JP6104232B2 - コーティング組成物および医療機器 - Google Patents

Description

本発明は、薬剤溶出性の医療機器のためのコーティング組成物、薬剤溶出性の医療機器の薬剤コート層および／またはそのコーティング組成物でコートされた薬剤溶出性の医療機器に関する。

局所薬剤デリバリー治療の一例として、薬剤溶出ステント（ＤＥＳ）がある。
ＤＥＳは、局所で薬剤を長期にわたって持続的に放出することによって、血管の再狭窄を防止するよう設計されている。ＤＥＳの薬剤徐放は、ポリ乳酸（ＰＬＡ）等のポリマーコンジュゲートにより達成されている。しかし、ポリマーが長期的に生体内に残存するため、病変患部での慢性炎症や遅発性血栓など、重篤な合併症が課題とされている。

従来、再狭窄を抑制するには、長期の薬剤徐放が必要であると報告されてきた。ところが、近年では、薬剤を標的組織に急速に移行させ、短期の薬剤持続効果でも再狭窄が防止できることが明らかになりつつある。急速に薬剤を送達する技術では、徐放のためのＰＬＡやポリ乳酸−グリコール酸共重合体（ＰＬＧＡ）などのポリマーマトリクスを必要とせず、合併症を回避するために有利である。

また、近年、バルーンカテーテルに薬剤をコートした薬剤溶出バルーン（Ｄｒｕｇ Ｅｌｕｔｉｎｇ Ｂａｌｌｏｏｎ；ＤＥＢ）の開発も積極的に行われており、再狭窄の治療および予防に効果的であると報告されている。バルーンは、薬剤および添加剤を含むコーティングによってコートされており、血管を拡張した際に、バルーンを血管壁に押し付け、薬剤を標的組織に送達させる。

しかし、バルーンが標的組織に送達されるまでの過程で、薬剤が容易にバルーンから剥がれると、病変患部に送達されたときには既に、治療効果に十分な薬剤がバルーンに残存しない状態になり、期待される治療効果が望めない。また、送達過程で容易に剥がれてしまった薬剤は、不必要に血中に暴露することになるため、安全性の面でも好ましくない。従って、薬剤でコートしたバルーンカテーテルを、病変患部に薬剤が剥がれることなく送達させ、拡張と同時にバルーンを血管壁に押し付け、薬剤を迅速に放出させることを可能にする薬剤コート層が望まれる。

親水性薬物は、親水性ポリマーのハイドロゲルによってコーティングされたバルーンカテーテルを用いることで送達可能であるとの報告がある。一方で、水不溶性薬剤の場合は、ハイドロゲルを形成するような親水性ポリマーとは混合することが難しい場合があり、効果的に薬剤を送達することが困難である。たとえ混合することができたとしても、親水性の高いポリマーと薬剤とを混合したコーティング層は、医療機器との付着性が乏しく、その高い極性の影響により標的組織に送達される間に容易に血中へ溶出すると考えられる。したがって、親水性のポリマーを用いた場合、病変患部に送達する過程で容易に脱落し、標的組織への薬剤移行性を高めることは困難である。

一方、水で溶解しないような疎水性の高い疎水性ポリマーを用いた場合、水不溶性薬物との疎水性相互作用が強いため、送達過程における薬剤コート層の耐性は改善されるが、一方で、薬剤と疎水性ポリマーとの疎水性相互作用が強いため病変患部において薬剤を迅速に放出することができない。また、水不溶性の疎水性薬剤同士の疎水性相互作用も強まり、互いにおよび医療機器表面に凝集し、均一にコーティングすることができない。このようにコートされた、凝集した薬剤状態は取り扱いの間に脱落しやすく、安全性および機能面で望まれない状態である。

また、薬剤と一緒にコーティングされる低分子化合物について、その化合物の疎水性が強すぎると、水不溶性薬剤との疎水性相互作用が強くなり、かつ、これらの疎水性領域がバルーン表面と強い親和性をもつため、バルーンが患部（血管内表面）と接触しても薬剤がバルーンから患部へ放出（移行）しにくくなる。さらに、疎水性薬剤と一緒に混合する低分子化合物の疎水性が強いと、水不溶性薬剤同士の疎水性相互作用が強くなり、医療機器表面に凝集しやすく、均一にコートすることが難しい場合がある。また、凝集した状態で医療機器表面にコートされた薬剤は、取り扱いの間に容易にバルーン表面から脱落しやすく、安全性および機能面で好ましくない。

一方、低分子化合物の親水性が強すぎると、水不溶性薬剤と混合することが難しい場合があり、安定な薬剤コート層溶液を調製することが困難になる場合や、その強い親水性によって、薬剤とともに容易に血流に流される可能性も出てくる。従って、薬剤と一緒にコーティングされる低分子化合物には、水不溶性薬剤同士の疎水性相互作用を緩和し、薬剤を均一に分散させることのできる極性を有すると共に、水不溶性薬剤と親和性のある疎水性領域も共存することが望ましい。

従って、水不溶性薬剤と混合する化合物は、ポリマーに関しても、低分子化合物に関しても、水不溶性薬剤と良好に混和するための極性のバランスが重要である。

そのため、再狭窄などの血管患部を治療するために、標的組織に送達する過程で薬剤が容易に医療機器から剥がれることなく送達することができ、送達後、病変患部において迅速に薬剤を放出し、薬剤の標的組織への移行性を高めことを可能にする医療機器の薬剤コート層が求められている。

そこで、本発明は、標的組織に送達する過程で容易に剥がれない薬剤コート層を形成し、患部においては迅速に薬剤を放出することができる、薬剤溶出性の医療機器のためのコーティング組成物を提供することを課題とする。

本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意検討を重ねたところ、水不溶性薬剤と、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸のヒドロキシ基の水素原子の少なくとも一部をアルカノイル基で置換したアルカノイル化ヒアルロン酸およびそれらの塩からなる群から選択される少なくとも１つと、アミノ酸エステルおよびその塩からなる群から選択される少なくとも１つとを含有するコーティング組成物を用いると、医療機器の表面に、標的組織に送達する過程で容易に剥がれず、かつ標的組織では医療機器の拡張と同時に血管内表面に薬剤を迅速に放出（移行）できる薬剤コート層を形成することができることを知得し、本発明を完成させた。

すなわち、本発明は次の（１）〜（１７）を提供する。
（１）水不溶性薬剤と、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸のヒドロキシ基の水素原子の少なくとも一部をアルカノイル基で置換したアルカノイル化ヒアルロン酸およびそれらの塩からなる群から選択される少なくとも１つと、アミノ酸エステルおよびその塩からなる群から選択される少なくとも１つとを含有する、薬剤溶出性の医療機器のためのコーティング組成物。
（２）前記アルカノイル基が下記式で表される、上記（１）に記載のコーティング組成物。

［式中、Ｒ_０は、炭素数５以下のアルキル基、ベンジル基またはフェニル基である。］
（３）前記アルカノイル基がアセチル基、プロピオニル基、イソブチリル基およびブチリル基からなる群から選択される少なくとも１つである、上記（１）または（２）に記載のコーティング組成物。
（４）前記ヒドロキシ基の水素原子の前記アルカノイル基による置換数が、前記ヒアルロン酸の１ユニットあたり、平均０．０１〜４個である、上記（１）〜（３）のいずれかに記載のコーティング組成物。
（５）前記ヒアルロン酸、ヒアルロン酸のヒドロキシ基の水素原子の少なくとも一部をアルカノイル基で置換したアルカノイル化ヒアルロン酸およびそれらの塩からなる群から選択される少なくとも１つの平均分子量が５×１０^３〜２×１０^５である、上記（１）〜（４）のいずれかに記載のコーティング組成物。
（６）前記アミノ酸エステルが、下記式で表される、上記（１）〜（５）のいずれかに記載のコーティング組成物。

［式中、Ｒ_１は、水素原子、メチル基、グアニジノプロピル基、カルバモイルメチル基、カルボキシメチル基、メトキシカルボニルメチル基、エトキシカルボニルメチル基、メルカプトメチル基、２−カルバモイル−エチル基、２−カルボキシエチル基、２−メトキシカルボニルエチル基、２−エトキシカルボニルエチル基、（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）メチル基、１−メチルプロピル基、２−メチルプロピル基、４−アミノブチル基、２−（メチルチオ）エチル基、ベンジル基、ヒドロキシメチル基、１−ヒドロキシエチル基、（１Ｈ−インドール−３−イル）メチル基、４−ヒドロキシベンジル基もしくはイソプロピル基であるか、またはＲ_２とともにトリメチレン基を形成し、Ｒ_２は、水素原子であるか、またはＲ_１とともにトリメチレン基を形成し、Ｒ_３は、水素原子、炭素数５以下のアルキル基、ベンジル基またはベンゾイル基であり、Ｒ_４は、炭素数５以下のアルキル基、ベンジル基またはフェニル基である。］
（７）前記アミノ酸エステルが、Ｌ−アラニン、Ｌ−アルギニン、Ｌ−アスパラギン、Ｌ−システイン、Ｌ−グルタミン、グリシン、Ｌ−ヒスチジン、Ｌ−イソロイシン、Ｌ−ロイシン、Ｌ−リシン、Ｌ−メチオニン、Ｌ−フェニルアラニン、Ｌ−プロリン、Ｌ−セリン、Ｌ−トレオニン、Ｌ−トリプトファン、Ｌ−バリン、Ｎ−ベンジルグリシンおよびＮα−ベンゾイル−Ｌ−アルギニンからなる群から選択されるいずれか１のアミノ酸のメチルエステルもしくはエチルエステル、またはＬ−アスパラギン酸およびＬ−グルタミン酸からなる群から選択されるいずれか１のアミノ酸のモノメチルエステル、ジメチルエステル、モノエチルエステルもしくはジエチルエステルである、上記（１）〜（６）のいずれかに記載のコーティング組成物。
（８）前記ヒアルロン酸もしくはそのヒドロキシ基の水素原子の少なくとも一部をアルカノイル基で置換したアルカノイル化ヒアルロン酸またはその塩の含有量（Ａ）と、前記アミノ酸エステルまたはその塩の含有量（Ｂ）との質量比（Ａ／Ｂ）が、０．０００８〜０．８（質量／質量）である、上記（１）〜（７）のいずれかに記載のコーティング組成物。
（９）さらに低級アルコールを含有する、上記（１）〜（８）のいずれかに記載のコーティング組成物。
（１０）前記低級アルコールがグリセリンである、上記（９）に記載のコーティング組成物。
（１１）前記水不溶性薬剤が、パクリタキセル、ラパマイシン、ドセタキセルおよびエベロリムスからなる群から選択される少なくとも１つである、上記（１）〜（１０）のいずれかに記載のコーティング組成物。
（１２）前記医療機器が、管腔内で径方向に拡張可能な医療機器である、上記（１）〜（１１）のいずれかに記載のコーティング組成物。
（１３）前記管腔内で径方向に拡張可能な医療機器がバルーンカテーテルまたはステントである、上記（１２）に記載のコーティング組成物。
（１４）上記（１）〜（１３）のいずれかのコーティング組成物により医療機器の表面の少なくとも一部に形成される薬剤コート層。
（１５）上記（１）〜（１１）のいずれかに記載のコーティング組成物でコートされた管腔内で径方向に拡張可能な医療機器。
（１６）上記（１５）に記載の医療機器を管腔内に送達するステップと、上記管腔内で上記医療機器を径方向に拡張させるステップと、上記医療機器の表面の少なくとも一部に形成された薬剤コート層から薬剤を溶出させ、上記管腔に薬剤を作用させるステップとを備える治療方法。

