JP6826033B2 - 高齢男性の筋機能の改善 - Google Patents

Description

[0001]本開示は、概して、高齢男性に投与されるタンパク質源と抗酸化物質とを含む組成物に関する。より具体的には、本開示は、高齢男性にタンパク質源と抗酸化物質とを含む組成物を投与してサルコペニアを治療又は予防すること、筋機能（例えば筋力、歩行速度等）の低下を軽減すること、筋機能を高めること、及び／又は筋萎縮後の筋機能の回復を改善することに関する。

[0002]サルコペニアは、加齢に伴う筋量及び筋機能（筋力及び歩行速度を含む）の低下として定義される。筋機能及び身体能力は筋量の低下に伴い衰える。筋機能障害は、高齢での寝たきり、能力低下、及び死亡の発生についての高度な予測指標となる。高齢者人口の増加に伴い、サルコペニアの有病率は高まりつつあり、米国高齢者集団の４５％が中等度から重度の症状を有する。米国におけるサルコペニアに起因する直接的及び間接的な医療コストは１９０億ドル近くに上る。したがって、サルコペニアの予防及び／又は治療は、我々の社会の健康及びクオリティ・オブ・ライフ、ひいては医療関連の経済に多大な影響を及ぼし得る。残念ながら、サルコペニアの病因及び生理病理学的機序は未だほとんど解明されておらず、予防又は治療のための有効な対策が困難となっている。

[0003]加齢に伴い観察される進行性の筋力低下を説明するために立てられた主要な仮説の一つに、栄養素による筋タンパク質合成の刺激が減ることに起因して食事摂取の同化作用が減少するというものである。この仮説は、筋同化抵抗性と呼ばれる。加えて、酸化的ストレス及び／又は軽度の炎症もまた、高齢者のフレイルに関連することが示されており、直接、あるいは筋肉のインスリン感受性の低下を介して、同化抵抗性の一因になっている可能性がある。

[0004]理論によって拘束されるものではないが、本発明者らは、意外にも、高齢男性にタンパク質源と少なくとも１つの抗酸化物質とを含む栄養組成物を与えると、高齢男性のサルコペニアを軽減しようとする試みが改善されることを見出した。例えば、かかる組成物は、かかる組成物を含まない食事と比べて、その組成物を投与した高齢男性の筋機能（例えば筋力、歩行速度等）の低下を軽減すること、又は筋機能を改善することができる。

[0005]したがって、一般的な実施形態において、本開示は、高齢男性の筋機能の低下を軽減する、高齢男性の筋機能を高める、及び／又は高齢男性の筋萎縮後の筋機能の回復を改善する方法を提供する。本方法は、高齢男性にタンパク質源と抗酸化物質とを含む組成物を投与することを含む。

[0006]一実施形態において、本組成物は脂肪酸を含む。脂肪酸はｎ−３脂肪酸であってもよい。

[0007]一実施形態において、抗酸化物質はポリフェノールを含む。ポリフェノールは、クルクミン、ルチン、ケルセチン及びこれらの組み合わせからなる群から選択することができる。

[0008]一実施形態において、タンパク質源はホエイタンパク質を含む。

[0009]一実施形態において、タンパク質源は、カゼイン、エンドウ豆タンパク質、大豆タンパク質及びこれらの組み合わせからなる群から選択されるタンパク質を含む。

[0010]一実施形態において、抗酸化物質はポリフェノールを含み、本組成物はタンパク質源に加えてｎ−３脂肪酸を含む。

[0011]一実施形態において、本組成物は少なくとも１ヵ月の期間にわたって少なくとも週２回投与される。

[0012]一実施形態において、筋機能としては、筋力、歩行速度、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される特性が含まれる。

[0013]一実施形態において、筋機能は、腓腹筋、脛骨筋、ヒラメ筋、長趾伸筋（ＥＤＬ）、大腿二頭筋、半腱様筋、半膜様筋、大殿筋、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される骨格筋のものである。

[0014]一実施形態において、本組成物は、１日に高齢男性の体重１ｋｇ当たり０．１〜０．４ｇのタンパク質源を提供する量で投与される。

[0015]一実施形態において、本組成物は、１日に高齢男性の体重１ｋｇ当たり０．０１〜０．０４ｇのロイシンを提供する量で投与される。

[0016]一実施形態において、高齢男性はサルコペニアを有する。

[0017]別の実施形態において、本開示は、（ｉ）サルコペニアを有する高齢男性のサルコペニアを治療すること、（ｉｉ）高齢男性のサルコペニアを予防すること、（ｉｉｉ）高齢男性の筋機能の低下を軽減すること、（ｉｖ）高齢男性の筋機能を高めること、又は（ｖ）高齢男性の筋萎縮後の筋機能の回復を改善することのうちの少なくとも１つに関して治療的に有効な量の、タンパク質源と抗酸化物質とを含む組成物を提供する。

[0018]一実施形態において、抗酸化物質はポリフェノールを含み、本組成物はタンパク質源に加えてｎ−３脂肪酸を含む。

[0019]一実施形態において、本組成物は、組成物の乾燥重量基準で０．２〜１００％の量のタンパク質源を含む。

[0020]一実施形態において、タンパク質源はロイシンを含み、ロイシンは組成物中に最大１０重量％の量で存在する。

[0021]一実施形態において、本組成物は、食品組成物、栄養補助食品、栄養組成物、ニュートラシューティカルズ、摂取前に水又はミルクで再構成される粉末栄養製剤、食品添加物、医薬、ドリンク、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される。

[0022]別の実施形態において、本開示は、高齢男性のサルコペニアを予防する方法であって、サルコペニアのリスクがある高齢男性にタンパク質源と抗酸化物質とを含む組成物を投与することを含む方法を提供する。

[0023]一実施形態において、抗酸化物質はポリフェノールを含み、本組成物はタンパク質源に加えてｎ−３脂肪酸を含む。

[0024]本開示の利点は、高齢男性のサルコペニアを治療する組成物、例えば食品製品又は補助食品を提供することである。

[0025]本開示の別の利点は、サルコペニアを予防する組成物、例えば食品製品又は補助食品を提供することである。

[0026]本開示の更に別の利点は、高齢男性の筋機能（例えば筋力、歩行速度等）の低下を、その組成物を含まない食事を摂取している場合に起こるであろう低下と比べて軽減する組成物、例えば食品製品又は補助食品を提供することである。

[0027]本開示の更なる利点は、高齢男性の筋機能（例えば筋力、歩行速度等）を、その組成物を含まない食事の摂取によって呈するであろう筋機能（例えば筋力、歩行速度等）と比べて高める組成物、例えば食品製品又は補助食品を提供することである。

[0028]本開示の別の利点は、高齢男性の筋萎縮後の筋機能（例えば筋力、歩行速度等）の回復を、その組成物を含まない食事の摂取によって呈するであろう回復と比べて改善する組成物、例えば食品製品又は補助食品を提供することである。

[0029]本開示の更に別の利点は、有利には、高齢男性のサルコペニアの軽減、予防、又は治療を促進することである。

[0030]本開示の別の利点は、高齢男性におけるサルコペニアの発症を軽減する、特にフレイル高齢男性の筋機能（例えば筋力、歩行速度等）の低下を軽減する栄養戦略を提供することである。

[0031]
追加の特徴及び利点は、以降の発明の詳細な説明及び図面に記載され、これにより明らかとなろう。

[0032]本明細書に開示する実験例で用いる筋断面積の推定方法を示す概略図である。 [0033]本明細書に開示する実験例のデータ表である。 [0034]本明細書に開示する実験例における左膝伸展強度の変化を示すグラフである。 [0035]本明細書に開示する実験例における来院日及び性別及び治療群別の左膝及び右膝伸展強度の箱ひげ図を示すグラフである。 [0036]本明細書に開示する実験例における来院日及び治療群別の左膝及び右膝伸展強度の平均値±ＳＤを示すプロットを示すグラフである。

[0037]パーセンテージは全て、特に明記しない限り組成物の全重量に対する重量によるものとする。同様に、比は全て、特に明記しない限り重量によるものとする。ｐＨについての参照がなされるとき、値は標準的な装置により２５℃において測定されるｐＨに相当する。本明細書で使用されるとき、「約」は、数値の範囲、例えば言及される数の−１０％〜＋１０％、好ましくは言及される数の−５％〜＋５％、より好ましくは言及される数の−１％〜＋１％、最も好ましくは言及される数の−０．１％〜＋０．１％の範囲にある数を指すものと理解される。

