JP6007182B2 - 胚、卵母細胞および幹細胞の自動撮像および評価のための装置、手段およびシステム - Google Patents
胚、卵母細胞および幹細胞の自動撮像および評価のための装置、手段およびシステム Download PDFInfo
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Description
本明細書は、その全てが参考文献によって本明細書に組み込まれている開示物である、2010年9月27日に出願された米国特許仮出願第61/386,765号明細書の利益を請求する。
本願明細書は、例えば、以下の項目も提供する。
(項目1)
培養器と併用する、ヒト胚、卵母細胞または多能性細胞の自動撮像および評価のための装置であって、
少なくとも1つのハウジングと、
前記ハウジング内に配置され、少なくとも1つの光源、および、少なくとも1つの撮像用カメラを有する、少なくとも1つの微速度顕微鏡と、
前記ハウジングから外側に延在し、複数のヒト胚または多能性細胞を保持するマルチウェル培養ディッシュを堅固に固定する、少なくとも1つのローディングプラットフォームと、
少なくとも1つの前記撮像用カメラからの画像を保存し、経時的画像シーケンスを解析するためにプログラムされたコンピュータと、
前記コンピュータに接続され、少なくとも1つの微速度顕微鏡を制御するためのグラフィカルユーザーインターフェースを表示する、少なくとも1つのタッチスクリーンパネルと、
を含む装置。
(項目2)
前記ハウジングが、胎児毒性のない物質から構成される、項目1に記載の装置。
(項目3)
前記ハウジングが、患者情報を示すためのインディケーターを含む、項目1に記載の装置。
(項目4)
前記少なくとも1つの微速度顕微鏡が、照明サブアセンブリと、撮像サブアセンブリを含む、項目1に記載の装置。
(項目5)
さらに、バーコードスキャナー等の走査器を含む、項目1の装置。
(項目6)
前記照明サブアセンブリが、暗視野照明アセンブリを含む、項目4に記載の装置。
(項目7)
前記照明サブアセンブリが、
LEDと、
光軸レンズと、
ディフューザーと、
暗視野開口部と、
直角鏡と、
集光レンズと
を含む、項目4に記載の装置。
(項目8)
前記撮像サブアセンブリが、
第一の対物レンズと、
前記対物レンズの焦点を合わせるための平行移動ステージと、
コンピュータ−制御焦点を提供するための、前記平行移動ステージに連結されたモーターと、
直角鏡と、
高品質チューブレンズとして働くための、チューブレンズまたは第二対物レンズと、
画像を取得するためのカメラと、
を含む、項目4に記載の装置。
(項目9)
前記撮像サブアセンブリがさらに、ローディングプラットフォームまたはマルチウェル培養ディッシュの少なくとも1つを移動させるための機構を含む、項目8に記載の装置。
(項目10)
前記照明サブアセンブリが、
集光レンズと、
光を遮るように構成された第一表面を有し、前記第一表面の反対に第二表面を有する、暗視野開口部であって、少なくとも1つの穴を画定している暗視野開口部と、
前記暗視野開口部の前記第二表面に接続した第二光源と、を含み、
照明アセンブリの第一モードにおいて、第一光源が、試料に到着する前に、暗視野開口部と集光レンズ中の少なくとも1つの穴を横断する光を発生させ、
照明アセンブリの第二モードにおいて、第二光源が、暗視野開口部中の少なくとも1つの穴を横切ることなしに、試料に届く光を発生させ、第一光源が光を発生させない、項目4に記載の装置。
(項目11)
前記ローディングプラットフォームが、
マルチウェル培養ディッシュを配置するためのバックプレートと、
マルチウェル培養ディッシュを所定の位置に収める陥溝と、
マルチウェル培養ディッシュの整列のための複数のマーカーと、
のうちの少なくとも1つを含む、項目1に記載の装置。
(項目12)
前記マルチウェル培養ディッシュが、それぞれが、単一のヒト胚または多能性細胞を保持する複数のマイクロウェルを含む、項目1に記載の装置。
(項目13)
前記マルチウェル培養ディッシュが、
複数のマイクロウェル周辺に位置する外側環と、
洗浄のための溶媒ドロップを保持するための複数の環と、
前記複数のマイクロウェルの近くに位置する複数のマーカーと、
前記ディッシュを、所定の方向にて、ローディングプラットフォーム内に搭載するための電鍵操作機構と、を含む、項目12に記載の装置。
(項目14)
前記培養ディッシュが、マイクロウェルの複数の群をから成る、項目13に記載の装置。
