JP6353849B2 - Bace−1の阻害剤としての糖樹状クラスター化合物 - Google Patents
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Description
[式中、
R3は、式(iii)のラジカル、式(iv)のラジカル、又は式(iv)(a)のラジカルであり、
R5は、式(v)、(vi)、(vii)、(viii)又は(ix)のラジカルであり、
jは、1〜6の整数であり、
kは、0〜5の整数であり、
R6は、H、SO3H、場合により放射標識されているアシル基であるか、又はR6は、C(=O)R8であり、R8はアリール又はアラルキルであり、
R7は、H又はSO3Hであり、
且つ、
YはOであり、
BはOであり、
R1及びR2は、存在せず、
A、E、D及びXはすべてCH2であるか、若しくはA、D及びXはすべてCH2であり、Eは(CH2CH2O)t #CH2であり、
#は、その隣接カルボニル基へのEの結合点を示し、
tは、1〜10の整数であり、
又は、
YはCであり、
R1及びR2は、どちらもHであり、
A、E、B及びDは、CH2であり、XはOであり、
又は、
YはCであり、
Aは(CH2)uであり、
R1及びR2は、どちらもHであり、
B、X、D及びEは、すべて存在せず、
uは、1〜10の整数であり、
又は、
YはCであり、
XはOであり、
Bは(CH2)pであり、
A、E及びDは、すべてCH2であり、
R1は、H、NHZ若しくはC1〜6アルキルであり、R2は、式(i)のラジカル、式(ii)のラジカル、若しくは式(ii)(a)のラジカルであり、
Zは、H、アシル、C(O)(CH2)wN(H)G、*CH3 *C(O)−(*Cは、13C又は14Cを意味する)、5−TAMRA(4−カルボキシテトラメチルローダミン)、フルオレセイン(レゾルシノールフタレイン)、Alexa Fluor350(7−アミノ−4−メチル−6−スルホクマリン−3−酢酸)、BODIPY(4,4−ジフルオロ−4−ボラ−3a,4a−ジアザ−s−インダセン)、若しくはAlkyne MegaStokes dye608(1−{3−{[4−(2−シクロオクチン−1−イルメチル)ベンゾイル]アミノ}プロピル}−4−{2−[4−(ジメチルアミノ)フェニル]エテニル}ピリジニウムヘキサフルオロホスファート)であり、
wは、1〜11の整数であり、
Gは、H、アシル、Boc(t−ブトキシカルボニル)、Troc(2,2,2−トリクロロエチルオキシカルボニル)、Fmoc(9−フルオレニルメトキシカルボニル)、Cbz(ベンジルオキシカルボニル)、*CH3 *C(O)−(*Cは、13C又は14Cを意味する)、5−TAMRA(4−カルボキシテトラメチルローダミン)、フルオレセイン(レゾルシノールフタレイン)、Alexa Fluor350(7−アミノ−4−メチル−6−スルホクマリン−3−酢酸)、BODIPY(4,4−ジフルオロ−4−ボラ−3a,4a−ジアザ−s−インダセン)、若しくはAlkyne MegaStokes dye608(1−{3−{[4−(2−シクロオクチン−1−イルメチル)ベンゾイル]アミノ}プロピル}−4−{2−[4−(ジメチルアミノ)フェニル]エテニル}ピリジニウムヘキサフルオロホスファート)であり、
又は、
YはCであり、
XはOであり、
Bは(CH2)pであり、
A、E及びDは、すべてCH2であり、
R1及びR2は、どちらも同じ、式(i)のラジカル、式(ii)のラジカル、若しくは式(ii)(a)のラジカルであり、
Tはそれぞれ、(CH2CH2O)xCH2CH2及びCH2からなる群から独立して選択され、
xはそれぞれ独立して、1〜12の整数であり、
nは、1〜11の整数であり、ただし、Tが(CH2CH2O)xCH2CH2である場合、nは1であり、
qは、1〜11の整数であり、
mは、1〜11の整数であり、ただし、Tが(CH2CH2O)xCH2CH2である場合、mは1であり、
pは、1〜5の整数である]
又は薬学的に許容されるその塩、若しくはそのプロドラッグ
を提供する。
である。
である。
(jは、上で定義した通りである)
である。
(jは、上で定義した通りである)
である。
(jは、上で定義した通りである)
である。
(jは、上で定義した通りである)
である。
(kは、上で定義した通りである)
である。
(kは、上で定義した通りである)
である。
である。
であるのが好ましい。
であるのが好ましい。
である。
であるのが好ましい。
であるのが好ましい。R3において、Tの1つは、(CH2CH2O)xCH2CH2であり、且つTの1つはCH2であるのがさらに好ましい。R3において、(T)mは(CH2CH2O)xCH2CH2であり、且つ(T)nは(CH2)nであるのがさらに好ましい。或いは、R3において、(T)nは(CH2CH2O)xCH2CH2であり、且つ(T)mは(CH2)mであるのが好ましい。
YがCであり、XがOであり、A、E及びDがすべてCH2であり、Bが(CH2)pであり、
R1がH、NHZ又はC1〜6アルキルであり、
R2が、式(i)のラジカル、式(ii)のラジカル、又は式(ii)(a)のラジカルであり、
Zは、H、アシル、C(O)(CH2)wN(H)G、*CH3 *C(O)−(*Cは、13C又は14Cを意味する)、5−TAMRA(4−カルボキシテトラメチルローダミン)、フルオレセイン(レゾルシノールフタレイン)、Alexa Fluor350(7−アミノ−4−メチル−6−スルホクマリン−3−酢酸)、BODIPY(4,4−ジフルオロ−4−ボラ−3a,4a−ジアザ−s−インダセン)、又はAlkyne MegaStokes dye608(1−{3−{[4−(2−シクロオクチン−1−イルメチル)ベンゾイル]アミノ}プロピル}−4−{2−[4−(ジメチルアミノ)フェニル]エテニル}ピリジニウムヘキサフルオロホスファート)であり、
wは、1〜11の整数であり、
Gは、H、アシル、Boc(t−ブトキシカルボニル)、Troc(2,2,2−トリクロロエチルオキシカルボニル)、Fmoc(9−フルオレニルメトキシカルボニル)、Cbz(カルボキシベンジル)、*CH3 *C(O)−(*Cは、13C又は14Cを意味する)、5−TAMRA(4−カルボキシテトラメチルローダミン)、フルオレセイン(レゾルシノールフタレイン)、Alexa Fluor350(7−アミノ−4−メチル−6−スルホクマリン−3−酢酸)、BODIPY(4,4−ジフルオロ−4−ボラ−3a,4a−ジアザ−s−インダセン)、又はAlkyne MegaStokes dye608(1−{3−{[4−(2−シクロオクチン−1−イルメチル)ベンゾイル]アミノ}プロピル}−4−{2−[4−(ジメチルアミノ)フェニル]エテニル}ピリジニウムヘキサフルオロホスファート)である
のが好ましい。
である。
である。
である。R2において、(T)mが(CH2CH2O)xCH2CH2であり、且つ(T)nが(CH2)nであるのがさらに好ましい。或いは、R2において、(T)mが(CH2)mであり、且つ(T)nが(CH2CH2O)xCH2CH2であるのが好ましい。或いは、好ましくは、R2が式(ii)(a)のラジカルであり、Tがそれぞれ(CH2CH2O)xCH2CH2であり、式(ii)(a)の各ラジカルにおけるxはそれぞれ、独立して選択される。
R1及びR2が、どちらも同じ、式(i)のラジカル、式(ii)のラジカル、又は式(ii)(a)のラジカル
であるのが好ましい。
であり、
R3は式(iii)のラジカル
である。
であり、
R3は式(iii)のラジカル
であり、
R5は式(ix)のラジカル
である。
であり、
R3は式(iv)のラジカル
である。
であり、
R3は式(iv)(a)のラジカル
である。
であり、
R3は式(iv)のラジカル
であり、
R5は式(ix)のラジカル
である。
である。
である。
であり、
R3は式(iii)のラジカル
である。
であり、
R3は式(iv)のラジカル
である。
であり、
R3は式(iii)のラジカル
である。
であり、
R3は式(iv)のラジカル
である。
である。
である。
である。
である。
からなる群から選択されるか、
又は薬学的に許容されるそれらの塩である。
用語「C1〜C6アルキル」は、最大6個の炭素原子を有する任意の飽和炭化水素ラジカルを意味しており、直鎖及び分岐鎖アルキル基のどちらも含むことが意図される。アルキル基の例には、メチル基、エチル基、n−プロピル基、イソ−プロピル基、n−ブチル基、イソ−ブチル基、sec−ブチル基、t−ブチル基、n−ペンチル基、1,1−ジメチルプロピル基、1,2−ジメチルプロピル基、2,2−ジメチルプロピル基、1−エチルプロピル基、2−エチルプロピル基、n−ヘキシル基、及び1−メチル−2−エチルプロピル基が含まれる。
を含めた、本明細書において示されている構造は、糖のgluco型及びido型を含むものと意図される。当業者は、本発明の化合物は、gluco型のみ、ido型のみ、又はgluco型とido型との混合物を組み込むことが可能であることも理解しよう。
本発明の化合物、特に、例示されているものは、BACE−1の阻害剤であり、特に、BACE−1を阻害することが望ましい疾患又は状態、例えば、老人性認知症、初老性認知症、多発脳梗塞性認知症、又はアルツハイマー病などの神経変性障害、特にアルツハイマー病を処置又は予防するための医薬品として有用である。
本発明の化合物は、様々な異なる方法によって調製することができる。下記は、本発明の化合物を合成するための、非限定的な代表的一般法である。
本発明の樹状化合物のための出発原料として使用される「コア」は、以下に記載されている様々な方法によって合成することができる。(注:当業者は、以下のスキーム2〜7が、スクシンイミジル基(単数又は複数)を含有するコアを示していることを認識するであろう。しかし、スクシンイミジル基以外を有するコアも同様に調製することができる。例えば、スクシンイミジル基をヒドロキシルに置きかえた化合物は、周囲温度、及び周囲圧又は5〜50psi、好ましくは5〜25psiの水素雰囲気下で撹拌した、水性THF、メタノール、エタノール、酢酸エチルなどの溶媒中、OBn前駆体(例えば、以下のスキーム2〜7)を炭素担持パラジウム又は炭素担持水酸化パラジウム又は炭素担持白金触媒により処理することによって、調製することができる。
コア出発原料に結合することができるグリコシドとして使用されるか、又はこれを調製するために使用される単糖、二糖及び四糖単位は、WO2012/121617において記載されている通り合成することができる。
「コア」出発原料は、遊離アミノ基を有するグリコシドに結合することができ、これにより、本発明の樹状化合物の調製が可能となる。カップリング手順は、適切な溶媒(例えば、DMF、DMSO、水)、少量の塩基、例えばトリエチルアミン、及び適切なグリコシド(少なくとも約2当量のグリコシド、例えば約2.2当量のグリコシドが二量体のコアとのカップリングに使用され、少なくとも約3当量のグリコシド、例えば約3.3当量のグリコシドが三量体のコアとのカップリングに使用され、少なくとも約4当量のグリコシド、例えば約4.4当量のグリコシドが四量体のコアとのカップリングに使用される)を必要とする。
NMR 核磁気共鳴
HRMS 高分解能質量分析法
ESI エレクトロスプレーイオン化
TLC 薄層クロマトグラフィー
RT 室温
DCM ジクロロメタン
TEMPO 2,2,6,6−テトラメチルピペリジニルオキシ
THF テトラヒドロフラン
DMF ジメチルホルムアミド
TMS トリメチルシリル
TMS−ジアゾメタン トリメチルシリル−ジアゾメタン
NHS N−ヒドロキシスクシンイミド
EDC 1−エチル−3−[3−ジメチルアミノプロピル]カルボジイミド塩酸塩
TCA トリクロロ酢酸
DABCO 1,4−ジアザビシクロ[2.2.2]オクタン
BAIB [ビス(アセトキシ)ヨード]ベンゼン
(例1.1)テトラ−スクシンイミジルエステルの合成
テトラニトリル前駆体(参照文献1、Hukkamaki,J.;Pakkanen,T.T.Journal of Molecular Catalysis A:Chemical 2001,174,205−211)は、ペンタエリスリトールへのアクリロニトリルのマイケル型付加により調製される。テトラニトリルの酸加水分解(参照文献2、Newcombe,G.R.;Mishra,A;Moorfield,C.N.J.Org.Chem.2002,67,3957−3960)により、四酸(tetraacid)が得られる。四酸(1.0g、2.35mmol)を乾燥DMF(15mL)に溶解する。この反応混合物に、室温でN−ヒドロキシスクシンイミド(1.62g、14.14mmol)及び1−エチル−3−[3−ジメチルアミノプロピル]カルボジイミド塩酸塩(EDC、2.71g、14.14mmol)を加え、24時間、撹拌を継続する。この混合物をDCMにより希釈して、水、次に希HCl及び水により洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水して濃縮する。残渣を、EtOAc、次いでEtOAc:MeOH、19:1→9:1→7:1→4:1で溶出したシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、テトラ−スクシンイミジルエステル(1’、1.2g、1.48mmol、63%)が得られる。Rf=0.25(酢酸エチル:MeOH、9:1)。13C-NMR (125MHz, DMSO-D6) δ 170.7, 170.1, 68.7, 65.5, 44.9, 31.5, 25.7. HRMS C33H40N4O20Na (M+Na)+ m/zの計算値835.2134, 実測値835.2128。
アミノオクタン酸を、塩化チオニルの存在下、ベンジルアルコールと処理すると(参照文献3、Patel,R.P;Price,S.J.Org Chem.1965,30(10),3575−3576)、テトラベンジルエステル(2g、8.12mmol)が得られる。これ及びテトラ−スクシンイミジルエステル(1’、1.1g、1.35mmol)を、乾燥THF(55mL)と乾燥DMF(3mL)との混合物に溶解し、トリエチルアミン(1.5mL、10.83mmol)により処理する。24時間、撹拌した後、この混合物を酢酸エチルにより希釈して水により2回洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水して濃縮する。残渣を熱EtOAcに溶解し、結晶をろ別して、取り出す。この母液を濃縮し、残渣をクロロホルム:EtOAc:MeOH、5:2:0.5で溶出したシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、テトラ−ベンジルエステル(2’、1.7g、1.26mmol、93%)が得られる。Rf=0.3(クロロホルム:酢酸エチル:MeOH、5:2:1)。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 173.5, 171.2, 136.1, 128.5, 128.2, 128.1, 69.1, 67.4, 66.1, 45.3, 39.5, 36.9, 34.2, 29.6, 29.4, 28.9, 26.7, 26.6, 24.8. HRMS C77H112N4O16Na (M+Na)+ m/zの計算値1371.7971, 実測値1371.7977。
テトラベンジルエステル(2’、0.595g、441μmol)を乾燥THF(16mL)に溶解する。水(4mL)及び氷酢酸(5滴)を加える。この反応混合物を炭素担持水酸化パラジウム(20%Pd、1g)により処理し、周囲温度及び圧力で、水素下3時間撹拌する。この触媒をろ別し、50%水性EtOHにより洗浄する。この溶液を濃縮乾固すると、「長腕の」四酸(3’、0.42g、429μmol、97%)が得られる。この生成物を、さらに精製することなく、次の工程に使用する。Rf=0.0(ベースライン、クロロホルム:酢酸エチル:MeOH、5:2:1)。13C-NMR (125MHz, DMSO-D6) δ 174.5, 169.9, 68.8, 67.3, 45.0, 39.0, 38.4, 36.1, 33.8, 29.1, 28.5, 38.4, 26.3, 25.2, 24.5. HRMS C49H87N4O16(M-H)- m/zの計算値987.6117, 実測値987.6110。
「長腕の」四酸(3’、424mg、429μmol)を乾燥DMF(7mL)に溶解する。この反応混合物に、室温でN−ヒドロキシスクシンイミド(296mg、2.57mmol)及び1−エチル−3−[3−ジメチルアミノプロピル]カルボジイミド塩酸塩(EDC、493mg、2.57mmol)を加え、24時間、撹拌を継続する。この混合物をDCMにより希釈して、水、次に希HCl及び水により洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水して濃縮する。残渣を、クロロホルム:酢酸エチル:MeOH、5:2:0.5→5:4:1で溶出したシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、「長腕の」テトラ−スクシンイミジルエステル(13b、415mg、301μmol、70.3%)が得られる。Rf=0.25(DCM:MeOH、9:1)。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 171.5, 169.4, 168.6, 68.9, 67.4, 45.3, 39.4, 36.7, 30.8, 29.5, 29.4, 28.6, 28.5, 26.6, 25.5, 25.4, 24.4. HRMS C65H100N8O24Na (M+Na)+ m/zの計算値1399.6748, 実測値1399.6737。
H2N(PEG)3CH2CH2COOH(又はPEGアミノ酸)(1.0g、4.52mmol)をベンジルアルコール(30mL、287mmol)に溶解し、0℃に冷却する。塩化チオニル(6mL、82.2mmol)をゆっくりと滴下して加える。この反応混合物を0℃で15分間撹拌し、次いで100℃で5時間加熱する。次に、これをジエチルエーテルにより希釈し、油状残渣を集め、ジクロロメタン:MeOH、9:1→1:1で溶出したシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、ベンジルエステル(4’、1.2g、3.9mmol、85%)が得られる。Rf=0.15(ジクロロメタン:MeOH、9:1)。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 171.6, 135.8, 128.5, 128.2, 128.1, 70.2, 70.14, 70.13, 69.9, 66.7, 66.4, 66.3, 50.0, 39.7, 35.0. HRMS C16H26NO5(M+H)+ m/zの計算値312.1811, 実測値312.1806。
