JP5762969B2 - pH安定性のエンベロープ付きウィルスの生産方法 - Google Patents
pH安定性のエンベロープ付きウィルスの生産方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5762969B2 JP5762969B2 JP2011537962A JP2011537962A JP5762969B2 JP 5762969 B2 JP5762969 B2 JP 5762969B2 JP 2011537962 A JP2011537962 A JP 2011537962A JP 2011537962 A JP2011537962 A JP 2011537962A JP 5762969 B2 JP5762969 B2 JP 5762969B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- virus
- cells
- viruses
- cell
- influenza
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/145—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5254—Virus avirulent or attenuated
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16021—Viruses as such, e.g. new isolates, mutants or their genomic sequences
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16051—Methods of production or purification of viral material
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
- C12N2760/16134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
ウィルス感染の年間のエピデミックにより引き起こされる疾病の予防には、ワクチン接種が最も重要な公衆衛生手段である。ワクチンの効率的供給は、大量のワクチン材料(例えばウィルス)を迅速に生産することができることに依存している。ワクチンの迅速な開発及びその豊富な入手性は、多くのヒト及び動物疾病を撲滅するのに決定的である。ワクチン生産の遅延及びその量の不足は、疾病の大発生に取り組むにあたり問題を生じることがある。
図1:用量6.0 log TCID50/動物で単一鼻腔内免疫化後のフェレットにおいて比較したWisc.ΔNS1及びWisc. ΔNS1_HA2_G75Rの免疫原性、
図2
A)マウスモデル中での血清抗体の誘導
B)免疫化したマウスの肺及び鼻甲介(nasal turbinate)中の攻撃ウィルスの生殖(Reproduction)、
図3
A.当初及び突然変異体ウィルスのHA分子の配列比較。部位指向的突然変異生成による2つのヌクレオチド(aa)から(tt)への置換は、HA2サブユニットの部位58位でKからIのアミノ酸変更を生じた。
B.ヒト赤血球を用いたVN1203及びVN1203 K58Iウィルスの融合活性。
C.VN1203及びVN1203 K58Iウィルスでの免疫化後のマウス鼻洗浄におけるIgA抗体力価。
D.VN1203及びVN1203 K58Iウィルスでの免疫化後のマウス血清におけるHAI抗体力価。
E.マウスについてのVN1203及びVN1203 K58Iウィルスの感染性、
図4:低pHに向けたウィーン/28及びウィーン/28_HA2_G75Rウィルスの感受性。
本発明は、以下の工程:
a)pH5.2〜5.9、好ましくは5.4〜5.8、最も好ましくは約5.6を有する溶液中でウィルスを希釈する工程、
b)宿主細胞を少なくとも1の感染性ウィルス粒子で感染させる工程、その際:
i)前記ウィルス粒子を前記細胞に添加する;及び
ii)前記細胞及びウィルス粒子を、ウィルス/細胞複合体を提供するために、pH5.2〜5.9、好ましくは5.4〜5.8、最も好ましくは約5.6でインキュベーションする、
c)この感染した宿主細胞をウィルスを増殖させるために培養する工程、
d)前記ウィルスを回収する工程、及び場合により;
e)前記ウィルスを精製及び/又は特性決定する工程
を含むこと特徴とするエンベロープ付きウィルスの生産方法に関する。
実施例1:
エピデミック株由来の表面糖タンパク質を有する2つのインフルエンザ株
A/ウィスコンシン/67/05(H3N2)及びWHOワクチン株IVR−116(A/ニューカレドニア/20/99及びA/プエルトリコ/8/34の再配列物)由来の他の全ての遺伝子を、NS1オープンリーディングフレームを欠失するNS遺伝子(ΔNS1)と組み合わせて、逆遺伝子学により構築した。得られたウィルスは、HA分子の配列中の1のアミノ酸置換により異なっており、これは、Vero細胞上の異なる継代条件のためである。第1のウィルス、Wisc.ΔNS1と名付けたものは、低pH緩衝液を用いたウィルス接種材料の予備処理でもってVeros細胞上で常に継代された、すなわち:
このウィルスをMES感染緩衝液(0.1M MES、150mM NaCl、0.9mM CaCl2、0.5mM MgCl2;pH=5.6)中で希釈し、これは、適したmoiにまで0.25μg/mlのアムホテリシンBで補給されていた。Vero細胞を感染緩衝液で洗浄し、このウィルス接種材料をこの細胞に適用し、30分間インキュベーションした。次いで、この接種材料を除去し、細胞を血清不含のOpti−pro培地(0.25μg/mlのアムホテリシンB及び5μg/mlのトリプシンで補給されている)中でインキュベーションした。
