JP6470984B2 - アロマターゼ阻害剤及びこれを含む医薬 - Google Patents

Description

本発明は、クマリン骨格を有する化合物を有効成分とするアロマターゼ阻害剤及びこれを含む医薬に関する。

女性死因の上位を占める乳がんの約６〜７割において、がん細胞の増殖はエストロゲン（女性ホルモン）依存性である。また、女性に特有の疾患である子宮筋腫、子宮内膜症及び子宮内膜がん等も、エストロゲン依存性の疾患である。

閉経前の女性の体内ではエストロゲンは卵巣から主に供給されるが、閉経後は、副腎から産生される男性ホルモンの一種であるアンドロゲンが末梢組織中のアロマターゼ（ＣＹＰ１９とも呼ばれる）によってエストロゲンへと変換されることで供給されている。そのため、アロマターゼは、エストロゲン受容体と共に、閉経後乳がんを含む各種のエストロゲン依存性疾患の治療における標的分子の一つとなっている。

アロマターゼ阻害活性を有する化合物は数多く開発され、臨床的にも利用されている。その多くはエキセメスタンなどのステロイド系化合物とアナストロゾールなどのアゾール系化合物に大別される。しかし、いずれの化合物も、肝障害、投与部位の疼痛、さらには重症薬疹（Ｓｔｅｖｅｎｓ−Ｊｏｈｎｓｏｎ症候群）等の副作用を伴いやすいという問題を有する。したがって、ステロイド系化合物又はアゾール系化合物とは異なる骨格構造を有する化合物を有効成分とするアロマターゼ阻害剤が求められている。

このような新たな骨格構造を有する化合物として、ジヒドロイソクマリン類（非特許文献１）及びクマリン誘導体（非特許文献２）が報告されている。クマリン骨格を有する化合物はステロイド系化合物又はアゾール系化合物のいずれにも属さず、したがって上記のような副作用を伴う可能性は低いと期待されている。

Ｅｎｄｒｉｎｇｅｒら、Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｐｒｏｄ．、第７１巻、第６号、第１０８２−１０８４ページ Ｃｈｅｎら、２００４年、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、第２７９巻、第４６号、第４８０７１−４８０７８ページ

本発明は、ステロイド系化合物又はアゾール系化合物とは異なる、アロマターゼ阻害活性を有する化合物を提供することを目的とするものである。

本発明者らは、クマリン骨格を有する既知の化合物の一部がアロマターゼ阻害活性を有することを見いだし、下記の各発明を完成させた。
（１）下記式（１）

［式（１）中、Ｘは水素又はＣ１〜Ｃ６のジアルキルアミノであり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４はいずれか１の置換基が下記式（２）〜（８）のいずれかであるが他の３つの置換基は水素であり、

式（３）〜式（８）中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６のアルキル、Ｃ１〜Ｃ６のアルコキシカルボニル、置換されていてもよいアミド又は置換されていてもよいフェニルであり、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒｅ及びＲｆは、それぞれ独立して、Ｃ１〜Ｃ６のアルキルを示す］の化合物、その異性体、製薬上許容しうるそれらの塩又はこれらの混合物を有効成分とするアロマターゼ阻害剤。
（２）５−（７−ジエチルアミノクマリン−３−イル）−３，３−ジメトキシインドリン−２−オン（化合物Ｎｏ．４４）、
５−（クマリン−３−イル）−３，３−ジメトキシインドリン−２−オン（化合物Ｎｏ．４７）、
５−（クマリン−４−イル）−３，３−ジメトキシインドリン−２−オン（化合物Ｎｏ．４８）、
５−（クマリン−５−イル）−３，３−ジメトキシインドリン−２−オン（化合物Ｎｏ．４９）、
５−（クマリン−６−イル）−３，３−ジメトキシインドリン−２−オン（化合物Ｎｏ．５１）、
６−（７−ジエチルアミノクマリン−３−イル）−３，３−ジメトキシインドリン−２−オン（化合物Ｎｏ．５３）、
５−（７−ジエチルアミノクマリン−３−イル）イサチン（化合物Ｎｏ．５６）、
５−（クマリン−３−イル）イサチン（化合物Ｎｏ．５９）
５−（クマリン−４−イル）イサチン（化合物Ｎｏ．６０）、
５−（クマリン−５−イル）イサチン（化合物Ｎｏ．６１）、
５−（クマリン−６−イル）イサチン（化合物Ｎｏ．６２）、
７−ジエチルアミノ−３−（７−ジエチルアミノクマリン−３−イル）クマリン（化合物Ｎｏ．６５）、
７−ジエチルアミノ−３−（オキサゾ−５−イル）クマリン（化合物Ｎｏ．６６）、
７−ジエチルアミノ−３−（５−メチル−１，３，４−オキサジアゾ−２−イル）クマリン（化合物Ｎｏ．６７）及び
エチル ２−（７−ジエチルアミノクマリン−３−イル）−４−メトキシオキサゾ−ル−５−カルボキシレート（化合物Ｎｏ．６８）
よりなる群から選択される化合物、その異性体、製薬上許容しうるそれらの塩又はこれらの混合物を有効成分とするアロマターゼ阻害剤。
（３）（１）又は（２）に記載のアロマターゼ阻害剤を含む医薬。
（４）エストロゲン依存性疾患の治療及び／又は予防のための、（３）に記載の医薬
（５）閉経後乳がんの治療及び／又は予防のための（３）又は（４）に記載の医薬。

本発明における化合物は、ステロイド系化合物又はアゾール系化合物と比較して副作用のおそれの少ないアロマターゼ阻害剤として、エストロゲン依存性の疾患、特に閉経後乳がんの治療及び／又は予防に利用することができる。