(項目15)
前記マルチウェル培養ディッシュがさらに、患者識別機構を含む、項目11に記載の装置。
(項目16)
前記患者識別機構が、バーコード、印刷ラベル、ステッカー、ディッシュに直接印刷されたラベル、およびRFIDタグからなる群より選択される、項目15に記載の装置。
(項目17)
前記コンピュータが、複数のウェル培養ディッシュの、ローディングプラットフォームへの前記搭載をモニタするため、また、マルチウェル培養ディッシュのローディングプラットフォームへの搭載位置不具合を修正するためにプログラムされる、項目1に記載の装置。
(項目18)
前記グラフィカルユーザーインターフェースが、少なくとも1つの顕微鏡によって取得された画像を表示するために、複数の表示画面を含む、項目1に記載の装置。
(項目19)
前記グラフィカルユーザーインターフェースが、少なくとも1つの微速度顕微鏡によって取得された画像に関する情報を表示する、複数の表示画面を設定するための、ユーザーが設定可能なインターフェースを含む、項目18に記載の装置。
(項目20)
前記グラフィカルユーザーアイエヌジーターフェースが、マルチウェル培養ディッシュが適切な位置にある際、それを示す、少なくとも1つの微速度顕微鏡を初期化するための、初期化ボタンを含む、項目18に記載の装置。
(項目21)
前記グラフィカルユーザーインターフェースが、患者情報を表示するための、表示画面を含む、項目18に記載の装置。
(項目22)
前記グラフィカルユーザーインターフェースが、少なくとも1つの微速度顕微鏡に関連する動作状態を表示するための、表示画面を含む、項目18に記載の装置。
(項目23)
前記グラフィカルユーザーインターフェースが、マルチウェル培養ディッシュ内の各ウェルの拡大視野を表示するための、ズーミングウインドウを含む、項目18に記載の装置。
(項目24)
前記グラフィカルユーザーインターフェースが、患者情報を入力するためにバーチャルキーボードを含む、項目18に記載の装置。
(項目25)
前記グラフィカルユーザーインターフェースがさらに、一時停止ボタン、再開ボタンボタンおよび停止ボタンを含む、項目18に記載の装置。
(項目26)
ヒト胚、卵母細胞または多能性細胞の自動撮像および評価のための方法であって、
少なくとも1つのヒト胚または多能性細胞を、マルチウェル培養ディッシュに配置することと、
ハウジング内部に少なくとも1つの微速度顕微鏡を有する撮像システムのローディングプラットフォームに、マルチウェル培養ディッシュを装填することと、
必要な場合に、マルチウェル培養ディッシュの位置および方向を検証するために、前記ローディングプラットフォームへのマルチウェル培養ディッシュの搭載を調節することと、
マルチウェル培養ディッシュの微速度撮影画像を取得することと、
タッチ−画面パネルによってアクセス可能なグラフィカルユーザーインターフェースに、少なくとも1つの微速度顕微鏡によって取得された画像を表示することと、
少なくとも1つのヒト胚または多能性細胞の成長潜在力を判定するために、マルチウェル培養ディッシュの微速度撮影画像を解析することと、
を含む、方法。
(項目27)
マルチウェル培養ディッシュが、少なくとも1つの微速度顕微鏡内に含まれた撮像用カメラによって検出した画像中で存在するかどうか判定することをさらに含む、項目26に記載の方法。
(項目28)
さらに、マルチウェル培養ディッシュ内の複数のマイクロウェルの試料の有無を判定することを含む、項目26に記載の方法。
(項目29)
さらに、少なくとも1つのヒト胚または多能性細胞の成長潜在力に関するパラメータを定めることを含む、項目26に記載の方法。
(項目30)
前記パラメータに、第一細胞質分裂の期間が含まれる、項目29に記載の方法。
(項目31)
前記パラメータに、細胞質分裂1と細胞質分裂2の間の時間間隔が含まれる、項目29に記載の方法。
(項目32)
前記パラメータに、細胞質分裂2と細胞質分裂3の間の時間間隔が含まれる、項目29に記載の方法。
(項目33)
マルチウェル培養ディッシュであって、
培養ディッシュの下部表面上に処置された環であって、前記環が空洞を画定し、上部表面、外側表面、内側表面を有し、前記空洞が空洞底を有する環と、
前記空洞底によって画定され、それぞれが、ヒト胚または多能性細胞を保持するように構成されている複数のマイクロウェルと、を含み
前記環の前記内側表面が、前記外側表面と、複数のマイクロウェル間で処置され、前記環の上部表面から空洞底まで延在し、
