JP5946494B2 - Xcr1陽性細胞への送達のためのシステムおよびその使用 - Google Patents
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Description
(i)ケモカイン(Cモチーフ)受容体1(XCR1)に結合する分子、および
(ii)該分子と結合した、送達される物質
を含む。
であり、同一アミノ酸および多数派アミノ酸(即ち、配列四つのうち三つに存在する配列、別のアミノ酸はスラッシュの後にリストされる)を考慮した場合には、
である。配列番号:1〜3の配列のコンセンサス配列は、同一アミノ酸のみを考慮した場合には、
であり、同一アミノ酸および多数派アミノ酸(即ち、配列三つのうち二つに存在する配列、別のアミノ酸はスラッシュの後にリストされる)を考慮した場合には、
である。従って、本発明の好ましい送達システムにおいて、XCL1の機能活性バリアント、好ましくは機能活性断片は、配列番号:7〜10のいずれか、好ましくは配列番号:8〜10のいずれか、より好ましくは配列番号:9または10のいずれか、特に配列番号:10の配列を含むか、またはこれらからなる。
[本発明1001]
XCR1陽性プロフェショナル抗原提示細胞へ物質を送達するために適している送達システムであって、
(i)ケモカイン(Cモチーフ)受容体1(XCR1)に結合する分子、および
(ii)該分子と結合した、送達される物質
を含む送達システム。
[本発明1002]
物質(ii)が、免疫原、アジュバント、薬物、または毒性薬剤である、本発明1001の送達システム。
[本発明1003]
免疫原が、病原体、病原体由来抗原、アレルゲン、腫瘍抗原、または寛容原である、本発明1002の送達システム。
[本発明1004]
毒性薬剤が、細胞毒、アポトーシス誘導剤、リボソーム不活化剤、DNA切断剤、RNA切断剤、またはタンパク質合成の阻害剤である、本発明1002の送達システム。
[本発明1005]
分子(i)が、ケモカイン(Cモチーフ)リガンド1(XCL1)またはその機能活性バリアントである、本発明1001〜1004のいずれかの送達システム。
[本発明1006]
XCL1の機能活性バリアント、好ましくは、機能活性断片が、SEQ ID NO:7〜10のいずれか、好ましくはSEQ ID NO:8〜10のいずれか、より好ましくはSEQ ID NO:9もしくは10のいずれか、特にSEQ ID NO:10の配列を含むか、またはこれらからなる、本発明1005の送達システム。
[本発明1007]
分子(i)が抗XCR1抗体またはその断片である、本発明1001〜1006のいずれかの送達システム。
[本発明1008]
分子(i)が(ポリ)ペプチドである、本発明1001〜1006のいずれかの送達システム。
[本発明1009]
分子(i)が、約2,000g/モル未満の分子量を有する小さな有機分子である、本発明1001〜1006のいずれかの送達システム。
[本発明1010]
(iii)アジュバント、特に、「デンジャーシグナル」をさらに含む、本発明1001〜1009のいずれかの送達システム。
[本発明1011]
分子(i)、物質(ii)、および任意でアジュバント(iii)が、一つまたは複数の(ポリ)ペプチドである、本発明1001〜1008および1010のいずれかの送達システム。
[本発明1012]
分子(i)、物質(ii)、および任意でアジュバント(iii)が、共有結合的に、かつ/または非共有結合的に相互に結合している、本発明1001〜1011のいずれかの送達システム。
[本発明1013]
細胞が樹状細胞である、本発明1001〜1012のいずれかの送達システム。
[本発明1014]
特に、主要組織適合遺伝子複合体(MHC)クラスI分子による、対象におけるXCR1陽性プロフェショナル抗原提示細胞による、物質またはその断片の、抗原としての提示を媒介することができる、本発明1008および1010〜1013のいずれかの送達システム。
[本発明1015]
本発明1011〜1014のいずれかの送達システムの(ポリ)ペプチドをコードする一つまたは複数の核酸。
[本発明1016]
