JP5777163B2

JP5777163B2 - Ｐｅｔ用標識化合物

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Publication number: JP5777163B2
Application number: JP2011521001A
Authority: JP
Inventors: 恭良渡辺; 浩隆尾上; 佳代高橋; 正昭鈴木; 久志土居; 孝充細谷
Original assignee: RIKEN Institute of Physical and Chemical Research
Current assignee: RIKEN Institute of Physical and Chemical Research
Priority date: 2009-07-03
Filing date: 2010-07-05
Publication date: 2015-09-09
Anticipated expiration: 2030-07-05
Also published as: JPWO2011002096A1; EP2450354B1; WO2011002096A1; EP2450354A1; US20120230914A1; EP2450354A4

Description

本発明は、ＰＥＴ用の標識化合物、および当該化合物を含む診断用組成物に関するものである。

近年、生体内情報を得るために種々の研究がなされており、とりわけ、目的の分子挙動を調べることができる「分子イメージング」技術が注目されている。分子イメージングは、種々の疾患の早期発見や、有効かつ副作用の少ない医薬の短期間での開発に有用であると考えられる。

生体内情報を得るための分子イメージングとしては、陽電子放射断層画像撮影法（ＰＥＴ）がよく知られている。ＰＥＴは、陽電子が電子と衝突することによって放射されるγ線を用いて断層画像を撮影する技術であり、放射性のポジトロン放出核種で標識した目的の分子（いわゆる、分子プローブ）を生体に投与し、標識されている放射性核種が別の原子核に崩壊していく際に放出する陽電子と、その近傍に存在する電子との衝突によって放出されるγ線を検出する。これによって、目的の分子の存在部位を定量的に調べることができる。このようなＰＥＴは、臨床的な分子イメージング技術として広く利用されている。

乳癌等において発現していることが知られているアロマテース（aromatase）は、男性ステロイドを女性ステロイドに変換する酵素であり、精神障害、更年期障害、慢性疲労症候群等に関わることも知られている。このため、アロマテースの定量を高い精度で行うことができれば、これらの疾患の診断、原因解明、治療法の究明等に役立つと考えられる。

ＰＥＴによるアロマテースのイメージング技術として、^１１Ｃで標識された（S）−6-［（4-chlorophenyl）（1,2,4-triazol-1-yl）methyl］-1-[¹¹C]methylbenzotriazole（[¹¹C]vorozole）をＰＥＴ用標識化合物として用いた技術が報告されている（例えば、非特許文献１，２参照）。

Lidstrom，P.；Bonasera，T. A.；Kirilovas，D.；Lindblom，B.；Lu，L.；Bergstrom，E.；Bergstrom，M.；Westlin，J.-E.；Langstrom，B. Nucl. Med. Biol. 1998，25，497-501. Takahashi，K.；Bergstrom，M.；Frandberg，P.；Vesstrom，E.-L.；Watanabe，Y.；Langstrom，B. Nucl. Med. Biol. 2006，33，599-605.

上述したように、ＰＥＴによるイメージングを用いてアロマテースを可視化することが実際に行われている。しかしながら、上記非特許文献１，２に記載の化合物では、プローブにおけるＮ−^１１ＣＨ_３部位が代謝により脱落し、その代謝物が脳内へ再取り込みされている可能性があるため、定量性に劣るという問題があった。生体内分子をＰＥＴによって定量するには、優れた分子プローブの開発が必要である。

本発明は、上記の問題点に鑑みてなされたものであり、その目的は、アロマテースを高い精度で定量することができるＰＥＴ用標識化合物を提供することにある。

本発明に係る化合物は、上記課題を解決するために、下記式（１）

（式中、Ｘ^１は、^１１ＣＨ_３、ＣＨ_２ ^１８Ｆ、ＣＦ_２ ^１８Ｆ、^１８Ｆ、^７６Ｂｒまたは^１２４Ｉであり、Ｘ^２は、ＣＮまたはＮＯ_２であり、Ｒは、

で表される基の何れか一つである）
で表される構造、あるいは
下記式（２）

（式中、Ｘ^３は、ＣＨ_３、ＣＨ_２Ｆ、ＣＦ_３、Ｆ、ＢｒまたはＩであり、Ｒは、上記式（１）と同義である）
で表される構造を有することを特徴としている。

上記構成によれば、Ｘ^１部位および^１１ＣＮ部位が代謝により脱落し難い。このため、アロマテースに対して選択的な親和性を示すだけでなく、ＰＥＴ用標識化合物として用いた際にアロマテースを高い精度で定量することができる。その結果、種々の疾患の診断を容易にするとともに、アロマテースを標的とする医薬品候補化合物のスクリーニングに活用することができる。また、例えば、アロマテースと結合することで副作用を発現するような、アロマテース以外の分子を標的とした医薬品候補化合物のスクリーニングにも活用することができる。

本発明に係る化合物は、下記式（１’）

（式中、Ｘ^１’は、ＣＨ_３またはＣＨ_２Ｆである）
で表される構造を有する。

上記化合物は、放射標識されていないこと以外は、一般式（１）または一般式（２）で表される上記化合物と同じ構造を有するため、一般式（１）または一般式（２）で表される上記化合物をＰＥＴ用標識化合物として用いる際のコントロール（いわゆるコールド標品）として用いることができる。

本発明に係る診断用組成物は、本発明に係る、一般式（１）または一般式（２）で表される上記化合物を含むことを特徴としている。

上記構成によれば、アロマテースを高い精度で定量することができるので、アロマテースまたは性ステロイドの関与が疑われる疾患（例えば、乳癌、乳腺症、子宮体癌、子宮内膜症、子宮筋腫等）を診断し得るとともに、精神障害、更年期障害、慢性疲労症候群等の診断（原因解明、治療法の究明を含む）が可能になる。さらには、アロマテースの誘導を伴う炎症性疾患の診断が可能になる。すなわち、本発明に係る診断用組成物は、アロマテースまたは性ステロイドの関与が疑われる疾患（例えば、乳癌、乳腺症、子宮体癌、子宮内膜症、子宮筋腫等）、アロマテースの誘導を伴う炎症性疾患、精神障害、更年期障害、慢性疲労症候群等を適用対象とする。また、本発明に係る診断用組成物は、アロマテースを標的とする医薬品候補化合物のスクリーニングに活用することもできる。また、例えば、アロマテースと結合することで副作用を発現するような、アロマテース以外の分子を標的とした医薬品候補化合物のスクリーニングにも活用することができる。

本発明に係る診断方法は、本発明に係る、一般式（１）または一般式（２）で表される上記化合物、あるいは本発明に係る上記診断用組成物をＰＥＴに用いる工程を包含する。上記診断方法は、診断を補助するためのデータ収集方法でもあり得る。

アロマテースは男性ステロイドを女性ステロイドに変換する酵素であり、性ステロイドの合成に重要である。一般式（１）または一般式（２）で表される上記化合物をＰＥＴ用標識化合物として用いることにより、アロマテースまたは性ステロイドの関与が疑われる疾患（例えば、乳癌、乳腺症、子宮体癌、子宮内膜症、子宮筋腫等）の診断を補助するためのデータを高い精度で収集することができる。さらに、精神障害、更年期障害、慢性疲労症候群等の診断に有用なデータを高い精度で収集し得る。

また、本発明に係る化合物は、下記式（３）

（式中、Ｘ^２は、ＣＮまたはＮＯ_２であり、Ｘ^４は、−ＣＨ_２Ｘ^５、−ＣＦ_２Ｘ^５、−ＳｎＲ^１ _３、−Ｂ（ＯＨ）_２、−ＢＦ_３・Ｋ、−Ｂ（ＯＲ^２）（ＯＲ^３）または

（式中、Ａは２価の炭化水素基である）
であり、Ｘ^５は、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＯＳＯ_２ＣＨ_３、−ＯＳＯ_２Ｃ_６Ｈ_４（４−ＣＨ_３）および−ＯＳＯ_２ＣＦ_３から選択される脱離基であり、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、それぞれ独立して、炭素数が１〜６のアルキル基であり、Ｒは、

で表される基の何れか一つである）
で表される構造、あるいは
下記式（４）

（式中、Ｘ^３は、ＣＨ_３、ＣＨ_２Ｆ、ＣＦ_３、Ｆ、ＢｒまたはＩであり、Ｘ^６は、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉまたは−ＯＳＯ_２ＣＦ_３から選択される脱離基であり、Ｒは、上記式（３）と同義である）
で表される構造を有する。

上記構成によれば、例えば、式（３）の化合物については、標識ヨウ化メチル等または標識フッ化カリウム等と反応させるか、または、あらかじめ置換基Ｘ^１をベンゼン環上に有するベンジルハライド等を用いて、例えば、非特許文献３（Okada，M.；Yoden，T.；Kawaminami，E.；Shimada，Y.；Kudoh，M.；Isomura，Y.；Shikama，H.；Fujikura，T. Chem. Pharm. Bull. 1996，44，1871-1879）または、非特許文献４（Okada，M.；Yoden，T.；Kawaminami，E.；Shimada，Y.；Kudoh，M.；Isomura，Y. Chem. Pharm. Bull. 1996，45，333-337）に記載の方法を用いることにより、式（１）で表される上記化合物を得ることができる。

また、式（４）の化合物については、標識シアン化水素または標識シアン化銅（Ｉ）等と反応させることにより、式（２）で表される上記化合物を得ることができる。

さらには、本発明に係る、ＰＥＴ用標識化合物を製造するためのキットは、式（３）または式（４）で表される上記化合物を備えている。

上記構成によれば、簡便に、ＰＥＴ用標識化合物を製造することができる。

本発明に係る化合物は、以上のように、式（１）または式（２）で表される構造を有することを特徴としている。このため、アロマテースをより高い精度で定量することができるＰＥＴ用標識化合物を提供することができ、種々の疾患の診断を容易にするとともに、アロマテースを標的とする医薬品候補化合物のスクリーニングに活用することができる。また、アロマテースと結合することで副作用を発現するような、アロマテース以外の分子を標的とした医薬品候補化合物のスクリーニングにも活用することができる。

本発明に係る化合物（１０）のＨＰＬＣ分取結果を示す図面である。本発明に係る標識化合物と従来技術に係る標識化合物とを用いた場合における扁桃体の結合能画像をそれぞれ示す図面である。本発明に係る標識化合物と従来技術に係る標識化合物とを用いた場合における側坐核の結合能画像をそれぞれ示す図面である。本発明に係る標識化合物と従来技術に係る標識化合物とを用いた場合における、小脳、扁桃体、視床下部、側坐核のＰＥＴ測定での時間経過によるＳＵＶの変化を示すグラフである。本発明に係る化合物（１０）による置換実験における結合能画像を示す図面である。図５に示す結合画像の結果を数値化したグラフである。本発明に係る化合物（１０）の結合実験の結果を示すグラフである。本発明に係る標識化合物と従来技術に係る標識化合物とを用いた場合における、血液中の親化合物の含有率の時間経過に対する変化を示すグラフである。本発明に係る標識化合物と従来技術に係る標識化合物とを用いた場合における、脳内の標識された代謝物の含有率の時間経過に対する変化を示すグラフである。本発明に係る別の標識化合物を用いた場合における扁桃体の結合能画像をそれぞれ示す図面である。本発明に係る化合物（２２）を用いた場合における、扁桃体、視床下部、側坐核、小脳のＰＥＴ測定での時間経過によるＳＵＶの変化を示すグラフである。本発明に係る化合物（３３）を用いた場合における、扁桃体、視床下部、側坐核、小脳のＰＥＴ測定での時間経過によるＳＵＶの変化を示すグラフである。本発明に係る化合物（３９）を用いた場合における、扁桃体、視床下部、側坐核、小脳のＰＥＴ測定での時間経過によるＳＵＶの変化を示すグラフである。

本発明の実施の一形態について説明すれば、以下の通りである。

本実施の形態に係る化合物は、下記式（１）

（式中、Ｘ^３は、ＣＨ_３、ＣＨ_２Ｆ、ＣＦ_３、Ｆ、ＢｒまたはＩであり、Ｒは上記式（１）と同義である）
で表される構造を有する。

このような化合物は、男性ステロイドを女性ステロイドに変換する酵素であるアロマテースに対して選択的な親和性を示す。また、上記化合物は、代謝に対して安定な部位に短寿命放射核種を有する。このため、アロマテースの分布を可視化するだけでなく、定量性の高いＰＥＴ画像を提供し得る。

ここで、Ｘ^１としては、^１１ＣＨ_３またはＣＨ_２ ^１８Ｆが好ましく、被験者の被曝を少なくする観点、並びに他のＰＥＴ用分子プローブによる検査を連続的に行うことができる観点から、半減期が比較的短い^１１ＣＨ_３であることがより好ましい。また、Ｘ^２としては、ＣＮが好ましく、Ｘ^３としては、ＣＨ_３またはＢｒが好ましい。

上記Ｘ^１およびＸ^３の置換位置は、オルト位、メタ位、パラ位の何れであってもよいが、パラ位であることが好ましい。

また、本実施の形態に係る化合物は、下記式（１’’）

（式中、Ｘ^１’’は、ＣＨ_３、ＣＨ_２Ｆ、ＣＦ_３、Ｆ、ＢｒまたはＩであり、Ｘ^２は、ＣＮまたはＮＯ_２であり、Ｒは上記式（１）と同義である）
で表される構造を有する。

上記化合物は、放射標識されていないこと以外は、一般式（１）または一般式（２）で表される上記化合物と同じ構造を有する。このため、一般式（１）または一般式（２）で表される上記化合物をＰＥＴ用標識化合物として用いる際のコールド標品として好適に用いることができる。

式（１’’）で表される上記化合物は、下記式（１’）

（式中、Ｘ^１’は、ＣＨ_３またはＣＨ_２Ｆである）
で表される構造を有することが好ましい。

また、上記式（１’）におけるＸ^１’としては、ＣＨ_３であることがより好ましい。

なお、式（１''）におけるＸ^１’’の置換位置、および式（１'）におけるＸ^１’の置換位置は、対応する、式（１）または式（２）で表される化合物におけるＸ^１またはＸ^３の位置と同じ位置であればよく、オルト位、メタ位、パラ位の何れであってもよい。

式（１）で表される上記化合物は、下記式（３）

（式中、Ａは２価の炭化水素基である）
であり、Ｘ^５は、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＯＳＯ_２ＣＨ_３、−ＯＳＯ_２Ｃ_６Ｈ_４（４−ＣＨ_３）または−ＯＳＯ_２ＣＦ_３等の脱離基であり、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、それぞれ独立して、炭素数が１〜６のアルキル基であり、Ｒは一般式（１）と同義である）
で表される構造を有する化合物から合成することができる。

具体的には、Ｘ^４が、−ＳｎＲ^１ _３、−Ｂ（ＯＨ）_２、−ＢＦ_３・Ｋ、−Ｂ（ＯＲ^２）（ＯＲ^３）または式（ｉ）の置換基である場合、式（３）で表される化合物を、標識ヨウ化メチル（^１１ＣＨ_３Ｉ）、標識フッ化ヨウ化メチル（^１８ＦＣＨ_２Ｉ）（以下、両者を総称して、単に、「標識ヨウ化メチル等」と略する場合がある）と反応させることにより、Ｘ^１が、^１１ＣＨ_３、ＣＨ_２ ^１８Ｆである、式（１）で表される上記化合物を得ることができる。

