JP6198730B2 - 自己免疫疾患を治療するための抗cd83アゴニスト抗体の使用 - Google Patents
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Description
本出願は、2011年7月1日に出願された米国仮出願第61/504,127、及び2011年12月27日に出願された日本特許出願第2011-285585、2011年12月27日に出願された2011-285595の優先権を主張するものであり、その内容は出典明記によりその全体を本明細書中に援用する。
本発明は、抗CD83アゴニスト抗体、及び炎症性腸疾患等の自己免疫疾患を治療するために抗CD83アゴニスト抗体を使用する方法に関する。
I.一般的技術
本願明細書中に記載又は引用される技術及び手順は、一般に十分に理解されるものであり、当業者によって従来の方法論を用いて一般的に利用されるものである。その例として、以下の文献に記載される方法論が広く利用されている。Sambrook等, Molecular Cloning: A Laboratory Manual 3d edition (2001) Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y.; Current Protocols in Molecular Biology (F.M. Ausubel,等 eds., (2003)); the series Methods in Enzymology (Academic Press, Inc.): PCR 2: A Practical Approach (M.J. MacPherson, B.D. Hames and G.R. Taylor eds. (1995)), Harlow and Lane, eds. (1988) Antibodies, A Laboratory Manual, and Animal Cell Culture (R.I. Freshney, ed. (1987)); Oligonucleotide Synthesis (M.J. Gait, ed., 1984); Methods in Molecular Biology, Humana Press; Cell Biology: A Laboratory Notebook (J.E. Cellis, ed., 1998) Academic Press; Animal Cell Culture (R.I. Freshney), ed., 1987); Introduction to Cell and Tissue Culture (J.P. Mather and P.E. Roberts, 1998) Plenum Press; Cell and Tissue Culture: Laboratory Procedures (A. Doyle, J.B. Griffiths, and D.G. Newell, eds., 1993-8) J. Wiley and Sons; Handbook of Experimental Immunology (D.M. Weir and C.C. Blackwell, eds.); Gene Transfer Vectors for Mammalian Cells (J.M. Miller and M.P. Calos, eds., 1987); PCR: The Polymerase Chain Reaction, (Mullis等, eds., 1994); Current Protocols in Immunology (J.E. Coligan等, eds., 1991); Short Protocols in Molecular Biology (Wiley and Sons, 1999); Immunobiology (C.A. Janeway and P. Travers, 1997); Antibodies (P. Finch, 1997); Antibodies: A Practical Approach (D. Catty., ed., IRL Press, 1988-1989); Monoclonal Antibodies: A Practical Approach (P. Shepherd and C. Dean, eds., Oxford University Press, 2000); Using Antibodies: A Laboratory Manual (E. Harlow and D. Lane (Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1999); The Antibodies (M. Zanetti and J. D. Capra, eds., Harwood Academic Publishers, 1995); and Cancer: Principles and Practice of Oncology (V.T. DeVita等, eds., J.B. Lippincott Company, 1993)。
「自己免疫性」なる用語は、抗体又はリンパ球等の免疫系要素が、分子、細胞、又はそれらを生産する臓器の組織を攻撃又は害するプロセスを意味する。「自己免疫性疾患」は、組織損傷等の損傷、又は病変形成が、少なくとも部分的には、自己免疫性プロセスの結果である疾患を意味する。例として、「自己免疫疾患」は、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、全身性エリテマトーデス(SLE)、ループス腎炎、潰瘍性大腸炎、ウェゲナー疾患(Wegener's disease)、炎症性腸疾患、特発性血小板減少性紫斑病(ITP)、血栓性血小板減少性紫斑病(TTP)、自己免疫性血小板減少症、多発性硬化症、乾癬、IgA腎症、IgM多発ニューロパチー、重症筋無力症、血管炎、糖尿病、レイノー症候群、シェーグレン症候群及び糸球体腎炎を含む。幾つかの実施態様では、自己免疫性疾患は、骨髄系細胞活性化(樹状細胞及びマクロファージ)を伴い、例えば多発性硬化症及び炎症性腸疾患等である。
本発明は、個体における自己免疫疾患(炎症性腸疾患等)を治療又は防止する方法を提供し、個体に有効量のここに記載の抗CD83アゴニスト抗体を投与することを含んでなる。幾つかの実施態様では、有効量の抗CD83アゴニスト抗体が、個体における潰瘍性大腸炎を治療又は防止するために個体に投与される。幾つかの実施態様では、有効量の抗CD83アゴニスト抗体が、個体におけるクローン病を治療又は防止するために個体に投与される。幾つかの実施態様では、有効量の抗CD83アゴニスト抗体が、個体における不確定大腸炎を治療又は防止するために個体に投与される。
本発明の方法は抗CD83アゴニスト抗体を使用し、この用語は、細胞表面に発現されるCD83に結合し、細胞表面上に発現されるCD83(例えば、成熟樹状細胞の細胞表面上に発現されるCD83)に結合した後、CD83によって媒介されるシグナル伝達を活性化する抗CD83抗体を意味する。ここに記載の抗CD83アゴニスト抗体は、一又は複数の以下の特徴を有しうる:(a)成熟樹状細胞におけるMAPKシグナル伝達の活性化の阻害(例えば成熟樹状細胞におけるp38及びCREBタンパク質のリン酸化の減少を導く);(b)成熟樹状細胞におけるmTORシグナル伝達の活性化を阻害する(例えば、成熟樹状細胞におけるmTORタンパク質のリン酸化の減少を導く);(c)成熟樹状細胞からの一又は複数の炎症促進性サイトカイン(MCP-1、IL-12p40等)の放出を阻害する;(d)成熟樹状細胞からの一又は複数の抗炎症性サイトカイン(IL-1ra)の放出を誘導する;(e)成熟樹状細胞活性化マーカー(CD83、HLA-DR等)の細胞表面発現の減少を誘導する;(f)成熟樹状細胞において一又は複数の創傷治癒遺伝子(vcan、spock2、及びfbn2等)の発現をアップレギュレートする;及び(g)自己免疫疾患(IBD等)を治療及び/又は防止する。抗CD83アゴニスト抗体の活性はインビトロ及び/又はインビボで測定されうる。
本発明はまた組換え技術を使用する抗CD83アゴニスト抗体の生産方法を提供する。例えば、ポリペプチドは、かかる抗体又はその断片をコードする単離された核酸、かかる核酸を含んでなるベクター及び宿主細胞を使用して調製されることができる。セクションBに記載される方法は一般に抗体の生産に対して言及するが、これらの方法は、ここに記載される任意のポリペプチドを生産するために使用されてもよい。
抗体又はその断片は直接的にだけではなく、融合タンパク質として組換え生産されてもよく、抗体は、異種ポリペプチド、好ましくはシグナル配列又は成熟タンパク質あるいはポリペプチドのN末端に特異的切断部位を有する他のポリペプチドと融合される。好ましく選択された異種シグナル配列は宿主細胞によって認識され加工される(すなわち、シグナルペプチダーゼによって切断される)ものである。天然哺乳類シグナル配列を認識せずプロセシングしない原核生物宿主細胞に対して、真核細胞(すなわち哺乳類)シグナル配列は、例えばアルカリホスファターゼ、ペニシリナーゼ、lppあるいは熱安定なエンテロトキシンII遺伝子からのリーダー配列から成る郡から選択される原核生物シグナル配列により置換される。酵母での分泌に対して、天然シグナル配列は、例えば酵母インベルターゼリーダー、α因子リーダー(酵母菌属(Saccharomyces)及びクルイベロマイシス(Kluyveromyces)α因子リーダーを含む)、又は酸ホスフォターゼリーダー、白体(C.albicans)グルコアミラーゼリーダー、又は国際公開第90/13646号に記載されているシグナルにより置換されうる。哺乳動物細胞での発現においては、哺乳動物のシグナル配列並びにウイルス分泌リーダー、例えば単純ヘルペスウィルスgDシグナルが利用できる。
発現及びクローニングベクターは共に、一又は複数の選択された宿主細胞において、ベクターの複製を可能にする核酸配列を含む。一般に、クローニングベクターにおいて、この配列は宿主染色体DNAとは独立にベクターが複製することを可能にするものであり、複製開始点又は自律的複製配列を含む。そのような配列は多くの細菌、酵母及びウイルスに対してよく知られている。プラスミドpBR322に由来する複製開始点は大部分のグラム陰性細菌に好適であり、2μプラスミド開始点は酵母に適しており、様々なウイルス開始点(SV40、ポリオーマ、アデノウイルス、水疱性口内炎ウイルス(「VSV」)又はウシパピローマウイルス(「BPV」))は哺乳動物細胞におけるクローニングベクターに有用である。一般には、哺乳動物の発現ベクターには複製開始点成分は不要である(SV40開始点は典型的にはただ初期プロモーターを有しているために用いられる)。
発現及びクローニングベクターは、典型的には、選択マーカーとしても知られる選択遺伝子も含みうる。典型的な選択遺伝子は、(a)アンピシリン、ネオマイシン、メトトレキセート或いはテトラサイクリンのような抗生物質或いは他の毒素に耐性を与え、(b)栄養要求性欠陥を補い、又は(c)複合培地から得られない重要な栄養素、例えば桿菌のD-アラニンラセマーゼをコードしている遺伝子を供給するタンパク質をコードする。
発現及びクローニングベクターは通常は宿主生物体によって認識され、抗CD83アゴニスト抗体又はその断片をコードする核酸に作用可能に結合しているプロモーターを含む。原核生物宿主での使用に好適なプロモーターは、phoAプロモーター、ラクタマーゼ及びラクトースプロモーター系、アルカリホスファターゼプロモーター、トリプトファンプロモーター系、及びハイブリッドプロモーター、例えばtacプロモーターを含むが、他の既知の細菌プロモーターも好適である。細菌系で使用するプロモータもまた抗体及び抗体断片をコードするDNAと作用可能に結合したシャイン・ダルガーノ(S.D.)配列を有する。