本発明1015の一つまたは複数の核酸を含むベクター。
[本発明1017]
本発明1001〜1014のいずれかの送達システムまたは本発明1015の一つまたは複数の核酸を含む医薬。
[本発明1018]
ワクチンおよび/またはアジュバントである、本発明1017の医薬。
[本発明1019]
特に、Th1応答、特に、Th1細胞障害性応答である、ペプチドに対する記憶免疫応答を誘導するための、本発明1017の医薬。
[本発明1020]
腫瘍および/または感染を防止または処置するための、本発明1019の医薬。
[本発明1021]
(ポリ)ペプチドに対する寛容を誘導するための、本発明1017の医薬。
[本発明1022]
移植片拒絶、アレルギー、および/または自己免疫疾患を阻害するための、本発明1021の医薬。
[本発明1023]
XCL1またはその機能活性断片を含むアジュバント。
[本発明1024]
XCR1陽性抗原提示細胞の機能をモジュレートすることにより、対象における免疫応答を増強するための、本発明1023のアジュバント。
C57BL/6マウス由来の脾臓を、37℃で、振とう水浴中で、25分間、2%(v/v)FBS(低内毒素;PAA,Pasching,Austria)、500μg/mlコラゲナーゼD、および20μg/ml DNaseI(いずれも、Roche Diagnostics GmbH,Penzberg,Germany)を含有しているRPMI1640において消化した。懸濁物を10mM EDTAに調整し、さらに5分間インキュベートした。細胞を70μmメッシュ(BD Biosciences,San Jose,CA,USA)に通し、MACS-PBS(PBS、2mM EDTA、0.5%(w/v)BSA(低内毒素))で濯いだ。4℃での380×gによる沈殿の後、細胞をMACS-PBSに懸濁させた。
200nM逆方向プライマー
および150nMハイブリダイゼーションプローブ
を使用した。マウスβ2ミクログロブリンを、300nM順方向プライマー
300nM逆方向プライマー、
および150nMハイブリダイゼーションプローブ
を使用して増幅した。mRNA/cDNAコピー定量化のための標準物を作成するため、特異的XCR1遺伝子断片を増幅し、Zero Backgroundクローニングキット(Invitrogen,Groningen,The Netherlands)を使用してpZErOベクターへクローニングした。qPCRのため、20μl PCR反応において、プライマーを、ROXを含む10μlのABsolute QPCR Mix(ABgene,Epsom,UK)および10分の1のcDNAと混合した。ABI Prism 7000または7700 Sequence Detection Systems(Applied Biosystems,Foster City,CA,USA)で、95℃における15分間の初期酵素活性化、それに続く50サイクル(95℃15秒;60℃1分)により、PCRを実施し定量化した。定量化のため、標準曲線を作成するため、100〜108コピーの範囲のクローニングされた遺伝子断片のいくつかの希釈物をパラレルに実行した。結果は以下の表1に示される。
実施例1に記載されたようなフローソーティングにより、>95%の純度で新鮮にソートされたCD8+ DCおよびCD8- DCに、2μM fura-2/AM(Molecular Probes,Brattleboro)を補足し、加湿雰囲気において、30分間、37℃および5%CO2で、ポリL-リジンコーティングされたカバーガラス上に沈着させた。付着細胞を、128mM NaCl、6mM KCl、1mM MgCl2、1mM CaCl2、5.5mMグルコース、10mM HEPES、0.2%(w/v)BSAを含有しているHEPES緩衝溶液で灌流し、倒立顕微鏡(Axiovert 100,Zeiss,Jena,Germany)のステージへマウントした。XCL1(100nM合成マウスXCL1(Dictagene,Lausanne,Switzerland))の適用の間、fura-2を、340nm、358nm、380nm、および480nmの単色光により連続的に励起し、蛍光放出を、冷却CCDカメラ(TILL-Photonics,Grafelfing,Germany)により512nmロングパスフィルターを通して検出した。