JP6813974B2 - グレリン分泌促進剤 - Google Patents

Description

本発明は、グレリン分泌促進剤に関する。

グレリンは、主に胃内で分泌されるペプチドホルモンであり、摂食亢進作用や消化管運動の調節作用、成長ホルモン促進、エネルギー代謝の調節作用、心機能亢進作用、抗糖尿病作用等が報告されている。したがって、グレリンの分泌促進は食欲不振を改善できることから、グレリンの分泌を促進する物質は非常に有用である。これまでに、乳成分・植物抽出物、あるいは漢方薬によるグレリンの分泌促進が報告されているが、一方で、乳酸菌によるグレリンの分泌促進は報告されていない。よって、医薬品などによらず、乳酸菌により調製された通常の食品摂取のような、より簡便な方法でグレリン分泌促進効果を得ることが望まれていた。

これまでの例では、例えば、特表２００９−５２４６４０号公報（特許文献１）では、ラクトバチルス・アシドフィルス、ラクトバチルス・サリバリウス、ラクトバチルス・クルバツスなどを用いて、グレリンの分泌を調節することが記載されている。特開２０１５−１２７３３８号公報（特許文献２）には、ラクトバチルス属の乳酸菌とグレリンとを含む組成物が記載されている。特開２０１５−２０５８２９号公報（特許文献３）及び特開２０１５−２０５８３０号公報（特許文献４）には、脱脂乳や脱脂粉乳を有効成分とするグレリン分泌促進剤が記載されている。しかし、これらの文献には、乳酸菌、特にラクトバチルス・ガセリが、グレリンの分泌を促進し、食欲不振を改善できることについては、記載や示唆されていなかった。

特表２００９−５２４６４０号公報 特開２０１５−１２７３３８号公報 特開２０１５−２０５８２９号公報 特開２０１５−２０５８３０号公報

これまで、グレリンを用いて食欲不振を改善するには、半ば強制的にグレリン又はグレリンを分泌させる公知の物質を摂取（投与）させる必要があり、摂取する上での物理的及び／又は心理的な障壁が存在していた。

このような背景から、本発明では、摂取しやすい形態であり、ヒトの体内に存在するグレリン分泌作用を発揮できる、新規で安全で副作用のないグレリン分泌促進剤を提供することを課題とする。

上記課題を解決するために、本発明者らは、身近で手軽に摂取できる食品として発酵乳に着目し、発酵乳を調製するために用いる乳酸菌の機能性について詳細に検討した。そして、その結果として、所定の乳酸菌、及びそれを用いて調製した発酵乳に顕著なグレリン分泌効果があることを見出し、本発明を完成させた。

すなわち、本発明は、次の通りとなる。
［１］ラクトバチルス属の乳酸菌を有効成分として含有することを特徴とする、グレリン分泌促進剤。
［２］前記ラクトバチルス属の乳酸菌が、ラクトバチルス・ガセリであることを特徴とする［１］に記載のグレリン分泌促進剤。
［３］前記ラクトバチルス属乳酸菌が、ラクトバチルス・ガセリＯＬＬ２７１６（ＦＥＲＭ ＢＰ−６９９９）であることを特徴とする［１］又は［２］に記載のグレリン分泌促進剤。
［４］ヘリコバクター・ピロリの陰性者用であることを特徴とする［１］〜［３］のいずれかに記載のグレリン分泌促進剤。
［５］［１］〜［４］のいずれか一つに記載のグレリン分泌促進剤を含む発酵乳。

また、本発明には、以下の発明も包含される。
［６］ラクトバチルス属の乳酸菌を用いて調製した発酵乳を対象に摂取させる工程を含む、グレリン分泌を促進させるための方法。
［７］ラクトバチルス属の乳酸菌が、ラクトバチルス・ガセリである、［６］に記載のグレリン分泌を促進させるための方法。
［８］ラクトバチルス・ガセリが、ラクトバチルス・ガセリＯＬＬ２７１６（ＦＥＲＭ ＢＰ−６９９９）である、［６］又は［７］に記載のグレリン分泌を促進させるための方法。
［９］グレリン分泌促進剤の製造における、ラクトバチルス属の乳酸菌の使用。
［１０］ラクトバチルス属の乳酸菌が、ラクトバチルス・ガセリである、［９］に記載の使用。
［１１］ラクトバチルス・ガセリが、ラクトバチルス・ガセリＯＬＬ２７１６（ＦＥＲＭ ＢＰ−６９９９）である、［９］又は［１０］に記載の使用。
［１２］グレリン分泌促進剤の製造に使用するための、ラクトバチルス属の乳酸菌。
［１３］グレリン分泌促進剤の製造に使用するための、ラクトバチルス属の乳酸菌であるラクトバチルス・ガセリＯＬＬ２７１６（ＦＥＲＭ ＢＰ−６９９９）。

本発明によれば、所定の乳酸菌や、それを用いて調製した発酵乳を摂取することで、グレリン分泌促進効果を得ることができ、食欲不振を顕著に改善できる。特に、発酵乳は食経験が豊富な食品であり、身近で手軽かつ安全に摂取できるので、食欲不振の改善に大きく寄与できる。

実施例１において、コントロール群とＬＧ２１ヨーグルト群の、血中活性型グレリン濃度を比較した結果を示すグラフである。縦棒は、各群内での標準偏差を示している。コントロール群とＬＧ２１ヨーグルト群で、危険率５％未満で統計学的に有意差あり。 実施例１において、コントロール群とＬＧ２１ヨーグルト群の、胃組織のグレリン遺伝子発現量を比較した結果を示すグラフである。縦棒は、各群内での標準偏差を示している。コントロール群とＬＧ２１ヨーグルト群で、危険率５％未満で統計学的に有意差あり。 実施例２において、コントロール群、ＬＧ２１生菌投与１時間後、ＬＧ２１生菌投与２時間後の、胃組織のグレリン遺伝子発現量を比較した結果を示すグラフである。縦棒は、各群内での標準偏差を示している。コントロール群とＬＧ２１生菌投与２時間後、及びＬＧ２１生菌投与１時間後とＬＧ２１生菌投与２時間後で、危険率５％未満で統計学的に有意差あり。

本発明では、乳酸菌をそのまま用いても良い。本発明での「乳酸菌」とは、分類学的に乳酸菌と認定されたものの全てを総称し、菌種や菌株などで限定されるものではない。なお、乳酸菌はその由来により、植物由来、及び動物由来と分類することもあるが、本発明の乳酸菌は植物由来も動物由来もどちらも使用することができる。本発明では、ラクトバチルス属の乳酸菌から選ばれる１種又は２種以上の菌株が、ヨーグルトなどの発酵乳により十分な食経験があるため好ましい。また、ラクトバチルス属乳酸菌がラクトバチルス・ガセリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｇａｓｓｅｒｉ）であることがより好ましく、中でもラクトバチルス・ガセリＯＬＬ２７１６（ＦＥＲＭ ＢＰ−６９９９）であることがさらに好ましい。

ここで、「ラクトバチルス・ガセリＯＬＬ２７１６」は、１９９９年５月２４日付（原寄託日）で独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センターに受託番号 ＦＥＲＭ ＢＰ−６９９９の下でブタペスト条約に基づき国際寄託されている。本寄託株は１９９９年５月２４日付の微工研菌寄第Ｐ−１７３９９号の国内寄託（原寄託）から、２０００年１月１４日にブタペスト条約に基づく国際寄託に移管された。

また、本発明の別の一態様では、乳酸菌を用いて発酵乳を調製しても良い。本発明では、発酵乳として摂取することで、乳酸菌として摂取する場合と比べ、発酵乳のほどよいさわやかな酸味をもって、本発明のラクトバチルス属の乳酸菌をストレスなく摂取できる。発酵乳の調製方法は、例えば原料乳を殺菌し、冷却後、乳酸菌スターターを添加して、所定の乳酸酸度となるような発酵温度と発酵時間で発酵させる方法が挙げられる。乳酸酸度としては、例えば０．６〜１．２質量％が例示される。発酵温度としては、例えば４０〜４５℃が例示される。発酵時間としては、例えば２〜１２時間が例示される。

本発明での「発酵乳」とは、乳を発酵させたものをいい、例えば、乳及び乳製品の成分規格等に関する省令（乳等省令）で定義される「発酵乳」、「乳酸菌飲料」、「乳飲料」、「ナチユラルチーズ」等を包含するがこれに限定されない。例えば、発酵乳は、乳等省令で定義される「発酵乳」、すなわち、生乳、牛乳、特別牛乳、生山羊乳、殺菌山羊乳、生めん羊乳、成分調整牛乳、低脂肪牛乳、無脂肪牛乳および加工乳などの乳またはこれと同等以上の無脂乳固形分を含む乳等を、乳酸菌または酵母で発酵させ、固形状（ハードタイプ）、糊状（ソフトタイプ）または液状（ドリンクタイプ）にしたもの、または、これらを凍結したものをいうが、これに限定されない。本発明の発酵乳では、無脂乳固形分の濃度の範囲は、例えば４．０％〜１２．０％が好ましく、６．０％〜１０．０％がより好ましく、７．０％〜９．０％がさらに好ましい。また、乳脂肪分の濃度は、例えば０．２％〜４．０％が好ましく、０．３％〜３．０％がより好ましく、０．４％〜２．０％がさらに好ましい。

発酵乳の典型例としては、ヨーグルトが挙げられる。本発明において、「ヨーグルト」とは、例えばプレーンヨーグルト、ハードヨーグルト（セットタイプヨーグルト）、ソフトヨーグルト、ドリンクヨーグルトなどが含まれる。本発明では、食欲不振時の飲みやすさの観点から、特にドリンクヨーグルトが好ましい。

本発明の発酵乳では、１回の摂取に適切な量を１個包装の形態とすることにより、適切かつ手軽に摂取できることになり、使用性の面から好ましい。１回の摂取に適切な量は、改善すべき食欲不振の程度などにより個人差やばらつきがあるものの、例えば、無脂乳固形分が８．０％である発酵乳の場合には、１回あたりで５０ｍＬ〜２００ｍＬが好ましく、８０ｍＬ〜１５０ｍＬがより好ましく、１００ｍＬ〜１２０ｍＬがさらに好ましい。あるいは、１回あたりで５０ｇ〜２００ｇが好ましく、８０ｇ〜１５０ｇがより好ましく、１００ｇ〜１２０ｇがさらに好ましい。

本発明では、「１個包装の形態」はあらゆる形態を包含し、例えば、蓋付きの容器、キャップ付きのボトル、個袋、パウチ、チューブなどの一般的な包装形態が含まれる。本発明では、各個包装、または複数の個包装を含む包装に、当該製品の用途、効能、摂取方法などの説明を記載すること、および／または、記載物を加えたパッケージとすること、および／または、別途パンフレットなどの記載物を掲示することなどにより、その用途を明確にすることができる。

本発明では、ヒトに対して１日あたり、その有効量（摂取量）として、有効成分の乳酸菌の菌数が、２×１０^７〜５×１０^１０個が好ましく、５×１０^７〜５×１０^１０個がより好ましく、１×１０^８〜５×１０^１０個がさらに好ましく、５×１０^８〜５×１０^１０個がもっと好ましく、５×１０^８〜２×１０^１０個が一層好ましい。

本発明の発酵乳は、単回での摂取で十分な効果が得られるが、グレリン分泌の促進効果を高める観点から、４週間以上、６週間以上、８週間以上、１０週間以上、１２週間以上の期間で継続して摂取することが好ましく、２４週間以上の期間で継続して摂取することがより好ましく、３６週間以上の期間で継続して摂取することがさらに好ましい。なお、本発明の発酵乳は、十分な食経験があり安全に摂取できるため、摂取期間の上限は特に制限されず、永久的に継続することが可能であるが、強いて上限を設けるならば、例えば１２０週間以下、１００週間以下、８０週間以下、６０週間以下である。

また、本発明では、本発明の実施形態における乳酸菌が含有されている市販商品を便宜的に使用しても良い。例えば、ラクトバチルス・ガセリＯＬＬ ２７１６（ＦＥＲＭ ＢＰ−６９９９）の場合、株式会社明治が販売している「明治プロビオヨーグルトＬＧ２１」を便宜的に用いることができる。当該市販品は、そのまま摂取しても良く、さらに加工しても良い。本発明の実施形態における乳酸菌と、その他の摂取可能な成分を一緒に摂取する場合、その他の摂取可能な成分に制限はないが、例えば乳性成分が好適に用いられる。乳性成分とは、乳そのもの又は乳を加工した乳成分を含む組成物を意味し、例えば、生乳（牛乳など）、還元乳（粉乳、クリーム、バター）、発酵乳（ヨーグルト、チーズ）、乳調製品（ホエイ、カゼイン、乳糖、乳清ミネラル、パーミエイト）などの乳成分を含んでいる全ての成分を含み、その由来や形態は特に限定されない。

なお、ラクトバチルス・ガセリＯＬＬ２７１６は、ヒト胃内のヘリコバクター・ピロリ菌の除菌能の高い乳酸菌であることが知られている（例えば、特許４５０９２５０号公報）が、本発明のグレリン分泌促進効果は、ヘリコバクター・ピロリ菌の除菌とは関係なく得られる。したがって、本発明はヘリコバクター・ピロリ菌の陽性者用として用いることもできるし、ヘリコバクター・ピロリ菌の陰性者用として用いることもできる。

以下、実施例に基づいて、本発明をより具体的に説明する。なお、この実施例は、本発明を限定するものではない。

［実施例１］
ｄｄｙマウス(日本エスエルシー株式会社、４週齢、オス)１２匹について、１週間の馴化期間後、コントロール群と、ＬＧ２１ヨーグルト群の２群に分けた。コントロール群にはＡＩＮ−９３Ｍ飼料(日本クレア株式会社、組成；コーンスターチ４６．５６９２％、ミルクカゼイン１４．０％、アルファ化コーンスターチ１５．５％、グラニュー糖１０．０％、精製大豆油４．０％、セルロースパウダー５．０％、ミネラルミックス（ＡＩＮ-９３Ｍ-ＭＸ）３．５％、ビタミンミックス（ＡＩＮ-９３ＶＸ）１．０％、Ｌ−シスチン０．１８％、重酒石酸コリン０．２５％、第３ブチルヒドロキノン ０．０００８％)を４週間投与した。ＬＧ２１ヨーグルト群には、１．１１ｇ/ｄａｙの投与量となるように、ＬＧ２１ヨーグルト（株式会社明治が販売している「明治プロビオヨーグルトＬＧ２１」で、ラクトバチルス・ガセリＯＬＬ２７１６（ＦＥＲＭ ＢＰ−６９９９）が含まれている）を混合したＡＩＮ−９３Ｍ飼料を４週間給与した。４週間経過後、剖検し、血液と胃組織を採取した。

血液はＥＤＴＡ処理後、１／１０量の塩酸（１ｍｏｌ/Ｌ）を加え、Ａｃｔｉｖｅ Ｇｈｒｅｌｉｎ ＥＬＩＳＡ ｋｉｔ（株式会社ＬＳＩメディエンス）を用いて、血中活性型グレリン濃度を測定した。また、採取した胃組織から、ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔ ＲＴ ｒｅｇｅｎｔ ｋｉｔ（タカラバイオ株式会社）を用いてｃＤＮＡを調製し、ＳＹＢＥＲ Ｐｒｅｍｉｘ Ｅｘ ＴａｑＩＩ（タカラバイオ株式会社）およびＴｈｅｒｍａｌ ｃｙｃｌｅｒ Ｄｉｃｅ（タカラバイオ株式会社)を用いて、胃組織のグレリン遺伝子発現量を測定した。

血中活性型グレリン濃度の測定結果を図１に、胃組織のグレリン遺伝子発現量を図２に示した。図１から、ＬＧ２１ヨーグルト群の血中活性型グレリン濃度は、コントロール群と比較して有意に高くなった。また、図２から、胃組織のグレリン遺伝子発現量は、コントロール群と比較して有意に高くなった。したがって、ラクトバチルス・ガセリＯＬＬ２７１６（ＦＥＲＭ ＢＰ−６９９９）が含まれているＬＧ２１ヨーグルトには、グレリン分泌促進効果があることが示唆された。

［実施例２］
ＩＣＲマウス（日本エスエルシー株式会社、１０週齢、オス）１５匹を、１週間の馴化期間後、３群に分けた。５時間絶食後、１群をコントロール群として、生理食塩水５００μＬを投与し、剖検し、胃組織を採取した。その他の２群には、ラクトバチルス・ガセリＯＬＬ２７１６（ＦＥＲＭ ＢＰ−６９９９）の生菌を２×１０^１０ｃｆｕ/ｍＬ含む生理食塩水５００μＬを投与し、投与後、１、２時間後に剖検し、胃組織を採取した。胃組織のグレリン遺伝子発現量を、実施例１と同様の方法で測定した。

結果を図３に示した。ラクトバチルス・ガセリＯＬＬ２７１６（ＦＥＲＭ ＢＰ−６９９９）の生菌を投与して２時間で、胃組織のグレリン遺伝子発現量はコントロール群と比較して有意に高くなった。したがって、ラクトバチルス・ガセリＯＬＬ２７１６（ＦＥＲＭ ＢＰ−６９９９）の生菌はグレリン分泌促進効果があることが示唆された。

本発明によれば、乳酸菌そのものや、それを用いて調製した発酵乳を摂取することで、グレリン分泌促進効果を得ることができ、食欲不振を顕著に改善できる。特に、発酵乳は食経験が豊富な食品であり、身近で手軽かつ安全に摂取できるので、食欲不振の改善に大きく寄与できる。

Claims (5)

1. ラクトバチルス・ガセリＯＬＬ２７１６（ＦＥＲＭ ＢＰ−６９９９）を有効成分として含有する食欲不振改善剤。
2. ラクトバチルス・ガセリＯＬＬ２７１６（ＦＥＲＭ ＢＰ−６９９９）を２×１０ ^７ 〜５×１０ ^１０ 個含有する、請求項１に記載の食欲不振改善剤。
3. 発酵乳である、請求項１または２に記載の食欲不振改善剤。
4. 食欲不振改善が、グレリンの分泌促進作用による、請求項１〜３のいずれか一項に記載の食欲不振改善剤。
5. 対象が、ヘリコバクター・ピロリ陰性である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の食欲不振改善剤。