前記環の内側表面が、前記培養ディッシュの前記下部表面における前記環の第一幅が、前記環の前記上部表面における前記間の第二幅よりも大きいように、複数のマイクロウェルに向かって傾く、
マルチウェル培養ディッシュ。
(項目34)
前記環の前記第一幅が、前記環の前記第二幅よりも2倍〜6倍の範囲である、項目33に記載のマルチウェル培養ディッシュ。
(項目35)
複数のマイクロウェルの少なくとも1つの下部表面が丸みを帯びている、項目33に記載のマルチウェル培養ディッシュ。
(項目36)
前記複数のマイクロウェルの少なくとも1つの中心における第一深度が、前記複数のマイクロウェルの少なくとも1つの側方周囲における第二深度より、1.1〜1.5倍の範囲である、項目33に記載のマルチウェル培養ディッシュ。
(項目37)
複数のマイクロウェルの少なくとも1つの下部表面が円錐である、項目33に記載のマルチウェル培養ディッシュ。
(項目38)
前記環の横断面が本質的に円形である、項目33に記載のマルチウェル培養ディッシュ。
(項目39)
前記環が第一環であり、さらに洗浄のために溶媒ドロップを保持するように構成される第二環を含む、項目33に記載のマルチウェル培養ディッシュ。
(項目40)
前記第一環と前記第二環周辺に位置した第三環をさらに含む、項目39に記載のマルチウェル培養ディッシュ。
(項目41)
前記環が第一環であり、さらに、
前記第一環の周辺に位置する第二環と、
前記第二環の側表面に隣接して位置するマーカーと、
を含む、項目33に記載のマルチウェル培養ディッシュと、
(項目42)
マルチウェル培養ディッシュであって、
前記培養ディッシュの下部表面上に位置する環であって、前記環が、空洞を画定し、上部表面、外側表面および内側表面を有し、前記空洞が空洞底を有する、
前記空洞底によって画定され、それぞれが、ヒト胚または多能性細胞を保持するように構成されている複数のマイクロウェルと、を含み
複数のマイクロウェルの少なくとも1つの下部表面が、丸みを帯びているか円錐である、マルチウェル培養ディッシュ。
(項目43)
複数のマイクロウェルの少なくとも1つの下部表面が丸みを帯びている、項目42に記載のマルチウェル培養ディッシュ。
(項目44)
前記複数のマイクロウェルの少なくとも1つの中心における第一深度が、前記複数のマイクロウェルの少なくとも1つの側方周囲における第二深度より、1.1〜1.5倍大きい範囲内である、項目42に記載のマルチウェル培養ディッシュ。
(項目45)
複数のマイクロウェルの少なくとも1つの下部表面が円錐である、項目42に記載のマルチウェル培養ディッシュ。
(項目46)
前記環の内部側表面が、外側表面と複数のマイクロウェル間に処置され、前記環の上部表面から前記空洞底まで延在し、
前記環の内側表面が、前記培養ディッシュの前記下部表面における前記環の第一幅が、前記環の前記上部表面における前記環の第二幅よりも大きいように、複数のマイクロウェルに向かって傾く、
項目42に記載の、マルチウェル培養ディッシュ。
(項目47)
前記環の前記第一幅が、前記環の前記第二幅よりも2倍〜6倍大きい範囲である、項目42に記載のマルチウェル培養ディッシュ。
(項目48)
2モード撮像のための照明アセンブリであって、
第一光源と、
集光レンズと、
光を遮断するように構成された第一表面を有し、前記第一表面と反対に第二表面を有する暗視野開口部であって、少なくとも1つの穴を画定する暗視野開口部と、
前記暗視野開口部の前記第二表面に接続した第二光源と、を含み、
照明アセンブリの第一モードにおいて、第一光源が、試料に到着する前に、暗視野開口部と集光レンズ中の少なくとも1つの穴を横断する光を発生させ、前記第二光源が光を発生せず、
照明アセンブリの第二モードにおいて、第二光源が、暗視野開口部中の少なくとも1つの穴を横切ることなしに、試料に届く光を発生させ、第一光源が光を発生させない、照明アセンブリ。
(項目49)
前記照明アセンブリが、ヒト胚、卵母細胞または多能性細胞の少なくとも1つの短時間撮影暗視野撮影を実行するために、第一モードに設定され、
短時間撮影暗視野撮影の完了後、照明アセンブリが、ヒト胚、卵母細胞または多能性細胞の少なくとも1つの明視野撮影を実行するために、第二モードにて設定される、
項目48に記載の照明アセンブリ。
(項目50)
前記照明アセンブリが、第一モードは微速度撮影に設定し、
前記照明アセンブリが、第二モードは、形態学的観察を目的として、間歇撮影に設定された、