CD8+ DCと結合したFITC標識抗体の弱い干渉シグナルを排除し、スペクトルアンミキシング(Lenz J.Cell Biol.2002,179:291-301)の後に[Ca2+]iを計算した。データは、三つの独立の実験において測定された45〜56個の単細胞(黒線)における細胞内Ca2+濃度([Ca2+]i)を表す。太黒線:測定された全細胞で平均化された平均[Ca2+]iシグナル。結果は、XCL1が、CD8+ DCにおいて強いCa2+シグナルを誘導するが(図2A)、CD8- DCにおいては誘導しない(図2B)ことを証明している。従って、結果は、CD8+ DCを特異的に活性化するXCL1の能力を証明しており、従って、XCL1は、XCR1保持APCのためのアジュバントとして作用する。
製造業者のプロトコル(Miltenyi Biotec,Bergisch Gladbach,Germany)に従って、CD11cミクロビーズを使用して、磁気分離により、C57BL/6脾細胞から、CD11c+細胞を高度に濃縮した。CD11c+細胞(0.5〜1×106)を100μlの培地に懸濁させ、5μm孔ポリカーボネート膜を含有している6.5mmのTranswell Permeable Support(Corning Costar Co.,Acton,MA,USA)に移した。Transwell Permeable Supportを、化学合成XCL1/ATAC(Dictagene,Lausanne,Switzerland)の段階希釈物または500ng/ml CCL21(ケモカイン(C-Cモチーフ)リガンド21;R&D Systems,Minneapolis,MN,USA)(後者は陽性対照として使用された)のいずれかを含有している600μlの培地が充填された24穴プレート(Corning Costar Co.(前記))に挿入し;全ての実験をデュプリケートで実施した。細胞を、細胞インキュベーター内で37℃で120〜150分間インキュベートした。膜の下側を軽く濯ぎ、下室内の細胞を、CD8(53-6.72-FITC;ATCC(前記))、CD11b(5C6-PE;ATCC(前記))、およびCD11c(N418-Cy5;ATCC(前記))の発現についてフローサイトメトリーにより分析した。各ウェルからの細胞懸濁物を明確な時間(5分)分析し、生細胞(DAPI陰性)の絶対数を決定した。下室内の細胞数を入力細胞数で割ることにより、遊走した細胞の割合[遊走細胞数/入力細胞数×100]を計算した。代表的な実験が図3に示される。XCL1に応答して、CD8+ DCは、特徴的な走化遊走の鐘形曲線を示し、1ng/mlの濃度では遊走せず、100ng/mlで最大遊走となり、1000ng/mlで減退応答が見られた。CD8- DCはXCL1に応答しなかったが、CCL21の存在下では遊走した。
ATAC遺伝子のエキソン2および3を、逆方向ネオマイシン遺伝子と交換する、ターゲティングベクターを使用した相同組み換えによる、胚性幹細胞におけるマウスATAC遺伝子の破壊により、XCL1欠損マウス(「ATAC-KO」)を作成した(図6)。サザンブロッティングにより同定されたように、正確にターゲティングされた胚性幹細胞を、キメラマウスの作成のために使用した。変異対立遺伝子の生殖系列への伝達およびヘテロ接合性ATAC欠損マウスの同種間交配の後、ホモ接合性ATAC欠損マウスが、F2世代において予想されるメンデルの法則の頻度で誕生し、それらを10世代にわたりC57BL/6バックグラウンドへ戻し交配した。標準的な方法によりマウスXCL1(GenBank Acc.No.:NM_008510)の完全コーディング領域がクローニングされたBCMGSneoベクター(Karasuyama et al.,1989,J Exp Med 169,13-25)により、電気穿孔により、マウスプレB細胞系300-19(Alt et al.,1981,Cell 27,381-90)をトランスフェクトした。