＜定義＞
「Ｃ１〜Ｃ６のアルキル」は、１〜６個の炭素原子を有する直鎖又は分岐鎖の飽和炭化水素基を意味し、限定するものではないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ｓｅｃ−ペンチル、ｔｅｒｔ−イソペンチル、ｎ−ヘキシル、イソヘキシル、ｓｅｃ−ヘキシル、ｔｅｒｔ−イソヘキシルなどが挙げられる。

「Ｃ１〜Ｃ６のジアルキルアミノ」は、−Ｎ−（Ｃ１〜Ｃ６のアルキル）_２で表される基を意味し、限定するものではないが、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ジプロピルアミノ、メチルエチルアミノ、メチルプロピルアミノ、エチルプロピルアミノなどが挙げられる。

「Ｃ１〜Ｃ６のアルコキシカルボニル」は、−ＣＯＯ−（Ｃ１〜Ｃ６のアルキル）で表される基を表し、限定するものではないが、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｎ−プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ｎ−ブトキシカルボニル、イソブトキシカルボニル、ｓｅｃ−ブトキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、ｎ−ペンチルオキシカルボニル、イソペンチルオキシカルボニル、ｓｅｃ−ペンチルオキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ペンチルオキシカルボニル、ｎ−ヘキシルオキシカルボニル、イソヘキシルオキシカルボニル、ｓｅｃ−ヘキシルオキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ヘキシルオキシカルボニルなどが挙げられる。

「置換されていてもよいアミド」は、−ＣＯ−ＮＨ_２で表されるアミド基の１又は２個の水素が、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６のアルキル、Ｃ１〜Ｃ６のアルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６のハロゲノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６のアルコキシカルボニル、Ｃ１〜Ｃ６のアルキルアミノ及び／又はＣ２〜Ｃ５のアルケニルによりそれぞれ独立して置換されていてもよい基を意味する。

「置換されていてもよいフェニル」は、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６のアルキル、Ｃ１〜Ｃ６のアルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６のハロゲノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６のアルコキシカルボニル、Ｃ１〜Ｃ６のアルキルアミノ及び／又はＣ２〜Ｃ５のアルケニルにより置換されていてもよいフェニルを意味する。

「ハロゲン」は塩素、フッ素、臭素及びヨウ素よりなる群から選択される任意の原子を意味する。

「Ｃ１〜Ｃ６のアルコキシ」は、酸素原子を介して分子に結合される１〜６個の炭素原子を有するアルキル基を意味し、限定するものではないが、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ｎ−ペンチルオキシ、イソペンチルオキシ、ｓｅｃ−ペンチルオキシ、ｔｅｒｔ−ペンチルオキシ、ｎ−ヘキシルオキシ、イソヘキシルオキシ、ｓｅｃ−ヘキシルオキシ、ｔｅｒｔ−ヘキシルオキシなどが挙げられる。

「Ｃ１〜Ｃ６のハロゲノアルキル」は、ハロゲンによって置換された１〜６個の炭素原子を有するアルキルを意味し、限定するものではないが、フルオロメチル、クロロメチル、ブロモメチル、ヨードメチル、ジクロロメチル、トリフルオロメチル及びトリクロロメチル、クロロエチル、ジクロロエチル、トリクロロエチル及びクロロプロピルなどのモノ、ジ又はトリ置換ハロゲン化メチルなどが挙げられる。

「Ｃ１〜Ｃ６のアルキルアミノ」は、−ＮＨ−（Ｃ１〜Ｃ６のアルキル）、又はＮ−（Ｃ１〜Ｃ６のアルキル）_２で表される基を意味し、限定するものではないが、メチルアミノ、エチルアミノ、プロピルアミノ、ブチルアミノ、ペンチルアミノ、ヘキシルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ及びメチルエチルアミノなどが挙げられる。

「Ｃ２〜Ｃ５のアルケニル」は、２〜５個の炭素原子及び１つの不飽和二重結合を有する炭化水素基を意味し、限定するものではないが、ビニル、アリルなどが挙げられる。

「異性体」は、本用語が用いられる化合物において存在し得るエナンチオマー、ジアステレオマー（シス−トランス異性体を含む）、配座異性体、二重結合におけるシス−トランス異性体などを意味する。

本発明は、下記式（１）

［式（１）中、Ｘは水素又はＣ１〜Ｃ６のジアルキルアミノであり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４はいずれか１の置換基が下記式（２）〜（８）のいずれかであるが他の３つの置換基は水素であり、

式（３）〜式（８）中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６のアルキル、Ｃ１〜Ｃ６のアルコキシカルボニル、置換されていてもよいアミド又は置換されていてもよいフェニルであり、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒｅ及びＲｆは、それぞれ独立して、Ｃ１〜Ｃ６のアルキルを示す］の化合物、その異性体、製薬上許容しうるそれらの塩又はこれらの混合物を有効成分とするアロマターゼ阻害剤に関する。

式（１）に示される化合物は、アロマターゼによるアンドロゲンからエストロゲンへの変換反応を阻害することができ、したがってアロマターゼ阻害剤として利用することができる。

式（１）に示される化合物において特に好ましい化合物は下記表１〜表３に示される通りである。なお、表中、Ｍｅはメチルを、Ｅｔはエチルをそれぞれ表す。

式（１）においてＲ１〜Ｒ４のいずれかが式（３）である化合物、例えば表１の化合物Ｎｏ．４４〜５１は、クマリン骨格の３位、４位、５位又は６位のいずれか１つに臭素（Ｂｒ）を有するクマリン又は７−ジアルキルアミノクマリンと、５−（トリブチルスタニル）−３，３−ジアルコキシインドリン−２−オンとを適当な溶媒中でパラジウム触媒を用いて反応させることで合成することができる。また、上記の臭素置換されたクマリン又は７−ジアルキルアミノクマリンの代わりに、トリフルオロメタンスルホニロキシ（−ＯＴｆ）により置換されたクマリン又は７−ジアルキルアミノクマリンを用いても、式（１）においてＲ１〜Ｒ４のいずれかが式（３）である化合物を合成することができる。