Ｘ^４が−ＳｎＲ^１ _３である場合における、上記反応は、例えば、非特許文献５（Suzuki，M.；Doi，H.；Bjorkman，M.；Andersson，Y.；Langstrom，B.；Watanabe，Y.；Noyori，R. Chem. Eur. J. 1997，12，2039-2042）に記載されている、有機スズ化合物とヨウ化メチルとをパラジウム錯体存在下に反応させメチル基を導入する方法に準じて行うことができる。具体的には、例えば、式（３）で表される化合物を、標識ヨウ化メチル等と、パラジウム（０）錯体、配位子、炭酸塩、任意にハロゲン化銅またはハロゲン化アルカリ金属の存在下に短時間で反応させることにより、式（１）で表される化合物を得ることができる。

また、ホウ素化合物からの[^１１C]メチル化と[^１８Ｆ]フルオロメチル化についても、例えば、非特許文献６（Doi，H.；Ban，I.；Nonoyama，A.；Sumi，K.；Kuang，C.；Hosoya，T.；Tsukada，H.；Suzuki，M. Chem. Eur. J. 2009，15，4165-4171）や国際公開ＷＯ２００８／０２３７８０に記載の方法に準じて行うことができる。

また、Ｘ^４が−ＣＨ_２Ｘ^５である場合には、標識フッ化カリウム（Ｋ^１８Ｆ）等と反応させることにより、Ｘ^１がＣＨ_２ ^１８Ｆである、式（１）で表される上記化合物を得ることができる。

Ｘ^１がＣＦ_２ ^１８Ｆである、式（１）で表される上記化合物は、例えば、非特許文献７（Prabhakaran，J.；Underwood，M. D.；Parsey，R. V.；Arango，V.；Majo，V. J.；Simpson，N. R.；Heertum，R. V.；Mann，J. J.；Kumar，J. S. D. Bioorg. Med. Chem. 2007，15，1802-1807）や、非特許文献８（Angelini，G.；Speranza，M.；Shiue，C.-Y.；Wolf，A. P. J. Chem. Soc.，Chem. Commun. 1986，924-925）に記載の方法に準じて、Ｘ^４が−ＣＦ_２Ｂｒまたは−ＣＦ_２Ｃｌである、式（３）で表される化合物に対して、^１８Ｆで標識された[^１８Ｆ]フッ素アニオンを用いた求核置換反応により得ることができる。

Ｘ^１が^１８Ｆである、式（１）で表される上記化合物は、Ｘ^４が−ＳｎＲ^１ _３である、式（３）で表される化合物に対して、^１８Ｆで標識された[^１８Ｆ]フッ素ガスあるいは[^１８Ｆ]アセチルハイポフルオライト等を反応させることにより得ることができる。

Ｘ^１が^７６Ｂｒまたは^１２４Ｉである、式（１）で表される上記化合物は、Ｘ^４が−ＳｎＲ^１ _３である、式（３）で表される化合物に対して、^７６Ｂｒで標識された[^７６Ｂｒ]臭素アニオンあるいは^１２４Ｉで標識された[^１２４Ｉ]ヨウ素アニオンを、クロラミンＴ等の酸化剤存在下で反応させることにより得ることができる。

上記Ａは、２価の炭化水素基であり、

で表される基の何れか１つであることが好ましい。

式（３）において、Ｘ^４が−ＣＦ_２Ｘ^５である場合、Ｘ^５としては、ＣｌまたはＢｒであることが好ましい。

上記Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、炭素数が１〜６のアルキル基であり、炭素数４〜６のアルキル基であることが好ましい。上記Ｒ^１として具体的には、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉ−プロピル基、シクロプロピル基、ｎ−ブチル基、ｉ−ブチル基、sec−ブチル基、tert−ブチル基、シクロプロピルメチル基、シクロブチル基、ｎ−ペンチル基、ｉ−ペンチル基、sec−ペンチル基、tert−ペンチル基、２−メチルブチル基、シクロブチルメチル基、シクロペンチル基、ｎ−ヘキシル基、１−メチルペンチル基、２−メチルペンチル基、３−メチルペンチル基、４−メチルペンチル基、１−エチルブチル基、２−エチルブチル基、１，１−ジメチルブチル基、２，２−ジメチルブチル基、３，３−ジメチルブチル基、１−エチル−１−メチルプロピル基、シクロペンチルメチル基、およびシクロヘキシル基等が挙げられる。

上記パラジウム（０）錯体としては、式（１）で表される化合物と、標識ヨウ化メチル等とのカップリング反応を触媒するものであれば特には限定されない。例えば、Ｐｄ_２（ｄｂａ）_３、Ｐｄ_２（ｄｂａ）_３ＣＨＣｌ_３、Ｐｄ［Ｐ（ｏ−ＣＨ_３Ｃ_６Ｈ_４）_３］_２、Ｐｄ［Ｐ（tert−Ｃ_４Ｈ_９）_３］_２等が挙げられる。

また、上記配位子としては特には限定されず、例えば、パラジウム（０）錯体がＰｄ_２（ｄｂａ）_３である場合、Ｐ（ｏ−ＣＨ_３Ｃ_６Ｈ_４）_３等が挙げられる。

上記ハロゲン化銅としては、ＣｕＣｌ、ＣｕＢｒ等が挙げられる。また、当該ハロゲン化銅の量は、上記パラジウム（０）錯体に含まれるパラジウム原子に対して、例えば２当量以上で用いることができる。

上記ハロゲン化アルカリ金属としては、ＣｓＦ等が挙げられる。当該ハロゲン化アルカリ金属の量は、上記パラジウム（０）錯体に含まれるパラジウム原子に対して、例えば２当量以上で用いることができる。

上記炭酸塩としては、炭酸カリウム、炭酸セシウム等が挙げられ、炭酸カリウムが好ましい。当該炭酸塩の量は、上記パラジウム（０）錯体に含まれるパラジウム原子に対して、例えば２当量以上で用いることができる。

また、式（１）で表される化合物を得るための上記反応では溶剤を用いてもよい。このような溶剤としては、例えば、ＤＭＦ、ＤＭＦと水との混合物等が挙げられる。

また、式（２）で表される上記化合物は、下記式（４）

（式中、Ｘ^３は、一般式（２）と同義であり、Ｘ^６は、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＯＳＯ_２ＣＦ_３等の脱離基であり、Ｒは上記式（１）と同義である）
で表される構造を有する化合物を、標識シアン化水素（Ｈ^１１ＣＮ）または標識シアン化銅（Ｉ）（Ｃｕ^１１ＣＮ）等と反応させることにより得ることができる。

より具体的には、例えば、標識シアン化銅（Ｉ）と反応させる場合には、ＤＭＦ中で１８０℃程度に加熱すれば得られ、標識シアン化水素と反応させる場合には、（Ｐｈ_３Ｐ）_４Ｐｄ等のパラジウム触媒存在下で加熱することにより得ることができる。

なお、式（４）におけるＸ^３の置換位置は、対応する、式（２）で表される化合物におけるＸ^３の位置と同じ位置であればよく、オルト位、メタ位、パラ位の何れであってもよい。

式（３）で表される上記化合物は、例えば、下記式（５）

（式中、Ｘ^２は、式（３）と同義であり、Ｘ^７は、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＯＳＯ_２ＣＦ_３等の脱離基であり、Ｒは上記式（１）と同義である）
で表される構造を有する化合物から製造することができる。

なお、式（５）におけるＸ^７の置換位置は、対応する、式（３）で表される化合物におけるＸ^４の位置と同じ位置であればよく、オルト位、メタ位、パラ位の何れであってもよい。

式（３）におけるＸ^４がＳｎＲ^１ _３である場合、式（５）で表される上記化合物を、例えば、Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_４存在下で、（ＳｎＲ^１ _３）_２と反応させることにより製造することができる。

また、式（３）におけるＸ^４が、−Ｂ（ＯＲ^２）（ＯＲ^３）や式（ｉ）で表される基である場合には、例えば、非特許文献９（Ishiyama，T.；Murata，M.；Miyaura，N. J. Org. Chem. 1995，60，7508-7510）に記載されているように、式（３）で表される上記化合物を、ＰｄＣｌ_２（ｄｐｐｆ）、および酢酸カリウムの存在下で、式（ｉ）で表される基を供与し得るアルコキシジボロンと反応させることにより製造することができる。

式（３）におけるＸ^４が、−Ｂ（ＯＨ）_２、−ＢＦ_３・Ｋである場合には、例えば、非特許文献１０（Murphy，J. M.；Tzschucke，C. C.；Hartwig，J. F. Org. Lett. 2007，9，757-760）に記載の方法によりピナコールボロン酸エステルから合成することができる。

式（３）におけるＸ^４がＣＨ_２Ｘ^５である場合には、式（５）で表される上記化合物のＸ^５がＯＨ（水酸基）である化合物を、例えば、トリエチルアミン等の塩基存在下、適当なスルホニルクロリドと反応させるかまたは、三ハロゲン化リンと反応させること等により製造することができる。

また、式（３）におけるＸ^４がＣＦ_２Ｘ^５である場合には、式（３）で表される上記化合物のＸ^５がＨ（水素）である化合物を、例えば、塩素または臭素、あるいはＮ-ブロモコハク酸イミドと反応させること等により製造することができる。Ｘ^５がＩ、−ＯＳＯ_２ＣＨ_３、−ＯＳＯ_２ＣＦ_３である場合も、上記方法に準じて製造することができる。

式（５）で表される上記化合物は、あらかじめ置換基Ｘ^７をベンゼン環上に有するベンジルハライド等を用いて、例えば、非特許文献３（Okada，M.；Yoden，T.；Kawaminami，E.；Shimada，Y.；Kudoh，M.；Isomura，Y.；Shikama，H.；Fujikura，T. Chem. Pharm. Bull. 1996，44，1871-1879）または非特許文献４（Okada，M.；Yoden，T.；Kawaminami，E.；Shimada，Y.；Kudoh，M.；Isomura，Y. Chem. Pharm. Bull. 1996，45，333-337）に記載の方法により、合成することができる。式（４）で表される上記化合物も、これらの方法に準じて合成することができる。

なお、式（１’’）で表される上記化合物は、例えば、上記非特許文献３または非特許文献４に記載の方法により、４−（４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−４−イルアミノ）ベンゾニトリル（実施例の化合物（３）参照）、１−ニトロ−４−（４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−４−イルアミノ）ベンゼン、４−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イルアミノ）ベンゾニトリル、または、１−ニトロ−４−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イルアミノ）ベンゼンに、炭酸カリウム等の塩基存在下、メチルベンジルハライド、フッ化メチルベンジルハライド、三フッ化メチルベンジルハライド、フッ化ベンジルハライド、塩化ベンジルハライド、臭化ベンジルハライド、ヨウ化ベンジルハライド等をそれぞれ反応させることにより得ることができる。また、上述した式（１）または式（２）で表される化合物の製造方法において、標識化ヨウ化メチル等の代わりに標識化されていないヨウ化メチル等（ＣＨ_３Ｉ、ＦＣＨ_２Ｉ）、または、標識化シアン化水素または標識化シアン化銅（I）等の代わりに標識化されていないシアン化水素またはシアン化銅（I）等を用いることによっても同様に得ることができる。

また、原理的には、式（１）および式（２）で表される化合物は、上述した上記非特許文献３または非特許文献４に記載の方法において、あらかじめポジトロン放出核種でラベル化された各種ベンジルハライドや、あらかじめポジトロン放出核種でラベル化された各種ベンゾニトリルを用いることによっても得ることができる。

分子プローブ中の放射能の低下を抑制することができれば、より少ない投与量にてＰＥＴを行うことができる。本発明者らはこれまでに、非常に短時間で完了するメチル化反応を開発している。これにより、寿命が非常に短い放射線核種を用いて製造した化合物であっても、ＰＥＴ用分子プローブとして有効に利用し得る。すなわち、本発明の好ましい実施形態において、式（１）で表される上記化合物は、上記メチル化反応を適用し得るものであり得る。また、このような化合物は、上記メチル化反応を用いて製造されることが好ましい。

上記キットとしては、式（３）で表される上記化合物を含有する場合には、または式（３）で表される上記化合物の他に、上述した、標識ヨウ化メチル等、パラジウム（０）錯体、配位子、および炭酸塩からなる群から選択される少なくとも１つを更に備えていてもよく、更に任意に、ハロゲン化銅またはハロゲン化アルカリ金属や、上述した反応に用い得る他の試薬、溶媒、触媒を備えていてもよい。

また、上記キットとして式（４）で表される上記化合物を含有する場合には、式（４）で表される上記化合物の他に、上述した、標識シアン化水素（Ｈ^１１ＣＮ）または標識シアン化銅（Ｉ）（Ｃｕ^１１ＣＮ）を更に備えていてもよく、更に任意に、反応に用い得る溶媒や触媒を備えていてもよい。

なお、本明細書中において使用される場合、用語「キット」は、特定の材料を内包する容器（例えば、ボトル、プレート、チューブ、ディッシュ等）を備えた包装が意図される。好ましくは各材料を使用するための指示書を備える。本明細書中においてキットの局面において使用される場合、「備えた（備えている）」は、キットを構成する個々の容器の何れかの中に内包されている状態が意図される。また、本実施の形態に係るキットは、複数の異なる組成物を１つに梱包した包装であり得る。「指示書」は、紙またはその他の媒体に書かれていても印刷されていてもよく、あるいは磁気テープ、コンピューター読み取り可能ディスクまたはテープ、ＣＤ−ＲＯＭなどのような電子媒体に付されてもよい。

本実施の形態に係るキットはまた、希釈剤、溶媒、洗浄液またはその他の試薬を内包した容器を備え得る。さらに、本実施の形態に係るキットは、用途に応じて必要な器具をあわせて備えていてもよい。

また、アロマテースは、乳癌、乳腺症、子宮体癌、子宮内膜症、子宮筋腫等において発現することが知られているため、式（１）または式（２）で表される上記化合物を標識化合物として用いてＰＥＴを行えばこれらの疾患を診断することや、これらの疾患の診断を補助するためのデータ収集をすることや、治療薬（アロマテース阻害薬）の開発を補助することができる。つまり、本実施の形態では、式（１）または式（２）で表される上記化合物をＰＥＴに用いる工程を包含する、疾患の診断方法、疾患の診断を補助するためのデータ収集方法、またはアロマテースを標的とする医薬品候補化合物、あるいはアロマテースと結合することで副作用を発現するような、アロマテース以外の分子を標的とした医薬品候補化合物のスクリーニング方法を提供する。

さらには、アロマテースは、精神障害、更年期障害、慢性疲労症候群等に関わることが知られているため、式（１）または式（２）で表される上記化合物をＰＥＴ用標識化合物として用いて脳内アロマテースの定量を行うことは、これらの疾患の原因解明や治療法の究明に役立つ。

本発明に係る化合物は、一実施形態において、組成物形態で提供され得る。本実施形態に係る組成物は、ＰＥＴによりアロマテースをイメージングするために用いられるだけでなく、アロマテースまたは性ステロイドの関与が疑われる疾患（例えば、乳癌、乳腺症、子宮体癌、子宮内膜症、子宮筋腫等）を診断するために、あるいは精神障害、更年期障害、慢性疲労症候群等の診断を目的として、使用される。本実施形態に係る組成物は、溶液または懸濁液のいずれかの形態にて調製されていても、液体（例えば、緩衝液）に溶解もしくは懸濁するために適切な固体形態として調製されていてもよい。