G418含有選択培地中でのサブクローニングの後、細胞内フローサイトメトリー(Dorner et al.,2002,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 99,6181-86)により決定されるような、マウスXCL1/ATACを安定的に分泌する細胞系(muATAC/300-19と呼ばれる)が入手された。野生型300-19(「wt/300-19」)細胞およびmuATAC/300-19細胞を、37℃で10分間、10μM 5,6-カルボキシフルオレセインスクシンイミジルエステル(CFSE,Molecular Probe)と共にインキュベートすることにより蛍光標識し、洗浄し、雌XCL1欠損C57BL/6(「ATAC-KO」)マウスに静脈内注射した(各10×106細胞);対照マウスにはPBSのみを注射した。12時間後、マウスを屠殺し、脾臓を摘出し、標準的な方法に従って脾細胞を単離した。脾細胞を、標準的な方法により、CD3、CD4、CD8、CD11b、CD11c、CD19、MHC II、およびNK1.1について染色し、データの評価のため、FlowJo(Tree Star Inc.,Ashland,OR,USA)を使用して、LSR II(BD Biosciences)フローサイトメーターでの分析(結果は図7に示される)により、CSFEシグナルを細胞表面マーカーと相関させた。結果は、既に、300-19野生型細胞が脾臓においてCD8+ DCにより取り込まれていることを証明した(図8A)。しかしながら、XCL1トランスフェクト300-19細胞(「muATAC/300-19」)は、明白に、より高度に取り込まれた(およそ50%の増加)(図8A)。これらの結果は、XCL1が、CD11c+CD8+ DCによる抗原取り込みを容易にすることを証明した。脾臓CD11c+CD8- DCによる細胞取り込みは観察されなかった(図8B)。
5〜7×106個のKJ1-26+トランスジェニックDO11.10 CD4+ T細胞(Murphy et al.,1990,Science 250,1720-3)を含有している脾細胞を、同一遺伝子のBALB/cマウスに養子移入した 。これらのトランスジェニックDO11.10 CD4+ T細胞は、ニワトリオボアルブミン(OVA)ペプチド323-339
に特異的である。足蹠への100μg OVAまたは100μg OVA+アジュバントLPS(10μg)により、レシピエントマウスを免疫感作した。または、静脈内注射された2mg OVAにより、レシピエントマウスを免疫感作した。OVA特異的KJ1-26+CD4+ T細胞を、フローサイトメトリー細胞ソーティングにより、流入領域膝窩リンパ節(足蹠OVA注射の場合)または全末梢リンパ節(静脈内OVA注射の場合)から、14時間後、24時間後、または48時間後にレシピエントから回収した(純度>97%)。回収されたトランスジェニックT細胞から全RNAを単離し、カスタムTaqMan Low Density Array(Applied Biosystems)を使用した遺伝子発現分析に供した。入手されたデータは、表2にリストされる。
ATAC-KOマウス(実施例4を参照のこと)を、C57BL/6バックグラウンドへ10回戻し交配し、次いで、OT-Iトランスジェニックマウスへ戻し交配した(「OT-I ATAC-KO」)。OT-Iトランスジェニックマウスは、ニワトリオボアルブミン(OVA)(Hogquist et al.,1994,Cell 76,17-27)に由来するSIINFEKLペプチド(SEQ ID NO: 15)(オボアルブミンの8アミノ酸エピトープ)に特異的なトランスジェニックT細胞受容体を発現する。2×106個のOT-I T細胞を含有している全脾細胞を、静脈内(i.v.)注射により同一遺伝子C57BL/6レシピエントマウスへ養子移入した。平行して、2×106個のOT-I ATAC-KO T細胞を含有している全脾細胞を、同一遺伝子C57BL/6 ATAC-KOレシピエントマウスへ養子移入した。全ての場合に、雌のドナーマウスおよびレシピエントマウスを使用した。細胞移入の24時間後、以前に記載されたようにして(Bonifaz et al.,2002,J.Exp.Med.196,1627-38)、CD8+ DCへの抗原の優先的な送達を達成するため、抗DEC205抗体とコンジュゲートした100ngのOVA(「DEC-205-OVA」)により、レシピエントマウスをチャレンジした。