さらにこのようにして合成された化合物を酸性条件下で加水分解して脱アセタール化することで、Ｒ１〜Ｒ４のいずれかが式（２）である化合物、例えば化合物Ｎｏ．５６〜６２を合成することができる。

式（１）においてＲ１〜Ｒ４のいずれかが式（４）である化合物、例えば表１の化合物Ｎｏ．５３は、クマリン骨格の３位、４位、５位又は６位のいずれか１つに臭素（Ｂｒ）を有するクマリン又は７−ジアルキルアミノクマリンを適当な溶媒中、パラジウム触媒の存在下でトリブチルスタニル化し、これをさらにパラジウム触媒の存在下で６−ブロモ−３，３−ジアルキルインドリン−２−オンと反応させることで合成することができる。

式（１）においてＲ１〜Ｒ４のいずれかが式（５）である化合物、例えば化合物Ｎｏ．６５は、クマリン骨格の３位、４位、５位又は６位に臭素（Ｂｒ）を有するクマリン又は７−ジアルキルアミノクマリンを、スズ及びパラジウム触媒の存在下でカップリングさせることで合成することができる。

式（１）においてＲ１が式（６）である化合物、例えば化合物Ｎｏ．６６は、下記スキーム（Ａ）によって合成することができる。

スキーム（Ａ）

また、式（１）においてＲ１が式（６）である化合物は、下記スキーム（Ｂ）によって合成することもできる。

スキーム（Ｂ）

スキーム（Ａ）及び（Ｂ）において、Ｘは水素又はＣ１〜Ｃ６のジアルキルアミノであり、Ｒ５は水素、Ｃ１〜Ｃ６のアルキル、Ｃ１〜Ｃ６のアルコキシカルボニル又は置換されていてもよいフェニルである。また、Ｒ２〜Ｒ４のいずれかに式（６）の置換基を有する式（１）の化合物も、上記スキーム（Ａ）又は（Ｂ）に倣って合成することができる。

また、式（１）においてＲ１が式（７）又は（８）である化合物は、下記スキーム（Ｃ）又は（Ｄ）によって合成することができる。

スキーム（Ｃ）

スキーム（Ｄ）

スキーム（Ｃ）及び（Ｄ）において、Ｘは水素又はＣ１〜Ｃ６のジアルキルアミノであり、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は互いに独立して水素、Ｃ１〜Ｃ６のアルキル、Ｃ１〜Ｃ６のアルコキシカルボニル又は置換されていてもよいフェニルである。またＲ２〜Ｒ４のいずれかに式（７）又は（８）の置換基を有する式（１）の化合物も、上記スキーム（Ｃ）又は（Ｄ）に倣って合成することができる。

上記の合成は適当な溶媒中で行われる。利用可能な溶媒としては、反応に悪影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、クロロホルムの他に、たとえば塩化メチレン、ベンゼン、トルエン及びキシレンなどの芳香族炭化水素類、ジオキサン、テトラヒドロフラン、アニソール、ジエチレングリコールジエチルエーテル及びジメチルセロソルブなどのエーテル類、アセトニトリルなどのニトリル類、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドなどのアミド類、メタノール、エタノール及びプロパノールなどのアルコール類、ジメチルスルホキシドなどのスルホキシド類並びに水などを挙げることができる。これらの溶媒は、一種又は二種以上混合して使用することもできる。

上記の合成において、各化合物は必要に応じて当業者に知られた適当な保護剤で保護されていてもよい。かかる保護剤及び脱保護反応は、保護される置換基に応じて当業者が適宜選択し、使用することができる。

後の実施例に示すように、前記式（１）に示される化合物、特に前記表１に列記される化合物は、アロマターゼの酵素活性を阻害することが確認された。本発明は、前記式（１）に示される化合物、特に前記表１に列記される化合物よりなる群から選択される化合物、その異性体、製薬上許容しうるそれらの塩又はこれらの混合物を有効成分とするアロマターゼ阻害剤及びこれを含む医薬を提供するものである。

製薬上許容しうる塩としては、通常知られているアミノ基などの塩基性基又はヒドロキシル基、ホスホリル基もしくはカルボキシル基などの酸性基における塩を挙げることができる。

塩基性基における塩としては、たとえば、塩酸、臭化水素酸及び硫酸などの鉱酸との塩、酒石酸、ギ酸、クエン酸、トリクロロ酢酸及びトリフルオロ酢酸などの有機カルボン酸との塩、並びにメタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メシチレンスルホン酸及びナフタレンスルホン酸などのスルホン酸との塩などを挙げることができる。

酸性基における塩としては、たとえば、ナトリウム及びカリウムなどのアルカリ金属との塩、カルシウム及びマグネシウムなどのアルカリ土類金属塩との塩、アンモニウム塩、並びにトリメチルアミン、トリエチルアミン、トリブチルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン、Ｎ−メチルピペリジン、Ｎ−メチルモルホリン、ジエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、プロカイン、ジベンジルアミン、Ｎ−ベンジル−β−フェネチルアミン、１−エフェナミン及びＮ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミンなどの含窒素有機塩基との塩などを挙げることができる。