ベンジルエステル4’(65mg、210μmol)及びテトラ−スクシンイミジルエステル(13b、58mg、42.1μmol)を乾燥DMF(2mL)に溶解し、トリエチルアミン(47μL、336μmol)により処理する。24時間、撹拌した後、この混合物を酢酸エチルにより希釈して水により2回洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水して濃縮する。残渣を熱EtOAcに溶解し、結晶をろ別して、取り出す。この母液を濃縮し、残渣をクロロホルム:EtOAc:MeOH、5:2:0.5で溶出したシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、テトラ−ベンジルエステル(5’、71mg、32.8μmol、78%)が得られる。Rf=0.3(クロロホルム:酢酸エチル:MeOH、5:2:1)。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 173.2, 171.3, 135.8, 128.5, 128.2, 128.1, 70.5, 704, 70.2, 69.9, 69.2, 67.5, 66.5, 66.3, 45.3, 39.4, 39.1, 36.9, 36.5, 35.1, 29.6, 29.1, 29.0, 26.7, 25.5。
テトラベンジルエステル(5’、16mg、7.21μmol)を乾燥THF(4mL)に溶解する。水(1mL)及び氷酢酸(2滴)を加える。この反応混合物を炭素担持水酸化パラジウム(20%Pd、20mg)により処理し、周囲温度及び圧力で、水素下3時間撹拌する。この触媒をろ別し、50%水性EtOHにより洗浄する。この溶液を濃縮乾固すると、「長腕の」PEG四酸(6’、13mg、7.21μmol、97%)が得られる。この生成物を、さらに精製することなく、次の工程に使用する。Rf=0.0(ベースライン、クロロホルム:酢酸エチル:MeOH、5:2:1)。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 176.7, 174.2, 71.4, 71.3, 71.2, 70.6, 68.8, 67.8, 62.8, 48.5, 40.6, 40.3, 37.8, 37.1, 35.8
「長腕の」PEG四酸(6’、13mg、7.21μmol)を乾燥DMF(1mL)に溶解する。この反応混合物に、室温でN−ヒドロキシスクシンイミド(5.1mg、43.2μmol)、DIPEA(7.6μL、43.2μmol)及び1−エチル−3−[3−ジメチルアミノプロピル]カルボジイミド塩酸塩(EDC、8.3mg、43.2μmol)を加え、24時間、撹拌を継続する。この混合物をDCMにより希釈して、水、次に希HCl及び水により洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水して濃縮する。残渣を、クロロホルム:酢酸エチル:MeOH、5:2:0.5→5:4:1で溶出したシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、「長腕の」PEGテトラ−スクシンイミジルエステル(7’、15mg、6.85μmol、94%)が得られる。Rf=0.25(DCM:MeOH、9:1)。
3,6,9−トリオキサウンデカン二酸(500mg、2.25mmol)を乾燥DMF(10mL)に溶解する。この反応混合物に、室温でN−ヒドロキシスクシンイミド(785mg、6.75mmol、3当量)、1−エチル−3−[3−ジメチルアミノプロピル]カルボジイミド塩酸塩(EDC、1.32g、6.75mmol、3当量)、及びN,N−ジイソプロピルエチルアミン(2.38mL、13.5mmol)、次いで8−アミノオクタン酸ベンジル(1.68g、6.75mmol、3当量)を加え、4時間撹拌を継続する。この混合物をDCMにより希釈して、水、次に希HCl及び水により洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水して濃縮する。残渣を熱EtOAcに溶解し、結晶をろ別して、取り出す。この母液を濃縮し、残渣をクロロホルム:EtOAc:MeOHを5:2:0.3で溶出したシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、ジ−ベンジルエステル(10、1.1g、1.61mmol、71%)が得られる。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 173.4, 169.9, 136.1, 128.4, 128.3, 128.1, 127.8, 127.7, 65.9, 63.9, 60.3, 39.5, 36.8, 31.9, 30.9, 29.3, 28.8, 26.6, 25.3, 24.7, 24.4, 21.2, 20.9. HRMS C38H56N2O9Na (M+Na)+m/zの計算値707.3884, 実測値707.3876。
ジ−ベンジルエステル(14’、204mg、297μmol)を乾燥THF(8mL)に溶解する。水(2mL)及び氷酢酸(3滴)を加える。この反応混合物を炭素担持水酸化パラジウム(20%Pd、0.5g)により処理し、周囲温度及び圧力で、水素下3時間撹拌する。この触媒をろ別し、50%水性EtOHにより洗浄する。この溶液を濃縮乾固すると、「長腕の」二酸(15’、150mg、297μmol、99.8%)が得られる。この生成物を、さらに精製することなく、次の工程に使用する。Rf=0.0(ベースライン、クロロホルム:酢酸エチル:MeOH、5:2:1)。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 178.1, 175.3, 172.9, 72.3, 71.7, 71.6, 40.4, 35.5, 30.9, 30.6, 30.5, 28.3, 26.5. HRMS C24H44N2O9Na (M+Na)+ m/zの計算値527.2945, 実測値527.2943。
「長腕の」二酸(15’、150mg、297μmol)を乾燥DMF(4mL)に溶解する。この反応混合物に、室温でN−ヒドロキシスクシンイミド(104mg、892μmol)、1−エチル−3−[3−ジメチルアミノプロピル]カルボジイミド塩酸塩(EDC、174mg、892μmol)、及びN,N−ジイソプロピルエチルアミン(0.157mL、892μmol)を加え、24時間、撹拌を継続する。この混合物をDCMにより希釈し、水、次に希HCl及び水により洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水して濃縮する。残渣をクロロホルム:酢酸エチル:MeOH、5:2:0.5→5:4:1で溶出したシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、「長腕の」ジ−スクシンイミジルエステル(33a、188mg、269μmol、90%)が得られる。Rf=0.25(DCM:MeOH、9:1)。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 170.9, 169.9, 169.5, 168.5, 70.7, 70.6, 70.5, 70.4, 70.0, 38.7, 31.4, 30.7, 29.4, 28.6, 28.5, 28.4, 26.5, 25.5, 24.4. HRMS C32H50N4O13Na (M+Na)+ m/zの計算値721.3272, 実測値721.3259。
6eの調製(スキーム8)
チオグリコシド供与体(WO2012/121617)(1g、2.2mmol)及びCbz保護ヘキサ−アミノアルコール(Chipowsky,S.;Lee,Y.C.Carb.Res.,1973,31,339−346)(1g、4.3mmol、2.0当量)を無水ジクロロメタン(20mL)に溶解して−15℃に冷却し、粉末モレキュラーシーブ(4Å)を加える。10分後、N−ヨードスクシンイミド(836mg、3.7mmol、1.7当量)及びトリフルオロメタンスルホン酸銀(281mg、1mmol、0.5当量)を加える。この反応混合物を1時間かけて、室温まで温める。この混合物を酢酸エチルにより希釈し、セライトによりろ過する。このろ液を飽和水性炭酸水素ナトリウムと水性チオ硫酸ナトリウム(30%)との1:1混合物により洗浄し、飽和水性塩化ナトリウムにより洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水して濃縮する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(EtOAc:石油エーテル、1:2)により精製すると、グリコシド6eがシロップ(1.35g、2.0mmol、93%)として得られる。TLC(EtOAc:石油エーテル、1:2 v/v):Rf=0.25。さらなる精製を行うことなく、化合物6fの合成に直接使用する。HRMS(ESI)C38H48N2O9Na(M+Na)+計算値m/z699.3258、測定値699.3257。
化合物6f(0.56g、0.827mmol)をメタノール(12mL)に溶解し、炭素担持水酸化パラジウム(20%Pd、500mg)により処理する。この反応混合物を周囲温度及び周囲圧力で、水素下、ちょうど20分間、撹拌する。この触媒をろ別し、EtOAc:MeOH、1:1(40mL)により洗浄する。この溶液を濃縮乾固し、残渣のクロマトグラフィー(EtOAc:メタノール:アンモニア水、4:1:0.05)により、化合物12d(0.4g、0.75mmol、91%)が得られる。TLC(EtOAc:メタノール:アンモニア水、4:1:0.05):Rf=0.15、13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 170.7, 170.4, 138.3, 137.7, 128.5, 128.4, 127.9, 127.8, 99.8, 80.4, 78.5, 78.1, 75.9, 75.4, 75.0, 74.7, 74.6, 72.8, 69.6, 63.3, 57.2, 41.8, 33.0, 29.3, 26.4, 26.1, 25.7, 25.5, 23.5, 20.8. HRMS (ESI) C30H43N2O7Na (M+H)+ m/zの計算値543.3070, 実測値543.3077。
化合物11a(0.56g、0.528mmol)をメタノール(15mL)に溶解し、炭素担持水酸化パラジウム(20%Pd、500mg)により処理する。この反応混合物を周囲温度及び周囲圧力で、水素下、ちょうど15分間、撹拌する。この触媒をろ別し、EtOAc:MeOH、1:1(40mL)により洗浄する。この溶液を濃縮乾固し、残渣のクロマトグラフィー(EtOAc:メタノール:アンモニア水、4:1:0.05)により、化合物12a(0.45g、0.49mmol、92%)が得られる。TLC(EtOAc:メタノール:アンモニア水、4:1:0.05):Rf=0.15、13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 173.3, 172.7, 170.8, 166.7, 139.8, 139.5, 138.5, 134.8, 130.9, 130.8, 129.9, 129.5, 129.1, 128.9, 128.8, 128.7, 128.6, 102.4, 98.9, 83.7, 81.7, 78.9, 76.2, 75.2, 71.5, 70.9, 63.7, 54.1, 53.5, 40.6, 30.2, 28.4, 26.9, 26.5, 22.9, 20.8. HRMS (ESI) C51H63N2O14(M+H)+ m/zの計算値927.4279, 実測値927.4270。
化合物11b(1.0g、0.942mmol)をメタノール(20mL)に溶解し、炭素担持水酸化パラジウム(20%Pd、1g)により処理する。この反応混合物を周囲温度及び周囲圧力で、水素下、ちょうど15分間、撹拌する。この触媒をろ別し、EtOAc:MeOH、1:1(40mL)により洗浄する。この溶液を濃縮乾固し、残渣のクロマトグラフィー(EtOAc:メタノール:アンモニア水、4:1:0.05)により、化合物12b(0.42g、0.45mmol、48%)が得られる。TLC(EtOAc:メタノール:アンモニア水、4:1:0.05):Rf=0.15、13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 170.6, 169.9, 169.5, 165.7, 138.0, 137.9, 137.2, 133.7, 129.7, 129.3, 128.9, 128.8, 128.5, 128.4, 128.0, 127.9, 127.7, 127.6, 99.9, 98.3, 80.5, 74.8, 74.0, 72.9, 72.3, 70.4, 68.9, 68.8, 67.6, 62.4, 59.7, 52.6, 52.3, 51.9, 45.4, 36.3, 29.6, 29.3, 27.6, 27.2, 27.0, 25.9, 22.9, 20.8. HRMS (ESI) C51H63N2O14(M+H)+ m/zの計算値927.4279, 実測値927.4275。
トリエチルアミン(8.0mL)を3a(1.8g、1.42mmol)のジクロロメタン(40mL)溶液に加え、この溶液を室温で3時間撹拌し、次に、水性HCl、水性NaHCO3により洗浄し、乾燥して、濃縮乾固する。(クロマトグラフィー(5〜40%のEtOAc/トルエン)により、表題化合物が発泡体として得られる(1.19g、1.14mmol、80%)。1H NMR (CDCl3), δ 8.05 (m, 2H), 7.58 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.47-7.44 (m, 2H), 7.41-7.30 (m, 5H), 7.23-7.16 (m, 5H), 5.57 (d, J = 3.9 Hz, 1H), 5.31 (dd, J = 8.8, 7.8 Hz, 1H), 4.94-4.88 (m, 3H), 4.79-4.71 (m, 4H), 4.62-4.57 (m, 2H), 4.51 (dd, J = 12.4, 4.0 Hz, 1H), 4.33 (dd, J = 11.8, 5.4 Hz, 1H), 4.15-4.12 (m, 3H), 4.03 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 3.93 (t, J = 9.4 Hz, 1H), 3.86-3.73 (m, 4H), 3.47-3.42 (m, 2H), 3.23 (dd, J = 10.3, 3.9 Hz, 1H), 3.07-3.01 (m, 3H), 2.09 (s, 3H), 1.52-1.42 (m, 2H), 1.32-1.13 (m, 6H). 13C NMR δ 171.87, 167.10, 165.03, 154.51, 137.82, 137.42, 133.38, 129.75, 129.04, 128.65, 128.57, 128.34, 128.18, 128.14, 127.72, 127.64, 100.86, 98.13, 82.99, 79.12,, 75.34, 74.55, 74.46, 74.26, 74.06, 72.40, 71.28, 70.69, 69.78, 64.98, 62.89, 62.65, 41.08, 40.70, 29.42, 29.14, 26.12, 25.47, 20.79. HRMS (ESI) C46H54Cl4N4O15Na [M+Na]+ m/zの計算値1065.2237, 実測値1065.2229。
室温で、四糖11c(660mg、0.37mmol)を乾燥THF(5mL)及び氷AcOH(4.5mL)に溶解する。この反応混合物を、予め活性化したZn(1.9g、29mmol、80当量)により処理し、室温で3.5時間撹拌する。この溶媒を真空で除去し、残渣をクロロホルムに溶解して、氷冷飽和水性炭酸水素ナトリウム及び水により洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水して濃縮すると、グリコシド12cが、発泡体として得られる(610mg、0.37mmol、100%)。TLC(DCM:MeOH、1:9 v/v):Rf=0.2。この生成物は非常に純度が高く、さらに精製することなく、次の工程に使用する。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 170.7, 170.6, 170.2, 170.1, 167.9, 167.5, 164.9, 138.7, 138.1, 137.7, 136.5, 136.4, 133.8, 133.4, 129.8, 129.7, 129.5, 128.8, 128.6, 128.5, 128.4, 128.3, 128.2, 128.1, 128.0, 127.9, 127.8, 127.4, 127.3, 127.1, 101.3, 101.2, 99.5, 99.1, 81.4, 81.2, 80.5, 78.1, 77.2, 77.1, 76.9, 75.4, 75.2, 74.9, 74.8, 74.7, 74.4, 73.8, 73.6, 70.7, 70.2, 70.0., 62.5, 62.2, 61.5, 52.8, 52.7, 52.5, 52.2, 49.6, 49.3, 41.9, 32.6, 30.3, 29.7, 29.4, 29.2, 28.8, 26.8, 26.3, 25.6, 22.6, 22.5, 20.8, 20.7. HRMS (ESI) C89H104N3O27 (M+H)+m/zの計算値1646.6857, 実測値1646.6847。
二糖3b(2.4g、2.0mmol)を乾燥ジクロロメタン(32mL)とトリエチルアミン(8mL)との混合物に溶解し、室温で3時間撹拌する。この混合物をジクロロメタンにより希釈し、希水性HCl、水、及び飽和水性塩化ナトリウムにより洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水して濃縮する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(酢酸エチル:石油エーテル、1:3→1:2)により精製すると、グリコシド4bが発泡体として得られる(1.75g、1.8mmol、90%)。TLC(酢酸エチル:石油エーテル、1:32 v/v)。Rf=0.25。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 171.7, 171.5, 167.0, 166.1, 156.0, 138.1, 137.7, 137.6, 133.3, 129.9, 129.8, 128.6, 128.5, 128.3, 128.1, 128.0, 127.9, 127.8, 127.7, 127.3, 98.7, 98.4, 82.5, 79.7, 76.1, 75.3, 75.1, 74.9, 74.7, 74.2, 73.6, 73.0, 72.9, 72.6, 72.4, 72.1, 71.3, 71.1, 70.7, 70.6, 70.1, 69.5, 68.8, 66.4, 65.9, 65.4, 65.3, 64.9, 64.1, 63.2, 60.4, 40.7, 40.6, 29.9, 29.7, 29.3, 28.4, 28.1, 26.5, 25.9, 25.6, 20.7, 20.6. HRMS (ESI) C48H61N4ClO15Na (M+Na)+m/zの計算値991.3720, 実測値991.3711。