エピデミック株A/ブリズベン/59/07(H1N1)からの表面糖タンパク質を有する2つのH1N1インフルエンザ株及びWHO株IVR−116からの他の全ての遺伝子が、NS1オープンリーディングフレームを欠失するNS遺伝子(ΔNS1)と組み合わせて、逆遺伝子学により構築された。得られたウィルスは、HA分子の配列中の1のアミノ酸置換により異なっており、これは、Vero細胞上の異なる継代条件のためであるように見える。第1のウィルス、ブリズベンΔNS1と名付けられたものを、アムホテリシンBの存在下で低pH条件で継代させた。この手順は、HA配列の保存を生じ、これは、臨床試料からのMDCK細胞において単離されたウィルスのものと類似しているように見えた(継代1)。
標準条件でのVero細胞上のインフルエンザB株の培養もまた、HA分子中の界面HA1−HA2又はHA2−HA2領域のいずれかの脱安定突然変異の様子も生じ、これは、動物モデル中の突然変異ウィルスの減少した安定性及び次には減少した免疫原性に関連している(データ示さず)。
以前に、過去数十年の間に循環した、H5N1高度病原性トリウィルスが、pH5.6を有するヒト鼻洗浄(nasal washings)を用いた処置に耐えないことが見出された。これらは、Vero細胞の接種の間に同じpH5.6を有する酸性緩衝液での処置にも耐えなかった。この不安定性の理由が、細胞膜で融合を実施するために、HA分子がこのコンフォメーションを変更する高pHにあり、これは、H5N1ウィルスにとってはpH5.6の値を有するが、一方でヒトウィルスにとってはこれは5.2〜5.4の範囲内にあることが見出された。
酸性接種を用いたウィルスの増殖は、熱不活性化に対するウィルス安定性も保存した。熱安定性は、高められた温度で15分間でのウィルスのインキュベーション後のウィルス赤血球凝集力価の滴定(titration)により確認された。低pH接種で培養されたウィルス(ブリズベンΔNS1 H1N1、ウィスコンシンΔNS1 H3N2、ブリズベンΔNS1 H3N3)は、60℃への曝露後にさえも赤血球凝集活性を保持したことが見出された。標準条件で培養され、HA中の脱安定突然変異を獲得したウィルス(ニューカレドニアΔNS1_HA2_113、ウィスコンシンΔNS1_HA_218_225_75_81H3N2)は、60℃での処置に耐えることができず、15分間後に赤血球凝集活性を完全に失った(第1表)。トリインフルエンザウィルスに関しては、多塩基性切断部位(トリプシン依存性の様式で)の改変だけを有するHAを含有する株が55℃での処置にさえ耐えなかった(香港156ΔNS1 H5N1、VN1203(6:2)(H5N1)、VN1203 H5N1)ことが見出され、処置の15分間の間に赤血球を凝集させる能力を完全に失った。これらウィルスの閾値は50℃であった。HA外部ドメイン(ectodomain)中のHA2サブユニット中の突然変異K58Iの導入は、55℃までウィルス安定性を増加させた。
エピデミックウィルスA/ウィーン/28/06(H3N2)からのHA及びNA遺伝子を、そして、WHO株IVR−116からの他の全ての遺伝子を、NS1オープンリーディングフレームを欠失するNS遺伝子(ΔNS1)と組み合わせて含有する2つのインフルエンザ6:2再配列物を、逆遺伝子学により構築した。得られたウィルスは、HA分子のHA2サブユニットの配列中の1のアミノ酸置換により異なっており、これは、Vero細胞上の異なる継代条件のためであるように見える。第1のウィルス、ウィーン/28と名付けられたものを、pH6.5を有する培地の存在下で培養し、その一方で、第2のウィルス(ウィーン28_HA2_G75R)を標準条件で培養した。ウィルス ウィーン/28_HA2_G75Rは、HA2サブユニット中のG75Rの位置でウィーン/28に比較してHAの配列中で異なっており、これは、当初野生型ウィルス中には存在しない。この置換は、ウィーン/28ウィルスに比較して、低pHでウィーン/28_HA2_G75Rウィルスの減少した感染性を生じ、これは、酸性緩衝液中のウィルスの予備インキュベーション(30分間)と引き続く感染力価の滴定により測定された(図4)。
ウィルスA/ブリズベン/10/2007(卵由来、NIBSC、UKから取得)を、MDCK及びVero細胞に対して並行して5回継代させた。5回の継代の後に、両方の生じる変異体は、当初ウィルスに対し、その感染性について異なる値のpHで免疫蛍光アッセイにおいて比較された。この得られたデータは、pH5.6及び中性pH7.5で同じ効率でもって当初ウィルスA/ブリズベン/10/2007が細胞を感染させることを明らかに実証した。しかし、相応する細胞株に対する5回の継代後に両方のウィルスは、pH5.6で細胞感染させる能力を失った。この細胞のポジティブ染色はpH5.8でだけ観察されたが、しかし、pH5.6を有する緩衝液が使用された場合に染色した細胞は可視可能でなかった(結果示さず)。HA遺伝子の配列決定は、HA分子中で位置160でD→Eの同じ突然変異を両方の変異体が獲得したことを明らかにした。
ウィルスA/ソロモン諸島/3/06(卵由来、NIBSC、UKから取得)を、異なる2つの経路によって為された連続的継代(consecutive passage)によりVero細胞に適応させた:標準(中性)条件で又は酸性で(pH5.6での感染)。中性pHで継代した結果物ウィルスは、4.7log TCID50/mlから6.7log TCID50/mlへとVero細胞での成長能を改善したが、しかし、免疫蛍光アッセイにおいてpH5.6で細胞を感染させる能力を失った。染色されていない細胞が、緩衝液pH5.6と組み合わせたウィルスを用いた細胞の感染後に観察され、その一方で、中性感染では全体的な単層(monolayer)が染色された。酸性条件での感染を用いたVero細胞上での成長に適応させたウィルスA/ソロモン諸島/3/60は、力価7.6log TCID50/mlに達し、かつ、同時に、低pH条件で感染性を保存した。免疫蛍光アッセイにおいて、pH5.6及び7.5での感染後に染色した細胞の同様の分布が観察された。
新規H1N1サブタイプのウィルスA/カリフォルニア/7/09(卵由来、CDCから取得)を、酸性条件で為された幾つかの連続的継代によりVero細胞に適応させた(pH5.6での細胞の感染)。結果物ウィルスをA/カリフォルニア/7/09−酸と名付けた。当初の及び適応させたウィルスを、引き続く精製を伴う、バイオリアクター中の少規模(10L)生産のために使用した。赤血球凝集力価(HA)により測定したA/カリフォルニア/7/09−酸ウィルスの収量は、各生産工程後にA/カリフォルニア/7/09ウィルスよりも2〜8倍より高かった。結果は第4表に示される。
