JP6584391B2 - 非ホジキンリンパ腫を治療するための、ｈｄａｃ阻害剤単独またはｐｉ３ｋ阻害剤との組み合わせ - Google Patents

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０１３年１０月１０日に出願されたＵ．Ｓ． Ｐｒｏｖｉｓｉｏｎａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ Ｓｅｒｉａｌ Ｎｏ．６１／８８９，２０７及び２０１３年１２月３日に出願されたＵ．Ｓ． Ｐｒｏｖｉｓｉｏｎａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ Ｓｅｒｉａｌ Ｎｏ．６１／９１１，０９７に対し優先権を主張し、そのそれぞれは、その全体が参照により本明細書に援用される。

背景
ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）酵素は、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）における誘因性の治療上の標的を表すが、残念なことに、非選択的ＨＤＡＣ阻害剤は、患者における用量制限毒性をまねいた。

ホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ ３−キナーゼ、ＰＩ３Ｋｓ、ＰＩ（３）Ｋｓ、ＰＩ−３Ｋｓ、ホスファチジルイノシトール−３−キナーゼまたはホスホイノシチド３−キナーゼ）は、細胞成長、増殖、分化、運動性、生存及び細胞内輸送などの細胞の機能において含まれる酵素のファミリーであり、それらは次々に癌に関与する。ＰＩ３Ｋｓは、ホスファチジルイノシトールのイノシトール環の３つの位置のヒドロキシル基をリン酸化することができる、関連する細胞内シグナルトランスデューサー酵素のファミリーである。

非選択的ＨＤＡＣ阻害剤の用量制限毒性のため、非ホジキンリンパ腫治療のためのより効果的でより毒性が低い組成物及び方法に対して、当該技術分野において持続的な需要がある。これらの需要を満たすために、本明細書において、ＨＤＡＣ阻害剤、ＨＤＡＣ阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤を含む薬学的な組み合わせ、並びに非ホジキンリンパ腫治療のための方法が提供される。本発明の化合物、組み合わせ及び方法は、十分に許容され、及び以前の治療法の用量制限毒性を示さない。

本発明の概要
その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫治療のための薬学的化合物が本明細書において提供される。また、その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫治療のための薬学的組み合わせが本明細書において提供される。加えて、その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫を治療するための方法が本明細書において提供される。

いくつかの実施形態において、その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫治療のための、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤が提供される。その他の実施形態において、その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫治療のためのヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤を含む組み合わせが提供される。

さらなる実施形態において、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤またはヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤を含む組み合わせの治療上有効な量を被験体に投与することを含む、その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫を治療するための方法が提供される。

いくつかの実施形態において、組成物及び組み合わせは、細胞生存度、細胞増殖を減少させ、及び相乗的に細胞のアポトーシスを増加させる。

具体的実施形態において、ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤は、式Ｉの化合物：
またはその薬学的に許容される塩であり、式中、環Ｂは、アリールまたはヘテロアリールであり；Ｒ_１は、アリールまたはヘテロアリールであり、そのそれぞれはＯＨ、ハロまたはＣ_１−６−アルキルによって任意に置換されてもよく；及びＲは、ＨまたはＣ_１−６−アルキルである。

好ましい実施形態において、式Ｉの化合物は：
またはその薬学的に許容される塩である。

さらに他の実施形態において、式Ｉの化合物は：
またはその薬学的に許容される塩である。

その他の具体的実施形態において、ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤は、式ＩＩの化合物：

またはその薬学的に許容される塩であり、式中、Ｒ_ｘ及びＲ_ｙは、各々が付着される炭素とともに、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルまたはシクロオクチルを形成する；それぞれのＲ_Ａは、独立してＣ_１−６−アルキル、Ｃ_１−６−アルコキシ、ハロ、ＯＨ、−ＮＯ_２、−ＣＮまたは−ＮＨ_２であり；及びｍは、０、１または２である。

好ましい実施形態において、式ＩＩの化合物は：
またはその薬学的に許容される塩である。

その他の好ましい実施形態において、式ＩＩの化合物は：
またはその薬学的に許容される塩である。

具体的実施形態において、ホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤は、ＣＡＬ−１２０／ＧＳ−９８２０、ＧＤＣ−０９４１、ＩＰＩ−１４５及びＧＳ−１１０１からなる群から選択されるか、またはそれらの薬学的に許容される塩である。

いくつかの実施形態において、ＨＤＡＣ阻害剤は、薬学的に許容される担体と共に投与される。その他の実施形態において、ＨＤＡＣ阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤の組み合わせは、薬学的に許容される担体と共に投与される。

いくつかの実施形態において、ＨＤＡＣ阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤は、別々の剤形で投与される。その他の実施形態において、ＨＤＡＣ阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤は、単一の剤形で投与される。

いくつかの実施形態において、ＨＤＡＣ阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤は、異なる時間に投与される。その他の実施形態において、ＨＤＡＣ阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤は、実質的に同時に投与される。

いくつかの実施形態において、ＨＤＡＣ阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤の組み合わせは、その必要のある被験体の治療において相乗効果を達成する。いくつかの実施形態において、ＨＤＡＣ阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤の組み合わせは、その必要のある被験体の治療において相乗効果を達成し、組み合わせは、化合物の一方または両方が単独で投与されるときに有効でないだろうが、その量が組み合わせにおいて有効である投薬量で投与される。

組み合わせ及び／または方法のいくつかの実施形態において、ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤は、式Ｉの化合物：
またはその薬学的に許容される塩であって、式中、環Ｂは、アリールまたはヘテロアリールであり；Ｒ_１はアリールまたはヘテロアリールであり、そのそれぞれはＯＨ、ハロまたはＣ_１−６−アルキルによって任意に置換されてもよく；及びＲは、ＨまたはＣ_１−６−アルキルであり；及びＰＩ３Ｋ阻害剤は、任意のＰＩ３Ｋ阻害剤である。

組み合わせ及び／または方法の具体的実施形態において、ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤は：
またはその薬学的に許容される塩であり；及びＰＩ３Ｋ阻害剤は、ＣＡＬ−１２０／ＧＳ−９８２０、ＧＤＣ−０９４１、ＩＰＩ−１４５及びＧＳ−１１０１からなる群から選択されるか、またはそれらの薬学的に許容される塩である。

組み合わせ及び／または方法の具体的実施形態において、ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤は：
またはその薬学的に許容される塩であり；及びＰＩ３Ｋ阻害剤は、ＣＡＬ−１２０／ＧＳ−９８２０、ＧＤＣ−０９４１、ＩＰＩ−１４５及びＧＳ−１１０１からなる群から選択されるか、またはそれらの薬学的に許容される塩である。

組み合わせ及び／または方法のいくつかの実施形態において、ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤は、式ＩＩの化合物：
またはその薬学的に許容される塩であって、式中、Ｒ_ｘ及びＲ_ｙは、各々が付着される炭素とともに、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルまたはシクロオクチルを形成する；それぞれのＲ_Ａは、独立してＣ_１−６−アルキル、Ｃ_１−６−アルコキシ、ハロ、ＯＨ、−ＮＯ_２、−ＣＮまたは−ＮＨ_２であり；及びｍは、０、１または２であり；及びＰＩ３Ｋ阻害剤は、任意のＰＩ３Ｋ阻害剤である。

組み合わせ及び／または方法の具体的実施形態において、ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤は：
またはその薬学的に許容される塩であり；及びＰＩ３Ｋ阻害剤は、ＣＡＬ−１２０／ＧＳ−９８２０、ＧＤＣ−０９４１、ＩＰＩ−１４５及びＧＳ−１１０１からなる群から選択されるか、またはそれらの薬学的に許容される塩である。

組み合わせ及び／または方法の具体的実施形態において、ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤は：
またはその薬学的に許容される塩であり；及びＰＩ３Ｋ阻害剤は、ＣＡＬ−１２０／ＧＳ−９８２０、ＧＤＣ−０９４１、ＩＰＩ−１４５及びＧＳ−１１０１からなる群から選択されるか、またはそれらの薬学的に許容される塩である。

本発明は、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤またはヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤を含む組み合わせを投与することによって癌細胞の細胞生存度を低下させる方法を含む。

また、本発明は、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤を含む組み合わせを投与することによって、癌細胞のアポトーシスを相乗的に増加させるための方法を含む。

さらに、本発明は、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤を含む組み合わせを投与することによって癌細胞の細胞増殖を減少させるための方法を含む。

さらに、本発明は、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤を含む組み合わせを投与することによって腫瘍成長を減少させるための方法を含む。

さらに、本発明は、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤を含む組み合わせを投与することによってＭｙｃ発現を抑制するための方法を含む。

その他の目的、特徴及び利点は、以下の詳細な説明から明らかになるだろう。詳細な説明及び特異的な実施例は、例証のためにのみ与えられ、本発明の精神及び範囲の中での種々の変更及び修飾は、この詳細な説明から当業者にとって明らかとなるだろう。さらに、実施例は、本発明の原理を証明する。

ＧＤＣ−０９４１（ピクチリシブ）及び化合物Ａ、化合物Ｂまたは化合物Ｃのいずれかでのヒトリンパ腫株化細胞の処理後のＦ_Ａ／ＣＩ相乗効果プロットを示す。マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）については、Ｍｉｎｏ、Ｊｅｋｏ１及びＧｒａｎｔａ−５１９細胞を利用し、一方では、Ｕ２９３２及びＳＵＤＨＬ１６細胞は、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）の活性化Ｂ細胞（ＡＢＣ）及び胚中心（ＧＣ）サブタイプを表した。組み合わせ指数（ＣＩ）値＜１を有するデータポイントは、細胞生存度の相乗的低下を生じる治療の組み合わせを示す。 ＣＡＬ−１０１（ＧＳ−１１０１、イデラリシブ、Ｚｙｄｅｌｉｇ）及び化合物Ａ、化合物Ｂまたは化合物Ｃのいずれかでのヒトリンパ腫株化細胞の処理後のＦ_Ａ／ＣＩ相乗効果プロットを示す。マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）については、Ｍｉｎｏ、Ｊｅｋｏ１及びＧｒａｎｔａ−５１９細胞を利用し、一方では、Ｕ２９３２及びＳＵＤＨＬ１６細胞は、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）の活性化Ｂ細胞（ＡＢＣ）及び胚中心（ＧＣ）サブタイプを表した。組み合わせ指数（ＣＩ）値＜１を有するデータポイントは、細胞生存度の相乗的低下を生じる治療の組み合わせを示す。 細胞周期阻害に対するＤＭＳＯ、化合物ＡもしくはＢ（２μＭ）、ＧＤＣ−０９４１（０．０７５−０．５μＭ）またはＧＤＣ−０９４１（０．０７５〜０．５μＭ）と化合物ＡまたはＢ（２μＭ）の組み合わせでのマントル細胞リンパ腫細胞（Ｊｅｋｏ１−図３Ａ、Ｍｉｎｏ−図３Ｂ及びＧｒａｎｔａ−５１９−図３Ｃ）の処理効果を示するグラフである。あるいは、細胞を細胞周期阻害に対する効果を測定する前に、ＤＭＳＯ、化合物ＡもしくはＢ（２μＭ）、ＣＡＬ−１０１（１〜２μＭ）またはＣＡＬ−１０１（１〜２μＭ）と化合物ＡもしくはＢ（２μＭ）の組み合わせで処理した。いずれのＰＩ３Ｋ阻害剤でも組み合わせ処理は、増殖減少と一致した細胞周期進行のさらなる減少を生じた。 アポトーシス誘導に対するＤＭＳＯ、化合物ＡもしくはＢ（２〜３μＭ）、ＧＤＣ−０９４１（０．０７５〜２μＭ）またはＧＤＣ−０９４１（０．０７５〜２μＭ）と化合物ＡもしくはＢ（２〜３μＭ）の組み合わせでのＪｅｋｏ１（図４Ａ及び４Ｂ）及びＭｉｎｏ（図４Ｃ）マントル細胞リンパ腫細胞の処理効果を示すグラフである。あるいは、細胞を、アポトーシス誘導を測定する前に、ＤＭＳＯ、化合物ＡもしくはＢ（２μＭ）、ＣＡＬ−１０１（２μＭ）またはＣＡＬ−１０１（２μＭ）と化合物ＡもしくはＢ（２μＭ）の組み合わせで処理した。いずれのＰＩ３Ｋ阻害剤との組み合わせ処理は、細胞アポトーシスの相乗的増加を生じた。 体重に対する媒体、ＧＤＣ−０９４１単独（１００ｍｇ／ｋｇ ＰＯ ＱＤ）またはＧＤＣ−０９４１（１００ｍｇ／ｋｇ ＰＯ ＱＤ）プラス化合物Ａ（３０ｍｇ／ｋｇ ＩＰ ＱＤ）でのＣＢ−１７ ＳＣＩＤマウスの処理の効果を示すグラフである。全ての処理は、毒性の明白な証拠がなく耐容性がよく、及び低レベル体重減少は処理期間の終わりまでに回復した。 化合物Ａ（１００ｍｇ／ｋｇ ＰＯ ＢＩＤ）及びＧＤＣ−０９４１（７５ｍｇ／ｋｇ ＰＯ ＱＤ）の組み合わせでのＧｒａｎｔａ−５１９腫瘍異種移植片をもつマウスの処理に応じて、いずれかの単剤での処理に対して有意に減少した腫瘍成長を示すグラフである。 化合物Ａ及びＧＤＣ−０９４１またはＣＡＬ−１０１いずれかの組み合わせが、単剤のいずれかに対して、Ｍｙｃ発現、癌における重要な転写制御因子のさらなる抑制をまねくことを示すＭｉｎｏ（図７Ａ）及びＧｒａｎｔａ−５１９（図７Ｂ）細胞からの免疫ブロットの画像を示す。

詳細な説明
本出願は、一般に、ＨＤＡＣ阻害剤、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤及びＰＩ３Ｋ阻害剤を含む組み合わせ並びに非ホジキンリンパ腫治療のための方法に関する。

定義
本発明を記述するために使用される種々の用語の定義を以下に収載してある。個々にまたはより大きなグループの一部として、特定の例において制限されない限り、これらの定義は、この明細書及び特許請求の範囲の全体にわたって使用されるとき、該用語に適用される。

用語「約」は、一般に、値の１０％、５％または１％に過ぎない変化の可能性を示す。たとえば、「約２５ｍｇ／ｋｇ」は、その最も広い意味において、２２．５〜２７．５ｍｇ／ｋｇ、すなわち、２５±２．５ｍｇ／ｋｇの値を一般に示すだろう。

用語「アルキル」は、飽和した、直鎖または分枝鎖炭化水素部分をいい、一定の実施形態において、それぞれ１〜６、または１〜８個の炭素原子を含む。Ｃ_１−６−アルキル部分の例は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ネオペンチル、ｎ−ヘキシル部分を含むが、限定されない；Ｃ_１−８−アルキル部分の例は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ネオペンチル、ｎ−ヘキシル、ヘプチル及びオクチル部分を含むが、限定されない。

アルキル置換基における炭素原子数は、接頭辞「Ｃ_ｘ−ｙ」によって示されることができ、ｘは置換基における炭素原子の最小数、ｙは最大数である。同様に、Ｃ_ｘ鎖は、ｘ個の炭素原子を含むアルキル鎖を意味する。

用語「アルコキシ」は、−Ｏ−アルキル部分をいう。

用語「シクロアルキル」または「シクロアルキレン」は、単環式または多環式の飽和または部分的に不飽和の炭素環式化合物から由来される一価の基を意味する。Ｃ_３−８−シクロアルキルの例は、限定されないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル及びシクロオクチルを含む；Ｃ_３−１２−シクロアルキルの例は、限定されないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、ビシクロ［２．２．１］ヘプチル及びビシクロ［２．２．２］オクチルを含む。また、１つの水素原子の除去によって少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有する、単環式または多環式の炭素環式化合物から由来される一価の基が想定される。このような基の例は、シクロプロペニル、シクロブテニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロヘプテニル、シクロオクテニル及び同様のものを含むが、限定されない。

用語「アリール」は、融合された、または融合されない１つまたは複数の芳香族環を有する単環式または多環式の炭素環式環系をいい、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、イデニル（ｉｄｅｎｙｌ）及び同様のものを含むが、限定されない。いくつかの実施形態において、アリール基は、６炭素原子を有する。いくつかの実施形態において、アリール基は、６〜１０炭素原子を有する。いくつかの実施形態において、アリール基は、６〜１６炭素原子を有する。

用語「ヘテロアリール」は、環形成原子の１つまたは複数は、酸素、硫黄または窒素などのヘテロ原子である少なくとも１つの芳香族環を有する、単環式または多環式（たとえば二環式または三環系またはそれ以上）の融合される、または融合されない部分または環系をいう。いくつかの実施形態において、ヘテロアリール基は、約１〜６炭素原子を、及びさらなる実施形態において、１〜１５炭素原子を有する。いくつかの実施形態において、ヘテロアリール基は、１つの環原子が酸素、硫黄及び窒素から選択される、５〜１６環原子を含み；０、１、２または３環原子は、酸素、硫黄及び窒素から独立して選択されるさらなるヘテロ原子であり；及び残りの環原子は、炭素である。ヘテロアリールは、ピリジニル、ピラジニル、ピリミジニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、チアジアゾリル、オキサジアゾリル、チオフェニル、フラニル、インドリル、キノリニル、イソキノリニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾオキサゾリル、キノキサリニル、アクリジニル及び同様のものを含むが、これに限定されない。

用語「ハロ」は、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素などのハロゲンをいう。

用語「組み合わせ」は、本開示において記述される治療上の状態または障害を治療するための２個以上の治療上の薬剤をいう。治療上の薬剤のこのような組み合わせは、単一の丸剤、カプセルまたは静脈注射溶液の形態であってもよい。しかし、用語「組み合わせ」はまた、２個以上の治療上の薬剤が別々の丸剤、カプセルまたは静脈注射溶液である状況を包含する。同様に、用語「組み合わせ療法」は、本開示において記述される治療上の状態または障害を治療するための２個以上の治療上の薬剤の投与をいう。このような投与は、活性成分の固定比率を有する単一のカプセル、またはそれぞれの活性成分のための複数の、または別々の容器（たとえば、カプセル）などにおける、実質的に同時の様式でのこれらの治療上の薬剤の同時投与を包含する。加えて、このような投与はまた、ほぼ同時に、または異なる時間のいずれかにて、経時的な様式における治療薬のそれぞれのタイプの使用を包含する。いずれかの場合において、治療処方計画は、本明細書において記述される状態または障害を治療することにおいて薬剤の組み合わせの有益な効果を提供するだろう。

用語「ＨＤＡＣ」は、ヒストンデアセチラーゼをいい、コアヒストンにおけるリジン残基からアセチル基を除去する酵素であり、凝集され、転写的に静止したクロマチンの形成をまねく。現在、１８個の公知のヒストンデアセチラーゼがあり、それらは４つのグループに分類される。クラスＩ ＨＤＡＣｓは、ＨＤＡＣ１、ＨＤＡＣ２、ＨＤＡＣ３及びＨＤＡＣ８を含み、酵母ＲＰＤ３遺伝子に関連がある。クラスＩＩ ＨＤＡＣｓは、ＨＤＡＣ４、ＨＤＡＣ５、ＨＤＡＣ６、ＨＤＡＣ７、ＨＤＡＣ９及びＨＤＡＣ１０を含み、酵母Ｈｄａ１遺伝子に関連がある。クラスＩＩＩ ＨＤＡＣｓは、サーチュインとしても公知であり、Ｓｉｒ２遺伝子に関連があり、ＳＩＲＴ１−７を含む。クラスＩＶ ＨＤＡＣｓは、ＨＤＡＣ１１のみを含み、クラスＩ及びＩＩ ＨＤＡＣｓの両方の特徴を有する。特に明記しない限り、用語「ＨＤＡＣ」は、１８個の公知のヒストンデアセチラーゼの任意の１つまたは複数をいう。

用語「ＨＤＡＣ６特異的」は、化合物が、ＨＤＡＣ１またはＨＤＡＣ２などのＨＤＡＣ酵素の任意のその他のタイプより、５Ｘ、１０Ｘ、１５Ｘ、２０Ｘまたはそれ以上大きいなど、実質的に大きい程度でＨＤＡＣ６に結合することを意味する。すなわち、化合物は、ＨＤＡＣ酵素の任意のその他のタイプを超えて、ＨＤＡＣ６に対し選択的である。たとえば、１０ｎＭのＩＣ_５０でＨＤＡＣ６に結合し、５０ｎＭのＩＣ_５０でＨＤＡＣ１に結合する化合物は、ＨＤＡＣ６特異的である。一方、５０ｎＭのＩＣ_５０でＨＤＡＣ６に結合し、６０ｎＭのＩＣ_５０でＨＤＡＣ１に結合する化合物は、ＨＤＡＣ６特異的ではない。

用語「阻害剤」は、用語アンタゴニストと同義である。

ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤
その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫治療のための化合物及び薬学的組み合わせは、本明細書において提供される。その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫を治療するための方法もまた、本明細書において提供される。

本発明の化合物、組み合わせ及び方法は、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤を含む。ＨＤＡＣ阻害剤は、任意のＨＤＡＣ阻害剤でもよい。したがって、ＨＤＡＣ阻害剤は、特定のタイプのヒストンデアセチラーゼ酵素に選択的でもよく、または選択的でなくてもよい。好ましくは、ＨＤＡＣ阻害剤は、選択的なＨＤＡＣ阻害剤である。より好ましくは、ＨＤＡＣ阻害剤は、ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤である。

いくつかの実施形態において、ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤は、式Ｉの化合物：
またはその薬学的に許容される塩であって、式中、環Ｂは、アリールまたはヘテロアリールであり；Ｒ_１はアリールまたはヘテロアリールであり、そのそれぞれはＯＨ、ハロまたはＣ_１−６−アルキルによって任意に置換されてもよく；及びＲは、ＨまたはＣ_１−６−アルキルである。

式Ｉの代表的化合物は、以下を含むが、限定されない：
または、その薬学的に許容される塩。

式Ｉに従った選択的なＨＤＡＣ６阻害剤の調製及び特性は、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０２１９８２号において提供され、その全内容が参照により本明細書に援用される。

その他の実施形態において、ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤は、式ＩＩの化合物：
または、その薬学的に許容される塩であって、式中、Ｒ_ｘ及びＲ_ｙは、各々が付着される炭素とともに、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルまたはシクロオクチルを形成する；それぞれのＲ_Ａは、独立してＣ_１−６−アルキル、Ｃ_１−６−アルコキシ、ハロ、ＯＨ、−ＮＯ_２、−ＣＮまたは−ＮＨ_２であり；及びｍは、０、１または２である。

式ＩＩの代表化合物は、以下を含むが、限定されない：
または、その薬学的に許容される塩。

式ＩＩに従った選択的なＨＤＡＣ６阻害剤の調製及び特性は、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０６０７９１において提供され、その全内容は参照により本明細書に援用される。

いくつかの実施形態において、本明細書において記述される化合物は、非溶媒和である。その他の実施形態において、化合物の１つまたは複数は、溶媒和した形態である。当該技術分野で公知のように、溶媒和化合物は、水、エタノール及び同様のものなどの薬学的に許容される溶媒のいずれかであることができる。

ホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤
本発明の組み合わせ及び方法のいくつかの実施形態は、ＰＩ３Ｋ阻害剤を含む。ＰＩ３Ｋ阻害剤は、任意のＰＩ３Ｋ阻害剤でもよい。

ホスファチジルイノシトール３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤は、ＰＩ３Ｋイソ型のいずれかの触媒活性及びその後のＰＩ３Ｋ媒介シグナリングを減少させることができる任意の化合物または複数化合物であることができる。特に、ＰＩ３Ｋ阻害剤は、生体高分子でもよく、または小さい有機または無機化合物でもよい。好ましくは、ＰＩ３Ｋ阻害剤は、小さい有機化合物及び好ましくは合成化合物である。

「ＰＩ３Ｋ媒介シグナリング」は、直接または間接的のいずれかで、ＰＩ３キナーゼの活性に依存的である生物学的活性のいずれかであることが意図される。ＰＩ３Ｋ媒介シグナリングの例は、ＰＩ３Ｋ発現細胞の増殖及び生存並びにＰＩ３Ｋ発現細胞内の１つまたは複数のＰＩ３Ｋシグナリング経路の刺激につながるシグナルである。

ＰＩ３Ｋ「シグナリング経路」または「シグナル伝達経路」は、ＰＩ３Ｋの活性から生じる、及びシグナル経路を介して伝達されるときに、シグナリングカスケードにおける１つまたは複数の下流の分子の活性化につながるシグナルを生成する少なくとも１つの生化学反応または生化学反応の群を意味する。シグナル伝達経路は、細胞の原形質膜全体の細胞表面からの、及び１つまたは複数の一連のシグナル伝達分子を介して、細胞の細胞質を介して、及び場合によっては、細胞の核の中へのシグナルの伝達につながる多数のシグナル伝達分子を含む。本発明にとって特に興味がもたれのは、ＮＦ−κＢシグナリング経路を経るＮＦ−κＢの活性化を最終的に調節する（増強する、または阻害するのいずれか）ＰＩ３Ｋシグナル伝達経路である（Ｈｕｓｓａｉｎ ｅｔ ａｌ． ＰＬｏＳ Ｏｎｅ． ２０１２；７（６）：ｅ３９９４５を参照されたい）。

一定の実施形態において、ＰＩ３Ｋ阻害剤は、アンタゴニスト抗ＰＩ３Ｋ抗体であることができる。本発明の一つの実施形態において、アンタゴニスト抗ＰＩ３Ｋ抗体は、１つの細胞応答における有意なアゴニスト活性がない。本発明のもう一つの実施形態において、アンタゴニスト抗ＰＩ３Ｋ抗体は、２つ以上の細胞応答（たとえば、増殖及び分化または増殖、分化及びＢ細胞のために、抗体産生）のアッセイにおいて有意なアゴニスト活性がない。

ＰＩ３Ｋ阻害剤の例は、ＣＡＬ−１２０／ＧＳ−９８２０、ワートマニン、デメトキシビリジン、ＬＹ２９４００２、ペリホシン、ＣＡＬ−１０１、ＰＸ−８６６、ＩＰＩ−１４５、ＢＡＹ ８０−６９４６、ＢＥＺ−２３５、ＲＰ−６５０３、ＴＧＲ−１２０２、ＳＦ−１１２６、ＩＮＫ−１１１７、ＧＤＣ−０９４１、ＢＫＭ−１２０、ＸＬ−１４７、ＸＬ−７６５、Ｐａｌｏｍｉｄ ５２９、ＧＳＫ−１０５９６１５、ＺＳＴＫ−４７４、ＰＷＴ−３３５９７、ＩＣ−８７１１４、ＴＧ１００−１１５、ＣＡＬ−２６３、ＲＰ−６５３０、ＰＩ−１０３、ＧＮＥ−４７７、ＣＵＤＣ−９０７及びＡＥＺＳ−１３６を含むが、限定されない。好ましくは、ＰＩ３Ｋ阻害剤は、ＩＰＩ−１４５（Ｄｏｎｇ ｅｔ ａｌ．， “ＩＰＩ−１４５ ａｎｔａｇｏｎｉｚｅｓ ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ ａｎｄ ｅｘｔｒｉｎｓｉｃ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｓｉｇｎａｌｓ ｉｎ ｃｈｒｏｎｉｃ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｃｅｌｌｓ”， Ｂｌｏｏｄ ２０１４； ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｄｉｓｃｏｖ．， ｖｏｌ． ４（２）， ｐ． １３６ ２０１４を参照されたい）、ＧＤＣ−０９４１及びＣＡＬ−１０１からなる群から選択されるか、またはそれらの薬学的に許容される塩である。

ＧＤＣ−０９４１の化学構造は：
である。

Ｙａｏ ｅｔ ａｌ．， “Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｈｅｒ２／Ｈｅｒ３−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ｗｉｔｈ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ ｏｆ ＧＤＣ−０９４１ ＰＩ３Ｋ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ， ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ， ａｎｄ ｐｅｒｔｕｚｕｍａｂ”， Ｃｌｉｎ． Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．， ｖｏｌ． １５（１２）， ｐｐ． ４１４７−５６ （２００９）； Ｊｕｎｔｔｉｌａ ｅｔ ａｌ．， “Ｌｉｇａｎｄ−ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ Ｈｅｒ２／Ｈｅｒ３／ＰＩ３Ｋ ｃｏｍｐｌｅｘ ｉｓ ｄｉｓｒｕｐｔｅｄ ｂｙ ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ ａｎｄ ｉｓ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ＰＩ３Ｋ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ＧＤＣ−０９４１”， Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ．， ｖｏｌ． １５（５）， ｐｐ． ４２９−４４０ （２００９）；及びＦｏｌｋｅｓ ｅｔ ａｌ．， “Ｔｈｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ２−（１Ｈ−ｉｎｄａｚｏｌ−４−ｙｌ）−６−（４−ｍｅｔｈａｎｅｓｕｌｆｏｎｙｌ−ｐｉｐｅｒａｚｉｎ−１−ｙｌｍｅｈｔｙｌ）−４−ｍｏｒｐｈｏｌｉｎ−４−ｙｌ−ｔｈｉｅｎｏｌ［３，２−ｄ］ｐｙｒｉｍｉｄｉｎｅ （ＧＤＣ−０９４１） ａｓ ａ ｐｏｔｅｎｔ， ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ， ｏｒａｌｌｙ ｂｉｏａｖａｉｌａｂｌｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｏｆ ｃｌａｓｓ Ｉ ＰＩ３ ｋｉｎａｓｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ”， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．， ｖｏｌ． ５１（１８）， ｐｐ． ５５２２−３２ （２００８）を参照されたい。

ＧＳ−１１０１／ＣＡＬ−１０１の化学構造は：
である。

Ｕ．Ｓ． ｐａｔｅｎｔ ｎｕｍｂｅｒｓ： ６８００６２０； ６９４９５３５； ８１３８１９５； ８４９２３８９； ８６３７５３３； ＲＥ４４５９９；及びＲＥ４４６３８を参照されたい。

その他のＰＩ３キナーゼ阻害剤の例は、Ｕ．Ｓ． Ｐａｔｅｎｔ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｏｓ． ２０１３／００７９３０３、２０１０／０２４９１２６及びＵＳ Ｐａｔｅｎｔ Ｎｏ．７， ４４６，１２４において見いだすことができる。現在臨床試験におけるＰＩ３Ｋ阻害剤は、Ｓｈｕｔｔｌｅｗｏｒｔｈ ｅｔ ａｌ． Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ （２０１１） １８， ２６８６−２７１４， Ｋｕｒｔｚ ｅｔ ａｌ． Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． ２０１２；３２（７）：２４６３−７０及びＦｏｓｔｅｒ ｅｔ ａｌ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｒｅｖ． ２０１２；６４（４）：１０２７−５４においてさらに概説される。

いくつかの実施形態において、本明細書において記述される化合物は、非溶媒和である。その他の実施形態において、化合物の１つまたは複数は、溶媒和した形態である。周知のように、溶媒和化合物は、水、エタノール及び同様のものなどの薬学的に許容される溶媒のいずれかであることができる。

組成物、組み合わせ並びに医薬組成物及び組み合わせ
その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫治療のための組成物及び組み合わせは、本明細書において提供される。いくつかの実施形態において、その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫治療のための、ＨＤＡＣ阻害剤またはヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤を含む組み合わせが提供される。

組成物及び組み合わせのいくつかの実施形態において、ＨＤＡＣ阻害剤は、ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤である。具体的実施形態において、ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤は、式Ｉの化合物：
またはその薬学的に許容される塩である。

好ましい実施形態において、式Ｉの化合物は、下記式：
またはその薬学的に許容される塩である。

さらに他の実施形態において、式Ｉの化合物は、下記式：
またはその薬学的に許容される塩である。

その他の具体的実施形態において、ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤は、式ＩＩの化合物：
またはその薬学的に許容される塩である。

好ましい実施形態において、式ＩＩの化合物は、下記式：
またはその薬学的に許容される塩である。

その他の好ましい実施形態において、式ＩＩの化合物は、下記式：
またはその薬学的に許容される塩である。

組み合わせのいくつかの実施形態において、ホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤は、ＣＡＬ−１２０／ＧＳ−９８２０、ＧＤＣ−０９４１、ＩＰＩ−１４５及びＧＳ−１１０１からなる群から選択されるか、またはそれらの薬学的に許容される塩である。

１つの実施形態において、ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤を含む組み合わせ療法が本明細書において提供され、ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤は、式Ｉの化合物：
またはその薬学的に許容される塩であって、式中、環Ｂは、アリールまたはヘテロアリールであり；Ｒ_１はアリールまたはヘテロアリールであり、そのそれぞれはＯＨ、ハロまたはＣ_１−６−アルキルによって任意に置換されてもよく；及びＲは、ＨまたはＣ_１−６−アルキルであり；及びＰＩ３Ｋ阻害剤は、任意のＰＩ３Ｋ阻害剤である。

組み合わせの具体的実施形態において、ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤は、下記式：
またはそれらの薬学的に許容される塩であり；及び
ＰＩ３Ｋ阻害剤は、ＣＡＬ−１２０／ＧＳ−９８２０、ＧＤＣ−０９４１、ＩＰＩ−１４５及びＧＳ−１１０１の群から選択されるか、またはその薬学的に許容される塩である。

その他の実施形態において、ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤を含む組み合わせ療法が本明細書において提供され、ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤は、式ＩＩの化合物：
またはその薬学的に許容される塩であって、式中、Ｒ_ｘ及びＲ_ｙは、各々が付着される炭素とともに、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルまたはシクロオクチルを形成する；それぞれのＲ_Ａは、独立してＣ_１−６−アルキル、Ｃ_１−６−アルコキシ、ハロ、ＯＨ、−ＮＯ_２、−ＣＮまたは−ＮＨ_２であり；及びｍは、０、１または２であり；及びＰＩ３Ｋ阻害剤は、任意のＰＩ３Ｋ阻害剤である。

組み合わせの具体的実施形態において、ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤は、下記式：
または、それらの薬学的に許容される塩であり；及び
ＰＩ３Ｋ阻害剤は、ＣＡＬ−１２０／ＧＳ−９８２０、ＧＤＣ−０９４１、ＩＰＩ−１４５及びＧＳ−１１０１の群から選択されるか、またはその薬学的に許容される塩である。

式Ｉ及びＩＩの化合物は、これらの中性形態において示されるが、いくつかの実施形態において、これらの化合物は薬学的に許容される塩形態において使用される。「薬学的に許容される塩」は、親化合物が既存の酸または塩基部分をその塩形態に変換することにより修飾されている、開示された化合物の誘導体をいう。薬学的に許容される塩の例は、アミンなどの塩基性残基におけるミネラルまたは有機酸の塩；カルボン酸などの酸性残基のアルカリまたは有機塩；及び同様のものを含むが、限定されない。本発明の薬学的に許容される塩は、たとえば、無毒性の無機または有機酸から形成される親化合物の従来の無毒性の塩を含む。本発明の薬学的に許容される塩は、従来の化学的方法によって、塩基性または酸性の部分を含む親化合物から合成されることができる。通常、このような塩は、これらの化合物の遊離酸または塩基形態を、水において、または有機溶媒において、または２つの混合物において、適切な塩基または酸の理論量と反応させることによって調製することができる；一般に、エーテル、エチルアセテート、エタノール、イソプロパノールまたはアセトニトリルのような非水溶媒が好ましい。適切な塩のリストは、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、１７．ｓｕｐ．ｔｈ ｅｄ．、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ， Ｅａｓｔｏｎ， Ｐａ．、１９８５、ｐ．１４１８及びＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ、６６、２（１９７７）において見いだされ、これらのそれぞれはその全体において参照により本明細書に援用される。

投与／用量
いくつかの実施形態において、ＨＤＡＣ阻害剤（式ＩまたはＩＩの化合物）は、ホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤と同時に投与される。同時の投与は、両方の化合物が正確に同時に患者に入ることを典型的には意味する。しかし、同時の投与はまた、ＨＤＡＣ阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤が異なる時間に患者に入る可能性を含むが、時間における相違は、十分に小さく、第２の投与化合物のエントリーの前に、第１の投与化合物が患者に効果をもたらす時間は与えられない。このようなディレイドタイムは、典型的には１分より少なく、より典型的には３０秒より少ない時間に相当する。１つの実施例において、化合物が溶液にあり、化合物の組み合わせを含む溶液を投与することによって同時の投与を達成することができる。もう一つの実施例において、１つはＨＤＡＣ阻害剤を含み、もう一方はホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤を含む、別々の溶液の同時の投与を使用することができる。化合物が固体形態である１つの実施例において、化合物の組み合わせを含む組成物を投与することによって、同時の投与を達成することができる。あるいは、同時の投与は、２つの別々の組成物を投与することによって達成することができ、１つがＨＤＡＣ阻害剤を含み、もう一方がホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤を含む。

その他の実施形態において、ＨＤＡＣ阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤は、同時に投与されない。いくつかの実施形態において、ＨＤＡＣ阻害剤は、ホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤の前に投与される。その他の実施形態において、ホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤は、ＨＤＡＣ阻害剤の前に投与される。同時でない投与における時間差は、１分、５分、１０分、１５分、３０分、４５分、６０分、２時間、３時間、６時間、９時間、１２時間、その他を上回ることができる。その他の実施形態において、第２の投与化合物が投与される前に、第１の投与化合物が患者に効果をもたらす時間が与えられる。一般に、時間差は、第１の投与化合物が患者においてその効果を完了する時間を越えて、または第１の投与化合物が患者において完全にもしくは実質的に除去されるかまたは非活性化される時間を越えて、拡大しない。

いくつかの実施形態において、ＨＤＡＣ阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤の１つまたは両方は、治療上有効な量または投薬量で投与される。「治療上有効な量」は、それ自体が患者に投与されるときに、非ホジキンリンパ腫を効率的に治療する、ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤（式ＩまたはＩＩの化合物）またはホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤の量である。所与の例において、特定の被験体のために「治療上有効な量」であると判明する量は、このような投薬量が熟練した開業医による「治療上有効な量」とみなされる場合であっても、考慮中に疾患または状態のために同じように治療される１００％の被験体に有効でなくてもよい。治療上有効な量に相当する化合物の量は、癌のタイプ、癌のステージ、治療される患者の年齢及びその他の事実に強く依存する。一般に、これらの化合物の治療上有効な量は、当該技術分野において公知であり、上で引用した支持参照文献において提供される。

その他の実施形態において、ＨＤＡＣ阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤の１つまたは両方は、治療量以下の有効な量または投薬量で投与される。治療量以下の有効な量は、それ自体が患者に投与されるときに、長い間意図された標的の生物学的活性を完全に阻害しない、ＨＤＡＣ阻害剤（たとえば、式ＩまたはＩＩの化合物）またはホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤の量である。

治療上の、または治療量以下の量で投与されようと、ＨＤＡＣ阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤の組み合わせは、非ホジキンリンパ腫を治療することにおいて有効であるべきである。たとえば、式ＩまたはＩＩの化合物（ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤）と組み合わせられるときに、組み合わせが非ホジキンリンパ腫治療において有効である場合、ホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤の治療量以下の量は有効量であることができる。

いくつかの実施形態において、化合物の組み合わせは、非ホジキンリンパ腫の治療において相乗効果（すなわち、相加効果より大きい）を示す。用語「相乗効果」は、たとえば、投与されるそれぞれの薬物のそれら自体による効果の単純な加算より大きい、癌またはその症候の症候性の進行を遅らせる効果を生み出す２つの薬剤、たとえばＨＤＡＣ阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤などの作用をいう。相乗効果は、たとえばＳｉｇｍｏｉｄ−Ｅｍａｘ方程式（Ｈｏｌｆｏｒｄ， Ｎ． Ｈ． Ｇ． ａｎｄ Ｓｃｈｅｉｎｅｒ， Ｌ． Ｂ．， Ｃｌｉｎ． Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ． ６： ４２９−４５３（１９８１））、Ｌｏｅｗｅ加算性の方程式（Ｌｏｅｗｅ， Ｓ． ａｎｄ Ｍｕｉｓｃｈｎｅｋ， Ｈ．， Ａｒｃｈ． Ｅｘｐ． Ｐａｔｈｏｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． １１４： ３１３−３２６（１９２６））及び半有効方程式 （Ｃｈｏｕ， Ｔ． Ｃ． ａｎｄ Ｔａｌａｌａｙ， Ｐ．， Ａｄｖ． Ｅｎｚｙｍｅ Ｒｅｇｕｌ． ２２： ２７−５５（１９８４））などの適切な方法を使用して算出することができる。上述したそれぞれの方程式は、実験データに適用されて、対応するグラフを生成し、薬物の組み合わせの効果を評価することを助けることができる。上述した方程式に関連する対応するグラフは、それぞれ、濃度効果曲線、イソボログラム曲線及び組み合わせインデックス曲線である。

異なる実施形態において、使用される組み合わせ及び有効量に応じて、化合物の組み合わせは、癌増殖を阻害すること、癌停滞を達成すること、または実質的にもしくは完全に癌退行を達成することさえできる。

ＨＤＡＣ阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤の量が、有効な非ホジキンリンパ腫治療をもたらすべきであると共に、その量は、組み合わさられるときに、患者に対し、好ましくは過剰に毒性でない（すなわち、その量は、好ましくは医学的な指針によって確立される毒性限度の範囲内である）。いくつかの実施形態において、過剰な毒性を防止すること及び／またはより効果的な非ホジキンリンパ腫治療を提供することのいずれかのために、総投与量上の限度が提供される。典型的には、本明細書において考慮される量は、１日当たりであり；しかし、半日及び２日または３日のサイクルもまた、本明細書において考慮される。

別の投薬量処方計画は、非ホジキンリンパ腫を治療するために使用されてもよい。いくつかの実施形態において、上述される例示的な投薬量のいずれかなどの１日投与量は、３、４、５、６、７、８、９または１０日間、１日１回、２回、３回または４回投与される。非ホジキンリンパ腫のステージ及び重症度に応じて、より短い治療時間（たとえば、５日まで）は高投薬量で使用されてもよく、またはより長い治療時間（たとえば１０日以上、または数週または１ヶ月またはそれ以上）は低投薬量で使用されてもよい。いくつかの実施形態において、１日１回の、または１日２回の投薬量は、１日おきに投与される。

いくつかの実施形態において、それぞれの投薬量は、単一の投薬量として送達されるＨＤＡＣ阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤の両方を含み、一方その他の実施形態において、それぞれの投薬量は、分離した投薬量として送達されるＨＤＡＣ阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤を含む。

式ＩもしくはＩＩの化合物またはこれらの薬学的に許容される塩もしくは溶媒和形態は、純粋な形態において、または適切な医薬組成物において、当該技術分野において公知の投与または薬剤の認められた様式のいずれかを介して投与することができる。化合物は、たとえば、経口的、経鼻的、非経口的（静脈内、筋肉内、または皮下）、局所的、経皮的、膣内、膀胱内、大槽内または直腸に投与されることができる。剤形は、たとえば固体、半固体、凍結乾燥粉末または液体の剤形、たとえば錠剤、丸剤、軟弾力性または硬ゼラチンカプセル、粉末、溶液、懸濁液、坐薬、エアロゾルまたは同様のものなど、好ましくは正確な投薬量の単純な投与のために適切な単位剤形であることができる。特定の投与経路は、経口であり、特に便利な１日投与量処方計画を治療される疾患の重症度の程度に従って調整することができるものである。

上で議論したように、薬学的組み合わせにおけるＨＤＡＣ阻害剤及びＰＩ３Ｋ阻害剤は、単一の単位投与または分離した剤形で投与することができる。したがって、フレーズ「薬学的組み合わせ」は、単一の剤形または別々の剤形のいずれかにおける２つの薬物の組み合わせを含み、すなわち、本出願の全体にわたって記述される薬学的に許容される担体及び賦形剤は、単一の単位投与におけるＨＤＡＣ阻害剤及びＰＩ３Ｋ阻害剤と組み合わせることができ、並びにこれらの化合物が別々に投与されるとき、個々にＨＤＡＣ阻害剤及びＰＩ３Ｋ阻害剤と組み合わせることができる。

補助剤及び補助薬剤は、たとえば保存料、湿潤剤、懸濁剤、甘味料、香味料、芳香剤、乳化剤及び予製薬剤を含んでもよい。微生物の作用の予防は、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸及び同様のものなどの種々の抗菌薬及び抗真菌薬剤によって一般に提供される。糖、塩化ナトリウム及び同様のものなどの等張性薬剤もまた含まれてもよい。注射可能な剤型の長期にわたる吸収は、吸収を遅延させる薬剤、たとえばモノステアリン酸アルミニウム及びゼラチンの使用によってもたらすことができる。補助薬剤はまた、湿潤剤、乳化剤、ｐＨ緩衝薬及び抗酸化剤、たとえば、クエン酸、ソルビタンモノラウレート、トリエタノールアミンオレアート、ブチル化水酸化トルエン及び同様のものなどを含むことができる。

固体の剤形は、腸溶コーティング及び当該技術分野において公知のその他のものなどのコーティング及びシェルで調整することができる。これらは、鎮静薬を含むことができ、及び遅発性様式で腸管の一定の部分において活性化合物または化合物を放出するような組成物であることができる。使用することができる包埋組成物の例は、重合性物質及びろうである。活性化合物はまた、適切な場合、前述した賦形剤の１つまたは複数とともに、マイクロカプセルに入れられた形態であることができる。

経口投与のための液体の剤形は、薬学的に許容されるエマルジョン、溶液、懸濁液、シロップ剤及びエリキシルを含む。このような剤形は、たとえば、以下を溶解すること、分散することその他によって調製される：本明細書において記述されるＨＤＡＣ阻害剤もしくはホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤、またはそれらの薬学的に許容される塩、及び担体、たとえば水、生理食塩水、水性デキストロース、グリセロール、エタノール及び同様のものにおける任意の薬学的アジュバント；可溶化剤及び乳化剤、たとえば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、エチルカルボナート、エチルアセテート、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド；オイル、特に、綿実油、落花生油、トウモロコシ胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油及びゴマ油、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール及びソルビタンの脂肪酸エステル；または、これらの物質の混合物及び同様のもの、これらにより溶液または懸濁液を形成する。

一般に、投与の意図された様式に応じて、薬学的に許容される組成物は、本明細書において記述される化合物またはその薬学的に許容される塩の重量による約１％〜約９９％、及び薬学的に許容される賦形剤の重量による９９％〜１％を含むだろう。一例において、組成物は、本明細書において記述される化合物またはその薬学的に許容される塩が重量による約５％〜約７５％であり、残りは適切な薬学的賦形剤である。

このような剤形を調製する実際の方法は、当業者に公知または明らかだろう。参照は、たとえば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、１８ｔｈ Ｅｄ．，（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ， Ｅａｓｔｏｎ， Ｐａ．， １９９０）になされる。

本発明の方法
本発明は、本発明のＨＤＡＣ阻害剤または薬学的組み合わせを被験体に投与することを含む、その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫を治療する方法に関する。したがって、ＨＤＡＣ阻害剤またはＨＤＡＣ阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤を含む組み合わせの治療上有効な量を被験体に投与することを含む、その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫を治療する方法が、本明細書において提供される。

本明細書において考慮される被験体は、典型的にはヒトである。しかし、被験体は、治療が望まれる任意の哺乳動物であることができる。したがって、本明細書において記述される方法は、ヒト及び獣医学的用途の両方に適用することができる。

用語「治療すること」または「治療」は、本方法が少なくとも異常な細胞の増殖を緩和したことを示す。たとえば、本方法は、患者における細胞成長の速度を減少させること、または非ホジキンリンパ腫の継続した成長または伝播を予防すること、または非ホジキンリンパ腫の全体の領域を減少させることさえできる。異常な細胞成長の阻害は、細胞死、アポトーシス、有糸分裂の停止、細胞分裂の阻害、転写、翻訳、伝達、その他を含むが、限定されない様々な機構によって生じ得る。

したがって、１つの実施形態において、化合物Ａの治療上有効な量を被験体に投与することを含む、その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫を治療する方法が、本明細書において提供される。

もう一つの実施形態において、化合物Ｂの治療上有効な量を被験体に投与することを含む、その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫を治療する方法である。

もう一つの実施形態において、化合物Ｃの治療上有効な量を被験体に投与することを含む、その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫を治療する方法である。

もう一つの実施形態において、化合物Ｄの治療上有効な量を被験体に投与することを含む、その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫を治療する方法である。

もう一つの実施形態において、化合物Ａ及びＣＡＬ−１２０／ＧＳ−９８２０の治療上有効な量を被験体に投与することを含む、その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫を治療する方法である。

もう一つの実施形態において、化合物Ｂ及びＣＡＬ−１２０／ＧＳ−９８２０の治療上有効な量を被験体に投与することを含む、その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫を治療する方法である。

もう一つの実施形態において、化合物Ｃ及びＣＡＬ−１２０／ＧＳ−９８２０の治療上有効な量を被験体に投与することを含む、その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫を治療する方法である。

もう一つの実施形態において、化合物Ｄ及びＣＡＬ−１２０／ＧＳ−９８２０の治療上有効な量を被験体に投与することを含む、その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫を治療する方法である。

もう一つの実施形態において、化合物Ａ及びＧＳ−１１０１の治療上有効な量を被験体に投与することを含む、その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫を治療するための方法である。

もう一つの実施形態において、化合物Ｂ及びＧＳ−１１０１の治療上有効な量を被験体に投与することを含む、その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫を治療するための方法である。

もう一つの実施形態において、化合物Ｃ及びＧＳ−１１０１の治療上有効な量を被験体に投与することを含む、その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫を治療するための方法である。

もう一つの実施形態において、化合物Ｄ及びＧＳ−１１０１の治療上有効な量を被験体に投与することを含む、その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫を治療するための方法である。

もう一つの実施形態において、化合物Ａ及びＩＰＩ−１４５の治療上有効な量を被験体に投与することを含む、その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫を治療するための方法である。

もう一つの実施形態において、化合物Ｂ及びＩＰＩ−１４５の治療上有効な量を被験体に投与することを含む、その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫を治療するための方法である。

もう一つの実施形態において、化合物Ｃ及びＩＰＩ−１４５の治療上有効な量を被験体に投与することを含む、その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫を治療するための方法である。

もう一つの実施形態において、化合物Ｄ及びＩＰＩ−１４５の治療上有効な量を被験体に投与することを含む、その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫を治療するための方法である。

もう一つの実施形態において、化合物Ａ及びＧＤＣ−０９４１の治療上有効な量を被験体に投与することを含む、その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫を治療するための方法である。

もう一つの実施形態において、化合物Ｂ及びＧＤＣ−０９４１の治療上有効な量を被験体に投与することを含む、その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫を治療するための方法である。

もう一つの実施形態において、化合物Ｃ及びＧＤＣ−０９４１の治療上有効な量を被験体に投与することを含む、その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫を治療するための方法である。

もう一つの実施形態において、化合物Ｄ及びＧＤＣ−０９４１の治療上有効な量を被験体に投与することを含む、その必要のある被験体における非ホジキンリンパ腫を治療するための方法である。

本発明は、ＨＤＡＣ阻害剤またはＨＤＡＣ阻害剤及びＰＩ３Ｋ阻害剤を含む組み合わせを投与することによって癌細胞の細胞生存度を低下させるための方法に関する。好ましくは、ＨＤＡＣ阻害剤は、ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤である。好ましくは、ＰＩ３Ｋ阻害剤は、ＣＡＬ−１２０／ＧＳ−９８２０、ＧＤＣ−０９４１、ＩＰＩ−１４５及びＧＳ−１１０１からなる群より選択されるか、またはそれらの薬学的に許容される塩である。

また、本発明は、ＨＤＡＣ阻害剤及びＰＩ３Ｋ阻害剤を含む組み合わせを投与することによって、癌細胞のアポトーシスを相乗的に増加させるための方法に関する。好ましくは、ＨＤＡＣ阻害剤は、ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤である。好ましくは、ＰＩ３Ｋ阻害剤は、ＣＡＬ−１２０／ＧＳ−９８２０、ＧＤＣ−０９４１、ＩＰＩ−１４５及びＧＳ−１１０１からなる群より選択されるか、またはそれらの薬学的に許容される塩である。

本発明は、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤を含む組み合わせを投与することによって、癌細胞の細胞増殖を減少させるための方法に関する。好ましくは、ＨＤＡＣ阻害剤は、ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤である。好ましくは、ＰＩ３Ｋ阻害剤は、ＣＡＬ−１２０／ＧＳ−９８２０、ＧＤＣ−０９４１、ＩＰＩ−１４５及びＧＳ−１１０１からなる群より選択されるか、またはそれらの薬学的に許容される塩である。

本発明は、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤を含む組み合わせを投与することによって、腫瘍成長を減少させるための方法に関する。好ましくは、ＨＤＡＣ阻害剤は、ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤である。好ましくは、ＰＩ３Ｋ阻害剤は、ＣＡＬ−１２０／ＧＳ−９８２０、ＧＤＣ−０９４１、ＩＰＩ−１４５、ＧＳ−１１０１及びＴＧＲ−１２０２からなる群より選択されるか、またはそれらの薬学的に許容される塩である。

本発明は、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤を含む組み合わせを投与することによって、Ｍｙｃ発現を抑制するための方法に関する。好ましくは、ＨＤＡＣ阻害剤は、ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤である。好ましくは、ＰＩ３Ｋ阻害剤は、ＣＡＬ−１２０／ＧＳ−９８２０、ＧＤＣ−０９４１、ＩＰＩ−１４５、ＧＳ−１１０１及びＴＧＲ−１２０２からなる群より選択されるか、またはそれらの薬学的に許容される塩である。

キット
その他の実施形態において、キットが提供される。本発明によるキットは、本発明の化合物または組成物を含むパッケージを含む。いくつかの実施形態において、キットは、ＨＤＡＣ阻害剤もしくはそれらの薬学的に許容される塩またはＨＤＡＣ阻害剤もしくはそれらの薬学的に許容される塩及びホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤またはそれらの薬学的に許容される塩を含む。

フレーズ「パッケージ」は、本明細書において示された化合物または組成物を含む任意の容器（ｖｅｓｓｅｌ）を意味する。いくつかの実施形態において、パッケージは、箱または包装であることができる。薬学的製品をパッケージすることに使用するためのパッケージング材料は、当業者に周知である。薬学的なパッケージング材料の例は、瓶、チューブ、吸入器、ポンプ、バッグ、バイアル、容器（ｃｏｎｔａｉｎｅｒｓ）、注射器、瓶、及び選択された製剤及び意図された投与及び治療の様式のために適切な任意のパッケージング材料を含むが、限定されない。

キットはまた、パッケージ内に含まれないが、パッケージの外側に付着される品目、たとえばピペットを含むことができる。

キットは、本発明の化合物または組成物を患者に投与するための説明書をさらに含むことができる。キットはまた、米国食品医薬品局などの規制機関による、本明細書における化合物の承認された使用のための説明書を含むことができる。キットはまた、化合物のためにラベリングまたは添付文書を含むことができる。パッケージまたは任意の添付文書（類）は、それ自体規制機関によって承認されてもよい。キットは、パッケージにおいて固体の相または液体の相（提供される緩衝液など）において化合物を含むことができる。キットはまた、本方法を行うための溶液を調製するための緩衝液及び１つの容器からもう一方へ液体を移すためのピペットを含むことができる。

実施例は、例証の目的で、及び本発明の一定の具体的実施形態を記述するために、以下に記載した。しかし、特許請求の範囲は、本明細書において記載される実施例によって決して限定されない。開示された実施形態に対する種々の変更及び修飾は当業者にとって明らかだろうし、及び、このような変更及び修飾は、限定されないが、本発明の化学構造、置換基、誘導体、製剤及び／または方法に関するものを含み、本発明の精神及び添付の特許請求の範囲を逸脱しない範囲でなされてもよい。本明細書のスキームにおける構造の変数の定義は、本明細書において提示される式における対応する位置のものと相応する。

式Ｉの化合物（たとえば、化合物Ａ及びＢ）の合成は、ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０２１９８２において提供され、それはその全体において参照により本明細書に援用される。式ＩＩの化合物（たとえば、化合物Ｃ及びＤ）の合成は、ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０６０７９１において提供され、それはその全体において参照により本明細書に援用される。

実施例１：２−（ジフェニルアミノ）−Ｎ−（７−（ヒドロキシアミノ）−７−オキソヘプチル）ピリミジン−５−カルボキサミド（化合物Ａ）の合成
反応スキーム
中間体２の合成：ＤＭＦ（１００ｍｌ）におけるアニリン（３．７ｇ、４０ｍｍｏｌ）、化合物１（７．５ｇ、４０ｍｍｏｌ）及びＫ_２ＣＯ_３（１１ｇ、８０ｍｍｏｌ）の混合物を脱気し、一晩Ｎ_２下で１２０℃にて撹拌した。反応混合物を室温（ｒ．ｔ．）に冷却して、ＥｔＯＡｃ（２００ｍｌ）で希釈し、次いで飽和ブライン（２００ｍｌ×３）で洗浄した。有機層を分離し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、蒸発乾固して、シリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ ＝ １０／１）によって精製して、白色固体（６．２ｇ、６４％）として所望の産物を得た。

中間体３の合成：ＴＥＯＳ（２００ｍｌ）中の化合物２（６．２ｇ、２５ｍｍｏｌ）、ヨードベンゼン（６．１２ｇ、３０ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（９５５ｍｇ、５．０ｍｍｏｌ）、Ｃｓ_２ＣＯ_３（１６．３ｇ、５０ｍｍｏｌ）の混合物を脱気し、窒素でパージした。生じる混合物を１４時間１４０℃で撹拌した。室温に冷却した後、残渣をＥｔＯＡｃ（２００ｍｌ）で希釈した。９５％ＥｔＯＨ（２００ｍｌ）及びシリカゲル上のＮＨ_４Ｆ−Ｈ_２Ｏ［５０ｇ、水（１５００ｍｌ）におけるＮＨ_４Ｆ（１００ｇ）をシリカゲル（５００ｇ、１００−２００メッシュ）に添加することによってプレ調製した）］を添加して、生じる混合物を２時間室温にて保持した。凝固した材料は、濾過して、ＥｔＯＡｃで洗浄した。ろ液は蒸発乾固し、残渣はシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ ＝ １０／１）によって精製して、黄色固体（３ｇ、３８％）を得た。

中間体４の合成：２Ｎ ＮａＯＨ（２００ｍｌ）をＥｔＯＨ（２００ｍｌ）中の化合物３（３．０ｇ、９．４ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を３０分間６０℃にて撹拌した。溶媒を蒸発させた後、溶液を２Ｎ ＨＣｌで中和して、白色沈殿を得た。懸濁液をＥｔＯＡｃ（２×２００ｍｌ）で抽出して有機層を分離し、水（２×１００ｍｌ）、鹹水（２×１００ｍｌ）で洗浄して、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させた。溶媒を除去し、茶色固体（２．５ｇ、９２％）を得た。

中間体６の合成：化合物４（２．５ｇ、８．５８ｍｍｏｌ）、化合物５（２．５２ｇ、１２．８７ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（３．９１ｇ、１０．３０ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（４．４３ｇ、３４．３２ｍｍｏｌ）の混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を濾過した後、ろ液を蒸発乾固し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ ＝ ２／１）によって精製して茶色固体（２ｇ、５４％）を得た。

２−（ジフェニルアミノ）−Ｎ−（７−（ヒドロキシアミノ）−７−オキソヘプチル）ピリミジン−５−カルボキサミド（化合物Ａ）の合成：化合物６（２．０ｇ、４．６ｍｍｏｌ）、ＭｅＯＨ（５０ｍｌ）における水酸化ナトリウム（２Ｎ、２０ｍＬ）及びＤＣＭ（２５ｍｌ）の混合物を１０分間０℃にて撹拌した。ヒドロキシルアミン（５０％）（１０ｍｌ）を０℃に冷却して、混合物に添加した。生じる混合物を室温にて２０分間撹拌した。溶媒を除去した後、混合物を１ＭのＨＣｌで中和して、白色沈殿を得た。粗産物を濾過し、プレＨＰＬＣによって精製して、白色固体（９５０ｍｇ、４８％）を得た。

実施例２：２−（（２−クロロフェニル）（フェニル）アミノ）−Ｎ−（７−（ヒドロキシアミノ）−７−オキソヘプチル）ピリミジン−５−カルボキサミド（化合物Ｂ）の合成
反応スキーム：
中間体２の合成：実施例１における中間体２の合成を参照されたい。

中間体３の合成：ＤＭＳＯ（６９０ｍｌ）中の化合物２（６９．２ｇ、１当量）、１−クロロ−２−ヨードベンゼン（１３５．７ｇ、２当量）、Ｌｉ_２ＣＯ_３（４２．０４ｇ、２当量）、Ｋ_２ＣＯ_３（３９．３２ｇ、１当量）、Ｃｕ（１当量４５μｍ）の混合物を、脱気し、窒素でパージした。生じる混合物は、１４０℃にて撹拌した。反応のワークアップは、収率９３％にて化合物３を与えた。

中間体４の合成：実施例１における中間体４の合成を参照されたい。

中間体６の合成：実施例１における中間体６の合成を参照されたい。

２−（（２−クロロフェニル）（フェニル）アミノ）−Ｎ−（７−（ヒドロキシアミノ）−７−オキソヘプチル）ピリミジン−５−カルボキサミド（化合物Ｂ）の合成：実施例１における化合物Ａの合成を参照されたい。

