JP6506692B2 - カプセル化された苦味ペプチド、苦味ペプチドをカプセル化する方法、及びカプセル化された苦味ペプチドを含む栄養組成物 - Google Patents

Description

背景

[0001]本開示は一般に、カプセル化された苦味ペプチド、苦味ペプチドをカプセル化する方法、及びカプセル化された苦味ペプチドを含む栄養組成物に関する。より詳細には、本開示は、オルガノゲル、固体脂質ナノ粒子、リポソーム又はこれらの組合せなどの脂質マトリックス内にカプセル化された苦味ペプチドを対象とする。

[0002]市場では、加齢及び／又は疾病に関連する状態を処置し、加水分解タンパク質を提供する栄養組成物に対するニーズが高まっている。タンパク質加水分解物は、重症患者並びにアレルギーの予防及び管理などに対する特定の消費者の利益及び／又はニーズに対処するために商業利用され、専門化した栄養製品である。多くのこのような専門化した栄養製品は、酵素による加水分解によって予め消化されたタンパク質を含む。しかし、加水分解は、苦味を有するタンパク質の疎水性断片を形成することがある。例えば、Ｌｅｋｓｒｉｓｏｍｐｏｎｇ，Ｐ．Ｐ．、「Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｌａｖｏｒ ｏｆ ｗｈｅｙ ｐｒｏｔｅｉｎ ｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｓ」、Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ．、５８（１０）：６３１８−６３２７（２０１０）を参照されたい。それでも、ペプチドは、組成物の栄養プロファイルに寄与するだけでなく、組成物内のエマルションの安定化にも役立つ。

[0003]タンパク質加水分解で形成されたタンパク質の疎水性断片のために、このような栄養組成物は加水分解タンパク質由来の望ましくない風味を有し、この風味が組成物を経口消費に関して魅力がないものにしている。栄養組成物の劣った官能特性により消費者が栄養組成物の摂取を拒否すると、所望の生物学的結果が実現されない。したがって、エマルションの安定性に影響を及ぼすことなく、そしてペプチドの生物学的利用能を損なうことなく、加水分解タンパク質を有し、かつ許容可能な物理的性質及び官能特性も有する栄養組成物を提供することは有益であろう。

概要

[0004]本開示は、カプセル化された苦味ペプチド、苦味ペプチドを選択的にカプセル化する方法、及びカプセル化された苦味ペプチドを含む栄養組成物を提供する。一実施形態において、栄養組成物が提供され、栄養組成物は、オルガノゲル、リポソーム、固体脂質ナノ粒子、及びこれらの組合せからなる群より選択される構造体内にカプセル化された苦味ペプチドを含む。

[0005]一実施形態において、構造体は、油、及び、例えば蒸留モノグリセリドなどのゲル化剤を含むオルガノゲルである。

[0006]一実施形態において、構造体は、ダイズ、卵又は乳の少なくとも１種から抽出されたリン脂質を含むリポソームである。

[0007]一実施形態において、構造体は固体脂質ナノ粒子である。

[0008]別の実施形態において、苦味ペプチドをカプセル化する方法が提供される。方法は、タンパク質加水分解物を含有する水相、及び、油又は溶融脂肪の少なくとも１種を含む油相を含むエマルションを形成するステップと、タンパク質加水分解物由来の苦味ペプチドが油相中の油滴内に選択的に移動した後に、ゲル化剤をエマルションに添加してオルガノゲルを形成するステップと、を含み、ゲル化剤の添加によって、苦味ペプチドはオルガノゲル内に取り込まれる。

[0009]一実施形態において、タンパク質加水分解物は、乳性タンパク質加水分解物である。一実施形態において、乳性タンパク質加水分解物は、ホエータンパク質加水分解物である。別の実施形態において、タンパク質加水分解物は、エンドウ及び／又はダイズタンパク質加水分解物などの植物性（ｖｅｇｅｔａｂｌｅ ｂａｓｅｄ）タンパク質加水分解物である。

[0010]一実施形態において、方法は、タンパク質を加水分解して水相中にタンパク質加水分解物を含む溶液を生じるステップを含み、加水分解の後、タンパク質加水分解物を含む溶液中に直接エマルションが形成されるようにして、苦味ペプチドは選択的にオルガノゲル内にインラインで取り込まれる。

[0011]一実施形態において、加水分解により非苦味ペプチドが形成され、非苦味ペプチドの少なくとも一部は油相内には取り込まれない。

[0012]一実施形態において、水相は、約５重量％〜約５０重量％のタンパク質加水分解物、好ましくは、約５重量％〜約１５重量％など、約５重量％〜約２５重量％のタンパク質加水分解物を含む。

[0013]別の実施形態において、苦味ペプチドをカプセル化する方法が提供される。方法は、タンパク質加水分解物を含有する水相、及び溶融脂肪を溶融脂肪の融点を超える温度で含有する油相を含むエマルションを形成するステップと、エマルションを冷却して、タンパク質加水分解物由来の苦味ペプチドが取り込まれる固体脂質ナノ粒子を生成させるステップと、を含む。

[0014]一実施形態において、方法は、タンパク質を加水分解してタンパク質加水分解物を含む溶液を生じるステップを含み、加水分解の後、タンパク質加水分解物を含む溶液中に直接エマルションが形成されるようにして、苦味ペプチドは固体脂質ナノ粒子内にインラインで取り込まれる。