Claims (17)
- 以下の工程:
a)pH5.2〜5.6を有する溶液中にウィルスを希釈する工程、
b)宿主細胞を少なくとも1の感染性ウィルス粒子で感染させる工程、その際:
i)前記ウィルス粒子を前記細胞に添加する;及び
ii)前記細胞及び前記ウィルス粒子を、ウィルス/細胞複合体を提供するために、引き続きpH5.2〜5.6でインキュベーションする、
c)感染した宿主細胞を、ウィルスを増殖させるために培養する工程、
d)前記ウィルスを回収する工程;及び
e)場合により、前記ウィルスを精製及び/又は特性決定する工程
を含み、前記宿主細胞がBSC−1細胞、LLC−MK細胞、CV−1細胞、CHO細胞、COS細胞、マウス細胞、ヒト細胞、HeLa細胞、293細胞、VERO細胞、MDBK細胞、MDCK細胞、MDOK細胞、CRFK細胞、RAF細胞、TCMK細胞、LLC−PK細胞、PK15細胞、WI−38細胞、MRC−5細胞、T−FLY細胞、BHK細胞、SP2/0細胞、NS0細胞、PerC6細胞からなる群から選択されていることを特徴とするインフルエンザウィルスの生産方法。 - マクロライドポリエン抗生物質又は誘導体が添加されることを特徴とする請求項1記載の方法。
- アムホテリシンBが添加されることを特徴とする請求項2記載の方法。
- 前記ウィルスがインフルエンザA、B又はCであることを特徴とする請求項1から3のいずれか1項記載の方法。
- 前記インフルエンザウィルスが弱毒化したインフルエンザウィルスであることを特徴とする請求項1から4のいずれか1項記載の方法。
- 前記インフルエンザウィルスが、NS1遺伝子内での欠失又は改変を含むことを特徴とする請求項1から5のいずれか1項記載の方法。
- 前記インフルエンザウィルスが低温適応したウィルスであることを特徴とする請求項1から6のいずれか1項記載の方法。
- 前記ウィルスが、pH値の範囲を提供することができ、かつ、細胞にとって生理学的である緩衝液中で希釈されることを特徴とする請求項1から7のいずれか1項記載の方法。
- 前記緩衝液が、MES緩衝液、クエン酸緩衝液及び酢酸緩衝液からなる群から選択されることを特徴とする請求項8記載の方法。
- 培養培地が、前記細胞を培養するために使用されることを特徴とする請求項1から9のいずれか1項記載の方法。
- 前記培養培地がSFM opti-pro (商標) 培地であることを特徴とする請求項10記載の方法。
- 前記ウィルスが、少なくとも1代にわたり前記宿主細胞中で継代されることを特徴とする請求項1から11のいずれか1項記載の方法。
- 赤血球凝集活性を60℃で保持し、5.5〜5.8のpH範囲で感染性を保持し、細胞培養において7log TCID 50 /ml超の成長であることを特徴とする請求項1から12のいずれか1項記載の方法により得られるインフルエンザウィルス。
- ヒトレセプター特異性を有することを特徴とする請求項13記載のインフルエンザウィルス。
- 種ウィルスとしての、請求項13又は14記載のインフルエンザウィルスを含有するエンベロープ付きウィルス粒子の使用。
- ワクチンウィルスの大規模生産のための、請求項13又は14記載のインフルエンザウィルスを含有するエンベロープ付きウィルス粒子の使用。
- 請求項13又は14記載のインフルエンザウィルス及び製薬学的に許容可能なキャリアー又はアジュバントを含有する、ワクチン接種又はウィルス疾病の治療に有用な組成物。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US11790008P | 2008-11-25 | 2008-11-25 | |
US61/117,900 | 2008-11-25 | ||
EP09153664.9 | 2009-02-25 | ||
EP09153664 | 2009-02-25 | ||
PCT/EP2009/065812 WO2010060921A1 (en) | 2008-11-25 | 2009-11-25 | METHOD FOR PRODUCTION OF pH STABLE ENVELOPED VIRUSES |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2012509684A JP2012509684A (ja) | 2012-04-26 |
JP5762969B2 true JP5762969B2 (ja) | 2015-08-12 |
Family
ID=40626824
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2011537962A Active JP5762969B2 (ja) | 2008-11-25 | 2009-11-25 | pH安定性のエンベロープ付きウィルスの生産方法 |
Country Status (8)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US8815252B2 (ja) |
EP (1) | EP2364167B1 (ja) |
JP (1) | JP5762969B2 (ja) |
KR (1) | KR101741848B1 (ja) |
CN (1) | CN102223895B (ja) |
CA (1) | CA2744354C (ja) |
EA (1) | EA024262B1 (ja) |
WO (1) | WO2010060921A1 (ja) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US8815252B2 (en) * | 2008-11-25 | 2014-08-26 | Baxter Healthcare Sa | Method for production of pH stable enveloped viruses |
EP2536428B1 (en) * | 2010-02-18 | 2018-12-05 | Technovax, Inc. | Universal virus-like particle (vlp) influenza vaccines |