項目49に記載の照明アセンブリ。
(項目51)
前記照明アセンブリが、少なくとも1時間に1回、第一モードと第二モードで配置される間で交互に起きる、項目49に記載の照明アセンブリ。
(項目52)
前記暗視野開口部と前記第二光源が、1つの、統合された開口部および光源に組み込まれる、項目48に記載の照明アセンブリ。
(項目53)
自動ディッシュ検出と、ウェル使用状態判定を行う装置であって、
撮像用カメラによって検出された画像内の、マルチウェル培養ディッシュの存在を検出するように構成されるディッシュ検出モジュールと、
マルチウェル培養ディッシュに含まれる各複数のマイクロウェルの位置を確定するように構成される、ウェル位置判定モジュールと、
複数のマイクロウェルの各位置に基づく、複数のマイクロウェル内の、マイクロウェルの存在を判定するように構成されたウェル使用状態判定モジュールと、
試料のあるマイクロウェルを少なくとも表示するように構成された表示モジュールと、
少なくとも1つのメモリまたは処理デバイス中に埋め込まれている少なくとも1つのディッシュ検出モジュール、ウェル位置判定モジュール、ウェル使用状態判定モジュール、または表示モジュールと、
を含む装置。
(項目54)
試料のあるマイクロウェルのみが、マスクされた画像中に含まれるように、前記表示モジュールが、画像に基づいてマスクされた画像を生成するように構成され、前記表示モジュールが、少なくともマスクされた画像を表示するように構成される、項目53に記載の装置。
(項目55)
さらに、画像に焦点を合わせるように構成され、マスクされた画像に焦点を合わせるように構成された自動焦点モジュールを含む、項目54に記載の装置。
(項目56)
さらに画像の照明を調整するように構成される自動露出システムを含む、項目54に記載の装置。
(項目57)
ウェル位置判定モジュールがさらに、
第一座標系中の複数のマイクロウェルの各初期位置と初期方向を確定し、
複数のマイクロウェルの各初期方向に基づいて、第二座標系中の複数のマイクロウェルの各位置を確定し、前記第二座標系が、前記第一座標系に対して回転し、
前記第二座標系中の複数のマイクロウェルの各位置に基づいて、前記第二座標系中の複数のマイクロウェルの各空間範囲を確定する、
ように構成される、項目53に記載の装置。
(項目58)
前記ウェル使用状態判定モジュールが、複数のマイクロウェルの各位置および空間範囲に基づいて、試料のあるマイクロウェルを確定する、項目57に記載の装置。
(項目59)
前記ウェル位置判定モジュールがさらに、複数のマイクロウェルの各位置の初期推定および方向の初期推定を確定するように構成され、
前記表示モジュールがさらに、複数のマイクロウェルの各位置の初期推定および方向の初期推定に基づいて、複数のマイクロウェルを表示するように構成される、
項目53に記載の装置。
(項目60)
複数のマイクロウェルの各位置の初期推定と方向の初期推定が、テンプレートマルチウェル培養ディッシュ中に含まれる複数のマイクロウェルの全範囲を示しているテンプレートに基づいて確定される、項目59に記載の装置。
(項目61)
前記ウェル位置判定モジュールがさらに、複数のマイクロウェルの各より正確な推定位置と、より正確な推定方向を確定するように構成される、項目59に記載の装置。
(項目62)
前記表示モジュールがさらに、複数のマイクロウェルの各より正確な推定位置と、より正確な推定方向に基づいて、複数のマイクロウェルを表示するように構成される、項目61に記載の装置。
(項目63)
複数のマイクロウェルの各、より正確な推定位置とより正確な推定方向が、任意の多マイクロウェルの完全範囲を表すことなしに、テンプレートマルチウェル培養ディッシュ内の複数のマイクロウェル間の境界を表しているテンプレートに基づいて確定される、項目61に記載の装置。
(項目64)
自動ディッシュ検出およびウェル使用状態判定のための方法であって、
撮像用カメラによって検出された画像中のマルチウェル培養ディッシュの存在を検出することと、
マルチウェル培養ディッシュ中に含まれる複数のマイクロウェルの各位置を確定することと、
複数のマイクロウェルの各位置に基づいて、複数のマイクロウェル中に含まれる試料のあるマイクロウェルを確定することと、
少なくとも試料のあるマイクロウェルを表示することと、
を含む方法。
(項目65)
さらに、
試料のあるマイクロウェルのみがマスクされた画像中に含まれるように、画像に基づいてマスクされた画像を生成することと、