雌BALB/cマウスを、hXCR1の最初の31個のN末端アミノ酸を表すペプチド
により免疫感作した。ペプチドのN末端を、グルタルアルデヒドを使用して、キーホールリンペットヘモシアニンとカップリングさせた(31-N-hXCR1-KLH;P.Henklein,Charite,Berlinによる合成)。初回免疫感作を、完全フロイントアジュバント中の31-N-hXCR1-KLH(30μgの腹腔内適用および30μgの皮下適用)により実施した。3〜4週間の間隔の後、2回、不完全フロイントアジュバント中の50μg 31-N-hXCR1-KLHの腹腔内適用によりマウスを追加刺激した。2回目の追加刺激の6週間後、生理食塩水中のウシ血清アルブミン(31-N-hXCR1-BSA)と結合した31-N-hXCR1ペプチド(50μg)をマウスに静脈内注射した。3日後、モノクローナル抗体作成のための標準的なプロトコルに従い、マウスを屠殺し、脾細胞を骨髄腫系P3X63Ag8.653と融合させた。ハイブリドーマ上清のスクリーニングを、標準的なELISAアッセイにおいて、96穴プレートに吸着したカップリングしていない31-N-hXCR1ペプチドを使用して実施した。一つのハイブリドーマ(6F8)が、ELISAアッセイにおいて、強く一貫したシグナルを与え;従って、そのハイブリドーマをサブクローニングし、6F6抗体をhXCR1のさらなる特徴決定のために使用した。この目的のため、3'末または5'末のいずれかでc-mycエピトープEQKLISEEDL(SEQ ID NO:19)によりタグ化されるような様式で、hXCR1/hATACR(GenBank Acc.No.:L36149)の全コーディング領域をベクターBCMGSneo(前記)にクローニングすることにより、いくつかのhXCR1トランスフェクタントを作成した。続いて、マウス骨髄腫系P3X63Ag8.653を、いずれかのバージョンのベクターにより電気穿孔によりトランスフェクトし、二つのトランスフェクトされた細胞系「5'c-myc/hATACR/P3X」および「3'c-myc/hATACR/P3X」を、G418含有選択培地にサブクローニングした後、確立した。Dr.Bernhard Moser(Bern,Switzerland)より入手されたhXCR1によりトランスフェクトされたマウス細胞系(「hATACR/300-19」)も、研究に含まれた。mAb 6F8の上清を、様々な細胞系からhXCR1タンパク質を免疫沈降させるために使用した(図11)。この目的のため、トランスフェクタント「5'c-myc/hATACR/P3X」、「3'c-myc/hATACR/P3X」、および「hATACR/300-19」、ならびにそれぞれの野生型系からの溶解物を、標準的な方法に従って、各々5〜10×106個の細胞から作成した(溶解緩衝液:50mMトリス/HCl(pH 8)、150mM NaCl、1mM EDTA、+1%(v/v)Nonident P-40、lmM PMSF、10μMロイペプチンA、lμMペプスタチン、10μg/mlアプロチニン)。これらの溶解物を、予備浄化の後、標準的な方法に従い、mAb 6F8上清(5〜10ml)と共にインキュベートし、プロテインGビーズにより免疫沈降させた。標準的な方法に従い、免疫沈降物をSDS緩衝液中で変性させ、還元12%SDSゲル上で分離し、Immobilon P膜(Millipore)にエレクトロブロットした。ブロットを、ブロッキング緩衝液で2500倍希釈されたポリクローナルウサギ抗hXCR1血清(標準的なプロトコルを使用して、hXCR1のN末端を表すペプチド