また、本実施形態に係る組成物は、式（１’’）で表される上記化合物をさらに含み得る。

なお、本実施形態に係る組成物は、キットとして提供されてもよい。「組成物」は各種成分が一物質中に含有されている形態であり、「キット」は各種成分の少なくとも１つが別物質中に含有されている形態であるが、本明細書中にて用いられる場合、「主成分を含有している組成物」は「主成分を備えているキット」を包含する。組成物中に含まれ得る他の成分は、主成分である化合物の機能を阻害しないものであれば特に限定されない。

なお、本実施の形態に係る化合物を生体に適用する場合の投与は、種々の経路による注入により行うことが好ましいが、これに限定されない。また、投与量も、必要に応じて当業者によって適宜設計され得る。

なお、上述したように、本発明に係る化合物は、式（１）で表される化合物であって、Ｘ^１が^１１ＣＨ_３であることが好ましい。

上記構成によれば、^１１ＣＨ_３は半減期が比較的短いため、被験者の被曝を少なくすることができ、さらには他のＰＥＴ用標識化合物による検査を連続的に行うことができる。

本発明に係る化合物は、式（２）で表される化合物であって、Ｘ^３がＣＨ_３またはＢｒであることが好ましい。

また、本発明に係る診断用組成物では、下記式（１’’）

（式中、Ｘ^１’’は、ＣＨ_３、ＣＨ_２Ｆ、ＣＦ_３、Ｆ、ＢｒまたはＩであり、Ｘ^２は、ＣＮまたはＮＯ_２であり、Ｒは、

で表される基の何れか一つである）
で表される構造を有する化合物をさらに含んでいることが好ましい。

さらには、本発明に係る診断用組成物では、適用対象が、アロマテースまたは性ステロイドの関与が疑われる疾患、アロマテースの誘導を伴う炎症性疾患、精神障害、更年期障害、および慢性疲労症候群からなる群より選択されることが好ましい。

また、本発明に係る診断方法では、適用対象が、アロマテースまたは性ステロイドの関与が疑われる疾患、アロマテースの誘導を伴う炎症性疾患、精神障害、更年期障害、および慢性疲労症候群からなる群より選択されることが好ましい。

以下、実施例に基づいて本発明をより詳細に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。

なお、以下に示す実験操作において、TLC（thin-layer chromatography）は、シリカゲル０．２５ｍｍがプレコートされたプレート（Merck Chemicals，Silica Gel 60 F254，Cat. No. 1.05715）を用いて行った。

カラムクロマトグラフィは、シリカゲル（関東化学（株），Silica Gel 60N，spherical neutral，粒径40-50 μｍ，Cat. No. 37563-85または粒径63-210 μｍ，Cat. No. 37565-85）を用いて行った。

融点（Mp）は、YANACO MP-J3 instrumentにより測定し、補正は行っていない。

¹Hおよび¹³C NMRは、Varian MERCURY 300 spectrometerを用い、それぞれ３００ＭＨｚおよび７５．５ＭＨｚで測定を行った。またはJEOL JNM-EX270 spectrometerを用い、それぞれ２７０ＭＨｚおよび６７．８ＭＨｚで測定を行った。ＮＭＲスペクトル用の溶媒としては、CDCl₃ （CIL，Cat. No. DLM-7TB）およびDMSO-d₆ （CIL,Cat. No. DLM-10）を用いた。また、化学シフト（δ）は、（CH₃）₄Si （CDCl₃の場合、δ 0.00（¹H NMR）若しくは上記溶媒ピーク（DMSO-d₆の場合、δ 2.49（¹H NMR）およびδ 39.5（¹³C NMR）、並びにCDCl₃の場合、δ 77.0（¹³C NMR））を内部基準として、結合定数（Ｈｚ）と共に、ｐｐｍで与えられる。さらには、略記”s”，”d”，”t”，”m”，および”br”は、それぞれ”singlet”，”doublet”，”triplet”，”multiplet”，および”broad”をそれぞれ意味する。

ＩＲスペクトルは、「DRS-8000A」を装着した「SHIMADZU IR Prestige-21 spectrometer」を用い、拡散反射法により測定した。

元素分析は、「YANACO CHN CORDER MT-5」により行った。

高分解能質量スペクトル（HRMS）は、「JEOL JMS-700 mass spectrometer」により、ポジティブ高速原子衝突（FAB⁺）条件下で測定した。または、「Bruker micrOTOF mass spectrometer」により、ポジティブエレクトロスプレーイオン化（ESI⁺）条件下で測定した。

なお、本実施例では、化合物（１）（4-fluorobenzonitrile）（Cat. No. 329-70013）、化合物（２）（4-amino-4H-1,2,4-triazole）（Cat. No. 326-41573）、tert−ブトキシカリウム（Cat. No. 161-08421）、４−メチルベンジルブロミド（Cat. No. 021-03131）、４−ブロモベンジルブロミド（Cat. No. 325-36072）、炭酸カリウム（Cat. No. 162-03495）、化合物（５）（4-bromobenzyl alcohol）（Cat. No. 320-77123）、トリブチルスズ（IV）クロリド（Cat. No. 202-08981）、メタンスルホニルクロリド（Cat. No. 131-01583）、トリエチルアミン（Cat. No. 202-02646）、ビス（ピナコラート）ジボロン（Cat. No. 329-56970）、ｍ−ブロモベンジルブロミド（Cat. No. 32-6642）、p-フルオロニトロベンゼン（Cat. No. 064-02081）、化合物（１８）（３−ブロモベンジルアルコール）（Cat. No. 326-21852）、臭化ナトリウム（Cat. No. 193-01505）、化合物（２６）（ｐ−キシレン−α，α’-ジオール）（Cat. No. 248-00562）、および四臭化炭素（Cat. No. 038-16555）は和光純薬工業（株）からそれぞれ購入した。PdCl₂（dppf）・CH₂Cl₂（Cat. No. B2064）は東京化成工業（株）から購入した。

また、（Ｐｈ_３Ｐ）_４Ｐｄ（Cat. No. 216666）および（n-Bu₃Sn）_２（Cat. No. 251127）、化合物（１３）（４−ヨードベンジルアルコール）（Cat. No. 523496）、３−メチルベンジルブロミド（Cat. No. B83509）、および（ジエチルアミノ）サルファートリフルオリド（Cat. No. 235253）はシグマアルドリッチジャパン（株）からそれぞれ購入した。ｎ−ブチルリチウムのｎ−ヘキサン溶液（Cat. No. 04937-25）および臭化カリウム（Cat. No. 32319-30）、酢酸カリウム（32299-30）およびトリフェニルホスフィン（Cat. No. 40950-25）は関東化学（株）からそれぞれ購入した。

他の全ての化学試薬は、市販されている等級のものをそのまま使用した。

また、化合物（３）（4-（4H-1,2,4-Triazol-4-ylamino）benzonitrile）は、非特許文献３（Okada，M.；Yoden，T.；Kawaminami，E.；Shimada，Y.；Kudoh，M.；Isomura，Y.；Shikama，H.；Fujikura，T.，Chem. Pharm. Bull. 1996，44，1871-1879）に記載の方法により、ＤＭＳＯ中、tert−ブトキシカリウム存在下で化合物（１）と化合物（２）とを反応させることにより合成した。化合物（９）、化合物（３１）および化合物（３７）も非特許文献３に記載の方法によって合成した。

〔化合物の合成〕
（Ｉ）化合物（４）（4-［（4H-1,2,4-Triazol-4-yl）｛4-（tributylstannyl）benzyl｝amino ］benzonitrile）の合成
＜方法Ａ＞
化合物（４）は、以下のスキームに従って合成した。

ここで、化合物（８）は、以下のスキームに従って合成した。

以下に、各化合物についての合成方法について具体的に説明する。

（ｉ）化合物（６）（4-（Tributylstannyl）benzyl alcohol）の合成（非特許文献１１（Huang, Y.; Hammond, P. S.; Wu, L.; Mach, R. H., J. Med. Chem. 2001, 44, 4404-4415）、非特許文献１２（Kopka, K.; Faust, A.; Keul, P.; Wagner, S.; Breyholz, H.-J.; Holtke, C.; Schober, O.; Schafers, M.; Levkau, B..J. Med. Chem. 2006, 49, 6704-6715）参照）
アルゴン雰囲気下、化合物（５）（４．１５ｇ，２２．２ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１５０ｍＬ）溶液に、ｎ−ブチルリチウム（１．６３Ｍ，３０．０ｍＬ，４８．９ｍｍｏｌ）のｎ−ヘキサン溶液を−７８℃でゆっくりと加えた。上記混合物を同温度下で５０分間攪拌した後、当該混合物に、トリブチルスズ（IV）クロリド（１３．３ｍＬ，４８．９ｍｍｏｌ）を−７８℃で加え、混合物を室温まで昇温した。１．５時間攪拌した後、上記反応混合物を減圧下で濃縮した。

その残留物に水（２００ｍＬ）を加え、混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２（８０ｍＬ×２）で抽出した。有機層を全て混合し、水（１５０ｍＬ×３）、食塩水（１５０ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、減圧下で濃縮した。

その残留物をカラムクロマトグラフィ（シリカゲル２００ｇ，n-hexane/EtOAc = 8/1）により精製し、化合物（６）（無色油状物，７．１４ｇ，８１．０％）を得た。

TLC R_f = 0.44 （n-hexane/EtOAc = 4/1），R_f= 0.50（n-hexane/CH₂Cl₂/EtOAc = 4/1/1）
¹H NMR （300 MHz，CDCl₃） δ 0.88 （t，9H，J = 7.2 Hz，3CH₃）,0.93-1.16 （m，6H，3CH₂），1.26-1.39 （m，6H，3CH₂），1.43-1.67 （m，6H，3CH₂），4.68 （d，2H，J = 5.8 Hz,benzylic CH₂），7.30-7.37 （AA’BB’，2H，aromatic），7.39-7.56 （AA’BB’，2H，³J（^119/117Sn-¹H） = 37.4 Hz,aromatic）
¹³C NMR （75.5 MHz，CDCl₃） δ 9.3 （3C，¹J（¹¹⁹Sn-¹³C） = 339.2 Hz，¹J（¹¹⁷Sn-¹³C） = 324.5 Hz）,13.5 （3C），27.2 （3C，³J（^119/117Sn-¹³C） = 54.7 Hz），28.9 （3C，²J（^119/117Sn-¹³C） = 19.7 Hz），64.2，126.5 （2C，³J（^119/117Sn-¹³C） = 41.3 Hz），136.2 （2C，²J（^119/117Sn-¹³C） = 31.4 Hz），140.2，140.5
IR （KBr，cm^-1）514，598，621，662，689，743，791，833，864，961，1015，1069，1207，1290，1375，1393，1418，1462，2851，2870，2924，2955，3296
Anal. Calcd. for C₁₉H₃₄Sn: C，57.46；H，8.63. Found: C，57.29；H，8.88
HRMS （FAB⁺/NBA+NaI） m/z 421.1536 （［M+Na］⁺，C₁₉H₃₄O¹²⁰SnNa requires 421.1529）。

（ii）化合物（７）（4-（Tributylstannyl）benzyl methanesulfonate）の合成（非特許文献１２参照）
アルゴン雰囲気下、化合物（６）（６．９０ｇ，１７．４ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（１００ｍＬ）溶液に、０℃でトリエチルアミン（３．６３ｍＬ，２６．０ｍｍｏｌ）およびメタンスルホニルクロリド（１．６１ｍＬ，２０．８ｍｍｏｌ）を順次加え、混合物を同温度下で３５分間攪拌した。

これに、水（２００ｍＬ）を加え、混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２（８０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、食塩水（１５０ｍＬ×３）で洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）させ、濾過し、減圧下で濃縮した。その残留物をカラムクロマトグラフィ（シリカゲル２００ｇ，n-hexane/EtOAc = 4/1）で精製し、化合物（７）（無色油状物，７．１７ｇ，８６．８％）を得た。

TLC R_f = 0.45（n-hexane/EtOAc = 4/1），R_f = 0.57（n-hexane/CH₂Cl₂/EtOAc = 4/1/1）
¹H NMR （300 MHz，CDCl₃） δ 0.88 （t，9H，J = 7.2 Hz，3CH₃），0.94-1.19 （m，6H，3CH₂），1.23-1.41 （m，6H，3CH₂），1.42-1.67 （m，6H，3CH₂），2.90 （s，3H，CH₃），5.23 （s，2H，benzylic CH₂），7.33-7.41 （AA’BB’，2H，aromatic），7.43-7.60 （AA’BB’，2H，³J（^119/117Sn-¹H） = 36.5 Hz，aromatic）
¹³C NMR （75.5 MHz，CDCl₃） δ 7.0 （3C，¹J（¹¹⁹Sn-¹³C） = 340.7 Hz，¹J（¹¹⁷Sn-¹³C） = 325.5 Hz），13.3 （3C），26.9 （3C，³J（^119/117Sn-¹³C） = 55.4 Hz），28.7 （3C，²J（^119/117Sn-¹³C） = 20.0 Hz），37.3，71.4，127.8 （2C，³J（^119/117Sn-¹³C） = 40.3 Hz），132.9，136.4 （2C，²J（^119/117Sn-¹³C） = 30.8 Hz），143.1
IR （KBr，cm^-1）513，529，664，691，816，862，932，1069，1175，1356，1396，1416，1464，2851，2870，2924，2955
Anal. Calcd. for C₂₀H₃₆O₃SSn: C，50.54；H，7.63. Found: C，50.32；H，7.80
HRMS （FAB⁺/NBA+NaI） m/z 499.1301 （［M+H］⁺，C₂₀H₃₆O₃S¹²⁰SnNa requires 499.1305）。

（iii）化合物（８）（4-（Tributylstannyl）benzyl bromide）の合成（非特許文献１３（Patel, H. K.; Kilburn, J. D.; Langley, G. J.; Edwards, P. D.; Mitchell, T.; Southgate, R.， Tetrahedron Lett. 1994, 35, 481-484）参照）
アルゴン雰囲気下、化合物（７）（６．９１ｇ，１４．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１００ｍＬ）溶液に、臭化カリウム（３．４６ｇ，２９．１ｍｍｏｌ）を室温下で加え、混合物を同温度下で１２時間攪拌した。

これに、水（１００ｍＬ）を加え、混合物をＥｔ_２Ｏ（８０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（１５０ｍＬ×３）、食塩水（１５０ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、減圧下で濃縮した。その残留物をカラムクロマトグラフィ（シリカゲル２００ｇ，n-hexane/Et₂O= 49/1）により精製し、化合物（８）（無色油状物，６．４３ｇ，９６．１％）を得た。

TLC R_f = 0.39（n-hexane）
¹H NMR （300 MHz，CDCl₃） δ 0.88 （t，9H，J = 7.2 Hz，3CH₃），0.92-1.18 （m，6H，3CH₂），1.25-1.40 （m，6H，3CH₂），1.42-1.64 （m，6H，3CH₂），4.49 （s，2H，benzylic CH₂），7.30-7.39 （AA’BB’，2H，aromatic），7.39-7.54 （AA’BB’，2H，³J（^119/117Sn-¹H） = 36.6 Hz，aromatic）
¹³C NMR （75.5 MHz，CDCl₃） δ 7.3 （3C，¹J（¹¹⁹Sn-¹³C） = 340.0 Hz，¹J（¹¹⁷Sn-¹³C） = 324.8 Hz），13.6 （3C），27.3 （3C，³J（^119/117Sn-¹³C） = 55.4 Hz），29.0 （3C，²J（^119/117Sn-¹³C） = 19.3 Hz），33.4，128.2 （2C，³J（^119/117Sn-¹³C） = 41.2 Hz），136.6 （2C，²J（^119/117Sn-¹³C） = 30.5 Hz），137.2，142.2
IR （KBr，cm^-1）627，669，777，797，839，937，1011，1086，1113，1406，1462，1485，2857，2884，2928，2953
Anal. Calcd. for C₁₉H₃₃BrSn: C，49.60；H，7.23. Found: C，49.44；H，7.41。

（iv）化合物（４）（4-［（4H-1,2,4-Triazol-4-yl）｛4-（tributylstannyl）benzyl｝amino ］benzonitrile）の合成
アルゴン雰囲気下、化合物（３）（１．１７ｇ，６．３３ｍｍｏｌ）、化合物（８）（３．４９ｇ，７．５９ｍｍｏｌ）、および炭酸カリウム（１．７６ｇ，１２．７ｍｍｏｌ）の混合物のアセトン（５０ｍＬ）溶液を室温下で８時間攪拌した。これに、水（１００ｍＬ）を加え、上記混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２（１００ｍＬ×３）により抽出した。有機層を全て混合し、水（１００ｍＬ×１）、食塩水（１００ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、減圧下で濃縮した。

その残留物をカラムクロマトグラフィ（シリカゲル１１０ｇ、CH₂Cl₂/CH₃OH = 20/1）により精製し、化合物（４）（無色固体，２．６２ｇ，７３．５％）を得た。ｎ−ヘキサンによって再結晶することによって無色板状晶が得られた（２．２６ｇ，６３．４％）。

TLC R_f = 0.57 （CH₂Cl₂/CH₃OH = 9/1）
Mp 93-94 ℃
¹H NMR （300 MHz，CDCl₃） δ 0.88 （t，9H，J = 7.2 Hz，3CH₃），0.93-1.18 （m，6H，3CH₂），1.23-1.41 （m，6H，3CH₂），1.44-1.58 （m，6H，3CH₂），4.88 （s，2H，benzylic CH₂），6.62-6.70 （AA’BB’，2H，aromatic），7.09-7.19 （AA’BB’，2H，aromatic），7.36-7.53（AA’BB’，2H，³J（^119/117Sn-¹H） = 36.0 Hz，aromatic），7.55-7.62 （AA’BB’，2H，aromatic），8.12 （br s，2H，triazole）
¹³C NMR （75.5 MHz，DMSO-d₆） δ 9.1 （3C，¹J（¹¹⁹Sn-¹³C） = 338.8 Hz，¹J（¹¹⁷Sn-¹³C） = 324.2 Hz），13.6 （3C），26.7 （3C，³J（^119/117Sn-¹³C） = 53.7 Hz），28.6 （3C，²J（^119/117Sn-¹³C） = 20.3 Hz），57.3，102.8，113.6 （2C），119.1，127.9 （2C，³J（^119/117Sn-¹³C） = 40.9 Hz），133.9 （2C），134.7，136.4 （2C，²J（^119/117Sn-¹³C） = 31.9 Hz），141.0，143.3 （2C），151.5
IR （KBr，cm^-1）669，826，1065，1179，1292，1335，1395，1462，1508，1605，2222，2851，2870，2924，2955
Anal. Calcd. for C₂₈H₃₉N₅Sn: C，59.59；H，6.97；N，12.41. Found: C，59.47；H，6.65；N，12.44
HRMS （FAB⁺/NBA） m/z 566.2318 （［M+H］⁺，C₂₈H₄₀N₅ ¹²⁰Sn requires 566.2306）。

＜方法Ｂ＞
また、化合物（４）は以下のスキームに示す別の方法によっても合成した。

具体的には、以下のように合成した。

なお、化合物（９）（4-｛（4-Bromobenzyl）（4H-1,2,4-triazol-4-yl）amino｝benzonitrile（YM511）は、文献１（Okada，M.；Yoden，T.；Kawaminami，E.；Shimada，Y.；Kudoh，M.；Isomura，Y.；Shikama，H.；Fujikura，T.，Chem. Pharm. Bull. 1996，44，1871-1879）に記載の方法により、アセトニトリル中、炭酸カリウム存在下で化合物（３）と４−ブロモベンジルブロミドとを反応させることにより合成した。

まず、アルゴン雰囲気下、化合物（９）（６８５ｍｇ，１．９３ｍｍｏｌ）のＤＭＥ（２０ｍＬ）溶液に、（Ｐｈ_３Ｐ）_４Ｐｄ（６６．９ｍｇ，５７．９μｍｏｌ）および（ｎ−Ｂｕ_３Ｓｎ）_２（２．５０ｍＬ，２．９３ｍｍｏｌ）を順次加え、混合物を１００℃で２０時間還流させた。

混合物を室温に冷却後、混合物に、飽和フッ化カリウム水溶液（５０ｍＬ）を加え、生じた沈殿物を濾過により除去した。濾液を酢酸エチル（１００ｍＬ×２）で抽出し、有機相を全て混合した。それを飽和フッ化カリウム水溶液（１００ｍＬ×１）、水（１００ｍＬ×１）、食塩水（１００ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、減圧下で濃縮した。

その残留物をカラムクロマトグラフィ（シリカゲル５０ｇ，CH₂Cl₂/EtOAc = 9/1）により精製し、化合物（４）（無色固体，５５１ｍｇ，５０．５％）を得た。

（II）化合物（１０）（4-｛（4-[¹¹C]Methylbenzyl）（4H-1,2,4-triazol-4-yl）amino｝benzonitrile，[¹¹C]cetrozole）の合成
化合物（１０）は以下のように合成した。

まず、トリスジベンジリデンアセトンジパラジウム（１．８ｍｇ、１．６μｍｏｌ）およびトリ−ｏ−トリルホスフィン（２．０ｍｇ、６．３μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（０．３ｍＬ）を反応容器（Ａ）中に準備し、室温下に置いた。反応容器（Ａ）中の溶液は、［^１１Ｃ］ヨウ化メチルを吹き込む１０〜２０分前に準備した。

一方、合成した化合物（４）（４．０ｍｇ、１３μｍｏｌ）、ＣｕＣｌ（２．０ｍｇ、２０μｍｏｌ）、およびＫ_２ＣＯ_３（２．４ｍｇ、１８μｍｏｌ）を反応容器（Ｂ）に準備し、室温下に置いた。

続いて、反応容器（Ａ）に［^１１Ｃ］ヨウ化メチルを吹き込み、その後１分間静置した。得られた溶液を反応容器（Ｂ）に添加した。

反応溶液（Ｂ）中の混合溶液を７０℃で５分間加熱した後、ＨＰＬＣ（high-performance liquid chromatography）を用いて下記条件下で分離および精製を行なった。

分離精製条件：ガードカラム Pd pack，AR-II 10 x 50 mm，分取カラム Cholester Waters 10 x 250 mm，UV検出波長 254nm，溶離液 CH₃CN:30mM酢酸アンモニウム=40:60，流速5.0 mL/min，保持時間約14分，目的化合物（１０）のHPLC分析収率91%以上（HPLC放射線スペクトルの面積比より算出），単離した（１０）の総放射能2.3 ＧＢｑ；分析条件（純度測定、比放射能測定）：AR-II 4.6 x 100 mm，UV検出波長254 nm，溶離液CH₃CN:30mM酢酸アンモニウム=40:60，流速1.0 mL/min，保持時間約4.5分，放射化学純度99%，化学純度96-99%，比放射能72 ＧＢｑ/μｍｏｌ
希釈用溶液：生理食塩水5.0 mL，プロピレングリコール0.5 mL，Tween 80界面活性剤0.08 mL。

^１１Ｃ−標識化合物（１０）のＨＰＬＣ分取結果を図１に示す。なお、図１中、ベースラインが下側にあるピークはＲＩ検出によるものであり、ベースラインが上側にあるピークはＵＶ検出によるものである。

ＨＰＬＣによる分離後、目的の^１１Ｃ−標識化合物（１０）を含むフラクションを減圧下、エバポレーターにより濃縮し、希釈用溶液を加えてサル臨床研究用の投与溶液とした。

また、化合物（１０）は、以下の方法によっても合成した。

サイクロトロン（製品名；住友CYPRIS HM-12Sサイクロトロン、住友重機械工業社製）を用いて、^１４Ｎ（ｐ，α）^１１Ｃ反応によって、[¹¹C]二酸化炭素を合成し、その後、標識用合成装置（RIKEN original automated radiolabeling system）によって、水素化アルミニウムリチウム、ヨウ化水素酸をこの順で加える処理を行い、[¹¹C]ヨウ化メチルへ変換させた。得られた [¹¹C]ヨウ化メチルは、以下に示す、パラジウム（０）触媒を用いた高速Ｃ-[¹¹C]メチル化反応に用いた。

[¹¹C]ヨウ化メチルを、Ｈｅガス流（３０ｍＬ／分）によって、室温の反応容器（Ａ）中の、Ｐｄ_２（ｄｂａ）_３（２．０ｍｇ，１．８μｍｏｌ）およびＰ（o-tolyl）_３（３．２ｍｇ，１０．１μｍｏｌ）のＤＭＦ（０．３ｍＬ）溶液へ移送した。当該混合物を、化合物（４）（２．５ｍｇ，４．４μｍｏｌ）、ＣｕＣｌ（２．０ｍｇ，２０μｍｏｌ）、およびＫ_２ＣＯ_３（２．５ｍｇ，１９μｍｏｌ）を含む反応容器（Ｂ）へ移送した。

反応容器（Ａ）の内部をＤＭＦ（０．５ｍＬ）でリンスし、その溶液を反応溶液（Ｂ）へ続けて移送した。

得られた混合物を７０℃で５分間加熱した。反応混合物における塩およびパラジウム残留物を、固相抽出、ＣＨ_３ＣＮ：３０ｍＭＣＨ_３ＣＯＯＮＨ_４（３５：６５）溶液１ｍＬで洗浄することによって除去した。

一体化した溶出液を、γ検出器を備えた分取ＨＰＬＣ（移動相，ＣＨ_３ＣＮ：３０ｍＭＣＨ_３ＣＯＯＮＨ_４（３５：６５）；カラム，Nacalai COSMOSIL AR-II C18，１０ｍｍ×２５０ｍｍ，５ｍｍ；ガードカラム，Sumika SUMIPAK Filter PG-ODS；流速，６ｍＬ／分；ＵＶ検出波長，２５４ｎｍ；化合物（１０）の保持時間，１３．５分）へ注入した。

所望のフラクションをフラスコに取り、減圧下で有機溶媒を除去した。所望の^１１Ｃでラベル化した化合物を、ポリソルベート８０（０．０５ｍＬ）、プロピレングリコール（０．３ｍＬ）、および生理食塩水（４ｍＬ）の混合物に溶解させた。

ＨＰＬＣ精製および静脈内投与のための放射性医薬品処方を含めた全ての合成時間は３８分であった。

投与のために作製された化合物（１０）の放射能は、１．５〜２．３ＧＢｑであり、比放射能は５０〜１２０ＧＢｑ／μｍｏｌであった。

化合物（１０）の同定は、ラベル化していないオーセンティックサンプルである化合物（１１）を、γ検出器を備えた分析用ＨＰＬＣ（移動相，ＣＨ_３ＣＮ：３０ｍＭＣＨ_３ＣＯＯＮＨ_４（４０：６０）；カラム，Nacalai COSMOSIL，AR-II C18，４．６ｍｍ×１００ｍｍ；流速，１ｍＬ／分；ＵＶ検出波長，２５４ｎｍ；化合物（１０）の保持時間，４．５分）へ共注入することによって確認した。化学純度および放射化学純度は９５％以上であった。

（III）化合物（１１）（4-{（4-Methylbenzyl）（4H-1,2,4-triazol-4-yl）amino}benzonitrile （cetrozole））の合成
化合物（１０）のコントロールとして、放射標識されていない化合物（１１）を以下のスキームに従って合成した。

アルゴン雰囲気下、化合物（３）（２．００ｇ，１０．８ｍｍｏｌ）、４−メチルベンジルブロミド（Cat. No. 021-03131、和光純薬工業（株）から購入）（２．００ｇ，１０．８ｍｍｏｌ）、および炭酸カリウム（２．９９ｇ，２１．６ｍｍｏｌ）の混合物のアセトニトリル（８０ｍＬ）溶液を室温下で２時間攪拌した。これに、水（２００ｍＬ）を加え、上記混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２（１００ｍＬ×３）により抽出した。有機層を全て混合し、水（３０ｍＬ×２）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、減圧下で濃縮した。

その残留物をカラムクロマトグラフィ（シリカゲル２００ｇ、CH₂Cl₂/EtOAc = 1/1から1/4）により精製し、化合物（１１）（無色固体，１．６０ｇ，５１．２％）を得た。酢酸エチル（６４ｍL）からの再結晶により、無色板状結晶（１．２７ｇ，４０．６％）が得られた。

TLC Rf= 0.30 （CH₂Cl₂/EtOAc = 1/1）
Mp 201-202℃
¹H NMR （300 MHz，DMSO-d₆） δ 2.25 （s，3H，CH₃），4.99 （s，2H，benzylic CH₂），6.70-6.78 （AA’BB’，2H，aromatic），7.06-7.14 （AA’BB’，2H，aromatic），7.14-7.22 （AA’BB’，2H，aromatic），7.70-7.79 （AA’BB’，2H，aromatic），8.76 （br s，2H，triazole）
¹³C NMR （75.5 MHz，DMSO-d₆） δ 20.7，56.9，102.8，113.7 （2C），119.1，128.5 （2C），129.3 （2C），131.2，133.9 （2C），137.4，143.4 （2C），151.6；IR （KBr，cm-1） 548，606，667，741，814，833，858，870，1069，1180，1207，1234，1265，1287，1302，1389，1456，1501，1512，1605，2220，2340，2359，3121
Anal. Calcd. for C₁₇H₁₅N₅: C，70.57；H，5.23；N，24.21. Found: C，70.41；H，5.10；N，24.48
HRMS （FAB⁺/NBA+NaI） m/z 312.1220 （[M+Na]⁺，C₁₇H₁₅N₅Na requires 312.1225）。

（IV）化合物（１２）（4-[{4-（4,4,5,5-Tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl）benzyl}（4H-1,2,4-triazol-4-yl）amino]benzonitrile）の合成
＜方法Ａ＞
化合物（１２）は、以下のスキームに従って合成した。

ここで、化合物（１６）は、以下のスキームに従って合成した。

（ｉ）化合物（１４）（4-（4,4,5,5-Tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl）benzyl alcohol）の合成（非特許文献１４（Filippis, A.; Morin, C.; Thimon, C., Synth. Commun. 2002, 32, 2669-2676）参照）
アルゴン雰囲気下、化合物（１３）（２．３４ｇ，１０．０ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（３０ｍＬ）溶液に、室温でＰｄＣｌ_２（ｄｐｐｆ）・ＣＨ_２Ｃｌ_２（２４５ｍｇ，３００μｍｏｌ），酢酸カリウム（２．９４ｇ，３０．０ｍｍｏｌ）、およびビス（ピナコラート）ジボロン（２．７９ｇ，１１．０ｍｍｏｌ）を順次加え、当該混合物を８５℃で１８時間攪拌した。

当該混合物を室温に冷却後、水（２５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。

有機層を全て混合し、水（１００ｍＬ×３）および食塩水（１００ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。

残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル６０ｇ，n-hexane/EtOAc = 5/1）で精製することによって、化合物（１４）を無色固体として得た。

TLC R_f = 0.41 （n-hexane/EtOAc = 2/1）
¹H NMR （300 MHz，CDCl₃） δ 1.35 （s，12H，4CH₃），4.72 （s，2H，benzylic CH₂），7.34-7.41 （AA’BB’，2H，aromatic），7.78-7.84 （AA’BB’，2H，aromatic）。

（ii）化合物（１５）（4-（4,4,5,5-Tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl）benzyl methanesulfonate）の合成（非特許文献１４参照）
アルゴン雰囲気下、化合物（１４）（３．４８ｇ，１４．９ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（６０ｍＬ）溶液に、０℃で、トリエチルアミン（３．１５ｍＬ，２２．６ｍｍｏｌ）およびメタンスルホニルクロリド（１．４０ｍＬ，１８．１ｍｍｏｌ）を順次加え、当該混合物を０℃で２時間攪拌した。この混合物に対して、水（１５０ｍＬ）を加え、ＣＨ_２Ｃｌ_２（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（７０ｍＬ×３）および食塩水（７０ｍＬ×３）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。

残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル１１０ｇ，n-hexane/EtOAc = 3/1）で精製することによって、化合物（１５）を無色固体として得た。化合物（１５）は、これ以上精製を行わずに次工程に用いた。
TLC 0.41 （n-hexane/EtOAc = 2/1）。

（iii）化合物（１６）（4-（4,4,5,5-Tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl）benzyl bromide）の合成（非特許文献１４参照）
アルゴン雰囲気下、化合物（１５）（３．５５ｇ，１１．４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２５ｍＬ）溶液に、臭化カリウム（２．０３ｇ，１７．１ｍｍｏｌ）を室温で加え、その混合物を室温で１９時間攪拌した。この混合物に対して、水（１５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（１００ｍＬ×３）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。

残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル１００ｇ，n-hexane/EtOAc = 9/1）で精製することによって、化合物（１６）を無色固体として得た。

TLC R_f = 0.73 （n-hexane/EtOAc = 3/1）
¹H NMR （300 MHz，CDCl₃） δ 1.34 （s，12H，4CH₃），4.49 （s，2H，benzylic CH₂），7.36-7.43 （AA’BB’，2H，aromatic），7.75-7.83 （AA’BB’，2H，aromatic）。

（iv）化合物（１２）の合成
アルゴン雰囲気下、化合物（３）（１．３６ｇ，７．３３ｍｍｏｌ）、化合物（１６））（２．６１ｇ，８．７９ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（２．０３ｇ，１４．７ｍｍｏｌ）の混合物のアセトン（５０ｍＬ）溶液を室温で５時間攪拌した。この混合物に対して、水（１５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（５０ｍＬ×１）および食塩水（５０ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。

残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル１１０ｇ，CH₂Cl₂/CH₃OH = 40/1）で精製することによって、化合物（１２）（無色固体，２．０２ｇ，６８．５％）を得た。

TLC R_f = 0.57 （CH₂Cl₂/CH₃OH = 9/1）
Mp 193-194 ℃
¹H NMR （300 MHz，CDCl₃） δ 1.34 （s，12H，4CH₃），4.91 （s，2H，benzylic CH₂），6.63-6.70 （AA’BB’，2H，aromatic），7.18-7.25 （AA’BB’，2H，aromatic），7.55-7.63 （AA’BB’，2H，aromatic），7.75-7.83 （AA’BB’，2H，aromatic），8.11 （s，2H，triazole）
¹³C NMR （67.8 MHz，CDCl₃） δ 24.7 （4C），58.2，83.9 （2C），104.8，113.3 （2C），118.5，127.2 （2C），133.9 （2C），135.5 （2C），136.3，142.5 （2C），150.4 （the carbon adjacent to boron was not observed）
IR （KBr，cm^-1） 546，656，671，733，826，858，912，962，1020，1065，1088，1142，1179，1213，1271，1325，1360，1398，1508，1603，2222，2978，3115，3401
HRMS （ESI⁺） m/z 424.1912 （[M+Na]⁺，C₂₂H₂₄BN₅NaO₂ ⁺requires 424.1915）。

＜方法Ｂ＞
また、化合物（１２）は以下のスキームに示す別の方法によっても合成した。

具体的には、以下のように合成した。

アルゴン雰囲気下、化合物（９）（３２４ｍｇ，９１５μｍｏｌ）のＤＭＳＯ（５．５ｍＬ）溶液に、ＰｄＣｌ_２（ｄｐｐｆ）・ＣＨ_２Ｃｌ_２（２２．５ｍｇ，２７．５μｍｏｌ）、酢酸カリウム（２７０ｍｇ，２．７５ｍｍｏｌ）、およびビス（ピナコラート）ジボロン（２５６ｍｇ，１．０１ｍｍｏｌ）を室温で順次加え、当該混合物を８０℃で２時間攪拌した。当該混合物を室温に冷却後、水（８０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（５０ｍＬ×３）および食塩水（５０ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。

残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル３０ｇ，CH₂Cl₂/CH₃OH = 20/1）で精製することによって、化合物（１２）（薄灰色固体，３３０ｍｇ，８９．９％）を得た。

（Ｖ）化合物（１２）から化合物（１０）の合成

サイクロトロン（製品名；住友CYPRIS HM-12Sサイクロトロン、住友重機械工業社製）を用いて、^１４Ｎ（ｐ，α）^１１Ｃ反応によって、[¹¹C]二酸化炭素を合成し、その後、標識用合成装置（RIKEN original automated radiolabeling system）によって、水素化アルミニウムリチウム、ヨウ化水素酸をこの順で加える処理を行い、[¹¹C]ヨウ化メチルへ変換させた。得られた[¹¹C]ヨウ化メチルは、以下に示す、パラジウム（０）触媒を用いた高速Ｃ-[¹¹C]メチル化反応に用いた。

[¹¹C]ヨウ化メチルを、Ｈｅガス流（３０ｍＬ／分）によって、室温で、化合物（１２）（４．０ｍｇ，１０μｍｏｌ），Ｐｄ_２（ｄｂａ）_３（２．９ｍｇ，２．５μｍｏｌ），P（o-tolyl）₃（４．０ｍｇ，１２．６μｍｏｌ）、およびＫ_２ＣＯ_３（４．０ｍｇ，３０μｍｏｌ）のＤＭＦ（０．５ｍＬ）溶液へ移送した。

得られた混合物を６５℃で２分間加熱した。反応混合物における塩およびパラジウム残留物を、固相抽出、ＣＨ_３ＣＮ：３０ｍＭＣＨ_３ＣＯＯＮＨ_４（３５：６５）溶液１ｍＬで洗浄することによって除去した。

一体化した溶出液を、γ検出器を備えた分取ＨＰＬＣ（移動相，CH₃CN:30 mM CH₃COONH₄ （35:65）；カラム，Nacalai COSMOSIL AR-II C18，10 mm ×250 mm；ガードカラム，Sumika SUMIPAK Filter PG-ODS；流速，6 ｍＬ/min；ＵＶ検出波長，254 nm；化合物（１０）の保持時間，13.5分）へ注入した。所望のフラクションをフラスコに取り、減圧下で有機溶媒を除去した。所望の^１１Ｃでラベル化した化合物を、ポリソルベート８０（０．０５ｍＬ）、プロピレングリコール（０．３ｍＬ）、および生理食塩水（４ｍＬ）の混合物に溶解させた。

ＨＰＬＣ精製および静脈内投与のための放射性医薬品処方を含めた全ての合成時間は３０分であった。投与のために作製された化合物（１０）の放射能は、２．６〜６．２ＧＢｑであり、比放射能は９０〜１１０ＧＢｑ／μｍｏｌであった。

化合物（１０）の同定は、ラベル化していないオーセンティックサンプルである化合物（１１）を、γ検出器を備えた分析用ＨＰＬＣ（移動相，CH₃CN:30 mM CH₃COONH₄ （40:60）；カラム，Nacalai COSMOSIL，AR-II C18，4.6 mm ×100 mm；流速，1 ｍＬ/min；UV検出波長，254 nm；化合物（１０）の保持時間，4.5分）へ共注入することによって確認した。化学純度および放射化学純度は９５％以上であった。

（VI）化合物（２２）（4-{（3-[¹¹C]Methylbenzyl）（4H-1,2,4-triazol-4-yl）amino}benzonitrile）の合成
化合物（２２）は、以下のスキームに従って合成した。

（ｉ）化合物（１９）（3-（Tributylstannyl）benzyl alcohol）の合成（非特許文献１５（Efange, S. M. N.; Michelson, R. H.; Khare, A. B.; Thomas, J. R., J. Med. Chem. 1993, 36, 1754-1760）参照）
アルゴン雰囲気下、化合物（１８）（２．６６ｍＬ，２２．２ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１５０ｍＬ）溶液に、−７８℃でｎ−ブチルリチウム（１．６３Ｍ，３０．０ｍＬ，４８．９ｍｍｏｌ）ｎ−ヘキサン溶液をゆっくりと加えた。反応混合物を−７８℃で３０分間攪拌後、−７８℃でトリブチルスズ（IV）クロリド（１３．５ｍＬ，４９．８ｍｍｏｌ）を加え、室温まで暖めた。１時間攪拌後、反応混合物を減圧下で濃縮した。残留物に対して、水（２００ｍＬ）を加え、ＣＨ_２Ｃｌ_２（８０ｍＬ×３）で抽出した。

有機層を全て混合し、水（１００ｍＬ×３）および食塩水（１００ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル２２０ｇ，n-hexane/EtOAc = 10/1）で精製することによって、化合物（１９）（無色油状物，７．４７ｇ，８４．８％）を得た。

TLC R_f = 0.52 （n-hexane/EtOAc = 4/1），R_f = 0.52 （n-hexane/CH₂Cl₂/EtOAc = 5/2/1）
¹H NMR （300 MHz，CDCl₃） δ 0.86 （t，9H，J = 7.4 Hz，3CH₃），0.93-1.18 （m，6H，3CH₂），1.22-1.44 （m，6H，3CH₂），1.45-1.63 （m，6H，3CH₂），4.67 （s，2H，benzylic CH₂），7.26-7.54 （m，4H，aromatic）。

（ii）化合物（２０）（3-（Tributylstannyl）benzyl methanesulfonate）の合成
アルゴン雰囲気下、化合物（１９）（７．１２ｇ，１７．９ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（３５ｍＬ）溶液に対して、０℃でトリエチルアミン（３．８０ｍＬ，２７．３ｍｍｏｌ）およびメタンスルホニルクロリド（１．６６ｍＬ，２１．５ｍｍｏｌ）を順次加え、当該混合物を０℃で３時間攪拌した。これに、水（１００ｍＬ）を加え、ＣＨ_２Ｃｌ_２（８０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（５０ｍＬ×１）および食塩水（５０ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。

残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル２２０ｇ，n-hexane/EtOAc = 9/1）で精製することによって、化合物（２０）（無色油状物，４．８５ｇ，５６．９％）を得た。

TLC 0.48 （n-hexane/EtOAc = 4/1），R_f= 0.65 （n-hexane/CH₂Cl₂/EtOAc = 5/2/1）
¹H NMR （300 MHz，CDCl₃） δ 0.89 （t，9H，J = 7.3 Hz，3CH₃），0.94-1.20 （m，6H，3CH₂），1.26-1.40 （m，6H，3CH₂），1.46-1.59 （m，6H，3CH₂），2.88 （s，3H，CH₃），5.24 （s，2H，benzylic CH₂），7.29-7.58 （m，4H，aromatic）
¹³C NMR （75.5 MHz，CDCl₃） δ 9.5 （3C，¹J（¹¹⁹Sn-¹³C） = 366.8 Hz，¹J（¹¹⁷Sn-¹³C） = 341.7 Hz），13.6 （3C），27.2 （3C，³J（^119/117Sn-¹³C） = 56.0 Hz），28.9 （3C，²J（^119/117Sn-¹³C） = 20.2 Hz），38.2，72.0，128.2 （³J（^119/117Sn-¹³C） = 39.5 Hz），128.6，132.5 （³J（^119/117Sn-¹³C） = 38.9 Hz），136.8 （²J（^119/117Sn-¹³C） = 30.8 Hz），137.4 （²J（^119/117Sn-¹³C） = 28.7 Hz），143.1
IR （KBr，cm^-1） 507，529，700，783，829，918，935，1175，1356，1464，2851，2870，2926，2957
Anal. Calcd. for C₂₀H₃₆O₃SSn: C，50.54；H，7.63. Found: C，50.32；H，7.28
HRMS （FAB⁺/NBA+NaI） m/z 499.1322 （M+H，C₂₀H₃₆O₃S¹²⁰SnNa requires 499.1305）。

（iii）化合物（２１）（3-（Tributylstannyl）benzyl bromide）の合成
アルゴン雰囲気下、化合物（２０）（２．６６ｍＬ，２２．２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３０ｍＬ）溶液に対して、臭化ナトリウム（１．９３ｇ，１８．８ｍｍｏｌ）を室温で加え、当該混合物を室温で１６時間攪拌した。この混合物に、水（２００ｍＬ）を加え、ジエチルエーテル（８０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（５０ｍＬ×３）および食塩水（５０ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。

残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル１００ｇ，n-hexane/Et₂O = 20/1）で精製することによって、化合物（２１）（無色油状物，４．０３ｇ，９３．３％）を得た。

TLC R_f = 0.68 （n-hexane）
¹H NMR （300 MHz，CDCl₃） δ 0.89 （t，9H，J = 7.4 Hz，3CH₃），0.93-1.19 （m，6H，3CH₂），1.25-1.41 （m，6H，3CH₂），1.43-1.67 （m，6H，3CH₂），4.50 （s，2H，benzylic CH₂），7.26-7.53 （m，4H，aromatic）
¹³C NMR （75.5 MHz，CDCl₃） δ 9.5 （3C，¹J（¹¹⁹Sn-¹³C） = 340.8 Hz，¹J（¹¹⁷Sn-¹³C） = 325.7 Hz），13.6 （3C），27.3 （3C，³J（^119/117Sn-¹³C） = 56.3 Hz），29.0 （3C，²J（^119/117Sn-¹³C） = 20.1 Hz），33.9，128.1 （³J（^119/117Sn-¹³C） = 40.3 Hz），128.6，136.4 （²J（^119/117Sn-¹³C） = 29.6 Hz），136.8，137.1 （³J（^119/117Sn-¹³C） = 38.8 Hz），142.8
IR （KBr，cm^-1） 664，700，1125，1462，2851，2870，2924，2955
Anal. Calcd. for C₁₉H₃₃BrSn: C，49.60；H，7.23. Found: C，49.66；H，6.84。

（iv）化合物（１７）（4-[（4H-1,2,4-Triazol-4-yl）{3-（tributylstannyl）benzyl}amino]benzonitrile）の合成
アルゴン雰囲気下、化合物（３）（５００ｍｇ，２．７０ｍｍｏｌ）、化合物（２１）（１．４９ｇ，３．２４ｍｍｏｌ）、および炭酸カリウム（７４６ｍｇ，５．４０ｍｍｏｌ）の混合物のアセトン（３０ｍＬ）溶液を室温で２１時間攪拌した。当該混合物を減圧下で濃縮した。残留物に水（１００ｍＬ）を加え、ＣＨ_２Ｃｌ_２（７０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（５０ｍＬ×１）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。

残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル６０ｇ，CH₂Cl₂ to CH₂Cl₂/CH₃OH = 40/1）で精製することによって、化合物（１７）（無色固体，１．４６ｇ，９５．８％）を得た。ｎ−ヘキサンによって再結晶することによって無色板状晶が得られた（１．１３ｇ，７４．２％）。

TLC R_f = 0.63 （CH₂Cl₂/EtOAc = 9/1）
Mp 116-117 ℃
¹H NMR （300 MHz，CDCl₃） δ 0.87 （t，9H，J = 7.3 Hz，3CH₃），0.92-1.16 （m，6H，3CH₂），1.23-1.37 （m，6H，3CH₂），1.42-1.56 （m，6H，3CH₂），4.89 （s，2H，benzylic CH₂），6.63-6.71 （AA’BB’，2H，aromatic），7.09 （d，1H，J = 7.1 Hz，aromatic），7.19-7.35 （m，2H，aromotic），7.36-7.53 （d，1H，J = 7.1 Hz，³J（^119/117Sn-¹H） = 36.1 Hz，aromatic），7.55-7.63 （AA’BB’，2H，aromatic），8.08 （s，2H，triazole）
¹³C NMR （67.8 MHz，CDCl₃） δ 9.5 （3C，¹J（¹¹⁹Sn-¹³C） = 342.1 Hz，¹J（¹¹⁷Sn-¹³C） = 326.8 Hz），13.6 （3C），27.2 （3C，³J（^119/117Sn-¹³C） = 56.0 Hz），28.9 （3C，²J（^119/117Sn-¹³C） = 20.2 Hz），58.2，104.7，113.2 （2C），118.5，127.5，128.5 （³J（^119/117Sn-¹³C） = 38.7 Hz），132.8 （³J（^119/117Sn-¹³C） = 38.0 Hz），133.9 （2C），135.6 （²J（^119/117Sn-¹³C） = 30.0 Hz），137.0 （²J（^119/117Sn-¹³C） = 28.5 Hz），142.5 （2C），143.9，150.5
IR （KBr，cm^-1） 704，837，874，1069，1179，1269，1379，1462，1508，1605，2224，2851，2870，2924，2957
Anal. Calcd. for C₂₈H₃₉N₅Sn: C，59.59；H，6.97；N，12.41. Found: C，59.55；H，6.81；N，12.38。

（ｖ）化合物（２２）（4-{（3-[¹¹C]Methylbenzyl）（4H-1,2,4-triazol-4-yl）amino}benzonitrile）の合成
サイクロトロン（製品名；住友CYPRIS HM-12Sサイクロトロン、住友重機械工業社製）を用いて、^１４Ｎ（ｐ，α）^１１Ｃ反応によって、[¹¹C]二酸化炭素を合成し、その後、標識用合成装置（RIKEN original automated radiolabeling system）によって、水素化アルミニウムリチウム、ヨウ化水素酸をこの順で加える処理を行い、[¹¹C]ヨウ化メチルへ変換させた。得られた [¹¹C]ヨウ化メチルは、以下に示す、パラジウム（０）触媒を用いた高速Ｃ-[¹¹C]メチル化反応に用いた。

[¹¹C]ヨウ化メチルを、Ｈｅガス流（３０ｍＬ／分）によって、室温の反応容器（Ａ）中の、Ｐｄ_２（ｄｂａ）_３（２．７ｍｇ，２．４μｍｏｌ）およびP（o-tolyl）₃（３．０ｍｇ，９．５μｍｏｌ）のＤＭＦ（０．３ｍＬ）溶液へ移送した。当該混合物を、化合物（１７）（３．０ｍｇ，５．３ｍｍｏｌ）、ＣｕＣｌ（２．０ｍｇ，２０μｍｏｌ）、およびＫ_２ＣＯ_３（２．４ｍｇ，１８μｍｏｌ）を含む反応容器（Ｂ）へ移送した。反応容器（Ａ）の内部をＤＭＦ（０．５ｍＬ）でリンスし、その溶液を反応溶液（Ｂ）へ続けて移送した。

得られた混合物を７０℃で５分間加熱した。反応混合物における塩およびパラジウム残留物を、固相抽出、ＣＨ_３ＣＮ：３０ｍＭＣＨ_３ＣＯＯＮＨ_４（４０：６０）溶液１ｍＬで洗浄することによって除去した。

一体化した溶出液を、γ検出器を備えた分取ＨＰＬＣ（移動相，CH₃CN:30 mM CH₃COONH₄ （40:60）；カラム，Nacalai COSMOSIL AR-II C18，10 mm × 250 mm；ガードカラム，Nacalai COSMOSIL Cholester 若しくはSumika SUMIPAK Filter PG-ODS；流速，5 ｍＬ/min；UV検出波長，254 nm；化合物（２２）の保持時間，12分）へ注入した。所望のフラクションをフラスコに取り、減圧下で有機溶媒を除去した。

所望の^１１Ｃでラベル化した化合物を、ポリソルベート８０（０．０５ｍＬ）、プロピレングリコール（０．３ｍＬ）、および生理食塩水（４ｍＬ）の混合物に溶解させた。

投与のために作製された化合物（２２）の放射能は、０．４〜４．５ＧＢｑであり、比放射能は３０〜６０ＧＢｑ／μｍｏｌであった。

化合物（２２）の同定は、ラベル化していないオーセンティックサンプルである化合物（２３）を、γ検出器を備えた分析用ＨＰＬＣ（移動相，CH₃CN:30 mM CH₃COONH₄ （40:60）；カラム，Nacalai COSMOSIL，AR-II C18，4.6 mm ×100 mm；流速，1 ｍＬ/min；UV検出波長，254 nm；化合物（２２）の保持時間，4.6分）へ共注入することによって確認した。化学純度および放射化学純度は９５％以上であった。

（VII）化合物（２３）（4-{（3-Methylbenzyl）（4H-1,2,4-triazol-4-yl）amino}benzonitrile）の合成
化合物（２２）のコントロールとして、放射標識されていない化合物（２３）を以下のスキームに従って合成した。

アルゴン雰囲気下、化合物（３）（３００ｍｇ，１．６２ｍｍｏｌ）、３−メチルベンジルブロミド（２６５μＬ，１．９６ｍｍｏｌ）、および炭酸カリウム（４４８ｍｇ，３．２４ｍｍｏｌ）の混合物のアセトン（１５ｍＬ）溶液を室温で５時間攪拌した。当該混合物に水（５０ｍＬ）を加え、ＣＨ_２Ｃｌ_２（５０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（５０ｍＬ×１）および食塩水（５０ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。

残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル３０ｇ，CH₂Cl₂/CH₃OH = 9/1）で精製することによって、化合物（２３）（無色固体，３７３ｍｇ，７９．６％）を得た。酢酸エチルによって再結晶することによって無色板状晶が得られた（２９３ｍｇ，６２．５％）。

TLC R_f = 0.41 （CH₂Cl₂/CH₃OH = 9/1）
Mp 185-186 ℃
¹H NMR （300 MHz，CDCl₃） δ 2.32 （s，3H，CH₃），4.86 （s，2H，benzylic CH₂），6.63-6.72 （AA’BB’，2H，aromatic），6.95-7.15 （m，2H，aromatic），7.17 （d，1H，J = 7.5 Hz，aromatic），7.23 （d，1H，J = 7.5 Hz，aromatic），7.55-7.64 （AA’BB’，2H，aromatic），8.10 （s，2H，triazole）
¹³C NMR （67.8 MHz，DMSO-d₆） δ 20.9，57.2，102.7，113.6 （2C），119.1，125.4，128.5，128.7，128.8，133.9 （2C），134.7，137.9，143.4 （2C），151.6
IR （KBr，cm^-1） 513，546，615，648，669，704，737，766，791，827，860，949，1007，1040，1069，1140，1182，1213，1300，1321，1391，1425，1460，1510，1605，1692，2218，2868，2918，3011，3051，3100，3121
Anal. Calcd. for C₁₇H₁₅N₅: C，70.57；H，5.23；N，24.21. Found: C，70.33；H，5.30；N，23.94。

（VIII）化合物（２４）（4-{（3-Bromobenzyl）（4H-1,2,4-triazol-4-yl）amino}benzonitrile）の合成（非特許文献３参照）

アルゴン雰囲気下、化合物（３）（３００ｍｇ，１．６２ｍｍｏｌ）、３−ブロモベンジルブロミド（４８５ｍｇ，１．９４ｍｍｏｌ）、および炭酸カリウム（４４８ｍｇ，３．２４ｍｍｏｌ）の混合物のアセトン（１５ｍＬ）溶液を室温で５時間攪拌した。当該混合物に水（５０ｍＬ）を加え、ＣＨ_２Ｃｌ_２（５０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（５０ｍＬ×１）および食塩水（５０ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル２０ｇ，CH₂Cl₂/CH₃OH = 40/1）で精製することによって、化合物（２４）（無色固体，５１１ｍｇ，８９．３％）を得た。酢酸エチル（１３ｍＬ）およびｎ−ヘキサン（７ｍＬ）によって再結晶することによって無色板状晶が得られた（３８０ｍｇ，６６．４％）。

TLC R_f = 0.53 （CH₂Cl₂/CH₃OH = 9/1）
¹H NMR （300 MHz，CDCl₃） δ 4.88 （s，2H，benzylic CH₂），6.62-6.70 （AA’BB’，2H，aromatic），7.14 （d，1H，J = 7.9 Hz，aromatic），7.23 （dd，1H，J = 7.9，7.9 Hz，aromotic），7.43 （s，1H，aromatic），7.51 （d，1H，J = 7.9 Hz，aromotic），7.57-7.65 （AA’BB’，2H，aromatic），8.18 （s，2H，triazole）
¹³C NMR （67.8 MHz，DMSO-d₆） δ 56.6，103.0，113.7 （2C），119.0，121.9，127.4，130.8，131.0，131.1，133.9 （2C），137.6，143.3 （2C），151.3
IR （KBr，cm^-1） 546，615，664，700，735，787，826，997，1067，1138，1179，1206，1273，1298，1331，1395，1429，1474，1508，1572，1605，2222，3117
Anal. Calcd. for C₁₆H₁₂N₅Br: C，54.25；H，3.41；N，19.77. Found: C，54.25；H，3.51；N，19.84。

（IX）化合物（２５）（4-{（4-Fluoromethylbenzyl）（4H-1,2,4-triazol-4-yl）amino}benzonitrile）の合成

尚、化合物（２８）は、以下のスキームに従って合成した。

（ｉ）化合物（２７）（4-Bromomethylbenzyl alcohol）の合成（非特許文献１６（Vassiliou, S,; Xeilari, M.; Yiotakis, A,; Grembecka, J.; Pawelczak, M.; Kafarskib, P.; Muchab, A., Bioorg. Med. Chem. 2007, 15, 3187-3200）参照）
アルゴン雰囲気下、化合物（２６）（５．００ｇ，３６．２ｍｍｏｌ）および四臭化炭素（１８．０ｇ，５４．３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５０ｍＬ）溶液へ、トリフェニルホスフィン（１４．２ｇ，５４．３ｍｍｏｌ）を０℃で加え、室温まで暖めた。１時間攪拌後、当該混合物に水（３００ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（１００ｍＬ×３）および食塩水（１００ｍＬ×３）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。

残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル２２０ｇ，n-hexane/EtOAc = 4/1）で精製することによって、化合物（２７）（無色固体，３．２８ｇ，４５．１％）を得た。

TLC R_f = 0.25 （n-hexane/EtOAc = 3/1）
¹H NMR （270 MHz，CDCl₃） δ 1.78 （br s，1H，OH），4.50 （s，2H，benzylic CH₂），4.69 （s，2H，benzylic CH₂），7.30-7.36 （AA’BB’，2H，aromatic），7.37-7.45 （AA’BB’，2H，aromatic）。

（ii）化合物（２８）（4-Fluoromethylbenzyl bromide）の合成（非特許文献１７（Ichikawa, J.; Sugimoto, K.; Sonoda, T.; Kobayashi, H., Chem. Lett. 1987, 10, 1985-1988）参照）
アルゴン雰囲気下、化合物（２７）（５００ｍｇ，２．４９ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（１０ｍＬ）溶液に、（ジエチルアミノ）サルファートリフルオリド（ＤＡＳＴ）（６６０μＬ，５．０４ｍｍｏｌ）を０℃で加え、０℃で１時間攪拌した。当該混合物にＮａＨＣＯ_３飽和水溶液を加え、ＣＨ_２Ｃｌ_２（５０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（５０ｍＬ×３）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。

残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル３０ｇ，n-hexane/Et₂O = 50/1）で精製することによって、化合物（２８）（黄白色固体，３５２ｍｇ，６９．７％）を得た。

TLC R_f = 0.52 （n-hexane/EtOAc = 6/1）
¹H NMR （300 MHz，CDCl₃） δ 4.50 （s，2H，benzylic CH₂），5.38 （d，2H，J_H-F = 47.6 Hz，benzylic CH₂），7.33-7.40 （AA’BB’，2H，aromatic），7.41-7.47 （AA’BB’，2H，aromatic）。

（iii）化合物（２５）（4-{（4-Fluoromethylbenzyl）（4H-1,2,4-triazol-4-yl）amino}benzonitrile）の合成
アルゴン雰囲気下、化合物（３）（１９１ｍｇ，１．０３ｍｍｏｌ），化合物（２８）（２５１ｍｇ，１．２４ｍｍｏｌ），および炭酸カリウム（２８５ｍｇ，２．０６ｍｍｏｌ）の混合物のアセトン（１０ｍＬ）溶液を室温で４時間攪拌した。当該混合物に水（５０ｍＬ）を加え、ＣＨ_２Ｃｌ_２（３０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（３０ｍＬ×１）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。

残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル３０ｇ，CH₂Cl₂/CH₃OH = 50/1）で精製することによって、化合物（２５）（淡黄色固体，２６４ｍｇ，８３．３％）を得た。

TLC R_f = 0.54 （CH₂Cl₂/CH₃OH = 9/1）
Mp 158-159 ℃
¹H NMR （300 MHz，CDCl₃） δ 4.92 （s，2H，benzylic CH₂），5.38 （d，2H，J_H-F = 47.4 Hz，benzylic CH₂），6.63-6.73 （AA’BB’，2H，aromatic），7.20-7.30 （AA’BB’，2H，aromatic），7.33-7.43 （AA’BB’，2H，aromatic），7.55-7.65 （AA’BB’，2H，aromatic），8.13 （s，2H，triazole）
¹³C NMR （67.8 MHz，DMSO-d₆） δ 57.0，83.8 （d，¹J_C-F = 162.0 Hz），102.9，113.7 （2C），119.0，128.1 （2C，d，³J_C-F = 5.6 Hz），128.6 （2C），133.9 （2C），135.3 （d，⁵J_C-F = 3.3 Hz），136.0 （d，²J_C-F = 16.2 Hz），143.3 （2C），151.5
¹⁹F NMR （282 MHz，CDCl₃） δ-47.9 （t，J_F-H = 47.4 Hz）
IR （KBr，cm^-1） 546，669，735，826，951，1001，1067，1179，1219，1298，1333，1379，1423，1460，1510，1603，2222，3117
Anal. Calcd. for C₁₇H₁₄N₅F: C，66.44；H，4.59；N，22.79. Found: C，66.51；H，4.79；N，22.69。

（Ｘ）化合物３３（4-{（4-[¹¹C]Methylbenzyl）（4H-1,2,4-triazol-4-yl）amino}nitrobenzene）の合成

（ｉ）化合物３２（4-[（4H-1,2,4-Triazol-4-yl）{4-（tributylstannyl）benzyl}amino]nitrobenzene）の合成
アルゴン雰囲気下、化合物（３１）（４４９ｍｇ，２．１９ｍｍｏｌ）、化合物（８）（１．２１ｇ，２．６３ｍｍｏｌ），および炭酸カリウム（６０５ｍｇ，４．３８ｍｍｏｌ）の混合物のアセトン（２０ｍＬ）溶液を室温で１８時間攪拌した。当該混合物に水（１００ｍＬ）を加え、酢酸エチル（８０ｍＬ×３）で抽出した。

