JP6355129B2

JP6355129B2 - １，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノースを高濃度で含有する飲食品

Info

Publication number: JP6355129B2
Application number: JP2014226228A
Authority: JP
Inventors: 洋杉山; 大樹本間; 善久田中; 山本　万里; 万里山本
Original assignee: National Agriculture and Food Research Organization
Current assignee: National Agriculture and Food Research Organization
Priority date: 2014-11-06
Filing date: 2014-11-06
Publication date: 2018-07-11
Anticipated expiration: 2030-03-08
Also published as: JP2015097525A

Description

本発明は、１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノースを高濃度で含有する飲食品に関する。

日本では近年食生活の欧米化が進んでいる。この現象に伴い、糖尿病の罹患率は上昇傾向にある。また、こうした公衆衛生上の問題は国内に限らず世界でも発生している。糖尿病を根治できる療法はいまだ開発されておらず、糖尿病対策は治療よりも予防に重点が置かれている。糖尿病の発症に大きく寄与する因子として食後血糖が挙げられる。食後血糖は、食事として摂取した糖質が消化吸収を受けてグルコースとして血中に出現した濃度として定義される。食後血糖が高値で維持されることが糖尿病発症の大きなリスクであることが近年示されている。食後高血糖の上昇を穏やかにすることで糖尿病の発症が抑制できることが明らかになったことから、α−アミラーゼ阻害作用を有する飲食品には糖尿病の予防作用が期待されている。こうした背景から、血糖上昇を穏やかにすることで糖尿病予防効果を期待できる食品が望まれている。

植物に含有されるポリフェノールには、コレステロールの低下作用や体脂肪の低減作用があることが報告されており、その生理的な有用性が示唆されている。ポリフェノールのこれらの作用発揮を期待して、ポリフェノールを高濃度で含有させた飲食品が存在する。
茶類は古来より用いられている飲料である。茶にはポリフェノールをはじめさまざまな成分が含有されている。茶に含まれる成分の有する機能性については多くの報告がある。しかしながら、茶に存在する各成分は微量であるがゆえに茶自身を飲料として摂取した場合に明確な機能を発揮できる場合はほとんどない。
Ｙｏｓｈｉｄａらは、サザンカ類の葉より１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノースをはじめて発見した（非特許文献１）。また、Ｆｕｋｕｄａらは、クルミ中に１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノースが存在することを発見し、１０ｋｇ中のクルミから７．７ｍｇを単離した（非特許文献２）。また、Ｇａｏらは、カメリア・タリエンシスに属する茶の茶葉に２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノースが０．０２質量％含有されていることを発見した（非特許文献３）。
しかしながら、これらの文献には、１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノースが糖尿病を予防するために使用できることは、記載されていない。

Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３７：２４１−２４４(１９９４) Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，６３：７９５−８０１(２００３) Ｊ．Ａｇｒｉｃ．ＦｏｏｄＣｈｅｍ．５６：７５１７−７５２１（２００８）

本発明は、αアミラーゼを阻害することによる食後の高血糖防止を通じて糖尿病を予防するための飲食品を提供することを目的とする。

われわれは、ある種の茶に含有される成分１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノースに優れた機能性を見出した。そして、この１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノースは他の茶成分と比較して極めて微量で機能性を発揮することが明らかとなった。すなわち、特許請求の範囲において規定される量の１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノースを含有する飲食品は、１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノースの有する機能を発揮することができる。
すなわち、本発明は、１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノースを高濃度で含有する飲食品を提供する。
また、本発明は、１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノースを有効成分として含有する血糖上昇抑制剤を提供する。
また、本発明は、１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノースを有効成分として含有するα−アミラーゼ阻害剤を提供する。
また、本発明は、１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノースを有効成分として含有する糖尿病の予防又は治療剤を提供する。

飲食品に１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノースを含有させることでα−アミラーゼ阻害作用を通して、食後の血糖上昇を抑制することができる。この作用により糖尿病の予防効果が期待できる。さらに、１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノースはごく微量でその効果（例えば、血糖上昇抑制効果）を発揮することができ、風味をはじめとする製品の品質を損なうことなく用いることができる。

１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノース（ＣＴ−１）によるα−アミラーゼ阻害活性を示すグラフである。経口糖負荷試験の結果を示すグラフである。経口糖負荷試験の結果を示すグラフである。

本発明において使用される１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノースは、例えばサザンカ類、カメリア・タリエンシス種、カメリア・イラワジエンシス種、カメリア・シネンシス種やそれらの雑種に属する茶、クルミなどに含まれており、本発明の飲食品、血糖上昇抑制剤、α−アミラーゼ阻害剤、並びに糖尿病の予防及び治療剤を調製する場合には、これらの植物体をそのまま使用してもよく、又はこれらの植物体から抽出して得られる抽出液を有効成分として使用してもよい。例えば、カメリア・タリエンシス種の植物体をそのまま使用する場合には、葉、果実、種子、幹又は根を生の状態、あるいは乾燥の後、適切な大きさに細砕又は粉末化する。また、抽出した抽出液を有効成分として使用する場合には、水、アルコール、又はその他の有機溶媒等を抽出溶媒として用いる。これらの溶媒の混合物を使用してもよい。好ましい抽出溶媒は水、又は水とアルコール等との混合溶媒である。抽出は、室温抽出、加熱抽出さらには加圧抽出等によって行ってもよい。一般的には、抽出は室温〜125℃で行われる。植物体からの抽出液の抽出後、遠心分離等により固形分と液体を分離し、さらに必要に応じて濾過等の処理を行った後、減圧濃縮等で濃縮してエキス化してもよい。さらに、真空乾燥、凍結乾燥等により粉末化することもできる。粉末化に際して、適当な賦形剤を加えてもよい。あるいは、抽出液をさらに精製して１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノースを単離して、本発明の飲食品、血糖上昇抑制剤、α−アミラーゼ阻害剤、並びに糖尿病の予防及び治療剤を調製するために添加してもよい。

本発明の血糖上昇抑制剤、α−アミラーゼ阻害剤、並びに糖尿病の予防及び治療剤を調製する際には、製剤化の常法を適宜使用することができ、１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノースを含む植物体若しくはその抽出液や抽出エキス、又は１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノースの単体を単独で使用して、又はこれらに賦形剤、結合剤、滑沢剤、崩壊剤、風味改善剤、溶解補助剤、懸濁剤、コーティング剤などの常用される補助剤を加えて、錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、ドリンク剤などの形態で製剤化してもよい。
また、１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノースを含む植物体若しくはその抽出液や抽出エキス、又は１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノースの単体を、必要に応じて上記補助剤若しくは食品素材とともに、固体状（粉末、顆粒状など）、ペースト状、液状ないし懸濁状の飲食品としてもよく、例えば茶飲料、ジュース、スポーツドリンク、アルコール飲料、発酵乳、チーズやバターなどの乳製品、ドリンクヨーグルトや乳酸菌飲料、バターケーキなどの菓子・パン類などの飲料又は食品の形態としてもよく、さらにサプリメントなどの医薬部外品としてもよい。また、飲料形態の場合は、飲料自体の風味や１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノースの保存安定性の観点から容器詰め飲料であることが好ましい。食品素材としては、固形物（粉状、薄片状、塊状など）、半固形物（ゼリー状、水飴状など）、又は液状物等のいずれであってもよい。製剤、飲料、食品又は医薬部外品１ｇあたりの１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノースの含有量は、０．１〜１０．０ｍｇ（乾燥重量）であることが望ましい。

本発明で用いる１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノースは、安全性には問題ないため、これを経口投与する場合の投与量に制限はない。一般的には、１回につき０．１ｇ（乾燥重量）／ｋｇ体重以上の量、好ましくは０．１〜２ｇ（乾燥重量）／ｋｇ体重の量を１日に１〜数回経口投与する。また、１日当たりの総投与量としては、０．１ｍｇ以上、好ましくは０．１〜５．０ｍｇである。

本発明の飲食品として、容器詰め飲料の形態をとる場合、容量を５００ｍＬとすれば、１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノースの含有量は、一般的には０．０２質量％以上、好ましくは０．０２〜０．２質量％である。

（１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノース含有添加物の調製）
カメリア・タリエンシス種雑種の茶中間母本農６号の茶葉２ｇを１００℃の熱水１００ｍＬに７分間接触させ熱水抽出物を得た。熱水抽出物を凍結乾燥し、茶葉熱水抽出物凍結乾燥物（以下、乾燥物という）を得た。乾燥物中の１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノース（実施例中において略称として「ＣＴ−１」と表示する場合がある。）含量を高速液体クロマトグラフィーにて定量した。分析条件は、カラム；ＩｎｅｒｔｓｉｌＯＤＳ−３２．１×１５０ｍｍ，溶離液Ａ；水：アセトニトリル＝９１：９（０．１％トリフルオロ酢酸含有），溶離液Ｂ；水：アセトリニトリル＝４０：６０（０．１％トリフルオロ酢酸含有），溶出条件；溶離液Ｂ濃度８から４０％への３５分間のリニアグラジエントとした。乾燥物中のＣＴ−１含量は７．７％であった。