上記の塩の中で、好ましい塩としては薬理学的に許容される塩が挙げられる。

本発明におけるアロマターゼ阻害剤は、賦形剤、結合剤、崩壊剤、崩壊抑制剤、固結・付着防止剤、滑沢剤、吸収・吸着担体、溶剤、増量剤、等張化剤、溶解補助剤、乳化剤、懸濁化剤、増粘剤、被覆剤、吸収促進剤、ゲル化・凝固促進剤、光安定化剤、保存剤、防湿剤、乳化・懸濁・分散安定化剤、着色防止剤、脱酸素・酸化防止剤、矯味・矯臭剤、着色剤、起泡剤、消泡剤、無痛化剤、帯電防止剤、緩衝・ｐＨ調節剤などの各種医薬品添加物を配合して医薬、好ましくは医薬組成物とすることができ、さらにこれを含む経口剤（錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、細粒剤、丸剤、懸濁剤、乳剤、液剤、シロップ剤など）、注射剤、坐剤、外用剤（軟膏剤、貼付剤など）、エアゾール剤などの製剤を調製することもできる。

錠剤、散剤、顆粒剤などの経口用固形製剤は、例えば、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、無水第二リン酸カルシウム、部分アルファ化デンプン、コーンスターチ及びアルギン酸などの賦形剤、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロース、セラック、メチルセルロース、エチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、アラビアゴム、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、水及びエタノールなどの結合剤、乾燥デンプン、アルギン酸、寒天末、デンプン、架橋ポリビニルピロリドン、架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム及びデンプングリコール酸ナトリウムなどの崩壊剤、ステアリルアルコール、ステアリン酸、カカオバター及び水素添加油などの崩壊抑制剤、ケイ酸アルミニウム、リン酸水素カルシウム、酸化マグネシウム、タルク、無水ケイ酸などの固結防止・付着防止剤、カルナバロウ、軽質無水ケイ酸、ケイ酸アルミニウム、ケイ酸マグネシウム、硬化油、硬化植物油誘導体、胡麻油、サラシミツロウ、酸化チタン、乾燥水酸化アルミニウムゲル、ステアリン酸、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、リン酸水素カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム及びポリエチレングリコールなどの滑沢剤、第４級アンモニウム塩、ラウリル硫酸ナトリウム、尿素及び酵素などの吸収促進剤、デンプン、乳糖、カオリン、ベントナイト、無水ケイ酸、含水二酸化ケイ素、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム及びコロイド状ケイ酸などの吸収・吸着担体といった固形製剤化医薬用添加物を用い、常法に従い調製すればよい。

さらに錠剤は、必要に応じ、通常の剤皮を施した錠剤、例えば、糖衣錠、ゼラチン被包錠、胃溶性被覆錠、腸溶性被覆錠及び水溶性フィルムコーティング錠とすることができる。

カプセル剤は、上記で例示した各種の医薬組成物を、硬質ゼラチンカプセル及び軟質カプセルなどに充填して調製される。

また、溶剤、増量剤、等張化剤、溶解補助剤、乳化剤、懸濁化剤、増粘剤などの上記した各種の液体製剤化用添加物を用い、常法に従い調製して、水性又は油性の懸濁液、溶液、シロップ及びエリキシル剤とすることもできる。

注射剤は、例えば、水、エチルアルコール、マクロゴール、プロピレングリコール、クエン酸、酢酸、リン酸、乳酸、乳酸ナトリウム、硫酸及び水酸化ナトリウムなどの希釈剤、クエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム及びリン酸ナトリウムなどのｐＨ調整剤及び緩衝剤、ピロ亜硫酸ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸、チオグリコール酸及びチオ乳酸などの安定化剤、食塩、ブドウ糖、マンニトール又はグリセリンなどの等張化剤、カルボキシメチルセルロースナトリウム、プロピレングリコール、安息香酸ナトリウム、安息香酸ベンジル、ウレタン、エタノールアミン、グリセリンなどの溶解補助剤、グルコン酸カルシウム、クロロブタノール、ブドウ糖、ベンジルアルコールなどの無痛化剤、及び局所麻酔剤などの液体製剤化用の医薬品添加物を用い、常法に従い調製すればよい。

坐剤は、例えば、ポリエチレングリコール、カカオ脂、ラノリン、高級アルコール、高級アルコールのエステル類、ゼラチン、半合成グリセライド及びウィテップゾールなどに適当な吸収促進剤を添加し調製すればよい。

ペースト、クリーム及びゲル形態の軟膏剤は、例えば、白色ワセリン、ポリエチレン、パラフィン、グリセリン、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコン及びベントナイトなどの基剤、パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピルなどの保存剤、安定剤、湿潤剤などの医薬品添加物を用い、常法により混合、製剤化すればよい。

貼付剤を製造する場合には、通常の支持体に上記軟膏、クリーム、ゲル又はペーストなどを常法により塗布すればよい。支持体としては、綿、スフ及び化学繊維からなる織布又は不織布、軟質塩化ビニル、ポリエチレン及びポリウレタンなどのフィルム又は発泡体シートが使用できる。

上記医薬製剤の投与方法は、特に限定されないが、製剤の形態、患者の年齢その他の条件、患者の症状の程度に応じて適宜決定される。

本発明の医薬の有効成分の投与量は、用法、患者の年齢、疾患の形態、その他の条件などに応じて適宜選択されるが、通常成人に対して１日０．１〜１００ｍｇ／ｋｇを１回から数回に分割して投与すればよい。