[0015]別の実施形態において、苦味ペプチドをカプセル化する方法が提供される。方法は、リン脂質をタンパク質加水分解物に添加するステップと、タンパク質加水分解物及びリン脂質を均質化して、タンパク質加水分解物からの苦味ペプチドを選択的に取り込むリポソームを形成するステップと、を含む。

[0016]一実施形態において、均質化は、約５０〜約６００バール、好ましくは約５０〜４００バール、より好ましくは約１００〜約３００バールで実施される。

[0017]一実施形態において、方法は、少なくとも１種のタンパク質を加水分解して、好ましくはタンパク質の混合物を加水分解して、タンパク質加水分解物を含む溶液を生じるステップを含み、加水分解の後、タンパク質加水分解物を含む溶液中に直接リン脂質が添加されるようにして、苦味ペプチドはリポソーム内にインラインで取り込まれる。

[0018]別の実施形態において、オルガノゲル、リポソーム、固体脂質ナノ粒子、及びこれらの組合せからなる群より選択される構造体内にカプセル化された苦味ペプチドが提供される。

[0019]別の実施形態において、栄養を供給する方法が提供される。方法は、タンパク質加水分解物由来の苦味ペプチドを含む栄養組成物を投与するステップを含み、苦味ペプチドは、オルガノゲル、リポソーム、固体脂質ナノ粒子、及びこれらの組合せからなる群より選択される構造体内にカプセル化されている。

[0020]本開示の利点は、カプセル化された苦味ペプチドをもたらすことである。

[0021]本開示の別の利点は、改善された栄養組成物をもたらすことである。

[0022]本開示の更に別の利点は、許容される官能特性を有する栄養組成物をもたらすことである。

[0023]本開示の更に別の利点は、苦味ペプチドをカプセル化することによって、苦味ペプチドを味覚受容体から覆い隠すことである。

[0024]本開示の実施形態の更に別の利点は、酵素の不活性化の後、疎水性相互作用により苦味ペプチドが水相中で直接カプセル化されるようにして、苦味ペプチドをインラインで又はニアラインでカプセル化することである。

[0025]本開示の更に別の利点は、エマルションの安定性を補助するペプチドの少なくとも一部がカプセル化されないように、苦味ペプチドを選択的にカプセル化することである。

[0026]追加的特色及び利点は、本明細書に記載されており、以下の詳細な説明及び図面から明らかになるであろう。

[0027]図１は、ナイルレッドで染色した、本開示の実施形態による苦味ペプチドをカプセル化するリポソームの顕微鏡検査写真である。
[0028]図２は、本開示の実施形態による苦味ペプチドをカプセル化するリポソームの食味検査の結果を示すグラフである。
[0029]図３は、本開示の実施形態によるカプセル化された苦味ペプチドの食味検査の結果を示すグラフである。
[0030]図４は、本開示の実施形態による固体脂質ナノ粒子内にカプセル化された苦味ペプチドを示す図である。

詳細な説明

[0031]本明細書内に含まれる全ての投与量範囲は、前記範囲内に含まれる全ての、全部又は部分の数値を含むものとする。

[0032]本開示及び添付の特許請求の範囲内で用いられる単数形「ａ」「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、文脈で他に明確に示されない限り、複数の指示対象を含む。つまり、例えば「ポリペプチド」への参照は、２つ以上のポリペプチドなどの混合物を含む。

[0033]本明細書で用いられる「約」は、数字範囲内の数を指すものと理解されたい。更に本明細書内の全ての数値範囲は、その範囲内の全ての全部又は部分の整数を含むものと理解されなければならない。

[0034]本開示は、疎水性マトリックス内にカプセル化された苦味ペプチドに関する。本明細書で用いられる「苦味ペプチド」は、タンパク質の加水分解によって形成される任意の疎水性ペプチドである。いくつかの実施形態において、苦味ペプチドは、ヒト苦味受容体（例えばＴ２Ｒ）に結合するペプチドを含む。苦味ペプチドは、食物タンパク質の加水分解によって形成され得る。予め加水分解したタンパク質は、一般に胃腸管によってより消化吸収されやすく、アレルゲン潜在性が低減されている。

[0035]任意の適切な食物タンパク質の加水分解物、例えば、乳タンパク質、食肉タンパク質及び卵タンパク質などの動物タンパク質、又は、ダイズタンパク質、コムギタンパク質、コメタンパク質、エンドウタンパク質、トウモロコシタンパク質、キャノーラタンパク質、エンバクタンパク質、ジャガイモタンパク質、ピーナッツタンパク質、及びマメ、ソバ若しくはレンズマメから得られる任意のタンパク質などの植物タンパク質の加水分解物が用いられ得る。カゼイン及びホエーなどの乳タンパク質、及びダイズタンパク質が、いくつかの用途では好ましいことがある。タンパク質が、乳タンパク質又は乳タンパク質画分である場合、タンパク質は、例えば、スイートホエー、酸ホエー、α−ラクトアルブミン、β−ラクトグロブリン、ウシ血清アルブミン、酸性カゼイン、カゼイネート、α−カゼイン、β−カゼイン及び／又はγ−カゼインであってもよい。もちろん、異なるタンパク質の組合せ由来の加水分解物が用いられてもよい。