[0038]更に、本明細書における全ての数値範囲は、その範囲内の全ての整数又は分数を含むと理解されるべきである。更に、これらの数値の範囲は、この範囲内の任意の数字又は数字の部分集合を対象とする請求項を支持するために与えられていると解釈すべきである。例えば、１〜１０という開示は、１〜８、３〜７、１〜９、３．６〜４．６、３．５〜９．９などの範囲を支持するものと解釈すべきである。

[0039]本明細書及び添付の請求項で使用するとき、文脈により明確に記載のない限り、単語の単数形には複数形が包含され、逆に複数形には単数形が包含される。したがって、「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」の言及には、概してそれぞれの用語の複数形が包含される。例えば、「成分（an ingredient）」又は「方法（a method）」の言及には、複数のかかる「成分」又は「方法」が含まれる。「Ｘ及び／又はＹ」の文脈で使用される用語「及び／又は」は、「Ｘ」、又は「Ｙ」、又は「Ｘ及びＹ」として解釈すべきである。

[0040]同様に、用語「含む（comprise）」、「含む（comprises）」、及び「含んでいる（comprising）」は、排他的にではなく、包括的に解釈される。同様にして、用語「含有する（include）」、「含有する（including）」及び「又は（or）」は、このような解釈が文脈から明確に妨げられない限りは包括的なものであると解釈される。しかし、本開示により提示される実施形態は、本明細書にて具体的に開示されない任意の要素を欠く場合がある。したがって、用語「含む（comprising）」を用いて提示される実施形態の開示は、開示される構成要素「から本質的になる」、及び「からなる」実施形態の開示でもある。本明細書において使用されるとき、用語「例（example）」は、特に、後に用語の掲載が続く場合に、単に例示的なものであり、かつ説明のためのものであり、排他的又は包括的なものであると判断すべきではない。本明細書で開示される全ての実施形態は、特に明示的に示されない限り、本明細書で開示される任意の別の実施形態と組み合わせることができる。

[0041]用語「高齢者」は、６０歳を超える人、好ましくは６３歳を超える人、及びより好ましくは６５歳を超える人を意味する。用語「フレイル」は、身体的に虚弱で、即ち丈夫でなく、脆弱な人を指す。

[0042]用語「治療」及び「治療すること」には、状態又は障害の改善をもたらす任意の効果、例えば状態又は障害を和らげること、軽減すること、調節すること、又は解消させることが含まれる。状態又は障害を「治療すること」又は「その治療」の非限定的な例としては、（１）状態又は障害を阻害すること、即ち状態若しくは障害又はその臨床症状の発症を止めること、及び（２）状態又は障害を緩和すること、即ち状態若しくは障害又はその臨床症状の一時的又は永久的な消退を生じさせることが挙げられる。

[0043]用語「予防」又は「予防すること」は、状態又は障害にさらされ得るか又はそれに罹り易い傾向があり得るが、まだ状態又は障害の症状を呈していないか又はそれが現れていない個体において、言及される状態又は障害の臨床症状を発症させないことを意味する。用語「状態」及び「障害」は、任意の疾患、状態、症状、又は徴候を意味する。

[0044]用語「食品」、「食品製品」、及び「食品組成物」は、ヒトによる摂取を意図し、ヒトに少なくとも１種の栄養素を提供する製品又は組成物を意味する。本開示の組成物は、本明細書に記載される多くの実施形態を含め、本明細書に記載される必須の要素及び制限、並びに本明細書に記載されるか又はその他高齢男性の食事に有用な任意の追加的な又は任意選択の成分、構成要素、又は制限を含み、それからなり、又はそれから本質的になることができる。

[0045]本明細書で使用されるとき、「完全栄養」は、その組成物が投与される動物にとって唯一の栄養源とするのに十分な、十分な種類及びレベルの主要栄養素（タンパク質、脂肪及び炭水化物）及び微量栄養素を含有する。各個体は、このような完全栄養性組成物から、各個体が必要とする栄養分の１００％を受給可能である。

[0046]本開示の一態様は、高齢男性のサルコペニアを治療又は予防する、筋機能（例えば筋力、歩行速度等）の低下を軽減する、筋機能（例えば筋力、歩行速度等）を高める、及び／又は筋萎縮後の筋機能（例えば筋力、歩行速度等）の回復を改善するための、タンパク質源と抗酸化物質とを含む組成物である。本開示の別の態様は、高齢男性のサルコペニアを治療するため、高齢男性のサルコペニアを予防するため、高齢男性の筋機能（例えば筋力、歩行速度等）の低下を軽減するため、高齢男性の筋機能（例えば筋力、歩行速度等）を高めるため、及び／又は高齢男性の筋萎縮後の筋機能（例えば筋力、歩行速度等）の回復を改善するため、タンパク質源と抗酸化物質とを含む組成物の治療的に有効な量を高齢男性に投与することを含む方法である。

[0047]本開示により治療又は予防されるとおりの筋萎縮は、多くの理由で生じ得る。例えば、筋萎縮は、寝たきりになるなどして身体活動が不足するか、又は加齢（老化に伴うサルコペニア）、股関節部骨折回復、若しくは、例えば癌、ＡＩＤＳ、うっ血性心不全、ＣＯＰＤ（慢性閉塞性肺疾患）、腎不全、外傷、敗血症、及び重度の熱傷など、いくつかの共存疾患に伴い身体活動が低くなっているために起こり得る。筋萎縮はまた、栄養不足若しくは不適切な栄養又は飢餓によっても起こり得る。極めてよく見られるところでは、筋萎縮はそれぞれの筋肉の廃用又は使用不足によって起こる。

[0048]本開示において言及される筋肉とは、好ましくは骨格筋である。例えば、本明細書に開示される組成物は、高齢男性の腕及び／又は脚の筋機能の低下を軽減するために用いられ得る。筋肉は、以下、即ち、腓腹筋、脛骨筋、ヒラメ筋、長趾伸筋（ＥＤＬ）、大腿二頭筋、半腱様筋、半膜様筋、又は大殿筋の１つ以上であり得る。

[0049]筋萎縮は、サルコペニア障害、即ち加齢に起因する筋肉の量、サイズ、及び機能の低下を引き起こし得る。筋萎縮の程度は、高齢者の極度のフレイルに見られるような重度の筋萎縮など、様々であり得る。極度のフレイルの高齢者は日常活動及び自己管理が困難となり得る。重症度が低い筋萎縮では、いくらかの動作及びいくらかの筋活動が可能であるものの、そうした筋活動は完全な筋組織の維持には不十分である。加齢に伴うサルコペニアの治療又は予防に関わる機序は、若年者の筋機能低下の治療又は予防とは異なる。

[0050]本明細書に開示される組成物はタンパク質源と抗酸化物質とを含み、かかる組成物を含まない食事と比べて、その組成物を投与される高齢男性の筋機能の低下を軽減すること、及び／又は筋機能を改善することができる。一実施形態において、筋機能（例えば筋力、歩行速度等）の低下の軽減、筋機能（例えば筋力、歩行速度等）の改善、筋萎縮後の筋機能（例えば筋力、歩行速度等）の回復の改善、サルコペニアの治療、及び／又はサルコペニアの予防は、筋サイズ又は筋量の変化なしに実現する。

[0051]タンパク質源は動物又は植物由来であってもよく、例えば、乳タンパク質、大豆タンパク質、及び／又はエンドウ豆タンパク質であり得る。好ましい実施形態において、タンパク質源は、ホエイタンパク質；カゼインタンパク質；エンドウ豆タンパク質；大豆タンパク質；小麦タンパク質；トウモロコシタンパク質；米タンパク質；マメ科植物、禾穀類及び穀粒類由来のタンパク質；及びこれらの組み合わせからなる群から選択される。それに加えて又は代えて、タンパク質源は、堅果類及び／又は種子類由来のタンパク質を含み得る。一実施形態において、本組成物は、乾燥重量基準で０．２〜１００％、好ましくは乾燥重量基準で１〜９５％、より好ましくは乾燥重量基準で２〜９０％、更により好ましくは乾燥重量基準で３〜８０％、及び最も好ましくは乾燥重量基準で５〜７０％の量のタンパク質を含む。一実施形態において、本組成物は、高齢男性の体重１ｋｇ当たり０．１〜０．４ｇのタンパク質、好ましくは高齢男性の体重１ｋｇ当たり０．２〜０．３５ｇのタンパク質を提供する１日用量で高齢男性に投与される。

[0052]タンパク質源は好ましくは、ホエイタンパク質を含む。ホエイタンパク質は非加水分解又は加水分解ホエイタンパク質であってもよい。ホエイタンパク質は任意のホエイタンパク質であってよく、例えばホエイタンパク質は、ホエイタンパク質濃縮物、ホエイタンパク質分離物、ホエイタンパク質ミセル、ホエイタンパク質加水分解物、酸ホエイ、スイートホエイ、変性スイートホエイ（カゼイノ−グリコマクロペプチドが除去されたスイートホエイ）、ホエイタンパク質の画分、及びこれらの任意の組み合わせからなる群から選択され得る。好ましい実施形態において、ホエイタンパク質はホエイタンパク質分離物及び／又は変性スイートホエイを含む。

