JP6312226B2 - 透析装置、リポソーム製造装置、及びリポソーム製造方法 - Google Patents

Description

本発明は、透析装置、リポソーム製造装置、及びリポソーム製造方法に関する。

リポソームを含む液体（以下、リポソーム液と記載する）中の有機溶媒や未封入の遊離薬物などを除去するために、中空糸透析カラムを用いてリポソーム液（被透析液）を透析する方法が提案されている（例えば、特許文献１、２参照）。

特開平２−４９７１８号公報 特開２００５−２２５７７０号公報

特許文献１又は２に記載されている方法では、中空糸透析カラムをリポソーム製剤の製造装置と連結することができ、一貫した操作で短期間に無菌的にリポソーム液を処理することができる。しかしながら、透析の過程でリポソーム液が希釈又は濃縮されることにより、中空糸透析カラムから流出した溶液中のリポソーム（透析後のリポソーム）の濃度が変化するとともに、溶液中の薬物の濃度が変化し得る。特許文献１又は２に記載されている方法では、透析後のリポソーム液の濃度を制御することは困難である。このため、特許文献１又は２に記載されている方法では、高い精度で所望の濃度を有するリポソーム液を得ることは難しいと考えられる。また、透析後にリポソーム液の濃度を調節しようとする場合において、一般的な濃縮方法（例えば、限外濾過又は遠心分離）によりリポソーム液を濃縮する場合、リポソームの凝集又は融合が生じ易い。また、密閉空間からリポソーム液を出さなければならず、無菌性を確保しづらいことに加えて、濃縮するためにかかる時間が長く、操作が煩雑となる。そのため、こうした濃縮方法は、産業規模のリポソームの製造には適していない。透析後のリポソーム液の濃度を希釈する場合において、水などを足してリポソーム液を希釈することはできるが、無菌性を確保しながら多量の溶液を均等に攪拌し、高い精度で所望の濃度のリポソーム液を得ることは難しい。

本発明は、上記課題に鑑みてなされたものであり、中空糸透析カラムを用いて透析する工程において、簡易に透析後の被透析液（例えば、リポソーム液）の濃度を制御し、所望の濃度を有する被透析液（例えば、リポソーム液）を得ることを目的とする。

本発明に係る透析装置は、中空糸透析カラムと、送液部と、流速可変部とを備える。前記中空糸透析カラムは、中空糸膜と、前記中空糸膜の内側に被透析液を流すための第１流路と、前記中空糸膜の外側に外液を流すための第２流路とを有する。前記送液部は、前記第１流路の入口に前記被透析液を送る。前記流速可変部は、前記第１流路の出口から流出する時の前記被透析液の流速を変更可能とする。

本発明に係るリポソーム製造装置は、リポソームを含むリポソーム液を製造する製造部と、前記製造されたリポソーム液を精製する精製部と、前記精製されたリポソーム液を回収する回収部とを備える。前記製造部と前記精製部と前記回収部とは、互いに密閉可能に連結されている。前記精製部は、中空糸透析カラムと、流速可変部とを備える。前記中空糸透析カラムは、中空糸膜と、前記中空糸膜の内側にリポソーム液を流すための第１流路と、前記中空糸膜の外側に外液を流すための第２流路とを有する。前記流速可変部は、前記第１流路の出口から流出する時の前記リポソーム液の流速を変更可能とする。

本発明に係るリポソーム製造装置は、リポソームを含むリポソーム液を製造する製造部と、前記製造されたリポソーム液を精製する精製部と、前記精製されたリポソーム液を回収する回収部とを備える。前記製造部と前記精製部と前記回収部とは、互いに密閉可能に連結されている。前記精製部は、中空糸透析カラムを備える。前記中空糸透析カラムは、中空糸膜と、前記中空糸膜の内側にリポソーム液を流すための第１流路と、前記中空糸膜の外側に外液を流すための第２流路とを有する。前記第２流路内の前記外液は、前記第１流路内の前記リポソーム液の流れに対向する向きに流れる。前記リポソーム液は、前記第１流路の入口から出口までを１回だけ通過する。

本発明に係る被透析液の濃度制御装置は、中空糸透析カラムを用いて、前記被透析液の濃度を制御する。前記中空糸透析カラムは、中空糸膜と、前記中空糸膜の内側に被透析液を流すための第１流路と、前記中空糸膜の外側に外液を流すための第２流路とを有する。本発明に係る被透析液の濃度制御装置は制御ユニットを備える。前記制御ユニットは、前記第１流路に前記被透析液を流し、前記第２流路に前記外液を流し、前記第１流路の入口における前記被透析液の流速と前記第１流路の出口における前記被透析液の流速との差分に基づいて、前記第１流路の出口から流出する前記被透析液の濃度を制御する。

本発明に係る被透析液の濃度制御方法は、中空糸透析カラムを用いて、前記被透析液の濃度を制御する。前記中空糸透析カラムは、中空糸膜と、前記中空糸膜の内側に被透析液を流すための第１流路と、前記中空糸膜の外側に外液を流すための第２流路とを有する。本発明に係る被透析液の濃度制御方法は、前記第１流路に前記被透析液を流すとともに前記第２流路に前記外液を流して、前記被透析液を透析しながら、前記第１流路から前記第２流路へ移動する液量と前記第２流路から前記第１流路へ移動する液量との少なくとも一方を制御することで、前記第１流路の出口から流出する前記被透析液の濃度を制御する。

本発明によれば、中空糸透析カラムを用いて透析する工程において、簡易に透析後の被透析液（例えば、リポソーム液）の濃度を制御し、所望の濃度を有する被透析液（例えば、リポソーム液）を得ることが可能になる。

本発明の実施形態に係るリポソーム製造装置の概要を示す図である。 本発明の実施形態に係るリポソーム製造装置の製造部を示す図である。 （ａ）は、リポソームの例を示す図であり、（ｂ）は、薬剤が封入されたリポソームの例を示す図である。 本発明の実施形態に係る透析装置の中空糸透析カラムの一例を示す図である。 本発明の実施形態に係る被透析液の濃度制御装置の制御ユニットの構成を機能ごとに分けて示すブロック図である。 被透析液（リポソーム液）の濃度をほとんど変えずに被透析液中の有機微粒子を除去する場合の制御を説明するための図である。 有機微粒子を除去しながら被透析液（リポソーム液）を濃縮する場合の制御を説明するための図である。 本発明の実施形態に係る透析装置の流速可変部の変形例を示す図である。 本発明の実施例１に係る実験データを示す表である。 本発明の実施例１において、透析前後での濃縮率とシクロスポリンの濃度との相関を示すグラフである。 本発明の実施例２に係る実験データを示す表である。 （ａ）及び（ｂ）はそれぞれ、本発明の実施例３に係る実験データを示す表である。 （ａ）及び（ｂ）はそれぞれ、本発明の実施例４に係る実験データを示す表である。

以下、図面を参照して、本発明の実施形態について説明する。

図１に、本実施形態に係るリポソーム製造装置１０を示す。以下、主に図１を参照して、リポソーム製造装置１０の構成及び動作について説明する。

本実施形態に係るリポソーム製造装置１０は、原料供給部１０ａと、製造部１３と、精製部１５と、回収部１７とを備える。原料供給部１０ａは、容器１１と、管１２と、ポンプ１２ａ（送液部）とを有する。

本実施形態では、容器１１が密閉可能な容器である。容器１１は、原料１１ａ（例えば、液体原料）を注入するための注入口を有する。容器１１の注入口は開閉式の蓋を有する。注入口の蓋が閉まった状態において、容器１１は密閉される。容器１１の材質は、断熱性（熱伝導率）、耐熱性、耐薬品性、及び密閉性等を考慮して決めることが望ましい。

管１２は、例えば送液用ポンプチューブ（サンゴバン株式会社製「ファーメッドＢＰＴ」又は「ファーマピュア」等）である。管１２の内径は、例えば約０．８ｍｍである。なお、管１２の内径は任意である。管１２の内径は０．８ｍｍよりも大きくてもよい。管１２の材質は、断熱性（熱伝導率）、耐熱性、耐薬品性、及び密閉性等を考慮して決めることが望ましい。

ポンプ１２ａは、例えばシリンジポンプ、プランジャポンプ、ピストンポンプ、又はローラーポンプである。なお、ポンプ１２ａとしては、任意のポンプを採用できる。

ポンプ１２ａの上流側には、管１２を介して、容器１１が接続されている。ポンプ１２ａの下流側には、管１２を介して、製造部１３が接続されている。ポンプ１２ａは、容器１１内の原料１１ａを所定の流速で製造部１３に向けて圧送（送液）する。ポンプ１２ａが作動することで、原料１１ａが管１２内を製造部１３に向かって流れる。