本発明によれば、標的組織に送達する過程で容易に剥がれず、かつ標的組織では医療機器の拡張と同時に血管内表面に薬剤を迅速に放出（移行）する薬剤コート層を形成することができる、薬剤溶出性の医療機器のためのコーティング組成物を提供することができる。

本発明のコーティング組成物で形成した薬剤コート層を有する薬剤溶出性の医療機器を用いると、薬剤コート層の脱落を抑えながら病変患部に効率よく薬剤を送達させることができる。しかも、病変患部における１〜２分の拡張時間において、薬剤を迅速に放出することができ、薬剤の組織移行性を高めることができる。

図１は、模倣血管を用いた薬剤コート層耐性評価試験において、模倣血管内に設置したガイディングカテーテルに、バルーンカテーテルを挿入した状態の実験装置の断面模式図である。 図２は、模倣血管を用いた薬剤コート層耐性評価における、実施例１〜９、１１〜１３および比較例Ｃ１〜Ｃ４の薬剤溶出バルーンのデリバリー操作後のバルーン上パクリタキセル残存率を表すグラフである。 図３は、ウサギ腸骨動脈における薬剤組織移行性評価における、実施例１、７、９、１２および１４〜１８、ならびに比較例Ｃ５〜Ｃ７の血管組織中パクリタキセル量を表すグラフである。 図４は、ウサギ腹大動脈における組織中薬剤滞留性評価における、実施例１９の、血管内拡張１時間後および２４時間後の血管組織中パクリタキセル量を表すグラフである。 図５は、ブタ冠動脈における有効性評価における、実施例１０および比較例Ｃ７、Ｃ８の狭窄率を表すグラフである。

１．コーティング組成物
本発明のコーティング組成物は、水不溶性薬剤と、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸のヒドロキシ基の水素原子の少なくとも一部をアルカノイル基で置換したアルカノイル化ヒアルロン酸およびそれらの塩からなる群から選択される少なくとも１つと、アミノ酸エステルおよびその塩からなる群から選択される少なくとも１つとを含有する、薬剤溶出性の医療機器のためのコーティング組成物である。

本発明のコーティング組成物は、水不溶性薬剤と、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸のヒドロキシ基の水素原子の少なくとも一部をアルカノイル基で置換したアルカノイル化ヒアルロン酸およびそれらの塩からなる群から選択される少なくとも１つと、アミノ酸エステルおよびその塩からなる群から選択される少なくとも１つとが混じりあった混合物（ブレンド）である。これらの各成分は互いに共有結合で結合していない。
本発明のコーティング組成物に混合されるアミノ酸エステルおよびその塩は、アミノ基の塩、例えば塩酸塩により極性（水溶性）が向上し、アミノ酸の側鎖によって、親水性／疎水性、塩基性／酸性などの異なる性質を示すことができる。本発明のアミノ酸エステル化合物およびその塩は、親水性領域を有するヒアルロン酸、ヒアルロン酸のヒドロキシ基の水素原子の少なくとも一部をアルカノイル基で置換したアルカノイル化ヒアルロン酸およびそれらの塩と共存するため、アミノ酸エステル化合物およびその塩の側鎖は、極性でも非極性でも良い。より好ましくは、ヒアルロン酸、アルカノイル化ヒアルロン酸およびそれらの塩が極性を有するため、アミノ酸エステル化合物およびその塩の側鎖は、非極性を有するのが好ましい。

（１）水不溶性薬剤
水不溶性薬剤とは、水に不溶または難溶性である薬剤を意味し、具体的には、水に対する溶解度が、ｐＨ５〜８で５ｍｇ／ｍＬ未満である。その溶解度は、１ｍｇ／ｍＬ未満、さらに、０．１ｍｇ／ｍＬ未満でもよい。水不溶性薬剤は脂溶性薬剤を含む。

いくつかの好ましい水不溶性薬剤の例は、免疫抑制剤、例えば、シクロスポリンを含むシクロスポリン類、ラパマイシン等の免疫活性剤、パクリタキセル等の抗がん剤、抗ウイルス剤または抗菌剤、抗新生組織剤、鎮痛剤および抗炎症剤、抗生物質、抗てんかん剤、不安緩解剤、抗麻痺剤、拮抗剤、ニューロンブロック剤、抗コリン作動剤およびコリン作動剤、抗ムスカリン剤およびムスカリン剤、抗アドレナリン作用剤、抗不整脈剤、抗高血圧剤、ホルモン剤ならびに栄養剤を含む。

水不溶性薬剤としては、ラパマイシン、パクリタキセル、ドセタキセルおよびエベロリムスからなる群から選択される少なくとも１つが好ましい。ラパマイシン、パクリタキセル、ドセタキセル、エベロリムスは、それぞれ、同様の薬効を有する限り、それらの類似体および／またはそれらの誘導体を含む。例えば、パクリタキセルとドセタキセルとは類似体の関係にあり、ラパマイシンとエベロリムスとは誘導体の関係にある。これらのうちでは、パクリタキセルがさらに好ましい。

（２）ヒアルロン酸、ヒアルロン酸のヒドロキシ基の水素原子の少なくとも一部をアルカノイル基で置換したアルカノイル化ヒアルロン酸およびそれらの塩からなる群から選択される少なくとも１つ
（２．１）ヒアルロン酸およびその塩
ヒアルロン酸は、下記式に示すように、グルクロン酸とＮ−アセチルグルコサミンの２糖が直鎖上に交互に結合した繰り返し構造からなり（ｎ＝正の整数）、その結合はβ―１，３グリコシド結合およびβ―１，４グリコシド結合である。

ヒアルロン酸の塩は、特に限定されないが、アルカリ金属塩が好ましく、ナトリウム塩がより好ましい。

ヒアルロン酸またはその塩の平均分子量は、特に限定されないが、５×１０^３〜２×１０^５であるものが好ましく、８×１０^４〜１．２×１０^５であるものがより好ましく、１×１０^５であるものがさらに好ましい。

（２．２）アルカノイル化ヒアルロン酸およびその塩
アルカノイル化ヒアルロン酸は、ヒアルロン酸のヒドロキシ基の水素原子の少なくとも一部をアルカノイル基で置換したヒアルロン酸の誘導体であり、その１ユニットは下記式で表される。

［式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３およびＲ_４は、それぞれ独立に、水素原子またはアルカノイル基である。］

アルカノイル基は、特に限定されないが、下記式

［式中、Ｒ_０は、炭素数５以下のアルキル基、ベンジル基およびフェニル基からなる群から選択されるいずれか１つである。］
で表されるものが好ましく、アセチル基（エタノイル基）、プロピオニル基（プロパノイル基）、イソブチリル基（２−メチルプロパノイル基）またはブチリル基（ブタノイル基）がより好ましく、アセチル基（エタノイル基）がさらに好ましい。

ヒアルロン酸のヒドロキシ基の水素原子のアルカノイル基による置換数は、特に限定されないが、平均で、０．０１〜４個／ユニットが好ましく、２．０〜４．０個／ユニットがより好ましく、２．５〜４．０個／ユニットがさらに好ましい。

アルカノイル化ヒアルロン酸の塩としては、特に限定されないが、アルカリ金属塩が好ましく、ナトリウム塩がより好ましい。

アルカノイル化ヒアルロン酸またはその塩の平均分子量は、特に限定されないが、５×１０^３〜２×１０^５であるものが好ましく、８×１０^４〜１．２×１０^５であるものがより好ましく、１×１０^５であるものがさらに好ましい。

ヒアルロン酸とアルカノイルヒアルロン酸とでは、アルカノイルヒアルロン酸がより好ましい。アルカノイル化ヒアルロン酸は疎水部と親水部とを有するが、疎水部は水不溶性薬剤や医療機器の表面との親和性を高めることができ、親水部は水不溶性薬剤同士の疎水性相互作用による凝集を防ぐため、本発明のコーティング組成物がアルカノイル化ヒアルロン酸を含有すると、水不溶性薬剤を医療器具の表面により均一に安定にコーティングすることができる。

また、ヒアルロン酸およびその誘導体は、血栓形成の誘導を起こさないなど生体適合性が高く、すみやかに生分解されるため、安全性の面でも好ましい。

本発明のコーティング組成物は、上記ヒアルロン酸、ヒアルロン酸のヒドロキシ基の水素原子の少なくとも一部をアルカノイル基で置換したアルカノイル化ヒアルロン酸および／またはそれらの塩を、合計で、上記水不溶性薬剤１００質量部に対して、好ましくは０．１〜１０質量部、より好ましくは１．０〜５．０質量部、さらに好ましくは２．０〜５．０質量部含有する。

（３）アミノ酸エステルおよびその塩からなる群から選択される少なくとも１つ
（３．１）アミノ酸エステル
アミノ酸エステルは、アミノ酸とアルコールまたはフェノールとのエステルであれば特に限定されないが、アミノ酸とアルコールとのエステルが好ましく、下記式で表されるものがより好ましい。

［式中、Ｒ_１は、水素原子、メチル基、グアニジノプロピル基、カルバモイルメチル基、カルボキシメチル基、メトキシカルボニルメチル基、エトキシカルボニルメチル基、メルカプトメチル基、２−カルバモイル−エチル基、２−カルボキシエチル基、２−メトキシカルボニルエチル基、２−エトキシカルボニルエチル基、（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）メチル基、１−メチルプロピル基、２−メチルプロピル基、４−アミノブチル基、２−（メチルチオ）エチル基、ベンジル基、ヒドロキシメチル基、１−ヒドロキシエチル基、（１Ｈ−インドール−３−イル）メチル基、４−ヒドロキシベンジル基もしくはイソプロピル基であるか、またはＲ_２とともにトリメチレン基を形成し、Ｒ_２は、水素原子であるか、またはＲ_１とともにトリメチレン基を形成し、Ｒ_３は、水素原子、炭素数５以下のアルキル基、ベンジル基またはベンゾイル基であり、Ｒ_４は、炭素数５以下のアルキル基、ベンジル基またはフェニル基である。］

上記アミノ酸エステルとしては、Ｌ−アラニン、Ｌ−アルギニン、Ｌ−アスパラギン、Ｌ−システイン、Ｌ−グルタミン、グリシン、Ｌ−ヒスチジン、Ｌ−イソロイシン、Ｌ−ロイシン、Ｌ−リシン、Ｌ−メチオニン、Ｌ−フェニルアラニン、Ｌ−プロリン、Ｌ−セリン、Ｌ−トレオニン、Ｌ−トリプトファン、Ｌ−バリン、Ｎ−ベンジルグリシンおよびＮα−ベンゾイルアルギニンからなる群から選択されるいずれか１つのアミノ酸のメチルエステルもしくはエチルエステル、またはＬ−アスパラギン酸およびＬ−グルタミン酸からなる群から選択されるいずれか１のアミノ酸のモノメチルエステル、ジメチルエステル、モノエチルエステルもしくはジエチルエステルがさらに好ましく、Ｌ−バリンメチルエステル、Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル、Ｌ−アラニンエチルエステル、Ｎ−ベンジルグリシンエチルエステル、Ｌ−アルギニンエチルエステル、Ｎα−ベンゾイル−Ｌ−アルギニンエチルエステル、Ｌ−アスパラギン酸ジメチルエステルまたはＬ−セリンエチルエステルがいっそう好ましく、Ｌ−バリンメチルエステルまたはＬ−アスパラギン酸ジメチルエステルがよりいっそう好ましい。

（３．２）アミノ酸エステルの塩
アミノ酸エステルの塩としては、上記アミノ酸エステルの、塩酸、酢酸等の無機酸または有機酸との塩が好ましく、塩酸塩がより好ましい。また、エステル結合の一部となっていない遊離のカルボキシ基が存在する場合には、ナトリウム等のアルカリ金属との塩も好ましい。

本発明のコーティング組成物は、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸のヒドロキシ基の水素原子の少なくとも一部をアルカノイル基で置換したアルカノイル化ヒアルロン酸およびそれらの塩からなる群から選択される少なくとも１つと、アミノ酸エステルおよびその塩からなる群から選択される少なくとも１つとを含有することによって、送達過程における薬剤コート層の脱落をより効果的に防ぐことが可能となった。

（４）含有量比
本発明のコーティング組成物においては、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸のヒドロキシ基の水素原子の少なくとも一部をアルカノイル基で置換したアルカノイル化ヒアルロン酸およびそれらの塩からなる群から選択される少なくとも１つの含有量（Ａ）と、アミノ酸エステルおよびその塩からなる群から選択される少なくとも１つの含有量（Ｂ）との質量比（Ａ／Ｂ）は、０．０００８〜０．８（質量／質量）が好ましく、０．００８〜０．４（質量／質量）がより好ましく、０．０１６〜０．１６（質量／質量）がさらに好ましい。

（５）組合せ
上記水不溶性薬剤と、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸のヒドロキシ基の水素原子の少なくとも一部をアルカノイル基で置換したアルカノイル化ヒアルロン酸およびそれらの塩からなる群から選択される少なくとも１つと、上記アミノ酸エステルおよびその塩からなる群から選択される少なくとも１つとの組合せは、特に限定されない。アセチル化ヒアルロン酸と、Ｌ−バリンメチルエステルおよび／またはＬ−アスパラギン酸ジメチルエステルとの組合せが好ましいものとして例示される。またアセチル化ヒアルロン酸と、Ｌ−フェニルアラニンエチルエステル／Ｌ−セリンエチルエステルとの組合せが好ましいものとして例示される。

（６）その他の好ましい含有成分
本発明のコーティング組成物は、さらに低級アルコールを含有することが好ましい。低級アルコールを含有すると、水不溶性薬剤の血管浸透性を増強することができ、また、薬剤コート層の均一性を高めることができる。低級アルコールは、炭素数５以下のアルコールであれば特に限定されないが、炭素数５以下のトリオールまたはテトラオールが好ましく、グリセリン（「グリセロール」または「プロパン−１，２，３−トリオール」ともいう。）、１，２，４−ブタントリール（「ブタン−１，２，４−トリオール」ともいう。）またはエリトリトール（「（２Ｒ，３Ｓ）−ブタン−１，２，３，４−テトラオール」ともいう。）がより好ましく、グリセリンがさらに好ましい。

上記低級アルコールを本発明の組成物に含有する場合、その含有量は、特に限定されないが、上記水不溶性薬剤１００質量部に対して、好ましくは１０〜５００質量部、より好ましくは３０〜３００質量部、さらに好ましくは５０〜２００質量部である。

（７）その他の含有してもよい成分
本発明のコーティング組成物は、上記成分の他に、水、エタノール、アセトン、テトラヒドロフラン等の、上記成分の溶媒を含んでもよく、さらに、本発明の効果を妨げないことを条件に、その他の添加剤を含有してもよい。

２．薬剤コート層
薬剤コート層は、本発明のコーティング組成物から形成された層であり、水不溶性薬剤と、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸のヒドロキシ基の水素原子の少なくとも一部をアルカノイル基で置換したアルカノイル化ヒアルロン酸およびそれらの塩からなる群から選択される少なくとも１つと、アミノ酸エステルおよびその塩からなる群から選択される少なくとも１つとを含有する層である。本発明の薬剤コート層は、医療機器の表面との親和性が高く、当該医療機器の送達過程においては剥離または脱落しにくいが、標的組織においては迅速に薬剤を放出することができる。

薬剤コート層は、本発明のコーティング組成物を、医療機器の表面にコートし、乾燥させることによって形成することができるが、この方法に限定されるものではない。

上記薬剤コート層には薬剤量を、特に限定されないが、０．１μｇ／ｍｍ^２〜１０μｇ／ｍｍ^２、好ましくは０．５μｇ／ｍｍ^２〜５μｇ／ｍｍ^２の密度で、より好ましくは０．５μｇ／ｍｍ^２〜３．５μｇ／ｍｍ^２、さらに好ましくは１．０μｇ／ｍｍ^２〜３．０μｇ／ｍｍ^２の密度で含有する。

３．薬剤溶出性の医療機器
本発明の薬剤溶出性の医療機器は、その表面上に直接、または有機溶剤やプライマー照射、ＵＶ照射等の前処理を介して上記薬剤コート層を有する。医療機器としては、血管等の管腔内で径方向（周方向）に拡張可能な医療機器が好ましく、バルーンカテーテルまたはステントがより好ましい。

本発明の薬剤溶出性の医療機器の表面の少なくとも一部には、水不溶性薬剤と、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸のヒドロキシ基の水素原子の少なくとも一部をアルカノイル基で置換したアルカノイル化ヒアルロン酸およびそれらの塩からなる群から選択される少なくとも１つと、アミノ酸エステルおよびその塩からなる群から選択される少なくとも１つとを含有する薬剤コート層が形成されている。この薬剤コート層は、医療機器の表面との親和性が高く、当該医療機器の送達過程において剥離または脱落しにくく、さらに、病変患部組織との親和性も高いため、標的組織においては迅速に薬剤を溶出することが期待される。バルーンカテーテルの場合、拡張部（バルーン）の外表面に薬剤コート層が形成される。またステントの場合、拡張部の外表面に薬剤コート層が形成される。

医療機器の拡張部の材質は、ある程度の柔軟性と血管や組織等に到達した時拡張されてその表面に有する薬剤コート層から薬剤を放出できるようにある程度の硬度を有するものが好ましい。具体的には、薬剤コート層が設けられる拡張部の表面は樹脂で構成されている。拡張部の表面を構成する樹脂としては、特に限定されないが、好適にはポリアミド類が挙げられる。すなわち、薬剤をコートする医療機器の拡張部の表面の少なくとも一部がポリアミド類である。ポリアミド類としては、アミド結合を有する重合体であれば特に制限されないが、例えば、ポリテトラメチレンアジパミド（ナイロン４６）、ポリカプロラクタム（ナイロン６）、ポリヘキサメチレンアジパミド（ナイロン６６）、ポリヘキサメチレンセバカミド（ナイロン６１０）、ポリヘキサメチレンドデカミド（ナイロン６１２）、ポリウンデカノラクタム（ナイロン１１）、ポリドデカノラクタム（ナイロン１２）などの単独重合体、カプロラクタム／ラウリルラクタム共重合体（ナイロン６／１２）、カプロラクタム／アミノウンデカン酸共重合体（ナイロン６／１１）、カプロラクタム／ω−アミノノナン酸共重合体（ナイロン６／９）、カプロラクタム／ヘキサメチレンジアンモニウムアジペート共重合体（ナイロン６／６６）などの共重合体、アジピン酸とメタキシレンジアミンとの共重合体、またはヘキサメチレンジアミンとｍ，ｐ−フタル酸との共重合体などの芳香族ポリアミドなどが挙げられる。さらに、ナイロン６、ナイロン６６、ナイロン１１、ナイロン１２などをハードセグメントとし、ポリアルキレングリコール、ポリエーテルまたは脂肪族ポリエステルなどをソフトセグメントとするブロック共重合体であるポリアミドエラストマーも、本発明に係る医療機器の基材として用いることができる。上記ポリアミド類は、１種類を単独で使用してもよいし、２種類以上を併用してもよい。

また、医療機器の拡張部の他の部分には、例えば、ポリエチレン、ポリプロピレン、エチレン−プロピレン共重合体等のポリオレフィン、ポリエチレンテレフタレート等のポリエステル、ポリ塩化ビニル、エチレン−酢酸ビニル共重合体、架橋型エチレン−酢酸ビニル共重合体、ポリウレタン等の熱可塑性樹脂、ポリアミド、ポリアミドエラストマー、シリコーンゴム、ラテックスゴム等が使用できる。

４．薬剤溶出性の医療機器を用いる治療方法
本発明の薬剤溶出性の医療機器を用いる治療方法は、当該医療機器の表面の少なくとも一部に形成された薬剤コート層から薬剤を溶出するステップを備える。より詳細には、本発明の薬剤溶出性の医療機器を用いる治療方法は、当該医療機器を管腔内に送達するステップと、前記管腔内で前記医療機器を径方向に拡張させるステップと、前記医療機器の表面の少なくとも一部に形成された薬剤コート層から薬剤を溶出させ、前記管腔に薬剤を作用させるステップとを備えることが好ましい。
上記本発明の薬剤溶出性の医療機器を管腔内に送達するステップは、従来公知のバルーンやステントと同様に行うことができる。例えば、本発明の薬剤溶出性のバルーンまたはステントを冠動脈の狭窄部に送達する場合には、患者の手首または太股の動脈から筒状になっているガイディングカテーテルを心臓冠動脈の入口部まで挿入し、ガイディングカテーテルの中にガイドワイヤーを挿入し、バルーンカテーテルをガイドワイヤーに沿って挿入することで、バルーンまたはステントを狭窄部に送達することができる。
本発明の薬剤溶出性の医療機器を管腔内で径方向に拡張させるステップは、従来公知のバルーンやステントと同様に行うことができる。
本発明の薬剤溶出性の医療機器の表面の少なくとも一部に形成された薬剤コート層から薬剤を溶出させ、前記管腔に薬剤を作用させるステップは、管腔内で拡張させた医療機器を、薬剤溶出バルーンを拡張したまま数十秒間〜数分間保持したり、薬剤溶出ステントを留置したりすることによって行うことができる。これにより、管腔が拡張され、薬剤コート層の薬剤が管腔組織に作用する。
本発明の薬剤溶出性の医療機器を用いる治療方法は、例えば、血管狭窄症の治療に適用することができ、薬剤としてパクリタキセル等の抗がん剤や免疫抑制剤など細胞増殖を抑える薬剤を利用することで、再狭窄を防止することができる。