実施例３：２−（（１−（３−フルオロフェニル）シクロヘキシル）アミノ）−Ｎ−ヒドロキシピリミジン−５−カルボキサミド（化合物Ｃ）の合成
中間体２の合成：乾燥ＤＭＦ（１０００ｍｌ）中の化合物１（１００ｇ、０．７４ｍｏｌ）の溶液に、１，５−ジブロモペンタン（１７０ｇ、０．７４ｍｏｌ）を添加した。反応を氷浴において冷却しながら、ＮａＨ（６５ｇ、２．２ｅｑ）を滴状に添加した。生じる混合物を一晩５０℃にて激しく撹拌した。懸濁液を慎重に氷水で急冷し、エチルアセテート（３×５００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を濃縮して粗産物を得て、それをフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して青色色の固体（１００ｇ、６７％）として化合物２を得た。

中間体３の合成：ＰＰＡ（５００ｍｌ）中の化合物２（１００ｇ、０．４９ｍｏｌ）の溶液は、約５〜６時間１１０℃にて加熱した。完了後、生じる混合物は、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液で約８〜９のｐＨに慎重に調整した。生じる沈殿物を収集して、水（１０００ｍｌ）で洗浄し、白色固体（９５ｇ、８７％）として化合物３を得た。

中間体４の合成：ｎ−ＢｕＯＨ（８００ｍｌ）中の化合物３（９５ｇ、０．４３ｍｏｌ）の溶液に、ＮａＣｌＯ（２６０ｍｌ、１．４ｅｑ）を添加した。３Ｎ ＮａＯＨ（４００ｍｌ、２．８当量）を０℃にて次いで添加して、反応を一晩室温にて撹拌した。生じる混合物はＥＡ（２×５００ｍｌ）で抽出し、合わせた有機層を鹹水で洗浄した。溶媒を真空下において除去して粗産物を得て、ＨＣｌ塩処理によってさらに精製して、白色粉末（７２ｇ、７３％）として化合物４を得た。

中間体６の合成：ジオキサン（５０ｍｌ）中の化合物４（２．２９ｇ １０ｍｍｏｌ）の溶液に、化合物５（１．８７ｇ、１．０当量）及びＤＩＰＥＡ（２．５８ｇ、２．０当量）を添加した。混合物を１１０〜１２０℃にて一晩加熱した。生じる混合物をシリカゲルカラム上で直接精製して、白色固体（１．３７ｇ、４０％）として、連結した産物である化合物６を得た。

２−（（１−（３−フルオロフェニル）シクロヘキシル）アミノ）−Ｎ−ヒドロキシピリミジン−５−カルボキサミド（化合物Ｃ）の合成：
ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（１０ｍｌ、１：１）中の化合物６（１００ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）の溶液に、水（２ｍｌ、過剰）における５０％ＮＨ_２ＯＨを添加した。飽和ＭｅＯＨ（２ｍｌ、過剰）におけるＮａＯＨを０℃にて次いで添加し、反応を３〜４時間撹拌した。完了後、生じる混合物を濃縮し、４〜５のｐＨに到達するために、２Ｎ ＨＣｌで酸性化した。沈殿物を収集して、水（１０ｍｌ）で洗浄し、過剰なＮＨ_２ＯＨを除去した。沈殿物を乾燥させて、白色粉末（７０ｍｇ、７３％）として、２−（（１−（３−フルオロフェニル）シクロヘキシル）アミノ）−Ｎ−ヒドロキシピリミジン−５−カルボキサミドを得た。

実施例４：Ｎ−ヒドロキシ−２−（（１−フェニルシクロプロピル）アミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド（化合物Ｄ）の合成
反応スキーム
中間体２の合成：ＭＢＴＥ（３７５０ｍｌ）中の化合物１、ベンゾニトリル（２５０ｇ、１．０当量）及びＴｉ（ＯｉＰｒ）_４（１３３０ｍｌ、１．５当量）の溶液を窒素雰囲気下で約−１０〜−５℃に冷却した。ＥｔＭｇＢｒ（１６１０ｍｌ、３．０Ｍ、２．３当量）を６０分間にわたって滴状に添加して、その間、反応の内部の温度を５℃より低く保持した。反応混合物は、１時間１５〜２０℃に温めた。ＢＦ_３−エーテル（１３００ｍｌ、２．０当量）を６０分間にわたって滴状に添加し、その一方で、内部温度を１５℃より低く維持した。反応混合物を１〜２時間１５〜２０℃にて撹拌し、ベンゾニトリルの低レベルが残っているときに止めた。３０℃より低く内部温度を維持しながら、１Ｎ ＨＣｌ（２５００ｍｌ）を滴状に添加した。ＮａＯＨ（２０％、３０００ｍｌ）を滴状に添加して、ｐＨを約９．０とし、その一方で、温度を３０℃より低くさらに維持した。反応混合物をＭＴＢＥ（３Ｌ×２）及びＥｔＯＡｃ（３Ｌ×２）で抽出し、合わせた有機層を無水のＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、減圧下（４５℃より低く）で濃縮してレッドオイルを得た。ＭＴＢＥ（２５００ｍｌ）をオイルに添加して透明な溶液を与え、乾燥ＨＣｌガスによるバブリング下で、固体を沈殿させた。この固体を濾過して真空において乾燥させ、１４３ｇの化合物２を得た。

中間体４の合成：化合物２（６２０ｇ、１．０当量）及びＤＩＰＥＡ（１０８０ｇ、２．２当量）をＮＭＰ（３１００ｍｌ）において溶解して、２０分間撹拌した。化合物３（６８０ｇ、１．０２当量）を添加して、反応混合物を４時間約８５〜９５℃に加熱した。溶液を室温にゆっくり冷却させた。この溶液をＨ_２Ｏ（２０Ｌ）上へ注いで、強く攪拌して固体の多くを溶液から沈殿させた。混合物を濾過し、固まりを２４時間５０℃にて減圧下で乾燥させ、８９６ｇの化合物４（固体、８６．８％）を得た。

Ｎ−ヒドロキシ−２−（（１−フェニルシクロプロピル）アミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド（化合物Ｄ）の合成：ＭｅＯＨ（１０００ｍｌ）の溶液を撹拌しながら約０〜５℃に冷却した。ＮＨ_２ＯＨ ＨＣｌ（１１０７ｇ、１０当量）を添加し、続いてＮａＯＣＨ_３（１０００ｇ、１２．０当量）を慎重に添加した。生じる混合物は、１時間０〜５℃にて撹拌し、濾過して固体を除去した。一部分における反応混合物に化合物４（４５０ｇ、１．０当量）を添加し、化合物４が消費されるまで、２時間１０℃にて撹拌した。反応混合物は、ＨＣｌ（６Ｎ）の添加を介して約８．５〜９のｐＨに調整し、沈澱を生じた。混合物は、減圧下で濃縮した。強く撹拌しながら水（３０００ｍｌ）を残渣に添加し、沈殿を濾過によって収集した。産物を４５℃にて一晩オーブンにおいて乾燥した（３４０ｇ、７９％収率）。

実施例５：ＨＤＡＣ酵素アッセイ
試験のための化合物をＤＭＳＯ中に５０倍の終濃度に希釈し、１０点の３倍希釈系列を作製した。化合物をアッセイ緩衝液（５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ｐＨ ７．４、１００ｍＭ ＫＣｌ、０．００１％Ｔｗｅｅｎ−２０、０．０５％ＢＳＡ、２０μＭ ＴＣＥＰ）において６倍のこれらの終濃度に希釈した。ＨＤＡＣ酵素（ＢＰＳ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓから購入）は、アッセイ緩衝液において１．５倍のこれらの終濃度に希釈した。０．０５μＭ終濃度のトリペプチド基質及びトリプシンは、アッセイ緩衝液において６倍のこれらの終濃度に希釈した。これらのアッセイ法において使用した最終的な酵素濃度は、３．３ｎｇ／ｍｌ（ＨＤＡＣ１）、０．２ｎｇ／ｍｌ（ＨＤＡＣ２）、０．０８ｎｇ／ｍｌ（ＨＤＡＣ３）及び２ｎｇ／ｍｌ（ＨＤＡＣ６）であった。使用した最終基質濃度は、１６μＭ（ＨＤＡＣ１）、１０μＭ（ＨＤＡＣ２）、１７μＭ（ＨＤＡＣ３）及び１４μＭ（ＨＤＡＣ６）であった。５μｌの化合物及び２０μｌの酵素は、黒い不透明な３８４ウェルプレートのウェルに重複して添加した。酵素及び化合物は、１０分間室温にて共にインキュベートした。５μｌの基質をそれぞれのウェルに添加し、プレートを６０秒間振盪して、Ｖｉｃｔｏｒ ２マイクロタイタープレートリーダーに入れた。蛍光発光を６０分間モニターし、線状の反応速度を算出した。Ｇｒａｐｈ Ｐａｄ Ｐｒｉｓｍを使用して４つのパラメーターカーブフィットによりＩＣ５０を決定した。

実施例６：単剤及び組み合わせ両方としてのＮＨＬ株化細胞の収集におけるＨＤＡＣ６の阻害
本実施例は、単剤及びこれらの新規の標的とされた薬剤との組み合わせ両方として、ＮＨＬ株化細胞のコレクションにおけるＨＤＡＣ６を阻害する治療上の可能性を記述する。ＰＩ３Ｋの阻害剤と組み合わせた化合物Ａ、化合物Ｂ及び高度に選択的な化合物Ｃを含む選択的なＨＤＡＣ６阻害剤での様々な分子サブタイプからのリンパ腫細胞の処理は、リンパ腫細胞生存度における相乗的減少を生じた。

ＮＨＬの最も共通のサブタイプを表したヒトリンパ腫株化細胞を選択した。マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）については、Ｍｉｎｏ、Ｊｅｋｏ１及びＧｒａｎｔａ−５１９細胞を利用し、その一方で、Ｕ２９３２及びＳＵＤＨＬ１６細胞は、それぞれ、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）の活性化Ｂ細胞（ＡＢＣ）及び胚中心（ＧＣ）サブタイプを表した。簡潔には、細胞を３８４−ウェルプレートに播き、及びＰＩ３Ｋ阻害剤（ＧＤＣ−０９４１またはＧＳ−１１０１／ＣＡＬ−１０１）と組み合わせてＨＤＡＣ６阻害剤（化合物Ａ、化合物Ｂまたは化合物Ｃ）でマトリックス剤形で４通りに処理した。４８時間これらの細胞をインキュベートした後に、総細胞生存度をＭＴＳアッセイ（Ａｑｕｅｏｕｓ Ｏｎｅ， Ｐｒｏｍｅｇａ）を介して評価した。影響を受ける画分（Ｆａ）をそれぞれの用量組み合わせについてその後決定し、及び組み合わせインデックス（ＣＩ）をＣｈｏｕ−Ｔａｌａｙの方法を使用して評価した。１未満のＣＩ値は相乗効果を表し、１に同等の値は相加効果を示唆し、及び２より大きい値は拮抗作用を示す。図１Ａ−Ｆ及び図２Ａ−２ＦにおけるＦａ−ＣＩプロットで分かるように、全ての５つのリンパ腫株化細胞において、ＨＤＡＣ６阻害剤は、試験した両方のＰＩ３Ｋ阻害剤と相乗作用の強力な証拠を示した。これは、０．７の高度に厳密なカットオフより下に落ちるＦａ−ＣＩプロットにおける多くのデータポイント（個々の用量の組み合わせを表す）によって明示される。合わせると、これらの結果は、ＰＩ３Ｋの阻害と組み合わせてＨＤＡＣ６の阻害が相乗的細胞死滅を生じる強力な証拠を提供し、及びＨＤＡＣ６の及びＰＩ３Ｋ両方を標的とする薬物の組み合わせがＮＨＬ患者のために有意な臨床利益を提供し得ることをさらに示唆する。