製造部１３は、リポソームを含むリポソーム液（被透析液）を製造する。精製部１５は、製造部１３により製造されたリポソーム液（透析前のリポソーム液）を精製（詳しくは、透析）する。回収部１７は、精製部１５により精製されたリポソーム液（透析後のリポソーム液）を回収する。製造部１３と精製部１５（詳しくは、中空糸透析カラム２０）とは、互いに管１４を介して接続される。製造部１３により製造されたリポソーム液は、管１４内を通って精製部１５（詳しくは、中空糸透析カラム２０）に流入する。精製部１５（詳しくは、中空糸透析カラム２０）と回収部１７とは、互いに管１６を介して接続される。精製部１５により精製されたリポソーム液（透析後のリポソーム液）は、管１６内を通って回収部１７に流入する。管１４及び１６はそれぞれ、例えば送液用ポンプチューブ（サンゴバン株式会社製「ファーメッドＢＰＴ」又は「ファーマピュア」等）である。なお、管１４及び１６の各々の材質は、断熱性（熱伝導率）、耐熱性、耐薬品性、及び密閉性等を考慮して決めることが望ましい。

管１２、１４、及び１６の各々の材料の例としては、熱可塑性プラスチック（例えば、可塑剤を含むポリ塩化ビニル）、熱可塑性プラスチックエラストマー（例えば、可塑剤を含まないポリ塩化ビニル、スチレン−エチレン−ブチレンとシリコーンオイルとの共重合体、又はＵＳＰ石油を含むポリプロピレン系プラスチック）、熱硬化性ゴム（例えば、非結晶シリカを含むシロキサンポリマー）、又は熱凝固性フッ素ゴムが挙げられる。

図２に、製造部１３の一例を示す。以下、主に図２を参照して、製造部１３の一例について説明する。

製造部１３は、例えば槽１３１、１３２、及び１３３を有する。さらに、製造部１３は、槽１３１と槽１３２との境界に滅菌フィルタ１３４を備える。槽１３１は原料溶解槽である。槽１３２はリポソーム形成槽である。槽１３３は冷却槽である。槽１３１、１３２、及び１３３は、例えば図示しない管（例えば、螺旋状に巻いたステンレスパイプ）を介して相互に接続されている。原料１１ａ（図１）は、管内を槽１３１（上流）から槽１３３（下流）に向かって流れる。槽１３１〜１３３はそれぞれ、断熱性を有する。原料溶解槽、リポソーム形成槽、及び冷却槽の各々の数は任意であり、複数であってもよい。

槽１３１、１３２、１３３はそれぞれ、恒温槽１３１ａ、１３２ａ、１３３ａと接続されている。また、槽１３１、１３２、１３３にはそれぞれ、温度センサ１３１ｂ、１３２ｂ、１３３ｂが設けられている。恒温槽１３１ａ〜１３３ａはそれぞれ、所定の温度に熱媒体（熱媒又は冷媒）を調整するとともに、槽１３１、１３２、又は１３３との間でその熱媒体を循環させる。恒温槽１３１ａ、１３２ａ、１３３ａにおける各熱媒体の温度を制御することで、槽１３１、１３２、又は１３３の温度を制御できる。

恒温槽１３１ａは、例えば３０℃以上９５℃以下、より好ましくは５０℃以上９０℃以下、さらに好ましくは７０℃以上８５℃以下の範囲で、熱媒体の温度を調整することができる。恒温槽１３２ａは、例えば０℃以上５０℃以下、より好ましくは５℃以上３０℃以下、さらに好ましくは１５℃以上２５℃以下の範囲で、熱媒体の温度を調整することができる。恒温槽１３３ａは、例えば０℃以上５０℃以下、より好ましくは５℃以上３０℃以下、さらに好ましくは１５℃以上２５℃以下の範囲で、熱媒体の温度を調整することができる。熱媒体としては、例えば水を用いることができる。ただし、熱媒体は任意であり、液体であってもよいし、気体であってもよいし、固体（例えば、アルミブロック）であってもよい。

以下、主に図２を参照して、製造部１３の動作の一例について説明する。この製造部１３の動作の一例では、原料１１ａとして脂質及び溶媒（水及び水混和性有機溶媒）を用いてリポソーム液を製造する。

槽１３１は、原料１１ａにおける脂質（例えば、リン脂質）及び原薬が溶媒に溶解する温度（例えば、４０℃以上８０℃以下）に保たれる。槽１３１では、原料１１ａにおける脂質が溶媒に溶解する。これにより、脂質の溶解液が調製される。調製された脂質の溶解液は、槽１３２に送られる。槽１３２でのリポソームの生成に先立ち、脂質の溶解液は、滅菌フィルタ１３４を通って滅菌される。

槽１３２は、脂質の溶解液においてリポソームが生成する温度（例えば、０℃以上であって、且つ、槽１３１の温度よりも低い温度）に保たれる。槽１３２では、脂質の溶解液においてリポソームが生成する。これにより、リポソームの懸濁液（リポソーム液）が調製される。調製されたリポソーム液は、槽１３３に送られる。

槽１３３は、槽１３２の温度よりも低い温度（例えば、０℃よりも高い温度であって、且つ、４０℃未満の温度）又は槽１３２の温度と同じ温度に保たれる。槽１３３では、リポソーム液を冷却する。これにより、リポソームを含むリポソーム液（低温）が得られる。

原料供給部１０ａ及び製造部１３としては、例えばリポソーム連続製造装置（東レエンジニアリング株式会社製「Ｌｉｐｏ−ＴＢ」）を用いることができる。

なお、リポソーム液（リポソーム）の製造方法は任意である。例えば、Ｂａｎｇｈａｍ法（薄膜法）によりリポソーム液を製造してもよい。以下、Ｂａｎｇｈａｍ法の一例について説明する。

まず、脂質（例えば、リン脂質）を有機溶媒（例えば、クロロホルム又はジクロロメタン）に溶解させる。続けて、脂質溶液をフラスコに入れる。続けて、例えばロータリーエバポレーターを用いて、フラスコ内の有機溶媒を揮発させる。続けて、フラスコ底部に脂質膜を形成する。その後、薬物を溶解した液（例えば、緩衝液）を脂質膜上に注入する。これにより、脂質が水和（又は膨潤）する。その結果、リポソームの懸濁液（リポソーム液）が得られる。

上記方法により製造されたリポソーム液では、リポソームの内腔に薬剤が入る。しかしこれに限られず、薬剤を最初から脂質（例えば、リン脂質）と混合し、その混合物を有機溶媒へ溶解させ、その溶液を用いてフィルムを作製することで、リポソームの膜内に薬剤を入れることも可能である。

図３（ａ）及び図３（ｂ）に、リポソーム液に含まれるリポソームの例（リポソーム１０１）を示す。以下、主に図３（ａ）及び図３（ｂ）を参照して、リポソーム１０１について説明する。

リポソーム１０１は、複数の脂質分子１０１ａを有する。脂質分子１０１ａの各々は、親水部１０１ｂ及び疎水部１０１ｃを有する。リポソーム１０１を所定の分散媒（例えば、水）に入れると、脂質分子１０１ａが二重の層（以下、脂質二重層と記載する）を形成し、表面積が最小になるようにリポソーム１０１の形状は球状になる。脂質二重層において、親水部１０１ｂは最外層（以下、最外親水層と記載する）及び最内層（以下、最内親水層と記載する）を構成する。また、疎水部１０１ｃは、最内親水層と最外親水層との間に挟まれる２つの層（以下、最内親水層側の層を第１疎水層と記載し、最外親水層側の層を第２疎水層と記載する）を構成する。

リポソーム１０１は、脂質二重層で囲まれた略球状の中空粒子である。リポソーム１０１の平均粒子径Ｄ１２は、例えば１０ｎｍ以上５００ｎｍ以下が好ましく、２０ｎｍ以上３００ｎｍ以下がより好ましく、３０ｎｍ以上２００ｎｍ以下がさらに好ましい。なお、リポソーム１０１は、１００ｎｍ未満の粒子径を有するリポソーム（ＳＵＶ：Small Unilameller Vesicle）であってもよいし、１００ｎｍ以上の粒子径を有するリポソーム（ＬＵＶ：Large Unilameller Vesicle）であってもよいし、多重層リポソーム（ＭＬＶ：Multilameller Vesicle）であってもよい。