本発明のコーティング組成物が含有するヒアルロン酸もしくはアルカノイル化ヒアルロン酸またはその塩は、血栓形成の誘導を起こさないなど生体適合性が高く、すみやかに生分解されるため、安全性の面でも好ましい薬剤溶出性の医療機器を提供することができる。

以下に実施例を示して本発明をより詳細に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。

［薬剤溶出バルーンの作製もしくは準備、または薬剤無塗布バルーンの準備］
〈実施例１〉
（１）コーティング溶液１の調製
１−１）アセチル化ヒアルロン酸ナトリウム（平均分子量＝１００，０００、アセチル基置換度＝２．６〜３．８個／ユニット、ＣＡＳ Ｎｏ．２８７３９０−１２−９）５ｍｇを量りとり、無水エタノール０．８ｍＬおよびＲＯ水０．２ｍＬからなる無水エタノール／水混合液に加え、溶解して、０．５％ アセチル化ヒアルロン酸溶液を調製した。
１−２）Ｌ−バリンメチルエステル塩酸塩（ＣＡＳ Ｎｏ．６３０６−５２−１）５４ｍｇを量りとり、無水エタノール１．５ｍＬおよびＲＯ水０．３ｍＬからなる無水エタノール／水混合溶液に加え、溶解して、３０ｍｇ／ｍＬ バリンメチルエステル溶液を調製した。
１−３）パクリタキセル（ＣＡＳ Ｎｏ．３３０６９−６２−４）８０ｍｇを量りとり、無水エタノール１ｍＬおよびアセトン１ｍＬからなる無水エタノール／アセトン混合溶液に加え、溶解して、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液を調製した。
１−４）０．５％ アセチル化ヒアルロン酸溶液３０μＬと、３０ｍｇ／ｍＬ バリンメチルエステル溶液１２０μＬと、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液１５０μＬとを混合し、コーティング溶液１を調製した。
（２）バルーンへの薬剤コーティング
拡張時サイズが直径３．０×長さ２０ｍｍ（拡張部）のバルーンカテーテル（テルモ社製、バルーン（拡張部）の素材はナイロンエラストマー）を準備した。拡張したバルーンをパクリタキセル量が約３μｇ／ｍｍ^２となるように、コーティング溶液１をピペットでコートし、バルーンを乾燥させ、薬剤溶出バルーンを作製した。

〈実施例２〉
（１）コーティング溶液２の調製
１−１）Ｌ−フェニルアラニンエチルエステル塩酸塩（ＣＡＳ Ｎｏ．３１８２−９３−２）５４ｍｇを量りとり、無水エタノール１．５ｍＬおよびＲＯ水０．３ｍＬからなる無水エタノール／水混合溶液に加え、溶解して、３０ｍｇ／ｍＬ フェニルアラニンエチルエステル溶液を調製した。
１−２）実施例１と同様にして、０．５％ アセチル化ヒアルロン酸溶液を調製した。
１−３）実施例１と同様にして、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液を調製した。
１−４）３０ｍｇ／ｍＬ フェニルアラニンエチルエステル溶液１２０μＬと、０．５％ アセチル化ヒアルロン酸溶液３０μＬと、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液１５０μＬとを混合し、コーティング溶液２を調製した。
（２）バルーンへの薬剤コーティング
調製したコーティング溶液２を用いて、パクリタキセル量が約２μｇ／ｍｍ^２となるように、実施例１と同様にして、薬剤溶出バルーンを作製した。

〈実施例３〉
（１）コーティング溶液３の調製
１−１）Ｌ−アラニンエチルエステル塩酸塩（ＣＡＳ Ｎｏ．１１１５−５９−９）８０ｍｇを量りとり、無水エタノール１ｍＬおよびＲＯ水１ｍＬからなる無水エタノール／水混合溶液に加え、溶解して、４０ｍｇ／ｍＬ アラニンエチルエステル溶液を調製した。
１−２）実施例１と同様にして、０．５％ アセチル化ヒアルロン酸溶液を調製した。
１−３）実施例１と同様にして、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液を調製した。
１−４）４０ｍｇ／ｍＬ アラニンエチルエステル溶液１２０μＬと、０．５％ アセチル化ヒアルロン酸溶液３０μＬと、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液１５０μＬとを混合し、コーティング溶液３を調製した。
（２）バルーンへの薬剤コーティング
調製したコーティング溶液３を用いて、パクリタキセル量が約２μｇ／ｍｍ^２となるように、実施例１と同様にして、薬剤溶出バルーンを作製した。

〈実施例４〉
（１）コーティング溶液４の調製
１−１）Ｎ−ベンジルグリシンエチルエステル（ＣＡＳ Ｎｏ．６４３６−９０−４）８０ｍｇを量りとり、無水エタノール１ｍＬおよびＲＯ水１ｍＬからなる無水エタノール／水混合溶液に加え、溶解して、４０ｍｇ／ｍＬ ベンジルグリシンエチルエステル溶液を調製した。
１−２）実施例１と同様にして、０．５％ アセチル化ヒアルロン酸溶液を調製した。
１−３）実施例１と同様にして、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液を調製した。
１−４）４０ｍｇ／ｍＬ ベンジルグリシンエチルエステル溶液８０μＬと、０．５％ アセチル化ヒアルロン酸溶液２０μＬと、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液１００μＬとを混合し、コーティング溶液４を調製した。
（２）バルーンへの薬剤コーティング
調製したコーティング溶液４を用いて、パクリタキセル量が約２μｇ／ｍｍ^２となるように、実施例１と同様にして、薬剤溶出バルーンを作製した。

〈実施例５〉
（１）コーティング溶液５の調製
１−１）Ｌ−アルギニンエチルエステル二塩酸塩（ＣＡＳ Ｎｏ．３６５８９−２９−４）６０ｍｇを量りとり、無水エタノール１ｍＬおよびＲＯ水１ｍＬからなる無水エタノール／水混合溶液に加え、溶解して、３０ｍｇ／ｍＬ アルギニンエチルエステル溶液を調製した。
１−２）実施例１と同様にして、０．５％ アセチル化ヒアルロン酸溶液を調製した。
１−３）実施例１と同様にして、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液を調製した。
１−４）３０ｍｇ／ｍＬ アルギニンエチルエステル溶液８０μＬと、０．５％ アセチル化ヒアルロン酸溶液２０μＬと、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液１００μＬとを混合し、コーティング溶液５を調製した。
（２）バルーンへの薬剤コーティング
調製したコーティング溶液５を用いて、パクリタキセル量が約２μｇ／ｍｍ^２となるように、実施例１と同様にして、薬剤溶出バルーンを作製した。

〈実施例６〉
（１）コーティング溶液６の調製
１−１）Ｎα−ベンゾイル−Ｌ−アルギニンエチルエステル塩酸塩（ＣＡＳ Ｎｏ．２６４５−０８−１）６０ｍｇを量りとり、無水エタノール１ｍＬおよびＲＯ水１ｍＬからなる無水エタノール／水混合溶液に加え、溶解して、３０ｍｇ／ｍＬ ベンゾイル−アルギニンエチルエステル溶液を調製した。
１−２）実施例１と同様にして、０．５％ アセチル化ヒアルロン酸溶液を調製した。
１−３）実施例１と同様にして、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液を調製した。
１−４）３０ｍｇ／ｍＬ ベンゾイル−アルギニンエチルエステル溶液８０μＬと、０．５％ アセチル化ヒアルロン酸溶液２０μＬと、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液１００μＬとを混合し、コーティング溶液６を調製した。
（２）バルーンへの薬剤コーティング
調製したコーティング溶液６を用いて、パクリタキセル量が約２μｇ／ｍｍ^２となるように、実施例１と同様にして、薬剤溶出バルーンを作製した。

〈実施例７〉
（１）コーティング溶液７の調製
１−１）Ｌ−アスパラギン酸ジメチルエステル塩酸塩（ＣＡＳ Ｎｏ．３２２１３−９５−９）６０ｍｇを量りとり、無水エタノール１ｍＬおよびＲＯ水１ｍＬからなる無水エタノール／水混合溶液に加え、溶解して、３０ｍｇ／ｍＬ アスパラギン酸ジメチルエステル溶液を調製した。
１−２）実施例１と同様にして、０．５％ アセチル化ヒアルロン酸溶液を調製した。
１−３）実施例１と同様にして、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液を調製した。
１−４）３０ｍｇ／ｍＬ アスパラギン酸ジメチルエステル溶液８０μＬと、０．５％ アセチル化ヒアルロン酸溶液２０μＬと、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液１００μＬとを混合し、コーティング溶液７を調製した。
（２）バルーンへの薬剤コーティング
調製したコーティング溶液７を用いて、パクリタキセル量が約２μｇ／ｍｍ^２となるように、実施例１と同様にして、薬剤溶出バルーンを作製した。

〈実施例８〉
（１）コーティング溶液８の調製
１−１）Ｌ−セリンエチルエステル塩酸塩（ＣＡＳ Ｎｏ．２６３４８−６１−８）６０ｍｇを量りとり、無水メタノール１ｍＬおよびＲＯ水１ｍＬからなる無水エタノール／水混合溶液に加え、溶解して、３０ｍｇ／ｍＬ セリンエチルエステル溶液を調製した。
１−２）実施例１と同様にして、０．５％ アセチル化ヒアルロン酸溶液を調製した。
１−３）実施例１と同様にして、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液を調製した。
１−４）３０ｍｇ／ｍＬ セリンエチルエステル溶液８０μＬと、０．５％ アセチル化ヒアルロン酸溶液２０μＬと、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液１００μＬとを混合し、コーティング溶液８を調製した。
（２）バルーンへの薬剤コーティング
調製したコーティング溶液８を用いて、パクリタキセル量が約２μｇ／ｍｍ^２となるように、実施例１と同様にして、薬剤溶出バルーンを作製した。

〈実施例９〉
（１）コーティング溶液９の調製
１−１）グリセリン（ＣＡＳ Ｎｏ．５６−８１−５）１００μＬと、無水エタノール１００μＬとを混合し、５０％ グリセリン溶液を調製した。
１−２）実施例１と同様にして、０．５％ アセチル化ヒアルロン酸溶液を調製した。
１−３）実施例１と同様にして、３０ｍｇ／ｍＬ バリンメチルエステル溶液を調製した。
１−４）実施例１と同様にして、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液を調製した。
１−５）５０％ グリセリン溶液２０μＬと、０．５％ アセチル化ヒアルロン酸溶液４０μＬと、３０ｍｇ／ｍＬ バリンメチルエステル溶液８０μＬと、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液１００μＬとを混合し、コーティング溶液９を調製した。
（２）バルーンへの薬剤コーティング
調製したコーティング溶液９を用いて、パクリタキセル量が約２μｇ／ｍｍ^２となるように、実施例１と同様にして、薬剤溶出バルーンを作製した。

〈実施例１０〉
（１）コーティング溶液１０の調製
１−１）実施例９と同様にして、５０％ グリセリン溶液を調製した。
１−２）アセチル化ヒアルロン酸ナトリウム（平均分子量＝１００，０００、アセチル基置換度＝２．６〜３．８個／ユニット、ＣＡＳ Ｎｏ．２８７３９０−１２−９）４０ｍｇを量りとり、無水エタノール０．８ｍＬおよびＲＯ水３．２ｍＬからなる無水エタノール／水混合液に加え、溶解して、１％ アセチル化ヒアルロン酸溶液を調製した。
１−３）Ｌ−バリンメチルエステル塩酸塩（ＣＡＳ Ｎｏ．６３０６−５２−１）２１０ｍｇを量りとり、無水エタノール１．５ｍＬおよびＲＯ水１．５ｍＬからなる無水エタノール／水混合溶液に加え、溶解して、７０ｍｇ／ｍＬ バリンメチルエステル溶液を調製した。
１−４）パクリタキセル（ＣＡＳ Ｎｏ．３３０６９−６２−４）１６８ｍｇを量りとり、テトラヒドロフラン３ｍＬを加え、溶解して、５６ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液を調製した。
１−５）５０％ グリセリン溶液１６８μＬと、１％ アセチル化ヒアルロン酸溶液３００μＬと、７０ｍｇ／ｍＬ バリンメチルエステル溶液７２０μＬと、５６ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液２４００μＬとを混合し、コーティング溶液１０を調製した。
（２）バルーンへの薬剤コーティング
調製したコーティング溶液１０を用いて、パクリタキセル量が約３μｇ／ｍｍ^２となるように、実施例１と同様にして、薬剤溶出バルーンを作製した。

〈実施例１１〉
（１）コーティング溶液１１の調製
１−１）ヒアルロン酸ナトリウム（平均分子量＝１，０００，０００、ＣＡＳ Ｎｏ．９０６７−３２−７）５ｍｇを量りとり、ＲＯ水１ｍＬに加え、溶解して、０．５％ ヒアルロン酸水溶液を調製した。
１−２）実施例１と同様にして、３０ｍｇ／ｍＬ バリンメチルエステル溶液を調製した。
１−３）実施例１と同様にして、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液を調製した。
１−４）０．５％ ヒアルロン酸水溶液２０μＬと、３０ｍｇ／ｍＬ バリンメチルエステル溶液８０μＬと、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液１００μＬとを混合し、コーティング溶液１１を調製した。
（２）バルーンへの薬剤コーティング
調製したコーティング溶液１１を用いて、パクリタキセル量が約２μｇ／ｍｍ^２となるように、実施例１と同様にして、薬剤溶出バルーンを作製した。

〈実施例１２〉
（１）コーティング溶液１２の調製
１−１）ブチリル化ヒアルロン酸ナトリウム（平均分子量＝１０００００、ブチリル基置換度＝０．９個／ユニット）５ｍｇを量りとり、無水エタノール０．８ｍＬおよびＲＯ水０．２ｍＬからなる無水エタノール／水混合液に加え、混合して、０．５％ ブチリル化ヒアルロン酸溶液を調製した。
１−２）実施例１と同様にして、３０ｍｇ／ｍＬ バリンメチルエステル溶液を調製した。
１−３）実施例１と同様にして、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液を調製した。
１−４）０．５％ ブチリル化ヒアルロン酸溶液３０μＬと、３０ｍｇ／ｍＬ バリンメチルエステル溶液１２０μＬと、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液１５０μＬとを混合し、コーティング溶液１２を調製した。
なお、上記ブチリル化ヒアルロン酸は、以下に記載するように、特許第４３２３１４８号公報に記載の方法により合成した。
ヒアルロン酸ナトリウム（キッコーマンバイオケミファ製、ＦＣＨ−１２０）０．７２ｇを純水７５ｍＬに溶解するとともに、ジステアリルジメチルアンモニウムクロライド１．０ｇを２００ｍＬの純水に懸濁させた。両液を４５℃に加温後攪拌しながら混合し、５分間攪拌を続けた。生成した錯体をろ取し、減圧化乾燥しヒアルロン酸とジステアリルジメチルアンモニウムクロライド錯体を得た。次いで、得られたヒアルロン酸とジステアリルジメチルアンモニウムクロライド錯体０．６８ｇをＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解させ、ｎ−ブチリルクロライド０．３０ｇ、ピリジン０．２５ｇを加え、６０℃で２時間攪拌した。反応終了後、酢酸ナトリウム飽和エタノール溶液９０ｍＬを加えた。析出した結晶をろ取し、減圧下乾燥させ、ブチリル化ヒアルロン酸を得た。
（２）バルーンへの薬剤コーティング
調製したコーティング溶液１２を用いて、パクリタキセル量が約２μｇ／ｍｍ^２となるように、実施例１と同様にして、薬剤溶出バルーンを作製した。

〈実施例１３〉
（１）コーティング溶液１３の調製
１−１）アセチル化ヒアルロン酸（平均分子量＝５，０００、アセチル基置換度＝０．３個／ユニット）５ｍｇを量りとり、無水エタノール０．８ｍＬおよびＲＯ水０．２ｍＬからなる無水エタノール／水混合液に加え、溶解して、０．５％ アセチル化ヒアルロン酸溶液（Ｍｗ５０００）を調製した。
１−２）実施例１と同様にして、３０ｍｇ／ｍＬ バリンメチルエステル溶液を調製した。
１−３）実施例１と同様にして、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液を調製した。
１−４）０．５％ アセチル化ヒアルロン酸溶液（Ｍｗ５０００）２０μＬと、３０ｍｇ／ｍＬ バリンメチルエステル溶液８０μＬと、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液１００μＬとを混合し、コーティング溶液１３を調製した。
上記アセチル化ヒアルロン酸（平均分子量＝５，０００、アセチル基置換度＝０．３個／ユニット）は、以下に記載するように、特許第３１４２４１５号公報に記載の方法により合成した。
ヒアルロン酸（キッコーマンバイオケミファ製、マイクロヒアルロン酸ＦＣＨ）１ｇを酢酸４０ｍＬに攪拌しながら加え、続いて、１０ｍＬの無水トリフルオロ酢酸を加え室温で３時間攪拌した。次にピリジン１００ｍＬを、水５０ｍＬを加え、反応溶液をアセトン１００ｍＬにゆっくり加え生じた結晶をろ取し、減圧下乾燥させ、アセチル化ヒアルロン酸（平均分子量＝５，０００、アセチル基置換度＝０．３個／ユニット）を得た。
（２）バルーンへの薬剤コーティング
調製したコーティング溶液１３を用いて、パクリタキセル量が約２μｇ／ｍｍ^２となるように、実施例１と同様にして、薬剤溶出バルーンを作製した。

〈実施例１４〉
（１）コーティング溶液１４の調製
１−１）アセチル化ヒアルロン酸ナトリウム（平均分子量＝１００，０００、アセチル基置換度＝２．６〜３．８個／ユニット、ＣＡＳ Ｎｏ．２８７３９０−１２−９）１０ｍｇを量りとり、無水エタノール０．２ｍＬおよびＲＯ水０．８ｍＬからなる無水エタノール／水混合液に加え、溶解して、１％ アセチル化ヒアルロン酸溶液を調製した。
１−２）Ｌ−フェニルアラニンエチルエステル塩酸塩（ＣＡＳ Ｎｏ．３１８２−９３−２）９０ｍｇを量りとり、無水エタノール１．５ｍＬおよびＲＯ水０．３ｍＬからなる無水エタノール／水混合溶液に加え、溶解して、５０ｍｇ／ｍＬ フェニルアラニンエチルエステル溶液を調製した。
１−３）パクリタキセル（ＣＡＳ Ｎｏ．３３０６９−６２−４）８０ｍｇを量りとり、テトラヒドロフラン２ｍＬを加え、溶解して、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液を調製した。
１−４）１％ アセチル化ヒアルロン酸溶液２４μＬと、５０ｍｇ／ｍＬ フェニルアラニンエチルエステル溶液１２０μＬと、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液３６０μＬとを混合し、コーティング溶液１４を調製した。
（２）バルーンへの薬剤コーティング
調製したコーティング溶液１４を用いて、パクリタキセル量が約３μｇ／ｍｍ^２となるように、実施例１と同様にして、薬剤溶出バルーンを作製した。

〈実施例１５〉
（１）コーティング溶液１５の調製
１−１）実施例１４と同様にして、１％ アセチル化ヒアルロン酸溶液を調製した。
１−２）Ｌ−アルギニンエチルエステル二塩酸塩（ＣＡＳ Ｎｏ．３６５８９−２９−４）５０ｍｇを量りとり、無水エタノール０．５ｍＬおよびＲＯ水０．５ｍＬからなる無水エタノール／水混合溶液に加え、溶解して、５０ｍｇ／ｍＬ アルギニンエチルエステル溶液を調製した。
１−３）実施例１４と同様にして、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液を調製した。
１−４）１％ アセチル化ヒアルロン酸溶液２４μＬと、５０ｍｇ／ｍＬ アルギニンエチルエステル溶液１２０μＬと、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液３６０μＬとを混合し、コーティング溶液１５を調製した。
（２）バルーンへの薬剤コーティング
調製したコーティング溶液１５を用いて、パクリタキセル量が約３μｇ／ｍｍ^２となるように、実施例１と同様にして、薬剤溶出バルーンを作製した。

〈実施例１６〉
（１）コーティング溶液１６の調製
１−１）実施例１４と同様にして、１％ アセチル化ヒアルロン酸溶液を調製した。
１−２）Ｌ−セリンエチルエステル塩酸塩（ＣＡＳ Ｎｏ．２６３４８−６１−８）５０ｍｇを量りとり、無水エタノール０．５ｍＬおよびＲＯ水０．５ｍＬからなる無水エタノール／水混合溶液に加え、溶解して、５０ｍｇ／ｍＬ セリンエチルエステル溶液を調製した。
１−３）実施例１４と同様にして、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液を調製した。
１−４）１％ アセチル化ヒアルロン酸溶液２４μＬと、５０ｍｇ／ｍＬ セリンエチルエステル溶液１２０μＬと、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液３６０μＬとを混合し、コーティング溶液１６を調製した。
（２）バルーンへの薬剤コーティング
調製したコーティング溶液１６を用いて、パクリタキセル量が約３μｇ／ｍｍ^２となるように、実施例１と同様にして、薬剤溶出バルーンを作製した。

〈実施例１７〉
（１）コーティング溶液１７の調製
１−１）実施例１４と同様にして、１％ アセチル化ヒアルロン酸溶液を調製した。
１−２）Ｌ−アスパラギン酸ジメチルエステル塩酸塩（ＣＡＳ Ｎｏ．３２２１３−９５−９）５０ｍｇを量りとり、無水エタノール０．５ｍＬおよびＲＯ水０．５ｍＬからなる無水エタノール／水混合溶液に加え、溶解して、５０ｍｇ／ｍＬ アスパラギン酸ジメチルエステル溶液を調製した。
１−３）実施例１４と同様にして、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液を調製した。
１−４）１％ アセチル化ヒアルロン酸溶液２４μＬと、５０ｍｇ／ｍＬ アスパラギン酸ジメチルエステル溶液１２０μＬと、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液３６０μＬとを混合し、コーティング溶液１７を調製した。
（２）バルーンへの薬剤コーティング
調製したコーティング溶液１７を用いて、パクリタキセル量が約３μｇ／ｍｍ^２となるように、実施例１と同様にして、薬剤溶出バルーンを作製した。

〈実施例１８〉
（１）コーティング溶液１８の調製
１−１）アセチル化ヒアルロン酸ナトリウム（平均分子量＝１００，０００、アセチル基置換度＝２．６〜３．８個／ユニット、ＣＡＳ Ｎｏ．２８７３９０−１２−９）５ｍｇを量りとり、無水エタノール０．２ｍＬおよびＲＯ水０．８ｍＬからなる無水エタノール／水混合液に加え、溶解して、０．５％ アセチル化ヒアルロン酸溶液を調製した。
１−２）Ｌ−フェニルアラニンエチルエステル塩酸塩（ＣＡＳ Ｎｏ．３１８２−９３−２）３０ｍｇを量りとり、無水エタノール１．５ｍＬおよびＲＯ水０．３ｍＬからなる無水エタノール／水混合溶液に加え、溶解して、３０ｍｇ／ｍＬ フェニルアラニンエチルエステル溶液を調製した。
１−３）グリセリン（ＣＡＳ Ｎｏ．５６−８１−５）５００μＬと、無水エタノール５００μＬとを混合し、５０％ グリセリン溶液を調製した。
１−４）パクリタキセル（ＣＡＳ Ｎｏ．３３０６９−６２−４）８０ｍｇを量りとり、無水エタノール１ｍＬおよびアセトン１ｍＬを加え、溶解して、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液を調製した。
１−５）０．５％ アセチル化ヒアルロン酸溶液４０μＬと、３０ｍｇ／ｍＬ フェニルアラニンエチルエステル溶液８０μＬと、５０％ グリセリン溶液１０μＬと、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液１００μＬとを混合し、コーティング溶液１８を調製した。
（２）バルーンへの薬剤コーティング
調製したコーティング溶液１８を用いて、パクリタキセル量が約３μｇ／ｍｍ^２となるように、実施例１と同様にして、薬剤溶出バルーンを作製した。

〈実施例１９〉
（１）コーティング溶液１９の調製
１−１）実施例１４と同様にして、１％ アセチル化ヒアルロン酸溶液を調製した。
１−２）Ｌ−アスパラギン酸ジメチルエステル塩酸塩（ＣＡＳ Ｎｏ．３２２１３−９５−９）５０ｍｇを量りとり、無水エタノール０．５ｍＬおよびＲＯ水０．５ｍＬからなる無水エタノール／水混合溶液に加え、溶解して、５０ｍｇ／ｍＬ アスパラギン酸ジメチルエステル溶液を調製した。
１−３）実施例１４と同様にして、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液を調製した。
１−４）１％ アセチル化ヒアルロン酸溶液２４μＬと、５０ｍｇ／ｍＬ アスパラギン酸ジメチルエステル溶液１２０μＬと、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液３６０μＬとを混合し、コーティング溶液１９を調製した。
（２）バルーンへの薬剤コーティング
調製したコーティング溶液１９を用いて、パクリタキセル量が約３μｇ／ｍｍ^２となるように、実施例１と同様にして、薬剤溶出バルーンを作製した。

〈比較例Ｃ１〉
（１）コーティング溶液２１の調製
１−１）Ｌ−バリンメチルエステル塩酸塩（ＣＡＳ Ｎｏ．６３０６−５２−１）５４ｍｇを量りとり、無水エタノール１．５ｍＬおよびＲＯ水０．３ｍＬからなる無水エタノール／水混合溶液に加え、溶解して、３０ｍｇ／ｍＬ バリンメチルエステル溶液を調製した。
１−２）パクリタキセル（ＣＡＳ Ｎｏ．３３０６９−６２−４）８０ｍｇを量りとり、無水エタノール１ｍＬおよびアセトン１ｍＬからなる無水エタノール／アセトン混合溶液に加え、溶解して、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液を調製した。
１−３）３０ｍｇ／ｍＬ バリンメチルエステル溶液７０μＬと、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液５０μＬとを混合して、コーティング溶液２１を調製した。
（２）バルーンへの薬剤コーティング
調製したコーティング溶液２１を用いて、パクリタキセル量が約２μｇ／ｍｍ^２となるように、実施例１と同様にして、薬剤溶出バルーンを作製した。

〈比較例Ｃ２〉
（１）コーティング溶液２２の調製
１−１）Ｌ−アラニンエチルエステル塩酸塩（ＣＡＳ Ｎｏ．１１１５−５９−９）８０ｍｇを量りとり、無水エタノール１ｍＬおよびＲＯ水１ｍＬからなる無水エタノール／水混合溶液に加え、溶解して、４０ｍｇ／ｍＬ アラニンエチルエステル溶液を調製した。
１−２）比較例Ｃ１と同様にして、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液を調製した
１−３）４０ｍｇ／ｍＬ アラニンエチルエステル溶液６０μＬと、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液５０μＬとを混合して、コーティング溶液２２を調製した。
（２）バルーンへの薬剤コーティング
調製したコーティング溶液２２を用いて、パクリタキセル量が約２μｇ／ｍｍ^２となるように、実施例１と同様にして、薬剤溶出バルーンを作製した。

〈比較例Ｃ３〉
（１）コーティング溶液２３の調製
１−１）Ｌ−アルギニン塩酸塩（ＣＡＳ Ｎｏ．１１１９−３４−２）６０ｍｇを量りとり、無水エタノール１ｍＬおよびＲＯ水１ｍＬからなる無水エタノール／水混合溶液に加え、溶解して、３０ｍｇ／ｍＬ アルギニン溶液を調製した。
１−２）比較例Ｃ１と同様にして、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液を調製した。
（１５．２）３０ｍｇ／ｍＬ アルギニン溶液６０μＬと、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液５０μＬとを混合して、コーティング溶液２３を調製した。
（２）バルーンへの薬剤コーティング
調製したコーティング溶液２３を用いて、パクリタキセル量が約２μｇ／ｍｍ^２となるように、実施例１と同様にして、薬剤溶出バルーンを作製した。

〈比較例Ｃ４〉
（１）コーティング溶液２４の調製
１−１）比較例Ｃ１と同様にして、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液を調製した。
１−２）調製した４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液１００μＬに、無水エタノール１００μＬを混合して、２０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液（を調製し、これをコーティング溶液２４とした。
（２）バルーンへの薬剤コーティング
調製したコーティング溶液２４を用いて、パクリタキセル量が約３μｇ／ｍｍ^２となるように、実施例１と同様にして、薬剤溶出バルーンを作製した。

〈比較例Ｃ５〉
（１）コーティング溶液２５の調製
１−１）水素添加大豆ホスファチジルリン脂質（ＳＰＣ−３、Ｌｉｐｏｉｄ社製、分子量：７９０）１００ｍｇを量りとり、無水エタノール２ｍＬに溶解し、５０ｍｇ／ｍＬ 水素添加大豆ホスファチジルリン脂質溶液を調製した。
１−２）アセチル化ヒアルロン酸ナトリウム（平均分子量＝１００，０００、アセチル基置換度＝２．６〜３．８個／ユニット、ＣＡＳ Ｎｏ．２８７３９０−１２−９）５ｍｇを量りとり、無水エタノール０．８ｍＬおよびＲＯ水０．２ｍＬからなる無水エタノール／水混合液に加え、混合して、０．５％ アセチル化ヒアルロン酸溶液を調製した。
１−３）比較例Ｃ１と同様にして、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液を調製した
１−４）５０ｍｇ／ｍＬ 水素添加大豆ホスファチジルリン脂質溶液４０μＬと、無水エタノール１２０μＬと、０．５％ アセチル化ヒアルロン酸溶液４０μＬと、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液２００μＬとを混合し、コーティング溶液２５を調製した。
（２）バルーンへの薬剤コーティング
調製したコーティング溶液２５を用いて、パクリタキセル量が約３μｇ／ｍｍ^２となるように、実施例１と同様にして、薬剤溶出バルーンを作製した。

〈比較例Ｃ６〉
（１）コーティング溶液２６の調製
１−１）フェニルアラニンで修飾したカルボキシメチルセルロース（ＡＣＲＯＳ社製、ＭＷ９００００、ＣＡＳ Ｎｏ．９００４−３２−４）１０ｍｇを量りとり、無水エタノール３．２ｍＬおよびＲＯ水１．６ｍＬからなる無水エタノール／水混合溶液に溶解し、０．１％ カルボキシメチルセルロース−フェニルアラニン（フェニルアラニンメチルエステルで修飾されたカルボキシメチルセルロース）溶液を調製した。
１−２）アセチル化ヒアルロン酸ナトリウム（平均分子量＝１００，０００、アセチル基置換度＝２．６〜３．８個／ユニット、ＣＡＳ Ｎｏ．２８７３９０−１２−９）２ｍｇを量りとり、無水エタノール０．８ｍＬおよびＲＯ水０．２ｍＬからなる無水エタノール／水混合液に加え、混合して、０．２％ アセチル化ヒアルロン酸溶液を調製した。
１−３）比較例Ｃ１と同様にして、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液を調製した。
１−４）０．１％ カルボキシメチルセルロース−フェニルアラニン溶液８０μＬと、０．２％ アセチル化ヒアルロン溶液４０μＬと、４０ｍｇ／ｍＬ パクリタキセル溶液２００μＬとを混合し、コーティング溶液２６を調製した。
（２）バルーンへの薬剤コーティング
調製したコーティング溶液２６を用いて、パクリタキセル量が約３μｇ／ｍｍ^２となるように、実施例１と同様にして、薬剤溶出バルーンを作製した。

〈比較例Ｃ７〉
市販品のバルーンカテーテルであるＩＮ．ＰＡＣＴ（Ｉｎｖａｔｅｃ社製）を準備した。

〈比較例Ｃ８〉
拡張時サイズが直径３．０×長さ２０ｍｍ（拡張部）のバルーンカテーテル（テルモ社製、バルーン（拡張部）の素材はナイロンエラストマー）を準備した。比較例Ｃ８のバルーンカテーテルは、薬剤をコートしていない、薬剤無塗布バルーンである。

［薬剤溶出ステントの作製］
〈実施例２０〉
（１）コーティング溶液２０の調製
実施例４のコーティング溶液４と同様にしてコーティング溶液２０を調製した。
（２）ステントへの薬剤コーティング
２．５×１８ｍｍのステント（テルモ製）を準備した。
準備したステントに、パクリタキセル量が約１．５μｇ／ｍｍ^２となるように、コーティング溶液２０をピペットでコートし、ステントを乾燥させ、薬剤溶出ステントを作製した。

［バルーンまたはステントにコートされたパクリタキセル量の測定］
実施例１〜１９および比較例Ｃ１〜Ｃ６の薬剤溶出バルーンおよび実施例２０の薬剤溶出ステントについて、バルーンにコートされたパクリタキセル量を測定した。

１．方法
作製した薬剤溶出バルーンまたは薬剤溶出ステントをメタノール溶液に浸し、その後、１０分間、振とう機を用いて振とうし、バルーンにコートされたパクリタキセルを抽出した。パクリタキセルを抽出したメタノール溶液の２２７ｎｍでの吸光度を、紫外可視吸光光度計を用いて高速液体クロマトグラフィーにて測定し、バルーンあたりのパクリタキセル量（［μｇ／ｂａｌｌｏｏｎ］）またはステントあたりのパクリタキセル量（［μｇ／ｓｔｅｎｔ］）を求めた。さらに、求めたパクリタキセル量と、バルーン表面積またはステント表面積とから、バルーンまたはステントの単位面積あたりのパクリタキセル量（［μｇ／ｍｍ^２］）を算出した。

２．結果
（１）実施例１〜１９および比較例Ｃ１〜Ｃ６（薬剤溶出バルーン）について
表１に示す結果を得た。表１中、実施例／比較例の列の１〜１９は実施例であり、Ｃ１〜Ｃ６は比較例である。また、表１中、「バルーン上のＰＴＸ量」の「バルーンあたり」はバルーン１個あたりのパクリタキセル量（単位：μｇ／バルーン）を、「バルーン上のＰＴＸ量」の「単位面積あたり」はバルーンの表面積１ｍｍ^２あたりのパクリタキセル量（単位：μｇ／ｍｍ^２）を、それぞれ表す。

実施例１〜１９および比較例Ｃ１〜Ｃ６において、バルーンにコートされたパクリタキセル量は、約２μｇ／ｍｍ^２（実施例２〜９、１１〜１３および１８、ならびに比較例Ｃ１〜Ｃ３）または約３μｇ／ｍｍ^２（実施例１、１０、１４〜１７および１９、ならびに比較例Ｃ４〜Ｃ６）であり、目標とするパクリタキセル量をバルーン表面にコートすることができた。

（２）実施例２０（薬剤溶出ステント）について
表２に示す結果を得た。表２中、実施例の列の２０は実施例である。また、表２中、「ステント上のＰＴＸ量」の「ステントあたり」はステント１個あたりのパクリタキセル量（単位：μｇ／ステント）を、「ステント上のＰＴＸ量」の「単位面積あたり」はステントの表面積１ｍｍ^２あたりのパクリタキセル量（単位：μｇ／ｍｍ^２）を、それぞれ表す。

実施例２０において、ステントにコートされたパクリタキセル量は１．５μｇ／ｍｍ^２であり、目標とするパクリタキセル量をステント表面にコートすることができた。

［模倣血管を用いた薬剤コート層耐性評価］
実施例１〜９および１１〜１３、ならびに比較例Ｃ１〜Ｃ４の薬剤溶出バルーンについて、病変患部に送達する過程でどれだけ薬剤コート層が脱落するかを評価するために、模倣血管による薬剤コート層耐性試験を以下の手順により行った。

１．方法
（１）９０度の角度がついている中空の模倣血管１を準備し、その中にガイディングカテーテル２（外径：５Ｆｒ）を通した（図１を参照）。
（２）ガイディングカテーテル２の内部を３７℃で加温したＰＢＳで満たした。
（３）作製した薬剤溶出バルーンを、ラッピング機で折りたたんだ。
（４）ラッピング後のバルーンカテーテル３を、ＰＢＳで満たしたガイディングカテーテル内に挿入し、ガイディングカテーテルの出口に向かって１分間にわたりバルーン４のデリバリー操作を行った。
（５）ガイディングカテーテル内をデリバリー後のバルーンを回収し、液体クロマトグラフによってバルーン上に残存したパクリタキセル量（残存ＰＴＸ量）を定量した。さらに、薬剤溶出バルーンにコートされたパクリタキセル量（搭載ＰＴＸ量）と残存ＰＴＸ量とから、バルーン上のパクリタキセルの残存率（ＰＴＸ残存率）を算出した。

２．結果
表３に示す結果を得た。表３中、実施例／比較例の列の１〜９、１１〜１３は実施例であり、Ｃ１〜Ｃ４は比較例である。また、表３中、「搭載ＰＴＸ量」は薬剤溶出バルーン１個当たりにコートされたパクリタキセル量（単位：μｇ／バルーン）を、「バルーン上残存ＰＴＸ量」はデリバリー操作後のバルーン１個あたりに残存したパクリタキセル量（単位：μｇ／バルーン）を、「バルーン上ＰＴＸ残存率」はデリバリー操作後にバルーン上に残存していたパクリタキセルの割合（単位：質量％）を、それぞれ表す。

また、図２に、模倣血管を用いた薬剤コート層耐性評価における、実施例１〜９、１１〜１３および比較例Ｃ１〜Ｃ４の薬剤溶出バルーンのデリバリー操作後のバルーン上パクリタキセル残存率を表すグラフを示す。図２において、横軸は実施例または比較例を表し、数字１〜９、１１〜１３は、それぞれ、実施例１〜９、１１〜１３を意味し、アルファベット付き数字Ｃ１〜Ｃ４は、それぞれ、比較例Ｃ１〜Ｃ４を意味する。また、縦軸はデリバリー操作後のバルーン上パクリタキセル残存率（単位：質量％）を表す。“ｍａｓｓ ％”は「質量％」の意味である。

本評価系において、デリバリー操作後のバルーン残存薬剤量が６０質量％以上である場合、デリバリー操作における薬剤保持能が良好であり、多くの薬剤を病変患部に送達することができる。一方、６０質量％を下回ると、デリバリー操作で剥がれる薬剤量が多いため、安全面でも好ましくなく、また病変患部へ送達できる薬剤量が少ないので組織移行性も期待できない。したがって、本評価系では、デリバリー操作後にバルーンに残存するパクリタキセル量が６０質量％以上であると送達過程において良好な薬剤保持能があると判断できる。

実施例１〜９および１１〜１３で作製した薬剤溶出バルーンのデリバリー操作後のバルーンに残存したパクリタキセル量は、搭載量に対して６０質量％以上であった。これに対して、比較例Ｃ１〜Ｃ４で作製した薬剤溶出バルーンのパクリタキセル残存量は３３〜５１質量％であり、いずれも６０質量％を下回った。
以上の結果より、本発明のヒアルロン酸誘導体とアミノ酸エステルを含む薬剤コート層は、バルーン対するパクリタキセルの付着力を向上させ、デリバリー操作における薬剤保持能を高めることが明らかとなった。

［ウサギ腸骨動脈における薬剤組織移行性評価］
実施例１、７、９、１２および１４〜１８、ならびに比較例Ｃ５〜Ｃ７の薬剤溶出バルーンについて、以下の手順により、ウサギ腸骨動脈におけるバルーン拡張１時間後の血管へのパクリタキセル組織移行性を評価した。

１．方法
（１）ウサギにガイドワイヤーをＸ線透視下で右腸骨動脈または左腸骨動脈まで挿入した。次いで、薬剤溶出バルーン（拡張時サイズ直径３．０×長さ２０ｍｍ（拡張部））を、ガイドワイヤーに沿わせて、該腸骨動脈まで移行させた。
（２）７ａｔｍで１分間バルーンを拡張させた。その後、直ちに、バルーンを抜去した。
（３）バルーン拡張６０分後に、血管（分枝より約３．５ｃｍの範囲）を採取した。
（４）採取した血管にメタノールを添加し、ホモジネイトして、組織ホモジネイトとした。
（５）組織ホモジネイトを、高速液体クロマトグラフを用いて分析し、組織中パクリタキセル量（組織１ｇあたりのパクリタキセル量）を定量した。さらに、薬剤溶出バルーンにコートされたパクリタキセル量と、バルーン上に残存したパクリタキセル量とから、バルーン上のパクリタキセルの残存率（バルーン上ＰＴＸ残存率）を算出した。

２．結果
表４に示す結果を得た。表４中、実施例／比較例の列の１、７、９、１２および１４〜１８は実施例であり、Ｃ５〜Ｃ７は比較例である。また、表４中、「組織中ＰＴＸ量」は血管組織１ｇ中に含まれるパクリタキセル量（単位：μｇ／ｇ組織）を、「組織へのＰＴＸ移行率」はバルーン上から血管組織中に移行したパクリタキセルの割合（単位：質量％）を、「バルーン上ＰＴＸ残存率」はバルーン上に残存したパクリタキセルの割合（単位：質量％）を、それぞれ表す。

また、図３に、ウサギ腸骨動脈における薬剤組織移行性評価における、実施例１、７、９、１２および１４〜１８ならびに比較例Ｃ５〜Ｃ７の血管組織中パクリタキセル量を表すグラフを示す。図３において、横軸は実施例または比較例を表し、数字１、７、９、１２および１４〜１８はそれぞれ実施例１、７、９、１２および１４〜１８を意味し、アルファベット付き数字Ｃ５〜Ｃ７は、それぞれ、比較例Ｃ５〜Ｃ７を意味する。また、縦軸は血管組織１ｇ中に含まれるパクリタキセル量（単位：μｇ／ｇ組織）を表す。“μｇ／ｇ ｔｉｓｓｕｅ”は「μｇ／ｇ組織」の意味である。

実施例１、７、９および１４〜１８のいずれについても、血管内拡張の６０分後に回収された組織中ＰＴＸ量は、組織１ｇあたり５００μｇを上回った。一方、比較例Ｃ５〜Ｃ７はいずれも組織１ｇあたり４００μｇを下回った。また、実施例１２は組織１ｇあたり５００μｇを下回っているが、５００μｇに近く、比較例Ｃ５〜Ｃ７に比べて明らかに組織中ＰＴＸ量が多くなっている。

以上の結果から、ヒアルロン酸誘導体およびアミノ酸エステルと共にコートしたパクリタキセルは、十分な薬物組織移行性を示すことが明らかとなった。また、本発明の薬剤溶出バルーンは、市販の薬剤溶出バルーンであるＩＮ．ＰＡＣＴと比較しても、薬剤組織移行性が非常に高いことが明らかとなった。さらに、ヒアルロン酸誘導体＋アミノ酸エステルに、グリセリンを混合したパクリタキセルコート層も薬剤組織移行性が高いことがわかった。

［ウサギ腹大動脈における組織中薬剤滞留性評価］
実施例１９の薬剤溶出バルーンについて、以下の手順により、ウサギ腹大動脈におけるバルーン拡張１時間後および２４時間後の組織中パクリタキセル量を求め、薬剤滞留性を評価した。