[0036]タンパク質加水分解物は、市販の原料粉末として入手することができ、又はタンパク質の加水分解、例えばタンパク質の酵素的加水分解により製造することがきる。例えば、一実施形態によれば、タンパク質加水分解物は、タンパク質分解酵素を用いて、水中でのホエータンパク質の加水分解により製造されてもよい。食品用途向けのタンパク質加水分解物の調製のための工程及び酵素は、当該技術分野で周知である。タンパク質加水分解物の調製のための工程の一例が、米国特許第５０３９５３２号に記載されている。

[0037]ペプチドは、所望通り、そして当該技術分野で公知の通りに、タンパク質を加水分解することにより生成することができる。例えば、タンパク質加水分解物、例えばホエータンパク質の加水分解物は、タンパク質を１つ又は複数のステップで酵素的に加水分解することにより調製することができる。いくつかの実施形態において、タンパク質は、既に加水分解された状態で入手することができる。
[0038]本出願者は、タンパク質加水分解物由来のカプセル化されていない苦味ペプチドと比較すると、苦味ペプチドをカプセル化することによって苦味がマスクされることを意外にも見出した。理論に拘束されるのを望むものではないが、カプセル化された苦味ペプチドが、苦味ペプチドを含む組成物の望ましくない風味を低減するのは、苦味ペプチドをカプセル化する疎水性マトリックスによって、苦味ペプチドが味覚受容体から遮断されるためであると考えられる。

[0039]いくつかの実施形態において、タンパク質加水分解物由来の苦味ペプチドの少なくとも一部は、オルガノゲル内にカプセル化され得る。オルガノゲルは、定常状態にあるときには流動を示さない実質的な希釈系であり、非結晶、非ガラス状の固体材料である。この固体材料は、三次元網目内に取り込まれ、及び／又は三次元網目に物理的に付着している液体有機相（例えば植物油）で構成されている。例えば、オルガノゲルは、架橋ポリマーの結合などの強い化学結合、又は非共有結合性相互作用などのより弱い結合のいずれかによって相互接続された高分子を含むことができる。この系は、ゲル化剤（例えばモノグリセリド）と呼ばれる構造化分子の自己集合に基づくことができる。液体成分が固体成分の網目構造内に固定化するのは、固体成分と液体成分との間の界面張力によるものとされている。

[0040]オルガノゲルを作製するために、エマルションが形成されてもよい。いくつかの実施形態において、水相中でタンパク質加水分解をした後、酵素の不活性化の後に、直接エマルションが形成される。エマルションは、タンパク質加水分解物を含有する水相を含むことができ、油及び／又は溶融脂肪を含有する油相を含むこともできる。例えば、ホエータンパク質加水分解物などのタンパク質加水分解物は、ヒマワリ油などの植物油に分散させることができる。一実施形態において、水相は、約５重量％〜約５０重量％のタンパク質加水分解物、好ましくは、約５重量％〜約１５重量％など、約５重量％〜約２５重量％のタンパク質加水分解物を含むことができる。

[0041]苦味ペプチドは、最初は水相内に位置し得るが、次いで疎水性相互作用によって油滴内に移動し得る。例えば、約３０分間などの撹拌により、苦味ペプチドの油滴内への移動を補助することができる。エマルションが形成された後、例えば、フィトステロール、リン脂質、モノグリセリド、及びこれらの組合せなどのゲル化剤分子を、エマルションに添加して、苦味ペプチドが取り込まれる油滴をゲル化させることができる。適切なゲル化剤の例としては、リン脂質、レシチン、モノグリセリド、両親媒性ペプチド、ソルビタンモノステアレート、モノ、ジ及び／若しくはトリアシルグリセロール、脂肪酸、脂肪族アルコール、ワックス並びに／又はフィトステロールなどの、低分子量ゲル化剤（ＬＭＷＧ）が挙げられる。例えば、ゲル化剤をエマルションに添加して、油滴をゲル化させることができる。好ましい実施形態において、オルガノゲルは、有機溶媒を用いずに食品グレードの材料のみを用いて形成される。特定の実施形態において、ゲル化剤は、蒸留モノグリセリドであってもよい。

[0042]オルガノゲルは、栄養組成物を製造するために用いることができる。いくつかの実施形態において、油及び／又は溶融脂肪は、苦味ペプチドをカプセル化するオルガノゲルが用いられる栄養組成物中の標準的な原材料である。例えば、オルガノゲルを含めるために栄養組成物の配合を変える必要がないことがある。いくつかの実施形態において、苦味及び／又は疎水性を有しない、タンパク質加水分解物由来のペプチドの少なくとも一部は、オルガノゲルではカプセル化されない。いくつかの実施形態において、固体脂質ナノ粒子は、界面活性剤により安定化される。

[0043]いくつかの実施形態において、タンパク質加水分解物由来の苦味ペプチドの少なくとも一部は、固体脂質ナノ粒子内にカプセル化され得る。固体脂質ナノ粒子は、苦味ペプチドなどの親油性分子を可溶化することができる固体脂質マトリックスである。脂質マトリックスはコアとなり得、コアは、この脂質マトリックスコアを取り囲んで界面活性剤として作用する乳化剤によって安定化される。