リポソーム１０１の表面は、修飾剤１０１ｄで修飾されていてもよい。修飾剤１０１ｄは、例えばＰＥＧ（ポリエチレングリコール）又はＰＥＧ誘導体から構成される。リポソーム１０１は、ＰＥＧ又はＰＥＧ誘導体で修飾されることで、血中に長時間滞留し易くなる。また、患部組織と親和性の高い抗体をＰＥＧ末端に結合させることにより、リポソーム１０１が患部に吸着し易くなる。その結果、薬物のターゲティング性を向上させることが可能になる。

脂質二重層は、生体を構成する細胞膜と近似しているため、生体内環境に受け入れられ易い。このため、リポソーム１０１はドラッグデリバリシステム（ＤＤＳ）で用いられることがある。例えば図３（ｂ）に示すように、リポソーム１０１に薬剤１０１ｅを封入して、生体内の所定の部位まで薬剤１０１ｅを輸送することができる。薬剤１０１ｅは、例えば炎症性疾患治療用医薬組成物である。ただし、薬剤１０１ｅの種類は任意である。薬剤１０１ｅとして、例えば免疫抑制剤、抗リウマチ薬、消炎酵素製剤、痛風治療薬、抗ヒスタミン薬、化学伝達物質遊離抑制薬、抗がん剤、抗感染症薬、又はアデノシンを使用してもよい。なお、リポソーム１０１の用途は任意である。例えば、リポソーム１０１を用いて化粧品を製造してもよい。

以下、主に図１及び図４を参照して、精製部１５について説明する。

図１に示すように、精製部１５は、中空糸透析カラム２０と、透析液供給部１０ｂと、廃液容器２４とを備える。

図４に、中空糸透析カラム２０の一例（ダイアライザー）を示す。以下、主に図１及び図４を参照して、中空糸透析カラム２０の構成について説明する。

中空糸透析カラム２０は、ハウジング内に多数の中空糸膜２０１ａの集合体を有する。中空糸膜２０１ａ（詳しくは、糸の側面）には、多数の孔２０１ｂが形成されている。中空糸透析カラム２０は、中空糸膜２０１ａの内側にリポソーム液１１ｂ（被透析液）を流すための第１流路２０１と、中空糸膜２０１ａの外側に外液２１ａ（透析液）を流すための第２流路２０２とを有する。第１流路２０１の上流端には入口２０ａが設けられ、第１流路２０１の下流端には出口２０ｂが設けられている。第２流路２０２の上流端には入口２０ｃが設けられ、第２流路２０２の下流端には出口２０ｄが設けられている。第２流路２０２の入口２０ｃは第１流路２０１の出口２０ｂ近傍に配置され、第２流路２０２の出口２０ｄは第１流路２０１の入口２０ａ近傍に配置されている。

中空糸透析カラム２０における中空糸膜２０１ａのＭＷＣＯ（Molecular Weight Cut Off）は、例えば３ｋＤ以上７５０ｋＤ以下であることが好ましい。第１流路２０１の入口２０ａから出口２０ｂまでの長さＤ１１は、例えば１０ｃｍ以上３００ｃｍ以下であることが好ましい。複数本の中空糸透析カラムを長手方向に（直列に）つなげることで、実質的に長い中空糸透析カラム２０を形成してもよい。中空糸膜２０１ａの内径（糸の内径）Ｄ１３は、例えば０．３ｍｍ以上２．０ｍｍ以下であることが好ましい。また、孔２０１ｂは、例えばリポソーム１０１の平均粒子径Ｄ１２よりも小さい直径Ｄ１４を有する。孔２０１ｂの直径Ｄ１４は、例えば２ｎｍ以上７５ｎｍ以下であることが好ましい。中空糸膜２０１ａの素材の例としては、ｍＰＥＳ（修飾ポリエーテルスルホン）、ＭＥ（混合セルロースエステル）、ＰＥＳ（ポリエーテルスルホン）、又はＰＳ（ポリスルホン）が挙げられる。中空糸透析カラム２０としては、例えばスペクトラム・ラボラトリーズ株式会社製の「ＭｉｄｉＫｒｏｓ（登録商標）モジュール」を用いることができる。

以下、主に図１及び図４を参照して、中空糸透析カラム２０の周辺装置について説明する。

製造部１３の下流側には、管１４を介して第１流路２０１の入口２０ａが接続される。第１流路２０１の出口２０ｂよりも下流側には、ポンプ１６ａ（流速可変部）が設けられている。ポンプ１６ａの上流側には、管１６を介して、第１流路２０１の出口２０ｂが接続されている。ポンプ１６ａの下流側には、管１６を介して、回収部１７が接続されている。

透析液供給部１０ｂは、容器２１と、管２２と、ポンプ２２ａとを有する。容器２１は、外液２１ａ（透析液）を収容するための容器である。本実施形態では、容器２１が密閉可能な容器である。容器２１は、外液２１ａを注入するための注入口を有する。容器２１の注入口は開閉式の蓋を有する。注入口の蓋が閉まった状態において、容器２１は密閉される。容器２１の材質は、断熱性（熱伝導率）、耐熱性、耐薬品性、及び密閉性等を考慮して決めることが望ましい。

ポンプ２２ａは、例えばシリンジポンプ、プランジャポンプ、ピストンポンプ、又はローラーポンプである。ポンプ２２ａとしては、任意のポンプを採用できる。ポンプ２２ａの上流側には、管２２を介して、容器２１が接続されている。ポンプ２２ａの下流側には、管２２を介して、中空糸透析カラム２０（第２流路２０２の入口２０ｃ）が接続されている。第２流路２０２の出口２０ｄと廃液容器２４とは、互いに管２３を介して接続されている。

管２２及び２３の各々の材質は、断熱性（熱伝導率）、耐熱性、耐薬品性、及び密閉性等を考慮して決めることが望ましい。管２２及び２３の各々の材料の例としては、熱可塑性プラスチック（例えば、可塑剤を含むポリ塩化ビニル）、熱可塑性プラスチックエラストマー（例えば、可塑剤を含まないポリ塩化ビニル、スチレン−エチレン−ブチレンとシリコーンオイルとの共重合体、又はＵＳＰ石油を含むポリプロピレン系プラスチック）、熱硬化性ゴム（例えば、非結晶シリカを含むシロキサンポリマー）、又は熱凝固性フッ素ゴムが挙げられる。

廃液容器２４（詳しくは、容器の底の位置）は、中空糸透析カラム２０（詳しくは、水平に置かれたカラムの真ん中の位置）よりも低い位置（重力方向）に配置されていることが好ましく、中空糸透析カラム（詳しくは、水平に置かれたカラムの真ん中の位置）よりも７０ｃｍ以上低い位置に配置されていることがより好ましい。中空糸透析カラム２０よりも低い位置（好ましくは、中空糸透析カラムよりも７０ｃｍ以上低い位置）に廃液容器２４を配置すると、透析効率が向上する傾向がある。中空糸透析カラム２０から外液２１ａが流出し易くなるからであると推察される。

第２流路２０２の出口２０ｄにフィルタ（廃液処理用フィルタ）が設けられていることが好ましい。第２流路２０２の出口２０ｄにフィルタを設けると、中空糸透析カラム２０内の圧力が高くなり、透析効率が向上する傾向がある。

以下、主に図１及び図４を参照して、精製部１５の動作について説明する。本実施形態のリポソーム製造装置１０では、精製部１５が、中空糸膜２０１ａを用いて、向流透析でリポソーム液を濾過（詳しくは、透析）する。

図４に示すように、製造部１３によって製造された透析前のリポソーム液１１ｂは、例えば、リポソーム１０１と、分散媒１０２（例えば、水性媒体）と、有機微粒子１０３とを含む。有機微粒子１０３は、残存有機溶媒（例えば、イソプロパノール）、リポソームへ内包されなかった遊離薬剤（より具体的には、シクロスポリン、抗リウマチ薬、消炎酵素製剤、痛風治療薬、抗ヒスタミン薬、化学伝達物質遊離抑制薬、抗がん剤、抗感染症薬、又はアデノシン等）、又はリン脂質等である。有機微粒子１０３は、孔２０１ｂの直径Ｄ１４よりも小さい粒子径Ｄ１５を有する。有機微粒子１０３の粒子径Ｄ１５は、例えば１ｎｍ以上８ｎｍ以下である。

リポソーム液１１ｂを透析する場合には、ポンプ２２ａを作動させて、中空糸膜２０１ａの外側に中空糸膜２０１ａ（詳しくは、糸の側面）に沿って外液２１ａを流す。外液２１ａは、例えばリポソーム液１１ｂ（被透析液）においてリポソーム１０１を分散させるための媒体（分散媒１０２）と同じ液体（例えば、水性媒体）である。