EP2576773A2 (en) * | 2010-06-02 | 2013-04-10 | Avir Green Hills Biotechnology Research Development Trade AG | Methods and helper viruses for the generation of rna virus |
CN104302317B (zh) * | 2012-05-16 | 2016-07-06 | Kj生物科学有限公司 | 新型和改进的流感疫苗 |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP4441595B2 (ja) | 1998-06-12 | 2010-03-31 | マウント シナイ スクール オブ メディシン オブ ニューヨーク ユニバーシティー | インターフェロン誘導性の遺伝子工学的に作製された弱毒ウイルス |
CA2334895C (en) | 1998-06-12 | 2016-01-19 | Mount Sinai School Of Medicine | Attenuated negative strand viruses with altered interferon antagonist activity for use as vaccines and pharmaceuticals |
CA2498297A1 (en) * | 2002-09-09 | 2004-03-18 | University Of Tennessee Research Foundation | Recombinatant mutants of rhabdovirus and methods of use thereof |
KR101251902B1 (ko) | 2003-02-25 | 2013-04-08 | 메디뮨 엘엘씨 | 인플루엔자 백신 조성물의 제조 방법 |
US7566458B2 (en) * | 2003-06-16 | 2009-07-28 | Medimmune, Llc | Influenza hemagglutinin and neuraminidase variants |
DE102004049290A1 (de) * | 2004-10-09 | 2006-04-20 | Bayer Healthcare Ag | Verfahren zur Herstellung von Virusmaterial |
EP1911836A1 (en) * | 2006-10-12 | 2008-04-16 | AVIR Green Hills Biotechnology Trading GmbH | Medium supplement for virus production |
US8815252B2 (en) * | 2008-11-25 | 2014-08-26 | Baxter Healthcare Sa | Method for production of pH stable enveloped viruses |
-
2009
- 2009-11-25 US US13/129,806 patent/US8815252B2/en active Active
- 2009-11-25 KR KR1020117011829A patent/KR101741848B1/ko active IP Right Grant
- 2009-11-25 EP EP09760521.6A patent/EP2364167B1/en active Active
- 2009-11-25 WO PCT/EP2009/065812 patent/WO2010060921A1/en active Application Filing
- 2009-11-25 CN CN200980147102.3A patent/CN102223895B/zh active Active
- 2009-11-25 CA CA2744354A patent/CA2744354C/en active Active
- 2009-11-25 US US12/626,475 patent/US8883479B2/en active Active
- 2009-11-25 EA EA201100845A patent/EA024262B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2009-11-25 JP JP2011537962A patent/JP5762969B2/ja active Active
-
2014
- 2014-08-25 US US14/468,131 patent/US20140377308A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EA201100845A1 (ru) | 2011-10-31 |
JP2012509684A (ja) | 2012-04-26 |
CN102223895B (zh) | 2014-11-05 |
CN102223895A (zh) | 2011-10-19 |
WO2010060921A1 (en) | 2010-06-03 |
US8883479B2 (en) | 2014-11-11 |
US20140377308A1 (en) | 2014-12-25 |
US20100172934A1 (en) | 2010-07-08 |
CA2744354C (en) | 2018-10-02 |
KR20110092280A (ko) | 2011-08-17 |
CA2744354A1 (en) | 2010-06-03 |
US20110223199A1 (en) | 2011-09-15 |
EP2364167B1 (en) | 2016-08-17 |
US8815252B2 (en) | 2014-08-26 |
KR101741848B1 (ko) | 2017-05-30 |
EA024262B1 (ru) | 2016-09-30 |