１．方法
（１）薬剤溶出バルーンをラッピング後、ステントをプレマウントした。ステントプレマウント後の薬剤溶出バルーンを用いた。
（２）ウサギにガイドワイヤーをＸ線透視下で腹大動脈まで挿入した後、ガイドワイヤーの位置を保持しながら、ガイディングカテーテルを抜去した。次いで、ステントプレマウントした薬剤溶出バルーン（拡張時サイズ直径３．０×長さ２０ｍｍ（拡張部））を、ガイドワイヤーに沿わせながら、該腹大動脈まで移行させた。
（３）７ａｔｍで１分間バルーンを拡張させた。その後、直ちに、バルーンを抜去した。
（４）バルーン拡張１時間後および２４時間後に、血管（分枝より約３．５ｃｍの範囲）を採取した。
（５）採取した血管にメタノールを添加し、ホモジネイトして、組織ホモジネイトとした。
（６）組織ホモジネイトを、高速液体クロマトグラフを用いて分析し、バルーン拡張１時間後および２４時間後の組織中パクリタキセル量（組織１ｇあたりのパクリタキセル量）を定量した。さらに、薬剤溶出バルーンにコートされたパクリタキセル量と、バルーン拡張１時間後および２４時間後の組織中パクリタキセル量とから、バルーン拡張１時間後および２４時間後のパクリタキセルの組織への移行率（組織へのＰＴＸ移行率）を算出し、バルーン上に残存したパクリタキセル量から残存率（バルーン上ＰＴＸ残存率）を算出した。

２．結果
表５に示す結果を得た。表５中、実施例の列の１９は実施例である。また、表５中、「組織中ＰＴＸ量」は血管組織１ｇ中に含まれるパクリタキセル量（単位：μｇ／ｇ組織）を、「組織へのＰＴＸ移行率」はバルーン上から血管組織中に移行したパクリタキセルの割合（単位：質量％）を、「バルーン上ＰＴＸ残存率」はバルーン上に残存したパクリタキセルの割合（単位：質量％）を、それぞれ表す。さらに、「組織中ＰＴＸ量」および「組織へのＰＴＸ移行率」の列の「１Ｈ」および「２４Ｈ」は、それぞれ血管内拡張１時間後および２４時間後を意味する。

また、図４に、ウサギ腹大動脈における組織中薬剤滞留性評価における、実施例１９の、血管内拡張１時間後および２４時間後の血管組織中パクリタキセル量を表すグラフを示す。図４において、横軸は実施例を表し、数字１９は実施例１９を意味する。また、縦軸は血管組織１ｇ中に含まれるパクリタキセル量（単位：μｇ／ｇ組織）を表す。凡例の「１Ｈ」および「２４Ｈ」は、それぞれ、血管内拡張１時間後および２４時間後を意味する。“μｇ／ｇ ｔｉｓｓｕｅ”は「μｇ／ｇ組織」の意味である。

血管内拡張１時間および２４時間後の組織中パクリタキセル量はほぼ同じ値を示し、時間とともにパクリタキセルは大きく減衰しないことが示唆された。このことから、ヒアルロン酸誘導体とアミノ酸エステルとパクリタキセルとを含む薬剤コーティング層は、薬剤が組織に移行した後も十分な量の薬剤が長時間にわたり組織内で滞留することが明らかとなった。

［ブタ冠動脈における有効性評価］
実施例１０、ならびに比較例Ｃ７および比較例Ｃ８の薬剤溶出バルーンについて、以下の手順により、ブタ冠動脈における有効性評価を実施した。

１．方法
（１）ガイドワイヤーとともにガイディングカテーテルを８Ｆｒ．シースより挿入し、エックス線透視下でブタの左および右冠動脈開口部まで誘導した。
（２）各冠動脈の造影を行い（冠動脈：左冠動脈前下行枝（ＬＡＤ）、右冠動脈（ＲＣＡ）、左冠動脈回旋枝（ＬＣＸ））、造影で得られた冠動脈の血管経をＱＣＡソフトにより測定した。
（３）血管径に対しステントの径が１．２倍、かつ薬剤溶出バルーンの径が１．３倍になる部位を選択し、ステント留置以降の作業を実施した。
（４）選択した冠動脈内でステント（ステント径３ｍｍ×長さ１５ｍｍ） を１．２倍になるように３０秒間拡張した後、ステント留置用バルーンカテーテルを抜去した。ステント留置部位にて薬剤溶出バルーン（バルーン径：３ｍｍ×長さ２０ｍｍ）を血管径に対し１．３倍になるように１分間拡張させた後、カテーテルを抜去した。
（５）薬剤溶出バルーン拡張終了後、ガイディングカテーテルおよびシースを抜去し、頚動脈の中枢側を結紮した後、頚部の創口は剥離した筋肉間を手術用縫合糸で縫合し、皮膚縫合用ステープラーで皮膚を縫合した。
（４）バルーン拡張２８日後に、剖検を実施した。剖検時には冠動脈造影検査を行い、ステント留置部位の開存性（狭窄率）を確認し、血管径を測定した。バルーン拡張直後の平均血管径と２８日後の平均血管径より狭窄率（％）を算出した。

２．結果
表６に示す結果を得た。表６中、実施例／比較例の列の１０は実施例であり、Ｃ７およびＣ８は比較例である。

また、図５に、ブタ冠動脈における有効性評価における、実施例１０および比較例Ｃ７、Ｃ８の血管狭窄率を表すグラフを示す。図５において、横軸は実施例または比較例を表し、数字１０は実施例１０を意味し、アルファベット付き数字Ｃ７、Ｃ８は、それぞれ、比較例Ｃ７、Ｃ８を意味する。また、縦軸は血管の狭窄率（単位：％）を表す。

比較例Ｃ８は、薬物無処置対照として薬剤無塗布バルーンで処置した例であり、血管の狭窄率は３５．０％であった。
また、比較例Ｃ７のＩＮ．ＰＡＣＴは、狭窄率１７．１％であった。
これに対して、実施例１０の本発明の薬剤溶出バルーンで処置したものは、狭窄率１１．５％であった。

以上の結果から、アセチル化ヒアルロン酸、アミノ酸エステルおよびグリセリンとパクリタキセルを含む薬剤コーティング層は、良好な狭窄抑制効果を示すことが明らかとなった。

本発明のコーティング組成物でコートした医療機器、例えば、バルーンカテーテルなど、を用いると、病変患部に送達する過程での薬剤コート層の脱落を抑えながら病変患部に効率よく薬剤を送達させることができ、しかも病変患部における医療機器からの迅速な薬剤放出を促し、薬剤の組織移行性を高めることができる。

１ 模倣血管
２ ガイディングカテーテル
３ バルーンカテーテル
４ バルーン

Claims (15)

1. 水不溶性薬剤と、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸のヒドロキシ基の水素原子の少なくとも一部をアルカノイル基で置換したアルカノイル化ヒアルロン酸およびそれらの塩からなる群から選択される少なくとも１つと、アミノ酸エステルおよびその塩からなる群から選択される少なくとも１つとを含有する、薬剤溶出性の医療機器のためのコーティング組成物。
2. 前記アルカノイル基が下記式で表される、請求項１に記載のコーティング組成物。
   ［式中、Ｒ_０は、炭素数５以下のアルキル基、ベンジル基およびフェニル基からなる群から選択されるいずれか１つである。］
3. 前記アルカノイル基がアセチル基、プロピオニル基、イソブチリル基およびブチリル基からなる群から選択される少なくとも１つである、請求項１または２に記載のコーティング組成物。
4. 前記ヒドロキシ基の水素原子の前記アルカノイル基による置換数が、前記ヒアルロン酸の１ユニットあたり、平均０．０１〜４個である、請求項１〜３のいずれかに記載のコーティング組成物。
5. 前記ヒアルロン酸、ヒアルロン酸のヒドロキシ基の水素原子の少なくとも一部をアルカノイル基で置換したアルカノイル化ヒアルロン酸およびそれらの塩からなる群から選択される少なくとも１つの平均分子量が５×１０^３〜２×１０^５である、請求項１〜４のいずれかに記載のコーティング組成物。
6. 前記アミノ酸エステルが、下記式で表される、請求項１〜５のいずれかに記載のコーティング組成物。
   ［式中、Ｒ_１は、水素原子、メチル基、グアニジノプロピル基、カルバモイルメチル基、カルボキシメチル基、メトキシカルボニルメチル基、エトキシカルボニルメチル基、メルカプトメチル基、２−カルバモイル−エチル基、２−カルボキシエチル基、２−メトキシカルボニルエチル基、２−エトキシカルボニルエチル基、（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）メチル基、１−メチルプロピル基、２−メチルプロピル基、４−アミノブチル基、２−（メチルチオ）エチル基、ベンジル基、ヒドロキシメチル基、１−ヒドロキシエチル基、（１Ｈ-インドール−３−イル）メチル基、４−ヒドロキシベンジル基もしくはイソプロピル基であるか、またはＲ_２とともにトリメチレン基を形成し、Ｒ_２は、水素原子であるか、またはＲ_１とともにトリメチレン基を形成し、Ｒ_３は、水素原子、炭素数５以下のアルキル基、ベンジル基またはベンゾイル基であり、Ｒ_４は、炭素数５以下のアルキル基、ベンジル基またはフェニル基である。］
7. 前記アミノ酸エステルが、Ｌ−アラニン、Ｌ−アルギニン、Ｌ−アスパラギン、Ｌ−システイン、Ｌ−グルタミン、グリシン、Ｌ−ヒスチジン、Ｌ−イソロイシン、Ｌ−ロイシン、Ｌ−リシン、Ｌ−メチオニン、Ｌ−フェニルアラニン、Ｌ−プロリン、Ｌ−セリン、Ｌ−トレオニン、Ｌ−トリプトファンおよびＬ−バリンからなる群から選択されるいずれか１のアミノ酸のメチルエステルもしくはエチルエステル、またはＬ−アスパラギン酸およびＬ−グルタミン酸からなる群から選択されるいずれか１のアミノ酸のモノメチルエステル、ジメチルエステル、モノエチルエステルもしくはジエチルエステルである、請求項１〜６のいずれかに記載のコーティング組成物。
8. 前記ヒアルロン酸もしくはそのヒドロキシ基の水素原子の少なくとも一部をアルカノイル基で置換したアルカノイル化ヒアルロン酸またはその塩の含有量（Ａ）と、前記アミノ酸エステルまたはその塩の含有量（Ｂ）との質量比（Ａ／Ｂ）が、０．０００８〜０．８（質量／質量）である、請求項１〜７のいずれかに記載のコーティング組成物。
9. さらに低級アルコールを含有する、請求項１〜８のいずれかに記載のコーティング組成物。
10. 前記低級アルコールがグリセリンである、請求項９に記載のコーティング組成物。
11. 前記水不溶性薬剤が、ラパマイシン、パクリタキセル、ドセタキセルおよびエベロリムスからなる群から選択される少なくとも１つである、請求項１〜１０のいずれかに記載のコーティング組成物。
12. 前記医療機器が、管腔内で径方向に拡張可能な医療機器である、請求項１〜１１のいずれかに記載のコーティング組成物。
13. 前記管腔内で径方向に拡張可能な医療機器がバルーンカテーテルまたはステントである、請求項１２に記載のコーティング組成物。
14. 請求項１〜１２のいずれかのコーティング組成物により医療機器の表面の少なくとも一部に形成される薬剤コート層。
15. 請求項１〜１１のいずれかに記載のコーティング組成物でコートされた管腔内で径方向に拡張可能な医療機器。