JP5896119B2 - ヒドロゲルナノ粒子に基づく免疫測定 - Google Patents
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Description
本出願は、2008年8月26に出願された、「Hydrogel Nanoparticle based Immunoassay」と題する米国特許仮出願第61/091,935号に開示された発明を請求するものである。これにより優先権が請求される。これにより35USC§119(e)に基づく該米国仮出願の利益が請求され、これにより前述の出願は参照により本明細書に組み込まれる。
粒子合成および特徴付け
本研究で使用される粒子構造の場合、NIPAmシェルは、親和性ベイト部分を含有するNIPAm/AAcコアを取り囲んでいる。NIPAmシェルのふるい能力は、存在する可能性があり、低含有量で低分子量の目的分子標的と、コアの親和性ベイトに対する結合を競合することができるより大型の分子から、コアおよびその親和性ベイト基を遮蔽する。コアおよびコア−シェル粒子のサイズを比較するために、光散乱による特徴付けを、粒子に対して合成中およびプロセスの終了時に実施した。25℃およびpH4.5でのコア直径は、364.7±4.3nmであり、同じ条件におけるコア−シェル粒子の直径は、699.4±6.2nmである(図5A)。これは、シェルの厚さが約170nmであることを示唆する。ヒドロゲルを含有するAAcの特徴的挙動に従って、コアおよびコア−シェル粒子のサイズは両方とも、温度の上昇およびpHの低下に従って減少した(図5A)。粒子を、原子間力顕微鏡(AFM)によりさらに特徴付けた。AFMの粒子画像(図5B)は、サイズの均一性を確認し、AFMによる粒子直径の測定値は、光散乱で測定されたものと一致した。粒子濃度は、凍結乾燥された粒子を計量することにより取得したところ、10mg/mLであり、1ミリリットル当たりの粒子数は2億3000万個であった。
ヒト血小板由来増殖因子(PDGF、MW14,500Da)を、PDGFと結合する担体タンパク質としてウシ血清アルブミン(BSA、MW66,000Da)を含有する溶液にスパイクし、PDGF−BSA溶液に添加されたコア−シェルヒドロゲルナノ粒子は、BSAと粒子との結合が検出されないことにより立証される分子ふるいとして作用し、粒子は、BSAを完全に除外し、溶液相PDGFをすべて完全に隔離した(図6A)。これは、ベイトに対するPDGF親和性が、担体BSAの親和性より高かったことを示唆する。コア−シェル粒子の分子ふるい特性をさらに評価するために、PDGF、BSA、アプロチニン(MW6,500Da)、リゾチーム(MW14,400Da)、トリプシン阻害剤(MW 218 21,500Da)、炭酸脱水酵素(MW31,000Da)、およびオバルブミン(MW45,000Da)を含有する溶液を使用した。粒子によるタンパク質の取り込みを、SDS PAGEにより評価した。コア−シェル粒子は、21,500Da未満の重量を有する低分子量タンパク質を効果的に捕捉および濃縮したが、高分子量を有するタンパク質は粒子から除外されたままであった(図6B)。
本発明者らは、濃度がELISAの検出閾値未満である希釈PDGF試料を濃縮するナノ粒子能力を検討し、PDGFの濃度が粒子隔離により増加されて、ELISAによりPDGFが測定可能になるかどうかを決定した。
図10には、血清学的バイオマーカーの他の関連モデル、つまりBSAと混合された粘膜関連上皮ケモカイン(MEC/CCL28、12,300Da)、ストロマ細胞由来因子−1ベータ(SDF−1β/CXCL12b、8,500Da)、およびエオタキシン−2(CCL24、8,800Da)と共にインキュベートされたコアシェルアクリル酸官能化粒子のSDS PAGE分析が示されている。ケモカインは、粒子により溶液から完全に除去され、捕捉され、および濃縮されたが、BSAは完全に除外されていた。
内因性および外因性プロテアーゼによるバイオマーカーの分解は、バイオマーカーの性能バイアスの主な要因であり、バイオマーカー候補の発見および測定を妨害する。免疫ブロット分析を使用して、酵素分解からPDGFを保護する粒子の能力を評価した。粒子の非存在下において、PDGFに対するトリプシン作用は10分後には明らかであり、14,000〜17,000DaのPDGFバンドがほとんど検出不能であることにより示されるように(図11Aおよび図11Bのレーン6〜8)、1時間後にはほとんど完了した。著しく対照的に、トリプシンおよびコア−シェル粒子と共にインキュベートされたPDGFは、染色強度が減少せず断片化されていなかった単一種のバンドを生成し、粒子がタンパク質分解からPDGFを保護することに成功したことを示唆した(図11Aおよび図11Bのレーン4)。トリプシンなしでPDGFが負荷された粒子のPDGFバンド(図11Aおよび図11Bのレーン2)は、PDGFおよびトリプシンが負荷された粒子のPDGFバンド(図11Aおよび図11Bのレーン4)と同一であり、PDGFタンパク質が酵素分解により失われなかったことをさらに示唆した。
