JP5668001B2 - Skin cosmetics and hair cosmetics - Google Patents

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Description

本発明は、植物抽出物及び/又は当該抽出物の酸加水分解物を有効成分とする抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤及び抗男性ホルモン剤、並びに植物抽出物及び/又は当該抽出物の酸加水分解物を配合した皮膚化粧料及び頭髪化粧料に関する。   The present invention relates to an anti-inflammatory agent, an anti-aging agent, a hair-restoring agent and an anti-androgen agent comprising a plant extract and / or an acid hydrolyzate of the extract as an active ingredient, and a plant extract and / or the extract. The present invention relates to a skin cosmetic and a hair cosmetic containing an acid hydrolyzate.

炎症性の疾患、例えば、接触性皮膚炎(かぶれ)、乾癬、尋常性天疱瘡、その他肌荒れを伴う各種皮膚疾患等の原因や発症機構は多種多様であるが、その原因の一つとして、主にマクロファージから産生される腫瘍壊死因子(以下「TNF−α」という)によるものが知られている。   There are various causes and onset mechanisms of inflammatory diseases such as contact dermatitis (rash), psoriasis, pemphigus vulgaris, and other skin diseases with rough skin. In addition, a tumor necrosis factor (hereinafter referred to as “TNF-α”) produced from macrophages is known.

TNF−αは、腫瘍を壊死させる因子として見出されたが、最近では腫瘍に対してだけでなく、正常細胞の機能を調節するメディエーター的な役割を担うサイトカインであると考えられている。TNF−αは炎症の初発から終息までの過程において重要な役割を担っているが、その持続的かつ過剰な産生は、皮膚を含めた組織の障害を引き起こし、全身的には発熱やカケクシアの原因となり、炎症の悪化を引き起こす。そのような炎症としては、例えば、関節リューマチ、変形性関節症などの慢性炎症性疾患が代表的である。したがって、病的な炎症においてはTNF−αの過剰な産生を抑制することが重要となる。TNF−α産生抑制作用を有する植物抽出物としては、ヒルガオ科ヨウサイからの抽出物(特許文献1参照)等が知られている。   TNF-α was found as a factor that necrotizes tumors, but is recently considered to be a cytokine that plays a mediator role not only for tumors but also for regulating the function of normal cells. TNF-α plays an important role in the process from the onset to the end of inflammation, but its continuous and excessive production causes damage to tissues including the skin, and causes systemic fever and cachexia. And cause worsening of inflammation. As such inflammation, for example, chronic inflammatory diseases such as rheumatoid arthritis and osteoarthritis are representative. Therefore, it is important to suppress excessive production of TNF-α in pathological inflammation. As a plant extract having a TNF-α production inhibitory effect, an extract from a convolvulaceae yosai (see Patent Document 1) and the like are known.

炎症性疾患を発症させる別の原因として、ヒアルロニダーゼの活性化、ヒスタミン遊離、血小板凝集等が知られている。ヒアルロニダーゼの活性化によって、マストセルからのヒスタミンの脱顆粒が促進され、その結果炎症が引き起こされる。したがって、ヒアルロニダーゼの活性化を阻害することにより、炎症性疾患の予防、治療又は改善が期待できる。ヒアルロニダーゼ阻害活性を有する植物抽出物としては、イロハモミジからの抽出物(特許文献2参照)等が知られている。   As other causes for causing inflammatory diseases, hyaluronidase activation, histamine release, platelet aggregation and the like are known. The activation of hyaluronidase promotes histamine degranulation from mast cells, resulting in inflammation. Therefore, prevention, treatment or improvement of inflammatory diseases can be expected by inhibiting the activation of hyaluronidase. As a plant extract having hyaluronidase inhibitory activity, an extract from Japanese maple (see Patent Document 2) and the like are known.

また、ヒスタミンが遊離されると同時に、ヘキソサミニダーゼも遊離されることから、ヘキソサミニダーゼの遊離を指標にヒスタミン遊離抑制作用を評価することができる。したがって、ヘキソサミニダーゼの遊離を抑制することにより、同時にヒスタミンの遊離も抑制でき、これにより炎症性疾患等の予防、治療又は改善に効果があるものと考えられる。ヘキソサミニダーゼ遊離抑制作用を有する植物抽出物としては、藤茶からの抽出物(特許文献3)等が知られている。   Further, since hexosaminidase is released at the same time as histamine is released, the histamine release inhibitory action can be evaluated using the release of hexosaminidase as an index. Therefore, it is considered that by suppressing the release of hexosaminidase, the release of histamine can also be suppressed at the same time, which is effective for preventing, treating or improving inflammatory diseases. As a plant extract having a hexosaminidase release inhibitory action, an extract from Fuji tea (Patent Document 3) and the like are known.

血小板は、凝集して活性化することにより、生理的には止血、病理的には血栓形成を生じる他、血小板の凝集は、動脈硬化の進展、がん転移、炎症等に関与していると考えられている。したがって、血小板の凝集を抑制することにより、上記疾患の予防、治療又は改善が期待できる。血小板凝集抑制作用を有する植物抽出物としては、地衣類雪茶からの抽出物(特許文献4参照)等が知られている。   Platelet aggregates and activates to cause hemostasis physiologically and pathologically thrombus formation, and platelet aggregation is involved in the progression of arteriosclerosis, cancer metastasis, inflammation, etc. It is considered. Therefore, prevention, treatment or improvement of the above diseases can be expected by suppressing platelet aggregation. As a plant extract having a platelet aggregation inhibitory action, an extract from lichen snow tea (see Patent Document 4) and the like are known.

加齢に伴う皮膚老化の一因は、女性ホルモンの一種であるエストロゲンの分泌が減退することにある。すなわち、エストロゲンは成人女性の健康維持に深く関わっており、その分泌不足は種々の内科的疾患を招くほか、肌の過敏症、弾力性低下、潤いの減少等、好ましくない肌の変化の原因となることが知られている。そこで、エストロゲンの分泌が衰える更年期以降の女性に対して、エストロゲンと同様の作用を有する物質を配合した薬剤を、経皮的又は経口的に投与することが行われている。エストロゲン様作用を有する植物抽出物としては、五斂子からの抽出物(特許文献5参照)等が知られている。   One cause of skin aging with aging is a decrease in the secretion of estrogen, a female hormone. In other words, estrogen is deeply involved in maintaining the health of adult women, and its lack of secretion leads to various medical illnesses, as well as the cause of unwanted skin changes such as skin irritability, reduced elasticity, reduced moisture, etc. It is known to be. Therefore, a drug containing a substance having the same action as estrogen is transdermally or orally administered to women after menopause, whose estrogen secretion declines. As a plant extract having an estrogen-like action, an extract from pentagon (see Patent Document 5) and the like are known.

皮膚の構造は、大きく分けて、表皮、基底膜、真皮、皮下組織からなる。基底膜は、表皮と真皮との境界部に存在しており、その機能は多岐にわたり、表皮の真皮への接着、表皮の極性の決定、表皮の分化・増殖の制御、さらには真皮細胞が産生する因子や血成分由来の栄養供給の制御に関与している。そのため、基底膜は、皮膚の構造、恒常性の維持にとってきわめて重要な役割を果たしている。したがって、基底膜の構造が変化すると、しわ、たるみ等の皮膚の老化症状を呈するようになる。特に、基底膜の主要成分であるIV型コラーゲンの産生量が減少すると、基底膜の構造が変化し、しわ、たるみ等の皮膚の老化症状を呈するようになる。IV型コラーゲン産生促進作用を有する植物抽出物としては、加水分解カゼイン、ブナの芽、エリスリナ、可溶性卵殻膜、カッコン、西洋キヅタよりなる群から選ばれる植物及び動物由来の抽出物等が知られている(特許文献6参照)。   Skin structure is roughly divided into epidermis, basement membrane, dermis and subcutaneous tissue. The basement membrane exists at the boundary between the epidermis and the dermis, and its functions are diverse. Adhesion of the epidermis to the dermis, determination of the polarity of the epidermis, control of epidermal differentiation and proliferation, and production of dermal cells It is involved in the regulation of nutrient supply derived from factors and blood components. Therefore, the basement membrane plays an extremely important role in maintaining the structure and homeostasis of the skin. Therefore, when the structure of the basement membrane changes, skin aging symptoms such as wrinkles and sagging appear. In particular, when the amount of type IV collagen, which is the main component of the basement membrane, decreases, the structure of the basement membrane changes, resulting in skin aging symptoms such as wrinkles and sagging. Known plant extracts having a type IV collagen production promoting action include extracts derived from plants and animals selected from the group consisting of hydrolyzed casein, beech buds, erythrina, soluble eggshell membranes, cuckoo, and western ivy. (See Patent Document 6).

皮膚に紫外線が照射されると、皮膚の細胞は障害を受けたり、細胞死が引き起こされたりし、肌は張りや弾力を失い、肌荒れ、シワ等の老化症状を呈するようになる。したがって、紫外線の照射によるダメージ(例えば、細胞障害、細胞死等)を抑制・回復することによって、皮膚の老化の予防又は改善が期待できる。紫外線照射によるダメージ回復作用を有する植物抽出物としては、油溶性甘草抽出物(特許文献7参照)等が知られている。   When the skin is irradiated with ultraviolet rays, the cells of the skin are damaged or cell death is caused, the skin loses its elasticity and elasticity, and exhibits aging symptoms such as rough skin and wrinkles. Therefore, prevention or improvement of skin aging can be expected by suppressing / recovering damage (for example, cell damage, cell death, etc.) caused by ultraviolet irradiation. Oil-soluble licorice extracts (see Patent Document 7) and the like are known as plant extracts having a damage recovery action by ultraviolet irradiation.