ポンプ２２ａは、容器２１内の外液２１ａを中空糸透析カラム２０に向けて圧送（送液）する。ポンプ２２ａが作動することで、外液２１ａは、管２２内を中空糸透析カラム２０（第２流路２０２の入口２０ｃ）に向かって流れて、第２流路２０２においては中空糸膜２０１ａの外側を中空糸膜２０１ａに沿って流れる。外液２１ａは、第２流路２０２の入口２０ｃから出口２０ｄまで流れて、管２３を通り、廃液容器２４内に回収される。その後、回収された廃液は、例えば廃棄する。ただし、回収された廃液に必要な処理を施して、処理された廃液を外液２１ａ（透析液）として再利用してもよい。

リポソーム液１１ｂを透析する場合には、上記のように外液２１ａを流しながら、中空糸膜２０１ａの内側（第１流路２０１）に、中空糸膜２０１ａ（詳しくは、糸の側面）に沿ってリポソーム液１１ｂを流す。リポソーム液１１ｂを流す向きは、外液２１ａの流れに対向する向き（逆向き）であることが好ましい。リポソーム液１１ｂと外液２１ａとを互いに逆向きに流すことで、透析効率を向上させることができる。

中空糸膜２０１ａの内側（第１流路２０１）を流れるリポソーム液１１ｂは、拡散により中空糸膜２０１ａの外側（第２流路２０２）に移動する。ただし、図４に示すように、リポソーム液１１ｂのうち、リポソーム１０１は、孔２０１ｂよりも大きいため、孔２０１ｂを通過できない。一方、有機微粒子１０３は、孔２０１ｂよりも小さいため、孔２０１ｂを通過できる。このため、リポソーム液１１ｂに含まれる有機微粒子１０３は、中空糸膜２０１ａの外側へ除去される。

また、リポソーム液１１ｂ中の分散媒１０２も、中空糸膜２０１ａの内側（第１流路２０１）から外側（第２流路２０２）へ移動する。他方、外液２１ａは、中空糸膜２０１ａの外側（第２流路２０２）から内側（第１流路２０１）へ移動する。本実施形態に係る被透析液の濃度制御方法では、中空糸透析カラム２０の第１流路２０１に被透析液を流すとともに第２流路２０２に外液２１ａを流して、被透析液を透析しながら、第１流路２０１へ入るリポソーム液１１ｂ（被透析液）の量と第１流路２０１から出るリポソーム液１１ｂ（被透析液）の量とを制御することで、中空糸透析カラム２０における分散媒１０２の移動量（第１流路２０１から第２流路２０２へ移動する液量）と外液２１ａの移動量（第２流路２０２から第１流路２０１へ移動する液量）との差分（ひいては、被透析液の濃度）を制御する（詳しくは、後述する）。

第１流路２０１の入口２０ａから出口２０ｂまで流れて透析されたリポソーム液１１ｂ（透析後のリポソーム液１１ｂ）は、管１６内を通って回収部１７に流入する。

本実施形態のリポソーム製造装置１０では、一度透析したリポソーム液１１ｂを循環させない。詳しくは、第１流路２０１の出口２０ｂから流出した透析後のリポソーム液１１ｂを第１流路２０１の入口２０ａに戻さない。このため、リポソーム液１１ｂは、第１流路２０１の入口２０ａから出口２０ｂまでを１回だけ通過する。これにより、精製時間を短くすることが可能になる。

本実施形態に係るリポソーム製造装置１０（透析装置）は、図５に示すような制御ユニット３０を有する。以下、主に図５を参照して、制御ユニット３０の構成について説明する。

図５に示すように、制御ユニット３０は、制御部３１と、検出部３２とを有する。制御部３１と検出部３２とは相互に通信可能に接続されている。

制御部３１は、ＣＰＵ（Central Processing Unit）と、ＲＯＭ（Read Only Memory）と、ＲＡＭ（Random Access Memory）と、リポソーム製造装置１０に含まれる各種アクチュエータの駆動回路とから構成される。ＲＯＭ５２には、ＢＩＯＳ（Basic Input/Output System）、ＯＳ（Operating System）、各種ドライバー、及び各種アプリケーションなど、各種プログラムが格納されている。検出部３２は、リポソーム製造装置１０に含まれる各種センサ（例えば、温度センサ１３１ｂ、１３２ｂ、１３３ｂ）の検出回路から構成される。

制御ユニット３０は、入力部４１と、表示部４２と、記憶部４３と、インターフェイス４４とそれぞれ通信可能に接続されている。インターフェイス４４は、制御ユニット３０と外部の装置との間でのデータの送受信を可能にする。制御ユニット３０は、インターフェイス４４を介して、例えば汎用コンピューター（いわゆるパーソナルコンピューター）に接続される。

入力部４１は、ユーザーからの入力を受け付ける。入力部４１は、例えばキーボード、マウス、又はタッチパネルから構成される。表示部４２は、例えばＬＣＤ（Liquid Crystal Display）又はＥＬＤ（Electro Luminescence Display）のようなディスプレーから構成される。なお、入力部４１及び表示部４２がタッチパネルから構成される場合には、入力部４１と表示部４２とは一体化していることになる。

記憶部４３は、例えばハードディスクのような不揮発性メモリーから構成される。記憶部４３には、各種制御に係るプログラム及びデータ（例えば、入力部４１から制御ユニット３０に入力されたデータ）等が格納される。

制御部３１は、入力部４１から制御ユニット３０に入力されたデータに基づいて、ポンプ１２ａ及び２２ａを制御する。また、制御部３１は、検出部３２に入力された温度センサ１３１ｂ、１３２ｂ、１３３ｂの各出力信号と、入力部４１から制御ユニット３０に入力されたコマンド又はデータとに基づいて、恒温槽１３１ａ、１３２ａ、１３３ａを制御する。

本実施形態に係るリポソーム製造装置１０では、制御ユニット３０が、第１流路２０１の入口２０ａにおける被透析液（透析前のリポソーム液１１ｂ）の流速（以下、第１流速と記載する）と第１流路２０１の出口２０ｂにおける被透析液（透析後のリポソーム液１１ｂ）の流速（以下、第２流速と記載する）との差分に基づいて、第１流路２０１の出口２０ｂから流出する被透析液（透析後のリポソーム液１１ｂ）の濃度を制御する。なお、第１流速と第２流速との差分は、第１流速及び第２流速の一方から他方を減算した値で表すこともできるし、第１流速及び第２流速の一方から他方を除算した値で表すこともできる。被透析液の濃度は、被透析液（例えば、リポソーム液１１ｂ）における所定の粒子（例えば、リポソーム１０１）の割合に相当する。以下、主に図６及び図７を参照して、こうした被透析液の濃度制御について説明する。

例えば制御ユニット３０（図５）がポンプ１２ａ（図１）を制御することにより、第１流速を所定の速度にすることができる。また、例えば制御部３１がポンプ１６ａを制御することにより、第２流速を所定の速度にすることができる。

例えば、第１流速を一定にしたまま第２流速を変えることで、第１流速に対する第２流速の比率（第２流速／第１流速）を変えることができる。以下、第１流速に対する第２流速の比率（第２流速／第１流速）を、透析前後の流速比率と記載する。

例えば透析前後の流速比率を１．０（第１流速＝第２流速）にすることで、図６に示すように、リポソーム液１１ｂの濃度をほとんど変えずにリポソーム液１１ｂ中の有機微粒子１０３（図４）を除去することができる。リポソーム液１１ｂが第１流路２０１を流れる間において、第１流路２０１から第２流路２０２へ移動する分散媒１０２の量は、第２流路２０２から第１流路２０１へ移動する分散媒１０２の量と略同じになる。

また、例えば透析前後の流速比率を１．０よりも小さく（第１流速＞第２流速）することで、図７に示すように、リポソーム液１１ｂ中の有機微粒子１０３（図４）を除去しながらリポソーム液１１ｂを濃縮することができる。詳しくは、第１流速を第２流速よりも大きくすることで、第１流路２０１の入口２０ａに流入する液量が、第１流路２０１の出口２０ｂから流出する液量よりも少なくなる。また、リポソーム液１１ｂが第１流路２０１を流れるうちに、リポソーム液１１ｂ中の分散媒１０２が、中空糸膜２０１ａの孔２０１ｂを通って、第１流路２０１から第２流路２０２へ移動する。リポソーム１０１は、中空糸膜２０１ａの孔２０１ｂ（図４）よりも大きいため、第１流路２０１から第２流路２０２へ移動しない。このため、第１流路２０１の出口２０ｂから流出する時のリポソーム液１１ｂの濃度は、第１流路２０１の入口２０ａに流入した時のリポソーム液１１ｂの濃度よりも高くなる。