SDS−PAGE分析を使用して、モデルとして選択されたケモカインを酵素分解から保護する粒子の能力を評価した。図12に示されているように、トリプシンは、粒子による隔離がない場合、各種類のケモカインを急速に分解した(図12、レーン2、5、8)。著しく対照的に、トリプシンおよび粒子と共にインキュベートされたケモカインは(図12、レーン3、6、9)、断片化されていなかった単一種のバンドを生成し、粒子がタンパク質分解からバイオマーカーを保存することに成功したことを示唆した。
PDGFの血漿中半減期が非常に短い(2分)ことは、分析上の主要な課題である。免疫ブロットおよび質量分析を使用して、ヒト血清にスパイクされたPDGFを回収、濃縮、および保存するコア−シェル粒子の効率を研究した。免疫ブロットを使用して、正しい分子量の完全タンパク質が存在することにより、PDGFの保存を検証した。50μL等量のコア−シェル粒子を、50mMトリスHCl pH7で1:25に希釈されたヒト血清中にスパイクされた50μLのPDGF溶液(5ng/mLまたは2ng/mLの濃度)と共に、室温で1時間インキュベートした。粒子は、上清(図13、レーン2および5)、および同時に、2つの異なる濃度で血清中にスパイクされた濃縮PDGF(図13、レーン3およびレーン6)に残っていた高分子量タンパク質を除外した。上記のELISAで示されているように、開始溶液中のPDGFは検出不能であった(図13、レーン1および4)。粒子は、PDGF分子の質量または含有量に検出可能な変化をもたらさずに、非常に複雑な血清溶液内のPDGF濃度を、免疫ブロットの検出限界を十分に超える濃度に増加させた。
本研究で使用された血清は、IRB認可の血清収集プロトコール(プロトコール番号 GMU HSRB#6081)に基づき、インフォームドコンセントに基づいて取得し、データは、HIPAA、およびヘルシンキ宣言で表明された原則に従って匿名で分析した。
50mMトリスHCl pH7中の0.02mg/mL PDGF、0.2mg/mL BSA、
PDGF、BSA、アプロチニン(MW6,500Da)、リゾチーム(MW14,400Da)、トリプシン阻害剤(MW21,500Da)、炭酸脱水酵素(MW31,000Da)、およびオバルブミン(MW45,000
419Da);これらの各々は、0.05mg/mLの濃度で、50mMトリス pH7に溶解されていた。
粘膜関連上皮ケモカイン(MEC/CCL28、Antigenix America社)、ストロマ細胞由来因子−1ベータ(SDF−1β/CXCL12b、Antigenix America社)、およびエオタキシン−2−(CCL24、Antigenix America社);これらの各々は、0.02mg/mLの濃度であり、BSA(0.2mg/mL)と混合されており、50mMトリス pH7に溶解されていた。
複雑なタンパク質混合物でスパイクされたPDGF:50mMトリスHCl pH7中に6.7μg/mL BSA(ThermoFisher Scientific社、MW66,000)、6.7μg/mLアプロチニン(Sigma−Aldrich社、MW6,500Da)、6.7μg/mLリゾチーム(Sigma−Aldrich社、MW14,400Da)、6.7μg/mLトリプシン阻害剤(Invitrogen Corporation社、MW21,500Da)、6.7μg/mL炭酸脱水酵素(Sigma−Aldrich社、MW31,000Da)、および6.7μg/mLオバルブミン(Sigma−Aldrich社、MW45,000Da)を含有するタンパク質混合物を、40μg/482mLの総タンパク質濃度で使用した。PDGFを以下の濃度で添加した:670ng/mL、67ng/mL、6.7ng/mL、0.67ng/mL。その結果、PDGFと総タンパク質との比率は、それぞれ1:60、1:600、1:6,000、および1:60,000だった。1.5mL等量の溶液を、100μLのコア−シェル粒子と共にインキュベートした。タンパク質を、60%アセトニトリルおよび2%酢酸を用いて100μLの容積に溶出し、溶出液をSpeed Vac(Thermo社)で乾燥し、ナノ逆相液体クロマトグラフィー質量分析(RPLC−MS/MS)で分析した。溶液および溶出液の両方から100μL等量を分析し、したがって同じ容積を維持した。
ヒト血清:200Lの健常ドナー血清を、100Lのコア−シェル粒子を有する50mMトリスHCl緩衝液、pH7で1:3に希釈した。粒子を10%アセトニトリル、0.5×PBS緩衝液で洗浄し、60%アセトニトリル、2%酢酸で溶出した。試料をSpeed Vac(Thermo社)で乾燥し、nanoRPLC−MS/MSで分析した。
Claims (21)
- 1)滲出マトリックスと多孔性マトリックスを有する免疫測定デバイスを提供すること;
2)被検体を含有する試料液体を、液体収集容器または多孔性基層に組み込まれたナノ粒子のゾーンと接触させること、但し該ナノ粒子は、i)1nm〜100nmの範囲の粒径を有し、ii)試料液体の固定化用の該粒子内に親和性ベイトを内部的に含有し、iii)該親和性ベイトを封入するポリマー性マトリックスシェルを有する;