表皮は、外部刺激を緩和し、水分等の体内成分の逸失を制御する働きをしており、基底層、有棘層、顆粒層及び角質層から構成されている。基底層で分裂、増殖した細胞は、有棘層、顆粒層を通過しながら分化し、強固な架橋結合をもったケラチン蛋白線維で構成された角質層になり、最終的には垢として角質層から脱落する。特に、顆粒層では、細胞膜が肥厚して肥厚細胞膜を形成するとともに、トランスグルタミナーゼ−1の作用により、蛋白分子間がグルタミル−リジン架橋され、強靭なケラチン蛋白線維が形成される。さらに、その一部にセラミド等が共有結合し、疎水的な構造をとることで、細胞間脂質のラメラ構造の土台を供給し、角質バリア機能の基礎が形成される。   The epidermis acts to alleviate external stimuli and control the loss of body components such as moisture, and is composed of a basal layer, a spiny layer, a granular layer, and a stratum corneum. Cells that divide and proliferate in the basal layer differentiate while passing through the spiny layer and granule layer, and become a stratum corneum composed of keratin protein fibers with strong cross-linking, and finally, the stratum corneum as plaque Drop off from. In particular, in the granular layer, the cell membrane is thickened to form a thickened cell membrane, and between the protein molecules is glutamyl-lysine cross-linked by the action of transglutaminase-1 to form a strong keratin protein fiber. Furthermore, ceramide or the like is covalently bonded to a part of the ceramide to form a hydrophobic structure, thereby providing a foundation for the lamellar structure of the intercellular lipid and forming the basis of the keratin barrier function.

しかし、加齢とともに表皮におけるトランスグルタミナーゼ−1の産生量が減少すると、角質バリア機能及び皮膚の保湿機能が低下するため、肌荒れ、乾燥肌等の皮膚の老化症状を呈するようになる。そのため、表皮におけるトランスグルタミナーゼ−1の産生を促進することにより、皮膚の老化症状を予防又は改善することができると考えられる。このような考えに基づき、トランスグルタミナーゼ−1産生促進作用を有するものとして、ニガリ又はその構成成分である塩化カルシウム等が知られている(特許文献8参照)。   However, when the amount of transglutaminase-1 produced in the epidermis decreases with aging, the keratin barrier function and the skin moisturizing function decrease, and skin aging symptoms such as rough skin and dry skin come to be exhibited. Therefore, it is considered that aging symptoms of skin can be prevented or improved by promoting production of transglutaminase-1 in the epidermis. Based on such an idea, bittern or calcium chloride which is a constituent component thereof is known as having transglutaminase-1 production promoting action (see Patent Document 8).

多くのステロイドホルモンは産生臓器から分泌された分子型で受容体と結合してその作用を発現するが、アンドロゲンと総称される男性ホルモンの場合、例えば、テストステロンは標的臓器の細胞内に入ってテストステロン5α−レダクターゼにより5α−ジヒドロテストステロン(5α−DHT)に還元されてから受容体と結合し、アンドロゲンとしての作用を発現する。   Many steroid hormones are expressed in the form of molecules secreted from production organs and bind to receptors to exert their effects. In the case of male hormones collectively called androgens, for example, testosterone enters the cells of target organs and becomes testosterone. After being reduced to 5α-dihydrotestosterone (5α-DHT) by 5α-reductase, it binds to the receptor and develops an action as an androgen.

アンドロゲンは重要なホルモンであるが、それが過度に作用すると、男性型脱毛症、多毛症、脂漏症、座瘡(ニキビなど)、前立腺肥大症、前立腺腫瘍、男児性早熟等、さまざまな好ましくない症状を誘発する。そこで、従来、これらの各種症状を改善するために過剰のアンドロゲンの作用を抑制する方法、具体的には、テストステロンを活性型5α−DHTに還元するテストステロン5α−レダクターゼの作用を阻害することにより、活性な5α−DHTが生じるのを抑制する方法や、テストステロンから生じた5α−DHTが受容体と結合するのを阻害することによりアンドロゲン活性を発現させない方法が提案されている。   Androgen is an important hormone, but when it works excessively, it is variously preferred, such as androgenetic alopecia, hirsutism, seborrhea, acne (such as acne), benign prostatic hyperplasia, prostate tumor, premature boyhood Not triggering symptoms. Therefore, conventionally, in order to improve these various symptoms, a method of suppressing the action of excess androgen, specifically, by inhibiting the action of testosterone 5α-reductase that reduces testosterone to active 5α-DHT, There have been proposed a method for suppressing the generation of active 5α-DHT and a method for preventing the expression of androgen activity by inhibiting the binding of 5α-DHT generated from testosterone to the receptor.

このようなテストステロン5α−レダクターゼ阻害作用を有する植物抽出物としては、例えば、ゴマノハグサ科独脚金からの抽出物(特許文献9参照)等が知られている。また、5α−DHTとその受容体との結合を阻害する作用を有する植物抽出物としては、例えば、マジト及び/又はカチュアからの抽出物(特許文献10参照)等が知られている。   As a plant extract having such a testosterone 5α-reductase inhibitory action, for example, an extract from a monopod of the genus Ligaceae (see Patent Document 9) is known. Moreover, as a plant extract which has the effect | action which inhibits the coupling | bonding of 5 (alpha) -DHT and its receptor, the extract (refer patent document 10) etc. from a majito and / or a cuture is known, for example.

特開2004−250344号公報JP 2004-250344 A 特開2003−113068号公報JP 2003-1113068 A 特開2003−12532号公報JP 2003-12532 A 特開2005−82532号公報JP 2005-82532 A 特開2002−302452号公報JP 2002-302452 A 特開2004−18471号公報JP 2004-18471 A 特開2004−250368号公報JP 2004-250368 A 特開2004−51596号公報JP 2004-51596 A 特開2005−75786号公報JP-A-2005-75786 特開2002−241297号公報JP 2002-241297 A

本発明は、安全性の高い天然抽出物及び/又はその酸加水分解物を有効成分とする抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤及び抗男性ホルモン剤、並びに当該天然抽出物及び/又はその酸加水分解物を配合した皮膚化粧料及び頭髪化粧料を提供することを目的とする。   The present invention relates to an anti-inflammatory agent, an anti-aging agent, a hair-restoring agent and an anti-androgen agent comprising a highly safe natural extract and / or acid hydrolyzate thereof as an active ingredient, and the natural extract and / or acid thereof. It aims at providing the skin cosmetics and hair cosmetics which mix | blended the hydrolyzate.

上記目的を達成するために、本発明の抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤又は抗男性ホルモン剤は、湖南甜茶からの抽出物及び/又は当該抽出物の酸加水分解物を有効成分として含有することを特徴とし、本発明の皮膚化粧料又は頭髪化粧料は、湖南甜茶からの抽出物及び/又は当該抽出物の酸加水分解物を配合したことを特徴とする。   In order to achieve the above object, the anti-inflammatory agent, anti-aging agent, hair-restoring agent or anti-androgen agent of the present invention contains an extract from Hunan coffee tea and / or an acid hydrolyzate of the extract as an active ingredient. The skin cosmetic or hair cosmetic of the present invention is characterized by blending an extract from Hunan coffee tea and / or an acid hydrolyzate of the extract.

本発明の抗炎症剤においては、前記抽出物及び前記酸加水分解物が、TNF−α産生抑制作用、ヒアルロニダーゼ阻害作用、ヘキソサミニダーゼ遊離抑制作用及び血小板凝集抑制作用からなる群より選ばれる1種又は2種以上の作用を有することが好ましい。また、本発明の抗老化剤においては、前記抽出物が、紫外線照射によるダメージ回復作用を有しており、前記酸加水分解物が、エストロゲン様作用、IV型コラーゲン産生促進作用、紫外線照射によるダメージ回復作用及びトランスグルタミナーゼ−1産生促進作用からなる群より選ばれる1種又は2種以上の作用を有することが好ましい。さらに、本発明の育毛剤又は抗男性ホルモン剤においては、前記抽出物が、テストステロン5α−レダクターゼ阻害作用及び/又はアンドロゲン受容体結合阻害作用を有しており、前記酸加水分解物が、テストステロン5α−レダクターゼ阻害作用を有することが好ましい。   In the anti-inflammatory agent of the present invention, the extract and the acid hydrolyzate are selected from the group consisting of a TNF-α production inhibitory action, a hyaluronidase inhibitory action, a hexosaminidase release inhibitory action, and a platelet aggregation inhibitory action. It is preferable to have seeds or two or more actions. In the anti-aging agent of the present invention, the extract has a damage recovery action by ultraviolet irradiation, and the acid hydrolyzate has an estrogen-like action, a type IV collagen production promoting action, a damage by ultraviolet irradiation. It preferably has one or more actions selected from the group consisting of a recovery action and a transglutaminase-1 production promoting action. Furthermore, in the hair restorer or anti-androgen hormone agent of the present invention, the extract has a testosterone 5α-reductase inhibitory action and / or an androgen receptor binding inhibitory action, and the acid hydrolyzate contains testosterone 5α. -It preferably has a reductase inhibitory action.