少なくともマスクされた画像を表示することと、
を含む、項目64に記載の方法。
(項目66)
さらに、
画像に焦点を合わせることと、
マスクされた画像に焦点を合わせることと、
を含む、項目65に記載の方法。
(項目67)
さらに、画像の照明を調整することと、を含む、項目64に記載の方法。
(項目68)
さらに、
第一座標系中、複数のマイクロウェルの各初期位置と初期方向を確定することと、
複数のマイクロウェルの各初期方向に基づいて、第二座標系中の複数のマイクロウェルの各位置を確定することで、前記第二座標系が、前記第一座標系に対して回転すると、
前記第二座標系中複数のマイクロウェルの各位置に基づいて、第二座標系中の複数のマイクロウェルの各空間範囲を確定することと、
を含む、項目64に記載の方法。
(項目69)
前記試料のあるマイクロウェルを確定することが、複数のマイクロウェルの各位置および空間範囲に基づく、項目68に記載の方法。
(項目70)
さらに、
複数のマイクロウェルの各位置の初期推定と、方向の初期推定を確定することと、
複数のマイクロウェルの各位置の初期推定と、方向の初期推定に基づいて複数のマイクロウェルを表示することと、
を含む、項目64に記載の方法。
(項目71)
複数のマイクロウェルの各位置の初期推定と、方向の初期推定を確定することが、テンプレートマルチウェル培養ディッシュ中に含まれる多マイクロウェルの完全範囲を表しているテンプレートに基づく、項目70に記載の方法。
(項目72)
さらに、複数のマイクロウェルの各より正確な推定位置と、より正確な推定方向を確定することを含む、項目70に記載の方法。
(項目73)
さらに、複数のマイクロウェルの各より正確な推定位置と、より正確な推定方向に基づいて、複数のマイクロウェルを表すことを含む,項目72に記載の方法。
(項目74)
複数のマイクロウェルの各より正確な推定位置と、より正確な推定方向を確定することが、任意の多マイクロウェルの完全範囲を表すことなしに、テンプレートマルチウェル培養ディッシュ中の多重のマイクロウェル間の境界を表しているテンプレートに基づく、項目72に記載の方法。
(項目75)
ヒト胚、卵母細胞または多能性細胞の自動撮像装置であって、
マルチウェル培養ディッシュをインキュベートするように構成された培養チャンバーであって、第一ウインドウを含む上部表面と、第二ウインドウを含む下部表面をもつ培養チャンバーと、
前記第一ウインドウおよび前記第二ウインドウを通して通過している光源からの光に基づく、前記培養チャンバー内のマルチウェル培養ディッシュの画像を生成するように構成された光源と撮像用カメラとを含む微速度顕微鏡であって、前記培養チャンバーと前記微速度顕微鏡とが、共通のハウジング中に統合され、
前記微速度顕微鏡を制御するための、グラフィカルユーザーインターフェースを表示するように構成されるタッチスクリーンパネルと、
を含む装置。
(項目76)
前記培養チャンバーが、1〜8個の培養ディッシュを保持するように構成される、項目75に記載の装置。
(項目77)
さらにプロセッサーを含み、前記プロセッサーが、マルチウェル培養ディッシュの存在と、マルチウェル培養ディッシュ中に含まれる複数のマイクロウェル内の試料の有無の自動検出を実行するように構成される、項目75に記載の装置。
(項目78)
さらにプロセッサーを含み、前記プロセッサーが、撮像用カメラによって生成された画像を解析するように構成される、項目75に記載の装置。
(項目79)
さらに電子管理回路を含み、前記電子管理回路が、
光源が点いている時間の長さを測定するよう、かつ
前記時間の長さが閾値より長い場合、光源を切るよう、
に構成される、項目75に記載の装置。
(項目80)
前記閾値が、5秒間〜15秒間の範囲である、項目79に記載の装置。
(項目81)
培養器とともに利用するための、ヒト胚、卵母細胞または多能性細胞の自動撮像および評価システムであって、
複数の撮像顕微鏡であって、複数の撮像顕微鏡のそれぞれが、複数のハウジングの対応する1つの中に位置し、少なくとも1つの光源と少なくとも1つの撮像用カメラを含み、複数のハウジングのそれぞれが、前記培養器内に位置し、
複数のハウジングのそれぞれから外側に延在するローディングプラットフォームであって、複数のヒト卵母細胞または多能性細胞を保持するマルチウェル培養ディッシュを堅固に固定するためのローディングプラットフォームと、