以下の実施例によって本発明をさらに詳細に説明する。なお、溶離液における混合比は、すべて容量比である。

＜実施例１＞化合物Ｎｏ．６５の合成

無水条件下、４−（ジエチルアミノ）−２−ヒドロキシベンズアルデヒド２．０ｇ、メチル（トリフェニルホスホラニリデン）アセテート３．８ｇの混合物を１８０℃で２時間撹拌した。室温に冷却後、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝２／１）、７−ジエチルアミノクマリンの黄色結晶２．２ｇを得た。

無水条件下、７−ジエチルアミノクマリン４３２ｍｇのアセトニトリル５０ｍＬ溶液にＮ−ブロモスクシンイミド３５６ｍｇのアセトニトリル２０ｍＬ溶液を添加した。室温で１８時間撹拌した後、濃縮してシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝４／１）、３−ブロモ−７−ジエチルアミノクマリンの黄色結晶５８５ｍｇを得た。

アルゴン雰囲気下、３−ブロモ−７−ジエチルアミノクマリン１００ｍｇのＤＭＦ５ｍＬ溶液に、ビストリ−ｎ−ブチルスズ１９６ｍｇ、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム３５ｍｇを添加し、８０℃で一晩撹拌した。室温に冷却後濃縮してシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝２／１）、７−ジエチルアミノ−３−（７−ジエチルアミノクマリン−３−イル）クマリン（化合物Ｎｏ．６５）
の黄色結晶１１７ｍｇを得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ（ｐｐｍ）：１．２２（ｔ，１２Ｈ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），３．４２（ｑ，８Ｈ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），６．５０（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝２．３Ｈｚ），６．６０（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，９．２Ｈｚ），７．３４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝９．２Ｈｚ），８．４３（ｓ，２Ｈ）

＜実施例２＞化合物Ｎｏ．４４及びＮｏ．５６の合成

５−ブロモイサチン２２６ｍｇのメタノール４０ｍＬ溶液に塩酸１ｍＬを添加した。室温で２４時間撹拌した後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を添加して５分撹拌してから、濃縮してメタノールを留去した。反応液を酢酸エチルで抽出し、有機層を水、飽和食塩水で洗った後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。有機層を濃縮してシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝２／１）、５−ブロモ−３，３−ジメトキシインドリン−２−オンの黄色結晶２５０ｍｇを得た。

アルゴン雰囲気下、５−ブロモ−３，３−ジメトキシインドリン−２−オン５００ｍｇのトルエン１２ｍＬ溶液に、ビストリ−ｎ−ブチルスズ１．５ｍＬ、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム２２ｍｇを添加し、８０℃で４８時間撹拌した。室温に冷却後濃縮してシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝４／１）、５−（トリブチルスタニル）−３，３−ジメトキシインドリン−２−オンの褐色油状物質７５０ｍｇを得た。

アルゴン雰囲気下、３−ブロモ−７−ジエチルアミノクマリン３０ｍｇ、５−（トリブチルスタニル）−３，３−ジメトキシインドリン−２−オン４８ｍｇ、ヨウ化銅（Ｉ）４ｍｇのＤＭＦ１ｍＬ溶液に、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム６ｍｇを添加し、５５℃で６０時間撹拌した。室温に冷却後、反応液に酢酸エチルを添加し、有機層を水、飽和食塩水で洗った後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。有機層を濃縮してシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）、５−（７−ジエチルアミノクマリン−３−イル）−３，３−ジメトキシインドリン−２−オン、化合物Ｎｏ．４４）の白色結晶３１ｍｇを得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ（ｐｐｍ）：１．２３（ｔ，６Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），３．４３（ｑ，４Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），３．６１（ｓ，６Ｈ），６．５３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．５Ｈｚ），６．６０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，８．８Ｈｚ），６．９１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．３１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．６８（ｓ，１Ｈ），７．７０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，８．２Ｈｚ），７．７５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．７Ｈｚ），７．７８（ｂｒｏａｄ ｓ，１Ｈ）

５−（７−ジエチルアミノクマリン−３−イル）−３，３−ジメトキシインドリン−２−オン５０ｍｇの８０％酢酸１０ｍＬ溶液を６０℃で１時間撹拌した。室温に冷却後、濃縮した残渣に酢酸エチルを添加し、有機層を水、飽和食塩水で洗った後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。有機層を濃縮してシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）、５−（７−ジエチルアミノクマリン−３−イル）イサチン（化合物Ｎｏ．５６）の褐色結晶３９ｍｇを得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ（ｐｐｍ）：１．１２（ｔ，６Ｈ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），３．４３（ｑ，４Ｈ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），６．５５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．３Ｈｚ），６．７３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，８．８Ｈｚ），６．９４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．４９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．８３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．７Ｈｚ），７．９３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，８．２Ｈｚ），８．１２（ｓ，１Ｈ）１１．１４（ｓ，１Ｈ）

＜実施例３＞化合物Ｎｏ．４８の合成

アルゴン雰囲気下、４−ヒドロキシクマリン１０ｇ、臭化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム２４ｇ、五酸化二リン２２ｇのトルエン１５０ｍＬ溶液を１００℃で１時間撹拌した。室温に冷却後、反応液に酢酸エチルを添加し、有機層を水、飽和食塩水で洗った後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。有機層を濃縮してシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝５／１）、４−ブロモクマリンの白色結晶１３ｇを得た。

アルゴン雰囲気下、４−ブロモクマリン１．８ｇ、５−（トリブチルスタニル）−３，３−ジメトキシインドリン−２−オン３．９ｇ、ヨウ化銅（Ｉ）０．２ｇのＤＭＦ７０ｍＬ溶液に、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム０．５ｇを添加し、５５℃で６０時間撹拌した。室温に冷却後、反応液に酢酸エチルを添加し、有機層を水、飽和食塩水で洗った後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。有機層を濃縮してシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）、５−（クマリン−４−イル）−３，３−ジメトキシインドリン−２−オン（化合物Ｎｏ．４８）の白色結晶１．５ｇを得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ（ｐｐｍ）：３．６３（ｓ，６Ｈ），６．４０（ｓ，１Ｈ），７．０９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．２６〜７．２９（１Ｈ），７．４３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．４６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，８．６Ｈｚ），７．５１〜７．５２（２Ｈ），７．５６〜７．５９（１Ｈ），８．５９（ｓ，１Ｈ）

