JP6440261B2 - ラテラルフロー検査方法 - Google Patents

Description

本発明は、臨床診断等に用いられる、イムノクロマト法や核酸クロマト法等を利用したラテラルフロー検査方法に関する。具体的には、判定時間から長時間経過した場合においても偽陽性のシグナルが生じず、正確な判定結果を維持できるラテラルフロー検査方法に関する。

近年、患者の健康状態を診断する臨床検査において、イムノクロマトグラフィーや核酸クロマトグラフィー等を利用したラテラルフロータイプの臨床検査が多く採用されている。ラテラルフロータイプとは、毛管作用を利用してテストストリップに試料液を展開させ、展開に伴いテストストリップ上にシグナルを表示させる方式である。このラテラルフロータイプの検査は（１）特別な測定機器を必要とせず、目視で判定できる、（２）検査にかかる時間が数分程度と極めて短時間で済む、（３）検査のための操作が簡単であり、特別な技術を必要としない、等の優れた特徴を有している。

図９に示すように、従来のラテラルフロー検査器具１’は、例えばイムノクロマトグラフィーのテストストリップ６’を内部に収容したハウジング２’から構成されている。ハウジングの天面３０’には、複数の開口部３１’が設けられており、主に、試料液Ｔをハウジング内部のテストストリップ６’に添加するための試料液添加孔３１ａ’と、テストストリップ上のシグナル検出部６ｃ’に表示されたシグナルを確認するための判定窓３１ｂ’が設けられている。そして、テストストリップ６’には、その一端側に、テストストリップ上を展開した試料液を吸収保持するための吸収パッド６ｄ’が設けられている。

ところが、時間の経過に伴い、吸収パッド６ｄ’にいったん吸収された試料液が展開方向とは逆方向、すなわち、もと来た方向に移動してしまい、吸収パッド６ｄ’に隣接するシグナル検出部６ｃ’にまで戻ってしまうことがあった。吸収パッド６ｄ’に吸収された検体試料液には、通過したテストストリップ６’に固定化されていた物質が含まれる。それゆえ、吸収パッド６ｄ’にいったん吸収された試料液がシグナル検出部６ｃ’に移動すると非特異反応が生じ、その結果として判定結果とは異なる偽陽性のシグナルを生じさせることがあった。

そこで、特許文献１には、吸収パッド中に吸収された試料液が逆方向に戻るのを防ぐため、ハウジングの天面に第３貫通口（蒸発孔）を吸収パッドと対向する位置に設け、吸収パッド中の試料液の蒸発を促進させることのできる検査器具が記載されている。

特表２００９−５４５７４１

特許文献１に記載された検査器具は、吸収パッド中の試料液の蒸発を促す蒸発孔を有しているため、蒸発孔を有していないものと比較すると試料液の戻りは生じにくい。しかしながら、検査済みの器具を長時間放置しておくと、吸収パッド中の試料液が隣接するシグナル検出部に戻り、判定結果とは異なる偽陽性のシグナルを生じることがあった。そのため、判定時間では陰性の判定がなされていても、検査の数時間後に検査済みの器具を見ると陽性のシグナルが認められるため、判定を誤ったり、正確な判定結果が分からなくなってしまうおそれがあった。そこで、本発明者は、使用済みの検査器具を長時間放置した際に偽陽性のシグナルが発生するという現象について検討した結果、時間が経つにつれてシグナル検出部に展開されていた試料液までが蒸発してしまい、その結果として、吸収パッドに吸収されていた試料液が隣のシグナル検出部に毛管作用で移動することが原因であることを見出した。

本発明は上述した点に鑑みなされたもので、その目的は、イムノクロマト法等を利用したラテラルフロー検査方法において、判定時間から長時間経過した場合、たとえば一晩放置した場合においても、試料液の逆方向への戻りを防ぎ、逆戻りによる偽陽性のシグナルを生じさせず、正確な判定結果を維持できる検査方法を提供することにある。

上記課題を解決するため、本発明のラテラルフロー検査方法は、ハウジング内部に収容されたラテラルフローのテストストリップに、ハウジングの表面に設けられた開口部から試料液を添加する添加工程と、開口部を密封してハウジングを略気密状態にする密封工程と、を含んでいる。

本発明のラテラルフロー検査方法によれば、試料液をテストストリップに添加した後、ハウジングの表面に設けられている開口部を密封してハウジングを略気密状態に密封する。これにより、テストストリップに添加され、吸収パッドにいったん吸収された試料液がハウジング内部で蒸発して、ハウジング内部の空間は実質的に気液平衡状態となる。それゆえ、気液平衡後にテストストリップ中に含まれる試料液はそのままの状態で保持され、テストストリップのシグナル検出部に展開されていた試料液も保持されるため、試料液が長時間逆方向に戻ることを防ぐことができる。その結果、逆戻りによる偽陽性のシグナルが生じず、正確な判定結果が長時間維持される。