[0053]上述のとおり、タンパク質源は動物又は植物由来であってもよく、例えば、乳タンパク質、大豆タンパク質、及び／又はエンドウ豆タンパク質であり得る。一実施形態において、タンパク質源はカゼインを含む。カゼインは任意の哺乳動物から得ることができるが、好ましくは牛乳から、及び好ましくはミセルカゼインとして得られる。

[0054]本組成物は１つ以上の分枝鎖アミノ酸を含み得る。例えば、本組成物は、ロイシン、イソロイシン及び／又はバリンを含み得る。本組成物のタンパク質源は、遊離形態のロイシン、及び／又はペプチド及び／又は乳タンパク質、動物性タンパク質若しくは植物性タンパク質などのタンパク質として結合したロイシンを含み得る。一実施形態において、本組成物は、組成物の乾燥物質の最大１０重量％の量のロイシンを含む。ロイシンは、Ｄ−又はＬ−ロイシン、好ましくはＬ型として存在し得る。本組成物がロイシンを含む場合、本組成物は、体重１ｋｇ当たり０．０１〜０．０４ｇのロイシン、好ましくは体重１ｋｇ当たり０．０２〜０．０３５ｇのロイシンを提供する１日用量で投与することができる。かかる用量は、特に完全栄養組成物に妥当であるが、当業者は、これらの用量をどのように経口栄養補助食品（ＯＮＳ）に適合させればよいかを容易に認識するであろう。

[0055]本組成物には、任意の抗酸化物質を使用することができるが、好ましくは抗酸化物質は、ポリフェノール類、フェノール類、フラボノイド類、ビタミン類、カロテノイド類、及びこれらの組み合わせの群から選択される。特に、食品等級ポリフェノール類が好ましい。化合物は、それが一般に認められており、かつ食品用途に安全であると見なされる場合に、「食品等級」と見なされる。

[0056]抗酸化物質の混合物が用いられてもよい。例えば、抗酸化物質は、抗酸化物質が豊富に含まれる食品組成物として、又はその抽出物として提供され得る。「抗酸化物質が豊富に含まれる」食品組成物は、ＯＲＡＣ（酸素ラジカル吸収能）の評点が組成物１００ｇ当たり少なくとも１００である。

[0057]好適なビタミン類の非限定的な例としては、ビタミンＥ（トコフェロール）、ビタミンＡ（レチノール又はβカロチン）及びビタミンＣ（アスコルビン酸）が挙げられる。好適なフラボノイド類の非限定的な例は、ヘスペレチン−７−グルコシド及びカテキンである。

[0058]好ましい実施形態において、抗酸化物質は、ヘスペレチン−７−グルコシド、クルクミン、緑茶カテキン類、ルチン、ビタミンＥ、ビタミンＡ、亜鉛、セレン、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される。抗酸化物質の代謝産物が用いられてもよい。特に好ましい実施形態において、抗酸化物質は、２つ以上の抗酸化物質の組み合わせである。

[0059]ココア、コーヒー及び茶には、抗酸化物質が多く含まれる。オレガノ、クミン、ショウガ、ニンニク、コリアンダー、タマネギ、タイム、マジョラム、タラゴン、ペパーミント、及び／又はバジルなど、抗酸化物質が多く含まれるいくつかの香辛料又はハーブが用いられてもよい。果実エキス又はドライフルーツ、例えば、セイヨウナシ、リンゴ、レーズン、ブドウ、イチジク、クランベリー、ブルーベリー、ブラックベリー、ラズベリー、イチゴ、クロスグリ、サクランボ、プラム、オレンジ、マンゴー、及び／又はザクロが用いられてもよい。本組成物は、キャベツ、ブロッコリー、ビートルート、アーティチョークのつぼみ、黒オリーブ、黒豆、セロリ、タマネギ、パセリ及び／又はホウレンソウなど、抗酸化物質が多く含まれる野菜を含み得る。

[0060]抗酸化物質は精製化合物又は部分精製化合物であってもよい。

[0061]一実施形態において、タンパク質源と抗酸化物質との重量比は、４０：１〜１：１、例えば３５：１〜２：１、好ましくは３０：１〜５：１、例えば２８：１〜８：１、更により好ましくは２５：１〜１０：１である。

[0062]好ましい実施形態において、抗酸化物質は１つ以上のポリフェノールを含む。２つ以上のポリフェノールなど、ポリフェノールの混合物が用いられてもよい。ポリフェノールはまた、ポリフェノールが豊富に含まれる食品組成物又はその抽出物として提供されてもよい。

[0063]ココア、コーヒー及び茶には、ポリフェノールが多く含まれる。果実エキス又はドライフルーツ、例えば、セイヨウナシ、リンゴ、ブドウ、クランベリー、ブルーベリー、ブラックベリー、ラズベリー、イチゴ、クロスグリ、サクランボ、プラム、及び／又はザクロが、ポリフェノール源として用いられてもよい。また、クリ、ヘーゼルナッツ及びアマニなど、一部の堅果類及び種子類にもポリフェノールが豊富に含まれる。ポリフェノールが多く含まれる野菜の非限定的な例は、キャベツ、ブロッコリー、ビートルート、アーティチョークのつぼみ、黒オリーブ、黒豆、セロリ、タマネギ、パセリ及びホウレンソウである。

[0064]ポリフェノールは精製化合物又は部分精製化合物であってもよい。好適なポリフェノールの非限定的な例は、フェノール酸；フラボノール類、フラボン類、イソフラボン類、フラバノン類、アントシアニン類、及びフラバノール類などのフラボノイド類；スチルベン類；及びリグナン類である。一実施形態において、ポリフェノールは、ヘスペレチン−７−グルコシド、クルクミン、ケルセチン、緑茶カテキン類、ルチン、及びこれらの組み合わせの群から選択される。好ましい実施形態において、ポリフェノールは、クルクミン、ルチン、ケルセチン及びこれらの組み合わせからなる群から選択される。特に好ましい実施形態において、ポリフェノールはクルクミン及び／又はルチンを含む。

[0065]一実施形態において、本組成物は、１つ以上のホエイタンパク質と１つ以上のポリフェノール類とを３００：１〜２：１、例えば１００：１〜５：１、好ましくは６０：１〜１０：１、更により好ましくは５０：１〜２０：１の重量比で含む。

[0066]タンパク質源と抗酸化物質とを含む組成物は、治療的に有効な用量で高齢男性に投与することができる。治療的に有効な用量は当業者が決定することができ、状態の重症度並びに高齢男性の体重及び全身状態など、当業者に公知のいくつもの要因に依存し得る。

[0067]本組成物は、高齢男性においてサルコペニアの状態がまだ発症していない場合に、サルコペニアを予防するのに、又はその発症リスクを少なくとも部分的に軽減するのに十分な量で高齢男性に投与され得る。かかる量は「予防的に有効な用量」と定義される。この場合もまた、正確な量は、体重、健康状態及び筋機能（例えば筋力、歩行速度等）がどの程度低下しているかなど、高齢男性に関連するいくつもの要因に依存する。

[0068]本組成物は、好ましくは高齢男性の食事に対する補給剤として毎日又は少なくとも週２回投与される。一実施形態において、本組成物は、高齢男性に数日間にわたり連続的に、好ましくは投与前と比べて筋機能（例えば筋力、歩行速度等）の増加が達成されるまで投与される。例えば、本組成物は、少なくとも３０日間、６０日間又は９０日間連続で毎日高齢男性に投与することができる。別の例として、本組成物は、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０年の期間など、より長期間にわたって高齢男性に投与することができる。

[0069]好ましい実施形態において、本組成物は、少なくとも３ヵ月間、例えば３ヵ月〜１年の期間、好ましくは少なくとも６ヵ月間にわたって高齢男性に投与される。

[0070]上記の投与例は、間断のない連日投与を必要とするものではない。それよりむしろ、投与期間中の２〜４日の中断など、投与に何回かの短期間の中断があり得る。本組成物の理想的な投与継続期間は当業者により決定され得る。

[0071]好ましい実施形態において、本組成物は、高齢男性に経口投与又は経腸投与（例えば経管栄養法）される。例えば、本組成物は、飲料、カプセル、錠剤、散剤又は懸濁液剤として高齢男性に投与することができる。