[0044]固体脂質ナノ粒子を生成するために、油中水型エマルション中の油を、固体脂質又は固体脂質のブレンドに置き換えることができる。一実施形態において、得られた固体脂質ナノ粒子は、水性媒体に分散された０．１〜３０％ｗ／ｗの固体脂質で構成される。固体脂質ナノ粒子は、加水分解した後、酵素の不活性化後に、又は追加のプロセスステップ（例えば膜ろ過及び／又はクロマトグラフィー技術）の後、水相中で直接、インラインで形成され得る。いくつかの実施形態において、固体脂質ナノ粒子は、界面活性剤により安定化される。固体脂質ナノ粒子の平均粒子サイズは、約４０ｎｍ〜約１００ミクロンであり得る。

[0045]例えば、エマルションは、タンパク質加水分解物を含有する水相、及び溶融脂肪を脂質の融点を超える温度で含有する油相を含む、エマルションで形成され得る。一実施形態において、水相は、約５重量％〜約５０重量％のタンパク質加水分解物、好ましくは、約５重量％〜約１５重量％など、約５重量％〜約２５重量％のタンパク質加水分解物を含むことができる。タンパク質加水分解物中の苦味ペプチドは、疎水性相互作用によって脂肪滴内に移動し得る。次いで、エマルションを冷却して、苦味ペプチドが取り込まれる固体脂質ナノ粒子を生成することができる。好ましい実施形態において、固体脂質ナノ粒子は、有機溶媒を用いずに食品グレードの材料のみを用いて形成される。

[0046]固体脂質ナノ粒子は、栄養組成物を製造するために用いることができる。いくつかの実施形態において、固体脂質又は固体脂質のブレンドは、苦味ペプチドをカプセル化する固体脂質ナノ粒子が用いられる栄養組成物中の標準的な原材料である。例えば、固体脂質ナノ粒子を含めるために栄養組成物の配合を変える必要がないことがある。いくつかの実施形態において、苦味及び／又は疎水性を有しない、タンパク質加水分解物由来のペプチドの少なくとも一部は、固体脂質ナノ粒子ではカプセル化されない。

[0047]いくつかの実施形態において、タンパク質加水分解物由来の苦味ペプチドの少なくとも一部は、リポソーム内にカプセル化され得る。リン脂質は、同一分子上に親油性尾部及び親水性頭部を有することにより特徴づけられる。水との相互作用時に、リン脂質は自己集合し、自己組織化コロイド粒子を形成する。リポソームにおける一般論として、リン脂質の親水性頭部は水区画に向かって配向し、親油性尾部は水から離れて小胞の中心に向かって配向し、かくして二重層が形成される。その結果、脂溶性化合物は、脂質二重層内に凝集する。

[0048]リポソーム形成時に、苦味ペプチドの疎水性により苦味ペプチドがリポソームの脂質二重層内に移動し得、疎水性相互作用により脂質二重層内での苦味ペプチドの位置決めが安定化され得る。結果として、苦味ペプチドはリポソーム内に取り込まれ得る。

[0049]例えば、ダイズ又は卵から抽出されたリン脂質などのリン脂質を、タンパク質加水分解物を含有する水に添加することによって、苦味ペプチドを取り込むリポソームを形成することができる。一実施形態において、水は、約５重量％〜約５０重量％のタンパク質加水分解物、好ましくは、約５重量％〜約１５重量％など、約５重量％〜約２５重量％のタンパク質加水分解物を含むことができる。次いで、直接に、又は追加のプロセシングステップの後に、均質化を実施して、タンパク質加水分解物からの苦味ペプチドを取り込むリポソームを形成することができる。例えば、均質化は、約１００〜約３００バールなど、約５０〜６００バールで実施することができる。好ましい実施形態において、リポソームは、有機溶媒を用いずに食品グレードの材料のみを用いて形成される。

[0050]リポソームは、栄養組成物を製造するために用いることができる。いくつかの実施形態において、リン脂質は、苦味ペプチドをカプセル化するリポソームが用いられる栄養組成物中の標準的な原材料である。例えば、リポソームを含めるために栄養組成物の配合を変える必要がないことがある。いくつかの実施形態において、苦味及び／又は疎水性を有しないペプチドの少なくとも一部は、リポソームではカプセル化されない。

[0051]本開示は、本明細書に開示されている任意の方法を用いて作製されたカプセル化された苦味ペプチドを含む栄養組成物を提供する。本開示はまた、カプセル化形態の苦味ペプチドを含む栄養組成物を個体に投与するステップを含む、苦味ペプチドを個体に投与する方法も提供する。本開示はまた、有効量のカプセル化された苦味ペプチドを含む栄養組成物を個体に投与するステップを含む、処置又は予防を必要とする個体において状態を処置又は予防する方法も提供する。

[0052]例えば、一実施形態において、栄養を人に供給する方法は、タンパク質加水分解物由来の苦味ペプチドを含む栄養製剤を人に投与するステップを含む。苦味ペプチドは、オルガノゲル、リポソーム、固体脂質ナノ粒子、及びこれらの組合せからなる群より選択される構造体内にカプセル化されている。

[0053]本発明のカプセル化系は、消化中にカプセル化されたペプチドを好都合に遊離させ、それにより、疎水性ペプチドが依然として生物学的に利用可能であるように加水分解物の生物学的特性を維持しながら、栄養組成物の消費／投与時にはペプチドの苦味をマスクする。

[0054]カプセル化された苦味ペプチドを含む栄養組成物は、医薬製剤、栄養製剤、栄養補助食品、機能性食品、飲料製品、及びこれらの組合せであってもよい。栄養組成物は、長期投与（６週間を超える連続投与）及び／又は短期投与（６週間未満の連続投与）向けであり得る。