3)上記2)のステップでナノ粒子のゾーンと接触させた後の試料液体を、該滲出マトリックスから該多孔性のゾーン中へと通過させること
からなる、免疫測定用被検体の濃縮方法であって;
該滲出マトリックスは、該多孔性マトリックスへの該液体の進入地点で該ナノ粒子が捕捉され、捕捉されたナノ粒子を通って該液体の全容量が滲出するような、細孔径を有し;該ナノ粒子内に濃縮された被検体が次の分析デバイスへの放出のために封入することを特徴とする、方法。 - 該ナノ粒子内に濃縮および隔離することにより被検体の分解を防止することからなる、請求項1に記載の方法。
- 該ナノ粒子から被検体を溶出させることからなる、請求項1または2に記載の方法。
- 該ナノ粒子から溶出される被検体からなる溶出液が免疫測定の入口へと直接的に流入することからなる、請求項3に記載の方法。
- 該ナノ粒子が、該試料液体内に沈殿することなく留まるに充分な浮揚性を有する、請求項1に記載の方法。
- 該ナノ粒子が、該試料液体により80パーセント超が占められている開放型ポリマー性構造である、請求項1に記載の方法。
- 該ナノ粒子と該試料液体との混合物が、側方流動免疫測定デバイスにアプライされ;該側方流動免疫測定デバイス内で且つ該試料液体が通過する経路内にある、該ナノ粒子のゾーンに、該ナノ粒子が沈積され固定化されることからなる、請求項1に記載の方法。
- 該ナノ粒子がポリマー性マトリックスシェルおよび内部コアからなり;該ポリマー性マトリックスシェルは、該被検体が該ポリマー性マトリックスシェルに進入することを可能にするが、該試料液体内にある他の化合物が該ポリマー性マトリックスシェルに進入することを防止する、細孔サイズを有し;該内部コアは、固定化された親和性リガンドを含有し、該親和性リガンドが、該被検体を認識するように形成されることからなる、請求項1に記載の方法。
- さらに、
(a)多孔性基層に捕捉されている該ナノ粒子を該側方流動免疫測定デバイスの部分として組み込むこと、
(b)該ナノ粒子が前記被検体を隔離した後に、該試料液体の流路を変更すること、
又は
(c)該ナノ粒子が1nm〜100nmの範囲の粒径にある場合において、該ナノ粒子を、異なる空隙を通って滲出することにより、該ナノ粒子の帯域内に流動させて捕捉させること
からなる、請求項7に記載の方法。 - 該試料液体が生物学的供給源に由来する、請求項1に記載の方法。
- 該試料液体が非生物学的供給源に由来する、請求項1に記載の方法。
- 前記試料液体が通過する経路内の前記進入地点に捕捉されている前記粒子と、前記試料液体を接触させることにより、タンパク質、ペプチド、および核酸バイオマーカーを隔離、濃縮、および分解から保護することをさらに含み、前記粒子が、前記被検体は前記ポリマー性マトリックスシュルに進入することを可能するが、前記試料液体内にある他の化合物が前記ポリマー性マトリックスシェルに進入することを防止する細孔サイズを有するポリマー性マトリックスシェルである、請求項1に記載の方法。
- 前記粒子が、前記試料液体中に存在する個々の種類の低分子量分子に特異的な複数の亜集団を含有する場合、前記捕捉されている粒子の集団を前記側方流動免疫測定デバイスに組み込むことをさらに含む、請求項7に記載の方法。
- 前記親和性ベイトを内部的に含有するナノ粒子が、被検体結合部分からなる、
請求項1に記載の方法。 - 前記被検体を捕捉粒子内に捕捉することをさらに含み、前記捕捉粒子が、分子ふるい部分および被検体結合部分により形成されており、前記分子ふるい部分および前記被検体結合部分が、改変された多孔度の架橋区域を有し、前記分子ふるい部分が、前記被検体を前記捕捉粒子内に捕捉するために、物理的および化学的処理に応じて収縮および膨張するように構成されている、請求項1に記載の方法。
- 前記被検体結合部分が、化学的および静電気的に前記被検体に結合および隔離することが可能である少なくとも1つのタイプの部分である、請求項15に記載の方法。
- 前記被検体結合部分が、カルボキシ基、アミン基、脂質、リンタンパク質、リン脂質、アミド基、ヒドロキシル基、エステル基、アクリル基、チオール基、アクリル酸、抗体、結合タンパク質、結合対、金属、キレート剤、核酸、アプタマー、酵素結合ポケット、レクチン、薬理学的作用剤、合成ペプチド、抗体断片、疎水性表面、および親水性表面のうちの組み合わせを含む、請求項15に記載の方法。
- 前記被検体を前記被検体結合部分に結合させることをさらに含み、前記被検体が、有機分子、無機分子、ポリペプチド、炭水化物、核酸、および脂質のうちの組み合わせである、請求項15に記載の方法。
- 前記分子ふるい部分が内部コアを封入する外側シェルであり、前記内部コアが、前記被検体結合部分で構成されている、請求項15に記載の方法。
- 免疫測定用被検体濃縮デバイスであって、該デバイスは
1)滲出マトリックスと多孔性マトリックス;
2)ナノ粒子からなる帯域、但し該ナノ粒子は、i)1nm〜100nmの範囲の粒径を有し、ii)試料液体の固定化用の該粒子内に親和性ベイトを内部的に含有し、iii)該親和性ベイトを封入するポリマー性マトリックスシェルを有する;
からなり;