より高等の真核生物による、抗体又はその断片をコードしているDNAの転写は、ベクター中にエンハンサー配列を挿入することによってしばしば増強される。哺乳動物遺伝子由来の多くのエンハンサー配列が現在知られている(グロビン、エラスターゼ、アルブミン、α-フェトプロテイン及びインスリン)。しかしながら、典型的には、当業者は、真核細胞ウィルス由来のエンハンサーを用いるであろう。例としては、複製起点の後期側のSV40エンハンサー(100−270塩基対)、サイトメガロウィルス初期プロモーターエンハンサー、複製起点の後期側のポリオーマエンハンサー及びアデノウィルスエンハンサーが含まれる。真核生物プロモーターの活性化のための増強要素については、Yaniv, Nature, 297:17-18 (1982)もまた参照のこと。エンハンサーは、抗体又は抗体断片コード配列の5'又は3'位でベクター中にスプライシングされうるが、好ましくはプロモーターの5'位に位置している。
真核生物宿主細胞(酵母、真菌、昆虫、植物、動物、ヒト、又は他の多細胞生物由来の有核細胞)に用いられる発現ベクターは、また転写の終結及びmRNAの安定化に必要な配列を含む。このような配列は、真核生物又はウィルスのDNA又はcDNAの5'、時には3'の非翻訳領域から一般に取得できる。これらの領域は、抗体又はその断片をコードしているmRNAの非翻訳部分にポリアデニル化断片として転写されるヌクレオチドセグメントを含む。一つの有用な転写終結成分はウシ成長ホルモンポリアデニル化領域である。国際公開第94/11026号とそこに開示された発現ベクターを参照のこと。
ここに記載のベクター中の抗CD83アゴニスト抗体又はその断片をコードするDNAをクローニングあるいは発現させるために適切な宿主細胞は、上述の原核生物、酵母、又は高等真核生物細胞を含む。この目的にとって適切な原核生物は、限定するものではないが、真正細菌、例えばグラム陰性又はグラム陽性生物体、例えばエシェリチアのような腸内菌科、例えば大腸菌、エンテロバクター、エルウィニア(Erwinia)、クレブシエラ、プロテウス、サルモネラ、例えばネズミチフス菌、セラチア属、例えばセラチア・マルセスキャンス及び赤痢菌属、並びに桿菌、例えば枯草菌及びバシリ・リチェフォルミス(licheniformis)(例えば、1989年4月12日に公開された DD266710に開示されたバシリ・リチェニフォルミス41P)、シュードモナス属、例えば緑膿菌及びストレプトマイセス属を含む。一つの好適な大腸菌クローニング宿主は大腸菌294(ATCC31446)であるが、他の大腸菌B、大腸菌X1776(ATCC31537)及び大腸菌W3110(ATCC27325)のような株も好適である。これらの例は限定するものではなく例示的なものである。
ここでの抗CD83アゴニスト抗体又は抗体断片を産生するために用いられる宿主細胞は種々の培地において培養することができる。市販培地の例としては、ハム(Ham)のF10(シグマ)、最小必須培地((MEM),(シグマ)、RPMI-1640(シグマ)及びダルベッコの改良イーグル培地((DMEM),シグマ)が宿主細胞の培養に好適である。また、Ham等, Meth. Enz. 58:44 (1979), Barnes等, Anal. Biochem. 102:255 (1980), 米国特許第4767704号;同4657866号;同4927762号;同4560655号;又は同5122469号;WIPO公開番号WO90/03430;同第WO87/00195;又は米国再発行特許第30985号に記載された何れの培地も宿主細胞に対する培地として使用できる。これらの培地には何れもホルモン及び/又は他の成長因子(例えばインシュリン、トランスフェリン、又は表皮成長因子)、塩類(例えば、塩化ナトリウム、カルシウム、マグネシウム及びリン酸塩)、バッファー(例えばHEPES)、ヌクレオチド(例えばアデノシン及びチミジン)、抗生物質(例えば、GENTAMYCINTM薬)、微量元素(最終濃度がマイクロモル範囲で通常存在する無機化合物として定義される)及びグルコース又は等価なエネルギー源を必要に応じて補充することができる。任意の他の必要な補充物質もまた当業者に知られている適当な濃度で含むことができる。培養条件、例えば温度、pH等々は、発現のために選ばれた宿主細胞について過去に用いられているものであり、当業者には明らかであろう。
組換え技術を用いる場合、抗CD83アゴニスト抗体又は抗体断片は細胞内、細胞膜周辺腔に生成され、又は培地内に直接分泌される。抗体が細胞内に生成された場合、第1の工程として、宿主細胞か溶解された断片の何れにしても、粒子状の細片が、例えば遠心分離又は限外濾過によって除去される。Carter等, Bio/Technology 10: 163-167 (1992)は、大腸菌の細胞膜周辺腔に分泌された抗体の単離方法を記載している。簡単に述べると、細胞ペーストを、酢酸ナトリウム(pH3.5)、EDTA、及びフェニルメチルスルホニルフルオリド(PMSF)の存在下で約30分間解凍する。細胞細片は遠心分離で除去できる。抗体が培地に分泌された場合は、そのような発現系からの上清を、一般的には先ず市販のタンパク質濃縮フィルター、例えばAmicon又はPelliconの限外濾過装置を用いて濃縮する。PMSFなどのプロテアーゼ阻害剤を上記の任意の工程に含めて、タンパク質分解を阻害してもよく、また抗生物質を含めて外来性の汚染物の成長を防止してもよい。
本発明において有用な抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、抗体断片(例えば、Fab、Fab’-SH、Fv、scFv、及びF(ab’)2)、キメラ抗体、二重特異性抗体、多価抗体、ヘテロコンジュゲート抗体、抗体部分を含んでなる融合タンパク質、ヒト化抗体、及び必要な特異性を有する抗原認識部位を有する免疫グロブリン分子の何れかの他の修飾構造を含み、抗体のグリコシル化変異体、抗体のアミノ酸配列変異体、及び共有結合的に修飾された抗体を含む。抗体は、マウス、ラット、ヒト、又は何れか他の起源であってもよい(キメラ又はヒト化抗体を含む)。
ポリクローナル抗体は、好ましくは、関連する抗原とアジュバントを複数回皮下(sc)又は腹腔内(ip)注射することにより動物に産生される。免疫化される種において免疫原性であるタンパク質、例えばキーホールリンペットヘモシアニン(KLH)、血清アルブミン、ウシサイログロブリン、又は大豆トリプシンインヒビターに関連抗原(例えば精製された又は組換えCD83)を、二官能性又は誘導体形成剤、例えばマレイミドベンゾイルスルホスクシンイミドエステル(システイン残基による抱合)、N-ヒドロキシスクシンイミド(リジン残基による)、グルタルアルデヒド、無水コハク酸、SOCl2、又はRとR1が異なったアルキル基であるR1N=C=NRにより抱合させることが有用である。用いられるアジュバントの例には、完全フロイントアジュバント及びMPL-TDMアジュバント(モノホスホリルLipid A、合成トレハロースジコリノミコレート)が含まれる。免疫の方法は、過度の実験をすることなく当業者によって選択することができる。
モノクローナル抗体は、実質的に均質な抗体集団から得られるが、つまり、該集団を含む個々の抗体は、少量存在する起こりうる自然発生的突然変異及び/又は翻訳後修飾(例えば、異性化、アミド化)を除いて同一である。従って、「モノクローナル」という形容詞は、別個の抗体の混合物ではないとの抗体の特徴を示すものである。
本発明の抗体(抗CD83アゴニスト抗体等)又は抗体断片には、さらにヒト化又はヒト抗体が含まれる。非ヒト(例えばマウス)抗体のヒト化形とは、キメライムノグロブリン、イムノグロブリン鎖あるいはその断片(例えばFab、Fab'-SH、Fv、scFv、F(ab')2又は抗体の他の抗原結合サブ配列)であって、非ヒトイムノグロブリン由来の最小配列を含むものである。ヒト化抗体はレシピエントの相補性決定領域(CDR)の残基が、所望の特異性、親和性及び能力を有するマウス、ラット、ハムスター、又はウサギのような非ヒト種(ドナー抗体)のCDRの残基によって置換されたヒトイムノグロブリン(レシピエント抗体)を含む。ある場合には、ヒトイムノグロブリンのFvフレームワーク残基は、対応する非ヒト残基によって置換されている。また、ヒト化抗体は、レシピエント抗体にも、移入されたCDRもしくはフレームワーク配列にも見出されない残基を含んでいてもよい。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも1つの、また典型的には2つの可変ドメインの全てを実質的に含み、この場合、CDR領域の全て若しくは実質的に全てが、非ヒトイムノグロブリンのものに相当し、FR領域の全て若しくは実質的に全てが、ヒトイムノグロブリンコンセンサス配列である。ヒト化抗体は、最適には免疫グロブリン定常領域(Fc)、典型的にはヒトのイムノグロブリンの定常領域の少なくとも一部も含む。Jones等, Nature, 321:522-525 (1986); Riechmann等, Nature, 332:323-329 (1988); 及びPresta, Curr. Op Struct. Biol., 2:593-596 (1992)。
あるいは、ヒト抗体を産生することができる。例えば、内在性のイムノグロブリン産生がない状態で、ヒト抗体の全レパートリーを免疫化することで産生することのできるトランスジェニック動物(例えば、マウス)を作ることが現在では可能である。例えば、キメラ及び生殖系列突然変異体マウスにおける抗体重鎖結合領域(JH)遺伝子の同型接合欠損が内因性抗体産生を完全に阻害することが記載されている。このような生殖系列突然変異体マウスにおけるヒト生殖系列イムノグロブリン遺伝子列の移入は、抗原投与時にヒト抗体の産生をもたらす。例としてJakobovits等, Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 90:2551 (1993);Jakobovits等, Nature 362:255-258 (1993);Bruggermann等, Year in Immuno., 7:33 (1993);米国特許第5,591,669号及びWO97/17852を参照。
ある状況では、全抗体を用いるよりもむしろ抗体断片を用いる方が有利なことがある。より小さいサイズの断片は急速にクリアランスを受け、固形腫瘍にアクセスしやすい。
二重特異性(BsAb)は、少なくとも2つの異なるエピトープに対する結合特異性を有する抗体であり、同じ又は異なるタンパク質(例えば、CD83)に対するものを含む。かかる抗体は、完全長抗体又は抗体断片(例えば、F(ab')2 二重特異性抗体)から得ることができる。
多価抗体は、抗体が結合する抗原を発現する細胞により、二価抗体よりも早くインターナリゼーション(及び/又は異化)されうる。本発明の抗CD83抗体又は抗体断片は、3又はそれ以上の結合部位を有する多価抗体(IgMクラス以外のもの)であり得(例えば四価抗体)、抗体のポリペプチド鎖をコードする核酸の組換え発現により容易に生成することができる。多価抗体は二量化ドメインと3又はそれ以上の抗原結合部位を有する。好ましい二量化ドメインはFc領域又はヒンジ領域を有する。このシナリオにおいて、抗体はFc領域と、Fc領域のアミノ末端に3又はそれ以上の抗原結合部位を有しているであろう。ここで、好ましい多価抗体は3ないし8、好ましくは4の抗原結合部位を有する。多価抗体は少なくとも1つのポリペプチド鎖(好ましくは2つのポリペプチド鎖)を有し、ポリペプチド鎖(類)は2又はそれ以上の可変ドメインを有する。例えば、ポリペプチド鎖(類)はVD1-(X1)n-VD2-(X2)n-Fcを有し、ここでVD1は第1の可変ドメインであり、VD2は第2の可変ドメインであり、FcはFc領域のポリペプチド鎖の一つであり、X1及びX2はアミノ酸又はポリペプチドを表し、nは0又は1である。同様に、ポリペプチド鎖(類)は:VH-CH1-柔軟なリンカー-VH-CH1-Fc領域鎖;又はVH-CH1-VH-CH1-Fc領域鎖を有し得る。ここで多価抗体は、好ましくは少なくとも2つ(好ましくは4つ)の軽鎖可変ドメインポリペプチドをさらに有する。ここで多価抗体は、例えば約2〜約8の軽鎖可変ドメインポリペプチドを有する。ここで考察される軽鎖可変ドメインポリペプチドは軽鎖可変ドメインを有し、場合によってはCLドメインを更に有する。
また、ヘテロコンジュゲート抗体も本発明の範囲に入る。ヘテロコンジュゲート抗体は、2つの共有結合した抗体からなる。例えば、ヘテロコンジュゲートの一方の抗体はアビジンに結合し、他方はビオチンに結合可能である。このような抗体は、例えば、免疫系細胞を不要な細胞に対してターゲティングさせることが提案され、米国特許第4,676,980号、またHIV感染の治療のために使用されている。国際公開第WO91/00360号;同第WO92/200373号;欧州特許第0308936号。該抗体は、クロスリンク剤に関連したものを含む合成タンパク化学における既知の方法を使用して、インビトロで調製することができると考えられる。例えば、ジスルフィド交換反応を使用するか又はチオエーテル結合を形成することによって、免疫毒素を作成することができる。この目的に対して好適な試薬の例には、イミノチオレート及びメチル-4-メルカプトブチリミデート、及び例えば米国特許第4,676,980号に開示されたものが含まれる。ヘテロコンジュゲート抗体は簡便なクロスリンク法を用いて作製してもよい。好適なクロスリンク剤は当業者に周知であり、クロスリンク技術の番号と共に米国特許第4,676,980号に開示されている。
エフェクター機能を変更及び/又は抗体の血清半減期を増加するように本発明の抗体を改変することが所望されうる。例えば、定常領域のFc受容体結合部位が、特定のFc受容体、FcγRI、FcγRII、及び/又はFcγRIIIに対する結合親和性を除去又は低減するように改変又は変異されうる。幾つかの実施態様では、エフェクター機能は、抗体のFc領域(例えば、IgGのCH2において)のN-グリコシル化を除去することによって損なわれる。幾つかの実施態様では、エフェクター機能は、ヒトIgGの233−236、297、及び/又は327−331等の領域を修飾することによって損なわれ、PCTWO99/58572及びArmour等, Molecular Immunology 40: 585-593 (2003); Reddy等, J. Immunology 164:1925-1933 (2000)に記載される。
ここで記載の抗体のアミノ酸配列の修飾を考察する。例えば、抗体又は抗体断片の結合親和性及び/又は他の生物学的特性が改善されることが望ましい。抗体又は抗体断片のアミノ酸配列変異体は、適当なヌクレオチド変化を抗体又は抗体断片をコードする核酸に導入することにより、又はペプチド合成により調製される。そのような修飾は、例えば、抗体のアミノ酸配列内の残基の欠失、及び/又は挿入及び/又は置換を含む。欠失、挿入、及び置換の任意の組み合わせは、最終構造物に達するまでなされるが、その最終構造物は所望の特徴(つまり、CD83と結合又は物理的相互作用する能力)を有する。また、アミノ酸変化は、グリコシル化部位の数又は位置の変化など、抗体の翻訳後過程を変更しうる。
(1)疎水性:ノルロイシン、met、ala、val、leu、ile;
(2)中性の親水性:cys、ser、thr、
(3)酸性:asp、glu;
(4)塩基性:asn、gln、his、lys、arg;
(5)鎖配向に影響する残基:gly、pro;及び
(6)芳香族:trp、tyr、phe。
本発明の抗体又は抗体断片は、当技術分野で知られ容易に入手可能である更なる非タンパク質性部分を持つよう更に修飾されることができる。好ましくは、抗体の誘導体化に適した部分は水溶性ポリマーである。水溶性ポリマーの非制限的な例は、限定するものではないが、ポリエチレングリコール(PEG)、エチレングリコール/プロピレングリコールのコポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ-1、3-ジオキソラン、ポリ-1,3,6-トリオキサン、エチレン/無水マレイン酸コポリマー、ポリアミノ酸(ホモポリマー又はランダムコポリマー)、及びデキストラン又はポリ(n-ビニルピロリドン)ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコールホモポリマー、ポリプロピレンオキシド/エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシエチレンポリオール(例えば、グリセロール)、ポリビニルアルコール、及びその混合を含む。ポリエチレングリコールプロピオンアルデヒドは、水中のその安定性により製造において利点を有しうる。ポリマーは、任意の分子量であり得、分岐又は非分岐でありうる。抗体に結合されるポリマーの数は様々であり得、一以上のポリマーが結合される場合は、それらは同じもしくは異なる分子であってもよい。一般に、誘導体化に使用されるポリマーの数及び/又はタイプは考察に基づいて決定されることが可能であり、限定するものではないが、改良される抗体の特定の特性又は機能、抗体誘導体が決められた条件下の治療で使用されるかどうか等を含む。このような技術及び多の適切な製剤は、Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Ed., Alfonso Gennaro, Ed., Philadelphia College of Pharmacy and Science (2000)に開示されている。
ここに記載される抗CD83アゴニスト抗体の治療用組成物及び製剤は、任意の製薬上許容可能な担体、賦形剤又は安定剤と、所望の精製度を有する活性成分とを混合することにより、調製されすることができる(Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Ed., (Gennaro, A.R., ed., Lippincott Williams & Wilkins, Publishers, Philadelphia, PA 2000)。許容される担体、賦形剤又は安定剤は、用いる投与量及び濃度ではレシピエントに対して無毒性であり、緩衝液、アスコルビン酸、メチオニン、ビタミンE、異性重亜硫酸ナトリウムを含む抗酸化剤;防腐剤、等張剤(isotonicifier)、安定剤、金属複合体(例えば、Zn-タンパク質複合体);EDTA等のキレート剤及び/又は非イオン性界面活性剤等を含む。
本発明は、個体において自己免疫疾患(炎症性腸疾患(IBD)等)を治療又は防止する方法を提供し、個体に有効量のここに記載の抗CD83アゴニスト抗体を投与することを含んでなる。幾つかの実施態様では、個体はヒトである。幾つかの実施態様では、自己免疫疾患は、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、全身性エリテマトーデス(SLE)、ループス腎炎、潰瘍性大腸炎、ウェゲナー疾患(Wegener's disease)、炎症性腸疾患、特発性血小板減少性紫斑病(ITP)、血栓性血小板減少性紫斑病(TTP)、自己免疫性血小板減少症、多発性硬化症、乾癬、IgA腎症、IgM多発ニューロパチー、重症筋無力症、血管炎、糖尿病、レイノー症候群、シェーグレン症候群及び糸球体腎炎から成る群から選択される。幾つかの実施態様では、個体は、病因において骨髄系細胞活性化(樹状細胞及びマクロファージ)を伴う自己免疫疾患を発生する危険性を有する。幾つかの実施態様では、個体はIBDを有する、又はIBDを発生する危険性にある。
本発明の方法は、併用又は付加治療工程として、又は治療用製剤の付加要素として、自己免疫疾患(IBD等)に対する既知の治療方法と組み合わせてもよい。あるいは、異なる抗CD83アゴニスト抗体が組み合わせて投与されうる。選択される併用療法のタイプは、疾患の臨床症状に依存するだろう。
本発明の医薬品組成物の用量及び所望の薬物濃度は、想定する特定の使用によって変化する。適当な用量の測定または投与のルートは、当分野の技術の範囲内でよい。動物実験は、ヒト治療のための有効量の決定のための確実な手引きとなる。有効量の異種間スケーリングは、Mordenti, J. 及び Chappell, W. 「The Use of Interspecies Scaling in Toxicokinetics」, In Toxicokinetics and New Drug Development, Yacobi 等, 編集, Pergamon Press, New York 1989, pp.42-46.に記載の原理に従って行うことができる。
限定はしないが、再構成される製剤を含む本発明の製剤(例えば、抗CD83アゴニスト抗体の製剤)は、抗CD83アゴニスト抗体による治療を必要としている個体、好ましくはヒト、に対して、ボーラス又はある期間にわたる連続的注入による静脈内投与、筋肉内、腹腔内、脳脊髄内、皮下、関節内、滑膜内、腱鞘内、口内、局部的又は吸入経路による既知の方法に従い投与される。
別の態様では、製造品又はキットが提供され、抗CD83アゴニスト抗体製剤を含み、好ましくは本発明の使用におけるそれの使用に対する指示を提供する。従って、ある実施態様では、製造品又はキットは、個体においてIBD(潰瘍性大腸炎及びクローン病を含む)等の自己免疫疾患を治療又は防ぐための方法における、抗CD83アゴニスト抗体の使用に対する指示を含み、個体に有効量の抗CD83アゴニスト抗体を投与することを含んでなる。ある実施態様では、個体はヒトである。
実施例
CD83は、成熟樹状細胞(DC)の表面に主に見られる、Igスーパーファミリーの良く保存されたタイプ1膜タンパク質である。可溶性CD83は免疫抑制活性を有するが、DC上でのCD83の機能及びその推定リガンドは未知のままである。我々は、DCに抗炎症性作用を誘発するCD83ホモタイプ相互作用を同定した。DC成熟間の可溶性CD83又は抗CD83抗体での処理は、表面活性化マーカーの発現及びIL-12p40等の炎症促進性サイトカインの分泌の低下となった。表面CD83発現のノックダウン、又は細胞質領域のトランケーションは、CD83治療への反応を抑止し、CD83ホモタイプ相互作用が炎症の阻害を媒介することを示した。MAPK及びmTORシグナル伝達はこの抑止の下流で機能し、CD83処置は、表面活性化マーカー発現及びIL-12p40産生に必要であるmTOR及びp38αのリン酸化を阻害する。CD83免疫抑制は、寛容及び免疫間のバランスの維持の中心であり、粘膜表面でCD83を過剰発現するマウスは大腸炎により抵抗性であり、体重維持及び低下血清サイトカインレベルにつながる。このように、CD83ホモタイプ相互作用は、DC免疫反応を調整し、不適切な炎症を防ぎ寛容を促進する。
細胞表面上に発現されるCD83に可溶性CD83が結合するか決定するために、アミノ酸配列
TPEVKVACSEDVDLPCTAPWDPQVPYTVSWVKLLEGGEERMETPQEDHLRGQHYHQKGQNGSFDAPNERPYSLKIRNTTSCNSGTYRCTLQDPDGQRNLSGKVILRVTGCPAQRKEETFKKYGRAQVTDKAAHYTLCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(配列番号:3)
を含んでなるCD83.fcを生成し、CHO細胞(CHO-hCD83)上に安定的に発現されるヒトCD83、又はMUTZ-3由来成熟樹状細胞(mDC)上で発現される内因性CD83の何れかに結合するその能力を評価した。安定CHO-hCD83細胞株の産生のための発現ベクターを生成するために、N末端HISタグヒトCD83(hCD83)をコードするDNA断片を、位置XbaI及びXhoIで、ネオマイシン耐性プラスミド、pRKneo(Crowley等, Proc Natl Acad Sci USA., 90(11):5021-5025, 1993)にクローニングしてhCD83.pRKneoを生成した。CHO細胞をFugene(Roche)を使用してhCD83.pRKneoで形質移入し、上位10%のCD83陽性細胞をFACSで選別し、次いでG418(400μg/ml;GIBCO)を用いて選択し、安定CHO-hCD83細胞株を生成した。MUTZ-3細胞から未熟DC(iDC)を得るため、細胞を、150ng/mlのrhGM-CSF及び50ng/mlのrhIL-4を含有するMEMα+glutamax/20%加熱不活性化FBSにおいて培養した。DCを、25ng/mlのrhIL-1b、100ng/mlのrhIL-6、50ng/mlのrhTNFα及び1μg/mlのPGE-2を含有するサイトカインカクテルを用いて、CD83の表面発現に対して成熟させた。
可溶性CD83処理によりDCに誘導される免疫反応を特徴付けるために、mDC表面活性化マーカーへのCD83処理の効果を評価した。MUTZ-3細胞からiDCを得るために、細胞を150ng/mlのrhGM-CSF及び50ng/mlのrhIL-4を含有するMEMα+glutamax/20%加熱不活性化FBSにおいて6日間培養した。iDCを、25ng/mlのrhIL-1b、100ng/mlのrhIL-6、50ng/mlのrhTNFa及び1μg/mlのPGE-2を含有する成熟刺激サイトカインカクテルで処理した。10μg/mlのCD83.fc、1μg/mlのHB15e、又はコントロールIgG.fcでのmDCの処理を成熟刺激と同時に行った。MUTZ-3由来mDCにおける細胞表面活性化マーカー、CD83及びHLA-DR(MHCII)の発現を、CD83又はMHCIIに対する蛍光色素コンジュゲート抗体で細胞を染色し、フローサイトメトリーによって細胞を分析することによって検査した。非特異的染色のレベルを決定するために、標識アイソタイプ適合抗体を使用した。データ解析及び全結合を示すヒストグラム構築は、CD83及びMHCIIはMUTZ-3由来mDCで発現されたが(黒線)、iDC(中実線ヒストグラム)では低レベルであることを示した(図4)。中実非線ヒストグラムはアイソタイプコントロールを表す。CD83及びMHCII双方の発現は、CD83.fc(灰色線)又はHB15e(破線)処置で低減され、CD83処理がmDCにおける表面活性化マーカーの発現を低減することを示す。
CD83.fc又はHB15eで処理されたDCに誘導される遺伝子発現における変更を更に特徴づけるため、処理後、DCから単離されたRNAにマイクロアレイ分析を実施した。マイクロアレイに関する統計解析をR project(http://r-project.org)及びBioconductor project(http://bioconductor.org)からのソフトウェアを使用して行った。バックグラウンド減算マイクロアレイデータを、アレイ内でLOESS正規化、アレイ間で分位数正規化した。次いで、正規化データをlog2変換し、プローブをBioconductorの「genefilter」パッケージを使用してフィルター処理した(例えば、Entrez遺伝子にマッピングされるプローブのみ保持される)。次に、50%最小可変プローブを除去する非特異的フィルターを使用した(Bourgon等, Proc Natl Acad Sci USA., 107(21):9546-51, 2010)。異なって発現される遺伝子を同定するために、limmaパッケージを使用して(Smyth., Stat Appl Genet Mol Biol., 3:Article 3, 2004)、減衰t検定を算出した。線形モデルを、未熟及び成熟DC間、並びにCD83連結サンプル(CD83fc-及びHB15e-処理成熟DC)及びコントロールサンプル(IgG-及び非処理成熟DC)間の異なる発現に対して試験した。false discovery rate(FDR)をBenjamini-Hochberg法を使用して算出した。0.01未満のFDRを有する場合、遺伝子は異なって発現されると考えた。5つの異なるドナーからのDCの分析は、CD83.fc及びHB15e処理細胞が分離し、未処理mDC並びにiDCから独立してクラスタとなることを示し、処理が創傷治癒に関与する遺伝子のアップレギュレーションとなることを示した。マイクロアレイデータを、CD83.fc又はHB15eで処理したmDCからの単離された全RNAのtaqman qPCR分析によって確認した(図7)。gapdhに対する正規化後、遺伝子発現解析は、創傷治癒に関与する遺伝子vcan、spock2、及びfbn2がアップレギュレートされたことを示した。示した平均相対発現は2^ΔCT+標準誤差(SEM)である。これらのインビトロ結果は、可溶性CD83処理が、炎症性疾患により引き起こされる組織損傷の治癒のための、正常な細胞増殖及び遊走を促進しうることを示す。
抗炎症性反応を調節するCD83相互作用を更に特徴付けるために、DCを、hCD83を過剰発現するCHO細胞と共培養した時に、抗炎症性反応についてモニタした。MUTZ-3細胞からiDCを得るために、細胞を150ng/mlのrhGM-CSF及び50ng/mlのrhIL-4を含有するMEMα+glutamax/20%加熱不活性化FBSにおいて6日間培養した。生成されたiDCを、コントロールCHO細胞株又はヒトCD83を安定に発現するCHO細胞と共培養した。その後、混合細胞の培養物を未処理か、もしくは25ng/mlのrhIL-1β、100ng/mlのrhIL-6、50ng/mlのrhTNFα及び1μg/mlのPGE-2を含有するサイトカインカクテルで処理してmDCを生成した。細胞培養上澄み液をDCの成熟48時間後収集し、分泌されたサイトカインIL12-p40及びMCP-1を標準の製造者指示に従ってELISA(Invitrogen)によって分析した。分泌されたIL12-p40及びMCP-1レベルの分析は、炎症促進性サイトカインの放出が、CD83発現を欠くCHO細胞と比較して、hCD83を発現するCHO細胞と共培養されたmDCにおいて有意に低減されることを示した(図8A及びB)。このデータは、CD83がトランスホモタイプ相互作用に関与して抗炎症性反応を媒介することが可能であることを実証する。このデータは、CD83が、抗炎症性反応を媒介するためにトランスホモタイプ相互作用に関与することが可能なことを示す。これらの結果は、複数ドナーの全血から単離されたヒト単球由来DC(MDDC)を使用して確認した。刺激後、CHO-hCD83細胞と共に培養したDCは、CD83発現を欠くCHO細胞と共に培養したものより有意に少ないIL12-p40を産生した。
CD83ホモタイプ相互作用がDCに抗炎症性効果を誘発するという新規な発見により、CD83細胞質内ドメインによって調整される下流シグナル伝達経路を調査した。CD83細胞質内ドメインの最後の15アミノ酸の配列比較は、C末端クラスIII PDZリガンドモチーフがCD83において保存されていることを示す(図10A)。このモチーフがCD83処理中の抗炎症性反応を媒介するか決定するために、CD83レンチウイルス発現コンストラクトを生成し、これはクラスIII PDZリガンドモチーフを消失するために位置205でバリンからアラニンへの変異(V205A)を有する完全長CD83を有した(図11B)。iDCを上述のように指示レンチウィルスで感染させた。細胞を、48時間、成熟刺激、並びにCD83.Fc、HB15e又はアイソタイプコントロールで処理した。その後、上澄部を収集し、IL12-p40放出をELISAによって分析した。分泌IL12-p40の分析は、完全長CD83のレンチウィルス過剰発現はCD83.fc又はHB15eに対するmDC反応を阻害しなかったが、しかし、CD83 V205A変異体の発現がCD83処理の抗炎症性効果を阻止したことを実証した(図11C)。これらの結果は、CD83細胞質内ドメイン上のクラスIII PDZリガンドモチーフが、抗炎症性反応を媒介するタンパク質と相互作用することを示唆する。
CD83ホモタイプ相互作用がインビトロにおいてDCに抗炎症性効果を誘発するという新規な発見は、それがインビボにおいて類似な効果を誘発し得ることを示唆する。インビボにおけるCD83媒介免疫抑制の効果を調査するために、粘膜表面にCD83を過剰発現する遺伝子導入マウスラインを作成した。FABP.CD83ターゲティングベクターを作成するために、SpeI/SacII部位を使用してFABP.sup.LacZベクターにクローニングするために、Picomax PCRシステムを使用して結腸組織からの完全長マウスCD83(mCD83)を増幅させた(図13A)。PCRに使用したプライマーは、CD83SPE順方向プライマー:5’-GATCAAACTAGTCCACCATGTCGCAAGGCCTCCAGCTCCT-3’及びCD83SACII-逆方向プライマー:5’-CATCATCCGCGGTCATACCGTITCTGTCTTAGGAAG-3’であった。マイクロインジェクション後、72匹のファウンダーマウスを、結腸における高発現及び腎臓における低発現についてスクリーニングした。1匹のマウスがこれらの基準を満たし、FVBマウスへの戻し交配によって遺伝子導入ラインを作成するために使用した(Jackson Labs)。マウスは特定病原体除去バリアー設備に収容した。全ての手順はGenentech Animal Care and Use Committeeによって承認された。
炎症性腸疾患のマウスモデルにおけるCD83過剰発現の効果を評価するために、大腸炎を、前の実施例において産生し特徴づけたCD83Tgマウスラインにおいて、デキストラン硫酸ナトリウム(DSS)を用いた処理によって誘発させた。8−10週の年齢のCD83Tgマウスが、7日間飲料水において6%DSSが自由に与えられ、7日目に、12日目の実験の中止まで通常の飲料水に切り替えられた。マウスは0日目、及び4日目以降毎日重さを量り、潜血、下痢及び何れか他の異常徴候についてチェックした。体重減少が0日目の初期体重の20%を超えた場合、マウスを安楽死させた。12日目に、マウスを麻酔の下、眼窩採血して150−200μlの血液を採取し、これは〜150μlの血清を産生した。血清サイトカインを、製造者の指示に従ってBio-Plex Pro Mouse 23-Plex アッセイ(Cat. No. M60-009RDPD; Bio-Rad)を使用して評価した。次いで、マウスを安楽死させ、小腸及び大腸を切片化し、組織学分析のためにH&Eで染色した。切片をランダム化し、二重盲検でスコア付けした。6%DSSで処置された野生型マウスは〜20%の体重を減少させたが、CD83Tgマウスは12日目まで〜89%の初期体重を維持した(図15A)。野生型マウスは、CD83Tgマウスと比較して、結腸構造の欠失を特徴とする重度な大腸炎及び炎症性浸潤の増加を有した(図15B)。野生型及びCD83Tgマウスからの結腸切片のH&E染色の組織学スコアは、野生型マウスは8.2の平均組織学スコアであったが、CD83Tgマウスの組織学スコアは有意に低く(**,P=0.0094)、5.3であることを示した(図14B及びC)。更に、炎症促進性サイトカインの血清レベルをELISAによって測定し、野生型同腹子と比較して6%DSSで処置されたCD83Tgマウスにおいて有意に低下したことが分かった(*,P<0.05)(図14D)。これらの結果は、粘膜表面でCD83を過剰発現するマウスが大腸炎に対してより抵抗性があることを示し、体重維持及び低減血清サイトカインレベルに至った。このように、CD83ホモタイプ相互作用は、DC媒介免疫反応を調整し、不適切な炎症を防ぎ、寛容を促進した。
DCにおけるCD83の欠失が大腸炎を悪化させるか決定するために、DCにおいて特異的にCD83を欠くマウスを作成しアッセイした。CD83fl/flマウスを相同組換えにより作成した。まず、固有制限部位:
を有する合成CD83検出ベクターを使用して、CD83ゲノム断片をBAC(Cat. No. RPCI23.C, Invitrogen)から検出した。精製した検出断片を、検出ゲノム断片にloxPフランクカナマイシン選択カセットを挿入する第一ターゲティングカセット:
で同時形質転換した。次いで精製した標的プラスミドをアラビノース誘導されたエレクトロコンピテントSW106細胞に形質転換し、選択カセットのCre媒介ポップアウトにより単一loxP部位を残した。次いで精製した断片を合成第二ターゲティングカセット:
で同時形質転換し、2つのFrt部位及び1つのloxP部位によりフランクされたPGK-em7-Neo-pA耐性遺伝子を挿入しコンディショナルターゲティングベクターを作成した。この選択カセットはES細胞におけるポジティブ選択のためにコンディショナルターゲティングベクターに残され、その後ES細胞においてFlpをコードするcDNAの一過性形質移入により除去されコンディショナルCD83fl対立遺伝子を作成した(図16A)。次いでCD83fl対立遺伝子を保有するES細胞をマウス胚盤胞に注入してキメラマウスを作成し、次いでこれを使用してホモ接合性CD83fl/flマウスを作成した。CD83ノックアウトマウスを、Fujimoto, Y. et aI., Cell 108, 755-767, 2002(出典明記により本明細書中に援用する)で使用されるものと類似のストラテジーを使用して作成した。CD83fl/flマウスを、CD11cプロモーターの制御下でCreリコンビナーゼのトランスジェニック発現を有するマウスと繁殖させ、DCにおいて特異的にCD83を欠失するマウスを作成した(CD83fl/flCD11c-Cre)。CD83fl/flCD11c-Creマウスはグロス形態学的異常を示さず、全般的CD83ノックアウトマウスと異なり、CD83wt/wtCD11c-Ce同腹子と比較した場合、脾臓において正常な数のCD4T細胞を有し、これは胸腺上皮細胞におけるCD83発現がこれらのマウスにおいておそらく影響を受けなかったためである。(図16B)。また脾臓及び結腸におけるDCの数は類似していたが、CD83の発現はCD83fl/flCD11c-CreマウスのほとんどのDCにおいて失われていた(図16C)。DCにおけるCD83発現の欠失は結果としてDSS大腸炎の生存率の低下となった(図16D)。CD83fl/flCD11c-CreDSS処理マウスは重度な体重減少となり、8日目までに、CD83wt/wtCD11c-Ce同腹子(84.9%)と比較して有意に少ないそれらの初期体重を維持した(77.7%)(図16E)。更に、DSS処理は、8日目までに、CD83wt/wtCD11c-Ce同腹子には観察されなかった、CD83fl/flCD11c-Creマウスの100%における肛門周辺及び便中の明らかな血(overt blood)を生じ(図16F)、人道的理由による安楽死を必要とした。これらの結果は、DSS誘導性大腸炎耐容のためにDC CD83発現が必要であることを示す。
ヒトCD83の細胞外領域内のエピトープに特異的に結合するアゴニスト抗体は、ファージディスプレイライブラリー等の抗体ライブラリーをスクリーニングすることによって産生され得る。ライブラリーの抗体は、ヒト抗体、ヒト化抗体、又はキメラ抗体でありうる。またライブラリーの抗体は、単鎖抗体又は単ドメイン抗体でありうる。あるいは、ヒトCD83の細胞外領域からのペプチドがマウスの免疫化使用されてもよく、抗CD83抗体が下に示すようにCD83アゴニスト活性に対して同定される。
樹状細胞上の細胞表面CD83に結合する抗体を同定するために、生成された抗体の結合親和性をフローサイトメトリー分析によってスクリーニングした。簡単には、未熟樹状細胞(iDC)をサイトカインカクテルで処理して、DC成熟及びCD83の表面発現を誘導した。固定及びフローサイトメトリーの前に、mDCを、DC成熟刺激と同時に生成された抗体で処理した。mDCの表面に発現されたCD83に特異的に結合する抗体をフローサイトメトリーデータを分析することによって同定した。あるいは、生成された抗CD83抗体を細胞凝集アッセイを使用してスクリーニングした。簡単には、hCD83(CHO-hCD83)を発現するCHO細胞を2mMのEDTAを用いてフラスコから脱離させ、洗浄し、2%FBS/10mMEDTAを含有するがCa2+又はMg2+を欠くHBSS培地に再懸濁させた。その後細胞を、106/mlで再懸濁させ、70μmフィルターを通過させて、低接着10cm培養皿にプレーティングするための単個細胞浮遊液を得た。その後、CHO-hCD83細胞を生成された抗体で処理し、4%のPFAでの固定の前に、37℃で90分間、軌道プラットフォームシェーカーでインキュベートした。CD83ホモタイプ結合の競合によりCHO-hCD83細胞の凝集を阻止する抗体を、細胞の顕微鏡イメージングによって同定した。これらの抗体は、それらのヒトCD83に対する結合及びアゴニスト活性について更に特徴付けられてもよい。
CD83アゴニスト活性を有する抗CD83抗体を同定するために、mDCによる炎症促進性及び抗炎症性サイトカイン分泌へのCD83処理の効果を評価する。簡単には、iDCをサイトカインカクテルで処理し、DC成熟及びCD83の表面発現を誘導する。生成された抗体でのmDCの処理をDC成熟刺激と同時に行う。DCの成熟の48時間後、細胞培養物上澄み液を収集し、炎症促進性サイトカインMCP-1及びIL-12p40並びに抗炎症性サイトカインIL-1raの分泌をELISAによって分析する。炎症促進性サイトカインMCP-1及びIL-12p40の放出を阻害する、及び/又は抗炎症性サイトカインIL-1raの放出を誘導する抗CD83抗体を、アゴニスト活性を有する抗体として同定する。
mDCの活性化を阻害するアゴニスト抗CD83抗体を同定するために、生成された抗体を、細胞表面活性化マーカーの発現を低減させる能力についてスクリーニングする。簡単には、未熟樹状細胞(iDC)をサイトカインカクテルで処理し、DC成熟を誘導する。mDCを、DC成熟刺激と同時に、生成された抗体で処理する。mDC上の細胞表面活性化マーカー、CD83及びHLA-DR(MHCII)の発現を、CD83又はMHCIIに対する蛍光色素コンジュゲート抗体で細胞を染色し、フローサイトメトリーによって細胞を分析することによって調査する。mDC上におけるCD83及び/又はHLA-DRの細胞表面発現を低下させる抗CD83抗体を、アゴニスト活性を有する抗体として識別する。
材料及び方法
培地及び抗体
ClonaCell-HY培地B(Cat# 03802)、培地C(Cat# 03803)、培地D(Cat# 03804)及び培地E(Cat# 03805)をStem Cell Technologiesから得た。電気融合に使用したCytofusion培地C(Cat# LCM-C)をCyto Pulse Sciencesから得た。ヤギ抗ハムスターIgG(H+L)-HRPコンジュゲート抗体(Cat# 127-035-160)をJackson Immuno Research Laboratoriesから得た。TMB one component HRP microwell substrate(Cat# TMBW-1000-01)及びTMB stop reagent(Cat# BSTP-1000-01)をBioFx Laboratoriesから得た。
インビボ免疫化
アルメニアンハムスターを、全18ブーストを3〜4日の間隔で腹腔内注射によって、モノホスホリルリピドA/トレハロースジコリノミコレートアジュバントに再懸濁した組換えマウス及びヒトCD83にて、ハムスターにつき注入につき2μgで免疫化した。最終プレ融合ブーストの3日後、免疫化したハムスター脾臓からのリンパ球を回収した。
ハイブリドーマ生成及び抗体スクリーニング
単離したハムスターの脾臓細胞を、Cyto Pulse CEEF-50 装置(Cyto Pulse Sciences)を使用してPU-l骨髄腫細胞(American Type Culture Collection)で融合した。簡単には、Cytofusion培地Cで2回洗浄した後、単離した脾臓細胞及びPU-l細胞を1:1比で混合し、次いでCytofusion培地C中に1000万細胞/mlで再懸濁した。電気融合を製造者の指示に従って実施した。融合細胞を7%CO2インキュベーターにおいて37℃で一晩、ClonaCell-HY培地Cにおいて培養した。翌日、融合細胞を遠心分離し、次いで10mlのClonaCell-HY培地Cに再懸濁し、その後HAT成分を含有する90mlのメチルセルロースベースのClonaCell-HY培地Dで穏やかに混合した。細胞を100mmペトリ皿(Cat#351029, Becton Dickinson)にプレーティングし、7%CO2インキュベーターにおいて37℃で増殖させた。10日のインキュベーションの後、単一ハイブリドーマクローンをClonePix(Genetix, United Kingdom)によって選び、ウェルにつき200μLのClonaCell-HY培地Eを有する96ウェル細胞培養プレート(#353075, Becton Dickinson)に移した。ハイブリドーマ培養培地をELISAスクリーニングの前に変えた。培地交換の3日後、ハイブリドーマ上澄部を、ELISA陽性クローンの同定のために、ヒトCD83又はマウスCD83に対してELISAによってスクリーニングした。
ハムスターAbs精製
ハイブリドーマ上澄部をプロテインA親和性クロマトグラフィーによって精製し、次いで無菌的に濾過し (0.2μm孔サイズ, Nalge Nunc International, NY, USA)、PBSにおいて4℃で保管した。機能アッセイを使用して更に試験する前に、精製したmAbsをELISAによって確認した。
ELISAアッセイ
ELISAアッセイを標準のプロトコルに従って実施した。ELISA96ウェルマイクロタイタープレート(Greiner, Gennany)を、0.05Mの炭酸バッファー(pH9.6)中に2μg/mlの濃度で、ウェルにつき100μLのヒト又はマウスCD83でコートし、4℃で一晩インキュベートした。ウェルを洗浄バッファー(PBS中0.05%Tween 20, Sigma)で3回洗浄した後、プレートを、BSAと共に100μLのELISAアッセイ希釈液でブロックした。100μLの培養上澄部又は希釈精製mAbを加え、1時間室温でインキュベートした。プレートを3回洗浄し、HRPコンジュゲートヤギ抗ハムスターIgG(H+L)で1時間インキュベートした。ウェルを3回洗浄した後、結合したHRPコンジュゲート抗体を、ウェルにつき100μLのTMB基質(BioFX Laboratories, MD, USA)の添加によって検出し、プレートを5分間インキュベートした。 反応をウェルにつき100μLの停止剤(BioFX, Laboratories, MD, USA)の添加によって停止し、色をA630nmで検出してヒト又はマウスCD83に結合した抗体を同定又は確認した。
FACS結合アッセイ
生成された抗体を、CHO細胞上に安定して発現されるヒトCD83又はマウスCD83に結合するそれらの能力について検定した。安定細胞株の産生のための発現ベクターを生成するために、N末端HISタグヒトCD83(hCD83)又はN末端HISタグマウスCD83(mCD83)をコードするDNA断片を、XbaI及びXhoI部位で、ネオマイシン耐性プラスミドpRKneo (Crowley et ai., Proc Natl Acad Sci USA., 90(11):5021-5025, 1993)にクローニングし、hCD83.pRKneo又はmCD83.pRKneoをそれぞれ産生した。CHO細胞をFugene (Roche)を使用してhCD83.pRKneo又はmCD83.pRKneoで形質移入し、上位10%のCD83陽性細胞をFACSによって選別し、次いでG418(400μg/ml; GIBCO)で選択して、安定CHO-hCD83又はCHO-mCD83細胞株をそれぞれ生成した。CHO-hCD83及びCHO-mCD83細胞を、PBS/2%BSA/2mM EDTAを含有するFACSバッファーに再懸濁し、氷上で30分間、抗ヒトCD83抗体又は抗マウスCD83抗体でインキュベートした。細胞をFACSバッファーで洗浄し、次いで30分間氷上で暗所において蛍光色素コンジュゲート抗ハムスターIgG2次抗体でインキュベートした。細胞をFACSバッファーで洗浄し、FACSDivaソフトウェア(Becton Dickinson)を使用してLSR IIフローサイトメーターでフローサイトメトリーによって解析した。データ解析及び図の構築をFlowJo v.9.4.11を使用して実施した。
サブクローニング
野生型マウスIgG2a定常領域をハムスター可変領域と共に有するキメラ抗体の産生のために、マウス又はヒトCD83に結合可能な抗体を産生したハイブリドーマクローンを少なくとも1回の単一細胞サブクローニングに課した。その後抗体を配列決定した。
結果
FACS結合アッセイのデータ解析は、CD83に結合する能力を有する抗体を産生する9つのハイブリドーマクローンを同定した。抗CD83抗体35G 10、40A11,54D11、59G1O、75AI及び7C7はヒトCD83を発現するCHO細胞に結合したが(黒線)、マウスCD83を発現する細胞(破線)又はCD83発現を欠いた親CHO細胞(中実ヒストグラム)には結合しなかった(図17A-F)。抗CD83抗体60B10はヒトCD83を発現するCHO細胞に結合し、またマウスCD83を発現するCHO細胞との交差反応も見せた(図17G)。抗CD83抗体42C6及び39A2は、マウスCD83を発現するCHO細胞に特異的に結合したが(破線)、ヒトCD83を発現するCHO細胞(黒線)又はCD83発現を欠く親CHO細胞株には結合しなかった(図18A及びB)。
39A2 抗マウスCD83重鎖DNA配列
39A2 抗マウスCD83重鎖アミノ酸配列
39A2 抗マウスCD83重鎖可変領域アミノ酸配列
39A2 HVR-Hlアミノ酸配列
39A2 HVR-H2アミノ酸配列
39A2 HVR-H3アミノ酸配列
39A2 抗マウスCD83軽鎖DNA配列
39A2 抗マウスCD83軽鎖アミノ酸配列
39A2 抗マウスCD83軽鎖可変領域アミノ酸配列
39A2 HVR-Llアミノ酸配列
39A2 HVR-L2アミノ酸配列
39A2 HVR-L3アミノ酸配列
42C6 抗マウスCD83重鎖DNA配列
42C6 抗マウスCD83重鎖アミノ酸配列
42C6 抗マウスCD83重鎖可変領域アミノ酸配列
42C6 HVR-Hlアミノ酸配列
42C6 HVR-H2アミノ酸配列
42C6 HVR-H3アミノ酸配列
42C6 抗マウスCD83軽鎖DNA配列
42C6 抗マウスCD83軽鎖アミノ酸配列
42C6 抗マウスCD83軽鎖可変領域アミノ酸配列
42C6 HVR-L1アミノ酸配列
42C6 HVR-L2アミノ酸配列
42C6 HVR-L3アミノ酸配列
60B10 抗ヒトCD83重鎖DNA配列
60B10 抗ヒトCD83重鎖アミノ酸配列
60B10 抗ヒトCD83重鎖可変領域アミノ酸配列
60B10 HVR-Hlアミノ酸配列
60B10 HVR-H2アミノ酸配列
60B10 HVR-H3アミノ酸配列
60B10 抗ヒトCD83軽鎖DNA配列
60B10 抗ヒトCD83軽鎖アミノ酸配列
60B10 抗ヒトCD83軽鎖可変領域アミノ酸配列
60B10 HVR-L1アミノ酸配列
60B10 HVR-L2アミノ酸配列
60B10 HVR-L3アミノ酸配列
樹状細胞(DC)を、抗CD83抗体60B10、35G10、40A11、54D1、59G10、75AI、又は7C7で処理した場合の抗炎症性反応についてモニタした。アッセイでは、単球由来樹状細胞を未熟DC(iDC)のまま残すか、又は25ng/mlのrhIL-1β、100ng/mlのrhIL-6、50ng/mlのrhTNFa及び1μg/mlのPGE-2を含有するサイトカインカクテルで処理して成熟DC(mDC)を生成した。成熟DCを10μg/mlの示した抗CD83抗体で処理し、48時間インキュベートした。インキュベート後、細胞培養上澄部を集め、分泌された炎症促進性サイトカインを標準の製造者の指示に従ってELISA(Invitrogen)によって解析した。分泌サイトカインレベルの解析は、炎症促進性サイトカインMCP-lの放出が、抗CD83抗体60B10、35G10、40A11、又は7C7で処理したmDCにおいて有意に低減されたことを示した(図19)。抗CD83抗体54D1、59G10、又は75AIでの処理は、mDCからのMCP-lの産生を有意には低減しなかった(図19A)。
炎症性腸疾患のマウスモデルにおける抗CD83抗体処置の効果を評価するために、大腸炎をデキストラン硫酸ナトリウム(DSS)での処置によってマウスに誘発させた。8−10週の年齢のFVBマウスに、200μgの抗CD83抗体39A2、42C6、又は60B10、又はコントロール抗gD抗体を、腹腔内注入によって、研究の1日目、3日目、及び5日目に1日に1回に与えた。マウスに、飲料水中に6%のDSSを、研究の0日目に開始して7日間与えた。7日目に、マウスは12日目の実験の中止まで通常の飲料水に変更した。次いでマウスを安楽死させ、小及び大腸の薄片を作り、組織学的分析のためにH&Eで染色した。切片をランダム化し、二重盲検でスコア付けした。DSSのみで処置されたマウスからの結腸切片は、8.4の平均組織学的スコアを有した(図20)。対照的に、抗CD83抗体を与えられたマウスは組織学的スコアを有意に低減させた。39A2、42C6、又は60B10抗体の使用は、それぞれ5.3、5.5、又は5.4の平均組織学的スコアの結果となった。
Claims (36)
- 個体において自己免疫疾患を治療又は防止するための医薬であって、有効量の抗CD83アゴニスト抗体を含む、医薬。
- 自己免疫疾患が、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、全身性エリテマトーデス(SLE)、ループス腎炎、潰瘍性大腸炎、ウェゲナー疾患(Wegener's disease)、炎症性腸疾患、特発性血小板減少性紫斑病(ITP)、血栓性血小板減少性紫斑病(TTP)、自己免疫性血小板減少症、多発性硬化症、乾癬、IgA腎症、IgM多発ニューロパチー、重症筋無力症、血管炎、糖尿病、レイノー症候群、シェーグレン症候群及び糸球体腎炎から成る群から選択される、請求項1に記載の医薬。
- 個体が、骨髄系細胞活性化を伴う自己免疫疾患を有する、請求項1に記載の医薬。
- 個体が、クローン病を有する、請求項3に記載の医薬。
- 個体が、潰瘍性大腸炎を有する、請求項3に記載の医薬。
- 個体がヒトである、請求項1−5の何れか一項に記載の医薬。
- 抗CD83アゴニスト抗体が、成熟樹状細胞からの炎症促進性サイトカインの放出を阻害する、請求項1−5の何れか一項に記載の医薬。
- 炎症促進性サイトカインMCP-1及び/又はIL-12p40の放出が阻害される、請求項7に記載の医薬。
- 抗CD83アゴニスト抗体が、成熟樹状細胞からの抗炎症性サイトカインの放出を誘導する、請求項1−5の何れか一項に記載の医薬。
- 抗炎症性サイトカインIL-1raの放出が誘導される、請求項9に記載の医薬。
- 抗CD83アゴニスト抗体が、成熟樹状細胞上のCD83及び/又はHLA-DRの細胞表面発現の低下を誘導する、請求項1−5の何れか一項に記載の医薬。
- 抗CD83アゴニスト抗体が、成熟樹状細胞におけるMAPK及び/又はmTORシグナル伝達の活性化を阻害する、請求項1−5の何れか一項に記載の医薬。
- MAPKシグナル伝達の活性化の阻害が、成熟樹状細胞におけるp38及びCREBタンパク質のリン酸化の低下によって測定される、請求項12に記載の医薬。
- mTORシグナル伝達の活性化の阻害が、成熟樹状細胞におけるmTORタンパク質のリン酸化の低下によって測定される、請求項12に記載の医薬。
- 抗CD83アゴニスト抗体がモノクローナル抗体である、請求項1−14の何れか一項に記載の医薬。
- 抗CD83アゴニスト抗体が、Fab、Fab'-SH、Fv、scFv、及び(Fab')2断片から成る群から選択される抗体断片である、請求項15に記載の医薬。
- 抗CD83アゴニスト抗体がヒト化抗体又はキメラ抗体である、請求項1−14の何れか一項に記載の医薬。
- 抗CD83アゴニスト抗体が、(a)配列番号:31のアミノ酸配列を含んでなるHVR-H1、(b)配列番号:32のアミノ酸配列を含んでなるHVR-H2、及び(c)配列番号:33のアミノ酸配列を含んでなるHVR-H3を含んでなる重鎖可変ドメイン、及び(a)配列番号:37のアミノ酸配列を含んでなるHVR-L1、(b)配列番号:38のアミノ酸配列を含んでなるHVR-L2、及び(c)配列番号:39のアミノ酸配列を含んでなるHVR-L3を含んでなる軽鎖可変ドメインを含む、請求項1−17の何れか一項に記載の医薬。
- 抗体が、配列番号:30のアミノ酸配列を含んでなる重鎖可変ドメイン、及び/又は配列番号:36のアミノ酸配列を含んでなる軽鎖可変ドメインを含む、請求項1−17の何れか一項に記載の医薬。
- 抗CD83アゴニスト抗体がヒト抗体である、請求項1−14の何れか一項に記載の医薬。
- 抗CD83アゴニスト抗体が、静脈内に、筋肉内に、皮下に、局所的に、経口的に、経皮的に、腹腔内に、眼窩内に、移植によって、吸入によって、髄腔内に、脳室内に、又は鼻腔内に投与される、請求項1−20の何れか一項に記載の医薬。
- 以下の6つのHVR配列:
(a)配列番号:31のアミノ酸配列を含んでなるHVR-H1;
(b)配列番号:32のアミノ酸配列を含んでなるHVR-H2;
(c)配列番号:33のアミノ酸配列を含んでなるHVR-H3;
(d)配列番号:37のアミノ酸配列を含んでなるHVR-L1;
(e)配列番号:38のアミノ酸配列を含んでなるHVR-L2;及び
(f)配列番号:39のアミノ酸配列を含んでなるHVR-L3
を含んでなる重鎖可変ドメイン及び軽鎖可変ドメインを含む、単離された抗CD83抗体。 - 抗体が、(a)配列番号:31のアミノ酸配列を含んでなるHVR-H1、(b)配列番号:32のアミノ酸配列を含んでなるHVR-H2、及び(c)配列番号:33のアミノ酸配列を含んでなるHVR-H3を含む、請求項22に記載の抗体。
- 抗体が、(a)配列番号:37のアミノ酸配列を含んでなるHVR-L1、(b)配列番号:38のアミノ酸配列を含んでなるHVR-L2、及び(c)配列番号:39のアミノ酸配列を含んでなるHVR-L3を更に含む、請求項23に記載の抗体。
- 抗体が、(a)配列番号:37のアミノ酸配列を含んでなるHVR-L1、(b)配列番号:38のアミノ酸配列を含んでなるHVR-L2、及び(c)配列番号:39のアミノ酸配列を含んでなるHVR-L3を含む、請求項22に記載の抗体。
- 抗体がキメラ抗体又はヒト化抗体である、請求項22−25の何れか一項に記載の抗体。
- 配列番号:30のアミノ酸配列を含んでなる重鎖可変ドメイン、及び配列番号:36のアミノ酸配列を含んでなる軽鎖可変ドメインを含む、単離された抗CD83抗体。
- 抗体がキメラ抗体である請求項27に記載の抗体。
- 請求項22−28の何れか一項に記載の抗体及び薬学的に許容可能な担体を含む、薬学的組成物。
- 請求項22−28の何れか一項に記載の抗CD83抗体をコードするヌクレオチド配列を含む、単離された核酸。
- 請求項30の核酸を含む、ベクター。
- ベクターが発現ベクターである、請求項31に記載のベクター。
- 請求項31又は32に記載のベクターを含む、宿主細胞。
- 宿主細胞が原核生物細胞又は真核生物細胞である、請求項33に記載の宿主細胞。
- 抗CD83抗体を作成する方法において、抗CD83抗体をコードする核酸の発現に適した条件下で請求項33の宿主細胞を培養することを含む、前記方法。
- 宿主細胞によって産生された抗CD83抗体を回収することを更に含む、請求項35に記載の方法。
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JP2013040160A (ja) | 2011-07-01 | 2013-02-28 | Genentech Inc | 自己免疫疾患を治療するための抗cd83アゴニスト抗体の使用 |
JP2013150592A (ja) * | 2011-07-01 | 2013-08-08 | Genentech Inc | 自己免疫疾患を治療するための抗cd83アゴニスト抗体の使用 |