＜実施例４＞化合物Ｎｏ．４９の合成

アルゴン雰囲気下、５−ヒドロキシクマリン０．６ｇのピリジン３０ｍＬ溶液を氷冷し、トリフルオロメタンスルホン酸無水物０．８ｍＬを添加し、室温で２４時間撹拌した。反応液に酢酸エチルを添加し、有機層を１Ｍ塩酸、水、飽和食塩水で洗った後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。有機層を濃縮してシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝５／１）、５−トリフルオロメタンスルホニロキシクマリンの無色結晶０．８ｇを得た。

アルゴン雰囲気下、５−トリフルオロメタンスルホニロキシクマリン２００ｍｇ、５−（トリブチルスタニル）−３，３−ジメトキシインドリン−２−オン３２８ｍｇ、ヨウ化銅（Ｉ）２７ｍｇのＤＭＦ２０ｍＬ溶液に、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム４０ｍｇを添加し、５５℃で４８時間撹拌した。室温に冷却後、反応液に酢酸エチルを添加し、有機層を水、飽和食塩水で洗った後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。有機層を濃縮してシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）、５−（クマリン−５−イル）−３，３−ジメトキシインドリン−２−オン（化合物Ｎｏ．４９）の褐色結晶１４４ｍｇを得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ（ｐｐｍ）：３．４３（ｓ，３Ｈ），３．４４（ｓ，３Ｈ），６．４６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１０．０Ｈｚ），７．００（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，８．０Ｈｚ），７．３０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．３５〜７．３８（１Ｈ），７．４０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．４３（ｓ，１Ｈ），７．６２〜７．６６（１Ｈ），７．７９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１０．０Ｈｚ），１０．７２（ｓ，１Ｈ）

＜実施例５＞化合物Ｎｏ．５１の合成

無水条件下、５−ブロモ−２−ヒドロキシベンズアルデヒド５．０ｇ、エチル（トリフェニルホスホラニリデン）アセテート３．８ｇのＮ，Ｎ−ジエチルアニリン２５０ｍＬ溶液を環流下で３時間加熱撹拌した。室温に冷却後、反応液に酢酸エチルを添加し、有機層を１Ｍ塩酸、水、飽和食塩水で洗った後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。有機層を濃縮してシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝５／１）、６−ブロモクマリンの黄色結晶３．８ｇを得た。

アルゴン雰囲気下、６−ブロモクマリン５００ｍｇ、５−（トリブチルスタニル）−３，３−ジメトキシインドリン−２−オン１．０ｇ、酸化銅（Ｉ）６００ｍｇ、１，３−ビス（ジフェニルホスフィノ）プロパン９０ｍｇ、酢酸パラジウム５０ｍｇのトルエン２０ｍＬ溶液を環流下で２４時間加熱撹拌した。室温に冷却後、濃縮してシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し（溶離液：トルエン／酢酸エチル＝４／３）、５−（クマリン−６−イル）−３，３−ジメトキシインドリン−２−オン（化合物Ｎｏ．５１）の黄色結晶２００ｍｇを得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ（ｐｐｍ）：３．４５（ｓ，６Ｈ），６．５４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．４Ｈｚ），６．９７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．４５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．６９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，８．０Ｈｚ），７．７２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８Ｈｚ），７．９０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，８．５Ｈｚ），８．０５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．３Ｈｚ），８．１２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．４Ｈｚ），１０．６９（ｓ，１Ｈ）

＜実施例６＞化合物Ｎｏ．５３の合成

６−ブロモイサチン１００ｍｇのメタノール５０ｍＬ溶液に塩酸１ｍＬを添加した。室温で１２時間撹拌した後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液１０ｍＬを添加した。反応液を酢酸エチルで抽出し、有機層を水、飽和食塩水で洗った後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。有機層を濃縮してシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝４／１）、６−ブロモ−３，３−ジメトキシインドリン−２−オンの黄色結晶１２０ｍｇを得た。

アルゴン雰囲気下、３−ブロモ−７−ジエチルアミノクマリン１．０ｇのトルエン２０ｍＬ溶液に、ビストリ−ｎ−ブチルスズ２．９ｍＬ、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム３９ｍｇを添加し、５５℃で４２時間撹拌した。室温に冷却後、反応液に酢酸エチルを添加し、飽和フッ化カリウム水溶液、飽和食塩水で洗った後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。有機層を濃縮してフロリジルカラムクロマトグラフィーに供し（溶離液：ヘキサン／ジエチルエーテル＝４／１）、７−ジエチルアミノ−３−（トリブチルスタニル）クマリンの黄色油状物質７５４ｍｇを得た。