複数の撮像顕微鏡のそれぞれに電子的に連結された制御装置であって、前記制御装置は、培養器の内側に位置し、少なくとも1つの光源を制御し、
少なくとも1つの撮像用カメラからの画像を保存し、経時的な画像のシーケンスを解析するためにプログラムされたコンピュータであって、前記コンピュータは、前記制御装置を介して複数の撮像顕微鏡のそれぞれに電子的に接続されているコンピュータと、
を含むシステム。
(項目82)
さらに、コンピュータに電子的に連結された少なくとも1つのタッチスクリーンパネルを含み、少なくとも1つの撮像顕微鏡を制御するためにグラフィカルユーザーインファーフェースを表示する、項目81に記載のシステム。
(項目83)
前記グラフィカルユーザーインターフェースが、患者情報を入力するためのバーチャルキーボードを含む、項目82に記載のシステム。
(項目84)
前記グラフィカルユーザーインターフェースが、マルチウェル培養ディッシュに含まれる複数のマイクロウェルの画像、すなわち複数の撮像顕微鏡によって取得された画像を表示するための、複数の表示画面を含む、項目82に記載のシステム。
(項目85)
前記グラフィカルユーザーインターフェースに、少なくとも1つの撮像顕微鏡に関連する操作状態を表示するための表示画面が含まれる、項目82に記載のシステム。
(項目86)
前記操作状態に、複数の撮像顕微鏡のそれぞれに関連する複数のアラームが含まれ、前記複数のアラームの少なくとも1つが、少なくとも1つの撮像用カメラによって引き出されている過電流を示す、項目85に記載のシステム。
(項目87)
前記制御装置が複数のスイッチを含み、前記複数のスイッチのそれぞれが、複数の撮像顕微鏡の対応する1つに関連する複数のアラームをリセットするように構成される、項目86に記載のシステム。
(項目88)
前記制御装置が、複数のハウジングのそれぞれでの熱発生を少なくするために、少なくとも1つの撮像用カメラ中に含まれるモーターに対するドライバーを含む、項目81に記載のシステム。
(項目89)
少なくとも1つの撮像用カメラが、マルチウェル培養ディッシュを横切っている少なくとも1つの光源からの光に基づいて、マルチウェル培養ディッシュ中に含まれる複数のマイクロウェルの画像を生成するように構成され、
前記制御装置が、少なくとも1つの光源が点灯している時間の長さを測定し、前記時間の長さが閾値よりも長い場合、少なくとも1つの光源を消すように構成される、
項目81に記載のシステム。
(項目90)
前記閾値が、1秒間〜15秒間の範囲である、項目89に記載のシステム。
(項目91)
前記ローディングプラットフォームに、ローディングプラットフォーム上のマルチウェル培養ディッシュの位置合わせを容易にする、インディケーターLEDが含まれ、
前記制御装置が、前記インディケーターLEDが点灯している時間の長さを測定し、前記時間が閾値よりも長い場合、前記インディケーターLEDを消すように構成される、
項目81に記載のシステム。
(項目92)
前記閾値が、1分間〜7分間の範囲である、項目91に記載のシステム。
(項目93)
さらに上部表面、下部表面と、前記上部表面と前記下部表面間で延在する側方周囲を有するストッパーを含み、
前記ストッパーが、複数の穴を画定し、複数の穴のそれぞれが、上部表面から下部表面に延在し、ストッパーの内部側面に外接し、
前記ストッパーが、複数の切り込みを画定し、複数の切り込みのそれぞれが、側方周囲から、複数の穴の対応する1つに外挿している内部側表面に延在する、
項目81に記載のシステム。
(項目94)
さらに、複数のケーブルを含み、複数のケーブルのそれぞれが、複数の撮像顕微鏡の対応する1つを、前記制御装置に連結し、
複数のケーブルのそれぞれが、複数の穴の対応する1つを通り、複数の穴の対応する1つ中に摺動可能的に調節でき、
複数の切り込みのそれぞれが、複数のケーブルのそれぞれが、複数の切り込みの対応する1つを通して、複数の穴の対応する1つ内に挿入可能であるように構成される、
項目93に記載のシステム。
(項目95)
前記ストッパーが、複数のケーブルのそれぞれが、圧縮封止状態によって適切な位置に滑止するよう、圧縮封止状態を生成するために、培養器のパネルによって画定される穴にぴったりと嵌合する、項目94に記載のシステム。
(項目96)
ヒト胚、卵母細胞、多能性細胞の自動評価および表示のための方法であって、
複数のマルチウェル培養ディッシュの画像を収集することであって、前記の複数のマイクロウェル培養ディッシュのそれぞれが、複数のマイクロウェルを含み、複数のマイクロウェルの少なくとも1つが、少なくとも1つのヒト胚または多能性細胞を含み、