[0072]本組成物は、ヒト及び／又は動物が摂取するのに好適ないかなる種類の組成物であってもよい。例えば、本組成物は、食品組成物、栄養補助食品、栄養組成物、ニュートラシューティカルズ、摂取前に水又はミルクで再構成される粉末栄養製剤、食品添加物、医薬品、飲料及びドリンクからなる群から選択され得る。一実施形態において、本組成物は、経口栄養補助食品（ＯＮＳ）、完全栄養配合物、医薬品、薬剤又は食品製品である。好ましい実施形態において、本組成物は高齢男性に飲料として投与される。本組成物は粉末としてサシェに保存され、次に使用の際に水などの液体中に懸濁されてもよい。

[0073]経口又は経腸投与が不可能であるか、又は推奨されない一部の場合には、本組成物はまた、非経口投与されてもよい。

[0074]一実施形態において、本組成物は、組成物の乾燥重量基準で０．５〜１００％の量のホエイタンパク質を含む。例えば、本組成物は、ほぼ全てがホエイタンパク質である栄養補給剤であり得る。したがって、好ましい実施形態において、本組成物は、乾燥重量基準で６０％を超えるホエイタンパク質、例えば乾燥重量基準で７０％を上回るホエイタンパク質、好ましくは８０％を上回るホエイタンパク質、例えば８５％を上回るホエイタンパク質、更により好ましくは９０％を上回るホエイタンパク質、例えば９２％を上回るホエイタンパク質、詳細には９５％を上回るホエイタンパク質、例えば９７％を上回るホエイタンパク質を含む。

[0075]一実施形態において、本組成物は、タンパク質源、例えばホエイタンパク質を含み、かつ１つ以上の脂肪酸、好ましくは必須脂肪酸；タンパク質；糖質；食物繊維；ビタミン；ミネラル；又はプロバイオティクスなどの、高齢男性が摂取するのに最適な他の成分もまた含む栄養補助食品である。かかる実施形態において、本組成物は、乾燥重量基準で０．５〜５０％の量のホエイタンパク質、例えば乾燥重量基準で１〜４０％のホエイタンパク質、好ましくは２〜３５％のホエイタンパク質、例えば３〜３０％のホエイタンパク質、より好ましくは乾燥重量基準で５〜２０％のホエイタンパク質を含み得る。

[0076]高齢男性に投与されるタンパク質源の量は、高齢男性の体重と健康状態、即ち高齢男性におけるサルコペニアの重症度及び／又は筋機能（例えば筋力、歩行速度等）の低下の程度との両方に依存する。一実施形態において、本組成物は、１日に体重１ｋｇ当たり０．０３〜１．０ｇのホエイタンパク質、例えば１日に体重１ｋｇ当たり０．０５〜０．７ｇのホエイタンパク質、好ましくは１日に体重１ｋｇ当たり約０．１〜０．５ｇのホエイタンパク質を提供する量で高齢男性に投与される。

[0077]したがって、一実施形態において、本組成物は、１日に５〜５０ｇのホエイタンパク質、例えば１日に１２〜４０ｇのホエイタンパク質、好ましくは１日に１５〜３０ｇのホエイタンパク質、例えば１日に１６〜２５ｇのホエイタンパク質、更により好ましくは１日に２０ｇのホエイタンパク質を提供するように投与される。一実施形態において、組成物の１回の服用により、５〜５０ｇのホエイタンパク質、例えば１０〜４０ｇのホエイタンパク質、好ましくは１２〜３５ｇのホエイタンパク質、例えば１５〜３０ｇのホエイタンパク質が提供される。

[0078]一実施形態において、タンパク質源と抗酸化物質とを含む組成物は、脂肪酸を更に含む。脂肪酸は任意の脂肪酸であってよく、脂肪酸の組み合わせなど、１つ以上の脂肪酸であり得る。脂肪酸は好ましくは、必須多価不飽和脂肪酸、即ちリノール酸（Ｃ１８：２ｎ−３）及びα−リノレン酸（Ｃ１８：３ｎ−３）など、必須脂肪酸を含む。脂肪酸は、エイコサペンタエン酸（Ｃ２０：５ｎ−３）、アラキドン酸（Ｃ２０：４ｎ−６）、ドコサヘキサエン酸（Ｃ２２：６ｎ−３）、又はこれらの任意の組み合わせなど、長鎖多価不飽和脂肪酸を含み得る。好ましい実施形態において、脂肪酸はｎ−３（ω３）脂肪酸及び／又はｎ−６（ω６）脂肪酸を含む。脂肪酸は好ましくは、エイコサペンタエン酸を含む。

[0079]脂肪酸は、ヤシ油、ナタネ油、ダイズ油、トウモロコシ油、ベニバナ油、パーム油、ヒマワリ油又は卵黄など、脂肪酸を含有する任意の好適な供給源に由来し得る。脂肪酸の供給源は、好ましくは魚油である。

[0080]一部の実施形態において、本組成物は単回投与剤形で高齢男性に投与され、即ち、食事と一緒に高齢男性に与えられる１つの製剤中に全ての化合物が存在している。他の実施形態において、本組成物は別個の剤形で共投与され、例えばタンパク質源と抗酸化物質は別個のものとして共投与される。

[0081]一実施形態において、本組成物はビタミンＤを更に含む。

[0082]本組成物は、電気的筋肉刺激（ＥＭＳ）の後に、例えばその後２時間以内、好ましくは１時間以内、より好ましくは３０分以内に高齢男性に投与することができる。ＥＭＳはまた、筋電刺激、筋肉電気刺激、神経筋電気刺激（ＮＭＥＳ）又は電気筋刺激と称されることもあり、これらの用語は同義的に用いられ得る。電気的筋肉刺激は、電気インパルスを使用した筋収縮の誘発である。インパルスは装置によって発生し、刺激する筋肉のごく近傍の皮膚上の電極を介して送り込まれる。インパルスは、中枢神経系によってもたらされる活動電位を模して筋肉に収縮を生じさせる。電極は、皮膚に貼り付けるパッドであり得るが、電極はまた他の形態であってもよい。

[0083]ＥＭＳは、好ましくは高齢男性に少なくとも週１回、好ましくは少なくとも週２回、より好ましくは少なくとも週３回与えられる。好ましくは、タンパク質源と抗酸化物質とを含む組成物は、高齢男性のＥＭＳレジメン中に少なくとも週２回、より好ましくは毎日投与される。高齢男性は、身体刺激用又は電気的筋肉刺激用装置、例えば筋肉機能によって強制的にエネルギー損失を増進する装置又は機械を使用することができる。

[0084]実施例
[0085]以下の非限定的な例は、タンパク質源と抗酸化物質とを含む組成物を高齢男性に投与して高齢男性のサルコペニアを治療する、高齢男性のサルコペニアを予防する、高齢男性の筋機能（例えば筋力、歩行速度等）の低下を軽減する、高齢男性の筋機能（例えば筋力、歩行速度等）を高める、及び／又は高齢男性の筋萎縮後の筋機能（例えば筋力、歩行速度等）の回復を改善するという概念を展開しかつ裏付ける科学的データを提供する。

[0086]以下に詳述するとおり、パイロット試験は、電気的筋肉刺激（ＥＭＳ）とホエイベースの栄養補給剤（±ポリフェノール類及びＰＵＦＡ類）とによる併用手法が身体的に障害のある集団の筋肉サイズ及び機能に及ぼす効果を調べることを目標とした。４１人のフレイル被験者を１：１：１比で３つの試験群のうちの１つに無作為化した；（Ａ）２０ｇの糖質＋プラセボカプセル（ＣＨＯ）、（Ｂ）２０ｇのホエイタンパク質分離物＋プラセボカプセル（ＷＨＥＹ）、又は（Ｃ）２０ｇのホエイタンパク質分離物＋ルチンカプセル（１日５００ｍｇのルチン）＋ｗ３−ＦＡカプセル（１日５００ｍｇのクルクミン及び１．５ｇのｗ３−ＦＡ）（Ｗ−ＢＩＯ）のいずれかを含有する等カロリー（９５ｋｃａｌ）の飲料。全ての被験者が１２週間の期間にわたって週２回ＥＭＳトレーニングを受けた。主要アウトカムの結果が示すところによれば、治療開始後１２週時における３群の間での腓腹部及び大腿部の筋厚（ｍｍ単位）及び筋断面積（ｍｍ^２単位）の差は、群間で統計的に有意でなかった。対照的に、腓筋の筋厚並びに大腿筋の筋断面積及び筋厚については、集団全体にわたって有意な増加傾向があった。この知見は、ＥＭＳ治療に帰することができる。３つの治療群のいずれの間にも、副次アウトカム（歩行速度、体組成、自律神経系の活動、及び血液化学）の多くについて統計的に有意な差は観察されなかった。