ここで、本発明において「アンドロゲン受容体結合阻害」とは、5α−DHTとアンドロゲン受容体との結合の阻害を意味し、その阻害様式は特に限定されるものではなく、例えば、競合的拮抗薬、非競合的拮抗薬といったアンタゴニストとしての阻害が考えられる。また、本発明において「紫外線照射によるダメージ」とは、紫外線の照射による皮膚細胞障害のことを意味し、細胞障害には、細胞レベルでの障害の他、組織レベルでの障害及び器官レベルでの障害が含まれ、例えば、細胞死、シワ形成、皮膚弾力性の低下、皮膚バリア機能の低下、角質層保湿機能の低下等が挙げられる。   Here, “androgen receptor binding inhibition” in the present invention means inhibition of binding between 5α-DHT and androgen receptor, and the inhibition mode is not particularly limited. For example, competitive antagonists Inhibition as an antagonist, such as a non-competitive antagonist, is contemplated. Further, in the present invention, “damage due to ultraviolet irradiation” means skin cell damage due to ultraviolet irradiation. Cell damage includes damage at the tissue level and organ level as well as damage at the cell level. Disorders are included, and examples include cell death, wrinkle formation, reduced skin elasticity, reduced skin barrier function, reduced stratum corneum moisturizing function, and the like.

本発明によれば、天然物である湖南甜茶からの抽出物及び/又は当該抽出物の酸加水分解物を有効成分として含有し、安全性の高い抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤、抗男性ホルモン剤、皮膚化粧料及び頭髪化粧料を提供することができる。   According to the present invention, an extract from a natural product, Hunan 甜 tea, and / or an acid hydrolyzate of the extract as an active ingredient, a highly safe anti-inflammatory agent, anti-aging agent, hair restorer, Male hormones, skin cosmetics and hair cosmetics can be provided.

以下、本発明について説明する。
〔抗炎症剤,抗老化剤,育毛剤,抗男性ホルモン剤〕
本発明の抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤又は抗男性ホルモン剤は、湖南甜茶からの抽出物及び/又は当該抽出物の酸加水分解物を有効成分として含有する。
The present invention will be described below.
[Anti-inflammatory agent, anti-aging agent, hair restorer, anti-androgen agent]
The anti-inflammatory agent, anti-aging agent, hair-restoring agent, or anti-androgen agent of the present invention contains an extract from Hunan coffee tea and / or an acid hydrolyzate of the extract as an active ingredient.

ここで、本発明において「抽出物」には、湖南甜茶(学名:Lithocarpus litseifolius)を抽出原料として得られる抽出液、当該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、当該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。   Here, in the present invention, the “extract” refers to an extract obtained by using Hunan coffee tea (scientific name: Lithocarpus litseifolius) as an extraction raw material, a diluted or concentrated solution of the extract, and a dry product obtained by drying the extract. Or any of these crudely purified products or purified products.

本発明において使用する抽出原料は、湖南甜茶(学名:Lithocarpus litseifolius)である。湖南甜茶(Lithocarpus litseifolius)は、ブナ科に属する植物であって、中国西南地方、華南地方等に広く分布しており、これらの地域から容易に入手することができる。抽出原料として使用する湖南甜茶の構成部位は特に限定されるものではなく、例えば、花部、葉部、枝部、果実部、樹皮、根部等が挙げられ、これらのうち、特に葉部若しくは枝部又はこれらの混合物を使用するのが好ましい。   The extraction raw material used in the present invention is Hunan 甜 tea (scientific name: Lithocarpus litseifolius). Hunan tea (Lithocarpus litseifolius) is a plant belonging to the family Beechaceae and is widely distributed in the southwestern region of China, the southern region of China, etc., and can be easily obtained from these regions. The constituent parts of the Konan tea used as the raw material for extraction are not particularly limited, and examples thereof include flower parts, leaf parts, branch parts, fruit parts, bark, root parts, etc., among these, especially leaf parts or branches. It is preferred to use parts or mixtures thereof.

湖南甜茶からの抽出物に含有される抗炎症作用、抗老化作用、育毛作用又は抗男性ホルモン作用を有する物質の詳細は不明であるが、植物の抽出に一般的に用いられている抽出方法によって、湖南甜茶から抗炎症作用、抗老化作用、育毛作用又は抗男性ホルモン作用を有する抽出物を得ることができる。   Details of substances with anti-inflammatory action, anti-aging action, hair-growth action or anti-androgenic action contained in the extract from Hunan coffee tea are unknown, but depending on the extraction method commonly used for plant extraction In addition, an extract having an anti-inflammatory action, an anti-aging action, a hair-growth action or an anti-androgen action can be obtained from Hunan 甜 tea.

例えば、抽出原料を乾燥した後、そのまま又は粗砕機を用いて粉砕し、抽出溶媒による抽出に供することにより得ることができる。この際、抽出原料の乾燥は天日で行ってもよいし、通常使用される乾燥機により行ってもよい。   For example, it can be obtained by drying the extraction raw material, pulverizing the raw material as it is or using a crusher, and subjecting it to extraction with an extraction solvent. At this time, the extraction raw material may be dried in the sun or by a commonly used dryer.

抽出溶媒としては、極性溶媒を用いるのが好ましく、例えば、水、親水性有機溶媒等が挙げられ、これらを単独で又は2種以上を組み合わせて、室温又は溶媒の沸点以下の温度で使用することが好ましい。   As the extraction solvent, it is preferable to use a polar solvent, and examples thereof include water and hydrophilic organic solvents. These may be used alone or in combination of two or more at room temperature or a temperature below the boiling point of the solvent. Is preferred.

抽出溶媒として使用し得る水としては、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等のほか、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、濾過、イオン交換、浸透圧調整、緩衝化等が含まれる。したがって、本発明において抽出溶媒として使用し得る水には、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。   Examples of water that can be used as the extraction solvent include pure water, tap water, well water, mineral spring water, mineral water, hot spring water, spring water, fresh water, and the like, and those subjected to various treatments. Examples of the treatment applied to water include purification, heating, sterilization, filtration, ion exchange, osmotic pressure adjustment, buffering, and the like. Therefore, the water that can be used as the extraction solvent in the present invention includes purified water, hot water, ion-exchanged water, physiological saline, phosphate buffer, phosphate buffered saline, and the like.

抽出溶媒として使用し得る親水性有機溶媒としては、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール等の炭素数1〜5の低級脂肪族アルコール;アセトン、メチルエチルケトン等の低級脂肪族ケトン;1,3−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等の炭素数2〜5の多価アルコール等が挙げられる。   Examples of hydrophilic organic solvents that can be used as extraction solvents include lower aliphatic alcohols having 1 to 5 carbon atoms such as methanol, ethanol, propyl alcohol, and isopropyl alcohol; lower aliphatic ketones such as acetone and methyl ethyl ketone; 1,3-butylene. Examples thereof include polyhydric alcohols having 2 to 5 carbon atoms such as glycol, propylene glycol and glycerin.

2種以上の極性溶媒の混合液を抽出溶媒として使用する場合、その混合比は適宜調整することができる。例えば、水と低級脂肪族アルコールとの混合液を使用する場合には、水10質量部に対して低級脂肪族アルコール1〜90質量部を混合することが好ましく、水と低級脂肪族ケトンとの混合液を使用する場合には、水10質量部に対して低級脂肪族ケトン1〜40質量部を混合することが好ましく、水と多価アルコールとの混合液を使用する場合には、水10質量部に対して多価アルコール10〜90質量部を混合することが好ましい。   When using the liquid mixture of 2 or more types of polar solvents as an extraction solvent, the mixing ratio can be adjusted suitably. For example, when using a liquid mixture of water and a lower aliphatic alcohol, it is preferable to mix 1 to 90 parts by weight of a lower aliphatic alcohol with respect to 10 parts by weight of water. When using a mixed solution, it is preferable to mix 1 to 40 parts by mass of a lower aliphatic ketone with 10 parts by mass of water, and when using a mixed solution of water and a polyhydric alcohol, water 10 It is preferable to mix 10 to 90 parts by mass of polyhydric alcohol with respect to parts by mass.

抽出処理は、抽出原料に含まれる可溶性成分を抽出溶媒に溶出させ得る限り特に限定はされず、常法に従って行うことができる。例えば、抽出原料の5〜15倍量(質量比)の抽出溶媒に、抽出原料を浸漬し、常温又は還流加熱下で可溶性成分を抽出させた後、濾過して抽出残渣を除去することにより抽出液を得ることができる。得られた抽出液は、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、該抽出液の乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物を得るために、常法に従って希釈、濃縮、乾燥、精製等の処理を施してもよい。   The extraction treatment is not particularly limited as long as the soluble component contained in the extraction raw material can be eluted in the extraction solvent, and can be performed according to a conventional method. For example, the extraction raw material is immersed in an extraction solvent 5 to 15 times (mass ratio) of the extraction raw material, the soluble components are extracted at room temperature or under reflux, and then filtered to remove the extraction residue. A liquid can be obtained. The obtained extract is diluted, concentrated, dried, purified, etc. according to a conventional method in order to obtain a diluted or concentrated solution of the extract, a dried product of the extract, or a crude purified product or a purified product thereof. Processing may be performed.

精製は、例えば、活性炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換樹脂処理等により行うことができる。得られた抽出液はそのままでも抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤又は抗男性ホルモン剤の有効成分として使用することができるが、濃縮液又は乾燥物としたものの方が使用しやすい。   Purification can be performed by, for example, activated carbon treatment, adsorption resin treatment, ion exchange resin treatment, or the like. The obtained extract can be used as it is as an active ingredient of an anti-inflammatory agent, an anti-aging agent, a hair-restoring agent, or an anti-androgen hormone, but a concentrated solution or a dried product is easier to use.