EP2364167A1 (en) | 2011-09-14 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Chen et al. | Advances in development and application of influenza vaccines | |
JP6352974B2 (ja) | ワクチンのための高力価組み換えインフルエンザ・ウィルス | |
US7494659B2 (en) | Live attenuated influenza vaccine | |
US8802417B2 (en) | Production of viruses, viral isolates and vaccines | |
US8597661B2 (en) | Neuraminidase-deficient live influenza vaccines | |
US8691238B2 (en) | High growth reassortant influenza A virus | |
MX2007005818A (es) | Vectores recombinantes de la influenza con unidades de transcripcion en tandem. | |
US11180737B2 (en) | Generation of infectious influenza viruses from virus-like particles | |
JP2017197555A (ja) | 変異型pb2遺伝子セグメントを有する弱毒化生ワクチンとしてのインフルエンザウイルス | |
Shin et al. | Comparison of immunogenicity of cell-and egg-passaged viruses for manufacturing MDCK cell culture-based influenza vaccines | |
JP5762969B2 (ja) | pH安定性のエンベロープ付きウィルスの生産方法 | |
US20110250587A1 (en) | Novel method for generation of rna virus | |
US20040142450A1 (en) | Lung epithelial cell line for propagating viruses | |
WO2002089586A1 (en) | Lung epithelial cell line for propagating viruses | |
JP2013529913A (ja) | Rnaウィルスの作製のための方法及びヘルパーウィルス | |
WO2010046335A1 (en) | Production of influenza virus by reverse genetics in per.c6 cells under serum free conditions | |
Elderfield et al. | Using reverse genetics to improve influenza vaccines | |
Marzio et al. | Production of viruses, viral isolates and vaccines | |
Kawaoka et al. | Reverse Genetics Approaches for Rational Design of Inactivated and Live Attenuated Influenza Vaccines | |
IVE | Kawa0ka et al. |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20121126 |
|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20130521 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20130521 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20140507 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20140716 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20140724 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20141104 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20150511 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20150610 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5762969 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313113 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
R360 | Written notification for declining of transfer of rights |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R360 |
|
R360 | Written notification for declining of transfer of rights |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R360 |
|
R371 | Transfer withdrawn |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R371 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313113 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |