JP5822402B2 - 腹膜透析用の分岐した可溶性グルコースポリマー - Google Patents
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Description
−水溶性であり、
−低粘度を有し、
−老化せず、
−全身循環において低いグルコース出現動態を生じさせ、
−ゆっくり加水分解されるが、その加水分解の終わりに体の酵素によって完全に分解され、かつ
−長続きする浸透圧を働かせる
べきである。
実のところ従来技術のすべての浸透圧剤は、急速に加水分解されるという欠点を有する。
−その欧州特許第1 369 432号明細書ではそのポリマーは、10%を超える、好ましくは12から30%の間のα−1,6結合の含量と、30,000〜200,000ダルトンのMwとを有する高度に分岐した可溶性グルコースポリマーであり、
−その欧州特許出願第1 548 033号明細書ではそのポリマーは、13から17%の間のα−1,6結合の含量と、90,000〜150,000ダルトンのMwとを有する高度に分岐した可溶性グルコースポリマーであり、また
−その欧州特許出願第1 994 061号明細書ではそのポリマーは、20から30%の間のα−1,6結合の含量と、20,000〜30,000ダルトンのMwとを有する高度に分岐した可溶性グルコースポリマーであった。
−0.6gの試験生成物を正確に量り分け、
−150mlのマレイン酸Na緩衝液(pH7)を0.1モル/lで加え、
−生成物が溶解するまで撹拌し、
−溶液の温度が37℃になるように、そのフラスコをサーモスタットで37℃に調温した水槽中に15分間置き、
−0分時に1.5mlの試料(試料SI)を採取し、
−8USPの活性当量を有するブタのパンクレアチン(動物由来のα−アミラーゼ)0.15gを加え、
−サーモスタットで調温した槽中で撹拌(THP 15 Variomag撹拌機の撹拌能力の4分の3で)しながら37℃で300分間インキュベートし、
−15、30、45、60、90、120、180、240、300分時に1.5mlの試料を採取し、
−試料を100℃の乾燥槽中に10分間置くことによって酵素反応を停止し、
−加水分解速度を調べるために試料上の還元糖を検定し、
−こうして放出されるアミラーゼ加水分解生成物の平均モル質量を求める。
−200μlの試料を栓付き試験管中に導入し、前記試料に200μlの使用液(酒石酸ナトリウム試薬および硫酸銅試薬)を加え、
−沸騰させ、冷却後にアルセノモリブデン酸試薬、次いで水を加える、
ことにある。
−25から35%の間の還元糖含量、および
−6000から12,000ダルトンの間の放出生成物のMw
で表される膵臓α−アミラーゼに対する抵抗性を示す。
−25%以上、30%未満の還元糖含量、および
−9500ダルトン以上、12,000ダルトン未満の放出生成物のMw
で表される膵臓α−アミラーゼに対する抵抗性を示す。
−30%以上、35%未満の還元糖含量、および
−6000ダルトン以上、9500ダルトン未満の放出生成物のMw
で表される膵臓α−アミラーゼに対する抵抗性を示す。
−注入量:200l、
−流量:0.5ml/分、
−カラム温度:40℃、
−溶離液:0.2M硝酸ナトリウム+0.02%アジ化Na、
−溶離時間:180分
のように決める。
−DP<10が25〜80%、
−DP>30が2〜10%
であり、平均DPが4から12の間にある
ことを特徴とする分岐鎖長分布プロフィールを有する。
−DP<10が25〜40%、
−DP>30が5〜10%
であり、平均DPが10から12の間にある
ことを特徴とする分岐鎖長分布プロフィールを有する。
−DP<10が65〜80%、
−DP>30が2〜5%
であり、平均DPが4から6の間にある
ことを特徴とする分岐鎖長分布プロフィールを有する。
−DP<10が22%、
−DP>30が16%
であり、平均DPが13である
ことを特徴とする分岐鎖長分布プロフィールを有する。