四糖9d(110mg、64μmol)を乾燥ジクロロメタン(5mL)に溶解し、0℃に冷却する。TFA(0.5mL)を加え、室温で18時間、撹拌する。この混合物をジクロロメタンにより希釈し、飽和水性炭酸水素ナトリウム、水により洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水して濃縮すると、グリコシド10が発泡体(98mg、61μmol、95%)として得られる。TLC(酢酸エチル:石油エーテル、1:2、v/v):Rf=0.25。この生成物は非常に純度が高く、さらに精製することなく、次の工程に使用する。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 170.7, 170.5, 169.7, 169.4, 165.7, 165.2, 137.8, 137.7, 137.6, 137.3, 133.4, 130.9, 130.0, 129.9, 129.7, 129.3, 128.8, 128.7, 128.5, 128.4, 128.3, 128.2, 128.1, 127.9, 127.8, 127.6, 99.1, 99.0, 98.9, 98.5, 79.9, 78.7, 76.8, 75.7, 75.6, 75.5, 75.0, 74.8, 74.6, 73.9, 73.6, 72.9, 72.3, 70.5, 70.2, 70.1, 69.7, 68.7, 68.3, 67.5, 64.7, 63.6, 63.5, 62.3, 61.8, 52.1, 52.0, 41.4, 31.9, 30.5, 29.9, 29.7, 26.5, 25.8, 20.8. HRMS (ESI) C85H96N7O25 (M+H)+m/zの計算値1614.6456, 実測値1614.6440。
Ido立体配置型四量体20d(7mg、1.3μmol)を水(1mL)に溶解する。三酸化硫黄トリメチルアミン錯体(20mg、144μmol)及び炭酸ナトリウム(20mg)を室温で加える。この混合物を室温で72時間撹拌し、シリカゲルカラムの上に注ぎ入れる。残渣をクロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5→5:4:1→メタノール:水:アンモニア水、3:1:1)により精製すると、N−硫酸化四量体22aが発泡体(6mg、1.1μmol、89%収率)として得られる。TLC(EtOAc:エタノール:水、2:1:1):Rf=0.12。
炭素6にリンカーとマスクしていないアミノ官能基とを有するグリコシド(6当量)の乾燥DMF(DMF1mL当たり100mg)溶液に、室温でテトラ−スクシンイミジルエステル13a又は13b(1当量)の乾燥DMF(DMF1mLあたり40mg)溶液を加える。この反応混合物をトリエチルアミン(8当量)により処理し、室温で1〜24時間撹拌する。DMFを真空で除去し、残渣をEtOAc、次いで酢酸エチル:MeOH、9:1→3:2により溶出したシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、テトラ−スクシンイミジルエステルが得られる。
化合物14eは、一般手順Aの後に、化合物12d及び13aから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(酢酸エチル:MeOH、9:1→3:2)により精製すると、四量体14eが発泡体として得られる(135mg、53.5mmol、92%収率)。TLC(EtOAc:MeOH、9:1 v/v)。Rf=0.65。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 173.8, 173.2, 172.5, 140.0, 139.8, 139.4, 129.5, 129.4, 129.1, 129.0, 128.9, 128.8, 128.7, 102.5, 84.4, 79.6, 79.5, 77.2, 76.3, 76.1, 75.8, 74.2, 70.7, 70.6, 70.5, 68.8, 64.3, 62.3, 56.8, 46.7, 40.5, 37.8, 30.5, 27.8, 26.8, 26.3, 23.3, 20.8. HRMS (ESI) C137H188N8O36Na (M+Na)+m/zの計算値2544.3024, 実測値2544.3049。
化合物14hは、一般手順Aの後に、化合物12d及び13bから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(EtOAc→酢酸エチル:MeOH、9:1→3:2)により精製すると、四量体14hが発泡体として得られる(176mg、57mmol、95%収率)。TLC(EtOAc:MeOH、9:1、v/v)。Rf=0.55。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 174.6, 174.2, 172.3, 171.7, 138.4, 138.1, 128.2, 128.1, 127.7, 127.6, 127.4, 101.1, 82.7, 78.2, 77.9, 77.7, 77.4, 75.7, 75.6, 74.8, 74.6, 69.7, 69.3, 67.4, 61.7, 61.0, 55.6, 45.3, 39.3, 39.0, 36.9, 36.5, 36.4, 35.9, 34.8, 32.9, 32.2, 29.8, 29.2, 29.1, 28.9, 28.8, 26.6, 26.5, 26.4, 25.7, 25.4, 25.3, 24.9, 22.2。
化合物14aは、一般手順Aの後に、化合物12a及び13bから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(EtOAc→酢酸エチル:MeOH、9:1→4:1)により精製すると、四量体14aが発泡体として得られる(314mg、67.9mmol、93%収率)。TLC(EtOAc:MeOH、9:1、v/v)。Rf=0.55。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 170.6, 169.9, 169.5, 165.7, 156.4, 138.1, 137.9, 137.8, 137.2, 136.7, 133.7, 129.7, 129.3, 129.1, 129.0, 128.8, 128.5, 128.4, 128.2, 128.1, 127.9, 127.7, 127.6, 125.3, 98.9, 98.3, 80.5, 74.8, 74.7, 73.9, 72.9, 72.4, 70.4, 68.9, 68.8, 67.7, 66.5, 62.5, 52.6, 52.4, 40.9, 29.8, 29.2, 26.4, 25.7, 22.9, 21.4, 20.8. HRMS (ESI) C253H326N12O68Na2[M+2Na]2+ m/z (%)の計算値, 2334.1187 (20), 2334.6204 (65), 2335.1218 (98), 2335.6235 (100), 2336.1250 (80), 2336.6267 (50), 2337.1282 (30); 実測値, 2334.6121 (50), 2335.1125 (85), 2335.6130 (100), 2336.1157 (98), 2336.6216 (85), 2337.1265 (70), 2337.6304 (50), 2338.1331 (40), 2338.6350 (30)。
化合物14bは、一般手順Aの後に、化合物12b及び13bから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(EtOAc→酢酸エチル:MeOH、9:1→4:1→メタノール)により精製すると、四量体14bが発泡体として得られる(394mg、85mmol、96%収率)。TLC(EtOAc:MeOH、9:1、v/v)。Rf=0.55。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 173.9, 173.5, 172.5, 172.1, 171.2, 170.2, 165.9, 163.6, 138.5, 138.2, 137.9, 133.5, 129.8, 129.7, 128.9, 128.4, 128.3, 128.2, 128.1, 127.9, 127.8, 127.5, 127.4, 99.2, 97.1, 80.6, 78.3, 78.1, 77.9, 77.8, 74.9, 74.8, 73.7, 73.5, 72.6, 72.5, 72.4, 70.6, 69.7, 69.4, 68.8, 68.7, 68.3, 68.2, 67.6, 62.9, 53.1, 51.9, 49.9, 45.5, 39.4, 39.2, 36.7, 36.1, 35.9, 35.1, 33.3, 32.9, 32.7, 30.7, 29.3, 29.2, 29.1, 28.9, 28.3, 27.0, 26.8, 26.6, 26.5, 25.9, 25.5, 25.2, 25.1。
化合物14cは、一般手順Aの後に、化合物12c及び13bから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(EtOAc→酢酸エチル:MeOH、9:1→4:1→メタノール)により精製すると、四量体14cが発泡体として得られる(544mg、0.072mmol、99%収率)。TLC(EtOAc:MeOH、9:1、v/v)。Rf=0.45。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 174.2, 172.0, 171.0, 168.5, 168.0, 165.1, 164.8, 163.0, 138.7, 137.9, 137.5, 136.3, 133.7, 133.3, 129.5, 129.3, 128.6, 128.3, 128.1, 127.9, 127.7, 127.3, 126.9, 100.9, 100.8, 97.8, 97.2, 81.9, 80.2, 78.0, 74.5, 74.3, 74.1, 73.4, 69.9, 69.8, 69.5, 69.0, 67.2, 62.2, 61.6, 52.3, 52.0, 51.9, 48.8, 48.6, 48.4, 48.3, 48.1, 47.9, 47.8, 39.1, 38.9, 36.4, 36.2, 35.9, 30.9, 29.3, 29.1, 28.8, 26.5, 26.2, 25.5, 21.9, 20.1。
化合物14dは、一般手順Aの後に、化合物10及び13bから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(EtOAc→酢酸エチル:MeOH、9:1→4:1→メタノール)により精製すると、四量体14dが発泡体として得られる(83mg、11.3μmol、93%収率)。TLC(EtOAc:MeOH、9:1、v/v)。Rf=0.55。13C-NMR (125MHz, DMSO-D6) δ 171.9, 171.8, 170.1, 169.9, 169.0, 168.9, 168.5, 164.9, 164.5, 162.3, 137.8, 137.7, 137.5, 133.5, 133.3, 129.4, 129.3, 129.1, 128.8, 128.6, 128.3, 128.2, 128.1, 128.0, 127.8, 127.7, 127.6, 127.5, 127.4, 127.3, 127.2, 98.1, 98.0, 97.7, 97.0, 79.7, 79.2, 78.9, 78.7, 78.3, 77.2, 74.9, 74.3, 74.2, 73.9, 73.5, 73.3, 73.2, 72.5, 72.3, 71.7, 69.7, 69.6, 69.2, 69.1, 68.8, 68.7, 67.9, 67.6, 67.3, 62.5, 62.4, 61.8, 61.6, 51.8, 51.5, 45.0, 39.0, 38.5, 38.3, 38.2, 36.1, 35.7, 35.4, 30.7, 29.1, 29.0, 28.9, 28.7, 28.5, 26.3, 26.2, 25.3, 25.2, 20.4。
トリクロロアセトイミダート供与体(1.3当量)及びグリコシル受容体アルコール(1当量)の無水トルエン(受容体1mmolあたり40mL)溶液を反応温度(−10〜−20℃の間)まで冷却し、粉末モレキュラーシーブ(4Å)を加え、この懸濁液をこの温度で撹拌する。15分後、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル(0.3当量)を加え、TLC(トルエン/酢酸エチル4:1)により完了するのが示されるまで、この反応混合物を反応温度で撹拌する。この混合物を酢酸エチルにより希釈し、セライトによりろ過して水性炭酸水素ナトリウムに入れ、有機層を水及び飽和水性塩化ナトリウムにより洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水して濃縮する。この残渣をフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、完全に保護されているオリゴ糖が得られる。
乾燥DCM(10mL)中のイミダート7a(1.7g、1.69mmol)、N−ベンジルオキシカルボニル−6−ヒドロキシヘキシルアミン(2a)(0.85g、3.38mmol)、及び乾燥4Åモレキュラーシーブ(1.0g)の混合物を1時間撹拌し、次に氷浴中で冷却して、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル(0.092mL、0.508mmol)を加える。30分後、この反応をトリエチルアミンによりクエンチしてろ過し、ろ液を水性NaHCO3により洗浄して乾燥し、濃縮する。クロマトグラフィー(ヘキサン中の15〜40%EtOAc)により、表題化合物(1.42g、1.3mmol、77%)が得られる。1H NMR (CDCl3) δ 8.05-8.03 (m, 2H), 7.55-7.17 (m, 23H), 5.55 (d, J = 3.9 Hz, 1H), 5.30 (dd, J = 8.7, 7.7 Hz, 1H), 5.08 (bs, 2H), 4.88 (bs, 2H), 4.83 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.77 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.73 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.60-4.56 (m, 3H), 4.34 (dd, J = 11.8, 5.5 Hz, 1H), 4.27-4.19 (m, 2H), 4.14-4.09 (m, 3H), 4.02 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 3.94-3.90 (m, 2H), 3.85-3.82 (m, 2H), 3.74-3.71 (m, 1H), 3.50 (dd, J = 9.8, 8.9 Hz, 1H), 3.44-3.39 (m, 1H), 3.29 (dd, J = 10.4, 3.9 Hz, 1H), 3.04-2.98 (m, 2H), 2.03 (s, 3H), 1.51-1.41 (m, 2H), 1.26-1.12 (m, 6H). 13C NMR δ 170.51, 167.01, 165.00, 156.33, 137.57, 137.48, 137.25, 136.77, 133.33, 129.72, 128.61, 128.53, 128.34, 128.19, 128.13, 128.02, 127.69, 127.61, 100.83, 97.98, 83.35, 82.93, 80.08, 77.90, 75.51, 75.23, 74.76, 74.24, 74.02, 73.17, 72.36, 70.29, 69.76, 67.04, 66.53, 65.03, 63.22, 62.57, 60.38, 40.88, 40.69, 29.65, 29.19, 26.21, 25.48, 20.77. HRMS (ESI) C58H65ClN4O15Na [M+Na]+m/zの計算値, 1115.4033; 実測値, 1115.4033。
化合物6bは、一般手順Bの後に、トリクロロアセトイミダート二糖供与体(WO2012/121617)(1g)及びCbz保護ヘキサ−アミノアルコール(Chipowsky,S.;Lee,Y.C.Carb.Res.,1973,31,339−346)(2.0当量)から調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(酢酸エチル:石油エーテル、1:3→1:2)により精製すると、グリコシド6bが発泡体として得られる(1.7g、1.55mmol、82%収率)。TLC(EtOAc:石油エーテル、1:2、v/v)。Rf=0.45。13C-NMR (125MHz, CDCl3) 170.6, 166.9, 166.1, 165.6, 156.4, 137.7, 137.5, 137.4, 136.7, 133.2, 129.9, 129.8, 128.6, 128.5, 128.4, 128.3, 128.1, 127.9, 98.8, 98.4, 80.6, 80.3, 76.8, 75.2, 75.1, 74.7, 74.1, 72.9, 72.4, 70.4, 70.2, 69.7, 68.7, 68.2, 66.5, 65.8, 65.3, 65.2, 63.8, 63.6, 62.7, 60.4, 40.6, 29.8, 29.3, 26.4, 25.9, 25.7, 20.7. HRMS (ESI) C58H65ClN4O15Na [M+Na]+ m/zの計算値, 1115.4033; 実測値, 1115.4031。