また、本発明の検査方法におけるハウジングは、（ａ）底面及びこの底面の全周から上方に連続する周壁からなり、底面にテストストリップが設置される下部ケースを有し、（ｂ）天面及びこの天面の全周から下方に連続する周壁からなり、天面に開口部が設けられた上部ケースを有し、（ｃ）上部ケースは、下部ケースの周壁の内側に嵌着されており、（ｄ）下部ケースの周壁の端面は、上部ケースの天面よりも上側に位置するように構成されており、開口部の密封は、ハウジングの表面全体を被覆するように、下部ケースの周壁の端面に粘着フィルム片を貼り付けすることにより行われることも好ましい。なお、本明細書において上下とは、テストストリップが収容されたハウジングを机の上等に置いて使用する状態での上下方向をいうものとする。

この検査方法に用いられるハウジングは上部ケースと下部ケースとからなり、下部ケースの周壁に囲まれた内側部分に、下部ケースよりも一回り小さく形成された上部ケースが上から嵌め込まれている。ここで、下部ケースの周壁の端面は、上部ケースの天面よりも上側に位置するように構成されているため、ハウジングの表面には、上部ケースの天面からなる部分と下部ケースの周壁の端面からなる凸状の外縁部分とが存在する。それゆえ、試料液をテストストリップに添加したのち、開口部を密封するためにハウジングの表面全体を覆うように粘着フィルム片を貼付する際には、粘着フィルム片を凸状の外縁部分、すなわち、下部ケースの周壁の端面部分に貼付することにより、試料液添加孔及び判定窓等の開口部を密封することができる。これにより、ハウジングが略気密状態に密封され、ハウジング内部の空間は実質的に気液平衡が生じた状態となるため、テストストリップのシグナル検出部に展開されていた試料液は蒸発し難くなり、試料液が長時間逆方向に戻ることを防ぐことができる。また、試料液が展開したテストストリップが露出している開口部及び上部ケースと下部ケースの嵌合部分が粘着フィルム片で覆われた状態となるため、開口部やケースの隙間を介した試料液の汚染を防ぐことができ、使用済みの検査器具をより安全に取り扱うことができる。

また、本発明の検査方法におけるハウジングは、（１）底面及びこの底面の全周から上方に連続する周壁からなり、底面にテストストリップが設置される下部ケースを有し、（２）天面及びこの天面の全周から下方に連続する周壁からなり、天面に開口部が設けられた上部ケースを有し、（３）上部ケースと下部ケースとは互いの周壁の端部において嵌着されており、開口部の密封は、ハウジングの表面全体を被覆するように、上部ケースの表面に粘着フィルム片を貼り付けすることにより行われることも好ましい。

この検査方法に用いられるハウジングは上部ケースと下部ケースとからなり、両ケースは互いの周壁の端部、すなわち、側面において嵌合している。試料液をテストストリップに添加したのち、ハウジング表面の開口部を密封するためにハウジングの表面全体を被覆するように粘着フィルム片を貼付する際には、粘着フィルム片を上部ケースの表面に直接貼付することにより、試料液添加孔及び判定窓等の開口部を密封することができる。これにより、ハウジングが略気密状態に密封され、ハウジング内部の空間は実質的に気液平衡が生じた状態となるため、テストストリップのシグナル検出部に展開されていた試料液は蒸発し難くなり、試料液が逆方向に戻ることを防ぐことができる。また、試料液を含むテストストリップが露出している開口部が覆われるため、開口部を介した試料液による汚染を防ぐことができる。

さらに、本発明の検査方法における粘着フィルム片は、透明の樹脂フィルムからなることも好ましい。これにより、ハウジングを略気密状態に密封したまま、粘着フィルム片を剥がさずに検査結果の判定を行うことができる。

本発明によれば、以下のような優れた効果を有するラテラルフロー検査方法を提供することができる。
（１）試料液の逆方向への戻りを防ぎ、逆戻りによる偽陽性のシグナルを防ぐことができる。
（２）判定時間から長時間経過しても、正確な判定結果が維持される。
（３）ハウジングの表面が密封されているため、ハウジングの開口部を介した試料液による汚染を防ぐことができ、使用済みの器具を安全に取り扱うことができる。