有機層を全て混合し、水（５０ｍＬ×１）および食塩水（５０ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。

残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル６０ｇ，n-hexane/EtOAc = 1/1）で精製することによって、化合物（３２）（薄茶色固体，７１８ｍｇ，５６．１％）を得た。酢酸エチル（３ｍＬ）およびｎ−ヘキサン（３０ｍＬ）での再結晶によって淡黄色板状晶が得られた（５３４ｍｇ，４１．８％）。

TLC R_f = 0.43 （n-hexane/EtOAc = 1/1）
Mp 112-113 ℃
¹H NMR （300 MHz，CDCl₃） δ 0.88 （t，9H，J = 7.2 Hz，3CH₃），0.94-1.19 （m，6H，3CH₂），1.24-1.40 （m，6H，3CH₂），1.41-1.63 （m，6H，3CH₂），4.94 （s，2H，benzylic CH₂），6.61-6.72 （AA’BB’，2H，aromatic），7.11-7.21 （AA’BB’，2H，aromatic），7.36-7.55 （AA’BB’，2H，³J（^119/117Sn-¹H） = 36.0 Hz，aromatic），8.14 （s，2H，triazole），8.16-8.22 （AA’BB’，2H，aromatic）
¹³C NMR （67.8 MHz，CDCl₃） δ 9.6 （3C，¹J（¹¹⁹Sn-¹³C） = 341.9 Hz，¹J（¹¹⁷Sn-¹³C） = 327.4 Hz），13.6 （3C），27.2 （3C，³J（^119/117Sn-¹³C） = 56.5 Hz），28.9 （3C，²J（^119/117Sn-¹³C） = 20.1 Hz），58.3，112.3 （2C），126.0 （2C），127.2 （2C，³J（^119/117Sn-¹³C） = 39.1 Hz），132.8，137.3 （2C，²J（^119/117Sn-¹³C） = 30.8 Hz），141.7，142.6 （2C），143.8，151.9
IR （KBr，cm^-1） 596，617，637，665，691，750，837，860，997，1016，1065，1123，1132，1196，1221，1263，1339，1375，1395，1460，1501，1595，2851，2924，3117
Anal. Calcd. for C₂₇H₃₉N₅O₂Sn: C，55.50；H，6.73；N，11.99. Found: C，55.48；H，6.36；N，11.95。

（ii）化合物３３（4-{（4-[¹¹C]Methylbenzyl）（4H-1,2,4-triazol-4-yl）amino}nitrobenzene）の合成
サイクロトロン（製品名；住友CYPRIS HM-12Sサイクロトロン、住友重機械工業社製）を用いて、^１４Ｎ（ｐ，α）^１１Ｃ反応によって、[¹¹C]二酸化炭素を合成し、その後、標識用合成装置（RIKEN original automated radiolabeling system）によって、水素化アルミニウムリチウム、ヨウ化水素酸をこの順で加える処理を行い、[¹¹C]ヨウ化メチルへ変換させた。得られた [¹¹C]ヨウ化メチルは、以下に示す、パラジウム（０）触媒を用いた高速Ｃ-[¹¹C]メチル化反応に用いた。

[¹¹C]ヨウ化メチルを、Ｈｅガス流（３０ｍＬ／分）によって、室温の反応容器（Ａ）中の、Ｐｄ_２（ｄｂａ）_３（２．０ｍｇ，１．８μｍｏｌ）およびP（o-tolyl）₃（３．０ｍｇ，９．５μｍｏｌ）のＤＭＦ（０．３ｍＬ）溶液へ移送した。当該混合物を、化合物（３２）（３．０ｍｇ，５．１μｍｏｌ）、ＣｕＣｌ（２．０ｍｇ，２０μｍｏｌ）、およびＫ_２ＣＯ_３（２．４ｍｇ，１８μｍｏｌ）を含む反応容器（Ｂ）へ移送した。反応容器（Ａ）の内部をＤＭＦ（０．５ｍＬ）でリンスし、その溶液を反応溶液（Ｂ）へ続けて移送した。

一体化した溶出液を、γ検出器を備えた分取ＨＰＬＣ（移動相，CH₃CN:30 mM CH₃COONH₄ （40:60）；カラム，Nacalai COSMOSIL AR-II C18，10 mm × 250 mm；ガードカラム，Nacalai COSMOSIL Cholester 若しくはSumika SUMIPAK Filter PG-ODS；流速，6 ｍＬ/min；UV検出波長，225 nm；化合物（３３）の保持時間，１２分）へ注入した。所望のフラクションをフラスコに取り、減圧下で有機溶媒を除去した。

ＨＰＬＣ精製および静脈内投与のための放射性医薬品処方を含めた全ての合成時間は３８分であった。投与のために作製された化合物（３３）の放射能は、０．５〜２．６ＧＢｑであり、比放射能は２０〜４４ＧＢｑ／μｍｏｌであった。

化合物（３３）の同定は、ラベル化していないオーセンティックサンプルである化合物（３４）を、γ検出器を備えた分析用ＨＰＬＣ（移動相，CH₃CN:30 mM CH₃COONH₄ （40:60）；カラム，Nacalai COSMOSIL，AR-II C18，4.6 mm ×100 mm；流速，1 ｍＬ/min；UV検出波長，254 nm；化合物（３３）の保持時間，6.1分）へ共注入することによって確認した。化学純度および放射化学純度は９５％以上であった。

（XI）化合物（３４）（4-{（4-Methylbenzyl）（4H-1,2,4-triazol-4-yl）amino}nitrobenzene）の合成（非特許文献３参照）
化合物（３３）のコントロールとして、放射標識されていない化合物（３４）を以下のスキームに従って合成した。

アルゴン雰囲気下、化合物（３１）（５００ｍｇ，２．４４ｍｍｏｌ），４−メチルベンジルブロミド（５４２ｍｇ，２．９３ｍｍｏｌ），および炭酸カリウム（６７４ｍｇ，４．８８ｍｍｏｌ）の混合物のアセトン（１５ｍＬ）溶液を室温で２２時間攪拌した。当該混合物に水（１００ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（５０ｍＬ×１）および食塩水（５０ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。

残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル６０ｇ，n-hexane/EtOAc = 1/2）で精製することによって、化合物（３４）（薄茶色固体，３４０ｍｇ，４５．１％）を得た。酢酸エチル（６０ｍＬ）およびｎ−ヘキサン（３０ｍＬ）によって再結晶することによって淡黄色板状晶が得られた（２５４ｍｇ，３３．７％）。

TLC R_f = 0.48 （n-hexane/EtOAc = 1/4）
¹H NMR （300 MHz，CDCl₃） δ 2.35 （s，3H，CH₃），4.91 （s，2H，benzylic CH₂），6.63-6.73 （AA’BB’，2H，aromatic），7.05-7.12 （AA’BB’，2H，aromatic），7.13-7.20 （AA’BB’，2H，aromatic），8.10 （s，2H，triazole），8.15-8.20 （AA’BB’，2H，aromatic）
¹³C NMR （75.5 MHz，DMSO-d₆） δ 20.7，57.0，113.0 （2C），125.8 （2C），128.5 （2C），129.3 （2C），131.4，137.4，140.6，143.3 （2C），153.1
IR （KBr，cm^-1） 665，748，818，835，851，870，1063，1111，1188，1211，1223，1288，1335，1395，1495，1595，3067，3123
Anal. Calcd. for C₁₆H₁₅N₅O₂: C，62.13；H，4.89；N，22.64. Found: C，62.21；H，4.88；N，22.68。

（XII）化合物３５（4-{（4-Bromobenzyl）（4H-1,2,4-triazol-4-yl）amino}nitrobenzene）の合成

アルゴン雰囲気下、化合物（３１）（５００ｍｇ，２．４４ｍｍｏｌ）、４−ブロモベンジルブロミド（７３２ｍｇ，２．９３ｍｍｏｌ）、および炭酸カリウム（６７４ｍｇ，４．８８ｍｍｏｌ）の混合物のアセトン（１５ｍＬ）溶液を室温で２２時間攪拌した。当該混合物に水（１００ｍＬ）を加え、酢酸エチル（８０ｍＬ×３）で抽出した。

残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル６０ｇ，n-hexane/EtOAc = 1/2）で精製することによって、化合物（３５）（茶色固体，１６０ｍｇ，１７．５％）を得た。酢酸エチル（３０ｍＬ）およびｎ−ヘキサン（１５ｍＬ）によって再結晶することによって茶色板状晶が得られた（８５．５ｍｇ，９．４％）。

TLC R_f = 0.32 （n-hexane/EtOAc = 1/4）
¹H NMR （300 MHz，CDCl₃） δ 4.91 （s，2H，benzylic CH₂），6.63-6.71 （AA’BB’，2H，aromatic），7.07-7.15 （AA’BB’，2H，aromatic），7.48-7.55 （AA’BB’，2H，aromatic），8.15 （s，2H，triazole），8.17-8.25 （AA’BB’，2H，aromatic）
¹³C NMR （67.8 MHz，DMSO-d₆） δ 56.6，113.0 （2C），121.4，125.8 （2C），130.6 （2C），131.6 （2C），134.0，140.7，143.3 （2C），152.9
IR （KBr，cm^-1） 600，665，735，750，818，849，885，908，1015，1063，1111，1223，1277，1341，1503，1591，3125，3429
Anal. Calcd. for C₁₅H₁₂N₅BrO₂: C，48.15；H，3.23；N，18.72. Found: C，48.24；H，3.35；N，18.56。

（XIII）化合物（３９）（4-{（4-[¹¹C]Methylbenzyl）（1H-1,2,4-triazol-1-yl）amino}benzonitrile）の合成

（ｉ）化合物３８（4-[（1H-1,2,4-Triazol-1-yl）{4-（tributylstannyl）benzyl}amino]benzonitrile）の合成
アルゴン雰囲気下、化合物（３７）（３００ｍｇ，１．６２ｍｍｏｌ）、化合物（８）（８９３ｍｇ，１．９４ｍｍｏｌ）、および炭酸カリウム（４４８ｍｇ，３．２４ｍｍｏｌ）の混合物のアセトン（１５ｍＬ）溶液を室温で２１時間攪拌した。当該混合物に水（５０ｍＬ）を加え、ＣＨ_２Ｃｌ_２（３０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（３０ｍＬ×１）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。

残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル６０ｇ，CH₂Cl₂ to CH₂Cl₂/EtOAc = 4/1）で精製することによって、化合物（３８）（無色油状物，８９１ｍｇ，９７．５％）を得た。

TLC R_f = 0.63 （CH₂Cl₂/EtOAc = 9/1）
¹H NMR （300 MHz，CDCl₃） δ 0.88 （t，9H，J = 7.3 Hz，3CH₃），0.92-1.18 （m，6H，3CH₂），1.23-1.39 （m，6H，3CH₂），1.45-1.56 （m，6H，3CH₂），4.89 （s，2H，benzylic CH₂），6.64-6.72 （AA’BB’，2H，aromatic），7.16-7.23 （AA’BB’，2H，aromatic），7.33-7.51 （AA’BB’，2H，³J（^119/117Sn-¹H） = 36.9 Hz，aromatic），7.52-7.61 （AA’BB’，2H，aromatic），7.86 （s，1H，triazole），8.03 （s，1H，triazole）
¹³C NMR （67.8 MHz，CDCl₃） δ 9.5 （3C，¹J（¹¹⁹Sn-¹³C） = 341.4 Hz，¹J（¹¹⁷Sn-¹³C） = 326.3 Hz），13.6 （3C），27.2 （3C，³J（^119/117Sn-¹³C） = 55.8 Hz），28.9 （3C，²J（^119/117Sn-¹³C） = 20.6 Hz），58.2，105.2，114.7 （2C），118.7，127.5 （2C，³J（^119/117Sn-¹³C） = 39.6 Hz），133.5，133.6 （2C），136.9 （2C，²J（^119/117Sn-¹³C） = 30.2 Hz），142.8，143.9，151.3，151.4
IR （KBr，cm^-1） 669，826，986，1130，1279，1273，1375，1454，1508，1605，2224，2851，2870，2924，2955
Anal. Calcd. for C₂₈H₃₉N₅Sn: C，59.59；H，6.97；N，12.41. Found: C，59.41；H，6.86；N，12.38。

（ii）化合物３９（4-{（4-[¹¹C]Methylbenzyl）（1H-1,2,4-triazol-1-yl）amino}benzonitrile）の合成
サイクロトロン（製品名；住友CYPRIS HM-12Sサイクロトロン、住友重機械工業社製）を用いて、^１４Ｎ（ｐ，α）^１１Ｃ反応によって、[¹¹C]二酸化炭素を合成し、その後、標識用合成装置（RIKEN original automated radiolabeling system）によって、水素化アルミニウムリチウム、ヨウ化水素酸をこの順で加える処理を行い、[¹¹C]ヨウ化メチルへ変換させた。得られた [¹¹C]ヨウ化メチルは、以下に示す、パラジウム（０）触媒を用いた高速Ｃ-[¹¹C]メチル化反応に用いた。

[¹¹C]ヨウ化メチルを、Ｈｅガス流（３０ｍＬ／分）によって、室温の反応容器（Ａ）中の、Ｐｄ_２（ｄｂａ）_３（２．７ｍｇ，２．４μｍｏｌ）およびP（o-tolyl）₃（３．０ｍｇ，９．５μｍｏｌ）のＤＭＦ（０．３ｍＬ）溶液へ移送した。当該混合物を、化合物（３８）（３．０ｍｇ，５．３μｍｏｌ）、ＣｕＣｌ（２．０ｍｇ，２０μｍｏｌ）、およびＫ_２ＣＯ_３（２．４ｍｇ，１８μｍｏｌ）を含む反応容器（Ｂ）へ移送した。反応容器（Ａ）の内部をＤＭＦ（０．５ｍＬ）でリンスし、その溶液を反応溶液（Ｂ）へ続けて移送した。

得られた混合物を７０℃で５分間加熱した。反応混合物における塩およびパラジウム残留物を、固相抽出、ＣＨ_３ＣＮ：３０ｍＭＣＨ_３ＣＯＯＮＨ_４（５０：５０）溶液１ｍＬで洗浄することによって除去した。

一体化した溶出液を、γ検出器を備えた分取ＨＰＬＣ（移動相，CH₃CN:30 mM CH₃COONH₄ （50:50）；カラム，Nacalai COSMOSIL AR-II C18，10 mm × 250 mm；ガードカラム，Nacalai COSMOSIL Cholester 若しくはSumika SUMIPAK Filter PG-ODS；流速，5 ｍＬ/min；UV検出波長，254 nm；化合物（３９）の保持時間，13.２分）へ注入した。所望のフラクションをフラスコに取り、減圧下で有機溶媒を除去した。

ＨＰＬＣ精製および静脈内投与のための放射性医薬品処方を含めた全ての合成時間は３８分であった。投与のために作製された化合物（３９）の放射能は、０．６〜２．８ＧＢｑであり、比放射能は５０〜１１６ＧＢｑ／μｍｏｌであった。