に対して作成された)により染色し、ビオチンとカップリングしたヤギ抗ウサギIgG(ブロッキング緩衝液で5000倍)、アビジン-アルカリホスファターゼ、およびWestern Light/CDP-Star検出系(Tropix)を使用して現像した。光シグナルの検出は、XOMatARフィルム(Kodak)により行った。ウサギ抗hXCR1血清は、11週間にわたり、完全フロイントアジュバント中の250μgの31-N-hXCR1ペプチドにより、3回、ウサギを免疫感作することにより作成された。
インビボで、ネイティブマウスXCL1は、N末端バリンを有するタンパク質をもたらす、シグナルペプチドのタンパク質分解除去により作成される(Dorner et al.,1997,J.Biol.Chem.272,8817-23)。N末端バリンから開始する対応する組換えマウスXCL1を作成するため、全長マウスATACのアミノ酸22〜114を、標準的なDNA組換え技術および発現ベクターpET SUMO(Invitrogen,Groningen,Netherlands)を使用して、ヒスチジンタグ化SUMOタンパク質のC末端と融合させた。融合タンパク質を、標準的なプロトコルを使用して大腸菌において発現させ、製造業者のプロトコルに従い、固定化金属アフィニティクロマトグラフィ(Ni-NTA Superflow,Qiagen,Hilden,Germany)により精製した。融合タンパク質の部位特異的な切断を、37℃で3時間、SUMOプロテアーゼ(Invitrogen)と共にインキュベートすることにより達成した。ヒスチジンタグ化SUMO融合部分を除去するため、2回目の固定化金属アフィニティクロマトグラフィ工程を実施した。このプロトコルを使用して、生物活性型の組換えマウスXCL1タンパク質が、高い収率および純度で作成された(図12)。
CD4、CD11b、CD11c、NK1.1、およびB220に対する抗体を使用した他の脾細胞集団の磁気枯渇により、OT-IマウスまたはATAC-KO OT-Iマウスの脾細胞から、OVAペプチドに特異的なトランスジェニックCD8+ T細胞を精製した。OT-I T細胞またはOT-I ATAC-KO T細胞(3×105個)を、それぞれ、同一遺伝子のC57BL/6またはATAC-KOマウスへ養子移入した。両方のマウス群を、OVAによりトランスフェクトされた3×106個の300-19細胞(「OVA/300-19」)により24時間後に免疫感作した。OVA/300-19細胞は、標準的な方法により、OVAの短縮されたコーディング領域(アミノ酸138-386に相当;GenBank Acc.No.:NM_205152)がクローニングされたBCMGSneoベクター(Karasuyama et al.,1989,J Exp Med 169,13-25)による野生型300-19細胞の電気穿孔により作成された。OVA/300-19細胞による免疫感作後6日目、以前に記載されたようにして(Romano et al.,2004,J.Immunol.172,6913-6921)、インビボ細胞障害性アッセイを実施した。簡単に説明すると、C57BL/6マウスの脾細胞を単離し、培地単独で、または10μMの特異的OVAペプチドSIINFEKLの存在下で、37℃で1時間、インキュベートした。洗浄後、ペプチドによりパルス処理された細胞を、10μM 5,6-カルボキシフルオレセインジアセテートスクシンイミジルエステル(CSFE,Molecular Probes,Oregon,USA)により標識し、パルス処理されていない細胞を1μM CSFEにより標識した。等量のCSFE-low脾細胞およびCSFE-high/SIINFEKL脾細胞(各10×106細胞)をOVA/300-19により免疫感作されたマウスに注射し、18時間後に、生存しているCSFE-low非細胞およびCSFE-high/SIINFEKL脾細胞の相対存在量を、フローサイトメトリーにより決定した。OVA特異的細胞障害性を、記載されたようにして(Hernandez et al.,2007,J.Immunol.178,2844-2852)、計算した。OVA/300-19細胞の注射は、OT-I T細胞の存在下で32±4%のOVA特異的細胞障害性を誘導したが、ATAC-KO OT-I T細胞の存在下では14±10%の細胞障害性しか誘導しなかった(図13)。野生型300-19細胞によるマウスの対照免疫感作は、移入されたOT-I T細胞による細胞障害性を誘導しなかった。この実験は、ATACがCD8+ T細胞細胞障害性の誘導においてアジュバントとして作用することを証明している。