本発明の検査方法を概略的に説明するフローチャートである。 本発明の第一の実施形態に係る検査方法で用いる検査用器具を概略的に示す斜視図である。 第一の実施形態に係る検査方法において、（ａ）ハウジングの開口部を密封しているところを示す斜視図及び（ｂ）図３（ａ）のＡ−Ａ’線断面図である。 第一の実施形態に係る検査方法において、ハウジングの開口部を密封しているところを示す正面図である。 本発明の第二の実施形態に係る検査方法で用いる検査用器具を概略的に示す斜視図である。 第二の実施形態に係る検査方法において、（ａ）ハウジングの開口部を密封しているところを示す斜視図及び（ｂ）図６（ａ）のＢ−Ｂ’線断面図である。 第二の実施形態に係る検査方法において、ハウジングの開口部を密封しているところを示す正面図である。 実施例で用いたテストストリップの構造を示す説明図である。 従来のラテラルフロー検査方法を示す説明図である。

以下、図１〜図４を参照しつつ、本発明の第一の実施形態について詳細に説明する。

図２に示すように、第一の実施形態に係るラテラルフロー検査方法に用いられる検査器具１はテストストリップ６が収容されたハウジング２と粘着フィルム片５とから概略構成されている。

図２に示すように、ハウジング２は上部ケース３と下部ケース４とから構成されている。上部ケース３と下部ケース４との間の空間には、ラテラルフローのテストストリップ６が収容されている。上部ケース３はハウジング２の上側に位置する天面３０と、この天面の全周から下向きにほぼ垂直に連続する周壁３２から概略形成されている。天面３０には、ハウジング２の内部に収容されたテストストリップ６に外部からアクセスするための複数の開口部３１（３１ａ及び３１ｂ）が設けられている。本実施形態においては、開口部３１として、試料液をテストストリップ６に添加するための試料液添加孔３１ａ及びテストストリップ６のシグナル検出部６ｃを視認するための判定窓３１ｂを有している。なお、開口部３１としては、具体的に上述したもの以外の孔や窓等を有していてもよい。他方、下部ケース４は、ハウジング２の下側に位置する底面４０と、この底面の全周から上向きにほぼ垂直に連続する周壁４１から概略形成されている。底面４０には、テストストリップ６が載置され、テストストリップ６が所定の位置に配置されるよう支持固定するためのテストストリップ支持部４２が設けられている。

図２に示すように、ハウジング２は上部ケース３と下部ケース４とが互いに向かいあった状態で嵌着することにより形成される。このうち、下部ケース４は、その周壁４１の内側に上部ケース３全体が液密に嵌めこまれるよう、上部ケース３よりひとまわり大きく形成されている。本実施形態では、下部ケース４の周壁４１の内側に上部ケース３の周壁３２の外側が嵌合し、上部ケース３は下部ケース４に液密に嵌着するように形成されている。また、本実施形態では、図３に示すように、下部ケース４に上部ケース３が嵌着してハウジング２が形成された状態において、下部ケース４の周壁の端面４１ａが上部ケース３の天面３０よりも一段高くなるように、下部ケース４の周壁４１の高さが調整されている。すなわち、下部ケース４の周壁４１の高さは、上部ケース３の周壁３２の高さ分の長さと下部ケース４の底面４０の厚み分の長さを足した値よりも大きい値となるように設計されている。具体的には、下部ケース４に上部ケース３が嵌着した状態で、下部ケース４の周壁の端面４１ａが上部ケース３の天面３０よりも０．５ｍｍ〜５ｍｍ高くなるように、下部ケース４の周壁４１の高さが設計されていることが好ましい。このように上部ケース３と下部ケース４を構成することにより、上部ケース３と下部ケース４との嵌合部分が、ハウジング２の表面上に現れることとなる。この嵌合部分は、下部ケース４の周壁の端面４１ａよりも下側に位置するため、下部ケース４の周壁の端面４１ａを後述する粘着フィルム片５で覆うことにより、複数の開口部３１及び上部ケース３と下部ケース４の嵌合部分が封止され、ハウジング２内部の気密状態が確保される。

図２〜図４に示すように、本実施形態の検査器具１は、検査を行う際に、ハウジング２を構成する下部ケース４の周壁の端面４１ａに、粘着フィルム片５を貼り付けして使用される。それゆえ、下部ケース４の端面４１ａは、粘着フィルム５の粘着力が作用し、安定的に粘着フィルム片５が端面４１ａ上に保持されるよう、一定の幅長さを有する略平坦な端面として形成されている。具体的には、下部ケース４の端面４１ａの幅長さは、１ｍｍ以上であることが好ましく、１．５ｍｍ以上であることがより好ましい。