湖南甜茶からの抽出物は、特有の匂いを有しているため、その生理活性の低下を招かない範囲で脱色、脱臭等を目的とする精製を行うことも可能であるが、皮膚化粧料又は頭髪化粧料に配合する場合には大量に使用するものではないから、未精製のままでも実用上支障はない。   Since the extract from Hunan coffee tea has a characteristic odor, it can be purified for the purpose of decolorization, deodorization, etc. within a range that does not cause a decrease in its physiological activity. Since it is not used in a large amount when blended into hair cosmetics, there is no practical problem even if it is not purified.

以上のようにして得られる湖南甜茶からの抽出物から、当該抽出物の酸加水分解物を得る方法は、特に限定されるものではなく、具体的には、以下のようにして得ることができる。   The method for obtaining the acid hydrolyzate of the extract from the extract from Hunan 甜 tea obtained as described above is not particularly limited, and specifically, it can be obtained as follows. .

湖南甜茶からの抽出物に酸と親水性有機溶媒との混合溶媒を添加し、還流加熱下で反応させ、得られた反応物を、多孔性吸着剤を充填したカラムクロマトグラフィーに付し、水、炭素数1〜5の低級脂肪族アルコール(例えば、メタノール、エタノール等)の順で溶出させ、低級脂肪族アルコールの画分として得ることができる。そして、得られた画分から溶媒を留去することにより湖南甜茶抽出物の酸加水分解物を得ることができる。   A mixed solvent of an acid and a hydrophilic organic solvent is added to the extract from Hunan coffee tea, and the mixture is reacted under reflux heating. The obtained reaction product is subjected to column chromatography packed with a porous adsorbent, and water. The lower aliphatic alcohol having 1 to 5 carbon atoms (eg, methanol, ethanol, etc.) is eluted in this order to obtain a fraction of the lower aliphatic alcohol. And the acid hydrolyzate of Hunan persimmon tea extract can be obtained by distilling a solvent off from the obtained fraction.

混合溶媒中の酸は、特に限定されるものではなく、例えば、塩酸、硫酸、硝酸、酢酸等を用いることができる。また、混合溶媒中の親水性有機溶媒も、特に限定されるものではなく、例えば、メタノール、エタノール、ブタノール、イソプロパノール、アセトニトリル等を用いることができる。   The acid in the mixed solvent is not particularly limited, and for example, hydrochloric acid, sulfuric acid, nitric acid, acetic acid and the like can be used. Further, the hydrophilic organic solvent in the mixed solvent is not particularly limited, and for example, methanol, ethanol, butanol, isopropanol, acetonitrile and the like can be used.

以上のようにして得られる湖南甜茶抽出物又は当該抽出物の酸加水分解物は、抗炎症作用、抗老化作用、育毛作用又は抗男性ホルモン作用を有しているため、それぞれの作用を利用して抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤又は抗男性ホルモン剤の有効成分として用いることができ、その場合、それぞれ単独で用いてもよいし、それらを混合して用いてもよい。湖南甜茶抽出物と当該抽出物の酸加水分解物とを混合して用いる場合、それらの混合比は特に限定されるものではない。   Since the Hunan coffee tea extract or acid hydrolyzate of the extract obtained as described above has an anti-inflammatory action, an anti-aging action, a hair growth action or an anti-androgen action, each action is used. Thus, it can be used as an active ingredient of an anti-inflammatory agent, an anti-aging agent, a hair-restoring agent or an anti-androgenic agent. In that case, they may be used alone or in combination. In the case of using a mixture of Hunan 甜 tea extract and the acid hydrolyzate of the extract, the mixing ratio is not particularly limited.

湖南甜茶抽出物又は当該抽出物の酸加水分解物が有する抗炎症作用は、例えば、TNF−α産生抑制作用、ヒアルロニダーゼ活性阻害作用、ヘキソサミニダーゼ遊離抑制作用及び血小板凝集抑制作用からなる群より選ばれる1種又は2種以上の作用に基づいて発揮される。ただし、湖南甜茶抽出物又は当該抽出物の酸加水分解物が有する抗炎症作用は、これらの作用に基づいて発揮される抗炎症作用に限定されるものではない。   The anti-inflammatory action of the Hunan coffee tea extract or the acid hydrolyzate of the extract is, for example, from the group consisting of TNF-α production inhibitory action, hyaluronidase activity inhibitory action, hexosaminidase release inhibitory action, and platelet aggregation inhibitory action It is exhibited based on one or more selected actions. However, the anti-inflammatory action which Hunan coffee tea extract or the acid hydrolyzate of the said extract has is not limited to the anti-inflammatory action exhibited based on these actions.

湖南甜茶抽出物が有する抗老化作用は、例えば、紫外線照射によるダメージ回復作用に基づいて発揮され、当該抽出物の酸加水分解物が有する抗老化作用は、例えば、エストロゲン様作用、IV型コラーゲン産生促進作用、紫外線照射によるダメージ回復作用及びトランスグルタミナーゼ−1産生促進作用からなる群より選ばれる1種又は2種以上の作用に基づいて発揮される。ただし、湖南甜茶抽出物又は当該抽出物の酸加水分解物が有する抗老化作用は、これらの作用に基づいて発揮される抗老化作用に限定されるものではない。   The anti-aging effect of the Hunan coffee tea extract is demonstrated based on, for example, the damage recovery effect by ultraviolet irradiation, and the anti-aging action of the acid hydrolyzate of the extract is, for example, estrogenic action, type IV collagen production It is exhibited based on one or more actions selected from the group consisting of a promoting action, a damage recovery action by ultraviolet irradiation, and a transglutaminase-1 production promoting action. However, the anti-aging action of the Hunan 甜 tea extract or the acid hydrolyzate of the extract is not limited to the anti-aging action exhibited based on these actions.

湖南甜茶抽出物が有する育毛作用は、例えば、テストステロン5α−レダクターゼ阻害作用及び/又はアンドロゲン受容体結合阻害作用に基づいて発揮され、当該抽出物の酸加水分解物が有する育毛作用は、例えば、テストステロン5α−レダクターゼ阻害作用に基づいて発揮される。ただし、湖南甜茶抽出物又は当該抽出物の酸加水分解物が有する育毛作用は、これらの作用に基づいて発揮される育毛作用に限定されるものではない。   The hair-growth action of the Hunan coffee tea extract is exhibited based on, for example, testosterone 5α-reductase inhibitory action and / or androgen receptor binding inhibitory action. The hair-growth action of the acid hydrolyzate of the extract is, for example, testosterone It is exhibited based on the 5α-reductase inhibitory action. However, the hair-restoring action of the Hunan coffee tea extract or the acid hydrolyzate of the extract is not limited to the hair-restoring action exhibited based on these actions.

湖南甜茶抽出物が有する抗男性ホルモン作用は、例えば、テストステロン5α−レダクターゼ阻害作用及び/又はアンドロゲン受容体結合阻害作用に基づいて発揮され、当該抽出物の酸加水分解物が有する抗男性ホルモン作用は、例えば、テストステロン5α−レダクターゼ阻害作用に基づいて発揮される。ただし、湖南甜茶抽出物又は当該抽出物の酸加水分解物が有する抗男性ホルモン作用は、これらの作用に基づいて発揮される抗男性ホルモン作用に限定されるものではない。   The antiandrogenic action of the Hunan coffee extract is exhibited based on, for example, testosterone 5α-reductase inhibitory action and / or androgen receptor binding inhibitory action, and the antiandrogen action of the acid hydrolyzate of the extract is For example, it is exhibited based on testosterone 5α-reductase inhibitory action. However, the antiandrogen action which Hunan coconut tea extract or the acid hydrolyzate of the said extract has is not limited to the antiandrogen action which is exhibited based on these actions.

なお、湖南甜茶抽出物は、TNF−α産生抑制作用、ヒアルロニダーゼ活性阻害作用、ヘキソサミニダーゼ遊離抑制作用、血小板凝集抑制作用、紫外線照射によるダメージ回復作用、テストステロン5α−レダクターゼ阻害作用又はアンドロゲン受容体結合阻害作用を有するため、それらの作用を通じて、TNF−α産生抑制剤、ヒアルロニダーゼ活性阻害剤、ヘキソサミニダーゼ遊離抑制剤、血小板凝集抑制剤、紫外線照射によるダメージ回復剤、テストステロン5α−レダクターゼ阻害剤又はアンドロゲン受容体結合阻害剤の有効成分として使用してもよい。   In addition, Hunan 甜 tea extract is a TNF-α production inhibitory action, a hyaluronidase activity inhibitory action, a hexosaminidase release inhibitory action, a platelet aggregation inhibitory action, a damage recovery action by UV irradiation, a testosterone 5α-reductase inhibitory action or an androgen receptor. Since it has a binding inhibitory action, through these actions, a TNF-α production inhibitor, a hyaluronidase activity inhibitor, a hexosaminidase release inhibitor, a platelet aggregation inhibitor, an ultraviolet radiation damage recovery agent, a testosterone 5α-reductase inhibitor Or you may use as an active ingredient of an androgen receptor binding inhibitor.