また、例えば透析前後の流速比率を１．０よりも大きくした場合（第１流速＜第２流速）には、リポソーム液１１ｂが濃縮される場合（図７に示す例）とは逆の向きにリポソーム液１１ｂ中の分散媒１０２が移動する。このため、透析前後の流速比率を１．０よりも大きくすることで、リポソーム液１１ｂ中の有機微粒子１０３を除去しながらリポソーム液１１ｂを希釈することができる。

なお、上記例では、第１流速に対する第２流速の比率（第２流速／第１流速）を制御することで、被透析液（透析後のリポソーム液１１ｂ）の濃度を制御している。しかし、第２流速に対する第１流速の比率（第１流速／第２流速）を制御することで、被透析液（透析後のリポソーム液１１ｂ）の濃度を制御してもよい。また、第１流速及び第２流速の一方から他方を引いた値（第１流速−第２流速、又は、第２流速−第１流速）を制御することで、被透析液（透析後のリポソーム液１１ｂ）の濃度を制御してもよい。

以上説明したように、本実施形態に係る透析装置（精製部１５等）は、中空糸透析カラム２０と、ポンプ１２ａ（送液部）と、ポンプ１６ａ（流速可変部）とを備える。そして、中空糸透析カラム２０は、中空糸膜２０１ａと、中空糸膜２０１ａの内側に被透析液を流すための第１流路２０１と、中空糸膜２０１ａの外側に外液２１ａを流すための第２流路２０２とを有する。ポンプ１２ａは、第１流路２０１の入口２０ａよりも上流側に設けられている。ポンプ１２ａは、第１流路２０１に所定の流速で被透析液を送る。ポンプ１６ａは、第１流路２０１の出口２０ｂよりも下流側に設けられている。ポンプ１６ａは、第１流路２０１の出口２０ｂから流出する時の被透析液の流速を変更可能とする。ポンプ１６ａは、第１流路２０１の出口２０ｂから流出した被透析液を所定の流速で下流に送る。

また、本実施形態に係る被透析液の濃度制御装置は、制御ユニット３０を備える。制御ユニット３０は、第１流路２０１に被透析液を流し、第２流路２０２に外液２１ａを流し、透析前後の流速比率（第１流路２０１の入口２０ａにおける被透析液の流速と第１流路２０１の出口２０ｂにおける被透析液の流速との比）に基づいて、第１流路２０１の出口２０ｂから流出する被透析液の濃度を制御する。詳しくは、制御ユニット３０は、例えばポンプ１６ａ（より詳しくは、ポンプ１６ａが単位時間当たりに送液する流量）を制御する。なお、ハードウェア（例えば、専用回路）だけで上記制御を実行可能にしてもよいし、ＣＰＵにプログラムを実行させることで上記制御を実行してもよい。

制御ユニット３０は、被透析液を濃縮する場合には、第１流路２０１の出口２０ｂにおける被透析液の流速を第１流路２０１の入口２０ａにおける被透析液の流速よりも大きくすることにより、第１流路２０１の出口２０ｂにおける被透析液の濃度を第１流路２０１の入口２０ａにおける被透析液の濃度よりも低くする。また、制御ユニット３０は、被透析液を希釈する場合には、第１流路２０１の出口２０ｂにおける被透析液の流速を第１流路２０１の入口２０ａにおける被透析液の流速よりも小さくすることにより、第１流路２０１の出口２０ｂにおける被透析液の濃度を第１流路２０１の入口２０ａにおける被透析液の濃度よりも高くする。

本実施形態に係る透析装置（精製部１５等）では、制御ユニット３０によりポンプ１６ａを制御することで、中空糸透析カラム２０から流出する被透析液の濃度を簡易に制御することができる。その結果、高い精度で所望の濃度を有する被透析液を得ることが可能になる。

第１流路２０１の出口２０ｂから流出する時の被透析液の流速を変更可能とする流速可変部は、ポンプ１６ａに限られず任意である。流速可変部としては、例えばポンプ１６ａに代えて、図８に示すような流路面積可変装置１６ｂ（例えば、絞り部）を用いてもよい。流路面積可変装置１６ｂにおける流路幅Ｄ１６（ひいては、流路面積）は変更可能とされる。流路幅Ｄ１６（流路面積）を変更する場合には、例えば流路の側壁を内側又は外側に変位させる。例えば管１６（特に、第１流路２０１の出口２０ｂ近傍）に流路面積可変装置１６ｂを設けることができる。例えば流路幅Ｄ１６（ひいては、流路面積）を小さくすることで、第１流路２０１の出口２０ｂから流出する時の被透析液の流速を小さくすることができる。制御ユニット３０が流路面積可変装置１６ｂ（例えば、流路幅Ｄ１６）を制御できることが好ましい。

本実施形態では、制御ユニット３０が、第１流路２０１の入口２０ａにおける被透析液の流速を一定に保ち、第１流路２０１の出口２０ｂにおける被透析液の流速を変化させることで、第１流路２０１の出口２０ｂから流出する被透析液の濃度を制御する。こうした構成を有する被透析液の濃度制御装置では、中空糸透析カラム２０から流出する被透析液の濃度を高い精度で簡易に制御することができる。ただしこれに限られず、第１流速（第１流路２０１の入口２０ａにおける被透析液の流速）と第２流速（第１流路２０１の出口２０ｂにおける被透析液の流速）との両方を変化させることで、第１流路２０１の出口２０ｂから流出する被透析液の濃度を制御してもよい。

本実施形態では、第２流路２０２の入口２０ｃにおける外液２１ａの流速（以下、第３流速と記載する）が第２流速（第１流路２０１の出口２０ｂにおける被透析液の流速）よりも大きい状態で、制御ユニット３０が被透析液の濃度を制御する。被透析液の濃度を調整する場合において、第３流速は第２流速よりも大きいことが好ましい。具体的には、第３流速は、第２流速の１０倍以上１００倍以下であることが好ましく、第２流速の３０倍以上８０倍以下であることがより好ましい。第３流速を第２流速よりも大きくすることで、透析前後の流速比率に基づいて被透析液の濃度を好適に制御することが可能になる。また、第３流速を大きくするほど透析効率が向上する傾向がある。

本実施形態に係る透析装置（精製部１５等）では、第１流路２０１内のリポソーム液１１ｂ（被透析液）が、第２流路２０２内の外液２１ａの流れに対向する向きに流れる。こうした構成を有する透析装置では、透析効率を向上させることができる。

本実施形態に係るリポソーム製造装置１０では、製造部１３と精製部１５と回収部１７と（被透析液が流れる系）が、互いに密閉可能に連結されている。このため、リポソーム液１１ｂ（リポソーム１０１）の製造、精製、及び回収を密閉空間で連続的に（ひいては、一連の工程で）行うことができる。これにより、外部からの菌の侵入が抑制される。このため、本実施形態に係るリポソーム製造装置１０（透析装置）は、薬の製造に適している。本実施形態に係るリポソーム製造装置１０は、炎症性疾患治療用医薬組成物を内包するリポソームの製造に特に適している。なお、外液２１ａが流れる系（特に、下流側）は必ずしも密閉されていることを要さない。

本実施形態に係るリポソーム製造装置１０では、リポソーム液１１ｂ（被透析液）が、第１流路２０１の入口２０ａから出口２０ｂまでを１回だけ通過する。リポソーム液１１ｂを循環させないことで、リポソーム液１１ｂを循環させる場合よりも効率的に、リポソーム液１１ｂ（被透析液）を透析し、且つ、濃度調整することが可能になる。また、リポソーム製造装置１０の構成がシンプルになるため、密閉空間を維持し易くなる。ただし、こうした構成に限られず、リポソーム液１１ｂ（被透析液）に第１流路２０１の入口２０ａから出口２０ｂまでを複数回通過させて（リポソーム液１１ｂを循環させて）、リポソーム液１１ｂ（被透析液）をさらに透析及び濃度調整（濃縮又は希釈）してもよい。

製造されるリポソーム液の濃度が高過ぎると、リポソーム液の保存安定性が悪くなることがある。本実施形態に係るリポソーム製造装置１０によれば、所望とする濃度のリポソーム液を容易に得ることが可能になる。被透析液（例えば、リポソーム液）の濃度を調整する場合において、透析前後の流速比率は０．２以上５．０以下であることが好ましく、０．５以上２．０以下であることがより好ましい。透析前後の流速比率を０．２以上５．０以下（より好ましくは、０．５以上２．０以下）にすることで、高い精度で被透析液の濃度を調整することが可能になる。