−7から10%の間、好ましくは8から9%のα−1,6グルコシド結合の含量、および
−光散乱によって求められる50,000から150,000ダルトンの間の重量平均分子量(Mw)
を有する少なくとも1種類の分岐した可溶性グルコースポリマーを含むことを特徴とする腹膜透析液に関する。
1)少なくとも30重量%、好ましくは35から80重量%の間のアミロース含量と、5から25%の間の乾物含量とを有するデンプンの乳状液のバーストおよび可溶化のステップ、
2)好熱性微生物から抽出された25,000U/mlから60,000U/mlの間の活性度を有するグリコーゲン分岐酵素を、デンプン1g(乾燥)当たり800から2500Uの間の用量で、60℃から80℃の間の温度で連続的に12〜18時間加えるステップ、
3)任意選択で、100から150KNU/mlの間の活性度を有するα−アミラーゼ型のデンプン液化酵素で95℃の温度、5から8の間のpHで30〜60分間、好ましくは45分間処理するステップ、
4)得られた分岐した可溶性グルコースポリマーを
−活性炭および/または粒状ブラックカーボンによる少なくとも1回の処理ステップ、
−少なくとも1回の滅菌濾過ステップ、および
−任意選択で、少なくとも1回の熱処理ステップ
によって精製するステップ、
5)得られた精製済み分岐した可溶性グルコースポリマーを回収するステップ
の一連のステップを含む方法を行うことができる。
−分岐酵素による処理のみによって得られた本発明によるグルコースポリマーに対応する第一系統、および
−分岐酵素およびα−アミラーゼによる複合処理によって得られた本発明によるグルコースポリマーに対応する第二系統
を構成する。
−活性炭および/または粒状ブラックカーボンによる少なくとも1回の処理のステップ、
−少なくとも1回の滅菌濾過のステップ、
−任意選択で、少なくとも1回の熱処理のステップ
によって精製することにある。
−Charles River−Endosafeによって生産された試薬(感度0.015EU/mlのLALライセート(OR15015参照)および1瓶当たりCSEエンドトキシン500ngまたは10ng(E110またはE120参照))を用いたLAL試験(ゲル−クロットエンドポイント法)によるエンドトキシン(およびβ−グルカン)については、0.6EU/g、また
−本出願人の会社によって開発された高感度試験によるペプチドグリカン(およびβ−グルカン)については、グルコースポリマー1g当たり<8ng(したがってペプチドグリカンについて欧州特許第1 720 999号明細書に記載の参考閾値をはるかに下回る)。
−水(例えばLAL試験用の特殊な水)に溶かして5%に調製されたグルコースポリマーの溶液中に含まれるペプチドグリカンおよびβ−グルカンと反応させ、
−セリン−プロテアーゼカスケード反応を引き起こし、
−Wako Pure Chemical Industries Ltd.社によって製造され、販売されているToxinometerチューブリーダーによって、前記ペプチドグリカンおよびβ−グルカンをきわめて低い閾値、すなわち、
・閾値約0.05ng/ml(すなわち、グルコースポリマー1g当たり1ng)の検出限界(LD)、および
・閾値約0.15ng/ml(すなわち、グルコースポリマー1g当たり3ng)の定量限界(LQ)
(試験されるこのグルコースポリマー製品の確定されたLDおよびLQ)で検出および/または定量することができる。
−適切な品質の水(例えばLAL試験用の特殊な水)に溶かした5%溶液の状態の試験用グルコースポリマーを調製し、
−直線検量線(対数目盛線形回帰曲線Ta=f(PG含量))を設定するためのSLP−HSシングルセットキットのペプチドグリカン基準(黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)から抽出された)を用いて、0.04〜2.5ng/ml(標的値)の適用範囲にわたって水中でのペプチドグリカンの較正範囲を作成し、