また、湖南甜茶抽出物の酸加水分解物は、TNF−α産生抑制作用、ヒアルロニダーゼ活性阻害作用、ヘキソサミニダーゼ遊離抑制作用、血小板凝集抑制作用、エストロゲン様作用、IV型コラーゲン産生促進作用、紫外線照射によるダメージ回復作用、トランスグルタミナーゼ−1産生促進作用又はテストステロン5α−レダクターゼ阻害作用を有するため、それらの作用を通じて、TNF−α産生抑制剤、ヒアルロニダーゼ活性阻害剤、ヘキソサミニダーゼ遊離抑制剤、血小板凝集抑制剤、エストロゲン様作用剤、IV型コラーゲン産生促進剤、紫外線照射によるダメージ回復剤、トランスグルタミナーゼ−1産生促進剤又はテストステロン5α−レダクターゼ阻害剤の有効成分として使用してもよい。   In addition, the acid hydrolyzate of Hunan 甜 tea extract has TNF-α production inhibitory action, hyaluronidase activity inhibitory action, hexosaminidase release inhibitory action, platelet aggregation inhibitory action, estrogen-like action, type IV collagen production promoting action, ultraviolet light It has a damage recovery action by irradiation, a transglutaminase-1 production promoting action or a testosterone 5α-reductase inhibitory action, and therefore through these actions, a TNF-α production inhibitor, a hyaluronidase activity inhibitor, a hexosaminidase release inhibitor, a platelet It may be used as an active ingredient of an aggregation inhibitor, an estrogen-like agent, a type IV collagen production promoter, a damage recovery agent by UV irradiation, a transglutaminase-1 production promoter or a testosterone 5α-reductase inhibitor.

本発明の抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤又は抗男性ホルモン剤は、湖南甜茶抽出物及び/又は当該抽出物の酸加水分解物のみからなるものであってもよいし、湖南甜茶抽出物及び/又は当該抽出物の酸加水分解物から製剤化したものであってもよい。   The anti-inflammatory agent, anti-aging agent, hair-restoring agent or anti-androgenic agent of the present invention may consist of only Hunan 甜 tea extract and / or acid hydrolyzate of the extract, or Hunan 甜 tea extract. And / or may be formulated from an acid hydrolyzate of the extract.

湖南甜茶抽出物及び/又は当該抽出物の酸加水分解物は、デキストリン、シクロデキストリン等の薬学的に許容し得るキャリアーその他任意の助剤を用いて、常法に従い、粉末状、顆粒状、液状等の任意の剤形に製剤化することができる。この際、助剤としては、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯臭剤等を用いることができる。また、湖南甜茶抽出物及び/又は当該抽出物の酸加水分解物は、他の組成物(例えば、後述する皮膚化粧料、頭髪化粧料等)に配合して使用することができるほか、軟膏剤、外用液剤、貼付剤等として使用することができる。   Hunan coffee tea extract and / or acid hydrolyzate of the extract is powdery, granular, liquid in accordance with a conventional method using a pharmaceutically acceptable carrier such as dextrin, cyclodextrin or any other auxiliary agent. And can be formulated into any dosage form. In this case, as an auxiliary agent, for example, an excipient, a binder, a disintegrant, a lubricant, a stabilizer, a flavoring agent and the like can be used. Further, the Hunan coffee tea extract and / or the acid hydrolyzate of the extract can be used by blending with other compositions (for example, skin cosmetics, hair cosmetics, etc. described later), and ointments. It can be used as a solution for external use, a patch and the like.

なお、本発明の抗炎症剤は、必要に応じて、抗炎症作用を有する他の天然抽出物を配合して有効成分として用いることができる。また、本発明の抗老化剤は、必要に応じて、抗老化作用を有する他の天然抽出物を配合して有効成分として用いることができる。さらに、本発明の育毛剤は、必要に応じて、育毛作用を有する他の天然抽出物を配合して有効成分として用いることができる。さらにまた、本発明の抗男性ホルモン剤は、必要に応じて、抗男性ホルモン作用を有する他の天然抽出物を配合して有効成分として用いることができる。   In addition, the anti-inflammatory agent of this invention can mix | blend the other natural extract which has an anti-inflammatory action as needed, and can use it as an active ingredient. Moreover, the anti-aging agent of this invention can mix | blend the other natural extract which has an anti-aging effect as needed, and can use it as an active ingredient. Furthermore, the hair restoring agent of the present invention can be used as an active ingredient by blending with other natural extracts having hair restoring action, if necessary. Furthermore, the anti-androgenic agent of the present invention can be used as an active ingredient by blending with other natural extracts having anti-androgenic action as required.

本発明の抗炎症剤は、湖南甜茶抽出物及び/又は当該抽出物の酸加水分解物が有するTNF−α産生抑制作用、ヒアルロニダーゼ活性阻害作用、ヘキソサミニダーゼ遊離抑制作用及び血小板凝集抑制作用からなる群より選ばれる1種又は2種以上の作用を通じて、接触性皮膚炎(かぶれ)、乾癬、尋常性天疱瘡、その他肌荒れを伴う各種炎症性皮膚疾患等を予防、治療又は改善することができる。ただし、本発明の抗炎症剤は、これらの用途以外にもTNF−α産生抑制作用、ヒアルロニダーゼ活性阻害作用、ヘキソサミニダーゼ遊離抑制作用及び血小板凝集抑制作用からなる群より選ばれる1種又は2種以上の作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。   The anti-inflammatory agent of the present invention is based on the TNF-α production inhibitory action, hyaluronidase activity inhibitory action, hexosaminidase release inhibitory action and platelet aggregation inhibitory action possessed by the Hunan coffee tea extract and / or the acid hydrolyzate of the extract. Through one or more actions selected from the group, contact dermatitis (rash), psoriasis, pemphigus vulgaris, and other various inflammatory skin diseases with rough skin can be prevented, treated or improved. . However, the anti-inflammatory agent of the present invention is one or two selected from the group consisting of TNF-α production inhibitory action, hyaluronidase activity inhibitory action, hexosaminidase release inhibitory action and platelet aggregation inhibitory action in addition to these uses. It can be used for all purposes that are meaningful for exerting more than a kind of action.

本発明の抗老化剤は、湖南甜茶抽出物が有する紫外線照射によるダメージ回復作用、並びに湖南甜茶抽出物の酸加水分解物が有するエストロゲン様作用、IV型コラーゲン産生促進作用、紫外線照射によるダメージ回復作用及びトランスグルタミナーゼ−1産生促進作用からなる群より選ばれる1種又は2種以上の作用を通じて、皮膚の老化症状等を予防、治療又は改善することができる。ただし、本発明の抗老化剤は、これらの用途以外にもエストロゲン様作用、IV型コラーゲン産生促進作用、紫外線照射によるダメージ回復作用及びトランスグルタミナーゼ−1産生促進作用からなる群より選ばれる1種又は2種以上の作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。   The anti-aging agent of the present invention is a damage recovery effect by UV irradiation of Hunan coffee tea extract, an estrogen-like action of an acid hydrolyzate of Hunan coffee tea extract, a type IV collagen production promoting action, and a damage recovery action by UV irradiation. In addition, skin aging symptoms and the like can be prevented, treated, or ameliorated through one or more actions selected from the group consisting of a transglutaminase-1 production promoting action. However, in addition to these uses, the anti-aging agent of the present invention is one kind selected from the group consisting of an estrogen-like action, a type IV collagen production promoting action, a damage recovery action by ultraviolet irradiation, and a transglutaminase-1 production promoting action. It can be used for all purposes that are meaningful in exerting two or more kinds of actions.

本発明の育毛剤は、湖南甜茶抽出物が有するテストステロン5α−レダクターゼ阻害作用及び/若しくはアンドロゲン受容体結合阻害作用、又は湖南甜茶抽出物の酸加水分解物が有するテストステロン5α−レダクターゼ阻害作用を通じて、男性型脱毛症、多毛症、脂漏症、座瘡(ニキビなど)、前立腺肥大症、前立腺腫瘍、男児性早熟等を予防、治療又は改善することができ、特に男性型脱毛症の予防、治療又は改善に好適である。ただし、本発明の育毛剤は、これらの用途以外にもテストステロン5α−レダクターゼ阻害作用及び/又はアンドロゲン受容体結合阻害作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。   The hair restorer of the present invention is a male through the testosterone 5α-reductase inhibitory action and / or androgen receptor binding inhibitory action possessed by Hunan coffee tea extract, or the testosterone 5α-reductase inhibitory action possessed by the acid hydrolyzate of Hunan coffee tea extract. Can prevent, treat or ameliorate alopecia, hirsutism, seborrhea, acne (acne etc.), benign prostatic hyperplasia, prostate tumor, premature boyhood, etc. Suitable for improvement. However, the hair-restoring agent of the present invention can be used for all purposes other than these uses that are meaningful for exerting testosterone 5α-reductase inhibitory action and / or androgen receptor binding inhibitory action.

本発明の抗男性ホルモン剤は、湖南甜茶抽出物が有するテストステロン5α−レダクターゼ阻害作用及び/若しくはアンドロゲン受容体結合阻害作用、又は湖南甜茶抽出物の酸加水分解物が有するテストステロン5α−レダクターゼ阻害作用を通じて、男性ホルモンが関与する疾患、例えば、男性型脱毛症、多毛症、脂漏症、座瘡(ニキビなど)、前立腺肥大症、前立腺腫瘍、男児性早熟等を予防、治療又は改善することができる。ただし、本発明の抗男性ホルモン剤は、これらの用途以外にもテストステロン5α−レダクターゼ阻害作用及び/又はアンドロゲン受容体結合阻害作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。   The anti-androgenic hormone agent of the present invention has a testosterone 5α-reductase inhibitory action and / or androgen receptor binding inhibitory action possessed by Hunan coffee tea extract, or a testosterone 5α-reductase inhibitory action possessed by an acid hydrolyzate of Hunan coffee tea extract. Can prevent, treat or ameliorate diseases involving male hormones, such as androgenetic alopecia, hirsutism, seborrhea, acne (acne etc.), benign prostatic hyperplasia, prostate tumor, premature boyhood, etc. . However, the anti-androgenic hormone agent of the present invention can be used for all purposes that are significant for exerting testosterone 5α-reductase inhibitory action and / or androgen receptor binding inhibitory action in addition to these uses.