（ＣＴ−１含有飲料の調製）
市販の緑茶（やぶきた茶）を用意し、茶葉２ｇを１００℃の熱水１００ｍＬに７分間接触させ、やぶきた茶を得た。ＣＴ−１濃度が５０、１２．５、３．１２５ｐｐｍになるよう乾燥物をやぶきた茶に添加し溶解させ、ＣＴ−１を高濃度で含有する茶飲料を得た。

（大理茶抽出液の調製）
市販の大理茶を用意し、茶葉２ｇを１００℃の熱水１００ｍＬに７分間接触させ、大理茶抽出液（ＣＴ−１濃度は４６ｐｐｍ）を得た。

（ＣＴ−１含有飲料の効果）
ＣＴ−１を高濃度で含有する茶飲料、やぶきた茶及び大理茶抽出液の有するα−アミラーゼ阻害活性を測定した。測定は以下のように行った。酵素液には、ラット小腸アセトン抽出物（シグマ社）３００ｍｇを５ｍＬマレイン酸バッファ（５０ｍＭ、ｐＨ６．０）に分散させ、遠心分離により得た上清を使用直前にマレイン酸バッファにより１００倍希釈して用いた。反応基質検体２０μＬと３６０μＬの０．１％でんぷん（メルク社）溶液および２０μＬの酵素液を混合し、３７℃で２０分反応させた。反応液にヨウ素液を添加し、６３０ｎｍの吸収波長で残存でんぷん量を定量した。阻害率は次のように算出した。
（阻害率％）＝（１−（茶添加時の酵素活性）／（茶無添加時の酵素活性））×１００
なお、「酵素活性」は酵素無添加時のでんぷん量と反応終了時の残存でんぷん量の差である。各種茶は段階希釈を行い、各希釈率に対する阻害率を求め、５０％阻害を与える希釈率を線形トレンドの予測から算出し、ＩＣ５０値とした。結果を図１に示す。
図１から、各種茶のＩＣ５０における希釈率は、大理茶では０．７３、５０ｐｐｍＣＴ−１含有やぶきた茶では０．４５、および１２．５ｐｐｍＣＴ−１含有やぶきた茶では０．８６であり、その他は活性が無かった。少なくとも５０ｐｐｍ以上のＣＴ−１を含有させたやぶきた茶では、大理茶抽出液以上のα−アミラーゼ阻害活性を有することが確認された。

（ＣＴ−１含有飲料の血糖上昇抑制効果）
マウス（９週齢雄性ｄｄＹマウス）を用いた評価系（経口糖負荷試験）により、ＣＴ−１含有飲料の有するα−アミラーゼ阻害作用を評価した。被検溶液は、コントロールとして、２ｇ／１０ｍＬでんぷん水溶液を用いた。また、ＣＴ−１含有水として、２ｇでんぷんをそれぞれ含むＣＴ-１水溶液を２５ｍｇ／１０ｍＬおよび１００ｍｇ／１０ｍＬの濃度で調製した。大理茶として、上述のとおりに調製した大理茶抽出液に２ｇ／１０ｍＬでんぷん水溶液を添加して用いた。一晩絶食したマウスに被検溶液をマウス体重１ｋｇあたり１０ｍＬ経口投与し、経時的に血糖値を測定した。２５ｍｇ／１０ｍＬおよび１００ｍｇ／１０ｍＬのＣＴ−１含有水は、デンプン摂取時のマウスの血糖上昇を有意に抑制した（図２）。一方、大理茶を投与した場合は、血糖値の上昇抑制作用は観察されなかった（図３）。

（試験結果からのヒト用量推定）
推定１：体表面積換算
マウス有効量を２５ｍｇ、マウス体重を４０ｇ、ヒト体重を５０ｋｇとした場合、（ヒト有効量）＝２５（ｍｇ）×０．０４（ｋｇ）×５０（ｋｇ）^2/3／０．０４（ｋｇ）^2/3＝１１６．０３（ｍｇ）となる。容器詰め飲料の容量を５００ｍＬとすれば、本有効量を含有させるには、０．１１６（ｇ）／５００（ｇ）× １００＝０．０２（質量％）となる。

推定２：体重換算
マウス有効量を２５ｍｇ、マウス体重を４０ｇ、ヒト体重を５０ｋｇとした場合、（ヒト有効量）＝２５（ｍｇ／ｋｇ）×５０（ｋｇ）＝１２５０（ｍｇ）となる。容器詰め飲料の容量を５００ｍＬとすれば、本有効量を含有させるには、１．２５（ｇ）／５００（ｇ）×１００＝０．２５（質量％）となる。

Claims

１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−ＨＨＤＰ−ｂ−ｄ−グルコピラノースを有効成分として含有する血糖上昇抑制剤。