[0055]一実施形態において、栄養組成物は、錠剤、カプセル、液体、チュワブル、ソフトゲル、サシェ、粉末、シロップ、液状懸濁物、エマルション、溶液、又はこれらの組合せからなる群より選択される形態である。一実施形態において、栄養組成物は、経口栄養補助剤である。

[0056]栄養組成物は、完全栄養の供給源であってもよい。完全栄養により、投与される動物にとって唯一の栄養源となるのに十分な多量栄養素（タンパク質、脂肪及び炭水化物）及び微量栄養素のタイプ及びレベルが提供される。患者は、このような完全栄養組成物から栄養必要量の１００％を受けることができる。或いは、栄養組成物は不完全栄養の供給源であってもよい。不完全栄養では、投与される動物にとって唯一の栄養源となるのに十分な多量栄養素（タンパク質、脂肪及び炭水化物）及び微量栄養素のレベルが提供されない。部分又は不完全栄養組成物は、栄養補助剤として用いることができる。別の実施形態によれば、栄養組成物は乳児用調乳であってもよい。

[0057]本明細書で用いられる「栄養製品」又は「栄養組成物」は、従来の食品添加物（合成又は天然）、例えば１種若しくは複数の酸味料、追加的増粘剤、緩衝剤若しくはｐＨ調整剤、キレート化剤、着色剤、乳化剤、賦形剤、着香剤、ミネラル、浸透剤、薬学的に許容される担体、防腐剤、安定化剤、糖、甘味剤、調質剤（ｔｅｘｔｕｒｉｚｅｒ）、及び／又はビタミンをはじめとする選択的な追加の原材料を任意の数含むものと理解される。選択的な原材料は、任意の適切な量で添加することができる。栄養製品又は栄養組成物は、完全栄養の供給源であってもよく、又は不完全栄養の供給源であってもよい。

[0058]栄養組成物は、従来の食品添加物（合成又は天然）、例えば１種若しくは複数の酸味料、追加的増粘剤、緩衝剤若しくはｐＨ調整剤、キレート化剤、着色剤、乳化剤、賦形剤、着香剤、浸透剤、薬学的に許容される担体、防腐剤、安定化剤、糖、甘味剤、調質剤、及び／又はビタミンをはじめとする選択的な追加の原材料を任意の数含み得る。例えば、栄養組成物は、乳化剤及び安定化剤、例えばダイズレシチン、モノ及びジグリセリドのクエン酸エステルなどを含有していてもよい。選択的な原材料は、任意の適切な量で添加することができる。

[0059]本開示の栄養組成物は、炭水化物供給源を含有してもよい。炭水化物の好ましい供給源はラクトースであるが、ラクトース、サッカロース、マルトデキストリン、デンプン、及びこれらの混合物などの栄養組成物中に従来から見出される任意の炭水化物供給源が用いられてもよい。一実施形態において、炭水化物供給源は、栄養組成物の総エネルギーの３５％〜６０％に寄与する。

[0060]本開示の栄養組成物は、カプセル化された苦味ペプチド由来の脂質に加えて、脂質の供給源も含有していてもよい。脂質供給源は、栄養組成物での使用に適した任意の脂質又は脂肪であってよい。脂肪供給源としては、高オレイン酸ヒマワリ油及び高オレイン酸サフラワー油が挙げられるが、これらに限定されない。多量の予備形成されたアラキドン酸及びドコサヘキサエン酸を含有する油、例えば魚油又は微生物油が少量添加されてもよいように、必須脂肪酸リノール酸及びα−リノレン酸も添加されてもよい。合計での脂肪含量は、栄養組成物の総エネルギーの約１０％〜約１０％に寄与するようになることが好ましい。

[0061]一実施形態において、栄養組成物は、ω−３脂肪酸の供給源及び／又はω−６脂肪酸の供給源を更に含む。ω−３脂肪酸の供給源としては、魚油、オキアミ、ω−３脂肪酸含有植物供給源、亜麻仁、クルミ、藻、又はこれらの組合せからなる群より選択されてもよい。ω−３脂肪酸は、α−リノレン酸（「ＡＬＡ」）、ドコサヘキサエン酸（「ＤＨＡ」）、エイコサペンタエン酸（「ＥＰＡ」）、又はこれらの組合せからなる群より選択されてもよい。ω−６脂肪酸の供給源としては、植物油（例えばヒマワリ、サフラワー、ダイズ、トウモロコシ、ゴマ、綿実、ブドウ種子、ヤシ、サクラソウ、ルリヂサ及びクルミ）、ナッツ（例えばクルミ、アーモンド及びカシューナッツ）、並びに種子（例えばアマ、アサ、ヒマワリ、ゴマ、マツの実、クロスグリ及びカボチャ）からなる群より選択されてもよい。

[0062]一実施形態において、栄養組成物は、デオキシリボ核酸（「ＤＮＡ」）のサブユニット、リボ核酸（「ＲＮＡ」）のサブユニット、ＤＮＡ及びＲＮＡのポリマー形態、酵母ＲＮＡ、又はこれらの組合せからなる群より選択される少なくとも１種のヌクレオチドを含んでいてもよい。一実施形態において、少なくとも１種のヌクレオチドは外因性ヌクレオチドである。