〔皮膚化粧料,頭髪化粧料〕
湖南甜茶抽出物及び/又は当該抽出物の酸加水分解物は、抗炎症作用、抗老化作用、育毛作用又は抗男性ホルモン作用を有しており、皮膚又は頭髪(頭皮)に適用した場合の使用感又は安全性に優れているため、皮膚化粧料又は頭髪化粧料に配合するのに好適である。この場合、皮膚化粧料又は頭髪化粧料には、湖南甜茶抽出物及び/又は当該抽出物の酸加水分解物をそのまま配合してもよいし、湖南甜茶抽出物及び/若しくは当該抽出物の酸加水分解物から製剤化した抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤又は抗男性ホルモン剤を配合してもよい。湖南甜茶抽出物及び/又は当該抽出物の酸加水分解物;湖南甜茶抽出物及び/若しくは当該抽出物の酸加水分解物から製剤化した抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤又は抗男性ホルモン剤を配合することにより、皮膚化粧料又は頭髪化粧料に抗炎症作用、抗老化作用、育毛作用又は抗男性ホルモン作用を付与することができる。
[Skin cosmetics, hair cosmetics]
Hunan coffee tea extract and / or acid hydrolyzate of the extract has anti-inflammatory action, anti-aging action, hair-growth action or anti-androgen action and is used when applied to skin or hair (scalp) Since it is excellent in feeling or safety, it is suitable for blending into skin cosmetics or hair cosmetics. In this case, the skin cosmetics or hair cosmetics may be directly blended with Hunan coffee tea extract and / or acid hydrolyzate of the extract, or Hunan coffee tea extract and / or acid hydrolyzate of the extract. You may mix | blend the anti-inflammatory agent, anti-aging agent, hair restorer, or antiandrogen agent which were formulated from the degradation product. Hunan coffee tea extract and / or acid hydrolyzate of the extract; anti-inflammatory agent, anti-aging agent, hair restorer or anti-androgen agent formulated from Hunan coffee tea extract and / or acid hydrolyzate of the extract By blending, it is possible to impart an anti-inflammatory action, an anti-aging action, a hair-growth action or an anti-androgen action to skin cosmetics or hair cosmetics.

湖南甜茶抽出物及び/又は当該抽出物の酸加水分解物を配合し得る皮膚化粧料又は頭髪化粧料の種類は特に限定されるものではなく、皮膚化粧料としては、例えば、軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、ファンデーション等が挙げられ、また、頭髪化粧料としては、例えば、ヘアトニック、ヘアクリーム、ヘアリキッド、シャンプー、ポマード、リンス等が挙げられる。   The kind of skin cosmetics or hair cosmetics that can be blended with Hunan coffee tea extract and / or acid hydrolyzate of the extract is not particularly limited, and examples of skin cosmetics include ointments, creams, and emulsions. , Lotions, packs, foundations and the like, and examples of hair cosmetics include hair tonics, hair creams, hair liquids, shampoos, pomades, rinses, and the like.

湖南甜茶抽出物及び/又は当該抽出物の酸加水分解物を皮膚化粧料又は頭髪化粧料に配合する場合、その配合量は、皮膚化粧料又は頭髪化粧料の種類に応じて適宜調整することができるが、好適な配合率は、標準的な抽出物に換算して約0.0001〜10質量%であり、特に好適な配合率は、標準的な抽出物に換算して約0.001〜1質量%である。   When blending Hunan coffee tea extract and / or acid hydrolyzate of the extract into skin cosmetics or hair cosmetics, the blending amount can be adjusted as appropriate according to the type of skin cosmetics or hair cosmetics. However, a suitable blending rate is about 0.0001 to 10% by mass in terms of a standard extract, and a particularly suitable blending rate is about 0.001 to 10% in terms of a standard extract. 1% by mass.

本発明の皮膚化粧料又は頭髪化粧料は、湖南甜茶抽出物及び/又は当該抽出物の酸加水分解物が有する抗炎症作用、抗老化作用、育毛作用又は抗男性ホルモン作用を妨げない限り、通常の皮膚化粧料又は頭髪化粧料の製造に用いられる主剤、助剤又はその他の成分、例えば、収斂剤、殺菌・抗菌剤、紫外線吸収剤、保湿剤、細胞賦活剤、消炎・抗アレルギー剤、抗酸化・活性酸素除去剤、油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、香料等を併用することができる。このように併用することで、より一般性のある製品となり、また、併用された上記成分との間の相乗作用が通常期待される以上の優れた使用効果をもたらすことがある。   Unless the skin cosmetic or hair cosmetic of the present invention interferes with the anti-inflammatory action, anti-aging action, hair-growth action or anti-androgen action of the Hunan coffee tea extract and / or acid hydrolyzate of the extract, Main agents, auxiliaries or other ingredients used in the manufacture of skin cosmetics or hair cosmetics such as astringents, bactericides / antibacterial agents, ultraviolet absorbers, moisturizers, cell activators, anti-inflammatory / anti-allergic agents, Oxidizing / active oxygen scavengers, fats and oils, waxes, hydrocarbons, fatty acids, alcohols, esters, surfactants, fragrances and the like can be used in combination. By using together, it becomes a more general product, and the synergistic action between the above-mentioned components used in combination may bring about a superior use effect than would normally be expected.

本発明の皮膚化粧料は、高い安全性を有しており、かつ抗炎症作用、抗老化作用及び抗男性ホルモン作用からなる群より選ばれる1種又は2種以上の作用を通じて、接触性皮膚炎(かぶれ)、乾癬、尋常性天疱瘡、その他肌荒れを伴う各種炎症性皮膚疾患、皮膚の老化症状、脂漏症、座瘡(ニキビ等)等を予防、治療又は改善することができる。また、本発明の頭髪化粧料は、高い安全性を有しており、かつ育毛作用及び/又は抗男性ホルモン作用を通じて、男性型脱毛症等を予防・改善することができる。   The skin cosmetic of the present invention has high safety, and through one or more actions selected from the group consisting of an anti-inflammatory action, an anti-aging action and an anti-androgen action, contact dermatitis (Rash), psoriasis, pemphigus vulgaris, other inflammatory skin diseases with rough skin, skin aging symptoms, seborrhea, acne (acne etc.), etc. can be prevented, treated or improved. Moreover, the hair cosmetic composition of the present invention has high safety, and can prevent and improve male pattern baldness and the like through a hair growth action and / or an antiandrogenic action.

なお、本発明の抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤、抗男性ホルモン剤、皮膚化粧料又は頭髪化粧料は、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、それぞれの作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物に対して適用することもできる。   The anti-inflammatory agent, anti-aging agent, hair-restoring agent, anti-androgen agent, skin cosmetic or hair cosmetic of the present invention is preferably applied to humans, but has the respective effects. It can also be applied to animals other than humans as long as possible.

以下、製造例、試験例及び配合例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の各例に何ら制限されるものではない。   Hereinafter, although a manufacture example, a test example, and a compounding example are shown and this invention is demonstrated concretely, this invention is not restrict | limited to each following example at all.

〔製造例1〕湖南甜茶抽出物の製造
細切りにした湖南甜茶の葉部の乾燥物400gに50質量%エタノール4000mLを加え、還流抽出器で80℃にて2時間加熱抽出し、熱時濾過した。残渣についてさらに同様の抽出処理をした。得られた抽出液を合わせて減圧下で濃縮し、さらに乾燥して湖南甜茶抽出物90.4gを得た(試料1)。
[Production Example 1] Manufacture of Hunan coffee tea extract 4000 ml of 50% ethanol by weight was added to 400 g of dried dried leaves of Hunan coffee tea, heated and extracted at 80 ° C for 2 hours with a reflux extractor, and filtered while hot. . The residue was further extracted in the same manner. The obtained extracts were combined, concentrated under reduced pressure, and further dried to obtain 90.4 g of a Konan tea extract (sample 1).

〔製造例2〕湖南甜茶抽出物の酸加水分解物の製造
製造例1で得られた湖南甜茶抽出物5.0gに、95質量%メタノールと5質量%塩酸とを混合した混合溶媒50mL(混合比(質量基準)=1:1.7)を加え、加熱還流下にて、2時間反応させた。反応終了後に水1000mLを加え、ダイヤイオンHP−20(三菱化学社製)カラムに付し、水、メタノールの順で溶出し、メタノール画分として酸加水分解物2.8gを得た(試料2)。
[Production Example 2] Production of acid hydrolyzate of Hunan coffee tea extract 50 ml of a mixed solvent obtained by mixing 95% by weight methanol and 5% by weight hydrochloric acid with 5.0 g of Hunan coffee tea extract obtained in Production Example 1. Ratio (mass basis) = 1: 1.7), and the mixture was reacted for 2 hours under heating and reflux. After completion of the reaction, 1000 mL of water was added, applied to a Diaion HP-20 (Mitsubishi Chemical Corporation) column, and eluted in the order of water and methanol to obtain 2.8 g of an acid hydrolyzate as a methanol fraction (Sample 2). ).