アルゴン雰囲気下、７−ジエチルアミノ−３−（トリブチルスタニル）クマリン７９０ｍｇ、６−ブロモ−３，３−ジメトキシインドリン−２−オン４４０ｍｇ、ヨウ化銅（Ｉ）３５ｍｇのＤＭＦ８０ｍＬ溶液に、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム９２ｍｇを添加し、５５℃で４８時間撹拌した。室温に冷却後、反応液に酢酸エチルを添加し、有機層を水、飽和食塩水で洗った後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。有機層を濃縮してシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）、６−（７−ジエチルアミノクマリン−３−イル）−３，３−ジメトキシインドリン−２−オン（化合物Ｎｏ．５３）の黄色結晶６１ｍｇを得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ（ｐｐｍ）：１．１３（ｔ，６Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），３．４１（ｓ，６Ｈ），３．４４（ｑ，４Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），６．５５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．３Ｈｚ），６．７３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，８．９Ｈｚ），７．２５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．４Ｈｚ），７．３１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．４Ｈｚ，７．７Ｈｚ），７．４２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），７．５２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．９Ｈｚ），８．１１（ｓ，１Ｈ），１０．５７（ｓ，１Ｈ）

＜実施例７＞化合物Ｎｏ．６０の合成
化合物Ｎｏ．４４の代わりに化合物Ｎｏ．４８を１００ｍｇ用いて実施例２と同様に脱アセタール化を行い、５−（クマリン−４−イル）イサチン（化合物Ｎｏ．６０）６９ｍｇを得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ（ｐｐｍ）：６．４６（ｓ，１Ｈ），７．０８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．３６（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．４５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．５０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．６６〜７．６９（２Ｈ），７．７５〜７．７７（１Ｈ），１１．２９（ｓ，１Ｈ）

＜実施例８＞化合物Ｎｏ．６１の合成
化合物Ｎｏ．４４の代わりに化合物Ｎｏ．４９を１００ｍｇ用いて実施例２と同様に脱アセタール化を行い、５−（クマリン−５−イル）イサチン（化合物Ｎｏ．６１）８４ｍｇを得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ（ｐｐｍ）：６．４７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ），７．０５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．３０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．１Ｈｚ，７．８Ｈｚ），７．４２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．５３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），７．６３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，８．２Ｈｚ），７．６６（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．７８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ），１１．２０（ｓ，１Ｈ）

＜実施例９＞化合物Ｎｏ．６２の合成
化合物Ｎｏ．４４の代わりに化合物Ｎｏ．５１を１００ｍｇ用いて実施例２と同様に脱アセタール化を行い、５−（クマリン−６−イル）イサチン（化合物Ｎｏ．６２）４７ｍｇを得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ（ｐｐｍ）：６．５３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．７Ｈｚ），６．９３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），７．４４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．１Ｈｚ），７．７３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），７．８６〜７．９０（２Ｈ），８．０５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），８．０８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．７Ｈｚ），１１．８４（ｓ，１Ｈ）

＜実施例１０＞化合物Ｎｏ．６６の合成

７−ジエチルアミノクマリン４３２ｍｇのＤＭＦ２ｍＬ溶液にオキシ塩化リン１．５３ｇのＤＭＦ５ｍＬ溶液を添加した。室温で１８時間撹拌した後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を添加した。反応液を酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗った後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。有機層を濃縮してシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝２／１）、７−ジエチルアミノクマリン−３−カルバルデヒドの橙色結晶２３９ｍｇを得た。

７−ジエチルアミノクマリン−３−カルバルデヒド７３５ｍｇ、トシルメチルイソニトリル５８５ｍｇ、炭酸カリウム４１４ｍｇのメタノール１０ｍＬ溶液を環流下で５時間加熱撹拌した。室温に冷却後、反応液に酢酸エチルを添加し、有機層を水、飽和食塩水で洗った後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。有機層を濃縮してシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝３／１）、７−ジエチルアミノ−３−（オキサゾ−５−イル）クマリン（化合物Ｎｏ．６６）の橙色結晶４１ｍｇを得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ（ｐｐｍ）：１．２３（ｔ，６Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），３．４４（ｑ，４Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），６．５３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），６．６３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，８．８Ｈｚ），７．３６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．７７（ｓ，１Ｈ），７．８９（ｓ，１Ｈ），７．９８（ｓ，１Ｈ）

＜実施例１１＞化合物Ｎｏ．６７の合成

エチル ７−ジエチルアミノクマリン−３−カルボキシレート４．３ｇ、ヒドラジン一水和物３．０ｍＬのエタノール４０ｍＬ溶液を室温で１２分間撹拌した。氷浴で冷却後、析出した結晶をろ取し、クロロホルム、ヘキサンの混合液より再結晶することで７−ジエチルアミノクマリン−３−カルボヒドラジドの黄色結晶２．１ｇを得た。

７−ジエチルアミノクマリン−３−カルボヒドラジド２７５ｍｇ、オルト酢酸トリメチル１．６ｇの混合物を１８０℃で２４時間撹拌した。室温に冷却後、濃縮した残渣をクロロホルム５ｍＬに溶解し、ピリジニウムｐ−トルエンスルホネート５０ｍｇを添加後環流下２４時間加熱撹拌した。室温に冷却後濃縮してシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し（溶離液：クロロホルム／酢酸エチル＝１／１）、７−ジエチルアミノ−３−（５−メチル−１，３，４−オキサジアゾ−２−イル）クマリン（化合物Ｎｏ．６７）の橙色結晶２７６ｍｇを得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ（ｐｐｍ）：１．２４（ｔ，６Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），２．６３（ｓ，３Ｈ），３．４６（ｑ，４Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），６．５１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．４Ｈｚ），６．６５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，８．８Ｈｚ），７．６４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），８．４１（ｓ，１Ｈ）

＜実施例１２＞化合物Ｎｏ．６８の合成

エチル ７−ジエチルアミノクマリン−３−カルボキシレート４．０ｇのＤＭＦ９０ｍＬ溶液に２５％アンモニア水溶液９０ｍＬを添加し、室温で１６時間撹拌した。氷浴で冷却後、析出した結晶をろ取し、クロロホルム、ヘキサンの混合液より再結晶することで７−ジエチルアミノクマリン−３−カルボキサミドの黄色結晶２．９ｇを得た。

