JP6205055B2 - マイクロ流体チップ - Google Patents
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Description
様々な粒子または細胞物質の分離、例えば、精子を非生存または非運動精子から生存運動精子に分離する、または、性別によって分離する場合、その処理は、時間がかかり、厳しい体積の制約が課される作業であることが多い。そのため、現在の分離技術は、例えば、望ましい成果または細胞物質の処理体積をタイムリーに生み出すことができない。
図1は、マイクロ流体チップ100の例示的な実施形態である。マイクロ流体チップ100は、適切なサーモプラスチック(例えば、低自動蛍光発光ポリマ等)から、当業者に周知のように、エンボス処理または射出成形処理を通して製造され、適したサイズである。
一実施形態において、マイクロ流体チップ100は、滅菌状態で提供され、1つまたは複数の溶液(すなわち、シースまたはバッファ流体163)とともに用意されてもよく、または、複数の公知の方法に従って、マイクロ流体チップ100をドレーンすること、または、シースまたはバッファ流体153もしくは他の複数の溶液をマイクロ流体チップ100を通して流すことのいずれかによって、任意の複数の流体もしくは複数の材料から浄化されてもよい。一度マイクロ流体チップ100が用意され、ジェットチャンバ130、131がシースまたはバッファ流体163で充填されると、製造時または(上述されたように)その後のいずれかにおいて、換気口121、122は、封止される。上述されたように、他の実施形態において、換気口121、122は、動作中に追加のシースまたはバッファ流体163がチャンバ130、131に加えられるように、開いたままであってもよい。
マイクロ流体チップ100は、チップホルダ200に搭載されるチップカセット212に装填される。チップホルダ200は、ホルダ200の微細な位置決定を可能とするべく、並進ステージ(図示せず)に搭載される。マイクロ流体チップホルダ200は、光線148が上述の態様で開口150において複数の成分160を妨害し得る位置に、マイクロ流体チップ100を保持するように構成される。マイクロ流体チップ100が閉位置にある場合、ガスケット層105(図1参照)は、本体211とマイクロ流体チップ100との間で実質的に漏れのない封止を形成する。
Claims (43)
- 複数のチャネルが配置される複数の層を備えるマイクロ流体チップであって、
前記複数のチャネルは、
分離されるべき複数の成分のサンプル流体混合物が投入されるサンプル投入チャネルと、
複数のシース流体が投入される第1の複数のシース流体チャネルであって、第1の交点において前記サンプル投入チャネルと交差することで、層流を前記サンプル投入チャネルに維持しつつ、前記複数のシース流体が少なくとも2つの側面において前記サンプル流体混合物を圧縮し、これにより、前記サンプル流体混合物が、前記複数のシース流体によって画定される相対的により小さな細い流れとなる、第1の複数のシース流体チャネルと、
前記第1の複数のシース流体チャネルと実質的に同じ寸法であり、複数のシース流体が投入される第2の複数のシース流体チャネルであって、前記サンプル投入チャネルより実質的に90度上及び下に向かう第2の方向において、前記第1の交点の下流側にある第2の交点で前記サンプル投入チャネルと交差することで、前記サンプル投入チャネルに層流をさらに維持しつつ、前記第2の複数のシース流体チャネルからの複数のシース流体が前記サンプル流体混合物を圧縮し、前記サンプル流体混合物の前記複数の成分が圧縮され、予め定められた方向に方向付けられる、第2の複数のシース流体チャネルと、
前記サンプル投入チャネルから延びる複数の流出チャネルであって、前記複数の成分及び前記複数のシース流体を前記マイクロ流体チップから除去する複数の流出チャネルと、