−この調製した試験溶液100μlを、希釈液(前述のキット中で与えられる)100μlを加えることにより再構成した後のHS−SLPチューブ中に導入し、
−このSLP−HSチューブを、サーモスタットで30℃に調温され、製造業者が推奨する条件に従ってパラメータが決められるToxinometerチューブリーダー(Wako Pure Chemical Ltd.)のインキュベーションウェル中に差し込む
ことにある。
−本発明による方法の第一の変形形態では、すなわち粒状ブラックカーボンを使用する場合には、この配置は向流モードでの作用に基づく。
−本発明による方法の第二の変形形態では、すなわち活性炭を使用する場合には、この配置は活性炭による「二重」の処理に基づく。
−本発明による方法の第三の変形形態では、粒状ブラックカーボンの段階と活性炭の段階を組み合わせることを選択する。
−生成された/ゾーンの入口と出口の間で生成されたエネルギーを回収する部分、
−2バールの蒸気で加熱する部分、
−一体化されており、所望の滞留時間に応じて調節することができる保持部分
からなる。
i)分岐した可溶性グルコースポリマーを含有する水溶液のpHを4から5の間の値、好ましくは4.5の値にするステップ、
ii)前記の得られた溶液に対して活性炭および/または粒状ブラックカーボンによる2回の連続する処理ステップを行うステップ、
iii)10μmの細孔径を有するフィルター上で、次いで1μmの細孔径を有するフィルター上で濾過するステップ、
iv)この分岐した可溶性グルコースポリマーの溶液を蒸発、濃縮、脱塩するステップ、
v)活性炭および/または粒状ブラックカーボンによる第三の処理ステップを行うステップ、
vi)10μmの細孔径を有するフィルター上で、次いで1.2μmの細孔径を有するフィルター上で濾過するステップ、
vii)細孔径が0.45μm、次いで0.22μmの2回の膜濾過からなる滅菌濾過を実施するステップ
の一連のステップを行うことにある。
デンプンを多く含み(95%を超える)、36.7%のアミロース含量を有するエンドウデンプンから11%の乾物を含有するデンプンの溶液を調製する。
デンプンを多く含み(95%を超える)、36.7%のアミロース含量を有するエンドウデンプンから、11%の乾物を含有するデンプンの溶液を調製する。
Claims (16)
- 35から80重量%の間のアミロース含量を有するデンプンから調製され、8から9%の間のα−1,6グルコシド結合の含量と、50,000から150,000ダルトンの間のMwとを有する分岐した可溶性グルコースポリマーであって、試験「B」に基づいて
・25から35%の間の還元糖含量、および
・6000から12,000ダルトンの間の放出生成物のMw
によって表される膵臓α−アミラーゼに対する抵抗性を示し、
4から12の間の平均DPで
−DP<10が25〜80%、
−DP>30が2〜10%
からなる分岐鎖長分布プロフィールを有することを特徴とする、ポリマー。 - 試験Aに基づいて測定される100mOsm/kg未満の値を有する浸透圧重量モル濃度を有し、前記試験Aが、Fiske(登録商標)Associatesから入手できるMark 3浸透圧計を用いて、1kgの水に溶かした100g(乾燥)の前記分岐グルコースポリマーを含有する溶液の浸透圧重量モル濃度を測定することにあることを特徴とする、請求項1に記載のポリマー。
- 試験「B」に基づいて
−25%以上かつ30%未満の還元糖含量、および
−9500以上かつ12,000ダルトン未満の放出生成物のMw
によって表される膵臓α−アミラーゼに対する抵抗性を示すことを特徴とする、請求項1または2のいずれか一項に記載のポリマー。 - 試験「A」に基づいて測定される10から20mOsm/kgの間の値を有する浸透圧重量モル濃度を有することを特徴とする、請求項3に記載のポリマー。
- 10から12の間の平均DPで
−DP<10が25〜40%、
−DP>30が5〜10%