本実施形態に係る被透析液の濃度制御方法では、第１流路２０１に被透析液を流すとともに第２流路２０２に外液２１ａを流して、被透析液を透析しながら、第１流路２０１から第２流路２０２へ移動する液量と第２流路２０２から第１流路２０１へ移動する液量との少なくとも一方を制御することで、第１流路２０１の出口２０ｂから流出する被透析液の濃度を制御する。本実施形態に係る被透析液の濃度制御方法によれば、中空糸透析カラム２０を用いて簡易に被透析液の濃度を制御することが可能になる。

第１流路２０１の入口における被透析液の流速と第１流路２０１の出口における被透析液の流速との差分を制御することで、第１流路２０１から第２流路２０２へ移動する液量と第２流路２０２から第１流路２０１へ移動する液量との差分を好適に制御することができる。

中空糸透析カラム２０の置き方（透析時の姿勢）は、任意である。例えば、中空糸透析カラム２０を、縦置き（カラムの長手方向が鉛直線に平行になる姿勢）にしてもよいし、横置き（カラムの長手方向が水平面に平行になる姿勢）にしてもよい。ただし、中空糸透析カラム２０を横置きにした場合、被透析液の濃度を制御し易くなる。この理由は、中空糸透析カラム２０全体に重力が均等にかかるからであると考えられる。

中空糸膜２０１ａの内径（糸の内径）Ｄ１３（図４）を太くしたり、複数本の中空糸透析カラムを並列につなげたりすることで、一度に処理（透析及び濃度調整）する量を増やすことができる。また、第１流路２０１の入口２０ａにおける被透析液の流速を大きくして処理量を増やしてもよい。こうした方法では、流速の調整のみで簡単に処理量を増やすことができる。ただし、第１流路２０１の入口２０ａにおける被透析液の流速を大きくすると、透析効率が低下する傾向がある。透析効率が低下した場合には、直列につなげる中空糸透析カラムの本数を増やすことで、十分な透析を行うことが可能になる。

＜実施例１＞
以下、主に図９及び図１０を参照して、図１に示されるリポソーム製造装置１０を実際に用いて被透析液の濃度を制御した実験（実施例１）について説明する。

［実験装置］
まず、実験に用いた装置について説明する。

原料供給部１０ａ及び製造部１３として、リポソーム連続製造装置（東レエンジニアリング株式会社製「Ｌｉｐｏ−ＴＢ」）を用いた。ポンプ１２ａは、バルブレス定量ポンプ（Ｆｌｕｉｄ Ｍｅｔｅｒｉｎｇ，Ｉｎｃ．製「ＲＨ−０ＣＴＣ−ＬＦ」）であった。管１２は、熱可塑性エラストマー系プラスチックからなる内径０．８ｍｍの管であった。容器１１としては、ホウケイ酸ガラスからなる容器を用いた。

中空糸透析カラム２０として、スペクトラム・ラボラトリーズ株式会社製の「ＭｉｄｉＫｒｏｓ（登録商標）モジュール」を２本用いた。詳しくは、２本の中空糸透析カラム（ＭｉｄｉＫｒｏｓモジュール）を長手方向に（直列に）つなげることで、実質的に長い中空糸透析カラム２０を形成した。２本の中空糸透析カラム（ＭｉｄｉＫｒｏｓモジュール）に関してはそれぞれ、中空糸膜２０１ａの表面積が３７０ｃｍ²、中空糸膜２０１ａのＭＷＣＯ（Molecular Weight Cut Off）が５００ｋＤ、第１流路２０１の長さが７０ｃｍであった。２本の中空糸透析カラムをつなげた状態において、第１流路２０１の入口２０ａから出口２０ｂまでの長さＤ１１（図１）は１４０ｃｍであった。中空糸透析カラム２０の置き方は横置きであった。

容器２１として、ポリエチレンからなる容器を用いた。ポンプ２２ａとして、ペリスタルティックポンプ（スペクトラム・ラボラトリーズ株式会社製「ＫｒｏｓＦｌｏ（登録商標）Ｒｅｓｅａｒｃｈ ＩＩｉポンプ」）を用いた。廃液容器２４として、ポリエチレンからなる容器を用いた。

ポンプ１６ａとして、ペリスタルティックポンプ（ＩＳＭＡＴＥＣ社製「ＩＳＭ５９７Ｄ」）を用いた。管１４及び１６としてそれぞれ、熱可塑性エラストマー系プラスチックからなる内径０．８ｍｍの管を用いた。管２２として、熱可塑性エラストマー系プラスチックからなる内径３．１ｍｍの管を用いた。管２３として、熱可塑性エラストマー系プラスチックからなる内径６．４ｍｍの管を用いた。また、回収部１７として、ポリプロピレンからなる容器を用いた。

廃液容器２４は、中空糸透析カラム２０よりも１１０ｃｍ低い位置（下方）に配置した。実施例１では、第２流路２０２の出口２０ｄにフィルタを設けなかった。

［被透析液及び外液］
次に、実験に用いた被透析液及び外液２１ａについて説明する。

被透析液は、リポソーム連続製造装置（Ｌｉｐｏ−ＴＢ）により製造されたリポソーム液１１ｂであった。リポソーム液１１ｂは、リポソーム１０１と、リン酸ナトリウムを含む１０質量％マルトース溶液（分散媒１０２）と、イソプロパノール（有機微粒子１０３）とを含んでいた。リポソーム液１１ｂでは、分散媒１０２中に多数のリポソーム１０１が分散していた。リポソーム１０１は、例えば図３（ｂ）に示すように、シクロスポリン（薬剤１０１ｅ）を内包していた。原料１１ａにおけるシクロスポリンの濃度は１．００ｍｇ／ｍＬであった。原料１１ａにおけるイソプロパノールの濃度は１６．６質量％であった。また、リポソーム１０１の表面は、ＰＥＧ（修飾剤１０１ｄ）で修飾されていた。リポソーム１０１の平均粒子径Ｄ１２は９３ｎｍ以上１０１ｎｍ以下であった。また、外液２１ａはリン酸ナトリウムを含む１０質量％マルトース溶液であった。

［評価方法及び評価結果］
実験では、リポソーム連続製造装置（Ｌｉｐｏ−ＴＢ）により製造したリポソーム液１１ｂを、中空糸透析カラム２０を用いて透析した。製造と透析とを連続して行った。透析では、各リポソーム液１１ｂに、第１流路２０１の入口２０ａから出口２０ｂまでを１回だけ通過させた。この際、第１流路２０１の入口２０ａにおける被透析液の流速（カラム入口の流速）を一定（２．００ｍＬ／分）に保ち、第１流路２０１の出口２０ｂにおける被透析液の流速（カラム出口の流速）を変化させた。詳しくは、ポンプ１６ａの流速の設定値を変えることによってカラム出口の流速を変化させた。図９に、実験条件（条件１−１〜１−３）及び実験結果（リポソーム液１１ｂの濃度）を示す。

図９に示すように、本実験では、条件１−１〜１−３（３種類の透析前後の流速比率又は濃縮率）の各々でリポソーム液１１ｂを透析し、透析後のリポソーム液に含まれるシクロスポリンの濃度を測定した。なお、条件１−１〜１−３のいずれにおいても、第２流路２０２の入口２０ｃにおける外液２１ａの流速（外液の流速）が６０．０ｍＬ／分であった。

条件１−１では、カラム入口の流速が２．００ｍＬ／分、カラム出口の流速が２．００ｍＬ／分であった。条件１−１における透析前後の濃縮率（カラム入口の流速／カラム出口の流速）は１．０００（＝２．００／２．００）であった。条件１−２では、カラム入口の流速が２．００ｍＬ／分、カラム出口の流速が１．３３ｍＬ／分であった。条件１−２における透析前後の濃縮率は１．５０４（≒２．００／１．３３）であった。条件１−３では、カラム入口の流速が２．００ｍＬ／分、カラム出口の流速が３．００ｍＬ／分であった。条件１−３における透析前後の濃縮率は０．６６７（≒２．００／３．００）であった。

条件１−１でリポソーム液１１ｂを透析した場合には、透析後のシクロスポリンの濃度が１．１３５ｍｇ／ｍＬであった。

条件１−２でリポソーム液１１ｂを透析した場合には、透析後のシクロスポリンの濃度が１．６６１ｍｇ／ｍＬであった。透析の過程でリポソーム液１１ｂが濃縮された。

条件１−３でリポソーム液１１ｂを透析した場合には、透析後のシクロスポリンの濃度が０．７７０ｍｇ／ｍＬであった。透析の過程でリポソーム液１１ｂが希釈された。

なお、条件１−１〜１−３のいずれにおいても、リポソーム液１１ｂに含まれるイソプロパノールの濃度は、透析によって１．０質量％以下まで減少した。透析に要した時間（リポソーム液１１ｂが中空糸透析カラム２０を通過する時間）は、約１０分であった。

図１０は、図９に示す実験データのうち、透析前後での濃縮率と透析後のシクロスポリンの濃度との相関を示すグラフである。

図１０に示すように、カラム入口の流速を一定（２．００ｍＬ／分）に保った状態において、透析前後での濃縮率（カラム入口の流速／カラム出口の流速）とシクロスポリンの濃度とが、高い精度で比例関係（直線関係）を有していた。濃縮率（ｘ）とシクロスポリンの濃度（ｙ）との関係は、「ｙ＝１．１１８７ｘ」の式で表され、決定係数Ｒ²は０．９９６８であった。このため、カラム出口の流速（ポンプ１６ａ）を制御することで、容易に所望の濃度を有するリポソーム液１１ｂを得ることができた。

＜実施例２＞
以下、主に図１１を参照して、図１に示されるリポソーム製造装置１０を実際に用いて被透析液の濃度を制御した実験（実施例２）について説明する。なお、実施例２の条件は、以下の点以外は、実施例１の条件と同様である。

図１１に示すように、本実験では、条件２−１及び２−２（２種類の外液の流速）の各々でリポソーム液１１ｂを透析し、透析後のリポソーム液に含まれるイソプロパノールの濃度を測定した。なお、条件２−１及び２−２のいずれにおいても、第１流路２０１の入口２０ａにおける被透析液の流速（カラム入口の流速）は２．００ｍＬ／分であり、第１流路２０１の出口２０ｂにおける被透析液の流速（カラム出口の流速）は２．００ｍＬ／分であった。

条件２−１では、第２流路２０２の入口２０ｃにおける外液２１ａの流速（外液の流速）が４０．０ｍＬ／分であった。条件２−１における外液の流速（４０．０ｍＬ／分）はカラム出口の流速（２．００ｍＬ／分）の２０倍であった。条件２−２では、第２流路２０２の入口２０ｃにおける外液２１ａの流速（外液の流速）が６０．０ｍＬ／分であった。条件２−２における外液の流速（６０．０ｍＬ／分）はカラム出口の流速（２．００ｍＬ／分）の３０倍であった。

条件２−１でリポソーム液１１ｂを透析した場合には、透析後のイソプロパノールの濃度が０．７９質量％であった。

条件２−２でリポソーム液１１ｂを透析した場合には、透析後のイソプロパノールの濃度が０．３６質量％であった。

上記実験では、外液の流速を大きくすることで、透析効率が向上した。この理由は、第１流路２０１から第２流路２０２へ移動する液量と第２流路２０２から第１流路２０１へ移動する液量とがそれぞれ増えるためであると推察される。

＜実施例３＞
以下、主に図１２（ａ）及び図１２（ｂ）を参照して、図１に示されるリポソーム製造装置１０を実際に用いて被透析液の濃度を制御した実験（実施例３）について説明する。なお、実施例３の条件は、以下の点以外は、実施例１の条件と同様である。

第１流路２０１の入口２０ａ及び出口２０ｂ、並びに第２流路２０２の入口２０ｃ及び出口２０ｄの各々に、管内の圧力を検出するための圧力センサ（スペクトラム・ラボラトリーズ株式会社製「ＡＣＰＭ−７９９−０１Ｓ」）を設けた。

図１２（ａ）に示すように、本実験では、条件３−１及び３−２（２種類の廃液容器の位置）の各々でリポソーム液１１ｂを透析し、透析後のリポソーム液に含まれるイソプロパノールの濃度を測定した。なお、条件３−１及び３−２のいずれにおいても、第１流路２０１の入口２０ａにおける被透析液の流速（カラム入口の流速）は２．００ｍＬ／分であり、第１流路２０１の出口２０ｂにおける被透析液の流速（カラム出口の流速）は２．００ｍＬ／分であった。

条件３−１では、中空糸透析カラム２０よりも１１０ｃｍ低い位置（下方）に廃液容器２４を配置した。条件３−２では、中空糸透析カラム２０と同じ高さに廃液容器２４を配置した。

条件３−１でリポソーム液１１ｂを透析した場合には、透析後のイソプロパノールの濃度が０．３６質量％であった。

条件３−２でリポソーム液１１ｂを透析した場合には、透析後のイソプロパノールの濃度が０．５８質量％であった。

また、本実験では、図１２（ｂ）に示すように、上述の圧力センサにより、条件３−１及び３−２の各々について、透析中における第１流路２０１及び第２流路２０２の各々の出入口（入口２０ａ、出口２０ｂ、入口２０ｃ、及び出口２０ｄ）の圧力をそれぞれ測定した。この圧力の測定では、中空糸透析カラム２０内を液体で満たし、且つ、管２３（廃液チューブ）内の液体を取り除いた状態での圧力を、ゼロ点（基準）とした。

条件３−１での透析中における、第１流路２０１の入口２０ａの圧力（内側流路入口の圧力）は１５ｍｂ（１５００Ｐａ）であり、第１流路２０１の出口２０ｂの圧力（内側流路出口の圧力）は−４ｍｂ（−４００Ｐａ）であり、第２流路２０２の入口２０ｃの圧力（外側流路入口の圧力）は１２ｍｂ（１２００Ｐａ）であり、第２流路２０２の出口２０ｄの圧力（外側流路出口の圧力）は−４１ｍｂ（−４１００Ｐａ）であった。

条件３−２での透析中における、第１流路２０１の入口２０ａの圧力（内側流路入口の圧力）は９７ｍｂ（９７００Ｐａ）であり、第１流路２０１の出口２０ｂの圧力（内側流路出口の圧力）は７５ｍｂ（７５００Ｐａ）であり、第２流路２０２の入口２０ｃの圧力（外側流路入口の圧力）は８８ｍｂ（８８００Ｐａ）であり、第２流路２０２の出口２０ｄの圧力（外側流路出口の圧力）は３５ｍｂ（３５００Ｐａ）であった。

上記実験では、中空糸透析カラム２０よりも低い位置に廃液容器２４を配置したことで、透析効率が向上した。この理由は、中空糸透析カラム２０よりも低い位置（重力方向）に廃液容器２４を配置すると、中空糸透析カラム２０から外液２１ａが流出し易くなるためであると推察される。

＜実施例４＞
以下、主に図１３（ａ）及び図１３（ｂ）を参照して、図１に示されるリポソーム製造装置１０を実際に用いて被透析液の濃度を制御した実験（実施例４）について説明する。なお、実施例４の条件は、以下の点以外は、実施例１の条件と同様である。

第１流路２０１の入口２０ａ及び出口２０ｂ、並びに第２流路２０２の入口２０ｃ及び出口２０ｄの各々に、管内の圧力を検出するための圧力センサ（スペクトラム・ラボラトリーズ株式会社製「ＡＣＰＭ−７９９−０１Ｓ」）を設けた。

図１３（ａ）に示すように、本実験では、条件４−１及び４−２（２種類の廃液容器の位置）の各々でリポソーム液１１ｂを透析し、透析後のリポソーム液に含まれるイソプロパノールの濃度を測定した。なお、条件４−１及び４−２のいずれにおいても、第１流路２０１の入口２０ａにおける被透析液の流速（カラム入口の流速）は２．００ｍＬ／分であり、第１流路２０１の出口２０ｂにおける被透析液の流速（カラム出口の流速）は２．００ｍＬ／分であった。

条件４−１では、第２流路２０２の出口２０ｄ（中空糸透析カラム２０と管２３との連結部）にフィルタを設けなかった。条件４−２では、第２流路２０２の出口２０ｄにフィルタ（Ｍｅｒｃｋ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社製「Ｍｉｌｌｅｘ−ＦＧ５０」）を設けた。

条件４−１でリポソーム液１１ｂを透析した場合には、透析後のイソプロパノールの濃度が０．３６質量％であった。

条件４−２でリポソーム液１１ｂを透析した場合には、透析後のイソプロパノールの濃度が０．２８質量％であった。

また、本実験では、図１３（ｂ）に示すように、上述の圧力センサにより、条件４−１及び４−２の各々について、透析中における第１流路２０１及び第２流路２０２の各々の出入口（入口２０ａ、出口２０ｂ、入口２０ｃ、及び出口２０ｄ）の圧力をそれぞれ測定した。この圧力の測定では、中空糸透析カラム２０内を液体で満たし、且つ、管２３（廃液チューブ）内の液体を取り除いた状態での圧力を、ゼロ点（基準）とした。

