JP6570472B2 - 毛髪の損傷の評価方法 - Google Patents
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(1)毛髪の損傷を評価する方法であって、毛髪に含まれる炭素数16〜22の脂肪酸アミドの量を毛髪の損傷の指標として用い、前記毛髪に含まれる炭素数16〜22の脂肪酸アミドの量に基づき、当該毛髪の損傷を評価することを特徴とする毛髪の損傷の評価方法、
(2)毛髪の損傷を評価する方法であって、質量顕微鏡法、液体クロマトグラフ法、ガスクロマトグラフ法、液体クロマトグラフ−質量分析法およびガスクロマトグラフ−質量分析法からなる群より選ばれた少なくとも1種の方法によって毛髪における炭素数16〜22の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度を測定し、得られたシグナルの強度を毛髪の損傷の指標として用い、前記シグナルの強度に基づき、当該毛髪の損傷を評価することを特徴とする毛髪の損傷の評価方法、
(3)被験試料が毛髪に与える損傷を評価する被験試料の評価方法であって、毛髪に含まれる炭素数16〜22の脂肪酸アミドの量を毛髪の損傷の指標として用い、被験試料との接触前後の毛髪における前記炭素数16〜22の脂肪酸アミドの含有量の変化に基づき、前記被験試料が毛髪に与える損傷を評価することを特徴とする被験試料の評価方法、
(4)被験試料が毛髪に与える損傷を評価する被験試料の評価方法であって、質量顕微鏡法、液体クロマトグラフ法、ガスクロマトグラフ法、液体クロマトグラフ−質量分析法およびガスクロマトグラフ−質量分析法からなる群より選ばれた少なくとも1種の方法によって被験試料との接触前後の毛髪における炭素数16〜22の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度を測定し、得られたシグナルの強度を毛髪の損傷の指標として用い、被験試料との接触前後の毛髪における前記シグナルの強度の変化に基づき、前記被験試料が毛髪に与える損傷を評価することを特徴とする被験試料の評価方法、ならびに
(5)前記炭素数16〜22の脂肪酸アミドが、ベヘニン酸アミド、パルミチン酸アミドおよびステアリン酸アミドからなる群より選ばれた少なくとも1種である前記(1)〜(4)のいずれかに記載の方法
に関する。
本発明の毛髪の損傷の評価方法は、1つの側面では、毛髪に含まれる炭素数16〜22の脂肪酸アミドの量を毛髪の損傷の指標として用い、前記毛髪に含まれる炭素数16〜22の脂肪酸アミドの量に基づき、当該毛髪の損傷を評価することを特徴とする。
(A)毛髪から炭素数16〜22の脂肪酸アミドを適切な溶媒に抽出し、得られた抽出物に含まれる前記炭素数16〜22の脂肪酸アミドの量に基づき、毛髪に含まれる前記炭素数16〜22の脂肪酸アミドの量を算出する方法;
(B)毛髪から得られた観察用試料を質量顕微鏡に供して毛髪における前記炭素数16〜22の脂肪酸アミドに対応する質量電荷比のシグナルの強度を測定し、当該シグナルの強度に基づき、毛髪に含まれる前記炭素数16〜22の脂肪酸アミドの量を算出する方法などが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。前記(B)の方法には、少量の毛髪を用いた場合であっても毛髪の損傷を適確に評価することができるとともに、毛髪における種々の部位の損傷を評価することができる利点がある。また、前記(B)の方法には、毛髪における特定部位での断面の顕微鏡画像から当該断面上の特定箇所に限定して当該特定箇所に存在する前記炭素数16〜22の脂肪酸アミドを調べることができるという利点がある。このような利点から、前記測定方法のなかでは、前記(B)の方法が好ましい。
=〔[被験対象の毛髪に含まれる炭素数16〜22の脂肪酸アミドの量]/[対照の毛髪に含まれる炭素数16〜22の脂肪酸アミドの量]〕 (I)
=〔[被験対象の毛髪に含まれる炭素数16〜22の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度]/[対照の毛髪に含まれる炭素数16〜22の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度]〕 (Ia)