3)該滲出マトリックスは、該多孔性マトリックスへの該液体の進入地点で該ナノ粒子が捕捉され、捕捉されたナノ粒子を通って該液体の全容量が滲出するような、細孔径を有し;該ナノ粒子内に濃縮された被検体が次の分析デバイスへの放出のために封入する
ことを特徴とする、デバイス。 - 免疫測定デバイスであって、該デバイスには請求項20に記載のデバイスが組み込まれてなることを特徴とする、デバイス。
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US9523701B2 (en) | 2009-07-29 | 2016-12-20 | Dynex Technologies, Inc. | Sample plate systems and methods |
DE102010014007B3 (de) * | 2010-03-30 | 2011-06-22 | FILT Lungen- und Thoraxdiagnostik GmbH, 13125 | Elektrochemischer Sensor zur Analyse von einem oder mehreren Analyten im Atemkondensat eines Exhalats |
CA2883080A1 (en) * | 2011-08-26 | 2013-03-07 | Vecoy Nanomedicines Ltd. | Pathogen and substance traps |
US20130078615A1 (en) * | 2011-09-26 | 2013-03-28 | Alberto Gandini | Device and Method for Detection and Quantification of Immunological Proteins, Pathogenic and Microbial Agents and Cells |
CN103930195A (zh) * | 2011-11-10 | 2014-07-16 | 谷纳米技术有限公司 | 吸收性的干燥生物流体采集基板 |
US10001477B2 (en) * | 2012-11-09 | 2018-06-19 | Korea University Research And Business Foundation | Use of protein nanoparticle based hydrogel |
US20140134601A1 (en) * | 2012-11-09 | 2014-05-15 | Korea University Research And Business Foundation | Use of protein nanoparticle based hydrogel |
WO2014121802A1 (en) * | 2013-02-07 | 2014-08-14 | Zaghloul Mohammad Hosam Eldeen | Innovative nano-elisa single test for the detection of hcv, hiv antibodies and hbsag |
US20160153973A1 (en) * | 2013-07-09 | 2016-06-02 | Lucas David Smith | Device and method of rapid linker mediated label-based immunoassays |
JP6439307B2 (ja) * | 2013-09-19 | 2018-12-19 | 株式会社リコー | 流体デバイス、転写材、および流体デバイスの製造方法 |
GB2528657B (en) * | 2014-07-24 | 2019-03-13 | Intelligent Fingerprinting Ltd | Sample analysing device |
JP6896271B2 (ja) * | 2016-09-15 | 2021-06-30 | 国立大学法人信州大学 | ゲル微粒子の製造方法 |
US20180284108A1 (en) * | 2017-04-01 | 2018-10-04 | Michael Joseph Pugia | Method for complete and fragmented markers |
CN112399829A (zh) * | 2018-06-07 | 2021-02-23 | 辛辛那提大学 | 用于样品预处理的基于水凝胶和气凝胶的方法和装置 |
US20190383807A1 (en) * | 2018-06-13 | 2019-12-19 | Tokitae Llc | Methods and systems for concentration of samples for lateral flow assays |
WO2020264093A2 (en) * | 2019-06-25 | 2020-12-30 | George Mason University | Diagnostic method for infectious diseases |
Family Cites Families (17)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP3640278B2 (ja) * | 1996-12-20 | 2005-04-20 | 日本化薬株式会社 | アッセイ装置およびそれを用いるアッセイ方法 |
AU2460399A (en) * | 1998-01-20 | 1999-08-02 | Packard Bioscience Company | Gel pad arrays and methods and systems for making them |
EP1173878B1 (en) * | 1999-04-27 | 2011-04-06 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Probes for a gas phase ion spectrometer |
GB9924222D0 (en) * | 1999-10-14 | 1999-12-15 | Imp College Innovations Ltd | Assay device |
WO2002041987A2 (en) * | 2000-10-25 | 2002-05-30 | Tufts University | Polymeric microspheres |
US6818456B2 (en) * | 2001-07-20 | 2004-11-16 | Varian, Inc. | Color contrast system for lateral flow immunoassay tests |
US6838289B2 (en) * | 2001-11-14 | 2005-01-04 | Beckman Coulter, Inc. | Analyte detection system |
CN1756834B (zh) * | 2003-02-24 | 2010-05-26 | 比南股份有限公司 | 干式化学、侧向流动重建流的层析酶驱动测定 |
GB0311664D0 (en) * | 2003-05-21 | 2003-06-25 | Univ Manchester | Polymeric hollow nanospheres |
US8105849B2 (en) * | 2004-02-27 | 2012-01-31 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Integration of fluids and reagents into self-contained cartridges containing sensor elements |
EP1580559B1 (en) * | 2004-03-23 | 2013-12-25 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Methods for reducing the variance between analyte concentrations taken from complex sample mixtures |
AU2005298344B2 (en) * | 2004-10-25 | 2011-02-10 | Varian Medical Systems, Inc. | Loadable polyphosphazene-comprising particles for therapeutic and/or diagnostic applications and methods of preparing and using the same |
US20060240492A1 (en) * | 2004-11-12 | 2006-10-26 | Rusling James F | Carbon nanotube based immunosensors and methods of making and using |
GB0515625D0 (en) * | 2005-07-29 | 2005-09-07 | Univ Manchester | Hydrogel particle |
MX2008004165A (es) * | 2005-09-27 | 2008-11-12 | Ct For Applied Proteomics And | Metodos para aislar analitos de una muestra. |
ES2601391T3 (es) * | 2006-01-27 | 2017-02-15 | Becton Dickinson And Company | Inmunoensayo de flujo lateral con modalidad de detección encapsulada |
US7935518B2 (en) * | 2006-09-27 | 2011-05-03 | Alessandra Luchini | Smart hydrogel particles for biomarker harvesting |
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