を含み、
前記複数の層は、前記第1の交点および前記第2の交点よりも下流で前記サンプル投入チャネルと交差する貫通孔を有し、
前記貫通孔の両端に配置されて前記サンプル投入チャネルを封止する第1のカバーおよび第2のカバーを更に備えるマイクロ流体チップ。 - 前記第2の交点の下流側に配置されるインタロゲーションチャンバにおいて、前記サンプル投入チャネルの前記サンプル流体混合物の前記複数の成分を、インタロゲート及び特定するインタロゲーション装置をさらに備える、請求項1に記載のマイクロ流体チップ。
- 前記サンプル投入チャネルにおける前記サンプル流体混合物の流れの軌道を変位させ、前記変位されたサンプル流体混合物の流れにおける複数の選択成分を前記インタロゲーションチャンバから延びる前記複数の流出チャネルの1つに押し出すことによって、前記インタロゲーションチャンバの下流側にある前記サンプル流体混合物の前記複数の成分から前記複数の選択成分を分離する分離メカニズムをさらに備える、請求項2に記載のマイクロ流体チップ。
- 少なくとも1つのジェットチャンバであって、少なくとも1つの換気口によって前記ジェットチャンバに導入された複数のシース流体を含む少なくとも1つのジェットチャンバと、
前記少なくとも1つのジェットチャンバに接続される少なくとも1つのジェットチャネルであって、前記インタロゲーションチャンバにおいて前記サンプル投入チャネルに入る、少なくとも1つのジェットチャネルと、
をさらに備える、請求項3に記載のマイクロ流体チップ。 - 前記分離メカニズムは、前記サンプル投入チャネルの少なくとも1つの側面に配置される少なくとも1つの圧電アクチュエータアセンブリを含む、請求項4に記載のマイクロ流体チップ。
- 前記圧電アクチュエータアセンブリは、外部積層圧電アクチュエータアセンブリである、請求項5に記載のマイクロ流体チップ。
- 前記ジェットチャンバの各々をカバーする隔膜をさらに備え、
前記外部積層圧電アクチュエータアセンブリは、前記ジェットチャンバにおける前記複数のシース流体を、前記サンプル投入チャネルへと駆動し、前記サンプル投入チャネルにおける前記サンプル流体混合物の前記流れの前記軌道を、前記複数の流出チャネルの1つに変位させるべく、前記隔膜に整合するとともにこれを変位させる、請求項6に記載のマイクロ流体チップ。 - 前記外部積層圧電アクチュエータアセンブリは、マイクロ流体チップホルダに配置される、請求項7に記載のマイクロ流体チップ。
- 前記圧電アクチュエータアセンブリに接続される電子回路をさらに備え、前記電子回路は、前記隔膜と接触する前記圧電アクチュエータアセンブリからの抵抗力によって生成される電子信号を増幅させる、請求項7に記載のマイクロ流体チップ。
- 前記圧電アクチュエータアセンブリからの電気信号は、前記外部積層圧電アクチュエータアセンブリによって生成される歪みの量を示す、請求項9に記載のマイクロ流体チップ。
- 接触のインジケータは、前記圧電アクチュエータアセンブリと前記隔膜との間に接触が生じた場合に、自動的にオンにされる、請求項9に記載のマイクロ流体チップ。
- 前記電子信号は、設定閾値を超えた場合に、前記インジケータをアクティブ化する、請求項11に記載のマイクロ流体チップ。
- 接触の前記インジケータは、光、音、触感またはこれらの任意の組み合わせを含む、請求項12に記載のマイクロ流体チップ。
- 前記圧電アクチュエータアセンブリは、
前記ジェットチャンバをカバーする柔軟な隔膜と、
付着メカニズムによって前記隔膜の上面に接着される圧電材料と、
を含む、請求項5に記載のマイクロ流体チップ。 - 前記圧電アクチュエータアセンブリの複数の電極に電圧が加えられた場合、前記柔軟な隔膜は、前記複数の選択成分を前記複数の流出チャネルの1つへと逸らせるべく、前記ジェットチャンバへと撓み、前記複数のシース流体を前記ジェットチャンバから前記サンプル投入チャネルへと押し出す、請求項14に記載のマイクロ流体チップ。
- 前記ジェットチャネルは、前記サンプル投入チャネルに接続する場合にテーパ状となる、請求項4に記載のマイクロ流体チップ。
- 前記複数の流出チャネルの複数の端部に配置される複数の流出部をさらに備える、請求項1から16のいずれか1項に記載のマイクロ流体チップ。
- 前記複数の流出チャネルは、前記サンプル投入チャネルより寸法が増大する、請求項17に記載のマイクロ流体チップ。
- 前記複数の流出部を分離するべく、前記マイクロ流体チップの下端に配置される複数の切欠きをさらに備える、請求項18に記載のマイクロ流体チップ。
- 前記サンプル投入チャネル及び前記第1及び第2の複数のシース流体チャネルは、前記マイクロ流体チップの1つまたは複数の平面に配置される、請求項2に記載のマイクロ流体チップ。
- 前記サンプル投入チャネル及び前記第1及び第2の複数のシース流体チャネルは、前記マイクロ流体チップの1つまたは複数の構造層に、または複数の構造層の間に配置される、請求項2に記載のマイクロ流体チップ。
- 前記第1及び第2の複数のシース流体チャネルの少なくとも1つは、前記サンプル投入チャネルが配置される平面と異なる平面に配置される、請求項20に記載のマイクロ流体チップ。
- 前記第1及び第2の複数のシース流体チャネルの少なくとも1つは、前記サンプル投入チャネルが配置される構造層と異なる構造層に配置される、請求項21に記載のマイクロ流体チップ。
- 前記サンプル投入チャネルは、前記第1の複数のシース流体チャネルとの前記第1の交点、および、前記第2の複数のシース流体チャネルとの前記第2の交点へのエントリポイントにおいてテーパ状となる、請求項1から23のいずれか1項に記載のマイクロ流体チップ。
- 前記サンプル投入チャネルは、前記インタロゲーションチャンバに向かってテーパ状となる、請求項2に記載のマイクロ流体チップ。
- 前記第1の交点での前記サンプル投入チャネルへの複数のエントリポイントにおける前記第1の複数のシース流体チャネル、および、前記第2の交点での前記サンプル投入チャネルへの複数のエントリポイントにおける前記第2の複数のシース流体チャネルの少なくとも一方はテーパ状となる、請求項1から25のいずれか1項に記載のマイクロ流体チップ。
- 前記インタロゲーションチャンバは、前記マイクロ流体チップの前記複数の構造層を通って切断される前記貫通孔を含み、
上窓は、前記複数の構造層の少なくとも1つの層の貫通孔において前記第1のカバーを受容し、
下窓は、前記複数の構造層の少なくとも1つの層の貫通孔において前記第2のカバーを受容する、請求項21に記載のマイクロ流体チップ。 - 前記インタロゲーションチャンバは、前記マイクロ流体チップの前記複数の平面を通って切断される前記貫通孔を含み、
上窓は、前記マイクロ流体チップの前記複数の平面のうち少なくとも1つの平面の貫通孔において前記第1のカバーを受容し、
下窓は、前記マイクロ流体チップの前記複数の平面のうち少なくとも1つの平面の貫通孔において前記第2のカバーを受容する、請求項20に記載のマイクロ流体チップ。 - 前記インタロゲーション装置は、前記サンプル流体混合物の前記複数の成分を照射及び励起するべく、第1のカバーを通してビームを発する光源を含み、
前記ビームによって誘導され発せられた光は、第2のカバーを通過し、対物レンズによって受容される、請求項2に記載のマイクロ流体チップ。 - 前記インタロゲーション装置は、前記サンプル流体混合物の前記複数の成分を照射及び励起するべく、前記マイクロ流体チップの複数の構造層を通してビームを発する光源を含み、