[0087]対照的に、膝伸展強度については、１２週時にＷ−ＢＩＯ群とＷＨＥＹ群との間（４．１７ｋｇ[９５％信頼区間（ＣＩ）０．４１〜７．９４］、ｐ＝０．０３０８）及びＷ−ＢＩＯ群とＣＨＯ群との間（５．８９ｋｇ[９５％信頼区間（ＣＩ）１．７８〜１０．０１］、ｐ＝０．００６３）に統計的に有意な差があった。右膝伸展については、１２週時に群３と群１との間に統計的に有意な差があった（５．３５ｋｇ[９５％信頼区間（ＣＩ）１．１３〜９．５７］、ｐ＝０．０１４５）。更に、この効果は男性で観察されたが、女性では観察されなかった。これらのデータは、ＥＭＳと特定の栄養補給剤とを併用する二重手法が筋力に肯定的な影響を与え、高齢者のクオリティ・オブ・ライフを改善し得ることを示唆している。したがって、ＥＭＳと特定の食事介入との併用は、加齢及び運動不足によって引き起こされる生活習慣病の新方式の治療と考えられ得る。

[0088]方法
[0089]主要目的は、電気的筋肉刺激（ＥＭＳ）に加えてホエイベースの補給剤を摂取することによる１２週間のＥＭＳ及び栄養学的介入における、フレイル者の筋形態及び筋機能の改善について、有効性を判定することであった。これは、３群によるパイロットスタディ、並行、二重盲検、無作為化試験デザイン、及び単一施設であった（下記参照）。

[0090]被験者：
[0091]当初本試験のためボランティアで募った４１人の被験者は、全員が日本の介護保険（ＬＣＴＩ）制度上のフレイル状態を呈するフレイル高齢者（年齢６５〜９０歳）であった。本試験に組み入れた全ての被験者が、いかなる支援も受けていないか、又はＬＴＣＩ制度上の要支援１、要支援２、要介護１（ＬＴＣ１）、及び要介護２（ＬＴＣ２）に分類された、「自由に日常生活を営んでいる（free-living）」者であった。歩行速度が０．６〜１．２ｍ／ｓの被験者を組み入れた。医師及びケアマネージャーが整形外科的及び内科的問診を行い全ての被験者をスクリーニングし、被験者が電気的筋肉刺激を含む運動介入に参加することが適切かどうかを判定した。

[0092]被験者は、１：１：１比で３つの試験群のうちの１つに無作為化した；（Ａ）２０ｇの糖質（マルトデキストリングルコースシロップ２１ＤＥ）＋プラセボカプセル（ＣＨＯ）（ｎ＝１３）、（Ｂ）２０ｇのホエイタンパク質分離物（Ｐｒｏｌａｃｔａ ９５）＋プラセボカプセル（ＷＨＥＹ）（ｎ＝１５）、又は（Ｃ）２０ｇのホエイタンパク質分離物（Ｐｒｏｌａｃｔａ ９５）＋ルチンカプセル（１日５００ｍｇのルチン）＋ｗ３−ＦＡ／クルクミンカプセル（１日用量：５００ｍｇクルクミン及び１．５ｇ ｗ３−ＦＡタイプＮＡＤ、供給元Ｓｏｆｉｎｏｌ）（Ｗ−ＢＩＯ）（ｎ＝１３）のいずれかを含有する等カロリー（９５ｋｃａｌ）の飲料。４人の被験者（ＣＨＯ群の１人及びＷ−ＢＩＯ群の３人）は、組入れ基準に適合しない被験者（ｎ＝２）であったか、又はフォローアップが早期に中止となった（ｎ＝２）ため、パー・プロトコル分析集団から除外した。

[0093]被験者は、群の割り付けに応じて、３通りの実験飲料（Ａ〜Ｃ）のうちの１つを２２０ｍｌの水に溶かして経口摂取した。ＥＭＳ治療（週２回）がある日は、この飲料はＥＭＳの直後に摂取された（タンパク質合成の刺激を最大限にするため）。補給剤の（かつ昼食によるものでない）特定の効果を区別することができるように、ＥＭＳは可能な限り朝早くに適用し（少なくとも食事の１時間前に補給剤が服用されるようにする）、又は午後遅く（昼食終了から少なくとも２時間後）に適用した。ＥＭＳ治療がない日は、被験者は、ＥＭＳを受けるときに服用するのと同じ時間に栄養補給剤を飲んだ。被験者はまた、試験期間中にわたり朝食時に２個、昼食時に３個及び夕食時に２個の、１日７個のカプセル、即ち、５００ｍｇのルチン／日又はプラセボを含有する２個の硬カプセル、魚油（１．５ｇ魚油／日）とクルクミン（１日５００ｍｇのクルクミン）との混合物を含有する５個の軟カプセルも摂取した。４１人の被験者全てについて簡易栄養状態評価（Mini-Nutritional Assessment：ＭＮＡ）を実施し、ベースライン時及び１２週間後の基礎栄養状態を評価した。

[0094]電気的筋肉刺激（ＥＭＳ）手順：
[0095]主に刺激の不快感が原因でＥＭＳの利用は減少しているが、新技術によれば、痛みを伴わずに強い収縮を加えることが可能である。かかる活動を、人が運動で達成するであろうものと比べてより高い運動量で、かつより効率的に加えることができる。電気的筋肉刺激療法については、他の文献に十分に説明されている（Ｈａｓｅｇａｗａ ｅｔ ａｌ．，２０１１；Ｋｉｍｕｒａ ｅｔ ａｌ．，２０１１；Ｍｉｙａｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ．，２０１２；Ｍｏｒｉｔａｎｉ ｅｔ ａｌ．，２００５）。簡潔に言えば、全ての被験者が１２週間にわたって週２回ＥＭＳトレーニングを受けた。被験者は、腰、両膝及び両足首の周りにベルト型の電極を取り付け、インナーマッスル並びに大殿筋、大腿四頭筋、大腿屈筋、下腿三頭筋、及び前脛骨筋を２０Ｈｚ（筋肥大モード）の刺激周波数で刺激することが求められた。ＥＭＳの刺激強度は、各個人が不快感なく耐容できる最大レベルに調節した。ＥＭＳトレーニングは、被験者に対し週２回、２０分間ずつ、１２週間にわたって提供した。毎回ＥＭＳ前に被験者の健康状態を確認した。ＥＭＳトレーニングは安静時に座位で実施し、急速な動作によって引き起こされる頭部ふらふら感、眩暈、落下感、及び失神が生じるリスクを最小限に抑えた。本調査におけるＥＭＳトレーニングには、特別に設計された筋肉刺激装置（オートテンズプロ、株式会社ホーマーイオン研究所、東京、日本）を使用した。刺激装置の電流波形は、２５０μｓのパルス幅によって２０Ｈｚの周波数で下肢筋群に共収縮が生じるように設計した。デューティサイクルは、２０分間に５秒の刺激で２秒の中断を伴うものであった。更に、指数関数的漸増波を使用して筋肉刺激中の不快感を抑えた。

[0096]すぐ上に記載したこれらのＥＭＳ手順は、以前に最大の力を誘発した周波数で能動力が低下するときは、明らかに高周波疲労が原因であることが理由及び論理的根拠となっている。高周波疲労では、誘発活動電位振幅の急速な減少に伴う電気的伝播障害に起因し得る、力の大幅な損失が生じる。この高周波力疲労の間は、２０Ｈｚ刺激で著しく大きい力が発生する（Ｍｏｒｉｔａｎｉ ｅｔ ａｌ．，１９８５）。したがって、高周波疲労は概して、筋膜興奮性が低下して誘発電位振幅及び伝導時間の低下につながることに起因し得る電気的伝達の障害によって説明することができる（Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，１９７９；Ｍｏｒｉｔａｎｉ ｅｔ ａｌ．，１９８５）。

[0097]先行研究の多くで、超高周波刺激（２５００Ｈｚ）又は高周波刺激（５０又は８０Ｈｚ）を用いたＥＭＳの有効性が報告されている。Ｅｒｉｋｓｓｏｎ ｅｔ ａｌ．（１９８１）は、４〜５週間の５０Ｈｚ ＥＭＳトレーニングセッションでは大腿四頭筋における筋肉酵素活性、繊維サイズ、及びミトコンドリア特性が変化しないことを示した。したがって、高周波（５０又は８０Ｈｚ）ＥＭＳトレーニングを用いた先行研究の患者は、高周波疲労を起こし、したがって意図した筋肉が効果的に収縮しなかった可能性がある。このエビデンスは、２０Ｈｚ ＥＭＳが高周波（５０又は８０Ｈｚ）のＥＭＳよりも有効な筋肉改善（神経因子と形態変化の複合的な適応）を誘発する可能性があることを示している。