からなる分岐鎖長分布プロフィールを有することを特徴とする、請求項3または4のいずれか一項に記載のポリマー。 - 試験「B」に基づいて
−30%以上かつ35%未満の還元糖含量、および
−6000ダルトン以上かつ9500ダルトン未満の放出生成物のMw
によって表される膵臓α−アミラーゼに対する抵抗性を示すことを特徴とする、請求項1または2のいずれか一項に記載のポリマー。 - 試験「A」に基づいて測定される50から100mOsm/kgの間の値を有する浸透圧重量モル濃度を有する、請求項6に記載のポリマー。
- 4から6の間の平均DPで
−DP<10が65〜80%、
−DP>30が2〜5%
からなる分岐鎖長分布プロフィールを有することを特徴とする、請求項6または7のいずれか一項に記載のポリマー。 - 1)35から80重量%の間のアミロース含量と、5から25%の間の乾物含量とを有するデンプンの乳状液のバーストおよび可溶化のステップ、
2)好熱性微生物から抽出された25,000U/mlから60,000U/mlの間の活性度を有するグリコーゲン分岐酵素を、デンプン1g(乾燥)当たり800から2500Uの間の用量で、60℃から80℃の間の温度で12〜18時間のあいだ連続的に加えるステップ、
3)任意選択で、100から150KNU/mlの間の活性度を有するα−アミラーゼ型のデンプン液化酵素で、95℃の温度、5から8の間のpHで30〜60分間処理するステップ、
4)得られた分岐した可溶性グルコースポリマーを
−活性炭および/または粒状ブラックカーボンによる少なくとも1回の処理のステップ、
−少なくとも1回の滅菌濾過のステップ、および
−任意選択で、少なくとも1回の熱処理のステップ
によって精製するステップ、
5)得られた精製済み分岐した可溶性グルコースポリマーを回収するステップ
の一連のステップを含むことを特徴とする、請求項1〜8のいずれか一項に記載の分岐した可溶性グルコースポリマーの調製方法。 - 前記精製のステップ4)が、
i)前記分岐した可溶性グルコースポリマーを含有する水溶液のpHを、4から5の間の値にするステップ、
ii)前記得られた溶液に対して活性炭および/または粒状ブラックカーボンによる2回の連続する処理ステップを行うステップ、
iii)10μmの細孔径を有するフィルター上で、次いで1μmの細孔径を有するフィルター上で濾過するステップ、
iv)分岐した可溶性グルコースポリマーの前記溶液を蒸発、濃縮、脱塩するステップ、
v)活性炭および/または粒状ブラックカーボンによる第三の処理ステップを行うステ
ップ、
vi)10μmの細孔径を有するフィルター上で、次いで1.2μmの細孔径を有するフィルター上で濾過するステップ、
vii)0.45μm、次いで0.22μmの細孔径の2回の膜濾過からなる滅菌濾過を実施するステップ
の一連のステップを含むことを特徴とする、請求項9に記載の方法。 - 請求項1〜8のいずれか一項に記載されている前記分岐グルコースポリマーを含有することを特徴とする、食品および医薬用途においてヒトおよび動物に使用することを意図する組成物。
- 請求項1〜8のいずれか一項に記載されている少なくとも1種類の分岐した可溶性グルコースポリマーを浸透圧剤として含むことを特徴とする腹膜透析液。
- ソルビトール、マンニトール、マルチトール、キシリトール、エリトリトール、および水素添加デンプン加水分解物からなる群から選択される多価アルコールもまた含むことを特徴とする、請求項12に記載の腹膜透析液。
- 乳酸塩、酢酸塩、およびグルコン酸塩などの緩衝剤もまた含むことを特徴とする、請求項12に記載の腹膜透析液。
- グルコース、マルトース、および/またはグルコースポリマーもまた含むことを特徴とする、請求項12〜14のいずれか一項に記載の腹膜透析液。
- アミノ酸およびグルコースもまた含むことを特徴とする、請求項12〜15のいずれか一項に記載の腹膜透析液。
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