ATAC遺伝子がlacZレポーター遺伝子と交換された(「ノックイン」)B6.129P2-Xcr1tm1Dgen/Jマウス(Jackson Laboratory,Maine,USA)からの器官組織を、インサイチューβ-ガラクトシダーゼ活性について分析した。この目的のため、器官の切片を、4℃で4時間、PBS中の0.1%グルタルアルデヒドおよび4%パラホルムアルデヒドに浸漬し、4℃で一夜、10%ショ糖/PBS中でインキュベートし、急速凍結させた。組織の凍結切片を、RTで10分間、PBS中の0.1%グルタルアルデヒドおよび4%パラホルムアルデヒドで再固定し、冷PBS(pH 7.4)により5分間3回洗浄し、37℃で一夜、X-Gal染色溶液(Sanes et al.,1986,EMBO J.5,3133-3142)と共にインキュベートし、PBSで3回洗浄し、ニュートラルレッドにより対比染色した。
B6.129P2-Xcr1tm1Dgen/Jマウスからの脾細胞を、標準的な方法により単離し、CD3、CD4、CD8、CD19、CD11c、MHC II、およびNK.1.1について染色した。製造業者のプロトコルに従い、フルオレセインジ-β-D-ガラクトピラノシド(FDG,Invitrogen)によりアッセイされたlacZレポーター遺伝子の発現は、CD4-CD8- DCの7%〜10%、CD8+ DCの75%〜90%で検出されたが、CD4+ DCにおいては検出されなかった(図14)。他の全ての脾臓集団は陰性であった。これらの結果は、XCR1が、免疫系内で、脾臓においては主としてCD8細胞表面マーカーを保持しているDCの亜集団においてのみ発現されることを証明している。
Claims (8)
- XCR1陽性プロフェショナル抗原提示細胞へ物質を送達するための医薬を製造するための送達システムの使用であって、該細胞が樹状細胞であり、該送達システムが、
(i)ケモカイン(Cモチーフ)受容体1(XCR1)に結合する分子、および
(ii)免疫原または寛容原である、送達される物質
を含み、該物質は該分子に共有結合し、そして該送達システムによってXCR1陽性プロフェショナル抗原提示細胞へ送達されるものである、使用。 - 分子(i)がケモカイン(Cモチーフ)リガンド1(XCL1)であるか、またはSEQ ID NO:7〜10のいずれかの配列を含むかもしくはSEQ ID NO:7〜10のいずれかの配列からなるXCL1の機能活性バリアントである、請求項1記載の使用。
- 分子(i)が抗XCR1抗体またはその断片である、請求項1記載の使用。
- 分子(i)および物質(ii)が、一つの(ポリ)ペプチドに含まれる、請求項1〜3のいずれか一項記載の使用。
- 送達システムが、対象におけるXCR1陽性プロフェショナル抗原提示細胞による、物質またはその断片の、主要組織適合遺伝子複合体(MHC)クラスI分子またはクラスII分子による抗原としての提示を媒介することができる、請求項1〜4のいずれか一項記載の使用。
- 医薬を製造するための、請求項4または5のいずれか一項において定義される送達システムをコードする一つまたは複数の核酸の使用であって、該送達システムが一つの(ポリ)ペプチドから構成される、使用。
- 医薬がワクチンである、請求項1〜6のいずれか一項記載の使用。
- (a) ペプチドに対する、Th1応答である記憶免疫応答を誘導する方法において使用するための、または
(b) 腫瘍および/もしくは感染を防止もしくは処置する方法において使用するための、または
(c) (ポリ)ペプチドに対する寛容を誘導する方法において使用するための、または
(d) 移植片拒絶、アレルギー、および/もしくは自己免疫疾患を阻害する方法において使用するための、
請求項1〜7のいずれか一項において定義される医薬。
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