ハウジング２、すなわち、上部ケース３及び下部ケース４の材質としては特に限定されないが、合成樹脂が好ましく、ポリエチレン、ポリプロピレン、耐衝撃性ポリスチレン等のポリスチレン又はＰＥＴ等の合成樹脂が挙げられる。また、後述する粘着フィルム片と下部ケース４の端面４１ａとの粘着を確実とするために、下部ケース４の端面４１ａには粘着性を向上させるような材料及び加工を施してもよい。

次に、テストストリップ６について説明する。図２及び図３（ｂ）に示すように、本実施形態に係る検査器具１のテストストリップ６は、イムノクロマトグラフィーのテストストリップとして形成されている。テストストリップ６は、添加された試料液を吸収するサンプルパッド６ａと、標識抗体等を含有するコンジュゲートパッド（図示せず、サンプルパッド６ａの下層に配置）と、補足抗体等を含有し検査結果が表示されるシグナル検出部６ｃと、余剰の試料液を吸収する吸収パッド６ｄとから概略構成されるが、この構成に限定されず、他の構成を適宜組み合わせたものも広く含まれる。また、テストストリップ６はイムノクロマトグラフィーによるものに限られず、ラテラルフロータイプのものであればよく、核酸クロマトグラフィーによるものも含まれる。

次に粘着フィルム片５について説明する。粘着フィルム片５は、樹脂フィルム５０と粘着剤５１とが積層されて構成されている。粘着フィルム片５は、ハウジング２の表面全体を被覆できる大きさに形成され、図２及び３に示すように、本実施形態ではハウジング２の下部ケース４の端面４１ａ全体を覆って貼り付けできる大きさに形成されている。

粘着フィルム片５の樹脂フィルム５０の材質としては特に限定されないが、合成樹脂が好ましく、ポリエチレン、ポリプロピレン、ＰＥＴ、ナイロン若しくはポリエステル等の合成樹脂フィルム、これらを組み合わせた合成樹脂多層フィルム、シリカやアルミナ等の透明蒸着フィルム、アルミ箔ラミネートフィルム又はアルミニウム蒸着フィルム等が挙げられる。特に、粘着フィルム片５でハウジング２を密封したまま、粘着フィルム片５を剥がさずに検査結果の判定を行うことができる観点から、透明度が高いフィルムが好ましい。さらに、粘着フィルム片５でハウジング２を密封するにあたり、気密性を高める観点から、ガスバリア性を有する積層フィルム、すなわち、合成樹脂多層フィルム、シリカやアルミナ等の透明蒸着フィルム、アルミ箔ラミネートフィルム又はアルミニウム蒸着フィルム等も用いることができる。また、粘着フィルム片５に用いられる粘着剤５１の材質としては、特に限定されず、下部ケース４の周壁の端面４１ａに確実に粘着して長時間貼り付け状態を維持できる粘着剤であればよい。本実施形態では、樹脂フィルム５０として、薄くてもコシがあり貼り付けしやすいことから、２０〜２００μｍ厚みのＰＥＴフィルムが採用されている。他方、粘着剤５１としてはアクリル系粘着剤が用いられ、接着力は５Ｎ／２５ｍｍ以上（ＪＩＳ Ｚ０２３７、１８０度ピール、３００ｍｍ／分）のものが好適に用いられる。

また、本実施形態では、粘着フィルム片５を取り扱う際、手に粘着剤５１が触れることがなく、取り扱いしやすいように、粘着フィルム片５の一部に粘着力を有しない把持部５２が設けられている。図２〜図４に示すように、把持部５２は、粘着フィルム片５のハウジング２の表面を覆っている部分から離れた端部に形成されている。図３及び図４に示すように、本実施形態における把持部５２は、樹脂フィルム５０に粘着剤５１が積層されておらず、樹脂フィルム５０のみとすることにより構成されているが、粘着剤５１を剥離紙等で覆うような構成とすることも可能である。

図２〜図４に示す本実施形態に係る検査器具１は、一例としてインフルエンザウイルスの検査に用いるラテラルフロータイプの検査器具を示しているが、検査対象としてはこれに限定されず、インフルエンザウイルスのほか、ＲＳウイルス、Ａ群β溶連菌、アデノウイルス、ノロウイルス、ロタウイルス、サポウイルス又は肺炎マイコプラズマ等の微生物、微生物・植物・非ヒト動物由来の蛋白質、微生物・植物・非ヒト動物由来の核酸等が挙げられる。

以下、図１〜図４を参照しつつ、本発明の第一の実施形態に係る検査方法について詳細に説明する。

図１に示すように、本実施形態に係るラテラルフロー検査方法は、ハウジング内部に収容されたラテラルフローのテストストリップに、ハウジングの表面に設けられた開口部から試料液を添加する添加工程Ｓ１と、開口部を密封してハウジングを略気密状態にする密封工程Ｓ２と、シグナルの有無を判定する判定工程Ｓ３とから構成される。