JP6539585B2 (ja) * | 2013-02-01 | 2019-07-03 | デンドロサイト バイオテック ピーティーワイ リミテッド | 抗cd83抗体及びその使用 |
AU2015336931B2 (en) * | 2014-10-23 | 2021-04-29 | Kira Biotech Pty Limited | CD83 binding proteins and uses thereof |
US9982057B2 (en) | 2014-11-17 | 2018-05-29 | Pelican Therapeutics, Inc. | Human TNFRSF25 antibody |
CN109320610B (zh) * | 2015-01-27 | 2021-07-27 | 中国科学技术大学先进技术研究院 | 抗人cd83单克隆抗体及其制备、鉴定和应用 |
EP3468998B1 (en) | 2016-06-09 | 2021-12-01 | Pelican Therapeutics, Inc. | Anti-tnfrsf25 antibodies |
US11192943B2 (en) * | 2017-09-30 | 2021-12-07 | Hefei Lifeon Pharmaceutical Co., Ltd. | Protein binding to fibronectin B domain |
MA51917A (fr) * | 2018-02-23 | 2021-06-02 | H Lee Moffitt Cancer Center & Res Institute Inc | Récepteurs antigéniques chimériques se liant à cd83 |
EP4013447A4 (en) * | 2019-08-16 | 2024-05-29 | H Lee Moffitt Cancer Center & Res Institute Inc | T CELLS EXPRESSING A CHIMERIC ANTI-CD83 ANTIGEN RECEPTOR |
CA3224385A1 (en) * | 2019-08-16 | 2021-02-25 | H. Lee Moffitt Cancer Center And Research Institute Inc. | Chimeric antigen receptors for treating myeloid malignancies |
US20230051885A1 (en) * | 2019-12-18 | 2023-02-16 | H. Lee Moffitt Cancer Center And Research Institute Inc. | Systems and Methods for Producing Efficacious Regulatory T Cells |
EP3895723A1 (en) * | 2020-04-16 | 2021-10-20 | Friedrich-Alexander-Universität Erlangen-Nürnberg | Scd83 for wound healing, hair growth, and skin and hair care |
WO2024077052A1 (en) * | 2022-10-04 | 2024-04-11 | Emergent Product Development Gaithersburg Inc. | Novel vsv virus formulations |
Family Cites Families (68)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
USRE30985E (en) | 1978-01-01 | 1982-06-29 | Serum-free cell culture media | |
US4657760A (en) | 1979-03-20 | 1987-04-14 | Ortho Pharmaceutical Corporation | Methods and compositions using monoclonal antibody to human T cells |
US4419446A (en) | 1980-12-31 | 1983-12-06 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Recombinant DNA process utilizing a papilloma virus DNA as a vector |
NZ201705A (en) | 1981-08-31 | 1986-03-14 | Genentech Inc | Recombinant dna method for production of hepatitis b surface antigen in yeast |
US4601978A (en) | 1982-11-24 | 1986-07-22 | The Regents Of The University Of California | Mammalian metallothionein promoter system |
US4560655A (en) | 1982-12-16 | 1985-12-24 | Immunex Corporation | Serum-free cell culture medium and process for making same |
US4657866A (en) | 1982-12-21 | 1987-04-14 | Sudhir Kumar | Serum-free, synthetic, completely chemically defined tissue culture media |
US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
DD266710A3 (de) | 1983-06-06 | 1989-04-12 | Ve Forschungszentrum Biotechnologie | Verfahren zur biotechnischen Herstellung van alkalischer Phosphatase |
US4767704A (en) | 1983-10-07 | 1988-08-30 | Columbia University In The City Of New York | Protein-free culture medium |
US4965199A (en) | 1984-04-20 | 1990-10-23 | Genentech, Inc. | Preparation of functional human factor VIII in mammalian cells using methotrexate based selection |
US4879231A (en) | 1984-10-30 | 1989-11-07 | Phillips Petroleum Company | Transformation of yeasts of the genus pichia |
US5206344A (en) | 1985-06-26 | 1993-04-27 | Cetus Oncology Corporation | Interleukin-2 muteins and polymer conjugation thereof |
GB8516415D0 (en) | 1985-06-28 | 1985-07-31 | Celltech Ltd | Culture of animal cells |
US4676980A (en) | 1985-09-23 | 1987-06-30 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Target specific cross-linked heteroantibodies |
US6548640B1 (en) | 1986-03-27 | 2003-04-15 | Btg International Limited | Altered antibodies |
US4927762A (en) | 1986-04-01 | 1990-05-22 | Cell Enterprises, Inc. | Cell culture medium with antioxidant |
GB8610600D0 (en) | 1986-04-30 | 1986-06-04 | Novo Industri As | Transformation of trichoderma |
US5567610A (en) | 1986-09-04 | 1996-10-22 | Bioinvent International Ab | Method of producing human monoclonal antibodies and kit therefor |
ATE108068T1 (de) | 1987-09-23 | 1994-07-15 | Bristol Myers Squibb Co | Antikörper-heterokonjugate zur töting von hiv- infizierten zellen. |
ATE135397T1 (de) | 1988-09-23 | 1996-03-15 | Cetus Oncology Corp | Zellenzuchtmedium für erhöhtes zellenwachstum, zur erhöhung der langlebigkeit und expression der produkte |
GB8823869D0 (en) | 1988-10-12 | 1988-11-16 | Medical Res Council | Production of antibodies |
US5175384A (en) | 1988-12-05 | 1992-12-29 | Genpharm International | Transgenic mice depleted in mature t-cells and methods for making transgenic mice |
FR2646437B1 (fr) | 1989-04-28 | 1991-08-30 | Transgene Sa | Nouvelles sequences d'adn, leur application en tant que sequence codant pour un peptide signal pour la secretion de proteines matures par des levures recombinantes, cassettes d'expression, levures transformees et procede de preparation de proteines correspondant |
EP0402226A1 (en) | 1989-06-06 | 1990-12-12 | Institut National De La Recherche Agronomique | Transformation vectors for yeast yarrowia |
DE3920358A1 (de) | 1989-06-22 | 1991-01-17 | Behringwerke Ag | Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung |
ES2096590T3 (es) | 1989-06-29 | 1997-03-16 | Medarex Inc | Reactivos biespecificos para la terapia del sida. |
US5225212A (en) | 1989-10-20 | 1993-07-06 | Liposome Technology, Inc. | Microreservoir liposome composition and method |