〔試験例1〕TNF−α産生抑制作用試験
製造例1及び製造例2で得られた各試料(試料1,2)について、以下のようにしてTNF−α産生抑制作用を試験した。
[Test Example 1] TNF-α production inhibitory action test Each sample (Samples 1 and 2) obtained in Production Example 1 and Production Example 2 was tested for TNF-α production inhibitory action as follows.

マウスマクロファージ細胞(RAW264.7)を、10%FBS含有ダルベッコMEM培地を用いて培養した後、セルスクレーパーにより細胞を回収した。回収した細胞を1.0×10cells/mLの細胞密度になるように10%FBS含有ダルベッコMEM培地で希釈した後、96ウェルプレートに1ウェルあたり100μLずつ播種し、4時間培養した。 After culturing mouse macrophage cells (RAW264.7) using Dulbecco's MEM medium containing 10% FBS, the cells were collected with a cell scraper. The collected cells were diluted with Dulbecco's MEM medium containing 10% FBS to a cell density of 1.0 × 10 6 cells / mL, then seeded at 100 μL per well in a 96-well plate, and cultured for 4 hours.

培養終了後、培地を抜き、終濃度2%DMSOを含む10%FBS含有ダルベッコMEM培地を用いて溶解した試料溶液(試料1,2)を各ウェルに100μLずつ添加し、終濃度1μg/mLで10%FBS含有ダルベッコMEMに溶解したリポポリサッカライド(LPS,E.coli0111;B4,DIFCO社製)を100μL加え、24時間培養した。培養終了後、各ウェルの培養上清中のTNF−α量を、サンドイッチELISA法を用いて測定し、測定結果から下記式によりTNF−α産生抑制率(%)を算出した。   After completion of the culture, the medium was removed, and 100 μL of a sample solution (samples 1 and 2) dissolved using Dulbecco's MEM medium containing 10% FBS containing 2% DMSO at a final concentration was added to each well at a final concentration of 1 μg / mL. 100 μL of lipopolysaccharide (LPS, E. coli 0111; B4, manufactured by DIFCO) dissolved in Dulbecco MEM containing 10% FBS was added and cultured for 24 hours. After completion of the culture, the amount of TNF-α in the culture supernatant of each well was measured using a sandwich ELISA method, and the TNF-α production inhibition rate (%) was calculated from the measurement result according to the following formula.

TNF−α産生抑制率(%)={(B−A)/B}×100
式中、Aは「試料溶液添加時のTNF−α量」を表し、Bは「試料溶液無添加時のTNF−α量」を表す。
TNF-α production inhibition rate (%) = {(B−A) / B} × 100
In the formula, A represents “a TNF-α amount when a sample solution is added”, and B represents a “a TNF-α amount when a sample solution is not added”.

試料溶液の濃度を段階的に減少させて、各濃度におけるTNF−α産生抑制率を算出し、その結果から内挿法により、TNF−αの産生を50%阻害する試料濃度IC50(μg/mL)を求めた。
結果を表1に示す。
The concentration of the sample solution is decreased stepwise to calculate the TNF-α production suppression rate at each concentration, and the sample concentration IC 50 (μg / g) that inhibits TNF-α production by 50% from the result is calculated. mL).
The results are shown in Table 1.

[表1]
試 料 IC 50 (μg/mL)
試料1 200
試料2 50
[Table 1]
Sample IC 50 (μg / mL)
Sample 1 200
Sample 2 50

表1に示すように、湖南甜茶抽出物(試料1)及びその酸加水分解物(試料2)は優れたTNF−α産生抑制作用を有することが確認された。また、TNF−α産生抑制作用の程度は、湖南甜茶抽出物及び/又はその酸加水分解物の濃度によって調節できることが確認された。   As shown in Table 1, it was confirmed that Hunan 甜 tea extract (sample 1) and its acid hydrolyzate (sample 2) have an excellent TNF-α production inhibitory action. In addition, it was confirmed that the degree of TNF-α production inhibitory action can be adjusted by the concentration of Hunan 甜 tea extract and / or its acid hydrolyzate.

〔試験例2〕ヒアルロニダーゼ活性阻害作用試験
製造例1及び製造例2で得られた各試料(試料1,2)について、以下のようにしてヒアルロニダーゼ活性阻害作用を試験した。
Test Example 2 Hyaluronidase Activity Inhibitory Action Test Each sample (Samples 1 and 2) obtained in Production Example 1 and Production Example 2 was tested for hyaluronidase activity inhibitory action as follows.

試料(試料1,2)を溶解した0.1mol/Lの酢酸緩衝液(pH3.5)0.2mL(試料濃度;400μg/mL)にヒアルロニダーゼ溶液(Type IV-S(from bovine testis),SIGMA社製,400NFU/mL)0.1mLを加え、37℃で20分間反応させた。さらに、活性化剤として2.5mmol/Lの塩化カルシウム0.2mLを加え、37℃で20分間反応させた。これに0.4mg/mLのヒアルロン酸カリウム溶液(from Rooster Comb)0.5mLを加え、37℃で40分間反応させた。   A hyaluronidase solution (Type IV-S (from bovine testis), SIGMA) was added to 0.2 mL (sample concentration: 400 μg / mL) of 0.1 mol / L acetate buffer (pH 3.5) in which the samples (Samples 1 and 2) were dissolved. (0.1N, 400 NFU / mL) was added and reacted at 37 ° C. for 20 minutes. Furthermore, 0.2 mL of 2.5 mmol / L calcium chloride was added as an activator and reacted at 37 ° C. for 20 minutes. To this, 0.5 mL of 0.4 mg / mL potassium hyaluronate solution (from Rooster Comb) was added and reacted at 37 ° C. for 40 minutes.

その後、0.4mol/L水酸化ナトリウムを0.2mL加えて反応を停止し、冷却した後、各反応溶液にホウ酸溶液0.2mLを加え、3分間煮沸した。氷冷後、p−DABA試薬6mLを加え、37℃で20分間反応させた。その後、波長585nmにおける吸光度を測定した。同様の方法で空試験を行い補正した。得られた測定結果から、下記式によりヒアルロニダーゼ活性阻害率(%)を算出した。   Thereafter, 0.2 mL of 0.4 mol / L sodium hydroxide was added to stop the reaction, and after cooling, 0.2 mL of boric acid solution was added to each reaction solution and boiled for 3 minutes. After cooling with ice, 6 mL of p-DABA reagent was added and reacted at 37 ° C. for 20 minutes. Thereafter, the absorbance at a wavelength of 585 nm was measured. A blank test was performed and corrected in the same manner. From the obtained measurement results, the hyaluronidase activity inhibition rate (%) was calculated by the following formula.

阻害率(%)={1−(St−Sb)/(Ct−Cb)}×100
式中、Stは「試料溶液の波長585nmにおける吸光度」を表し、Sbは「試料溶液ブランクの波長585nmにおける吸光度」を表し、Ctは「コントロール溶液の波長585nmにおける吸光度」を表し、Cbは「コントロール溶液ブランクの波長585nmにおける吸光度」を表す。
結果を表2に示す。
Inhibition rate (%) = {1− (St−Sb) / (Ct−Cb)} × 100
In the formula, St represents “absorbance of the sample solution at a wavelength of 585 nm”, Sb represents “absorbance of the sample solution at a wavelength of 585 nm”, Ct represents “absorbance of the control solution at a wavelength of 585 nm”, and Cb represents “control”. The absorbance of the solution blank at a wavelength of 585 nm is expressed.
The results are shown in Table 2.

[表2]
試 料 ヒアルロニダーゼ活性阻害率(%)
試料1 25.8
試料2 95.3
[Table 2]
Sample Hyaluronidase activity inhibition rate (%)
Sample 1 25.8
Sample 2 95.3

表2に示す結果から、湖南甜茶抽出物(試料1)及びその酸加水分解物(試料2)は優れたヒアルロニダーゼ活性阻害作用を有することが確認された。   From the results shown in Table 2, it was confirmed that Hunan 甜 tea extract (sample 1) and its acid hydrolyzate (sample 2) have an excellent hyaluronidase activity inhibitory action.

〔試験例3〕ヘキソサミニダーゼ遊離抑制作用試験
製造例1及び製造例2で得られた各試料(試料1,2)について、以下のようにしてヘキソサミニダーゼ遊離抑制作用を試験した。
[Test Example 3] Hexosaminidase release inhibitory action test Each sample (Samples 1 and 2) obtained in Production Example 1 and Production Example 2 was tested for hexosaminidase release inhibitory action as follows.

ラット好塩基球白血病細胞(RBL−2H3)を15%FBS添加S−MEM培地を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を4.0×10cells/mLの細胞密度に希釈し、終濃度0.5μg/mLとなるようにDNP-specific IgEを添加した後、96ウェルプレートに1ウェルあたり100μLずつ播種し、一晩培養した。 Rat basophil leukemia cells (RBL-2H3) were cultured in S-MEM medium supplemented with 15% FBS, and then cells were collected by trypsin treatment. The collected cells are diluted to a cell density of 4.0 × 10 5 cells / mL, DNP-specific IgE is added to a final concentration of 0.5 μg / mL, and then seeded at 100 μL per well in a 96-well plate. And cultured overnight.