まず、添加工程Ｓ１では、検査器具１の表面３０に設けられた試料液添加孔３１ａを介して、ハウジング２内のテストストリップ６に試料液を添加することが行われる。

次に、密封工程Ｓ２では、開口部３１を密封してハウジング２を略気密状態に密封することが行われる。本実施形態では、具体的には、図３に示すように、ハウジング２の表面全体を覆うように、粘着フィルム片５をハウジング２の下部ケース４の周壁の端面４１ａに貼り付けして密封する。これにより、図３（ｂ）に示すように、ハウジング表面の複数の開口部３１及びハウジング２を構成する上部ケース３と下部ケース４の嵌合部が粘着フィルム片５で覆われ、ハウジング２を略気密状態とすることができる。粘着フィルム片５の貼り付けによる開口部３１の密封は、添加工程Ｓ１の直後に行うことが好ましいが、試料液の添加後から判定時間（判定に適した時間；通常数分〜数十分）の間に行ってもよい。なお、判定時間を超えて開口部３１を密封することも可能であるが、その場合には試料液の添加後２時間以内に行うことが好ましい。

上述した密封工程Ｓ２により、テストストリップ６に添加され、吸収パッド６ｄに吸収された試料液がハウジング２内部で蒸発し、ハウジング内部の空間が実質的に気液平衡状態となる。気液平衡後にテストストリップ中に含まれる試料液はそのままの状態で保持されるため、テストストリップ６のシグナル検出部６ｃに展開されていた試料液も保持され、試料液が逆方向に戻るのを防ぐことができる。また、試料液が展開したテストストリップ６が露出している試料液添加孔３１ａ及び判定窓３１ｂ並びに上部ケース３と下部ケース４の嵌合部分が粘着フィルム片５で覆われた状態となるため、開口部３１やケースの隙間を介した試料液の汚染を防ぐことができ、使用済みの検査器具をより安全に取り扱うことができる。

なお、本実施形態の検査器具１を用いた場合の密封工程Ｓ２について述べたが、開口部３１の密封は粘着フィルム片５による被覆に限定されず、粘着フィルム片５の変わりにシリコン、ゴム、金属箔又は樹脂等から形成されたシート材を用いてもよい。また、検査器具１の粘着フィルム片５は貼り付け面に粘着剤５１を有しているが、粘着剤を有さない構成とすることも可能である。その場合には、ハウジング２の下部ケース４の周壁の端面４１ａ上に粘着剤を有する構成とするか、延性を有するシート材等を用いることが好ましい。

次に判定工程Ｓ３では、シグナルの有無の判定が行われる。シグナルはテストストリップ６のシグナル検出部６ｃに表示され、ハウジング２の判定窓６ｃを介して視認により確認することができる。本実施形態では、粘着フィルム片５が透明樹脂フィルムから形成されているため、粘着フィルム片５を貼り付けたまま検査結果の判定を行うことができる。

次に、図１及び図５〜図７を参照しつつ、本発明の第二の実施形態について説明する。

図５に示すように、本発明の第二の実施形態に係るラテラルフロー検査方法に用いられる検査器具１１はテストストリップ１６が収容されたハウジング１２と粘着フィルム片１５とから概略構成されている。

図５に示すように、ハウジング１２は上部ケース１３と下部ケース１４とから構成されている。上部ケース１３と下部ケース１４との間の空間には、テストストリップ１６が収容されている。上部ケース１３はハウジング１２の上側に位置する天面１３０と、この天面の全周から下向きにほぼ垂直に連続する周壁１３２から概略形成されている。天面１３０には、ハウジング１２の内部に収容されたテストストリップに外部からアクセスするための複数の開口部１３１（１３１ａ及び１３１ｂ）が設けられている。本実施形態においては、開口部１３１として、試料液をテストストリップ１６に導入するための試料液添加孔１３１ａ及びテストストリップのシグナル検出部位を視認するための判定窓１３１ｂを有している。なお、開口部１３１としては、具体的に上述したもの以外の孔や窓等を有していてもよい。他方、下部ケース１４は、ハウジング１２の下側に位置する底面１４０と、この底面の全周から上向きにほぼ垂直に連続する周壁１４１から概略形成されている。底面１４０には、テストストリップ１６が載置され、テストストリップ１６が所定の位置に配置されるよう支持固定するためのテストストリップ支持部１４２が設けられている。