前記複数のマルチウェル培養ディッシュの画像を解析することと、
複数のマルチウェル培養ディッシュのそれぞれに関連したステータス情報を同時に表示すること、とを含む方法。
(項目97)
前記ステータス情報が、
複数のマルチウェル培養ディッシュのそれぞれに関連する患者情報と、
複数のマルチウェル培養ディッシュの各画像の群の第一ステータスと、
複数のマルチウェル培養ディッシュの各画像の解析の第二ステータスと、
を含む、項目96に記載の方法。
(項目98)
複数のマルチウェルディッシュの最初の1つの前記第一ステータスが、複数のマルチウェル培養ディッシュの第二の1つの前記第一ステータスとは異なる、項目97に記載の方法。
(項目99)
複数のマルチウェルディッシュの最初の1つの前記第一ステータスが、複数のマルチウェル培養ディッシュの第二の1つの前記第二ステータスとは異なる、項目97に記載の方法。
(項目100)
さらに、
前記複数のマルチウェル培養ディッシュの1つに関連する情報の選択を受け取ることと、
選択を受け取ると、前記複数のマルチウェル培養ディッシュの1つに関連したステータス情報を表示することと、
を含む、項目96に記載の方法。
(項目101)
さらに、選択を受け取ると、前記複数のマイクロウェル培養ディッシュの1つの画像を表示することと、を含む、項目100に記載の方法。
(項目102)
さらに、
複数のマルチウェル培養ディッシュの1つに含まれるマイクロウェルに関連する情報の選択を受け取ることと、
選択に受け取ると、マルチウェル中に含まれるヒト胚の画像の解析に基づいて定めたパラメータを表示することと、
を含む、項目96に記載の方法。
(項目103)
前記パラメータに、第一細胞質分裂の期間が含まれる、項目102に記載の方法。
(項目104)
前記パラメータに、細胞質分裂1と細胞質分裂2間の時間間隔が含まれる、項目102に記載の方法。
(項目105)
前記パラメータに、細胞質分裂2と細胞質分裂3間の時間間隔が含まれる、項目102に記載の方法。
(項目106)
ヒト胚、卵母細胞または多能性細胞の自動撮像および評価のためのシステムであって、
複数の微速度顕微鏡であって、各複数の微速度顕微鏡が、複数のハウジングの対応する1つの内部に位置し、少なくとも1つの光源と少なくとも1つの撮像用カメラを含み、各複数のハウジングが培養器内に位置し、
各複数のハウジングから外側に延在するローディングプラットフォームであって、複数のヒト胚または多能性細胞を保持する少なくとも1つのマルチウェル培養ディッシュを堅固に固定するためのローディングプラットフォーム、
複数の微速度顕微鏡に電気的に接続されたに接続されたコンピュータと、
ネットワーク上、前記コンピュータと通信するように構成され、少なくとも1つのマルチウェル培養ディッシュ内に含まれるヒト胚または多能性細胞の画像の解析に基づいて判定された、ステータス情報とパラメータを提供する、グラフィカルユーザーインターフェースを表示するように構成されたサーバーであって、前記ステータス情報が、複数の微速度顕微鏡のそれぞれに関連し、少なくとも1つの画像が、複数の微速度顕微鏡のそれぞれによって生成されるサーバーと、
を含むシステム。
(項目107)
前記ステータス情報が、
少なくとも1つのマルチウェル培養ディッシュに関連する患者情報と、
少なくとも1つのマルチウェル培養ディッシュの画像の群の第一ステータスと、
少なくとも1つのマルチウェル培養ディッシュの画像の解析の第二ステータスと、
を含む、項目106に記載のシステム。
(項目108)
前記ステータス情報が、複数の微速度顕微鏡のそれぞれに関連する複数のアラームを含み、少なくとも1つの複数のアラームが、少なくとも1つの撮像用カメラによって引き出されている過電流を示す、項目106に記載のシステム。
(項目109)
前記パラメータに、第一細胞質分裂の期間が含まれる、項目106に記載の方法。
(項目110)
前記パラメータに、細胞質分裂1と細胞質分裂2間の時間間隔が含まれる、項目106に記載の方法。
(項目111)
前記パラメータに、細胞質分裂2と細胞質分裂3間の時間間隔が含まれる、項目106に記載の方法。
語句「成長潜在力」および「発達能力」は、本明細書内で、健康な胚または多能性細胞が、増殖または発達する能力または性質を意味するために使用される。