[0063]一実施形態において、栄養組成物は、フラバノイド、フェノール化合物類、ポリフェノール化合物、テルペノイド、アルカロイド、硫黄含有化合物、又はこれらの組合せからなる群より選択される植物栄養素を更に含む。植物栄養素は、カロテノイド、植物ステロール、ケルセチン、クルクミン、リモニン、又はこれらの組合せからなる群より選択されてもよい。

[0064]栄養組成物は、カプセル化された苦味ペプチド、及び／又は加水分解物の残部に加えて、タンパク質の供給源を更に含んでいてもよい。任意の適切な食物タンパク質、例えば、乳タンパク質、食肉タンパク質及び卵タンパク質などの動物タンパク質、又は、ダイズタンパク質、コムギタンパク質、コメタンパク質、エンドウタンパク質、トウモロコシタンパク質、キャノーラタンパク質、エンバクタンパク質、ジャガイモタンパク質、ピーナッツタンパク質、及びマメ、ソバ若しくはレンズマメから得られる任意のタンパク質などの植物タンパク質が用いられてもよい。乳性タンパク質は、カゼイン、カゼイネート、カゼイン加水分解物、ホエー、ホエー加水分解物、ホエー濃縮物、ホエー単離物、乳タンパク質濃縮物、乳タンパク質単離物、又はこれらの組合せであってもよい。カゼイン及びホエーなどの乳タンパク質、並びに／又はダイズタンパク質が、いくつかの用途では好ましいことがある。一実施形態において、タンパク質供給源は、栄養組成物の総エネルギーの１５％〜３５％に寄与する。

[0065]栄養組成物は、プロバイオティクスを更に含んでいてもよい。プロバイオティクスは、適量を投与された場合、宿主に健康利益をもたらし得る、より詳細には腸内微生物バランスを改善することにより宿主に有益に作用して、宿主の健康又は良好な状態（ｗｅｌｌ−ｂｅｉｎｇ）への効果につながる、食品グレードの微生物体（半生存若しくは弱体化、及び／又は非複製を含む生存状態）、代謝産物、微生物細胞調製物、又は微生物細胞成分である。Ｓａｌｍｉｎｅｎ Ｓ．ら、「Ｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓ：ｈｏｗ ｓｈｏｕｌｄ ｔｈｅｙ ｂｅ ｄｅｆｉｎｅｄ？」、Ｔｒｅｎｄｓ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．、１０、１０７−１０（１９９９）を参照されたい。一般に、これらの微生物体は、腸管内の病原菌の増殖及び／若しくは代謝を阻害する、又はその増殖及び／若しくは代謝に影響を及ぼすと考えられている。プロバイオティクスは、宿主の免疫機能も活性化し得る。

[0066]プロバイオティクスの非限定的例としては、アエロコッカス属（Ａｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）、アスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）、バクテロイデス属（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）、ビフィドバクテリウム属（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、カンジダ属（Ｃａｎｄｉｄａ）、クロストリジウム属（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）、デバロマイセス属（Ｄｅｂａｒｏｍｙｃｅｓ）、エンテロコッカス属（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）、フソバクテリウム属（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ラクトバチルス属（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、ラクトコッカス属（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ）、ロイコノストック属（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）、メリソコッカス属（Ｍｅｌｉｓｓｏｃｏｃｃｕｓ）、ミクロコッカス属（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ）、ムコール属（Ｍｕｃｏｒ）、オエノコッカス属（Ｏｅｎｏｃｏｃｃｕｓ）、ペジオコッカス属（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ）、ペニシリウム属（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）、ペプトストレプトコッカス属（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｏｃｏｃｃｕｓ）、ピチア属（Ｐｉｃｈｉａ）、プロピオニバクテリウム属（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、シュードカテヌラツム属（Ｐｓｅｕｄｏｃａｔｅｎｕｌａｔｕｍ）、リゾプス属（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）、サッカロミセス属（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）、スタフィロコッカス属（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）、ストレプトコッカス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、トルロプシス属（Ｔｏｒｕｌｏｐｓｉｓ）、ワイセラ属（Ｗｅｉｓｓｅｌｌａ）、又はこれらの組合せが挙げられる。

[0067]一実施形態において、栄養組成物は、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、ヒドロキシプロリン、ヒドロキシセリン、ヒドロキシチロシン、ヒドロキシリシン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、タウリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン、又はこれらの組合せからなる群より選択されるアミノ酸を更に含む。

[0068]一実施形態において、栄養組成物は、抗酸化剤を更に含む。抗酸化剤の非限定的例としては、アスタキサンチン、カロテノイド、コエンザイムＱ１０（「ＣｏＱ１０」）、フラボノイド、グルタチオン、ゴジ（ウルフベリー）、ヘスペリジン、ラクトウルフベリー、リグナン、ルテイン、リコペン、ポリフェノール、セレン、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ゼアキサンチン、又はこれらの組合せが挙げられる。

[0069]一実施形態において、栄養組成物は、ビタミンＡ、ビタミンＢ１（チアミン）、ビタミンＢ２（リボフラビン）、ビタミンＢ３（ナイアシン又はナイアシナミド）、ビタミンＢ５（パントテン酸）、ビタミンＢ６（ピリドキシン、ピリドキサール又はピリドキサミン、又はピリドキシン塩酸塩）、ビタミンＢ７（ビオチン）、ビタミンＢ９（葉酸）及びビタミンＢ１２（様々なコバラミン、一般にはビタミンサプリメント中のシアノコバラミン）、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、Ｋ１及びＫ２（即ち、ＭＫ−４、ＭＫ−７）、葉酸、ビオチン、又はこれらの組合せからなる群より選択されるビタミンを更に含む。