図５〜図７に示すように、ハウジング１２は上部ケース１３と下部ケース１４とが互いに向かいあった状態で嵌着することにより形成される。このうち、上部ケース１３と下部ケース１４とは、その周壁１３２及び１４１の端部で液密に嵌着され、ハウジング１２を形成するように設計されている。本実施形態では、図６（ｂ）に示すように、上部ケース１３の端面１３２ａは平坦でなく段状に形成されており、それに嵌合する段状形状に下部ケース１４の端面１４１ａが形成されている。それゆえ、上部ケース１３と下部ケース１４とはその段状の端面１３２ａ及び１４１ａとが噛み合って嵌着している。本実施形態では、第一の実施形態とは異なり、ハウジング１２の側面に上部ケース１３と下部ケース１４の嵌合部が現れる。

図５〜図７に示すように、本実施形態の検査器具１１は、ハウジング１２の表面、すなわち、ハウジング１２を構成する上部ケース１３の天面１３０に、粘着フィルム片１５が貼り付けされる。それゆえ、上部ケース１３の天面１３０は、粘着フィルム１５の粘着力が作用し、安定的に粘着フィルム片１５が保持されるよう、開口部１３０以外は略平坦な面として形成されている。

次に、テストストリップ１６について説明する。図６（ｂ）に示すように、本実施形態に係る検査器具１１のテストストリップ１６は、イムノクロマトグラフィーのテストストリップとして形成されている。テストストリップ１６は、添加された試料液を吸収するサンプルパッド１６ａと、標識抗体等を含有するコンジュゲートパッド（図示せず、サンプルパッド１６ａの下層に配置）と、補足抗体等を含有し検査結果が表示されるシグナル検出部１６ｃと、余剰の試料液を吸収する吸収パッド１６ｄとから概略構成されるが、この構成に限定されず、他の構成を適宜組み合わせたものも広く含まれる。また、テストストリップ１６はイムノクロマトグラフィーによるものに限られず、ラテラルフロータイプのものであればよく、核酸クロマトグラフィーによるものも含まれる。

次に粘着フィルム片１５について説明する。粘着フィルム片１５は、樹脂フィルム１５０と粘着剤１５１とが積層されて構成されている。粘着フィルム片１５は、少なくとも、ハウジング１２の表面に形成されている上部ケース１３の開口部１３１を被覆できる大きさであることが好ましく、ハウジング１２の表面全体を被覆できる大きさであることがより好ましい。本実施形態では、図５に示すように、粘着フィルム片１５は、ハウジング１２の上部ケース１３の天面１３０全体を覆うことができる大きさに形成されている。

また、図５〜図７に示すように、粘着フィルム片１５には、取り扱いの際、手に粘着剤１５１が触れることがなく、脱着しやすいように、粘着フィルム片１５の一部に粘着力を有しない把持部１５２が設けられている。把持部１５２は、粘着フィルム片１５のハウジング１２の表面を覆っている部分から離れた端部に形成されている。図７等に示すように、本実施形態における把持部１５２は、樹脂フィルム１５０に粘着剤１５１が積層されておらず、樹脂フィルム１５０のみとすることにより構成されている。

ハウジング１２、粘着フィルム片１５及びテストストリップ１６の構成並びに検査器具１１についてのその他の説明は、上述した第一の実施形態の場合と同様であり、その機能や作用効果も同様である。

以下、図１及び図５〜図７を参照しつつ、本発明の第二の実施形態に係る検査方法について詳細に説明する。

まず、本実施形態に係る添加工程Ｓ１では、検査器具１１の表面１３０に設けられた試料液添加孔１３１ａを介して、ハウジング１２内のテストストリップ１６に試料液を添加することが行われる。

次に、本実施形態における密封工程Ｓ２では、開口部１３１を密封してハウジング１２を略気密状態に密封することが行われる。具体的には、図６に示すように、ハウジング１２の表面全体を覆うように、粘着フィルム片１５をハウジング１２の天面１３０に貼り付けして密封する。これにより、図６（ｂ）に示すように、ハウジング表面の複数の開口部１３１が粘着フィルム片１５で覆われ、ハウジング１２を略気密状態とすることができる。粘着フィルム片１５の貼り付けによる開口部１３１の密封は、添加工程Ｓ１の直後に行うことが好ましいが、試料液の添加後から判定時間の間に行ってもよい。なお、判定時間を超えて開口部１３１を密封することも可能であるが、その場合には試料液の添加後２時間以内とすることが好ましい。

上述した密封工程Ｓ２により、テストストリップ１６に添加され、吸収パッド１６ｄに吸収された試料液がハウジング１２内部で蒸発し、ハウジング内部の空間が実質的に気液平衡状態となる。気液平衡後にテストストリップ中に含まれる試料液はそのままの状態で保持されるため、テストストリップ１６のシグナル検出部１６ｃに展開されていた試料液も保持され、試料液が逆方向に戻るのを防ぐことができる。また、試料液が展開したテストストリップ１６が露出している試料液添加孔１３１ａ及び判定窓１３１ｂが粘着フィルム片１５で覆われた状態となるため、開口部１３１を介した試料液の汚染を防ぐことができ、使用済みの検査器具をより安全に取り扱うことができる。