図1を参照して、本発明の実施形態に係る装置100の概略図を記述する。装置100には、本明細書以下でより詳細に記述する、撮像システム110〜120を保持するための1つまたはそれ以上のスリーブを有する標準培養器105が含まれる。撮像システム110〜120は、ローディングプラットフォームを有し、それらのローディングプラットフォーム上に搭載されたディッシュ中で培養された1つまたはそれ以上の胚を撮像するために、培養器105内に配置される。
1.ディッシュ805の配置を助けるバックプレート、
2.その中にディッシュ805が収納される凹型溝(ミリメートル深未満)、
3.ある一定方向でのローディングのみを可能として認める、ディッシュ805上の電鍵操作(機械的)機能、
4.方向合わせを助ける(クロスヘア等の)マーカー類。ユーザーは、ディッシュ805を回転して、ディッシュ805上の水平線を中心線に合わせ込むことができる。
5.垂直線、または、他の特徴をディッシュ805に照射することを助けるインディケーターLED、
6.顕微鏡やソフトウェアで識別可能な、文字、数字、ドットまたは線等、ディッシュ上の基準マーカー、
7.顕微鏡を使ってディッシュ805の画像の取得と、ローディング手順の監視を行うにソフトウェア。インディケーターLEDは、ディッシュ805の方向が正確または不正確であることをユーザーに警告するために、色を変えることもできる。および/または
8.誤った位置合わせ判別して、(可能性として任意の方向でのローディングのみを認め)、それに応じた画像調節を行うソフトウェア、
等の、ディッシュ805が正しく配置され、方向を向くかどうか同定することを補助するために、種々の関連した特徴を持ってよい。
Claims (8)
- ヒト胚、卵母細胞または多能性細胞の自動撮像および評価のための方法であって、
少なくとも1つのヒト胚または多能性細胞を、マルチウェル培養ディッシュに配置することと、
ハウジング内部に少なくとも1つの微速度顕微鏡を有する撮像システムのローディングプラットフォームに、前記マルチウェル培養ディッシュをローディングすることと、
前記ローディングプラットフォームへの前記マルチウェル培養ディッシュのローディングを調節することにより、前記マルチウェル培養ディッシュの位置および方向を検証することであって、
前記位置および方向を検証することは、
前記マルチウェル培養ディッシュの画像を検出することと、前記マルチウェル培養ディッシュのウェルの位置を確定することと、前記マルチウェル培養ディッシュの検出された画像に対する漸次的に回転されたテンプレートの繰り返しの適用により前記マルチウェル培養ディッシュの方向を確定することとにより、前記マルチウェル培養ディッシュの初期整列を判定すること、および、
前記マルチウェル培養ディッシュに関する整列インディケーションを提供することであって、前記整列インディケーションは、前記マルチウェル培養ディッシュが正しく整列されている場合の第一インディケーションと、前記マルチウェル培養ディッシュが正しく整列されていない場合の第二インディケーションとを含む、こと
を含む、ことと、
前記マルチウェル培養ディッシュの微速度撮影画像を取得することと、
タッチ−画面パネルによってアクセス可能なグラフィカルユーザーインターフェースに、前記少なくとも1つの微速度顕微鏡によって取得された前記画像を表示することと、
前記マルチウェル培養ディッシュの前記微速度撮影画像を解析することにより、前記少なくとも1つのヒト胚または多能性細胞の成長潜在力を判定することと、
を含む、方法。 - 前記マルチウェル培養ディッシュが前記少なくとも1つの微速度顕微鏡内に含まれた撮像用カメラによって検出した画像中で存在するかどうかを判定することをさらに含む、請求項1に記載の方法。
- 前記マルチウェル培養ディッシュ内に含まれる複数のマイクロウェルの試料の有無を判定することをさらに含む、請求項1に記載の方法。
- 前記少なくとも1つのヒト胚または多能性細胞の成長潜在力に関するパラメータを定めることをさらに含む、請求項1に記載の方法。
- 前記パラメータは、細胞質分裂1の期間を含む、請求項4に記載の方法。
- 前記パラメータは、細胞質分裂1と細胞質分裂2の間の時間間隔を含む、請求項4に記載の方法。
- 前記パラメータは、細胞質分裂2と細胞質分裂3の間の時間間隔を含む、請求項4に記載の方法。
- 前記整列インディケーションは、光を含む、請求項1に記載の方法。
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