ１ＰＲ１構造のモデリングを行うためにMolecular Operating Environment（ＭＯＥ）プログラムが用いられた。プロセスを通して、ＣＨＡＲＭＭ２７力場が実装され、気相環境が指定された。Ｓ１ＰＲ２のアミノ酸配列はＵｎｉＰｒｏｔアーカイブから取得された。Ｓ１ＰＲ２及びＳ１ＰＲ１のアミノ酸配列のアライメントが行われ、このアライメントから相同性モデルが生成された。生成されたモデルは、３１０Ｋの温度、７．０のｐＨ、及び０．１ｍｏｌ／Ｌの塩濃度でプロトン化された。ＭＯＥのサイトファインダーツールが、受容体の結合ポケットを特定するために用いられた。タンパク質の細胞外表面に位置する３４アミノ酸で構成されたポケットが特定された（図８）。

図９に示されるように、Ｓ１ＰＲ２受容体の主要なリガンドであるＳ１Ｐは、３つの異なる化学的領域を有する。これらの領域が、領域１、２、又は３のどれかを含む類似の分子についてＰｕｂＣｈｅｍ及びｈｉｔ−ｔｏ−ｌｅａｄデータベースを検索するように用いられた。また、硫酸基も、ホスフェートの生物学的等価体であるため、検索に含められた。３９０未満の分子量、領域２及び３については−１から７の間のＸＬｏｇＰ値、又は領域１については５未満のＸＬｏｇＰ値及び３５−１２０の総極性表面積を有しなければならない、という判定基準に基づいて化合物が特定された。各領域から特定された化合物がデータベースとしてＭＯＥにインポートされた。領域１について合計６２１２５個の結果；領域２について２９７１個の結果、及び領域３について１３４４２個の結果が得られた。これらの分子はまず構造に含まれているかもしれない任意の塩イオンを除去するために洗浄され、気相環境においてＣＨＡＲＭＭ２７力場を用いてエネルギー最適化された。そしてこの化合物はＳ１ＰＲ２の特定された結合ポケットによる仮想スクリーニングにかけられた。

仮想スクリーニングの結果から、それぞれの領域について最良の１００個の化合物が選択され、より厳密なドッキング法にかけられ、Ｓ１ＰＲ２及びＳ１ＰＲ１を比較したフィッティングが導かれた。このドッキングは、ドッキングされるリガンドと同様、このポケットを覆っているアミノ酸側鎖が動くことを許容する。結果として得られたデータベースが、Ｓ１Ｐのスコアよりも良好なＳスコアを有し、Ｓ１ＰＲ１よりもＳ１ＰＲ２に対して特異的を有すると予測される化合物を求めて、検討された。次に、特定された化合物は購入可能性に関してスクリーニングされ、３６個の化合物が商業的に入手可能であると判定され、試験のために実行可能な標的として選択された。図１１Ａ〜Ｄに示されるように、これらはＰｕｂＣｈｅｍからのものであり、ＰｕｂＣｈｅｍ識別番号を用いると、3382778、44317142 (also as 520 and 644260)、54736865、3866342、46891770 (also as 3247041)、51624406、9578291、9864156、365015、28094480、40592676、10883396、342302、56923845、54734912、18390590、56923928、51508548、28960354、51624683、27993であった。

これらの有効性は選択的Ｓ１ＰＲ２阻害の特異性を有するＳ１ＰＲ拮抗薬であるＪＴＥ−０１３と容易に比較されることができる。

ＦＥＶＲのゼブラフィッシュモデルにおけるＳ１ＰＲ２拮抗活性の実証及び順位付け
ノックアウトアプローチは、ヒトの疾患を再現するゼブラフィッシュモデルの作製を可能とし、より時間を消費し高価である哺乳動物における研究の前に、薬物スクリーニングのための迅速で中間的なインビボ工程を可能とする。Ｓ１ＰＲ２薬物標的およびＦＺＤ４経路は、ゼブラフィッシュ、マウス、及びヒトの間で高度に保存されている。生殖細胞系列ｆｚｄ４^−／−ゼブラフィッシュを作製するためにＴＡＬＥＮシステムが用いられた（図１０）。