前記ビームによって誘導され発せられた光は、対物レンズによって受容される、請求項27に記載のマイクロ流体チップ。 - 前記インタロゲーション装置は、前記サンプル流体混合物の前記複数の成分を照射及び励起するべく、前記マイクロ流体チップの前記複数の平面を通してビームを発する光源を含み、
前記ビームによって誘導され発せられた光は、対物レンズに受容される、請求項28に記載のマイクロ流体チップ。 - 前記サンプル投入チャネルにおける前記サンプル流体混合物の流れの軌道を変位させ、前記変位されたサンプル流体混合物の流れにおける複数の選択成分を前記インタロゲーションチャンバから延びる前記複数の流出チャネルの1つに押し出すことによって、前記インタロゲーションチャンバの下流側にある前記サンプル流体混合物の前記複数の成分から前記複数の選択成分を分離する分離メカニズムをさらに備え、
前記分離メカニズムは、前記サンプル投入チャネルの少なくとも1つの側面に配置される少なくとも1つの圧電アクチュエータアセンブリを含み、
前記対物レンズによって受容された前記発せられた光は、前記圧電アクチュエータアセンブリのトリガとなる電子信号に変換される、請求項30に記載のマイクロ流体チップ。 - 前記サンプル投入チャネルにおける前記サンプル流体混合物の流れの軌道を変位させ、前記変位されたサンプル流体混合物の流れにおける複数の選択成分を前記インタロゲーションチャンバから延びる前記複数の流出チャネルの1つに押し出すことによって、前記インタロゲーションチャンバの下流側にある前記サンプル流体混合物の前記複数の成分から前記複数の選択成分を分離する分離メカニズムをさらに備え、
前記分離メカニズムは、前記サンプル投入チャネルの少なくとも1つの側面に配置される少なくとも1つの圧電アクチュエータアセンブリを含み、
前記対物レンズによって受容された前記発せられた光は、前記圧電アクチュエータアセンブリのトリガとなる電子信号に変換される、請求項31に記載のマイクロ流体チップ。 - 前記サンプル流体混合物または前記複数のシース流体の1つは、圧送装置によって、前記マイクロ流体チップに圧送される、請求項1から33のいずれか1項に記載のマイクロ流体チップ。
- 外部管は、複数の流体を、前記マイクロ流体チップに連通させる、請求項1から34のいずれか1項に記載のマイクロ流体チップ。
- 前記複数の成分は、複数の細胞である、請求項1から35のいずれか1項に記載のマイクロ流体チップ。
- 分離されるべき前記複数の細胞は、非生存または非運動精子からの生存運動精子、性別及び他の性別分類バリエーションによって分離された精子、集団細胞から分離された複数の幹細胞、複数の精子細胞を含む複数の未標識細胞から分離された1つまたは複数の標識細胞、望ましいまたは望ましくない特性によって明確にされる、複数の精子細胞を含む複数の細胞、特定の特徴に係る核DNAにおいて分離された複数の遺伝子、複数の表面マーカに基づいて分離された複数の細胞、膜完全性または生存性に基づいて分離された複数の細胞、可能なまたは予測される再生ステータスに基づいて分離された複数の細胞、凍結生存能力に基づいて分離された複数の細胞、複数の汚染物質または破片から分離された複数の細胞、複数の損傷細胞から分離された複数の健康な細胞、プラズマ混合物の複数の白血球及び血小板から分離された複数の赤血球細胞、または、複数の任意の他の細胞成分から複数の対応する断片に分離された複数の任意の細胞の少なくとも1つを含む、請求項36に記載のマイクロ流体チップ。
- 前記分離されるべき複数の成分は、前記複数の流出チャネルの1つに移動させられ、複数の未選択成分は、前記複数の流出チャネルのうち他のものを通って流出する、請求項1から37のいずれか1項に記載のマイクロ流体チップ。
- 前記サンプル流体混合物または前記複数のシース流体の前記1つの前記マイクロ流体チップへの前記圧送を制御するコンピュータをさらに備える、請求項34に記載のマイクロ流体チップ。