なお、本実施形態の検査器具１１を用いた場合の密封工程Ｓ２について述べたが、開口部１３１の密封は粘着フィルム片１５による被覆に限定されず、粘着フィルム片１５の変わりにシリコン、ゴム、金属箔又は樹脂等から形成されたシート材を用いてもよい。また、検査器具１１の粘着フィルム片１５は貼り付け面に粘着剤５１を有しているが、粘着剤を有さない構成とすることも可能である。その場合には、開口部１３１の周縁部又はハウジング２の天面１３０の周縁部に粘着剤を有する構成とするか、延性を有するシート材等を用いることが好ましい。

次に判定工程Ｓ３では、シグナルの有無の判定が行われる。シグナルはテストストリップ１６のシグナル検出部１６ｃに表示され、ハウジング１２の判定窓１６ｃを介して視認により確認することができる。粘着フィルム片１５を透明樹脂フィルムから形成することにより、粘着フィルム片１５を貼り付けたまま検査結果の判定を行うことができる。

以下、実施例を用いて、本発明を詳細に説明する。

図２に示す検査器具１及び図５に示す検査器具１１を用いて、試料液の逆戻りの有無を確認する試験を行った。テストストリップとしては、図８に示す構造のイムノクロマトグラフィーテストストリップを用いた。具体的には、テストストリップ６０（幅４ｍｍ×長さ７７ｍｍ）は、図８に示すように、バッキングシートＢＳ（幅４ｍｍ×長さ７７ｍｍ、ＧＬ−１８７、ローマン社製品）の上に、テストストリップを構成する各シート片が所定の位置になるように重ねて作製した。シート片としては、サンプルパッド６０ａ（幅４ｍｍ×長さ３５ｍｍ、ＧＦＤＸ２０３０００、メルクミリポア社製品）、コンジュゲートパッド６０ｂ（幅４ｍｍ×長さ１０ｍｍ、ＧＦＤＸ２０３０００、メルクミリポア社製品）、シグナル検出部６０ｄを形成するメンブレン（幅４ｍｍ×長さ２５ｍｍ、ニトロセルロースメンブレンＨＦ１８０、メルクミリポア社製品）及び吸収パッド６０ｄ（幅４ｍｍ×長さ２５ｍｍ、ワットマン濾紙７４０−Ｅ、ＧＥヘルスケア バイオサイエンス社製品）を用いた。試料液添加位置Ｓはテストストリップ６０の一端から１０ｍｍの位置とし、当該添加位置ＳからコントロールラインＣＬまでの距離が３６ｍｍとなるように、シグナル検出部６０ｄを形成するメンブレンにコントロールラインＣＬを設けた。コントロールラインＣＬは、抗マウスＩｇＧヤギ抗体（フィッツジェラルドインダストリーズ社製品）をメンブレン６ｃ上に線状に塗布することにより形成した。また、コンジュゲートパッド６０ｂとしては、予め、金コロイド（径６０ｎｍ、ＢＢインターナショナル社製品、ＥＭ．ＧＣ６０）でインフルエンザＩｇＧマウス抗体（フィッツジェラルドインダストリーズ社製品）を標識させた金コロイド標識抗体を吸着させたものを用いた。

試験は次のようにして行った。まず、テストストリップ６０の吸収パッド６０ｄに水溶性赤インクを５μＬ滴下した。あらかじめ吸収パッド６０ｄに色液を染み込ませておくことにより、試料液が逆戻りするとシグナル検出部が着色するため、容易に逆戻りの状態を確認することができる。テストストリップ６０をハウジングに収容し、５０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ７．５）を試料液として用い、検査器具の試料液添加孔からテストストリップに１５０μＬ添加した。添加後、直ちにハウジングの表面全体を覆うように粘着フィルム片を貼り付けし、開口部を密封した。試料液添加後、試料液のコントロールラインＣＬ検出時間を測定し、所定の経過時間ごとに吸収パッド６０ｄからの試料液の戻りの状態を測定した。測定は、吸収パッド６０ｄとシグナル検出部６０ｃとの境界Ｐ（図８参照）からシグナル検出部６０ｃ上で着色が生じた部分までの距離（ｍｍ）を測定した。他方、比較対照試験として、開口部を密封しない場合についても、粘着フィルム片を使用しない以外は上記と同様にして試験を行った。なお、比較対照試験で使用した検査器具のハウジングについては、開口部として試料液添加孔及び判定窓に加えて、蒸発窓を設けたものを用いた。蒸発窓は吸収パッドに対向する位置にスリット状の貫通孔を３つ並設して形成した。また、上記試験は室温２１℃、湿度３５％の環境下で行った。結果を以下表１に示す。