特定されたＳ１ＰＲ２拮抗薬を、既知のツール化合物ＪＴＥ−０１３と同様にアッセイするために、３つのｆｚｄ４^−／−ゼブラフィッシュ胚が９６ウェルプレートに配列される。次に、受精後（ｈｐｆ）２４時間に、化合物が最終濃度０．０１〜３０μＭでこの胚プレートに移される。次に、胚は化合物とともに２８．５℃で１２時間インキュベートされ、大まかに全体的な発生への作用がスクリーニングされる。様々な時間枠（２−１２日）において、次に胚にトリカイン（ＭＳ−２２２）が過剰投与され、４％パラホルムアルデヒドで固定され、顕微鏡検査を用いて網膜血管系を判定することができる。ゼブラフィッシュに対して最も良好に正常な血管系を回復する化合物が、最も有効な治療化合物を分離するために、次にＴｓｐａｎ１２^−／−及びＦｚｄ４^−／−マウスで試験される。

マウスにおける研究の場合、化合物は、Ｓ１ＰＲ２拮抗薬により効果的に治療されることができる、Ｐ１７からＰ２８までの間のマウスの眼へと眼内注射によって送達される（０．０１〜３０μＭ）。この時間枠は、ヒトにおいてＦＥＶＲが生じるステージと同様である。次に、網膜の表現型及び眼の機能が、Ｔｓｐａｎ１２^−／−及びＦｚｄ４^−／−ＦＥＶＲマウスモデル及び他のＦＥＶＲ遺伝学的モデルの研究について上述したように判定される。

Claims

式（ＩＸ）又はその任意の薬学的に許容可能な塩である化合物。
ここで、
Ｒ_１はＣ_１−Ｃ_１２アルキルであり、
Ｒ_２、Ｒ_３、及びＲ_４は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシ、Ｃ_１−Ｃ_６ペルハロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_４ペルハロアルコキシ、アミノ、モノ若しくはジＣ_１−Ｃ_４アルキルアミノ、Ｃ_３−Ｃ_７シクロアルキル、又はＣ_３−Ｃ_７シクロアルキルオキシであり、
Ｒ_３及びＲ_４は、ｈ、ｉ、又はｊに位置することができるが、同じ箇所には同時に位置せず、
それぞれのＲ_５は、独立して、水素、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシ、Ｃ_１−Ｃ_６ペルハロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_４ペルハロアルコキシ、アミノ、モノ若しくはジＣ_１−Ｃ_４アルキルアミノ、Ｃ_３−Ｃ_７シクロアルキル、及びＣ_３−Ｃ_７シクロアルキルオキシから選択され、
ｎは０、１、２、３、又は４であり、
ＸはＮＲ_ａ、ＣＨ_２、又は−Ｃ（＝Ｏ）−であり、ここでそれぞれのＲ_ａは独立して水素及びＣ_１−Ｃ_３アルキルから選択され、
Ｙ_１及びＹ_２はそれぞれ独立してＮＲ_ａ、ＣＨ_２、又はＯから選択され、
Ｚは以下のうちの１つから選択される、基の任意の幾何異性体である。
Ｚが
の任意の幾何異性体である、請求項１に記載の化合物。
請求項１又は２に記載の化合物及び薬学的に許容可能な担体を含む薬学的組成物。
請求項１又は２に記載の化合物を含む、対象において網膜症を治療するための薬学的組成物。
前記網膜症が、糖尿病性網膜症、黄斑変性症、高血圧性網膜症、放射線網膜症、日光網膜症、未熟児網膜症（ＲＯＰ）、ノリエ病（ＮＤ）、家族性滲出性硝子体網膜症（ＦＥＶＲ）、コーツ病、鎌状赤血球網膜症、及び網膜色素変性症からなる群から選択される、請求項４に記載の薬学的組成物。
前記網膜症がＦＥＶＲである、請求項５に記載の薬学的組成物。
請求項１又は２に記載の化合物を含む、対象において不十分な血管新生によって特徴付けられる疾患を治療するための薬学的組成物。
前記疾患が、粥状動脈硬化症、高血圧症、糖尿病、再狭窄、子癇前症、月経過多、新生児呼吸窮迫症、肺線維症、腎症、骨粗鬆症、筋萎縮性側索硬化症、脳卒中、及びアルツハイマー病からなる群から選択される、請求項７に記載の薬学的組成物。