[0098]筋肉形態評価：
[0099]ベースライン時、実験介入４週時、８週時及び１２週時に、大腿四頭筋、大腿屈筋群、及び下腿三頭筋の筋厚を超音波検査を用いて評価した。Ｂモード超音波によって測定した筋厚とＭＲＩによって測定した対応部位の骨格筋量との間には、強い相関が報告されている（Ｄｕｐｏｎｔ ｅｔ ａｌ．，２００１；Ｆｕｋｕｎａｇａ ｅｔ ａｌ．，２００１）。したがって、筋肉サイズ及び筋肥大度の推定に筋厚測定値を用いることは妥当である。先行研究により、筋厚の測定に対する超音波技術の信頼性は示されている（Ｋｅｌｌｉｓ ｅｔ ａｌ．，２００９；Ｒｅｅｖｅｓ ｅｔ ａｌ．，２００４）。また、この試験では、超音波測定の信頼性も評価した。ＲＦ、ＶＬ、及びＣＡにおける級内相関係数は、それぞれ、０．９７（０．８８〜０．９９）、０．９６（０．８５〜０．９９）、及び０．９９（０．９６〜１．０）であった。

[0100]超音波検査による筋厚の測定は、以下のとおり標準化した：全てのスキャンをベースライン時及び治療後４週間おきに実施した。同じ操作者が、５ＭＨｚ広帯域トランスデューサーを備えたリアルタイムスキャナ（ＳＳＤ−９００、アロカ株式会社、東京、日本）を使用して各被験者を調べた。プローブに水性ゲルを塗布した後、イメージング手技を行った。イメージング中、トランスデューサーは皮膚の表面に対し垂直に保持し、過剰な圧力がかからないよう特に注意した。測定部位は筋肉の最も厚い部分とし、骨格マーカーを用いる標準的な手順で慎重に位置決めした。歩行速度は大腿四頭筋及び下腿三頭筋が主な決定要因となるため、イメージング及び測定はこれらの筋肉についてそれぞれ、被験者を座位として片側で行った。得られた画像はその場で保存し、後に全データを国立衛生研究所（National Institute of Health：ＮＩＨ）画像プログラムを使用して分析した。いかなる実験バイアスも回避するため、各イメージングデータは被験者及び日付情報に関して盲検法で分析した。超音波検査による筋体積の測定もまた、以下の方法で標準化した；筋厚の測定に加えて、標準的な手順で大腿筋群及び腓筋群の周径を測定することにより、これらの筋群の変化を推定した。各筋群の４ヵ所の皮下脂肪厚を超音波検査によって測定し、平均した。次に、Ｍｏｒｉｔａｎｉ ａｎｄ ｄｅＶｒｉｅｓ（１９７９）の方法を用いることにより、各筋群の体積を代数的に計算した。（図１を参照）。

[0101]自律神経系の活動評価：
[0102]心拍変動（ＨＲＶ）パワースペクトル解析は、広く受け入れられている有用かつ非侵襲的な方法であり、種々の研究及び臨床現場で自律神経機能の包括的、定量的及び定性的評価を提供している（Ｃｏｎｎｙ ｅｔ ａｌ．，１９９３；Ｍｏｒｉｔａｎｉ ｅｔ ａｌ．，１９９５）。一般に、ＨＲＶのパワースペクトル解析は、心電図（ＥＣＧ）Ｒ−Ｒ間隔における少なくとも２つの個別的な周期性領域を明らかにしている。高周波成分（＞０．１５Ｈｚ）は、副交感神経系（ＰＮＳ）の活動を反映する主要な寄与因子であり、低周波成分（＜０．１５Ｈｚ）は、交感神経系（ＳＮＳ）の活動及びＰＮＳの活動の両方に関連する（Ａｋｓｅｌｒｏｄ ｅｔ ａｌ．，１９８１；Ｍｏｒｉｔａｎｉ ｅｔ ａｌ．，１９９３）。

[0103]Ｒ−Ｒ間隔パワースペクトル解析手順については、他の文献に十分に説明されている（Ｍｏｒｉｔａｎｉ ｅｔ ａｌ．，１９９３；Ｍａｔｓｕｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ．，１９９９，２００１）。簡潔に言えば、ＥＣＧモニター（ライフスコープ、日本光電、東京、日本）のアナログ出力を１３ビットアナログ−デジタル変換器（ＨＴＢ ４１０；Ｔｒａｎｓ Ｅｒａ，Ｓｏｕｔｈ Ｏｒｅｍ，ＵＴ）によって１０００Ｈｚのサンプリングレートでデジタル化した。デジタル化したＥＣＧ信号を微分し、後の解析のため、得られたＥＣＧ ＱＲＳスパイク及びインパルスの間隔（Ｒ−Ｒ間隔）をハードディスクに順次保存した。Ｒ−Ｒスペクトル解析の実施前に、保存したＲ−Ｒ間隔データを表示して順次整列させることにより、２Ｈｚの有効サンプリング周波数の等間隔の試料を得て、目視検査のためコンピュータ画面上に表示した。次に、０．０３〜０．５Ｈｚ帯域のデジタルフィルタリングによって直流成分及び線形傾向を完全に除いた。平均振幅を表すものとしてＲ−Ｒ間隔の二乗平均平方根値を計算した。ハミング型のデータウィンドウにかけた後、試験中に得られたＲ−Ｒ間隔データの連続２５６秒時系列に対して高速フーリエ変換を用いたパワースペクトル解析を実施した。以下のそれぞれの帯域幅について曲線下面積を積分することにより、周波数領域のスペクトルパワーを定量化した：それぞれ、低周波（ＬＦ：０．０３及び０．１５Ｈｚ）、ＳＮＳ及びＰＮＳ活動の両方の指標；高周波（ＨＦ：０．１５及び０．５Ｈｚ）、これはＰＮＳ活動のみを反映する；及び全パワー（ＴＰ：０．０３及び０．５Ｈｚ）、全体的なＡＮＳ活動を表す。

[0104]身体能力試験：
[0105]筋力測定．手順は他の文献に報告されている（Ｗａｔａｎａｂｅ ｅｔ ａｌ．，２０１２ａ，２１０１２ｂ）。簡潔に言えば、張力トランスデューサー（ＬＵ−１００ＫＳＥ；共和電業、東京、日本）を搭載した特注の筋力計で等尺性膝伸展を実施した。収縮時、股関節及び膝関節の角度は両方ともにそれぞれ９０°屈曲位であった（１８０°は完全に伸展している）。最大随意収縮（ＭＶＣ）には、膝伸筋によって及ぼされる膝伸展力を２〜３秒でベースラインから最大値に徐々に増加させることと、次に最大値で２秒間維持することとが含まれた。課題のタイミングは、１秒間隔で与えられる口頭でのカウントに基づき、力がプラトーに達し始めたら、研究者らが積極的に励ました。被験者はＭＶＣ試行を各膝につき少なくとも２回行った。試行間には２分の休息を挟んだ。最も高いＭＶＣ力を比較に使用した。

[0106]歩行速度．能力評価の一環として、スクリーニング時、任意のＥＭＳ又は栄養補給の前のベースライン、及び１２週間後、最後のＥＭＳ治療及び栄養補助の後に、歩行速度、即ち、床にテープで示した６メートルの直線路に沿った６ｍ歩行時間（秒）を、特注のトリガーリンクストップウォッチを使用して測定した。評価時、被験者には、日常生活と同じく通常どおり歩くよう求めた。通常の歩行補助具（例えば、杖、歩行器）は認められた。歩行速度は各被験者につき３回評価し、平均した。

[0107]体組成．生体電気インピーダンス解析を用いることによる体組成（体脂肪量、除脂肪量、Ｋｇ及び％で表す）の評価をベースライン時及び治療１２週時に行った。これらの測定は、全ての被験者について、最新鋭の生体電気インピーダンス解析装置（Ｔａｎｉｔａ ＢＣ−１１８Ｄ、タニタ、東京、日本）を用いて、手持ち式リードを足裏平面電極と共に使用して５０ＫＨｚ、５００μＡの励起電流で実施した。測定したインピーダンス値を使用して、それぞれ「両腕」、「両足」、「体幹部」、及び「全身」の除脂肪量及び体脂肪量を計算した。