表１の結果によれば、ハウジングの表面が粘着フィルム片で密封されなかったもの（対照）では、試料液添加後２時間半で逆戻りが見られた。他方、ハウジングの表面に粘着フィルムを貼り付けし、密封したものは５時間以上逆戻りが生じなかった。これにより、判定時間から５時間以上経過しても逆戻りによる偽陽性のシグナルが生じないため、判定時間から長時間経過しても正確な検査結果を維持できることがわかった。また、検査器具１（図２）と検査器具１１（図５）との結果を比較すると、検査器具１１（図５）については、試料液添加５時間を過ぎた後には逆戻りがみられたが、検査器具１（図２）は試料液添加２４時間後においても逆戻りはみられなかった。このことから、とりわけ、検査器具１（図２）を用いてハウジングを密封することにより、判定時間から１日経過しても逆戻りによる偽陽性のシグナルが生じず、前日行った検査済みの器具を翌日確認したとしても、正確な判定結果が維持されることがわかった。これらのことから、本発明にかかる検査方法によれば、正確な判定結果が長時間維持されるため、判定が確実なものとなり、安定した検査を行うことができることが示された。また、表１の結果によれば、コントロールラインＣＬが検出されるまでの時間は、ハウジングの表面を覆って開口部を密封したものと密封しなかったものとの差は１秒のみであった。このことより、テストストリップ上の試料液の展開に対し、ハウジングを略気密状態に密封することはほとんど影響がないことが示された。

本発明は、上記の実施形態に限定されるものでなく、特許請求の範囲に記載された発明の要旨を逸脱しない範囲内での種々、設計変更した形態を技術的範囲に含むものである。

１、１１、１’ 検査器具
２、１２、２’ ハウジング
３、１３ 上部ケース
３０、１３０、３０’ 天面
３１、１３１ 開口部
３１ａ、１３１ａ、３１ａ’ 試料液添加孔
３１ｂ、１３１ｂ、３１ｂ’ 判定窓
３２、１３２ 周壁
１３２ａ 上部ケースの周壁の端面
４、１４ 下部ケース
４０、１４０ 底面
４１、１４１ 周壁
４１ａ、１４１ａ 下部ケースの周壁の端面
４２、１４２ テストストリップ支持部
５、１５ 粘着フィルム片
５０、１５０ 樹脂フィルム
５１、１５１ 粘着剤
５２、１５２ 把持部
６、１６、６０、６’ テストストリップ
６ａ、１６ａ、６０ａ、６ａ’ サンプルパッド
６０ｂ コンジュゲートパッド
６ｃ、１６ｃ、６０ｃ、６ｃ’ シグナル検出部（メンブレン）
６ｄ、１６ｄ、６０ｄ、６ｄ’ 吸収パッド
７ 間隙
ＢＳ バッキングシート
ＣＬ コントロールライン位置
Ｐ 吸収パッドとシグナル検出部との境界
Ｓ 試料液添加位置
Ｔ 試料液

Claims (2)

1. ハウジング内部に収容されたラテラルフローのテストストリップに、該ハウジングの表面に設けられた試料液添加孔から試料液を添加する添加工程と、
   前記試料液添加孔と前記ハウジングの表面に設けられた判定窓を少なくとも含む複数の開口部および前記ハウジングを構成する上部ケースと下部ケースとの嵌合部を密封して前記ハウジングを略気密状態にする密封工程と、を含み、
   前記ハウジングは、
   （ａ）底面及び該底面の全周から上方に連続する周壁からなり、該底面に前記テストストリップが設置される下部ケースを有し、
   （ｂ）天面及び該天面の全周から下方に連続する周壁からなり、該天面に前記複数の開口部が設けられた上部ケースを有し、
   （ｃ）前記上部ケースは、前記下部ケースの周壁の内側に嵌着されており、
   （ｄ）前記下部ケースの周壁の端面は、前記上部ケースの天面よりも上側に位置するように構成されており、
   前記複数の開口部および前記嵌合部の密封は、前記ハウジングの表面全体を被覆するように、前記下部ケースの周壁の端面に粘着フィルム片を貼り付けすることにより行われることを特徴とするラテラルフロー検査方法。
2. 前記粘着フィルム片は透明の樹脂フィルムからなることを特徴とする請求項１に記載のラテラルフロー検査方法。
   

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