７−ジエチルアミノクマリン−３−カルボキサミド２６０ｍｇ、エチル ２−クロロアセトアセテート３．６ｇの混合物を環流下で２４時間加熱撹拌した。室温に冷却後濃縮してシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供し（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）、エチル ２−（７−ジエチルアミノクマリン−３−イル）−４−メトキシオキサゾ−ル−５−カルボキシレート（化合物Ｎｏ．６８）の橙色結晶１４８ｍｇを得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ（ｐｐｍ）：１．２４（ｔ，６Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），１．４２（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），２．５６（ｓ，３Ｈ），３．４６（ｑ，４Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），４．４１（ｑ，２Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），６．５２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．４Ｈｚ），６．６４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，８．９Ｈｚ），７．３９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．９Ｈｚ），８．４７（ｓ，１Ｈ）

＜実施例１３＞アロマターゼ阻害能の測定
アロマターゼに対する各化合物の阻害活性を、１β−^３Ｈアンドロステンジオンがアロマターゼにより変換される際に生じる^３Ｈ_２Ｏの放射能の測定値を元に、アロマターゼの残存活性により評価した。試験管にリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）、［１β−^３Ｈ］アンドロステンジオン（５×１０^５ｄｐｍ）溶液、アロマターゼ発現ミクロソーム溶液（Ｇｅｎｔｅｓｔ）、ＮＡＤＰＨをそれぞれの終濃度が６７ｍＭ、０．２μＭ、０．８ｍＭ及び０．６ｍＭとなるように添加し、反応液とした。反応液に合成した各化合物のＤＭＳＯ又はメタノール１０μＬ溶液を終濃度１０μＭ（化合物Ｎｏ．６６〜６８については終濃度１０μＭ及び１μＭ、化合物Ｎｏ．６５については終濃度４μＭ）になるように添加し、３７℃のインキュベーターで１５分間撹拌し、クロロホルム０．５ｍＬを加えて反応を停止させた。遠心分離してから、水層０．２ｍＬをＳｃｉｎｔｉｓｏｌ ＥＸ−Ｈ ５ｍＬ（同仁化学研究所）に添加し、液体シンチレーションカウンター（ＬＳＣ−６１００、日立アロカメディカル）で^３Ｈ_２Ｏの放射能を測定した。別に、上記反応液にＤＭＳＯ又はメタノール１０μＬを添加した後、同様に反応を行ったものを残存活性１００％の対照値とした。得られた測定値から、合成した化合物の存在下でのアロマターゼの残存活性を計算した。その結果を表４に示す。

また、７−ジエチルアミノ−３−（７−ジエチルアミノクマリン−３−イル）クマリン（化合物Ｎｏ．６５）について７５ｎＭ、５０ｎＭ、２５ｎＭ、１０ｎＭでの残存活性を測定した結果から、そのＩＣ_５０値は２８．７５ｎＭと算出された。

本発明における化合物はアロマターゼ阻害活性を有し、アロマターゼ阻害剤としてエストロゲン依存性の疾患、特に閉経後乳がんの治療及び／又は予防のための医薬としての有用性を有する。

Claims (4)

1. （１）下記式（１）
   

   

   ［式（１）中、Ｘは水素又はＣ１〜Ｃ６のジアルキルアミノであり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４はいずれか１の置換基が下記式（２）〜（８）のいずれかであるが他の３の置換基は水素であり、
   

   

   式（３）〜式（８）中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１〜Ｃ６のアルキル、Ｃ１〜Ｃ６のアルコキシカルボニル、置換されていてもよいアミド又は置換されていてもよいフェニルであり、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒｅ及びＲｆは、それぞれ独立して、Ｃ１〜Ｃ６のアルキルを示す］の化合物、その異性体、製薬上許容しうるそれらの塩又はこれらの混合物を有効成分とするアロマターゼ阻害剤。
2. ５−（７−ジエチルアミノクマリン−３−イル）−３，３−ジメトキシインドリン−２−オン、
   ５−（クマリン−３−イル）−３，３−ジメトキシインドリン−２−オン、
   ５−（クマリン−４−イル）−３，３−ジメトキシインドリン−２−オン、
   ５−（クマリン−５−イル）−３，３−ジメトキシインドリン−２−オン、
   ５−（クマリン−６−イル）−３，３−ジメトキシインドリン−２−オン、
   ６−（７−ジエチルアミノクマリン−３−イル）−３，３−ジメトキシインドリン−２−オン、
   ５−（７−ジエチルアミノクマリン−３−イル）イサチン、
   ５−（クマリン−３−イル）イサチン、
   ５−（クマリン−４−イル）イサチン、
   ５−（クマリン−５−イル）イサチン、
   ５−（クマリン−６−イル）イサチン、
   ７−ジエチルアミノ−３−（７−ジエチルアミノクマリン−３−イル）クマリン、
   ７−ジエチルアミノ−３−（オキサゾ−５−イル）クマリン、
   ７−ジエチルアミノ−３−（５−メチル−１，３，４−オキサジアゾ−２−イル）クマリン及び
   エチル ２−（７−ジエチルアミノクマリン−３−イル）−４−メトキシオキサゾ−ル−５−カルボキシレート
   よりなる群から選択される化合物、その異性体、製薬上許容しうるそれらの塩又はこれらの混合物を有効成分とする、アロマターゼ阻害剤。
3. 請求項１又は２に記載のアロマターゼ阻害剤を含む、エストロゲン依存性疾患の治療及び／又は予防のための医薬。
4. 請求項１又は２に記載のアロマターゼ阻害剤を含む、閉経後乳がんの治療及び／又は予防のための医薬。