[0070]一実施形態において、栄養組成物は、ホウ素、カルシウム、クロム、銅、ヨウ素、鉄、マグネシウム、マンガン、モリブデン、ニッケル、リン、カリウム、セレン、ケイ素、スズ、バナジウム、亜鉛、又はこれらの組合せからなる群より選択されるミネラルを更に含む。ミネラルは、塩の形態で添加されてもよい。特定のミネラル及び他のビタミンの存在及び量は、対象とする個体群によって異なる。

[0071]一実施形態において、栄養組成物が１，６００グラムを含んでいて成人の完全な一日摂取量であると仮定して、栄養組成物は、栄養組成物中に約６．２５ｍｇ〜約１２．５ｍｇ／１００ｇ栄養組成物の量で存在する分枝鎖脂肪酸を含む。或いは、栄養組成物は、１日あたり約１００ｍｇ〜約１，５００ｍｇの分枝鎖脂肪酸を提供する量で提供されてもよい。或いは、栄養組成物は、総脂肪酸の約０．５重量％〜約５重量％の分枝鎖脂肪酸を含んでいてもよい。

[0072]一実施形態において、栄養組成物は、プレバイオティクスも含む。プレバイオティクスは、腸内で有益な細菌の増殖を選択的に促進する、又は病原菌の増殖若しくは粘膜接着を阻害する食物物質である。プレバイオティクスは、これを摂取した人の胃及び／又は腸上部で不活性化されることも、胃腸管に吸収されることもなく、胃腸管のミクロフローラ及び／又はプロバイオティクスによって発酵する。プレバイオティクスは、例えば、Ｇｌｅｎｎ Ｇｉｂｓｏｎら、「Ｄｉｅｔａｒｙ Ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｈｕｍａｎ Ｃｏｌｏｎｉｃ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｔａ：Ｉｎｔｒｏｄｕｃｉｎｇ ｔｈｅ Ｃｏｎｃｅｐｔ ｏｆ Ｐｒｅｂｉｏｔｉｃｓ」、Ｊ．Ｎｕｔｒ．、１２５：１４０１−１４１２（１９９５）により定義される。

[0073]プレバイオティクスの非限定的例としては、アカシアゴム、αグルカン、アラビノガラクタン、βグルカン、デキストラン、フラクトオリゴ糖、フコシルラクトース、ガラクトオリゴ糖、ガラクトマンナン、ゲンチオオリゴ糖、グルコオリゴ糖、グアーガム、イヌリン、イソマルトオリゴ糖、ラクトネオテトラオース、ラクトスクロース、ラクツロース、レバン、マルトデキストリン、ミルクオリゴ糖、部分加水分解グアーガム、ペクチンオリゴ糖、耐性デンプン、老化デンプン、シアロオリゴ糖、シアリルラクトース、ダイズオリゴ糖、糖アルコール、キシロオリゴ糖、又はこれらの加水分解物、又はこれらの組合せが挙げられる。

[0074]いくつかの実施形態において、栄養組成物は、腸のミクロフローラを改善するために共に作用するプレバイオティクス及びプロバイオティクスの両方を含有するシンバイオティクスであってもよい。

[0075]限定ではなく例として、以下の実施例は本開示の実施形態を例示するものである。
[0076]

[0077]以下の実施例は、タンパク質加水分解物由来の苦味ペプチドのカプセル化の概念を発展させ、そして裏づける科学データを表す。

[0078]実施例１
[0079]ダイズ又は卵から抽出された１％のリン脂質を、１０重量％の加水分解タンパク質を含有する水に添加し、続いて均質化することによって、リポソームを形成した。Ｋｅｒｒｙ Ｇｒｏｕｐのハイプロール（Ｈｙｐｒｏｌ）（商標）３３１５を、加水分解タンパク質として使用した。アッセイを表１に詳細に示す。

[0080]表１：試験で使用したリン脂質

[0081]サイズ分布分析は、リポソームが形成されたことを示している（表２参照）。各試料を２００バールで均質化した結果、リポソーム形成の特徴である２００〜３００ｎｍの範囲のサイズ分布を有する凝集物群が生じた。

[0082]表２：試験のサイズ分布分析

[0083]図１に示すように、脂質を染色するナイルレッドを用いた蛍光顕微鏡検査も、凝集物の形成を示した。

[0084]苦味ペプチドが疎水性相互作用によりリポソームの脂質二重層内に移動したことを確かめるため、異なる溶液の食味検査を実施した。図２に示すように、試料の苦味を、７人の訓練されたパネリストにより、最も苦味のないもの（ランク１）から最も苦味のあるもの（ランク６）までランク付けした。結果は、水中に１０％のハイプロール（商標）３３１５のみを含有する対照と比較して、エッグＰＣ（Ｅｇｇ ＰＣ）リポソーム内にカプセル化された苦味ペプチドが最も低減した苦味を有していたこと、そしてダイズから抽出されたトプシチン（Ｔｏｐｃｉｔｈｉｎ）（商標）内にカプセル化された苦味ペプチドの苦味が２番目に低減されていたことを示している。対照と比較してアッセイの大部分で苦味が減少したことは、苦味ペプチドが確かにリポソーム内に移動したということを示している。

[0100]実施例２
[0101]苦味ペプチドがオルガノゲル及び固体脂質ナノ粒子の油相内に移動することを確かめるため、油又は溶融脂肪、及び１０％のハイプロール（商標）３３１５を溶解させた水相を含有するエマルションを調製した。３０分間の撹拌の後、水相及び油相をデカンテーションにより分離した。次いで、抽出された水相を、訓練されたパネリスト集団が食味検査した。抽出ステップは、評価のために用いられるものであり、栄養組成物で用いられるカプセル化された苦味ペプチドの実施形態の大部分では用いられないことに留意することは重要である。

[0102]試料は、乳脂肪、カカオ脂、又は中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）とダイズレシチンとの混合物で調製した。油／脂肪のそれぞれを、抽出前に、４重量％の量で１０％ハイプロール（商標）３３１５溶液に添加した。１３人の訓練されたパネリストが、試料を最も苦味のないもの（ランク１）から最も苦味のあるもの（ランク４）までランク付けした。図３に示すように、カカオ脂の試料は参照よりやや苦味が少なく、乳脂肪及びＭＣＴ／ダイズレシチン混合物で抽出した加水分解物は、参照より大幅に苦味が少ないと知覚された。結果にフリードマン検定を実施し（グローバルリスク５％）、それにより、対照と比較して乳脂肪及びＭＣＴ／ダイズ脂肪抽出物で苦味の減少が知覚されたことは、統計的に有意なものであると結論づけられた。

[0103]実施例３
[0104]固体脂質ナノ粒子内での苦味ペプチドのカプセル化を更に調べるため、流動層被覆（Ｇｌａｔｔ、ベンチスケール）を用いて、ハイプロール（商標）３３１５の脂肪被覆を実施した。得られた固体脂質ナノ粒子を図４に示す。脂肪被覆を実施した後では、１０％ハイプロール（商標）３３１５の再構成溶液にもはや苦味はなく、このことは、疎水性苦味ペプチドが固体脂質ナノ粒子内にカプセル化されていて、水中には放出されていなかったことを意味している。

[0105]実施例４
[0106]オルガノゲル内での苦味ペプチドのカプセル化を更に調べるため、ハイプロール（商標）３３１５をヒマワリ油に分散させ、次いでモノグリセリドゲル化剤（ディモダン（Ｄｉｍｏｄａｎ）（商標））を添加することによって、オルガノゲルを形成した。ゲル化の後、１０％ハイプロール（商標）３３１５の再構成溶液の苦味が大幅に低減しており、このことは、疎水性苦味ペプチドがオルガノゲル内にカプセル化されていて、オルガノゲルから水中には放出されていなかったことを意味している。

[0107]本明細書に記載された現在の好ましい実施形態への様々な変更及び改良が、当業者に明らかになるであろうことは、理解されるべきである。本発明の主題の主旨及び範囲から逸脱することなく、そして意図された利点を減ずることなく、そのような変更及び改良を施すことができる。つまり、そのような変更及び改良は、添付の特許請求の範囲に含まれるものとする。

Claims (7)

1. 構造体内にカプセル化された疎水性苦味ペプチドを含む栄養組成物であって、
   前記構造体が、油又は溶融脂肪と、リン脂質、レシチン、モノグリセリド、両親媒性ペプチド、ソルビタンモノステアレート、モノ、ジ及び／若しくはトリアシルグリセロール、脂肪酸、脂肪族アルコール、ワックス、フィトステロール、並びに／又はこれらの組合せからなるリストより選択されるゲル化剤と、を含むオルガノゲルである、栄養組成物。
2. タンパク質加水分解物を含有する水相、及び、油又は溶融脂肪の少なくとも１種を含む油相を含む、エマルションを形成するステップと、
   前記タンパク質加水分解物由来の疎水性苦味ペプチドが前記油相中の油滴内に移動した後に、ゲル化剤を前記エマルションに添加して、前記油滴をゲル化させることによりオルガノゲルを形成するステップと、を含み、
   前記ゲル化剤の添加によって、前記疎水性苦味ペプチドが前記オルガノゲル内に取り込まれる、疎水性苦味ペプチドをカプセル化する方法。
3. タンパク質を加水分解して前記タンパク質加水分解物を含む溶液を生じるステップを含み、前記加水分解の後、前記タンパク質加水分解物を含む前記溶液中に直接前記エマルションが形成されるようにして、前記疎水性苦味ペプチドが前記オルガノゲル内にインラインで取り込まれる、請求項２に記載の方法。
4. 前記タンパク質加水分解物が、乳タンパク質加水分解物である、請求項２又は３に記載の方法。
5. 前記加水分解により非苦味ペプチドが形成され、前記非苦味ペプチドの少なくとも一部が前記油相内には取り込まれない、請求項３に記載の方法。
6. オルガノゲルである構造体と、該構造体内にカプセル化された疎水性苦味ペプチドとを含む、カプセル化疎水性苦味ペプチド。
7. タンパク質加水分解物由来の疎水性苦味ペプチドを含む栄養組成物を、ヒトを除く動物に投与するステップを含み、前記疎水性苦味ペプチドが、オルガノゲルである構造体内にカプセル化されている、栄養を前記動物に供給する方法。