US6150584A (en) | 1990-01-12 | 2000-11-21 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
SG48759A1 (en) | 1990-01-12 | 2002-07-23 | Abgenix Inc | Generation of xenogenic antibodies |
US6075181A (en) | 1990-01-12 | 2000-06-13 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
US5229275A (en) | 1990-04-26 | 1993-07-20 | Akzo N.V. | In-vitro method for producing antigen-specific human monoclonal antibodies |
US5633425A (en) | 1990-08-29 | 1997-05-27 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US5661016A (en) | 1990-08-29 | 1997-08-26 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes |
US5625126A (en) | 1990-08-29 | 1997-04-29 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
EP0546073B1 (en) | 1990-08-29 | 1997-09-10 | GenPharm International, Inc. | production and use of transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US5545806A (en) | 1990-08-29 | 1996-08-13 | Genpharm International, Inc. | Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5122469A (en) | 1990-10-03 | 1992-06-16 | Genentech, Inc. | Method for culturing Chinese hamster ovary cells to improve production of recombinant proteins |
US5571894A (en) | 1991-02-05 | 1996-11-05 | Ciba-Geigy Corporation | Recombinant antibodies specific for a growth factor receptor |
CA2102511A1 (en) | 1991-05-14 | 1992-11-15 | Paul J. Higgins | Heteroconjugate antibodies for treatment of hiv infection |
WO1993006217A1 (en) | 1991-09-19 | 1993-04-01 | Genentech, Inc. | EXPRESSION IN E. COLI OF ANTIBODY FRAGMENTS HAVING AT LEAST A CYSTEINE PRESENT AS A FREE THIOL, USE FOR THE PRODUCTION OF BIFUNCTIONAL F(ab')2 ANTIBODIES |
US5565332A (en) | 1991-09-23 | 1996-10-15 | Medical Research Council | Production of chimeric antibodies - a combinatorial approach |
US5587458A (en) | 1991-10-07 | 1996-12-24 | Aronex Pharmaceuticals, Inc. | Anti-erbB-2 antibodies, combinations thereof, and therapeutic and diagnostic uses thereof |
WO1993008829A1 (en) | 1991-11-04 | 1993-05-13 | The Regents Of The University Of California | Compositions that mediate killing of hiv-infected cells |
AU3178993A (en) | 1991-11-25 | 1993-06-28 | Enzon, Inc. | Multivalent antigen-binding proteins |
DE69333807T2 (de) | 1992-02-06 | 2006-02-02 | Chiron Corp., Emeryville | Marker für krebs und biosynthetisches bindeprotein dafür |
US5573905A (en) | 1992-03-30 | 1996-11-12 | The Scripps Research Institute | Encoded combinatorial chemical libraries |
CA2140280A1 (en) | 1992-08-17 | 1994-03-03 | Avi J. Ashkenazi | Bispecific immunoadhesins |
DK0669836T3 (da) | 1992-11-13 | 1996-10-14 | Idec Pharma Corp | Terapeutisk anvendelse af kimære og radioaktivt mærkede antistoffer og humant B-lymfocytbegrænset differentieringsantigen til behandling af B-cellelymfom |
US5789199A (en) | 1994-11-03 | 1998-08-04 | Genentech, Inc. | Process for bacterial production of polypeptides |
US5731168A (en) | 1995-03-01 | 1998-03-24 | Genentech, Inc. | Method for making heteromultimeric polypeptides |
US5840523A (en) | 1995-03-01 | 1998-11-24 | Genetech, Inc. | Methods and compositions for secretion of heterologous polypeptides |
US5641870A (en) | 1995-04-20 | 1997-06-24 | Genentech, Inc. | Low pH hydrophobic interaction chromatography for antibody purification |
US5739277A (en) | 1995-04-14 | 1998-04-14 | Genentech Inc. | Altered polypeptides with increased half-life |
US5869046A (en) | 1995-04-14 | 1999-02-09 | Genentech, Inc. | Altered polypeptides with increased half-life |
EP1978033A3 (en) | 1995-04-27 | 2008-12-24 | Amgen Fremont Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
CA2219486A1 (en) | 1995-04-28 | 1996-10-31 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
DE19544393A1 (de) | 1995-11-15 | 1997-05-22 | Hoechst Schering Agrevo Gmbh | Synergistische herbizide Mischungen |
ES2301183T3 (es) | 1996-12-03 | 2008-06-16 | Amgen Fremont Inc. | Anticuerpo completamente humano que se une al receptor del egfr. |
IL136544A0 (en) | 1997-12-05 | 2001-06-14 | Scripps Research Inst | Humanization of murine antibody |
GB9809951D0 (en) | 1998-05-08 | 1998-07-08 | Univ Cambridge Tech | Binding molecules |
US20040185040A1 (en) * | 2001-11-21 | 2004-09-23 | Celltech R & D Limited | Modulating immune responses |
WO2003045318A2 (en) | 2001-11-21 | 2003-06-05 | Celltech R & D, Inc. | Manipulation of cytokine levels using cd83 gene products |
AU2002950779A0 (en) | 2002-08-15 | 2002-09-12 | The Corporation Of The Trustees Of The Order Of The Sisters Of Mercy In Queensland | A method of immunomodulation |
EP1572976B1 (en) | 2002-11-21 | 2010-09-15 | Celltech R & D, Inc. | Modulating immune responses |
US7169898B2 (en) * | 2002-12-04 | 2007-01-30 | Alexander Steinkasserer | Soluble CD83 proteins and use thereof for the treatment or prevention of a disease or medical condition caused by dysfunction or undesired function of a cellular immune response involving T cells |
AU2005313971B2 (en) * | 2004-12-08 | 2011-10-13 | Immunomedics, Inc. | Methods and compositions for immunotherapy and detection of inflammatory and immune-dysregulatory disease, infectious disease, pathologic angiogenesis and cancer |
JP2013040160A (ja) | 2011-07-01 | 2013-02-28 | Genentech Inc | 自己免疫疾患を治療するための抗cd83アゴニスト抗体の使用 |
-
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