イミダート(2.14g、1.88mmol)(1)(WO2012/121617)及び6−ヒドロキシヘキシルカルバミン酸2,2,2−トリクロロエチル(2b)(1.10g、3.76mmol)を乾燥アセトニトリル(15mL)に溶解し、次に濃縮乾固する。残渣を乾燥ジクロロメタン(15mL)に溶解し、アルゴン下、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル(0.068mL、0.376mmol)を加えている間、アルゴン下、撹拌しながら氷浴中で冷却する。30分後、この溶液を水性NaHCO3により洗浄し、乾燥して濃縮乾固する。クロマトグラフィー[ヘキサン中の25〜60%(EtOAc/CHCl3 1:2)]により、表題化合物が発泡体(1.84g、1.45mmol、77%)として得られる。1H NMR (CDCl3), δ 8.07-8.05 (m, 2H), 7.76-7.74 (m, 2H), 7.61-7.54 (m, 3H), 7.47-7.44 (m, 2H), 7.40-7.37 (m, 2H), 7.30-7.16 (m, 12H), 5.60 (d, J = 3.9 Hz, 1H), 5.31 (dd, J = 8.7, 7.7 Hz, 1H), 4.90 (bs, 1H), 4.87 (t, J = 9.3 Hz, 1H), 4.76-4.72 (m, 4H), 4.66-4.58 (m, 3H), 4.48 (dd, J = 10.5, 6.7 Hz, 1H), 4.38-4.25 (m, 3H), 4.18 (t, J = 6.9 Hz, 1H), 4.14 (s, 2H), 4.09-3.92 (m, 4H), 3.87-3.83 (m, 1H), 3.78-3.74 (m, 1H), 3.45-3.43 (m, 1H), 3.35 (dd, J = 10.3, 3.9 Hz, 1H), 3.08-3.04 (m, 2H), 2.05 (s, 3H), 1.54-1.43 (m, 6H). 13C NMR δ 170.49, 167.05, 165.01, 154.50, 154.14, 143.24, 143.01, 141.32, 137.35, 137.13, 133.40, 129.75, 129.71, 128.58, 128.39, 127.97, 127.89, 127.79, 127.61, 127.25, 125.10, 124.91, 120.11, 100.83, 95.80, 82.79, 77.38, 75.11, 74.88, 74.72, 74.47, 74.25, 73.97, 72.31, 70.39, 69.77, 68.71, 64.98, 62.60, 61.98, 46.71, 41.08, 40.68, 29.44, 29.15, 26.13, 25.47, 20.69. HRMS (ESI) C61H64Cl4N4O17Na [M+Na]+ m/zの計算値1287.2918, 実測値1287.2927。
アセトイミダート供与体(WO2012/121617)(5a)(1.37g、1.36mmol)及び4a(1.19g、1.14mmol)の乾燥DCM(10mL)溶液を氷浴中で冷却し、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル(0.062mL、0.34mmol)を撹拌しながら加える。30分後、この溶液を水性NaHCO3により洗浄し、乾燥して濃縮乾固する。クロマトグラフィー(10〜30%EtOAc/ヘキサン)により、表題化合物がシロップとして得られる。1H NMR (CDCl3) δ 8.07-8.02 (m, 4H), 7.62-7.55 (m, 2H), 7.48-7.42 (m, 4H), 7.37-7.11 (m, 25H), 5.49-5.46 (m, 2H), 5.37 (dd, J = 8.6, 8.1 Hz, 1H), 5.23 (dd, J = 8.8, 7.8 Hz, 1H), 5.10 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.91-4.87 (m, 3H), 4.83-4.79 (m, 2H), 4.72-4.62 (m, 7H), 4.56 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 4.51 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 4.39-4.32 (m, 2H), 4.24-4.08 (m, 6H), 4.01-3.57 (m, 15H), 3.49 (t, J = 9.4 Hz, 1H), 3.41-3.37 (m, 1H), 3.30 (dd, J = 10.3, 3.9 Hz, 1H), 3.22 (dd, J = 10.2, 4.0 Hz, 1H), 3.07-3.03 (m, 2H), 2.02, 2.00 (s, 各3H), 1.50-1.37 (m, 2H), 1.30-1.12 (m, 6H); 13C NMR δ 170.50, 170.44, 166.88, 166.48, 164.99, 164.95, 154.50, 138.30, 137.52, 137.40, 137.32, 137.24, 133.80, 133.35, 129.77, 129.73, 129.05, 128.90, 128.81, 128.61, 128.57, 128.37, 128.32, 128.25, 128.21, 128.11, 128.05, 127.75, 127.69, 127.49, 127.41, 125.32, 100.98, 100.81, 98.08, 97.66, 95.81, 82.95, 82.83, 80.14, 77.81, 77.77, 77.60, 75.58, 75.23, 75.05, 74.72, 74.64, 74.47, 74.20, 74.01, 72.41, 72.32, 70.37, 69.73, 69.68, 65.01, 64.26, 63.23, 62.65, 62.42, 61.90, 41.09, 40.53, 40.47, 29.42, 29.12, 26.10, 25.45, 20.77. HRMS (ESI) C90H98Cl5N7O27Na [M+Na]+ m/z (%)の計算値, 1906.4851 (62), 1907.4885 (61), 1908.4821 (100), 1909.4855 (97), 1910.4792 (64), 1911.4826 (62); 実測値, 1906.4845 (50), 1907.4875 (60), 1908.4772 (100), 1909.4808 (90), 1910.4786 (90), 1911.4829 (70). HRMS (ESI) C90H98N7Cl5O27Na (M+Na)+ m/zの計算値1906.4851, 実測値1906.4861。
化合物3bは、一般手順Bの後に、トリクロロアセトイミダート二糖供与体(WO2012/121617)(1g)及びBoc保護ヘキサ−アミノアルコール(2d)(Pichot,C.,Delair,T.,Mandrand,B.and Llauro,M.F.;Makromol.Chem.,1993,194,117−135)から調製される。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(酢酸エチル:クロロホルム:石油エーテル、1:3:3)により精製すると、グリコシド3bが発泡体として得られる(3.0g、2.56mmol、86%収率)。TLC(EtOAc:石油エーテル、1:2、v/v)。Rf=0.45。13C-NMR (125MHz, CDCl3) 170.5, 166.9, 165.6, 156.0, 154.2, 143.3, 143.1, 141.4, 141.3, 137.7, 137.2, 133.4, 129.9, 129.8, 129.1, 128.7, 128.5, 128.4, 128.3, 128.1, 128.0, 127.8, 127.7, 127.3, 125.1, 124.9, 120.1, 98.9, 98.5, 78.9, 78.2, 75.8, 74.9, 74.6, 72.8, 72.4, 70.2, 69.8, 68.9, 68.5, 68.2, 65.2, 65.0, 63.3, 62.1, 60.4, 46.8, 40.6, 30.0., 29.4, 28.5, 26.6, 25.9, 25.7, 20.7. HRMS (ESI) C63H71N4ClO17Na (M+Na)+ m/zの計算値1213.4400, 実測値1213.4409。
化合物6dは、一般手順Bの後に、トリクロロアセトイミダート二糖供与体(WO2012/121617)(1g)及びグリコシド4bから調製される。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(酢酸エチル:石油エーテル、1:1)により精製すると、N−Boc保護基が一部失われるために中程度の収率で、グリコシド6dが発泡体として得られる(1.2g、0.66mmol、45%収率)。TLC(EtOAc:石油エーテル、1:2、v/v)。Rf=0.35。13C-NMR (125MHz, CDCl3) 170.6, 170.5, 167.1, 167.0, 166.9, 165.9, 165.7, 165.5, 156.0, 137.7, 137.5, 137.3, 136.5, 133.4, 133.3, 129.8, 129.5, 128.7, 128.6, 128.5, 128.4, 128.3, 128.2, 128.1, 128.0, 127.9, 127.7, 98.8, 98.4, 98.1, 97.9, 80.6, 78.9, 77.2, 76.9, 75.6, 75.3, 75.2, 74.9, 74.7, 74.5, 74.1, 73.4, 73.2, 72.4, 70.5, 70.3, 70.1, 69.8, 68.8, 68.2, 67.4, 65.5, 65.2, 65.1, 64.7, 63.9, 63.8, 63.7, 62.7, 62.3, 60.4, 40.6, 40.5, 29.9, 29.7, 29.3, 28.5, 26.5, 25.9, 20.8. HRMS (ESI) C92H105N7Cl2O27Na (M+Na)+ m/zの計算値1832.6333, 実測値1832.6316。
DABCO(クロロアセチル基あたり6当量)を、室温で乾燥エタノール(40μmolに対し5mL)中の出発原料に加える。この混合物をアルゴン下、60〜70℃で2時間加熱する。TLC(EtOAc:石油エーテル、3:2)により反応の完了が示された後、Dowex 50WX8−200イオン交換樹脂を加え、溶液を中和する。15分後、この樹脂をろ別し、この溶液を濃縮乾固する。クロマトグラフィー(EtOAc:石油エーテル、3:2)により、ブロックされていない一級ヒドロキシル基を有する生成物が得られる。
EtOH(20mL)及びピリジン(2mL)中のクロロアセタート6a(1.1g、1.006mmol)の溶液に、1,4−ジアザビシクロ(2.2.2)オクタン(0.338g、3.02mmol)を加え、この溶液を、約70〜80℃で3時間加熱する。クロロホルムを加え、この混合物を水、水性HCl、水性NaHCO3により洗浄し、乾燥して濃縮する。クロマトグラフィー(20〜60%EtOAc/Hex)により、生成物8aが発泡体として得られる(0.932g、0.916mmol、91%)。1H NMR (CDCl3) δ 8.04-8.02 (m, 2H), 7.54-7.15 (m, 23H), 5.62 (d, J = 3.9 Hz, 1H), 5.29 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 5.08 (bs, 2H), 4.89 (bs, 2H), 4.82 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 4.76 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.72 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.65 (bs, 1H), 4.59-4.55 (m, 2H), 4.29 (dd, J = 11.9, 2.0 Hz, 1H), 4.23 (dd, J = 12.0, 4.8 Hz, 1H), 4.07-4.00 (m, 2H), 3.95-3.77 (m, 5H), 3.54-3.41 (m, 3H), 3.27 (dd, J = 10.4, 4.0 Hz, 1H), 3.03-2.98 (m, 2H), 2.03 (s, 3H), 1.51-1.41 (m, 2H), 1.26-1.11 (m, 6H). 13C NMR δ 170.63, 165.01, 156.34, 137.66, 137.53, 137.36, 136.75, 133.26, 129.82, 129.70, 128.57, 128.52, 128.31, 128.10, 128.00, 127.68, 101.18, 97.64, 83.47, 80.17, 78.04, 75.49, 75.18, 74.89, 74.41, 74.29, 72.82, 70.06, 69.88, 66.54, 63.24, 62.96, 61.93, 40.86, 29.64, 29.22, 26.19, 25.46, 20.78。
化合物8bは、一般手順Cの後に、化合物6bから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(EtOAc:PE、1:2→1:1)により精製すると、8bが発泡体として得られる(1.8g、1.77mmol、92%収率)。TLC(EtOAc:PE、1:2、v/v):Rf=0.15。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 170.6, 165.7, 156.5, 137.8, 137.5, 137.4, 136.7, 133.1, 130.1, 129.8, 128.5, 128.4, 128.3, 128.1, 128.0, 127.9, 127.8, 127.7, 98.6, 98.4, 80.7, 80.5, 76.8, 75.8, 75.1, 74.5, 73.5, 72.7, 72.1, 70.3, 69.8, 68.8, 67.8, 67.3, 66.6, 63.9, 63.7, 63.1, 61.7, 60.4, 40.9, 29.8, 29.4, 29.2, 26.3, 25.7, 20.7. HRMS (ESI) C56H64N4O14Na [M+Na]+ m/zの計算値1039.4317, 実測値1039.4310。
化合物8cは、一般手順Cの後に、化合物6cから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(EtOAc:トルエン、1:9→1:1)により精製すると、8cが発泡体として得られる(1.6g、0.923mmol、87%収率)。TLC(EtOAc:トルエン、2:1、v/v)。Rf=0.45。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 170.4, 166.9, 166.5, 164.9, 138.2, 137.5, 137.4, 137.3, 137.2, 133.8, 133.3, 129.7, 128.9, 128.8, 128.6, 128.5, 128.4, 128.3, 128.2, 128.1, 128.0, 127.7, 127.5, 127.4, 100.9, 100.8, 98.1, 97.6, 82.9, 82.8, 80.1, 77.0, 76.8, 75.6, 75.2, 75.0, 74.7, 74.6, 74.5, 74.2, 74.0, 72.4, 72.3, 70.3, 69.7, 65.0, 64.3, 63.2, 62.6, 62.4, 61.9, 41.1, 40.5, 29.4, 29.1, 26.1, 25.4, 20.7. HRMS (ESI) C86H96N7Cl3O25Na (M+Na)+ m/zの計算値1754.5419, 実測値1754.5426。
化合物51は、一般手順Cの後に、化合物50から調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(EtOAc:PE、1:1→2:1)により精製すると51が発泡体として得られる(215mg、140μmol、93%収率)。TLC(EtOAc:PE、3:2、v/v)。Rf=0.25。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 171.1, 170.6, 170.5, 165.8, 165.7, 156.1, 137.8, 137.5, 137.4, 133.3, 130.3, 130.1, 129.8, 129.7, 128.6, 128.5, 128.4, 128.39, 128.33, 128.2, 128.1, 128.0, 127.9, 127.8, 98.5, 98.2, 98.0, 97.9, 80.6, 79.3, 79.0, 76.9, 75.6, 75.2, 74.9, 74.6, 74.2, 74.0, 73.6, 73.5, 72.9, 72.4, 72.1, 70.3, 70.0, 69.4, 69.0, 68.1, 67.9, 67.2, 64.1, 63.8, 62.7, 62.6, 61.9, 61.7, 60.4, 31.9, 29.7, 29.4, 28.8, 26.4, 25.8, 20.74, 20.73. HRMS (ESI) C88H103N7O25Na (M+Na)+ m/zの計算値1680.6901, 実測値1680.6919。
アセトニトリル(32μmolに対し5mL)及び水(0.9mL)中の出発原料の溶液を、室温で4〜24時間、TEMPO(0.2当量)及びBAIB(ヒドロキシル基あたり2.5当量)により処理する。TLC(EtOAc:石油エーテル、3:2)により反応の完了が示された後、クロロホルム及び水を加える。この溶液を希HClにより酸性にし、クロロホルムにより逆抽出して乾燥し、濃縮する。残渣を乾燥エーテルに溶解し、TLC(EtOAc:石油エーテル、2:3)によりメチルエステルの形成が示されるまで、過剰量の新しく調製したジアゾメタンのエーテル溶液により処理する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(EtOAc:石油エーテル、2:3)により精製すると、エステルが得られる。