本発明の被験試料の評価方法は、1つの側面では、被験試料が毛髪に与える損傷を評価する被験試料の評価方法であって、毛髪に含まれる炭素数16〜22の脂肪酸アミドの量を毛髪の損傷の指標として用い、被験試料との接触前後の毛髪における前記炭素数16〜22の脂肪酸アミドの含有量の変化に基づき、前記被験試料が毛髪に与える損傷を評価することを特徴とする。
=[{〔脂肪酸アミドの含有量A〕−〔脂肪酸アミドの含有量B〕}÷〔脂肪酸アミドの含有量A〕]×100 (II)
に基づいて算出することができる。
=[{〔脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度A〕−〔脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度B〕}÷〔脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度A〕]×100
(IIa)
に基づいて算出することができる。前記〔被験試料との接触前後の毛髪における前記炭素数16〜22の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度の変化率〕が大きいほど、被験試料が毛髪に与える損傷が大きいと評価することができる。
毛髪長約30cmの単一人毛からなる毛束2.5gを、約40℃の0.5質量%ラウリル硫酸ナトリウム水溶液200g中に30分間浸漬させた後、前記毛束を約40℃の大過剰の水道水中に3分間浸漬させた。水道水への毛束の浸漬の操作を合計3回繰り返した。水道水への浸漬後の毛束を自然乾燥させ、健常毛を得た。
調整例1で得られた健常毛0.5gを、表1に示される組成を有する第1剤と第2剤とを等量混合したブリーチ剤中に室温で15分間浸漬させた。つぎに、浸漬後の毛髪を水で洗浄した後、約40℃の0.25質量%ポリオキシエチレンラウリルエーテル硫酸ナトリウム水溶液200g中に5分間浸漬させた。その後、前記毛髪を約40℃の大過剰の水道水中に3分間浸漬させた。水道水への毛髪の浸漬の操作を合計3回繰り返した。水道水への浸漬後の毛髪を自然乾燥させ、損傷毛1〜4を得た。なお、第1剤のI液およびII液ならびに第2剤のA液およびB液の組成を表2に示す。
(1)観察用試料の調製
調製例1で得られた健常毛および調製例2〜5で得られた損傷毛それぞれを凍結包埋法にしたがって包埋して包埋試料を得た。クライオスタットを用いて前記包埋試料の横断面切片を作製した。前記横断面切片をスライドガラス上に接着させた後、前記横断面切片にマトリックス(ゲンチジン酸)を蒸着させ、観察用試料を得た。
試験例1(1)で得られた観察用試料をイメージング質量顕微鏡〔(株)島津製作所製、商品名:iMScope〕に供し、前記観察用試料を観察するとともに、当該観察用試料について、m/z200〜1500の範囲のマススペクトルを測定した。分析条件は、以下のとおりである。
イオン化法:マトリックス支援レーザー脱離イオン化法
測定モード:正イオン測定モード
レーザー強度:30%
レーザー繰り返し周波数:1000Hz
質量分析計:四重極型イオントラップ飛行時間型質量分析計
(1)測定試料の調製
調製例1で得られた健常毛500mgを液体窒素中で凍結させ、得られた凍結健常毛を乳鉢で破砕した。得られた健常毛の破砕物にメタノール15mLを添加した。得られた混合物を室温で1日振盪させた。振盪後の混合物を遠心分離に供して不溶物を沈降させ、上清を回収した。得られた上清を、メタノールで10倍希釈し、測定試料を得た。
試験例1の結果から、マススペクトルにおけるm/z=340.39のピークは、ベヘニン酸アミドに由来することが予想された。そこで、ベヘニン酸アミドの標準品をその濃度が100ng/mLになるように試験例2(1)で得られた測定試料に添加し、対照試料を得た。
測定試料、対照試料およびベヘニン酸アミドの標準品それぞれと、トリプル四重極リニアイオントラップ質量分析システム〔(株)エービーサイエックス(ABSCIEX)製、商品名:4000 QTRAP LC/MS/MSシステム〕とを用い、液体クロマトグラフ−質量分析法によって、測定試料に含まれる前記m/z=340.39(試験例1のマススペクトルおけるm/z)のピークに対応する化合物の同定を行なった。測定条件は、以下のとおりである。
使用カラム:ジーエルサイエンス社製、商品名:Inertsil ODS−3(内径2.1mm、長さ150mm)
カラム温度:35℃
流速:0.2mL/min
移動相A:0.1体積%ギ酸水溶液
移動相B:アセトニトリル
グラジエント条件:
開始後0分から開始後5分経過時まで:
A/B(体積比)=5/95
開始後5分経過時から開始後15分経過時まで:
A/B(体積比)=0/100
開始後15.01分経過時から開始後25分経過時まで:
A/B(体積比)=5/95
装置:トリプル四重極リニアイオントラップLC/MS/MSシステム(4000QTRAP AB Sciex)
イオン化法:ESI
解析:プロダクトイオンスキャンモードおよびMRM(Multiple Reaction Monitoring)
(1)観察用試料の調製
試験例1(1)と同様の操作を行ない、調製例1で得られた健常毛および調製例2〜5で得られた損傷毛1〜4それぞれの観察用試料を得た。
実施例1(1)で得られた観察用試料をイメージング質量顕微鏡〔(株)島津製作所製、商品名:iMScope〕に供し、調製例1で得られた健常毛および調製例2〜5で得られた損傷毛1〜4それぞれにおけるm/z=340.39(試験例1のマススペクトルにおけるm/z)のピークに対応する化合物であるベヘニン酸アミドの分布を視覚化した。分析条件は、試験例1(2)で用いられた分析条件と同様である。
試験例1(1)と同様の操作を行ない、調製例1で得られた健常毛および調製例2〜5で得られた損傷毛それぞれの観察用試料を得た。
=〔[被験対象の毛髪に含まれるベヘニンアミドに由来するシグナルの強度]÷[健常毛に含まれるベヘニンアミドに由来するシグナルの強度]〕 (Ib)
試験例1(1)と同様の操作を行ない、調製例4で得られた損傷毛4および調製例1で得られた健常毛それぞれの観察用試料を得た。
Claims (5)
- 毛髪の損傷を評価する方法であって、毛髪に含まれる炭素数16〜22の脂肪酸アミドの量を毛髪の損傷の指標として用い、前記毛髪に含まれる炭素数16〜22の脂肪酸アミドの量に基づき、当該毛髪の損傷を評価することを特徴とする毛髪の損傷の評価方法。
- 毛髪の損傷を評価する方法であって、質量顕微鏡、液体クロマトグラフ法、ガスクロマトグラフ法、液体クロマトグラフ−質量分析法およびガスクロマトグラフ−質量分析法からなる群より選ばれた少なくとも1種の方法によって毛髪における炭素数16〜22の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度を測定し、得られたシグナルの強度を毛髪の損傷の指標として用い、前記シグナルの強度に基づき、当該毛髪の損傷を評価することを特徴とする毛髪の損傷の評価方法。
- 被験試料が毛髪に与える損傷を評価する被験試料の評価方法であって、毛髪に含まれる炭素数16〜22の脂肪酸アミドの量を毛髪の損傷の指標として用い、被験試料との接触前後の毛髪における前記炭素数16〜22の脂肪酸アミドの含有量の変化に基づき、前記被験試料が毛髪に与える損傷を評価することを特徴とする被験試料の評価方法。
- 被験試料が毛髪に与える損傷を評価する被験試料の評価方法であって、質量顕微鏡、液体クロマトグラフ法、ガスクロマトグラフ法、液体クロマトグラフ−質量分析法およびガスクロマトグラフ−質量分析法からなる群より選ばれた少なくとも1種の方法によって被験試料との接触前後の毛髪における炭素数16〜22の脂肪酸アミドに由来するシグナルの強度を測定し、得られたシグナルの強度を毛髪の損傷の指標として用い、被験試料との接触前後の毛髪における前記シグナルの強度の変化に基づき、前記被験試料が毛髪に与える損傷を評価することを特徴とする被験試料の評価方法。
- 前記炭素数16〜22の脂肪酸アミドが、ベヘニン酸アミド、パルミチン酸アミドおよびステアリン酸アミドからなる群より選ばれた少なくとも1種である請求項1〜4のいずれかに記載の方法。
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