JP6148708B2 - 迅速核酸抽出方法および装置 - Google Patents
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Description
Claims (26)
- 洗浄緩衝液を入れた破断可能なカプセルを製造するステップと、
前記カプセルをシリンジデバイスに挿入するステップであって、該カプセルが前記シリンジデバイスの下端部の上かつ前記シリンジデバイスのプランジャの下に位置するように、前記カプセルを挿入するステップと、
前記シリンジデバイスの下端部を、核酸を含む溶液の入った容器に挿入するステップであって、該容器は、さらに、核酸を捕捉するように構成した薄膜を備えることを特徴とする、前記シリンジデバイスの下端部を挿入するステップと、
前記シリンジデバイスのプランジャを押し込むステップであっで、まず、前記薄膜を介して前記溶液を押し出し、前記薄膜により核酸を保持する一方、前記溶液中の不要な成分は薄膜を透過させるようにする、押し込むステップと、
その後、前記カプセルを破断させて前記洗浄緩衝液を放出するステップと、 さらに、前記シリンジデバイスのプランジャを前進させるステップであって、前記薄膜を介して前記シリンジデバイスの下端部の外に前記洗浄緩衝液を排出する一方、純粋な核酸を前記薄膜上に残すようにする、前進させるステップと、を備える方法。 - 前記プランジャを押し込むことにより生成された空気圧により、前記溶液が前記薄膜を介して押し出されることを特徴とする、請求項1に記載の方法。
- 前記薄膜をさらに洗浄するように構成した第2のシリンジ装置を用いて、選別された核酸を溶出するステップを備える、請求項1または2に記載の方法。
- 選別された核酸が、RNA、DNA、相補的DNA、相補的RNA、修飾DNA、修飾RNA、転移RNA、リボゾームRNA、tmRNA、PNA、LNA、GNA、またはTNAのうちの1つを含むことを特徴とする、請求項3に記載の方法。
- 前記破断可能なカプセルは、前記洗浄緩衝液を放出するように破断可能な立体中空体部品と、前記立体中空体部品に取り付けた材料と、を備えることを特徴とする、請求項1〜4のいずれか1項に記載の方法。
- 前記材料は金属薄箔であり、前記薄箔を穿孔して前記カプセルを破断することを特徴とする、請求項5に記載の方法。
- 開口を備える上端と、核酸を保持するように構成した薄膜で塞いだ下端とを有する第1の容器を用い、さらに、バレル、および、前記バレル内に移動可能に取り付けたプランジャを備えたシリンジデバイスを用いる、迅速核酸抽出方法であって、
洗浄緩衝液を入れた洗浄緩衝液放出カプセルを製造するステップと、
前記洗浄緩衝液放出カプセルを前記シリンジデバイスに挿入するステップと、
第2の容器に核酸作成溶液をあらかじめ充填するステップであって、該核酸作成溶液は、生試料の細胞を破壊して核酸を放出させ、かつ、前記核酸を維持するように選択したものである、充填するステップと、
核酸を含む生試料を、前記あらかじめ充填した第2の容器に投入し、第2の容器の内容物を攪拌して、処理済み核酸抽出用溶液を生成するステップと、
選択した量の処理済み核酸溶液を前記第1の容器に充填するステップと、
前記シリンジデバイスを前記第1の容器に挿入するステップと、
前記シリンジデバイスのプランジャを下方に押し込むステップであって、空気圧によって処理済み核酸溶液を前記薄膜を介してまず押し出すことにより、前記薄膜上に核酸を捕捉する一方、処理済み核酸溶液の他の成分は薄膜を透過させるステップと、
その後、前記プランジャ下の位置で前記洗浄緩衝液放出カプセルから前記洗浄緩衝液を放出するステップと、
さらに、前記プランジャを下方に前進させるステップであって、前記薄膜を介して前記洗浄緩衝液を排出することにより、純粋な核酸を薄膜上に残すようにする、前進させるステップと、を備える方法。 - 前記生試料は、固形物を含むことを特徴とする、請求項7に記載の方法。
- 前記生試料は、液体であることを特徴とする、請求項7に記載の方法。
- 前記第2の容器の内容物を撹拌することにより、前記試料を前記核酸作成溶液と混合することを特徴とする、請求項7〜9のいずれか1項に記載の方法。
- 前記第2の容器の内容物は、震盪ステップを用いることにより攪拌することを特徴とする、請求項7〜9のいずれか1項に記載の方法。
- 第2のシリンジ装置を用いて前記薄膜をさらに洗浄して、選別された核酸を溶出するステップをさらに備える、請求項7〜11のいずれか1項に記載の方法。
- 前記選別された核酸は、RNA、DNA、相補的DNA、相補的RNA、修飾DNA、修飾RNA、転移RNA、リボゾームRNA、tmRNA、PNA、LNA、GNA、またはTNAのうちの1つを含むことを特徴とする、請求項12に記載の方法。
- 前記カプセルは、前記洗浄緩衝液を放出するように破断可能な立体中空体部品と、前記立体中空体部品に取り付けた材料と、を備えることを特徴とする、請求項7〜13のいずれか1項に記載の方法。
- 洗浄緩衝液を入れた破断可能なカプセルを製造するステップと、
前記カプセルをシリンジデバイスに挿入するステップと、
核酸溶液と、核酸を捕捉するように構成した薄膜と、を備える容器に前記シリンジデバイスを挿入するステップと、
前記シリンジデバイスのプランジャを押し込むステップであって、まず、前記薄膜を介して前記溶液を押し出す、プランジャを押し込むステップと、
その後、前記カプセルを破断させて前記洗浄緩衝液を放出するステップと、
さらに、前記プランジャを前進させるステップであって、前記薄膜を介して前記洗浄緩衝液を排出する、前進させるステップと、を備える方法。 - シリンジデバイスの下端部の上かつ前記シリンジデバイスのプランジャの下に位置する、洗浄緩衝液の入った破断可能なカプセルを含むシリンジデバイスを用いる核酸抽出方法であって、
前記シリンジデバイスの下端部を、核酸を含む溶液の入った容器に挿入するステップであって、該容器は、さらに、核酸を捕捉するように構成した薄膜を備えることを特徴とする、挿入するステップと、
前記シリンジデバイスのプランジャを押し込むステップであって、まず、前記薄膜を介して前記溶液を押し出し、前記薄膜により核酸を保持する一方、溶液中の不要な成分は薄膜を透過させるようにする、押し込むステップと、
その後、前記カプセルを破断させて前記洗浄緩衝液を放出するステップと、 さらに、前記シリンジデバイスのプランジャを前進させるステップであって、前記薄膜を介して前記シリンジデバイスの下端部の外に前記洗浄緩衝液を排出する一方で、純粋な核酸を前記薄膜上に残すようにする、前進させるステップと、を備える方法。 - 前記プランジャを押し込むことにより、生成された空気圧により、前記溶液が前記薄膜を介して押し出されることを特徴とする、請求項16に記載の方法。
- 前記薄膜をさらに洗浄するように構成した第2のシリンジ装置を用いて、選別された核酸を溶出するステップを備える、請求項16または17に記載の方法。
- 前記選別された核酸は、RNA、DNA、相補的DNA、相補的RNA、修飾DNA、修飾RNA、転移RNA、リボゾームRNA、tmRNA、PNA、LNA、GNA、またはTNAのうちの1つを含むことを特徴とする、請求項18に記載の方法。
- 前記破断可能なカプセルは、前記洗浄緩衝液を放出するように破断可能な立体中空体部品と、前記立体中空体部品に取り付けた材料と、を備えることを特徴とする、請求項16〜19のいずれか1項に記載の方法。
- 核酸抽出用溶液を収容するように構成し、また、下端部に位置する薄膜を有する第1の容器であって、前記薄膜は核酸を捕捉する一方で前記溶液のその他の成分を透過させるように構成したことを特徴とする、第1の容器と、
前記第1の容器の開口上端部内に挿入可能なシリンジであって、該シリンジは、シリンジのプランジャの作動に応じて下方に移動可能なカプセルを備え、該カプセルは、その下端部に取り付けたスパイクを有し、該スパイクは、カプセルの下端部の外へ延在する第1の端部を有し、該カプセルは、さらに、その上部開口全体にわたって設けた封止材を有し、該カプセルには、さらに、緩衝溶液が入っていることを特徴とする、シリンジと、を備え、
前記カプセルの前記シリンジ内部における構成および位置は、該シリンジ内部で該カプセルが下方へ移動することにより、まず、第1の容器内にある核酸溶液が薄膜を通って押し出され、その後、前記スパイクが前記シリンジの下面に接触して前記封止材を穿刺することにより前記緩衝溶液が前記第1の容器に放出されるような構成および位置としたことを特徴とする、核酸抽出装置。 - 請求項21に記載の核酸抽出装置であって、さらに、
前記シリンジがさらに下方へ移動することにより、前記緩衝溶液が前記薄膜を通って押し出され、その結果として純粋な核酸が薄膜上に残留するように構成した、
核酸抽出装置。 - 請求項21に記載の核酸抽出装置は、前記薄膜をさらに洗浄して、選別された核酸を溶出するように構成した第2のシリンジ装置を備える、
核酸抽出装置。 - 請求項23に記載の核酸抽出装置において、
前記選別された核酸は、RNA、DNA、相補的DNA、相補的RNA、修飾DNA、修飾RNA、転移RNA、リボゾームRNA、tmRNA、PNA、LNA、GNA、またはTNAのうちの1つを含むことを特徴とする、
核酸抽出装置。 - 核酸を含む溶液を入れた容器であって、さらに、核酸を捕捉するように構成した薄膜を備えた容器と、
洗浄緩衝液を含む破断可能なカプセルと、
前記カプセルを破断して前記洗浄緩衝液を放出する破断部品と、
シリンジデバイスであって、前記カプセルが該シリンジデバイス内の下端部の上および該シリンジデバイスのプランジャの下に位置し、前記シリンジデバイスの下端部は、前記容器の開口端に嵌め込むように成形してある、シリンジデバイスと、
前記薄膜は核酸を保持する一方、溶液の不要な成分は薄膜を透過するように、まず、前記薄膜を介して前記溶液を押し出す、押し下げ可能な前記シリンジデバイスのプランジャと、を備える核酸抽出装置であって、
前記破断部品に前記カプセルを破断させ、前記洗浄緩衝液を放出し、その後、前記薄膜を介して前記シリンジデバイスの下端部の外に前記洗浄緩衝液を排出することで前記薄膜上に純粋な核酸を残すように、前記プランジャはさらに押し下げ可能であることを特徴とする、装置。 - 洗浄緩衝液の入った、破断可能なカプセルと、
プランジャの下方に配置した前記カプセルを含むシリンジデバイスと、
前記カプセルと連動して設けた封止機構であって、前記カプセルと前記シリンジデバイスとの間を封止すると同時に、前記シリンジデバイスに対して移動が可能である封止機構と、
前記カプセルを破断する破断機構と、
核酸溶液を収容する容器であって、核酸を補足するように配置されかつ構成された薄膜を備えた容器と、
を備えた装置であって、
前記カプセル、前記シリンジ、前記プランジャ、前記封止機構、および前記破断機構は、空気圧を前記シリンジから前記容器に印加し、その後、前記カプセルに入った洗浄緩衝液を前記シリンジから前記容器に供給するように構成したことを特徴とする、装置。
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