実施例７：ＨＤＡＣ６阻害剤及びＰＩ３Ｋ阻害剤の組み合わせは、細胞増殖及び細胞周期進行に影響する
本実施例は、ＨＤＡＣ６阻害剤及びＰＩ３Ｋ阻害剤の組み合わせがどのように細胞増殖及び細胞周期進行に影響を及ぼすかという証拠を提供する。化合物Ａ、化合物Ｂ及び／またはＰＩ３Ｋ阻害剤でのリンパ腫細胞の処理は、細胞周期進行の減少を生じ、増殖減少を指し示す。

Ｊｅｋｏ１（図３Ａ）、Ｍｉｎｏ（図３Ｂ）またはＧｒａｎｔａ−５１９（図３Ｃ）リンパ腫細胞を４日間薬物に曝露し、及び細胞周期分布をＥｄＵ（５−エチニル−２’−デオキシウリジン）の取り込み及びヨウ化プロピジウムでの染色を介してフローサイトメトリーによって評価した。次いで、細胞周期（Ｇ０／Ｇ１、Ｓ及びＧ２／Ｍ）のそれぞれの段階における細胞の相対的画分、並びに死細胞（Ｓｕｂ Ｇ１）の画分を評価した。細胞を細胞周期阻害時にＤＭＳＯ、化合物ＡもしくはＢ（２μＭ）、ＧＤＣ−０９４１（０．０７５〜０．５μＭ）またはＧＤＣ−０９４１（０．０７５〜０．５μＭ）と化合物ＡもしくはＢ（２μＭ）の組み合わせで処理した。あるいは、細胞を細胞周期阻害に対する効果を測定する前に、ＤＭＳＯ、化合物ＡもしくはＢ（２μＭ）、ＣＡＬ−１０１（１〜２μＭ）またはＣＡＬ−１０１（１〜２μＭ）と化合物ＡもしくはＢ（２μＭ）の組み合わせで処理した。

全ての細胞において、組み合わせ処理は、これらの細胞における増殖減少と一致して、細胞周期のＳ期において活発に増殖する細胞の割合における有意な減少を生じた。また、組み合わせ処理は、ＨＤＡＣ６ｉ及びＰＩ３Ｋｉでの組み合わせ処理の結果としての細胞死増加と一致して、両方の株化細胞におけるＳｕｂ Ｇ１集団における増加を生じた。

実施例８：ＨＤＡＣ６阻害剤及びＰＩ３Ｋ阻害剤の組み合わせは、リンパ腫細胞におけるアポトーシスを誘導する
本実施例は、ＨＤＡＣ６阻害剤及びＰＩ３Ｋ阻害剤の組み合わせがどのようにリンパ腫細胞におけるアポトーシスを誘導するかという証拠を提供する。ＰＩ３Ｋｉに加えて化合物ＡまたはＢでのリンパ腫細胞の処理は、細胞のアポトーシスにおいて相乗的増加を生じた。

Ｊｅｋｏ１（図４Ａ及び図４Ｂ）、またはＭｉｎｏ（図４Ｃ）リンパ腫細胞を４日間薬物に曝露し、及びアポトーシスをアネキシンＶ結合及び細胞のヨウ化プロピジウムに対する透過性を測定することによりフローサイトメトリーによって評価した。次いで、初期のアポトーシスにおいて、後期のアポトーシスまたは死において生存していた細胞の相対的画分を評価した。細胞をアポトーシスの誘導においてＤＭＳＯ、化合物ＡもしくはＢ（２〜３μＭ）、ＧＤＣ−０９４１（０．０７５〜２μＭ）またはＧＤＣ−０９４１（０．０７５〜２μＭ）と化合物ＡもしくはＢ（２〜３μＭ）の組み合わせで処理した。あるいは、細胞をアポトーシスの誘導を測定する前に、ＤＭＳＯ、化合物ＡもしくはＢ（２μＭ）、ＣＡＬ−１０１（２μＭ）またはＣＡＬ−１０１（２μＭ）と化合物ＡもしくはＢ（２μＭ）の組み合わせで処理した。

化合物ＡまたはＢでの処理は、対照細胞に対してアポトーシスにおいて小さな増加を生じ、その一方で、ＧＤＣ−０９４１またはＣＡＬ−１０１での処理は、細胞死増加を生じなかった。しかし、ＧＤＣ−０９４１またはＣＡＬ−１０１と化合物ＡまたはＢの組み合わせは、アポトーシス細胞の割合において相乗的増加を生じた。

実施例９：ＨＤＡＣ６阻害剤及びＰＩ３Ｋ阻害剤の組み合わせは、良好な耐容性を示す
本実施例は、ＨＤＡＣ６阻害剤及びＰＩ３Ｋ阻害剤の組み合わせがマウスにおいて良好な耐容性を示すことを示す。

ＣＢ−１７ ＳＣＩＤマウスを媒体、ＧＤＣ−０９４１単独（１００ｍｇ／ｋｇ ＰＯ ＱＤ）または化合物Ａ（３０ｍｇ／ｋｇ ＩＰ ＱＤ）に加えてＧＤＣ−０９４１（１００ｍｇ／ｋｇ ＰＯ ＱＤ）で処理した。パーセント体重量変化を投薬の開始と比較して決定し、及び平均変化±ＳＤをプロットした。全ての処理を３サイクルについて１週あたり５日間投薬した。全ての処理は、毒性の明白な証拠がなく、及び最小の体重減少後に完全な回復で良好な耐容性を示した。図５を参照されたい。

実施例１０：ＨＤＡＣ６阻害剤及びＰＩ３Ｋ阻害剤の組み合わせは、腫瘍成長を軽減する
本実施例は、ＨＤＡＣ６阻害剤及びＰＩ３Ｋ阻害剤の組み合わせがマウスにおける腫瘍成長を減少させることを示す。

Ｇｒａｎｔａ−５１９腫瘍異種移植片をもつマウスを媒体、化合物Ａ単独（１００ｍｇ／ｋｇ ＰＯ ＢＩＤ）、ＧＤＣ−０９４１単独（７５ｍｇ／ｋｇ ＰＯ ＱＤ）または化合物Ａ（１００ｍｇ／ｋｇ ＰＯ ＢＩＤ）に加えてＧＤＣ−０９４１（７５ｍｇ／ｋｇ ＰＯ ＱＤ）で処理した。腫瘍容積（ｍｍ^３）を投薬の開始と比較して決定し、及び平均容積±ＳＤをプロットした。化合物Ａ及びＧＤＣ−０９４１の組み合わせは、いずれか単剤と比較して有意に腫瘍成長減少を示した。図６を参照されたい。

実施例１１：ＨＤＡＣ６阻害剤及びＰＩ３Ｋ阻害剤の組み合わせは、Ｍｙｃ発現のさらなる抑制を導く
本実施例は、ＨＤＡＣ６阻害剤及びＰＩ３Ｋ阻害剤の組み合わせがＭｙｃのさらなる抑制を導くことを示す。

図７Ａ−Ｂは、化合物Ａ及びＧＤＣ−０９４１またはＣＡＬ−１０１のいずれかの組み合わせが、単剤のいずれかと比較して、Ｍｙｃ発現、癌における重要な転写制御因子のさらなる抑制を導いたことを示すＭｉｎｏ（図７Ａ）及びＧｒａｎｔａ−５１９（図７Ｂ）細胞からの免疫ブロットの画像を示す。

参照による援用
本出願の全体にわたって引用される全ての参照（文献参照、発行された特許、公開された特許出願及び同時係属特許出願を含む）の内容は、これによりこれらの全体において本明細書に明白に組み込まれる。定義されない限り、本明細書において使用される全ての技術的及び科学的な用語は、一般に当業者に公知の意味に一致する。

均等物
当業者は、本明細書において記述される発明の具体的実施形態の多くの均等物を認識するだろう、またはルーチン試験しか使用せずに確認することができるだろう。このような均等物は、以下の請求項によって包含されることが意図される。

Claims (11)

1. 治療上有効な量のヒストンデアセチラーゼ６（ＨＤＡＣ６）特異的な阻害剤と治療上有効な量のホスファチジルイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤とを含む、非ホジキンリンパ腫を治療するための組合せ医薬であって、前記ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤が、
   もしくはその薬学的に許容される塩、または
   もしくはその薬学的に許容される塩であり、前記ＰＩ３Ｋ阻害剤が、ＧＤＣ−０９４１またはＧＳ−１１０１であり、前記非ホジキンリンパ腫が、マントル細胞リンパ腫またはびまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫である、組合せ医薬。
2. 前記ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤は、治療量以下の用量で投与される、請求項１に記載の組合せ医薬。
3. 前記ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤は、癌細胞のアポトーシスを誘導する、請求項１に記載の組合せ医薬。
4. 薬学的に許容される担体をさらに含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組合せ医薬。
5. 癌細胞の細胞生存度を低下させるための、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組合せ医薬。
6. 癌細胞のアポトーシスを相乗的に増加させるための、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組合せ医薬。
7. 癌細胞の細胞増殖を減少させるための、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組合せ医薬。
8. 腫瘍成長を減少させるための、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組合せ医薬。
9. Ｍｙｃ発現を抑制するための、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組合せ医薬。
10. 前記ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤と前記ＰＩ３Ｋ阻害剤とが同一の組成物中に存在する、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組合せ医薬。
11. 前記ＨＤＡＣ６特異的な阻害剤と前記ＰＩ３Ｋ阻害剤とが２つの別個の組成物中に存在する、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組合せ医薬。