JP6227645B2 - プロセスサンプル中の微生物の多様性指数および生存率指数を構築するための方法 - Google Patents
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Description
本出願は2012年1月24日に出願された米国特許出願13/360,238号の一部継続出願である。
不適用。
コートフリーシート工場は機械へッドボックスの1つ内で持続性の堆積を経験し、これが最終的な製品の欠陥の原因であると考えられた。へッドボックス自体は、化学的堆積物および繊維性増殖物の蓄積に見舞われた。顕微および化学分析により、蓄積内には細菌はほとんど〜全く存在しないことが示された。微生物類が問題の根本原因であると推測された。しかしながら、プロセスサンプルを分析するために使用される従来のモニタリング技術(例えば、標準平板菌数およびATPレベル)は、微生物活性のレベルの上昇を示さなかった。特定的には結果は100CFU/ml以下および100RLU(ATP)以下を示した。
コートフリーシート工場は競合的なオキシダントに基づく生物的防除プログラムを数年間使用した。微生物増殖の制御は十分として認知された;しかしながら、プロセス効率の改善のためにシート破損をさらに低減させる機会があった。プログラムは数段階で実行され、最適化された。プロセスを通して細菌密度は低いままであり、シート破損の低減が実証された。破損の平均数/日は平均、1.2破損/日から0.42破損/日に減少した。
機械上堆積物およびシート欠陥として現れた、性能問題を経験している2つの製紙工場からのフェルトサンプルを、qPCRを使用して分析した。各サンプルを微生物類の存在に対して試験した。各サンプルが大量の細菌を含むことが決定されるとすぐに、その後、サンプルを適応および初期バイオフィルム形成物の存在に対して分析した。これらは、機械効率および製品品質の問題の一因であることが知られている、スフィンゴモナダセアエ(Sphingomonadaceae)fm.、メイオテルムス、ゲオテルムス(Geothermus)、およびシュードキサントモナスを含んだ。どちらの工場も正常レベルの適応バイオフィルム形成物を含んだが、しかしながら、工場1は、工場2の2倍も多くの初期バイオフィルム形成物を有した(図4)。適応バイオフィルム形成物のレベルは、そのレベルが、問題の一因である可能性が低いことを示す範囲内にあったので、正常と決定した。多様性指数は、工場2でのパイオニアバイオフィルム形成物のレベルはほぼバックグラウンドレベルにあったことを示した。工場2での高レベルのパイオニアバイオフィルム形成物は、フェルト内でのバイオフィルム形成(これはフェルト閉塞およびシートからの水の除去の低減に至らしめる)を示唆した。フェルト上のバイオフィルムの存在は他の物質の堆積の増加に至らしめる可能性があり、これはその後、シート上に再堆積し得る。工場1でのパイオニアバイオフィルム形成物の上昇したレベルは、プロセスの他の部分、例えばシャワー水、添加物、収納チェスト、などの追加の分析が、これらの生物が発生している場所を決定するために必要であることを示唆した。
Claims (11)
- 下記工程:
前記産業プロセスシステムの少なくとも1つの部分中に存在する2つ以上の生物の相対濃度を同定する、少なくとも1つの第1の測定を行う工程、
前記産業プロセスシステムの前記少なくとも1つの部分中に存在する2つ以上の生物の相対濃度を同定する少なくとも1つの第2の測定を行う工程であって、前記第2の測定による同定は少なくとも部分的にその後の多様性指数を規定し、前記少なくとも1つの第2の測定は前記第1の測定(複数可)よりも後で行われる、工程、
前記2つ以上の生物の濃度における任意の相対変化に注目する工程、
前記測定された生物の1つの前記相対濃度が、予め決められた閾値量を超えた場合、前記相対変化が前記産業プロセスシステムに対する望まれない効果と関連するかを決定する工程、ならびに
前記望まれない効果を修正するための修正法を実行する工程、
を含む、産業プロセスシステムにおける微生物侵襲に対処する方法であって、
前記測定された生物の1つがパイオニアであるか、および前記測定された生物の1つがアダプターであるかを同定する工程をさらに含み、
前記測定された生物の1つがパイオニアであり、前記第2の測定におけるその相対濃度が前記予め決められた閾値量を超えて増加する場合、前記修正法は、パイオニアを標的とする殺生物剤レジメンを適用する工程を含み、パイオニアが検出されない場合、前記修正法は、前記微生物類の定着を促進する非生物学的ベクターを同定し、排除する工程を含む、方法。 - 前記第1および第2の測定は、DNA分析、PCR分析、qPCR分析、およびそれらの任意の組み合わせからなるリストより選択される少なくとも1つのアイテムにより実施される、請求項1に記載の方法。
- 前記閾値量は、前記システムから取られた1mlの流体あたり104細胞または前記産業プロセスの最終製品もしくは前記産業プロセスからの固体サンプル1グラムあたり104細胞である、請求項1に記載の方法。
- 前記少なくとも1つの生物のアイデンティティに関係なく、それらの相対濃度が前の測定に比べ、閾値を超える量だけ増加した場合、全体の生物学的個体数が同じままであっても、殺生物剤処理が前記システムに付加される、請求項1に記載の方法。
- 前記多様性指数の変化を前記産業システムで起きた別の事象と相関させる工程をさらに含み、前記別の事象は下記からなるリストより選択される、請求項1に記載の方法:少なくとも1つの供給材料の源を変更すること、少なくとも1つの供給材料の種類を変更すること、前記システムの少なくとも一部の動作速度を変更すること、およびそれらの任意の組み合わせ、ならびに前記事象を反転させること。
- 前記サンプル中の細胞の全体の濃度は前記第1の測定と前記第2の測定の間で不変のままである、請求項1に記載の方法。
- 前記測定は、堆積物が形成されたシステムの一部で行われ、前記堆積物はいずれの重要な生物学的要素も含まない、請求項1に記載の方法。
- 前記測定は前記システムを通して複数の位置にわたって行われ、前記指数は全システム集団を比較する、請求項1に記載の方法。
- 少なくとも1つの第3の多様性指数測定が、前記第2の測定後および前記修正後に行われ、前記修正の効力が前記第3の多様性指数測定において測定された少なくとも2つの生物の相対濃度の変化により評価される、請求項1に記載の方法。
- 前記サンプル中の細胞の全体の濃度は、前記第1の測定と前記第2の測定の間で不変のままであり、第1および第2の生物のアイデンティティはプロセス機器または最終製品に対しいずれの望まれない効果も引き起こさないことが知られており、有効な殺生物剤は、閾値変化が検出された時に、前記第1および第2の生物を死滅させるために前記システムに添加される、請求項1に記載の方法。
- 前記生物の1つは、殺生物剤に抵抗性がある胞子を形成することができ、その生物の相対量が閾値を超えて増殖した場合、前記方法は、胞子形成を防止するために、栄養細胞を有するプロセスの領域を標的とする、請求項1に記載の方法。
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