化合物9bは、一般手順D1の後に、化合物8bから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(EtOAc:PE、1:2→1:1)により精製すると、9bが発泡体として得られる(1.1g、1.0mmol、84%収率)。TLC(EtOAc:PE、1:1、v/v):Rf=0.75。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 170.5, 169.7, 165.5, 156.4, 137.8, 137.7, 136.7, 133.2, 129.9, 129.7, 129.0, 128.7, 128.5, 128.4, 128.3, 128.2, 128.0, 127.9, 127.8, 127.7, 125.3, 99.5, 99.2, 80.1, 76.8, 76.0, 74.8, 74.7, 73.4, 72.3, 70.1, 68.7, 68.0, 67.4, 66.6, 63.8, 62.4, 52.3, 40.9, 29.8, 29.3, 26.5, 25.8, 20.8. HRMS (ESI) C57H64N4O15Na (M+Na)+ m/zの計算値1067.4266, 実測値1067.4269。
アセトニトリル(32μmolに対し5mL)及び水(0.9mL)中の出発原料の溶液を、室温で4〜24時間、TEMPO(0.2当量)及びBAIB(ヒドロキシル基あたり2.5当量)により処理する。TLC(EtOAc:石油エーテル、3:2)により反応の完了が示された後、クロロホルム及び水を加える。この溶液を希HClにより酸性にし、クロロホルムにより逆抽出して乾燥し、濃縮する。残渣をジエチルエーテル/メタノール(3:2)に溶解し、TMS−ジアゾメタンの2Mヘキサン溶液(カルボキシラートあたり1.5当量)を0℃で滴下して加える。完了(TLC:Tol/EtOAc 3:2)後、酢酸(0.5mL)を加えて、反応をクエンチする。溶媒を真空で蒸発させて、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると、エステルが得られる。
アセトニトリル(10mL)及び水(2mL)中のアルコール8a(0.93g、0.914mmol)の溶液に、ヨードベンゼンジアセタート(0.589g、1.829mmol)及びTEMPO(2,2,6,6−テトラメチルピペリジニルオキシ、遊離ラジカル)(0.043g、0.274mmol)を加え、次にこの溶液を室温で24時間撹拌する。溶媒のほとんどを蒸発させて、クロロホルムを加え、この混合物を2M水性HClにより洗浄して、次に乾燥し濃縮乾固する。粗製残渣のエーテル(15mL)とMeOH(5mL)との溶液を氷浴中で冷却し、ヘキサン中2M(トリメチルシリル)ジアゾメタン(0.429ml、2.74mmol)を加える。30分後、過剰量のジアゾメタンを少量の酢酸によりクエンチし、次にこの溶液を濃縮乾固する。クロマトグラフィー(10〜40%EtOAc/ヘキサン)により、表題化合物9aがシロップとして得られる(0.844g、0.808mmol、88%)。1H NMR (CDCl3) δ 8.03-8.01 (m, 2H), 7.55-7.16 (m, 23H), 5.50 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 5.32 (dd, J = 8.4, 7.1 Hz, 1H), 5.08 (bs, 2H), 4.87 (bs, 2H), 4.81 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.78 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.71 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.69 (bs, 1H), 4.62 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 4.56 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.33-4.27 (m, 2H), 4.22 (dd, J = 12.1, 3.6 Hz, 1H), 4.07 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.00 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 3.92-3.82 (m, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.66-3.63 (m, 1H), 3.51 (t, J = 9.4 Hz, 1H), 3.44-3.39 (m, 1H), 3.29 (dd, J = 10.4, 3.7 Hz, 1H), 3.04-3.00 (m, 2H), 2.03 (s, 3H), 1.51-1.41 (m, 2H), 1.28-1.12 (m, 6H). 13C NMR δ 170.63, 168.63, 164.96, 156.34, 137.66, 137.56, 137.41, 136.79, 133.33, 129.74, 129.68, 128.52, 128.31, 128.04, 127.94, 127.78, 127.72, 101.20, 97.66, 82.26, 80.11, 77.60, 75.48, 75.01, 74.95, 74.49, 74.32, 73.81, 69.89, 69.79, 66.52, 63.40, 62.31, 52.75, 40.89, 29.66, 29.11, 26.23, 25.47, 20.82. HRMS (ESI) C57H64N4O15Na [M+Na]+m/zの計算値, 1067.4266; 実測値, 1067.4269。
化合物9cは、一般手順D2の後に、化合物8cから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(EtOAc:トルエン、1:9→1:1)により精製すると9cが発泡体として得られる(1.0g、0.56mmol、71%収率)。TLC(EtOAc:PE、1:1、v/v):Rf=0.75。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 170.6, 168.5, 167.7, 164.9, 164.7, 154.5, 138.2, 137.8, 137.6, 137.5, 137.3, 137.2, 133.8, 133.3, 129.9, 129.7, 129.6, 129.1, 128.9, 128.8, 128.5, 128.3, 128.2, 128.1, 128.0, 127.9, 127.8, 127.7, 127.6, 127.5, 125.3, 101.2, 101.1, 97.7, 97.3, 82.6, 80.2, 77.7, 76.8, 75.6, 75.5, 75.3, 75.0, 74.9, 74.8, 74.5, 74.1, 73.8, 73.5, 69.8, 69.1, 63.4, 62.7, 62.2, 61.5, 52.7, 52.1, 41.1, 29.4, 29.0, 26.1, 25.5, 21.5, 20.8. HRMS (ESI) C88H96N7Cl3O27Na (M+Na)+ m/zの計算値1810.5317, 実測値1810.5317。
化合物9dは、一般手順D2の後に、化合物8dから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(EtOAc:PE、1:2→1:1)により精製すると、9dが発泡体として得られる(165mg、96μmol、93%収率)。TLC(EtOAc:PE、1:1、v/v):Rf=0.75。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 170.7, 170.5, 169.7, 169.4, 165.7, 165.2, 155.9, 137.8, 137.7, 137.6, 137.3, 133.4, 130.0, 129.9, 129.7, 129.4, 128.8, 128.7, 128.5, 128.4, 128.3, 128.2, 128.0, 127.9, 127.8, 127.6, 99.2, 99.1, 98.9, 98.5, 79.9, 79.0, 78.7, 76.8, 75.8, 75.6, 75.5, 75.0, 74.8, 74.6, 73.9, 72.9, 72.3, 70.5, 70.2, 70.1, 69.7, 68.7, 68.2, 67.5, 63.6, 63.5, 62.3, 62.2, 61.8, 60.4, 40.5, 29.9, 29.7, 29.3, 28.5, 26.5, 25.8, 20.8. HRMS (ESI) C90H103N7O27Na (M+Na)+ m/zの計算値1736.6800, 実測値1736.6814。
乾燥ピリジン(20μmolに対し1mL)中の出発原料に、室温でチオール酢酸(20μmolあたり1mL)を加える。この反応混合物を室温で48〜72時間撹拌する。TLC(EtOAc:トルエン、4:1)により反応の完了が示された後、トルエンを加え、この溶液を水、希HCl、及びNaHCO3溶液(飽和水性)により洗浄し、乾燥して濃縮する。クロマトグラフィー(EtOAc:トルエン、4:1)により、N−アセチル化生成物が得られる。
化合物6fは、一般手順Eの後に、化合物6eから発泡体として調製される。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(トルエン→EtOAc:トルエン、3:1→1:1)により精製すると、6fが得られる(0.98g、1.45mmol、96%収率)。TLC(EtOAc:トルエン、1:1、v/v)。Rf=0.15。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 170.7, 170.4, 156.5, 138.4, 137.7, 136.7, 129.0, 128.5, 128.4, 128.2, 128.0, 127.9, 127.8, 127.7, 125.3, 99.8, 80.5, 78.3, 74.6, 74.5, 72.8, 69.3, 66.5, 63.3, 56.9, 40.7, 29.7, 29.1, 26.1, 25.4, 23.5, 21.4, 20.9. HRMS (ESI) C38H48N2O9(M+H)+ m/zの計算値699.3258, 実測値699.3257。
ピリジン(3mL)及びチオ酢酸(3mL)中のアジド9a(0.84g、0.804mmol)の溶液を、室温で24時間撹拌する。次に、トルエンを加え、この溶液を水、水性HCl、次いで水性NaHCO3により洗浄し、乾燥して濃縮乾固する。クロマトグラフィー(20〜60%EtOAc/ヘキサン)により、生成物が発泡体として得られる(0.649g、0.612mmol、76%)。1H NMR (CDCl3) δ 8.01-7.99 (m, 2H), 7.56-7.52 (m, 1H), 7.43-7.40 (m, 2H), 7.36-7.25 (m, 16H), 7.17-7.12 (m, 4H), 5.81 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 5.34 (dd, J = 8.7, 7.0 Hz, 1H), 5.09 (bs, 2H), 4.96 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 4.83 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.78 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.70 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 4.68 (bs, 1H), 4.62-4.52 (m, 4H), 4.35 (dd, J = 12.0, 2.1 Hz, 1H), 4.28 (dt, J = 10.0, 3.5 Hz, 1H), 4.21-4.14 (m, 2H), 3.95 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 3.89-3.80 (m, 3H), 3.78 (s, 3H), 3.69 (t, J = 10.0 Hz, 1H), 3.63 (t, J = 9.3 Hz, 1H), 3.43-3.38 (m, 1H), 3.04-3.00 (m, 2H), 2.04 (s, 3H), 1.51-1.40 (m, 2H), 1.36 (s, 3H), 1.27-1.11 (m, 6H). 13C NMR δ 170.69, 170.15, 167.94, 164.97, 156.34, 138.17, 137.73, 136.75, 136.60, 133.48, 129.71, 129.45, 128.67, 128.54, 128.52, 128.47, 128.38, 128.29, 128.17, 128.15, 128.08, 128.05, 127.90, 127.79, 101.44, 100.00, 81.01, 80.81, 77.93, 77.25, 75.52, 75.06, 74.94, 74.80, 73.88, 70.77, 69.98, 66.54, 62.31, 52.92, 52.71, 40.88, 29.67, 29.08, 26.22, 25.45, 22.57, 20.81. HRMS (ESI) C59H68N2O16Na [M+Na]+ m/zの計算値, 1083.4467; 実測値, 1083.4462。
化合物11bは、一般手順Eの後に、化合物9bから発泡体として調製される。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(トルエン→EtOAc:トルエン、3:1→1:1)により精製すると、11bが得られる(1.0g、0.95mmol、99%収率)。TLC(EtOAc:トルエン、1:1、v/v):Rf=0.2。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 170.6, 169.9, 169.5, 165.7, 156.4, 138.1, 137.9, 137.3, 137.2, 136.7, 133.7, 129.8, 129.3, 129.0, 128.9, 128.8, 128.7, 128.5, 128.4, 128.2, 127.9, 127.7, 127.6, 127.3, 125.3, 99.9, 98.3, 81.7, 80.5, 76.8, 75.9, 74.8, 74.7, 74.0, 73.0, 72.7, 72.4, 70.4, 68.9, 68.8, 67.7, 66.5, 62.5, 52.6, 52.3, 40.9, 29.8, 29.2, 26.4, 25.7, 22.9, 21.4, 20.8. HRMS (ESI) C59H68N2O16Na (M+Na)+ m/zの計算値1083.4467, 実測値1083.4471。
化合物11cは、一般手順Eの後に、化合物9cから発泡体として調製される。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(トルエン→EtOAc:トルエン、9:1→1:1)により精製すると11cが得られる(681mg、0.38mmol、75%収率)。TLC(EtOAc:トルエン、4:1、v/v):Rf=0.75。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 172.7, 170.7, 170.6, 170.2, 170.1, 167.9, 167.4, 164.9, 154.5, 138.8, 138.1, 137.9, 137.7, 136.5, 136.4, 133.8, 133.5, 136.4, 133.8, 133.5, 129.8, 129.7, 129.5, 129.0, 128.9, 128.8, 128.6, 128.5, 128.3, 128.2, 128.1, 128.0, 127.9, 127.8, 127.7, 127.5, 127.4, 127.3, 127.1, 125.3, 101.3, 101.2, 99.5, 99.2, 81.4, 81.2, 80.5, 78.1, 77.2, 77.1, 76.8, 76.1, 75.4, 75.2, 75.1, 74.9, 74.8, 74.7, 74.5, 74.3, 74.0, 73.8, 73.6, 70.7, 70.2, 69.9, 69.0, 62.2, 61.5, 52.8, 52.7, 52.5, 52.2, 41.0, 29.4, 29.0, 26.1, 25.4, 22.6, 22.5, 21.5, 20.8. HRMS (ESI) C92H104N3Cl3O29Na (M+Na)+ m/zの計算値1842.5719, 実測値1842.5718。
出発原料を、乾燥メタノール(50μmolに対し10mL)に室温で溶解し、新しく調製した1%ナトリウムメトキシド(150mgに対し20μL)溶液により処理する。室温で、この反応混合物の撹拌を24時間継続する。TLC(DCM:MeOH、9:1)により反応の完了が示された後、この溶液を濃縮して乾燥する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(DCM:MeOH、9:1→5:1)により精製すると、脱O−アセチル化生成物が得られる。
化合物15eは、一般手順Fの後に、化合物14eから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(DCM:MeOH、9:1→5:1)により精製すると、テトラオール15eが発泡体として得られる(85mg、36μmol、83%収率)。TLC(DCM:MeOH、9:1、v/v):Rf=0.55。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 172.4, 171.7, 138.4, 138.1, 128.1, 128.0, 127.7, 127.5, 127.3, 101.1, 82.7, 78.2, 77.9, 77.7, 77.4, 75.7, 74.7, 74.6, 69.2, 67.4, 61.0, 55.5, 45.3, 39.2, 36.5, 29.2, 26.4, 25.5, 22.2. HRMS (ESI) C129H180N8O32Na (M+Na)+m/zの計算値2376.2601, 実測値2376.2625。
化合物15hは、一般手順Fの後に、化合物14hから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(EtOAc:MeOH、9:1→4:1)により精製すると、テトラオール15hが発泡体として得られる(72mg、24.7μmol、76%収率)。TLC(EtOAc:MeOH、4:1、v/v):Rf=0.51。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 174.6, 174.2, 172.3, 171.8, 171.2, 139.4, 138.3, 138.2, 137.8, 128.2, 128.1, 128.0, 127.8, 127.7, 127.6, 127.5, 127.4, 101.2, 101.1, 82.7, 77.6, 75.5, 74.8, 74.6, 72.8, 69.4, 69.3, 67.4, 63.0, 60.9, 55.5, 45.3, 39.2, 39.0, 36.9, 36.5, 35.9, 34.8, 32.9, 29.2, 29.1, 28.9, 28.8, 26.6, 26.4, 25.7, 25.4, 24.9, 22.2, 19.9. HRMS (ESI) C161H240N12O36Na (M+Na)+m/zの計算値2940.7216, 実測値2940.7217。
出発原料を乾燥ジクロロメタン(9μmolに対して2mL)に0℃で溶解し、塩化アセチル(80μL)を含有している冷乾燥メタノール(4mL)溶液により処理する。反応混合物の撹拌を0℃で30分間、次に23℃で48時間、継続する。TLC(EtOAc)により反応の完了が示された後、ジクロロメタンを加え、この溶液を水及びNaHCO3溶液(飽和水性)により洗浄し、乾燥して濃縮する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(EtOAc:MeOH、9:1)により精製すると、脱O−アセチル化生成物が得られる。
化合物15aは、一般手順Gの後に、化合物14aから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(EtOAc→EtOAc:MeOH、9:1→4:1)により精製すると、テトラオール15aが発泡体として得られる(250mg、56.1μmol、91%収率)。TLC(EtOAc:MeOH、4:1、v/v)。Rf=0.51。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 175.9, 173.8, 173.1, 170.7, 166.7, 140.1, 139.9, 138.4, 134.8, 131.0, 130.8, 129.9, 129.5, 129.46, 129.42, 129.1, 128.8, 128.7, 128.6, 128.5, 128.2, 102.5, 99.1, 83.8, 81.6, 78.9, 76.0, 75.9, 75.8, 75.6, 75.3, 75.2, 73.8, 71.1, 70.7, 68.8, 61.5, 54.2, 53.5, 46.8, 40.5, 40.3, 37.9, 37.2, 30.6, 30.5, 30.3, 30.2, 27.9, 27.6, 27.1, 26.7, 23.1。
化合物15bは、一般手順Gの後に、化合物14bから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(EtOAc→EtOAc:MeOH、9:1→4:1)により精製すると、テトラオール15bが発泡体として得られる(343mg、77μmol、96%収率)。TLC(EtOAc:MeOH、4:1、v/v):Rf=0.51。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 175.2, 173.8, 173.3, 171.6, 167.1, 139.9, 139.8, 139.2, 134.6, 130.9, 130.1, 129.5, 129.4, 129.1, 128.9, 128.8, 128.7, 128.5, 100.4, 98.7, 81.7, 79.4, 76.1, 75.9, 75.7, 74.6, 74.1, 74.0, 73.9, 73.8, 71.6, 70.7, 70.2, 70.1, 70.0, 69.9, 68.8, 62.0, 54.4, 53.1, 51.1, 46.8, 40.5, 37.8, 37.2, 36.1, 34.5, 34.0, 33.8, 30.6, 30.5, 30.3, 30.2, 29.4, 28.2, 28.0, 27.7, 27.6, 27.4, 27.0, 26.7, 26.3, 22.9。
化合物15cは、一般手順Gの後に、化合物14cから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(クロロホルム→クロロホルム:MeOH、19:1→9:1→4:1)により精製すると、オクタオール55が発泡体として得られる(255mg、40.7μmol、89%収率)。TLC(EtOAc:MeOH、9:1、v/v):Rf=0.65。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 175.9, 173.8, 173.0, 172.9, 170.4, 170.1, 166.8, 166.5, 140.6, 139.9, 139.8, 138.2, 138.1, 135.3, 134.9, 130.9, 130.8, 130.5, 130.2, 129.9, 129.6, 129.5, 129.2, 129.0, 128.9, 128.8, 128.6, 126.5, 102.5, 102.1, 99.1, 98.8, 83.9, 83.8, 81.6, 79.4, 79.3, 79.2, 78.9, 78.4, 76.2, 76.0, 75.9, 75.7, 75.5, 75.2, 73.9, 73.3, 71.3, 70.7, 68.9, 61.7, 60.4, 54.2, 53.7, 53.4, 46.8, 40.7, 40.5, 38.0, 37.5, 30.7, 30.5, 30.4, 30.3, 28.1, 27.7, 27.2, 26.7, 23.5, 22.2。
乾燥DMF(50mgに対し3mL)中の出発原料に、三酸化硫黄トリメチルアミン錯体(ヒドロキシル基あたり5当量)を加える。この混合物をアルゴン下、50〜60℃で48〜72時間、加熱する。MeOH(1mL)を加え、この混合物を15分間撹拌し、真空で濃縮する。クロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5)により、O−硫酸化生成物が得られる。
化合物16eは、一般手順Hの後に、化合物15eから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5)により精製すると、テトラ−サルファート16eが発泡体(83mg、31mmol、96%収率)として得られる。TLC(ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5):Rf=0.15。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 173.9, 173.3, 140.0, 139.7, 129.3, 128.8, 128.7, 128.6, 102.6, 84.1, 79.5, 76.2, 75.8, 74.9, 70.7, 68.8, 67.7, 56.8, 46.7, 40.5, 37.8, 30.5, 27.7, 26.7, 23.2. HRMS (ESI, 陰モード) C129H179N8O44S4(M-H)- m/zの計算値2672.0898, 実測値2672.0876。
化合物16hは、一般手順Hの後に、化合物15hから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5)により精製すると、テトラ−サルファート16hが発泡体(70mg、21.6mmol、90%収率)として得られる。TLC(ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5):Rf=0.25。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 176.1, 175.7, 173.9, 173.2, 140.0, 139.6, 129.4, 129.3, 128.8, 128.7, 128.6, 102.6, 84.1, 79.5, 76.0, 75.9, 75.0, 70.7, 70.5, 68.8, 67.7, 56.8, 46.7, 40.5, 40.3, 37.9, 37.8, 37.2, 35.8, 34.2, 30.5, 30.4, 30.2, 30.1, 27.9, 27.7, 27.0, 26.7, 26.3, 23.1。
化合物16aは、一般手順Hの後に、化合物15aから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5)により精製すると、テトラ−サルファート16aが発泡体(252mg、52.7mmol、95%収率)として得られる。TLC(ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5):Rf=0.25。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 176.0, 173.9, 173.2, 170.9, 166.8, 140.1, 139.8, 138.6, 134.8, 130.9, 130.8, 129.9, 129.5, 129.4, 129.38, 129.32, 128.9, 128.7, 128.6, 102.5, 99.2, 83.5, 81.6, 78.9, 76.1, 76.0, 75.9, 75.7, 75.5, 75.3, 71.9, 71.2, 70.7, 68.8, 66.8, 55.2, 54.2, 53.6, 46.8, 40.5, 40.3, 37.8, 37.2, 30.6, 30.5, 30.3, 30.2, 27.9, 27.6, 27.1, 26.7, 23.1。
化合物19aは、一般手順Hの後に、化合物17aから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5)により精製すると、オクタ−サルファート19aが発泡体(89mg、19.2mmol、89%収率)として得られる。TLC(ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5):Rf=0.25。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 176.2, 175.5, 173.9, 173.1, 140.3, 139.9, 139.3, 129.7, 129.5, 129.3, 129.2, 128.7, 128.6, 128.5, 102.3, 98.6, 84.1, 82.0, 80.7, 79.3, 77.4, 76.3, 75.9, 75.4, 74.4, 71.5, 70.7, 68.8, 67.3, 54.4, 44.7, 40.5, 40.4, 37.8, 37.2, 30.5, 30.3, 30.2, 27.9, 27.8, 27.1, 26.7, 23.0。
化合物16bは、一般手順Hの後に、化合物15bから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5→5:4:1)により精製すると、テトラ−サルファート16bが発泡体(330mg、69.1mmol、99%収率)として得られる。TLC(ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5):Rf=0.21。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 175.3, 173.8, 173.3, 171.7, 167.1, 140.0, 139.9, 139.2, 134.6, 130.9, 130.1, 129.6, 129.5, 129.4, 128.9, 128.8, 128.6, 128.4, 100.5, 98.8, 81.5, 79.2, 76.2, 75.9, 75.5, 75.4, 75.3, 74.2, 73.7, 72.4, 71.2, 70.7, 69.9, 69.8, 69.6, 69.5, 68.8, 67.2, 54.4, 53.2, 51.1, 46.8, 40.5, 40.4, 37.8, 37.2, 34.5, 33.9, 33.8, 30.5, 30.4, 30.3, 30.2, 30.1, 29.4, 28.2, 28.0, 27.8, 27.6, 27.4, 27.0, 26.7, 26.3, 22.8。
化合物19bは、一般手順Hの後に、化合物17bから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5→5:4:1)により精製すると、オクタ−サルファート19bが発泡体(120mg、25.9mmol、94%収率)として得られる。TLC(ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5):Rf=0.15。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 174.4, 174.3, 174.2, 174.1, 173.2, 173.1, 172.9, 172.8, 139.2, 138.7, 138.3, 138.2, 128.7, 128.5, 128.4, 128.3, 128.2, 127.9, 127.8, 127.6, 117.4, 100.1, 98.6, 80.9, 78.2, 75.5, 75.1, 74.1, 72.5, 72.4, 72.1, 71.5, 70.6, 70.5, 69.6, 68.2, 68.1, 67.8, 67.2, 66.2, 54.3, 53.7, 50.2, 45.7, 40.3, 39.5, 39.4, 38.7, 36.8, 36.2, 35.2, 34.1, 33.4, 33.0, 32.8, 29.6, 29.5, 29.4, 29.3, 29.2, 29.1, 28.5, 27.2, 26.9, 26.8, 26.7, 26.5, 26.2, 26.1, 26.0。
化合物16cは、一般手順Hの後に、化合物15cから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5→5:4:1)により精製すると、オクタ−サルファート16cが発泡体(278mg、35.6mmol、100%収率)として得られる。TLC(ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5):Rf=0.2。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 176.0, 173.9, 173.3, 173.2, 170.6, 170.4, 166.8, 166.6, 140.4, 140.1, 139.9, 138.6, 138.5, 135.1, 1334.9, 131.3, 130.9, 130.8, 130.6, 130.2, 129.9, 129.4, 129.3, 129.2, 128.9, 128.6, 128.5, 102.4, 101.7, 98.9, 98.8, 84.0, 83.7, 81.8, 79.5, 79.0, 78.3, 76.3, 75.9, 75.8, 75.5, 75.3, 75.1, 74.9, 71.8, 71.3, 71.2, 70.7, 68.8, 66.8, 65.7, 54.1, 53.4, 52.9, 46.8, 40.5, 40.3, 37.9, 37.2, 30.5, 30.4, 30.3, 30.2, 30.1, 27.9, 27.6, 27.1, 26.7, 23.1, 23.0。
化合物19cは、一般手順Hの後に、化合物17cから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5→5:4:1)により精製すると、ヘキサデカ−サルファート19cが発泡体(99mg、14.6μmol、90%収率)として得られる。TLC(ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5):Rf=0.2。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 176.2, 175.8, 175.1, 173.9, 173.4, 140.5, 139.9, 139.7, 139.6, 139.5, 129.8, 129.6, 129.5, 129.4, 129.39, 129.35, 129.3, 129.2, 128.8, 128.7, 128.6, 128.5, 102.4, 101.4, 98.7, 97.4, 83.8, 81.8, 80.9, 80.4, 79.3, 77.3, 76.5, 76.3, 75.9, 75.5, 74.5, 74.2, 71.6, 71.2, 70.9, 70.7, 68.8, 67.2, 66.8, 55.2, 54.4, 53.2, 46.8, 41.1, 40.5, 40.4, 37.8, 37.2, 35.5, 30.5, 30.3, 30.2, 30.1, 27.9, 27.8, 27.1, 26.8, 23.3, 23.1。
化合物16dは、一般手順Hの後に、化合物15dから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5→5:4:1)により精製すると、サルファート16dが発泡体(13.3mg、1.8μmol、99%収率)として得られる。TLC(EtOAc:エタノール:水、3:1:1):Rf=0.15。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 176.2, 173.9, 139.9, 139.6, 138.8, 129.5, 129.3, 129.2, 129.1, 128.8, 128.7, 101.3, 99.8, 97.8, 95.1, 82.3, 79.0, 76.3, 76.1, 73.1, 72.7, 71.6, 71.3, 70.7, 69.1, 68.8, 67.2, 65.9, 48.5, 40.5, 40.4, 37.8, 37.2, 30.5, 30.4, 30.3, 30.2, 27.9, 27.8, 27.1。
出発原料を、水酸化ナトリウム2M溶液(反応混合物1.25mLあたり50μL)を含有するメタノール及び水(4/1、v/v、20mgに対し1.25mL)に0℃で溶解する。この反応混合物を室温で48〜72時間撹拌する。TLC(EtOAc:EtOH:水、3:1:1)が反応の完了を示した後、溶媒の体積を真空で減少させる。この溶液を、フラッシュクロマトグラフィーのためのシリカカラム(ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5)にかけると、脱O−ベンゾイル化生成物が得られる。
化合物17aは、一般手順Iの後に、化合物16aから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール、9:1→ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5→5:4:1)により精製すると、四量体17aが発泡体(219mg、50.9mmol、99%収率)として得られる。TLC(アセトニトリル:水:アンモニア水、3:1:1):Rf=0.15。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 176.2, 175.4, 173.9, 172.9, 140.2, 139.8, 139.7, 138.7, 130.8, 129.9, 129.5, 129.4, 129.38, 129.31, 128.9, 128.7, 128.6, 104.6, 98.8, 86.3, 81.9, 79.3, 77.9, 76.3, 76.1, 75.9, 75.8, 75.6, 75.4, 71.4, 71.1, 70.7, 68.8, 67.4, 55.2, 54.4, 46.8, 40.5, 40.4, 37.9, 37.2, 30.7, 30.5, 30.4, 30.3, 30.2, 27.9, 27.8, 27.6, 27.1, 26.8, 23.1。
化合物17bは、一般手順Iの後に、化合物16bから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール、9:1→ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5→5:4:1)により精製すると、四量体17bが発泡体(255mg、59.2mmol、96%収率)として得られる。TLC(EtOAc:エタノール:水、3:1:1):Rf=0.15。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 176.1, 175.4, 174.8, 174.7, 173.9, 173.2, 140.2, 139.8, 139.6, 139.5, 129.5, 129.4, 129.3, 128.9, 128.8, 128.7, 128.6, 102.7, 97.2, 82.2, 79.1, 76.3, 76.0, 74.9, 73.2, 72.8, 72.1, 70.7, 69.2, 69.1, 68.8, 68.7, 67.8, 67.7, 67.2, 54.4, 51.2, 46.8, 40.6, 40.4, 37.9, 37.2, 36.2, 34.5, 34.0, 33.8, 30.7, 30.5, 30.4, 30.35, 30.3, 30.2, 29.5, 28.2, 28.0, 27.9, 27.7, 27.6, 27.2, 27.1, 26.7, 26.4, 23.1。
化合物17cは、一般手順Iの後に、化合物16cから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール、9:1→ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5→5:4:1)により精製すると、四量体16cが発泡体(88mg、12.8μmol、86%収率)として得られる。TLC(EtOAc:エタノール:水、3:1:1):Rf=0.15。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 176.3, 176.2, 175.1, 173.9, 173.1, 172.9, 140.3, 140.2, 139.9, 139.8, 139.7, 129.5, 129.4, 129.38, 129.31, 129.0, 128.9, 128.6, 104.7, 104.1, 98.7, 98.2, 86.6, 85.8, 81.9, 80.4, 79.3, 78.2, 77.8, 76.5, 76.3, 76.1, 75.9, 75.5, 75.3, 75.1, 74.9, 71.9, 71.3, 71.1, 70.7, 68.8, 67.4, 67.1, 54.4, 53.4, 46.8, 40.5, 40.4, 37.9, 37.2, 30.7, 30.5, 30.4, 30.3, 30.2, 27.9, 27.8, 27.1, 26.8, 23.0。
化合物17dは、一般手順Iの後に、化合物16dから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5→5:4:1、MeOH:アンモニア水→7:1)により精製すると、四量体17dが発泡体(59mg、9.7μmol、94%収率)として得られる。TLC(EtOAc:エタノール:水、3:1:1):Rf=0.12。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 176.4, 176.1, 175.2, 173.9, 129.3, 129.2, 129.0, 128.9, 128.8, 128.7, 128.5, 102.7, 101.1, 97.2, 96.0, 82.1, 79.6, 76.3, 75.8, 74.9, 73.6, 73.4, 72.7, 71.9, 70.7, 69.1, 68.8, 68.0, 65.6, 62.1, 61.8, 46.7, 40.5, 40.4, 37.8, 37.2, 30.7, 30.5, 30.4, 30.3, 30.2, 27.9, 27.8, 27.2, 27.1, 26.8。
出発原料を、アンモニア水溶液(反応混合物の10%)を含有するTHF及び水(1/1、v/v、10mgに対し3mL)に溶解し、炭素担持水酸化パラジウム(20%Pd、出発原料の5倍重量)により処理する。この反応混合物を周囲温度及び周囲圧力で、水素下、24〜48時間、撹拌する。TLC(EtOAc:EtOH:水、2:1:1)により反応の完了が示された後、触媒をろ別し、50%水性THFにより洗浄する。この溶液を濃縮乾固し、残渣のクロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、5:4:1)により、最終生成物がアンモニウム塩として得られる。得られた物質を水に溶解し、Dowex50WX8−200(Na+)樹脂カラム(8×1cm)に通し、水により溶出する。生成物を含有するフラクションを蒸発させて真空で乾燥すると、最終生成物のナトリウム塩が得られる。
化合物18eは、一般手順Jの後に、化合物16eから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(アセトニトリル:水:アンモニア水、6:2:1)により精製すると、四量体18eが発泡体(52mg、26.6mmol、89%収率)として得られる。TLC(アセトニトリル:水:アンモニア水、6:2:1)。Rf=0.33。13C-NMR (125MHz, D2O) δ 174.4, 174.1, 173.9, 101.3, 73.7, 70.5, 69.7, 69.4, 69.0, 67.7, 67.1, 61.1, 55.6, 45.3, 39.5, 36.5, 28.7, 28.6, 25.9, 24.9, 22.37. HRMS (ESI, 陰モード) C73H131N8O44S4 (M-H)-m/zの計算値1951.7142, 実測値1951.7120。
化合物18hは、一般手順Jの後に、化合物16hから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(アセトニトリル:水:アンモニア水、6:2:1)により精製すると、四量体18hが発泡体(30mg、11.9mmol、86%収率)として得られる。TLC(アセトニトリル:水:アンモニア水、6:2:1)。Rf=0.4。13C-NMR (125MHz, D2O) δ 176.6, 176.4, 174.3, 173.8, 101.3, 73.8, 70.5, 69.7, 69.2, 67.7, 67.2, 55.6, 45.4, 39.5, 39.3, 37.7, 36.5, 35.8, 35.5, 32.9, 28.6, 28.5, 28.4, 28.3, 28.2, 26.2, 25.8, 25.5, 24.9, 24.8, 22.3。
化合物18aは、一般手順Jの後に、化合物17aから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(アセトニトリル:水:アンモニア水、6:2:1)により精製すると、四量体18aが発泡体(57mg、17.7mmol、91%収率)として得られる。TLC(アセトニトリル:水:アンモニア水、6:2:1):Rf=0.4。13C-NMR (125MHz, D2O) δ 176.6, 174.4, 174.1, 173.8, 102.3, 97.3, 76.6, 76.3, 73.5, 70.7, 70.2, 69.3, 69.1, 67.7, 66.4, 53.6, 45.4, 39.5, 39.3, 36.5, 35.9, 29.7, 28.7, 28.6, 28.4, 28.3, 26.2, 25.9, 25.5, 24.8, 22.0。
化合物20aは、一般手順Jの後に、化合物19aから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール、9:1→ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5→5:4:1→メタノール:アンモニア水、7:1)により精製すると、四量体20aが発泡体(45mg、12.7mmol、98%収率)として得られる。TLC(EtOAc:エタノール:水、2:1:1):Rf=0.15。13C-NMR (125MHz, D2O) δ 176.7, 174.5, 173.9, 173.8, 100.6, 97.6, 80.4, 76.5, 75.8, 75.2, 70.8, 70.6, 70.3, 69.2, 69.1, 67.7, 66.4, 53.6, 45.4, 39.5, 39.3, 36.5, 35.9, 29.5, 28.7, 28.6, 28.3, 28.2, 28.1, 25.9, 25.5, 24.7, 22.0。
化合物18bは、一般手順Jの後に、化合物17bから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール、9:1→ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5→5:4:1→メタノール:アンモニア水、7:1)により精製すると、四量体18bが発泡体(55mg、17.1mmol、92%収率)として得られる。TLC(EtOAc:エタノール:水、2:1:1):Rf=0.15。13C-NMR (125MHz, D2O) δ 175.6, 175.1, 174.9, 173.5, 173.4, 172.8, 99.8, 93.8, 72.8, 70.2, 69.4, 68.2, 67.7, 67.6, 67.5, 67.3, 66.8, 65.6, 52.5, 49.5, 48.0, 46.8, 44.4, 38.6, 38.4, 35.6, 34.9, 32.7, 32.3, 31.7, 32.3, 31.7, 29.2, 27.7, 27.5, 27.4, 26.8, 25.5, 25.3, 25.0, 24.9, 24.8, 24.6, 24.5, 24.4, 24.3, 24.2, 24.1, 24.0, 21.1。
化合物20bは、一般手順Jの後に、化合物19bから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール、9:1→ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5→5:4:1→メタノール:アンモニア水、7:1)により精製すると、四量体20bが発泡体(49mg、13.8mmol、91%収率)として得られる。TLC(EtOAc:エタノール:水、2:1:1):Rf=0.15。13C-NMR (125MHz, D2O) δ 175.7, 175.2, 175.0, 173.9, 173.8, 172.9, 97.5, 93.2, 72.6, 70.3, 70.2, 69.3, 68.3, 68.2, 67.7, 67.6, 66.7, 65.7, 65.6, 62.8, 56.5, 52.4, 49.5, 46.8, 44.4, 38.6, 38.4, 35.6, 34.9, 32.7, 32.3, 31.6, 29.2, 27.6, 27.5, 27.4, 27.3, 26.8, 25.5, 25.3, 24.9, 24.8, 24.7, 24.6, 24.5, 24.3, 24.1, 21.4。
化合物18cは、一般手順Jの後に、化合物17cから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール、9:1→ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5→5:4:1→メタノール:アンモニア水、7:1)により精製すると、八硫酸化四量体18cが発泡体(66mg、13.1μmol、99%収率)として得られる。TLC(EtOAc:エタノール:水、2:1:1):Rf=0.15。13C-NMR (125MHz, D2O) δ 176.6, 174.5, 174.4, 174.3, 173.9, 102.3, 101.9, 97.2, 97.0, 77.4, 76.6, 76.4, 76.3, 76.2, 76.1, 73.5, 70.6, 70.2, 69.3, 69.2, 69.0, 68.9, 67.7, 66.4, 65.8, 60.3, 53.5, 53.2, 45.4, 39.5, 39.3, 36.5, 35.9, 29.5, 28.7, 28.6, 28.4, 28.3, 26.2, 25.9, 25.5, 24.8, 22.0。
化合物20cは、一般手順Jの後に、化合物19cから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール、9:1→ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5→5:4:1→メタノール:アンモニア水、7:1)により精製すると、十六硫酸化四量体20cが発泡体(79mg、14μmol、99%収率)として得られる。TLC(EtOAc:エタノール:水、2:1:1):Rf=0.15。13C-NMR (125MHz, D2O) δ 177.9, 176.7, 174.5, 174.4, 173.9, 173.4, 100.6, 99.8, 97.8, 97.3, 80.4, 80.0, 77.8, 77.5, 76.1, 75.6, 75.3, 74.9, 70.8, 70.6, 70.2, 69.3, 69.2, 68.8, 67.7, 66.4, 65.8, 53.5, 53.3, 45.4, 39.5, 39.3, 36.5, 35.9, 29.6, 28.7, 28.6, 28.4, 28.3, 26.2, 25.9, 25.5, 24.7, 22.0。
化合物18dは、一般手順Jの後に、化合物17dから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール、9:1→ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5→5:4:1→メタノール:水:アンモニア水、3:1:1)により精製すると、硫酸化四量体18dが発泡体(7mg、1.3μmol、74%収率)として得られる。TLC(EtOAc:エタノール:水、2:1:1):Rf=0.15。13C-NMR (125MHz, D2O) δ 176.8, 175.3, 173.9, 98.6, 97.9, 91.3, 90.9, 75.3, 72.8, 70.4, 69.6, 69.3, 68.8, 68.1, 67.7, 67.2, 66.2, 62.7, 62.5, 54.3, 54.1, 45.3, 39.5, 39.3, 36.5, 35.9, 28.5, 28.4, 28.2, 26.1, 25.9, 25.5, 25.0。
炭素6にリンカーとマスクしていないアミノ官能基を有するグリコシド(3当量)の乾燥DMF(DMF1mLあたり100mg)溶液に、室温でジ−スクシンイミジルエステル33a(1当量)の乾燥DMF(DMF1mLあたり40mg)溶液を加える。この反応混合物をトリエチルアミン(4当量)により処理し、室温で1〜24時間撹拌する。DMFを真空で除去し、残渣をEtOAc、次いで酢酸エチル:MeOH、9:1→3:2により溶出したシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると、ジ−スクシンイミジルエステルが得られる。
化合物34aは、一般手順A2の後に、化合物12b及び33aから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(酢酸エチル:MeOH、9:1→3:2)により精製すると、二量体34aが発泡体として得られる(330mg、142μmol、93%収率)。TLC(EtOAc:MeOH、9:1、v/v):Rf=0.55。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 173.1, 170.5, 169.6, 165.6, 138.1, 137.8, 137.2, 133.6, 129.7, 129.3, 128.9, 128.6, 128.4, 128.3, 128.1, 128.0, 127.9, 127.8, 127.7, 127.6, 127.5, 98.9, 98.3, 80.3, 74.8, 74.7, 73.9, 73.1, 72.3, 70.8, 70.4, 70.3, 70.1, 68.9, 68.8, 67.7, 62.4, 60.3, 52.6, 52.3, 39.3, 38.8, 36.5, 29.5, 29.4, 29.2, 29.0, 28.8, 26.6, 25.3, 22.8, 20.7. HRMS (ESI) C126H164N6O35Na (M+Na)+ m/zの計算値2344.1135, 実測値2344.1116。
化合物35aは、一般手順Gの後に、化合物34aから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(EtOAc→EtOAc:MeOH、9:1→7:1→6:1)により精製すると、ジオール35aが発泡体として得られる(209mg、93.3μmol、92%収率)。TLC(EtOAc:MeOH、4:1、v/v):Rf=0.5。13C-NMR (125MHz, CDCl3) δ 173.0, 169.9, 169.7, 169.5, 138.2, 138.1, 137.2, 133.7, 129.8, 129.3, 128.9, 128.7, 128.5, 128.4, 128.1, 128.0, 127.9, 127.7, 127.6, 127.5, 99.1, 98.6, 79.9, 76.9, 75.0, 74.6, 74.5, 73.6, 73.2, 72.4, 70.8, 70.5, 70.2, 68.9, 68.8, 67.7, 61.7, 52.8, 52.4, 39.3, 38.8, 36.5, 29.5, 29.4, 29.2, 29.1, 28.8, 26.6, 26.5, 25.7, 25.6, 22.9. HRMS (ESI) C122H160N6O33Na (M+Na)+ m/zの計算値2260.0924, 実測値2260.0906。
化合物36aは、一般手順Hの後に、化合物35aから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5)により精製すると、ジ−サルファート36aが発泡体(138mg、57.5μmol、91%収率)として得られる。TLC(ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5):Rf=0.15。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 176.2, 176.0, 173.4, 172.5, 171.7, 167.1, 139.9, 139.8, 139.2, 134.6, 131.1, 130.9, 130.1, 129.8, 129.6, 129.5, 129.4, 129.0, 128.9, 128.8, 128.6, 128.5, 100.5, 98.9, 81.4, 79.2, 76.2, 76.0, 75.4, 74.3, 73.7, 72.4, 71.6, 71.2, 69.9, 69.5, 67.2, 54.4, 53.2, 40.5, 40.3, 40.1, 37.2, 37.0, 30.5, 30.4, 30.2, 30.0, 27.8, 27.7, 27.0, 26.9, 22.8. HRMS (ESI, 陰モード) C122H158N6O39S2Na (M-2H)2- m/zの計算値1198.5031, 実測値1198.5035。
化合物39aは、一般手順Hの後に、化合物37aから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5)により精製すると、テトラ−サルファート39aが発泡体(51mg、21.9μmol、89%収率)として得られる。TLC(ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5):Rf=0.15。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 176.1, 175.9, 174.1, 172.4, 169.2, 140.3, 139.8, 139.3, 129.8, 129.6, 129.4, 129.3, 129.1, 129.0, 128.8, 128.7, 128.5, 100.4, 98.9, 82.0, 79.2, 76.5, 76.1, 74.9, 73.5, 72.5, 71.9, 71.5, 71.3, 71.2, 71.0, 69.0, 68.4, 67.2, 54.7, 40.4, 40.1, 37.1, 30.6, 30.5, 30.4, 30.2, 30.1, 27.9, 27.8, 27.1, 27.0, 23.4. HRMS (ESI, 陰モード) C106H146N6O43S4Na (M-2H)2- m/zの計算値1159.9169, 実測値1159.9193。
化合物37aは、一般手順Iの後に、化合物36aから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール、9:1→ジクロロメタン:メタノール:アンモニア水、7:2:0.5→5:4:1)により精製すると、四量体37aが発泡体(94mg、43.4μmol、87%収率)として得られる。TLC(アセトニトリル:水:アンモニア水、3:1:1):Rf=0.15。13C-NMR (125MHz, MeOD) δ 176.1, 175.5, 173.1, 172.4, 140.2, 139.8, 139.5, 139.1, 129.5, 129.4, 129.3, 129.2, 128.9, 128.8, 128.7, 128.6, 102.5, 97.2, 82.3, 79.1, 76.3, 76.0, 74.9, 73.4, 72.7, 71.8, 71.6, 71.3, 71.2, 69.2, 67.9, 67.2, 54.5, 40.4, 40.0, 37.2, 30.7, 30.5, 30.4, 30.2, 30.1, 27.8, 27.1, 27.0, 23.1. HRMS (ESI, 陰モード) C106H146N6O37S2Na (M-2H)2-m/zの計算値1079.9601, 実測値1079.9614。
化合物38aは、一般手順Jの後に、化合物37aから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(アセトニトリル:水:アンモニア水、6:2:1)により精製すると、四量体38aが発泡体(38mg、23.4μmol、95%収率)として得られる。TLC(アセトニトリル:水:アンモニア水、6:2:1):Rf=0.3。13C-NMR (125MHz, D2O) δ 176.8, 174.9, 174.3, 172.2, 100.7, 94.5, 73.7, 71.0, 70.4, 69.6, 69.5, 69.4, 69.2, 68.8, 68.5, 68.4, 66.5, 53.4, 39.3, 39.0, 35.8, 28.5, 28.4, 28.3, 28.1, 25.9, 25.8, 25.4, 25.0, 22.0. HRMS (ESI, 陰モード) C64H110N6O37S2Na (M-2H)2- m/zの計算値1641.6250, 実測値1641.6233。
化合物40aは、一般手順Jの後に、化合物39aから調製する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(アセトニトリル:水:アンモニア水、6:2:1)により精製すると、二量体40aが発泡体(29mg、16.3μmol、84%収率)として得られる。TLC(アセトニトリル:水:アンモニア水、6:2:1):Rf=0.32。13C-NMR (125MHz, D2O) δ 176.0, 174.3, 173.9, 171.3, 97.5, 92.9, 72.7, 70.3, 70.0, 69.5, 69.2, 68.7, 68.6, 68.4, 67.6, 65.9, 65.7, 62.7, 60.3, 52.4, 38.4, 38.1, 34.9, 27.5, 27.4, 27.1, 25.1, 24.9, 24.5, 24.1, 21.4。
本発明の化合物の、APPのBACE−1切断を阻害する能力は、FRETペプチドHiLyte 488−Glu−Val−Asn−Leu−Asp−Ala−Glu−Phe−Lys(QXL520)−OH(Anaspec,Inc.、CA、米国、カタログ番号60604−01)を使用する、蛍光共鳴エネルギー移動(FRET)ペプチド切断アッセイを使用して評価する。無傷の場合、アミノ末端フルオロフォアはクエンチされるが、酵素切断の際には、フルオロフォアがクエンチャーから放出されて蛍光(520nm)を発する。アッセイは、96ウェル黒色プレートに三連で行う(20mM酢酸ナトリウム、0.1%Triton−X−100、pH4.5、ウェルあたりペプチド2.2ng、及び組換えヒトBACE−1(R&D Systems、カタログ番号931−AS)25ng/ウェル)。酵素活性(基質と酵素、及び基質のみ)に対する適切な対照を用い、プレートをインキュベートする(1時間、25℃、2.5M酢酸ナトリウムにより活性を停止)。本発明の化合物を100〜0.0001μg/mLの濃度範囲で加える。蛍光480ex/520emをPolarstarプレートリーダー(BMG LabTechnologies、英国)で測定し、データは阻害率に対してlog10(化合物の濃度)をプロットして、OriginPro8(OriginLabs、Mass、米国)を使用するロジスティック用量応答S字曲線に当てはめることにより解析する。
本発明の化合物、標準又は対照(5μl)を、アッセイ用緩衝液(0.9%塩化ナトリウム)中で、96ウェルプレート(Costar 3595)にピペット操作で移し、アッセイ用緩衝液中の0.03IU/mlヒト抗トロンビンIII(American Diagnostica Inc.、製品番号433)19μlを各ウェルに加える。このプレートを37℃で2分間インキュベートする。アッセイ用緩衝液中のウシ第Xa因子(14nkat/ml、Thermo Scientific、製品番号32521)19μlを各ウェルに加え、37℃で1分間インキュベートする。アッセイ用緩衝液中の2.5mM発色性基質(American Diagnostica Inc.Spectrozyme FXa、製品番号222L)19μlを各ウェルに加え、37℃で2時間インキュベートし、次いで30%酢酸5μlを各ウェルに加える。マルチプレートリーダーで、405nmの吸光度を読み取る。
ヒトSWE変異アミロイド前駆タンパク質を発現するトランスジェニックTG2576マウスを、8〜10か月齢で、頚椎脱臼により犠牲にする。脳を取り除き、手動のティッシュチョッパー(Leica Microsystems)を使用して、400μmの冠状切断物を得る。スライスは4.5mg/mlグルコース(Sigma Aldrich)及び3.75μg/mlアムホテリシンB(Sigma Aldrich)を補充したHBSS(ハンク平衡塩溶液、Life Technologies)中で手短に洗浄し、トランスウェルプレート(Costar3396、0.4μmのポリカーボネート膜を備えたHTS24ウェルのトランスウェルプレート)の、25%加熱不活性化ウマ血清(Life Technologies)、25%HBSS、0.5mMグルタミン(Life Technologies)、4.5mg/mlグルコース、及び3.75μg/mlアムホテリシンBを補充した50%MEM(最小必須培地、Life Technologies)1ml中に移す。スライスは、37℃、5%CO2で48時間インキュベートする。48時間後、培地を各ウェルから採集し、保存する。本発明の化合物又はNAc−LMWHを(1、10及び100μg/mlの濃度で)含む又は含まない新しい培地1mlを、各ウェルに加える。スライスをさらに48時間インキュベートし、培地を採集して保存する。製造元の指示書に従い、SensoLyte(商標)Anti−Human βeta−Amyloid(1−40)ELISAキット(Anaspec)を使用して、培地中の可溶性Aβ1−40を定量する。手短に言えば、試料希釈用緩衝液中に1:4で、培地を希釈し、適切なウェルに100mlを加える。検出用抗体(50μl)を各ウェルに加え、このプレートを暗所において4℃で一晩インキュベートする。ウェルは、各洗浄の浸け時間を30秒にして、洗浄用緩衝液350μlにより7x洗浄する。TMB着色用基質溶液(100μl)を各ウェルに加え、このプレートを暗所において室温で15分間インキュベートする。着色反応は、停止溶液50μlにより停止させ、吸光度プレートリーダー(Thermo Multiskan EX)を使用して、このプレートを450nmで読み取る。Aβ1−40の量は、Aβ1−40の標準曲線(SensoLyte(商標)キット中に提供されている)を参照することにより定量する。データは、各条件について、96時間体48時間において存在している、Aβ1−40の割合として表す。結果を図1a及び1bに示す。
Claims (23)
- 式(I)の化合物
[式中、
R3は、式(iii)のラジカル、式(iv)のラジカル、又は式(iv)(a)のラジカルであり、
R5は、式(v)、(vi)、(vii)、(viii)又は(ix)のラジカルであり、
jは、1〜6の整数であり、
kは、0〜5の整数であり、
R6は、H、SO3H、場合により放射標識されているアシル基であるか、又はR6は、C(=O)R8であり、R8はアリール又はアラルキルであり、
R7は、H又はSO3Hであり、
且つ、
YはCであり、
XはOであり、
Bは(CH2)pであり、
A、E及びDは、すべてCH2であり、
R1は、H、NHZ若しくはC1〜6アルキルであり、R2は、式(i)のラジカル、式(ii)のラジカル、若しくは式(ii)(a)のラジカルであり、
Zは、H、アシル、C(O)(CH2)wN(H)G、*CH3 *C(O)−(*Cは、13C又は14Cを意味する)、4−カルボキシテトラメチルローダミン、レゾルシノールフタレイン、7−アミノ−4−メチル−6−スルホクマリン−3−酢酸、4,4−ジフルオロ−4−ボラ−3a,4a−ジアザ−s−インダセン)、若しくは1−{3−{[4−(2−シクロオクチン−1−イルメチル)ベンゾイル]アミノ}プロピル}−4−{2−[4−(ジメチルアミノ)フェニル]エテニル}ピリジニウムヘキサフルオロホスファートであり、
wは、1〜11の整数であり、
Gは、H、アシル、t−ブトキシカルボニル、2,2,2−トリクロロエチルオキシカルボニル、9−フルオレニルメトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、 *CH3 *C(O)−(*Cは、13C又は14Cを意味する)、4−カルボキシテトラメチルローダミン、レゾルシノールフタレイン、7−アミノ−4−メチル−6−スルホクマリン−3−酢酸、4,4−ジフルオロ−4−ボラ−3a,4a−ジアザ−s−インダセン、又は1−{3−{[4−(2−シクロオクチン−1−イルメチル)ベンゾイル]アミノ}プロピル}−4−{2−[4−(ジメチルアミノ)フェニル]エテニル}ピリジニウムヘキサフルオロホスファートであり、
又は、
YはCであり、
XはOであり、
Bは(CH2)pであり、
A、E及びDは、すべてCH2であり、
R1及びR2は、どちらも同じ、式(i)のラジカル、式(ii)のラジカル、若しくは式(ii)(a)のラジカルであり、
Tはそれぞれ、(CH2CH2O)xCH2CH2及びCH2からなる群から独立して選択され、
xはそれぞれ独立して、1〜12の整数であり、
nは、1〜11の整数であり、ただし、Tが(CH2CH2O)xCH2CH2である場合、nは1であり、
qは、1〜11の整数であり、
mは、1〜11の整数であり、ただし、Tが(CH2CH2O)xCH2CH2である場合、mは1であり、
pは、1〜5の整数である]
又は薬学的に許容されるその塩。 - TがそれぞれCH2である、請求項1に記載の化合物。
- R3が、式(iii)のラジカル又は式(iv)のラジカルである、請求項1又は請求項2に記載の化合物。
- R1及びR2が、どちらも同じ、式(i)のラジカル若しくは式(ii)のラジカルであるか、又はR1がH、NHZ、若しくはC1〜6アルキルであり、R2が式(i)のラジカル若しくは式(ii)のラジカルである、請求項1又は請求項2に記載の化合物。
- 少なくとも1つのTが、(CH2CH2O)xCH2CH2である、請求項1、3又は4のいずれか一項に記載の化合物。
- R5が、式(vi)、(vii)、(viii)、又は(ix)のラジカルであり、ラジカル(vi)、(vii)、(viii)、又は(ix)が、ido型糖単位を含有しない、請求項1から5までのいずれか一項に記載の化合物。
- R5が、式(vi)、(vii)、(viii)、又は(ix)のラジカルであり、ラジカル(vi)、(vii)、(viii)、又は(ix)が、gluco型糖単位を含有しない、請求項1から5までのいずれか一項に記載の化合物。
- R5が、式(vi)、(vii)、(viii)、又は(ix)のラジカルであり、ラジカル(vi)、(vii)、(viii)、又は(ix)が、gluco型糖単位とido型糖単位との混合物を含む、請求項1から5までのいずれか一項に記載の化合物。
- R1及びR2が、どちらも同じ、式(ii)(a)のラジカル
である、請求項1から3まで、又は5から8までのいずれか一項に記載の化合物。 - YがCであり、XがOであり、A、E及びDがすべてCH2であり、Bが(CH2)pであり、
R1がH、NHZ又はC1〜6アルキルであり、
R2が、式(i)のラジカル、式(ii)のラジカル、又は式(ii)(a)のラジカルであり、
Zは、H、アシル、CO(CH2)wN(H)G、*CH3 *CO−(*Cは、13C又は14Cを意味する)、4−カルボキシテトラメチルローダミン、レゾルシノールフタレイン、7−アミノ−4−メチル−6−スルホクマリン−3−酢酸、4,4−ジフルオロ−4−ボラ−3a,4a−ジアザ−s−インダセン、又は1−{3−{[4−(2−シクロオクチン−1−イルメチル)ベンゾイル]アミノ}プロピル}−4−{2−[4−(ジメチルアミノ)フェニル]エテニル}ピリジニウムヘキサフルオロホスファートであり、
wは、1〜11の整数であり、
Gは、H、アシル、t−ブトキシカルボニル、2,2,2−トリクロロエチルオキシカルボニル、9−フルオレニルメトキシカルボニル、カルボキシベンジル、*CH3 *CO−(*Cは、13C又は14Cを意味する)、4−カルボキシテトラメチルローダミン、レゾルシノールフタレイン、7−アミノ−4−メチル−6−スルホクマリン−3−酢酸、4,4−ジフルオロ−4−ボラ−3a,4a−ジアザ−s−インダセン、又は1−{3−{[4−(2−シクロオクチン−1−イルメチル)ベンゾイル]アミノ}プロピル}−4−{2−[4−(ジメチルアミノ)フェニル]エテニル}ピリジニウムヘキサフルオロホスファートである、
請求項1から8までのいずれか一項に記載の化合物。 - YがCであり、XがOであり、A、E及びDがすべてCH2であり、Bが(CH2)pであり、
R1及びR2が、どちらも同じ、式(i)のラジカル、式(ii)のラジカル、又は式(ii)(a)のラジカル
である、請求項1から8までのいずれか一項に記載の化合物。 - R5が式(viii)のラジカルであり、jが1である、請求項1から11までのいずれか一項に記載の化合物。
- R5が式(ix)のラジカルであり、kが0又は1である、請求項1から11までのいずれか一項に記載の化合物。
- pが1である、請求項1から13までのいずれか一項に記載の化合物。
- qが6である、請求項1から14までのいずれか一項に記載の化合物。
- nが7である、請求項1から15までのいずれか一項に記載の化合物。
- mが7である、請求項1から16までのいずれか一項に記載の化合物。
- xが3である、請求項1から15までのいずれか一項に記載の化合物。
-
からなる群から選択される、請求項1に記載の化合物、
又は薬学的に許容されるその塩。 - 薬学的に有効な量の請求項1から19までのいずれか一項に記載の化合物、及び場合により薬学的に許容される担体、賦形剤、又は添加剤を含む、医薬組成物。
- BACE−1を阻害することが望ましい疾患又は障害を処置又は予防するための、薬学的に有効な量の請求項1から19までのいずれか一項に記載の化合物を含む医薬組成物。
- 疾患又は障害が神経変性障害である、請求項21に記載の医薬組成物。
- 疾患又は障害が、老人性認知症、初老性認知症、多発脳梗塞性認知症、又はアルツハイマー病である、請求項22に記載の医薬組成物。
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