[0108]血液化学．夜間絶食後に血液試料を肘前静脈から真空管に採取した。それぞれ、インスリン感受性マーカー（血中グルコース、ヘモグロビンＡ１Ｃ、血漿インスリン及びＣ−ペプチド濃度の変化）、赤血球数、白血球数、血漿脂肪酸プロファイル、炎症マーカー（ＣＲＰ、トランスサイレチン、フィブリノゲン及びオロソムコイド）、血液化学（ＣＰＫ、ＨＤＬ及びＬＤＬコレステロール、アルブミン、総タンパク量及びトリグリセリド）に関する血液検査。ベースライン、２、６、１２週時に凝固パラメータ（血小板数、プロトロンビン時間及び部分プロトロンビン時間）についての血液検査を評価して、栄養学的介入に伴う安全性を確保した。他のパラメータについては、測定はベースライン時並びにＥＭＳ及び栄養補給による介入の１２週間後に行った。

[0109]統計的分析：
[0110]主要解析は、群２を群１と比較するフル・アナリシス・セット（ＦＡＳ）及びパー・プロトコル（ＰＰ）解析集団で実施した。ベースライン測定値、性別、無作為化時の年齢及び時間を共変量とする反復測定の混合モデルを使用して筋厚（ｍｍ^２単位）を解析した。１２週時の筋肉位置及び治療群毎の最小二乗平均が提供されることになる。

[0111]群１と群２との間のオブライエンＯＬＳ検定をグローバル検定として使用して、１２週時の製剤効果を両方の筋肉位置で評価した。オブライエンＯＬＳ統計量は以下のとおり測定した：

[0112]筋肉位置の各々（即ち腓腹部及び大腿部）について独立に、第８来院日における治療効果に関するｔ検定統計検定量を計算する。

[0113]次にＯＬＳ統計量を、以下のとおり求めた：

[0114]式中、ｔは腓腹部及び大腿部測定値のｔ検定統計量のベクトルであり、ｊは１のベクトルであり、及びAは元の観察の標本相関行列である。

[0115]ｔ_ｏｌｓの自由度（ｄ．ｆ．）の近似は、ｄ．ｆ．＝０．５×（ｎ_１＋ｎ_２−２）×（１＋１／ｍ^２）として定義した[式中、ｍは解析するエンドポイントの数（即ち腓腹部＋大腿部）であり、ｎ_１及びｎ_２は、第８来院日の腓腹部及び大腿部の測定値が利用可能なそれぞれ群１及び群２の被験者の人数である］。

[0116]副次解析はＦＡＳ集団のみで実施した。実施した解析はＳＡＰの第１１．２節に詳説する。

[0117]反復測定間の相関を説明するため、時系列データに混合効果線形モデルを使用した。ベースラインから１つの時点までの変化の解析には、固定効果線形モデルを使用した。必要と思われる場合、多重比較（Ｗ−ＢＩＯ対ＰＬＡＣＥＢＯ及びＷＨＥＹ対ＰＬＡＣＥＢＯ）を行った。これらの多重比較については、シングルステップ調整を用いた調整ｐ値を報告した。筋断面積及び筋厚に対する効果を組み合わせた片側仮説を検証するため、オブライエンのグローバル検定を実施した。これは、Ｗ−ＢＩＯ群とＰＬＡＣＥＢＯとの比較のためのみに、かつ腓筋及び大腿筋について別個に行った。全てのデータ解析は、Ｒ、バージョン３．０．１を使用して行った。

[0118]結果
[0119]表１（以下）は、集団のベースライン時パラメータの詳細を示す。本試験で無作為化した被験者の大多数は女性であった。Ｗ−ＢＩＯ群に組み入れた被験者は体重がやや重い傾向があり（ＣＨＯ及びＷＨＥＹ群ではＢＭＩがそれぞれ２０．３及び２１．３であったのにに対して、Ｗ−ＢＩＯ群では２２．７ｋｇ／ｍ^２）、ＣＨＯ群及びＷＨＥＹ群に組み入れた被験者と比較してより大きい腓筋（断面積、ｍｍ^２）を有した。それぞれＷＨＥＹ群及びＷ−ＢＩＯ群に無作為化した被験者について得られた測定値と比較して、ＣＨＯ群に無作為化した被験者は右膝及び左膝伸展強度が低かった。

[0120]表１．集団のベースライン時パラメータの詳細

[0121]筋肉形態：
[0122]筋表面積及び筋厚の縦断的解析．腓腹部断面積（ＣＳＡ）及び厚さ並びに大腿部について一緒に同様に測ったＣＳＡに関して、Ｗ−ＢＩＯ群とＰＬＡＣＥＢＯとを比較するためグローバル検定を実施した。これらの比較では統計的有意性は認められなかった。

[0123]介入終了時の筋表面積及び筋厚に及ぼす食事治療の効果．治療期間の終了時（３ヵ月後）に種々の群を比較したとき、大腿筋及び腓筋の筋厚又は筋断面積に関して３群の間に統計的に有意な差は認められなかった。いずれの時点についても、大腿筋及び腓筋断面積に関して試験治療群のいずれの間にも統計的に有意な差はなかった。したがって、筋肉形態の結果を総合的に考えると、これらの結果は、この治療が３群で観察された筋表面積及び筋厚の増加を誘導し、したがって恐らく特定の栄養学的介入よりもＥＭＳ治療に一層関係があったことを示している。

[0124]身体能力：
[0125]歩行速度．表２は、３つの治療群に関するベースライン及び１２週時の歩行速度（ｍ／ｓ）の記述的結果を示す（図２）。歩行速度における最も大きい改善は、Ｗ−ＢＩＯ群で見られ、１．１５±０．４５から１．２６±０．４６ｍ／ｓに改善した（ほぼ９．５％の増加）。ＣＨＯ群（１．２０±０．３２から１．２４±０．３７ｍ／ｓ（３．３％の増加））及びＷＨＥＹ群（１．１２±０．３３から１．１６±０．３１ｍ／ｓ（３．６％の増加））のそれぞれで見られた歩行速度の増加は中程度に過ぎなかった。しかしながら、これらの差は統計的有意性に達しなかった。

[0126]筋力．図３は、３つの治療群に関するベースライン及び１２週時の左膝伸展筋力の変化を示す。１２週時、左膝伸展に関してＷ−ＢＩＯ群とＷＨＥＹ群との間（４．１７ｋｇ[９５％信頼区間（ＣＩ）０．４１〜７．９４］、ｐ＝０．０３０８）及びＷ−ＢＩＯ群とＣＨＯ群との間（５．８９ｋｇ[９５％信頼区間（ＣＩ）１．７８〜１０．０１］、ｐ＝０．００６３）に統計的に有意な差があった。

[0127]更に、混合効果モデルをフィットさせることにより、各時点で各被験者につき２つの膝で取られた２つの測定値の間の相関を考慮に入れた。結果（図４を参照）は、治療と性別との間に統計的に有意な交互作用があることを示している。換言すれば、２つの性別で治療効果が異なる。これは、男性及び女性について別個に積極的治療群（Ｗ−ＢＩＯとも称される）とプラセボ（ＣＨＯ）との間の比較の点で見ると、浮き彫りになる。したがってこの治療は、Ｗ−ＢＩＯ群の男性において膝伸展強度の強力な改善を誘導したものと思われるが、この効果は女性では観察されなかった。

[0128]最後に、各被験者を個々に見たときの結果が興味深い（図５）：Ｗ−ＢＩＯのほぼ全ての被験者が（性別に関わらず）Ｖ２〜Ｖ８の間で正の傾きを呈したが、このとき他の２つの群では推移が上下するように見える。したがって、この図示から、Ｗ−ＢＩＯ群で観察され、かつ上記に記載した統計的分析によって実証された特定の利益が直接可視化される。

[0129]体組成．生体電気インピーダンス解析を用いることによる人体計測（体脂肪量、除脂肪量、Ｋｇ及び％で表す）をベースライン及び実験治療１２週時に実施した。ベースライン及び１２週時に試験治療群のいずれの間にも統計的に有意な差はなかった。

[0130]自律神経系の活動．心電図記録Ｒ−Ｒ間隔パワースペクトル解析により、安静時心拍数、ＬＦ（交感神経系の活動）、ＨＦ（副交感神経系の活動）及びＴＰ（全体的な自律神経系の活動）について、ベースライン及び１２週時に試験治療群のいずれの間にも統計的に有意な差はないことが明らかとなった。

[0131]血液分析．ベースライン及び１２週時のインスリン感受性マーカー（血中グルコース、ヘモグロビンＡ１Ｃ、血漿インスリン及びＣ−ペプチド濃度の変化）、赤血球数、白血球数、血漿脂肪酸プロファイル、炎症マーカー（ＣＲＰ、トランスサイレチン、フィブリノゲン及びオロソムコイド）、血液化学（ＣＰＫ、ＨＤＬ及びＬＤＬコレステロール、アルブミン、総タンパク量及びトリグリセリド）に関する血液検査結果について、試験治療群のいずれの間にも統計的に有意な差はなかった。同様に、ベースライン、２、６、１２週時に計測した凝固パラメータ（血小板数、プロトロンビン時間及び部分プロトロンビン時間）についての血液検査は、有意な群間差がないことを実証した。

[0132]考察
[0133]本試験は、ＥＭＳトレーニングと併せた１２週間にわたる生物活性物質の補給（ホエイタンパク質、ルチン、ｗ３−ＦＡ、及びクルクミン）の後、Ｗ−ＢＩＯ群においては、他の２つの群（ＣＨＯ及びＷＨＥＹ）と比べてフレイル者の膝伸展強度が有意に増加した（左脚１８．８％及び右脚７．３％）ことを実証した。また、このＷ−ＢＩＯ群は、糖質又はホエイタンパク質補給をＥＭＳトレーニングと併せた群の中で最も大きい歩行速度の改善（９．６％）を実証した。興味深いことに、筋力に対するこの利益は、筋肉サイズの増加とは無関係であった。実際、３群において１２週間の治療の間に観察された筋肉サイズの増加は僅かであり、しかしこの効果は３群で同様であったことから、恐らくＥＭＳ治療に特有のものであった（及び食事治療には関係がなかった）ものと考えられる。

[0134]興味深いことに、ＥＭＳトレーニングに対する反応の程度に性差が認められ、具体的には男性被験者は筋厚の有意な改善を示したが、一方、女性ではかかる有意な変化は観察されなかった。

[0135]これらの知見は「神経因子」が重要であることを裏付けており、神経因子は、未だ十分には定義付けられていないものの、筋力と呼ばれる、筋肉が示す最大の力に確かに関与している。ヒト随意筋力は、関与する筋肉部分の量（筋断面積）及び質（筋線維タイプ）のみならず、その筋肉部分が活性化された程度（神経因子）によっても決まる。更に、筋肉の質には筋肉内に含まれる脂質も関係しており、かかる脂質は年齢と共に増加し、筋肉の質が低くなる原因となる。したがって、本試験の間の、特にＷ−ＢＩＯ治療群に見られた利益となるような筋肉の質の変化は、筋線維の数又はサイズの増加と併せた筋肉の脂質含量の低下である可能性があり、したがって筋厚又はＣＳＡの変化なしに筋力の改善を得ること（脂質とタンパク質含量との間の均衡）が可能であり得る。

[0136]本試験では、３群全てが、主要な下肢筋群の「不随意の」収縮を誘発する同じＥＭＳトレーニングを１２週間の期間にわたって週２回受けた。３群の間の大腿筋及び腓筋の筋厚及び推定断面積に有意な差がないことがないことから、Ｗ−ＢＩＯ群が、生物活性物質の補給によって可能となった中枢運動駆動の増進及び／又は断面積当たりにより高い張力を発生させるような筋線維組成の変化によって、筋肉を活性化させる能力をより高度に獲得したのではないかという可能性が示唆される。Ｗ−ＢＩＯ群は、中枢神経系の完全性が増進した結果、筋肉を活性化させる運動指令が亢進した可能性がある。

[0137]Ｗ−ＢＩＯ群で特に観察された筋力増加を説明する別の可能性として、ポリフェノールが、活動性の低い高齢者に起こることが知られる酸化的ストレスを管理する助けとなり得るというものである。タンパク質と共に与えられるポリフェノールは、（酸化的ストレスを管理することによって）同化抵抗性に対抗する助けとなり得るため、したがって筋タンパク質合成に対する栄養素及びタンパク質の同化作用が回復し得る。同じように、ＥＰＡ補給もまた、インスリン感受性の改善をもたらし、ひいてはホエイタンパク質に関連する筋タンパク質合成を刺激した可能性がある。

[0138]本明細書中に記載される好適な実施形態に対する種々の変更及び修正は当業者には明らかであることは理解されるべきである。このような変更及び修正は、本発明の主題の主旨及び範囲から逸脱することなく、かつ意図される利点を損なうことなく、行うことができる。したがって、このような変更及び修正は、添付の「特許請求の範囲」によって包含されることが意図される。

Claims (24)

1. （ｉ）サルコペニアを有する高齢男性のサルコペニアを治療すること、（ｉｉ）高齢男性のサルコペニアを予防すること、（ｉｉｉ）高齢男性の筋機能の低下を軽減すること、（ｉｖ）高齢男性の筋機能を高めること、又は（ｖ）高齢男性の筋萎縮後の筋機能の回復を改善することのうちの少なくとも１つの用途のための組成物であって、前記用途に関して治療的に有効な量のタンパク質源と抗酸化物質とを含み、前記タンパク質源がホエイタンパク質を含み、前記抗酸化物質がクルクミン及びルチンを含み、更にｎ−３脂肪酸を含む、組成物。
2. サルコペニアを有する高齢男性のサルコペニアの治療又は予防用である、請求項１に記載の組成物。
3. 高齢男性の筋萎縮後の筋機能の回復の改善用である、請求項１に記載の組成物。
4. 前記抗酸化物質が、更にケルセチンを含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
5. 前記組成物の乾燥重量基準で０．２〜９５％の量の前記タンパク質源を含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
6. 前記タンパク質源が、カゼイン、エンドウ豆タンパク質、大豆タンパク質及びこれらの組み合わせからなる群から選択されるタンパク質を更に含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
7. 前記タンパク質源が更にロイシンを含み、前記ロイシンが前記組成物中に最大１０重量％の量で存在する、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
8. １日に高齢男性の体重１ｋｇ当たり０．０１〜０．０４ｇのロイシンを提供する量で投与される、請求項７に記載の組成物。
9. 前記組成物が、食品組成物、栄養補助食品、栄養組成物、ニュートラシューティカルズ、摂取前に水又はミルクで再構成される粉末栄養製剤、食品添加物、医薬品、ドリンク、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の組成物。
10. 少なくとも１ヵ月の期間にわたって少なくとも週２回投与されるための、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物。
11. 前記筋機能が、筋力、歩行速度、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される特性を含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組成物。
12. １日に高齢男性の体重１ｋｇ当たり０．１〜０．４ｇの前記タンパク質源を提供する量で投与される、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の組成物。
13. （ｉ）サルコペニアを有する高齢男性のサルコペニアを治療すること、（ｉｉ）高齢男性のサルコペニアを予防すること、（ｉｉｉ）高齢男性の筋機能の低下を軽減すること、（ｉｖ）高齢男性の筋機能を高めること、又は（ｖ）高齢男性の筋萎縮後の筋機能の回復を改善することのうちの少なくとも１つの用途のための組成物を製造するための、タンパク質源、抗酸化物質及びｎ−３脂肪酸の使用であり、前記タンパク質源がホエイタンパク質を含み、前記抗酸化物質がクルクミン及びルチンを含む、使用。
14. 前記組成物が、サルコペニアを有する高齢男性のサルコペニアの治療又は予防用である、請求項１３に記載の使用。
15. 前記組成物が、高齢男性の筋萎縮後の筋機能の回復の改善用である、請求項１３に記載の使用。
16. 前記抗酸化物質が更にケルセチンを含む、請求項１３〜１５のいずれか一項に記載の使用。
17. 前記組成物が前記組成物の乾燥重量基準で０．２〜９５％の量の前記タンパク質源を含む、請求項１３〜１６のいずれか一項に記載の使用。
18. 前記タンパク質源が、カゼイン、エンドウ豆タンパク質、大豆タンパク質及びこれらの組み合わせからなる群から選択されるタンパク質を更に含む、請求項１３〜１７のいずれか一項に記載の使用。
19. 前記タンパク質源が更にロイシンを含み、前記ロイシンが前記組成物中に最大１０重量％の量で存在する、請求項１３〜１８のいずれか一項に記載の使用。
20. 前記組成物が、１日に高齢男性の体重１ｋｇ当たり０．０１〜０．０４ｇのロイシンを提供する量で投与されるものである、請求項１９に記載の使用。
21. 前記組成物が、食品組成物、栄養補助食品、栄養組成物、ニュートラシューティカルズ、摂取前に水又はミルクで再構成される粉末栄養製剤、食品添加物、医薬品、ドリンク、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１３〜２０のいずれか一項に記載の使用。
22. 前記組成物が、少なくとも１ヵ月の期間にわたって少なくとも週２回投与されるためのものである、請求項１３〜２１のいずれか一項に記載の使用。
23. 前記筋機能が、筋力、歩行速度、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される特性を含む、請求項１３〜２２のいずれか一項に記載の使用。
24. 前記組成物が、１日に高齢男性の体重１ｋｇ当たり０．１〜０．４ｇの前記タンパク質源を提供する量で投与される、請求項１３〜２３のいずれか一項に記載の使用。

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