化合物（３９）の同定は、ラベル化していないオーセンティックサンプルである化合物（３８）を、γ検出器を備えた分析用ＨＰＬＣ（移動相，CH₃CN:30 mM CH₃COONH₄ （５０：５０）；カラム，Nacalai COSMOSIL，AR-II C18，4.6 mm × 100 mm；流速，1 ｍＬ/min；UV検出波長，254 nm；化合物（３９）の保持時間，4.5分）へ共注入することによって確認した。化学純度および放射化学純度は９５％以上であった。

（XIV）化合物４０（4-{（4-Methylbenzyl）（1H-1,2,4-triazol-1-yl）amino}benzonitrile）の合成（非特許文献４参照）
化合物（３９）のコントロールとして、放射標識されていない化合物（４０）を以下のスキームに従って合成した。

アルゴン雰囲気下、化合物（３７）（３００ｍｇ，１．６２ｍｍｏｌ）、４−メチルベンジルブロミド（３５９ｍｇ，１．９４ｍｍｏｌ）、および炭酸カリウム（４４８ｍｇ，３．２４ｍｍｏｌ）の混合物のアセトン（１５ｍＬ）溶液を室温で２０時間攪拌した。当該混合物を減圧下で濃縮した後、水（５０ｍＬ）を加え、ＣＨ_２Ｃｌ_２（３０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（３０ｍＬ×１）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。

残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル３０ｇ，CH₂Cl₂ to CH₂Cl₂/EtOAc = 4/1）で精製することによって、化合物（４０）（無色固体，４４８ｍｇ，９５．６％）を得た。酢酸エチル（８ｍＬ）およびｎ−ヘキサン（３２ｍＬ）での再結晶によって無色板状晶が得られた（３９５ｍｇ，８４．３％）。

TLC R_f = 0.46 （CH₂Cl₂/CH₃OH = 9/1）
¹H NMR （270 MHz，DMSO-d₆） δ 2.25 （s，3H，CH₃），4.96 （s，2H，benzylic CH₂），6.68-6.81 （AA’BB’，2H，aromatic），7.04-7.16 （AA’BB’，2H，aromatic），7.17-7.27 （AA’BB’，2H，aromatic），7.66-7.81 （AA’BB’，2H，aromatic），8.14 （s，1H，triazole），8.58 （s，1H，triazole）
¹³C NMR （67.8 MHz，DMSO-d₆） δ 20.7，56.7，103.3，114.6 （2C），119.0，128.4 （2C），129.1 （2C），131.7，133.7 （2C），137.2，145.0，151.0，151.4
IR （KBr，cm^-1） 548，617，669，719，827，943，988，1022，1130，1179，1204，1229，1275，1304，1333，1350，1368，1420，1450，1510，1605，2222，2864，2920，3049，3123
Anal. Calcd. for C₁₇H₁₅N₅: C，70.57；H，5.23；N，24.21. Found: C，70.76；H，5.20；N，24.29。

（XV）化合物４１（4-{（4-Bromobenzyl）（1H-1,2,4-triazol-1-yl）amino}benzonitrile）の合成（非特許文献４参照）

アルゴン雰囲気下、化合物（３７）（３００ｍｇ，１．６２ｍｍｏｌ）、４−ブロモベンジルブロミド（４８５ｍｇ，１．９４ｍｍｏｌ）、および炭酸カリウム（４４８ｍｇ，３．２４ｍｍｏｌ）の混合物のアセトン（１５ｍＬ）溶液を室温で２０．５時間攪拌した。当該混合物を減圧下で濃縮した後、水（５０ｍＬ）を加え、ＣＨ_２Ｃｌ_２（３０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（３０ｍＬ×１）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。

残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル６０ｇ，CH₂Cl₂ to CH₂Cl₂/EtOAc = 4/1）で精製することによって、化合物（４１）（無色固体，５７５ｍｇ，quant.）を得た。酢酸エチル（１０ｍＬ）およびｎ−ヘキサン（３０ｍＬ）での再結晶によって無色板状晶が得られた（４５８ｍｇ，７９．８％）。

TLC R_f = 0.48 （CH₂Cl₂/EtOAc = 9/1）
¹H NMR （300 MHz，CDCl₃） δ 4.87 （s，2H，benzylic CH₂），6.64-6.75 （AA’BB’，2H，aromatic），7.09-7.22 （AA’BB’，2H，aromatic），7.41-7.52 （AA’BB’，2H，aromatic），7.53-7.65 （AA’BB’，2H，aromatic），7.87 （s，1H，triazole），8.03 （s，1H，triazole）
¹³C NMR （67.8 MHz，DMSO-d₆） δ 56.2，103.5，114.6 （2C），119.0，121.1，130.7 （2C），131.4 （2C），133.8 （2C），134.4，145.0，151.1，151.2
IR （KBr，cm^-1） 509，548，615，669，735，827，943，986，1013，1070，1130，1179，1204，1227，1275，1333，1373，1406，1445，1508，1605，1767，2222，3121
Anal. Calcd. for C₁₆H₁₂N₅Br: C，54.25；H，3.41；N，19.77. Found: C，54.28；H，3.40；N，19.96。

〔化合物の評価〕
（Ｉ）ＰＥＴ測定
（ｉ）化合物（１０）について
オスのアカゲザルを用いてＰＥＴ測定を行った。具体的には、アカゲザルをケタラール（１０ｍｇ／ｋｇ）で沈静させ、脚部にＲＩ投与用の静脈カテーテルを設置した。その後、プロポフォール（１０ｍｇ／ｋｇ／ｈ）で持続麻酔を行い、ＰＥＴスキャナに保定した。

ＰＥＴ測定では、３０分間のトランスミッションスキャン後、化合物（１０）（３３ＭＢｑ／ｋｇ）を静脈より注入し９０分間スキャンを行った。画像再構成後、小脳を参照領域として結合能（Binding Potential:BP）の画像が構成された。この場合の結合能とは、結合速度定数を解離速度定数で割った値である。

なお、比較のために、化合物（１０）の代わりに、[¹¹C]vorozole（〔背景技術〕における非特許文献１，２参照）を用いて上記と同様の操作を別途行った。これらの結果を図２〜４に示す。

なお、図２および図３において、「coronal」は、前額（冠状）断面を意味し、「transaxial」は水平断面を意味する。

図２は、本発明に係る化合物（１０）と、従来技術に係る[¹¹C]vorozole（ＶＯＲ）とを用いた場合における扁桃体の結合能（ＢＰ）画像をそれぞれ示す図面である。なお、図２における矢印は扁桃体を示す。

図２から明らかなように、本発明に係る化合物（１０）を用いた場合では、従来技術に係る[¹¹C]vorozole（ＶＯＲ）を用いた場合と同様に、扁桃体において特異的な結合を示した。しかも、本発明に係る化合物（１０）を用いた場合では、従来技術に係る[¹¹C]vorozole（ＶＯＲ）を用いた場合と比べて標識化合物の大脳皮質等への非特異的結合が抑制されていた。

図３は、本発明に係る化合物（１０）と、従来技術に係る標識化合物（ＶＯＲ）とを用いた場合における側坐核の結合能（ＢＰ）画像をそれぞれ示す図面である。なお、図３における矢印は側坐核を示す。

図３から明らかなように、側坐核においても同様の挙動を示した。

また、図４は、小脳、扁桃体、視床下部、側坐核のＰＥＴ測定における、時間経過によるＳＵＶ（standardized uptake value）の変化を示すグラフであり、（ａ）は従来技術に係る[¹¹C]vorozole（ＶＯＲ）を用いた場合を示し、（ｂ）は本発明に係る化合物（１０）を用いた場合を示す。ＳＵＶは、組織１ｍｌあたりの放射能濃度を体重１ｇあたりの放射能濃度で割った値、つまり、
ＳＵＶ＝組織１ｍｌあたりの放射能濃度／体重１ｇあたりの放射能濃度
で表される値である。

なお、図４中、小脳、扁桃体、視床下部、および側坐核は、それぞれ「ＣＲＢ」、「Ａｍｙ」、「ＨＴ」、および「Ａｃｂ」と示す。図４に示すように、従来技術に係る[¹¹C]vorozole（ＶＯＲ）を用いた場合では、スキャンの後半において、時間の経過と共にＳＵＶの値はフラット若しくは若干増加しており、代謝物の脳内への再取り込みが起こっている可能性を示唆している。

一方、本発明に係る化合物（１０）を用いた場合では、スキャンの後半において、時間の経過と共にＳＵＶが減少しており、代謝物の再取り込みの可能性は低いと考えられる。従って、本発明に係る化合物（１０）を用いれば、より高い精度で脳内アロマテースを定量することができると考えられる。

標識された代謝物の再取り込みについて確認するために、イソフルレン麻酔下のオスラットに化合物（１０）を尾静脈より注射し、その５、１０、２０分後にそれぞれ血液を腹部大静脈よりサンプリングした後、脳を取り出しホモジナイズした。血液と脳ホモジネートにアセトニトリルを加え遠心し、抽出物をＨＰＬＣにかけて標識された代謝物を測定した。

血液中における親化合物の含有率を図８に、脳内における標識された代謝物の含有率を図９にそれぞれ示す。

尚、図８におけるＭｏｎｋｅｙのデータは、ＰＥＴ撮像と並行して静脈血をサンプリングして遠心をかけ、血漿にアセトニトリルを加え遠心し、抽出物をＨＰＬＣにかけて血漿中の親化合物を測定することによって求めた。

その結果、図９に示すように、ＶＯＲは、標識された代謝物が脳内に再取り込みされていたが、本発明に係る化合物（１０）ではその現象は認められなかった。

（ii）化合物（２２）、化合物（３３）、化合物（３９）について
化合物（１０）の代わりに、化合物（２２）、化合物（３３）、および化合物（３９）をそれぞれ用いたこと以外は、上記と同様にＰＥＴ測定を行った。これらの結果を図１０〜１３に示す。

図１０から明らかなように、本発明に係る化合物（２２）（３３）（３９）を用いた場合では、化合物（１０）を用いた場合と同様に、扁桃体において特異的な結合を示した。

また、図１１〜１３に示すように、化合物（１０）を用いた場合と同様に、スキャンの後半において、時間の経過と共にＳＵＶが減少しており、代謝物の再取り込みの可能性は低いと考えられる。従って、本発明に係る化合物（２２）（３３）（３９）を用いても、より高い精度で脳内アロマテースを定量することができると考えられる。

また、本発明に係る化合物（２２）（３３）（３９）の何れを用いた場合も化合物（１０）と同じ分布様相を呈したが、その結合能には差が見られた。化合物（２２）は結合能が比較的低く、化合物（３９）は比較的高い結果となった。

このように、本発明を用いれば、男性ステロイドを女性ステロイドに変換する酵素であるアロマテースの分布を可視化し、かつ精度よく定量し得る。本発明によって、従来のＰＥＴプローブよりも非特異的結合が有意に減少し、精度のより高いアロマテース定量が可能になった。

（II）本発明に係る化合物（１０）による置換実験
化合物（１０）の投与５分前に非標識vorozole（ＶＯＲ）（１００μｇ／ｋｇ）を投与して、アカゲザルの脳の結合能（ＢＰ）画像を観察した。

図５における、上段（全結合）に、化合物（１０）のみを投与した場合の結合能画像を示し、下段（置換した結合）に、非標識ＶＯＲ（１００μｇ／ｋｇ）を投与した５分後に化合物（１０）を投与した場合の結合能（ＢＰ）画像を示す。

なお、図５においても、「coronal」は、前額（冠状）断面を意味し、「transaxial」は水平断面を意味する。

また、図６に、図５に示す結合画像の結果を数値化したグラフを、ＶＯＲで同様の実験を行った結果と共に、視床下部（ＨＴ）および側坐核（Ａｃｂ）における結果と併せて示す。

図５に示すように、非標識ＶＯＲを投与した５分後に、化合物（１０）を投与した場合では、化合物（１０）のみを投与した場合には確認されていた扁桃体への取り込みが見えなかった。これは、非標識ＶＯＲにより化合物（１０）の結合が阻害されていると考えられる。視床下部、側坐核においても同様の結果が得られた。

また、図６に示すように、本発明に係る化合物（１０）は、ＶＯＲと比較して置換した結合が少ない。置換した結合は非特異的結合であると考えられるため、本発明によって、従来のＰＥＴプローブよりも非特異的結合が有意に減少し、精度のより高いアロマテース定量を提供し得ることが確認できた。

（III）本発明に係る化合物（１０）の結合実験
インビトロ実験で、化合物（１０）の結合試験を行った。

具体的には、メスのラットに対しジエチルエーテルで深く麻酔をかけ、０．０１Ｍリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ，ｐＨ７．４）で、経心臓的にかん流させた。これらの卵巣を直ぐに取り除き、０．３２Ｍスクロース溶液１ｍＬ中でホモジナイズした。

リガンド飽和実験のため、ホモジナイズした組織を、２連で、化合物（１０）の濃度を上げながら（０．０３、０．０５、０．１、０．３、１．０、および２．０ｎＭ）、室温で３０分間インキュベートした。非特異性結合は、化合物（１０）を添加する直前に１μＭの非標識ＶＯＲを添加し、サンプルとインキュベートすることにより得られた。濾過およびγカウンターによるカウントを行い、Ｋ_Ｄの平均は、Scatchard plot analysisにより計算した。

図７に、上記結合試験の結果の一例を示す。（ａ）には、参照として、ラットの扁桃体でのＶＯＲの結果を示し、（ｂ）には、化合物（１０）の上記実験結果を示す。

その結果、結合能を示す解離定数（Ｋ_Ｄ）は、化合物（１０）で０．３０ｎＭであり、vorozole（ＶＯＲ）で０．６０ｎＭであり、本発明に係る化合物（１０）の方が、ＶＯＲよりも親和性が約２倍高いことが確認できた。

なお、本発明は上述した各実施形態に限定されるものではなく、請求項に示した範囲で種々の変更が可能であり、異なる実施形態にそれぞれ開示された技術的手段を適宜組み合わせて得られる実施形態についても本発明の技術的範囲に含まれる。

本発明の化合物は、アロマテースの分布を可視化し、定量するためのＰＥＴ用分子プローブに好適に用いることができる。

Claims

下記式
で表される構造を有する、化合物。
請求項１に記載の化合物を含んでいる、診断用組成物。
下記式
で表され、かつ放射標識されていないことを除いて前記化合物と同一である構造を有する化合物をさらに含んでいる、請求項２に記載の組成物。
適用対象が、乳癌、乳腺症、子宮体癌、子宮内膜症または子宮筋腫、アロマテースの誘導を伴う炎症性疾患、精神障害、更年期障害、および慢性疲労症候群からなる群より選択される、請求項３に記載の組成物。
陽電子放射断層画像撮影法に用いて診断するための、請求項３または４に記載の組成物。
適用対象が、乳癌、乳腺症、子宮体癌、子宮内膜症または子宮筋腫、アロマテースの誘導を伴う炎症性疾患、精神障害、更年期障害、および慢性疲労症候群からなる群より選択される、請求項３〜５の何れか１項に記載の組成物。
下記式
で表される構造を有する、化合物。
請求項７に記載の化合物を備えている、陽電子放射断層画像撮影法用標識化合物を製造するためのキット。
前記陽電子放射断層画像撮影法用標識化合物が診断に用いられる、請求項８に記載のキット。
前記診断の適用対象が、乳癌、乳腺症、子宮体癌、子宮内膜症または子宮筋腫、アロマテースの誘導を伴う炎症性疾患、精神障害、更年期障害、および慢性疲労症候群からなる群より選択される、請求項９に記載のキット。