条件４−１での透析中における、第１流路２０１の入口２０ａの圧力（内側流路入口の圧力）は１５ｍｂ（１５００Ｐａ）であり、第１流路２０１の出口２０ｂの圧力（内側流路出口の圧力）は−４ｍｂ（−４００Ｐａ）であり、第２流路２０２の入口２０ｃの圧力（外側流路入口の圧力）は１２ｍｂ（１２００Ｐａ）であり、第２流路２０２の出口２０ｄの圧力（外側流路出口の圧力）は−４１ｍｂ（−４１００Ｐａ）であった。

条件４−２での透析中における、第１流路２０１の入口２０ａの圧力（内側流路入口の圧力）は５９ｍｂ（５９００Ｐａ）であり、第１流路２０１の出口２０ｂの圧力（内側流路出口の圧力）は４１ｍｂ（４１００Ｐａ）であり、第２流路２０２の入口２０ｃの圧力（外側流路入口の圧力）は５７ｍｂ（５７００Ｐａ）であり、第２流路２０２の出口２０ｄの圧力（外側流路出口の圧力）は１ｍｂ（１００Ｐａ）であった。

上記実験では、図１３（ａ）に示すように、中空糸透析カラム２０よりも低い位置（下方）に廃液容器２４を配置し、且つ、第２流路２０２の出口２０ｄ（中空糸透析カラム２０と管２３との連結部）にフィルタを設けたことで、透析効率が向上した。また、図１３（ｂ）に示すように、第２流路２０２の出口２０ｄにフィルタを設けなかった場合（条件４−１）において、中空糸透析カラム２０よりも低い位置に廃液容器２４を配置すると、中空糸透析カラム２０に陰圧がかかり（外側流路出口の圧力と内側流路出口の圧力とがそれぞれ負の値になり）、中空糸透析カラム２０内の圧力が低くなった。一方、第２流路２０２の出口２０ｄにフィルタを設けた場合（条件４−２）において、第２流路２０２の出口２０ｄにフィルタを設けると、中空糸透析カラム２０に陰圧がかからず（外側流路出口の圧力と内側流路出口の圧力とがそれぞれ正の値になり）、中空糸透析カラム２０内の圧力が高くなった。条件４−２では、中空糸透析カラム２０内の圧力が高くなったことにより、透析効率が向上したと推察される。

＜他の実施例＞
第１流路２０１の入口２０ａにおける被透析液の流速を３ｍＬ／分〜４ｍＬ／分にして、４本の中空糸透析カラム（ＭｉｄｉＫｒｏｓモジュール）を長手方向に（直列に）つなげることで、約４Ｌの量の被透析液（リポソーム液）を約２０時間かけて処理（透析及び濃縮）することができた。

本発明は、上記実施形態及び実施例に限定されない。例えば以下のように変形して実施することもできる。

第１流路２０１の入口２０ａにおける被透析液の流速を制御する（例えば、流速を一定に保つ）ためのポンプを、製造部１３と精製部１５との間に設けてもよい。

第１流路２０１の入口２０ａにおける被透析液の流速と、第１流路２０１の出口２０ｂにおける被透析液の流速と、第２流路２０２の入口２０ｃにおける外液２１ａの流速と、第２流路２０２の出口２０ｄにおける外液２１ａの流速との少なくとも１つを検出するための流速センサを、精製部１５に設けてもよい。

被透析液は任意である。例えば、リポソーム液の代わりに、有機化合物（高分子化合物又は低分子化合物）、薬剤、及び抗体の少なくとも１つを分散させた液体を、被透析液として用いてもよい。

上記実施形態及び変形例は、任意に組み合わせることができる。用途等に応じて適切な組み合わせを選ぶことが好ましい。透析装置で被透析液中の有機微粒子（例えば、残存有機溶媒又は遊離薬剤）の除去のみを行って、リポソームの製造までは行わなくてもよい。

上記実施形態及び変形例において、透析装置、リポソーム製造装置、及び被透析液の濃度制御装置の構成（構成要素、寸法、材質、形状、又は配置等）は、本発明の趣旨を逸脱しない範囲において任意に変更又は割愛することができる。例えば、十分な透析効率が得られる場合には、リポソーム液１１ｂを流す向きと外液２１ａを流す向きとを同じ向きにしてもよい。

本発明に係る透析装置、リポソーム製造装置、被透析液の濃度制御装置、及び被透析液の濃度制御方法は、例えば薬剤又はリポソームの製造に適している。

１０ リポソーム製造装置
１０ａ 原料供給部
１０ｂ 透析液供給部
１１ 容器
１１ａ 原料
１１ｂ リポソーム液
１２ 管
１２ａ ポンプ
１３ 製造部
１４ 管
１５ 精製部
１６ 管
１６ａ ポンプ
１６ｂ 流路面積可変装置
１７ 回収部
２０ 中空糸透析カラム
２０ａ 入口
２０ｂ 出口
２０ｃ 入口
２０ｄ 出口
２１ 容器
２１ａ 外液
２２ 管
２２ａ ポンプ
２３ 管
２４ 廃液容器
３０ 制御ユニット
３１ 制御部
３２ 検出部
４１ 入力部
４２ 表示部
４３ 記憶部
４４ インターフェイス
１０１ リポソーム
１０１ａ 脂質分子
１０１ｂ 親水部
１０１ｃ 疎水部
１０１ｄ 修飾剤
１０１ｅ 薬剤
１０２ 分散媒
１０３ 有機微粒子
１３１〜１３３ 槽
１３１ｂ〜１３３ｂ 温度センサ
１３１ａ〜１３３ａ 恒温槽
１３４ 滅菌フィルタ
２０１ 第１流路
２０１ａ 中空糸膜
２０１ｂ 孔
２０２ 第２流路

Claims (7)

1. 中空糸膜と、前記中空糸膜の内側に被透析液を流すための第１流路と、前記中空糸膜の外側に外液を流すための第２流路とを有する中空糸透析カラムと、
   前記第１流路の入口に前記被透析液を送る送液部と、
   前記第１流路の出口から流出する時の前記被透析液の流速を変更可能とする流速可変部と、
   を備え、
   前記流速可変部は、前記第１流路の出口よりも下流側に設けられ、前記第１流路の出口から流出した前記被透析液を所定の流速で下流に送るポンプから構成される、透析装置。
2. 前記第２流路内の前記外液が、前記第１流路内の前記被透析液の流れに対向する向きに流れる、請求項１に記載の透析装置。
3. 中空糸膜と、前記中空糸膜の内側に被透析液を流すための第１流路と、前記中空糸膜の外側に外液を流すための第２流路とを有する中空糸透析カラムと、
   前記第１流路の入口に前記被透析液を送る送液部と、
   前記第１流路の出口から流出する時の前記被透析液の流速を変更可能とする流速可変部と、
   を備え、
   前記第２流路の出口には管を介して廃液容器が接続されており、
   前記廃液容器は、前記中空糸透析カラムよりも低い位置に配置されており、
   前記第２流路の出口にフィルタが設けられている、透析装置。
4. リポソームを含むリポソーム液を製造する製造部と、
   前記製造されたリポソーム液を精製する精製部と、
   前記精製されたリポソーム液を回収する回収部と、
   を備え、
   前記製造部と前記精製部と前記回収部とは、互いに密閉可能に連結されており、
   前記精製部は、
   中空糸膜と、前記中空糸膜の内側にリポソーム液を流すための第１流路と、前記中空糸膜の外側に外液を流すための第２流路とを有する中空糸透析カラムと、
   前記第１流路の出口から流出する時の前記リポソーム液の流速を変更可能とする流速可変部と、
   を備え、
   前記流速可変部は、前記第１流路の出口よりも下流側に設けられ、前記第１流路の出口から流出した前記リポソーム液を所定の流速で下流に送るポンプから構成される、リポソーム製造装置。
5. 前記リポソーム液は、前記第１流路の入口から出口までを１回だけ通過する、請求項４に記載のリポソーム製造装置。
6. リポソームを含むリポソーム液を製造することと、
   前記製造されたリポソーム液を、請求項１に記載の透析装置により透析することと、
   を含む、リポソーム製造方法。
7. リポソームを含むリポソーム液を製造することと、
   前記製造されたリポソーム液を、請求項３に記載の透析装置により透析することと、
   を含む、リポソーム製造方法。

Images