- 前記マイクロ流体チップの前記貫通孔上に配置されるCCDカメラによって取得された視野内に前記複数の成分を表示するコンピュータをさらに備える、請求項27に記載のマイクロ流体チップ。
- 前記マイクロ流体チップの前記貫通孔上に配置されるCCDカメラによって取得された視野内に前記複数の成分を表示するコンピュータをさらに備える、請求項28に記載のマイクロ流体チップ。
- マイクロ流体チップホルダに搭載されるマイクロ流体チップカセットに装填されたマイクロ流体チップであって、複数の成分を含むサンプル流体を前記マイクロ流体チップに導入するためのサンプル投入部、シース流体を前記マイクロ流体チップに導入するための複数のシース投入部、及び、第1の交点で前記サンプル投入部に接続され、第2の交点で前記複数のシース投入部に接続され、前記サンプル流体および前記シース流体を下流に流すチャネルを有するマイクロ流体チップと、
前記サンプル流体を貯留部から前記マイクロ流体チップの前記サンプル投入部に圧送し、前記シース流体を前記マイクロ流体チップの前記複数のシース投入部に圧送し、前記サンプル流体および前記シース流体を、前記サンプル投入部および前記複数のシース投入部から前記チャネルを通じて下流に圧送する圧送メカニズムと、
を備え、
前記マイクロ流体チップは、前記第1の交点および前記第2の交点よりも下流で前記チャネルと交差する貫通孔を有し、前記貫通孔の両端に配置されて前記チャネルを封止する第1のカバーおよび第2のカバーを更に有する、マイクロ流体チップシステム。 - 複数の成分を含むサンプル流体混合物をマイクロ流体チップのサンプル投入チャネルに投入する段階と、
前記マイクロ流体チップの複数の第1のシース流体チャネルに複数のシース流体を投入する段階であって、前記複数の第1のシース流体チャネルからの複数のシース流体は、前記複数の第1のシース流体チャネル及び前記サンプル投入チャネルの第1の交点において、前記サンプル投入チャネルの前記サンプル流体混合物に合流し、前記複数の第1のシース流体チャネルからの前記複数のシース流体は、前記サンプル流体混合物の前記複数の成分を前記サンプル投入チャネルの中央の周りに集中させるべく、前記サンプル投入チャネルの一方向に前記サンプル流体混合物を圧縮する、段階と、
前記マイクロ流体チップの複数の第2のシース流体チャネルに複数のシース流体を投入する段階であって、前記複数の第2のシース流体チャネルからの前記複数のシース流体は、前記第1の交点の下流側にある、複数の第2のシース流体チャネル及び前記サンプル投入チャネルの第2の交点において、前記サンプル投入チャネルの前記サンプル流体混合物に合流し、前記複数の第2のシース流体チャネルからの前記複数のシース流体は、前記複数の成分が前記サンプル投入チャネルを通って流れる際、幅及び深さの両方だけ、前記複数の成分が前記サンプル投入チャネルの中央に集中及び整合するように、前記サンプル流体混合物を、前記第2の交点において第2の方向にさらに圧縮し、前記複数のシース流体は、前記複数の成分が前記サンプル投入チャネルを通って流れる際、前記複数の成分を選択方向に圧縮及び方向付けるべく、前記複数の成分に作用する、段階と、
を備え、
前記マイクロ流体チップは、前記第1の交点および前記第2の交点よりも下流で前記サンプル投入チャネルと交差する貫通孔を有し、前記貫通孔の両端には、前記サンプル投入チャネルを封止する第1のカバーおよび第2のカバーが配置され、
前記複数の成分をインタロゲートすべく、前記第1のカバー、前記貫通孔および前記第2のカバーを介して、前記サンプル投入チャネルを通って流れる前記複数の成分にレーザビームを照射する段階を更に備える、
流体混合物の複数の成分を方向付けする方法。
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