培養終了後、培地を抜き、シリガリアン緩衝液500μLにて洗浄を2回行った。次に、同緩衝液30μL及び同緩衝液にて調製した試料溶液10μLを加え、37℃にて10分間静置した。その後、100ng/mLのDNP−BSA溶液10μLを加え、37℃にて15分間静置し、ヘキソサミニダーゼを遊離させた。その後、96ウェルプレートを氷上に静置することにより遊離を停止した。各ウェルの細胞上清10μL及び1mmol/Lのp−NAG(p−ニトロフェニル−N−アセチル−β−D−グルコサイド)溶液10μLを、新たな96ウェルプレートに添加し、37℃で1時間反応させた。反応終了後、各ウェルに0.1mol/LのNaCO/NaHCO250μLを加え、波長415nmにおける吸光度を測定した。また、空試験として、細胞上清10μLと、0.1mol/LのNaCO/NaHCO250μLとの混合液の波長415nmにおける吸光度を測定し、補正した。得られた測定結果から、下記式によりヘキソサミニダーゼ遊離抑制率(%)を算出した。 After completion of the culture, the medium was removed and washed twice with 500 μL of Siligalian buffer. Next, 30 μL of the same buffer solution and 10 μL of the sample solution prepared with the same buffer solution were added, and the mixture was allowed to stand at 37 ° C. for 10 minutes. Thereafter, 10 μL of a 100 ng / mL DNP-BSA solution was added, and the mixture was allowed to stand at 37 ° C. for 15 minutes to release hexosaminidase. Thereafter, the release was stopped by allowing the 96-well plate to stand on ice. 10 μL of cell supernatant in each well and 10 μL of 1 mmol / L p-NAG (p-nitrophenyl-N-acetyl-β-D-glucoside) solution were added to a new 96-well plate and incubated at 37 ° C. for 1 hour. Reacted. After completion of the reaction, 250 μL of 0.1 mol / L Na 2 CO 3 / NaHCO 3 was added to each well, and the absorbance at a wavelength of 415 nm was measured. As a blank test, the absorbance at a wavelength of 415 nm of a mixed solution of 10 μL of cell supernatant and 250 μL of 0.1 mol / L Na 2 CO 3 / NaHCO 3 was measured and corrected. From the obtained measurement results, the hexosaminidase release inhibition rate (%) was calculated by the following formula.

ヘキソサミニダーゼ遊離抑制率(%)={1−(B−C)/A}×100
式中、Aは「試料無添加での波長415nmにおける吸光度」を表し、Bは「試料添加での波長415nmにおける吸光度」を表し、Cは「試料添加・p−NAG無添加での波長415nmにおける吸光度」を表す。
Inhibition rate of hexosaminidase release (%) = {1− (B−C) / A} × 100
In the formula, A represents “absorbance at a wavelength of 415 nm without addition of a sample”, B represents “absorbance at a wavelength of 415 nm with addition of a sample”, and C represents “at a wavelength of 415 nm with addition of a sample and no p-NAG added”. Absorbance ".

試料溶液の濃度を段階的に減少させて上記ヘキソサミニダーゼ遊離抑制率を算出し、その結果から内挿法により、ヘキソサミニダーゼの遊離を50%阻害する試料濃度IC50(μg/mL)を求めた。
結果を表3に示す。
The concentration of the sample solution is decreased stepwise to calculate the hexosaminidase release inhibition rate, and the sample concentration IC 50 (μg / mL) that inhibits hexosaminidase release by 50% from the result is calculated. )
The results are shown in Table 3.

[表3]
試 料 IC 50 (μg/ml)
試料1 406
試料2 40.9
[Table 3]
Sample IC 50 (μg / ml)
Sample 1 406
Sample 2 40.9

表3に示す結果から、湖南甜茶抽出物(試料1)及びその酸加水分解物(試料2)は優れたヘキソサミニダーゼ遊離抑制作用を有することが確認された。また、ヘキソサミニダーゼ遊離抑制作用の程度は、湖南甜茶抽出物及び/又はその酸加水分解物の濃度によって調節できることが確認された。   From the results shown in Table 3, it was confirmed that Hunan 甜 tea extract (sample 1) and its acid hydrolyzate (sample 2) have an excellent hexosaminidase release inhibitory action. Moreover, it was confirmed that the degree of hexosaminidase release inhibitory action can be adjusted by the concentration of Hunan 甜 tea extract and / or its acid hydrolyzate.

〔試験例4〕血小板凝集抑制作用試験
製造例1及び製造例2で得られた各試料(試料1,2)について、以下のようにして血小板凝集抑制作用を試験した。
[Test Example 4] Platelet aggregation inhibitory action test Each sample (Samples 1 and 2) obtained in Production Example 1 and Production Example 2 was tested for platelet aggregation inhibitory action as follows.

(1)血小板浮遊液の調製
採血したウサギの血液に77mmol/LのEDTA(pH7.4)を1/10量加えて、遠心(180×g,10分,室温)して血小板浮遊液(P.R.P.)を得た。さらに遠心(810×g,10分,4℃)し、上清を除去して血小板を得た。これを血小板洗浄液(0.15mol/Lの塩化ナトリウムと、0.15mol/Lのトリス塩酸緩衝液(pH7.4)と、77mmol/LのEDTA溶液(pH7.4)とを90:8:2で混合)に浮遊させ、上記と同様に遠心し、得られた血小板を血小板浮遊液(145mmol/Lの塩化ナトリウム、5mmol/Lの塩化カリウム及び5.5mmol/Lのグルコースを含む10mmol/LのHEPES緩衝液,pH7.4)に浮遊させて血小板数を調整(3.0×10cells/μL)し、洗浄血小板浮遊液を得た。
(1) Preparation of platelet suspension 1/10 amount of 77 mmol / L EDTA (pH 7.4) was added to the collected rabbit blood, centrifuged (180 × g, 10 minutes, room temperature), and platelet suspension (P RP) was obtained. Further centrifugation (810 × g, 10 minutes, 4 ° C.) was performed, and the supernatant was removed to obtain platelets. This was washed with a platelet washing solution (0.15 mol / L sodium chloride, 0.15 mol / L Tris-HCl buffer (pH 7.4), and 77 mmol / L EDTA solution (pH 7.4) in 90: 8: 2. The resulting platelets were centrifuged in the same manner as above, and the resulting platelets were suspended in platelets (10 mmol / L containing 145 mmol / L sodium chloride, 5 mmol / L potassium chloride and 5.5 mmol / L glucose). The platelet count was adjusted (3.0 × 10 5 cells / μL) by suspending in HEPES buffer (pH 7.4) to obtain a washed platelet suspension.

(2)血小板凝集抑制作用試験
得られた洗浄血小板浮遊液222μLに200mmol/Lの塩化カルシウム溶液1μLを加え、37℃で1分間反応させた。これに試料溶液2μLを加え、さらに2分間反応させ、撹拌子を入れて1分間撹拌した後、コラーゲン溶液を25μL添加して、37℃の温度条件下で10分間の血小板凝集率を測定した。また、コントロールとして試料溶液を添加しない以外は同様にして血小板凝集率を測定した。得られた測定結果から、下記式により、血小板凝集抑制率(%)を算出した。
(2) Platelet aggregation inhibitory action test 1 μL of 200 mmol / L calcium chloride solution was added to 222 μL of the obtained washed platelet suspension and reacted at 37 ° C. for 1 minute. 2 μL of the sample solution was added thereto, and the mixture was further reacted for 2 minutes. After a stir bar was added and stirred for 1 minute, 25 μL of the collagen solution was added, and the platelet aggregation rate for 10 minutes was measured at a temperature of 37 ° C. As a control, the platelet aggregation rate was measured in the same manner except that no sample solution was added. From the measurement results obtained, the platelet aggregation inhibition rate (%) was calculated by the following formula.

血小板凝集抑制率(%)=(A−B)/A×100
式中、Aは「コントロールの血小板凝集率」を表し、Bは「試料添加時の血小板凝集率」を表す。
結果を表4に示す。
Platelet aggregation inhibition rate (%) = (A−B) / A × 100
In the formula, A represents “control platelet aggregation rate”, and B represents “platelet aggregation rate at the time of sample addition”.
The results are shown in Table 4.

[表4]
試 料 試料濃度(μg/mL) 血小板凝集抑制率(%)
試料1 25 69.6
試料2 400 19.6
[Table 4]
Specimen sample concentration ([mu] g / mL) platelet aggregation inhibition rate (%)
Sample 1 25 69.6
Sample 2 400 19.6

表4に示す結果から、湖南甜茶抽出物(試料1)及びその酸加水分解物(試料2)は、血小板凝集抑制作用を有することが確認された。特に、湖南甜茶抽出物(試料1)は、優れた血小板凝集抑制率を有することが確認された。   From the results shown in Table 4, it was confirmed that Hunan 甜 tea extract (sample 1) and its acid hydrolyzate (sample 2) have a platelet aggregation inhibitory action. In particular, it was confirmed that Hunan 甜 tea extract (Sample 1) has an excellent platelet aggregation inhibition rate.

〔試験例5〕エストロゲン様作用試験
製造例2で得られた試料2について、以下のようにしてエストロゲン様作用を試験した。
[Test Example 5] Estrogen-like action test Sample 2 obtained in Production Example 2 was tested for estrogen-like action as follows.

ヒト乳癌由来細胞(MCF−7)を、10%FBS、1%NEAA及び1mmoL/Lのピルビン酸ナトリウムを含有するMEM培地を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を活性炭処理した10%FBS、1%NEAA及び1mmol/Lのピルビン酸ナトリウムを含有し、フェノールレッドを含有しないMEM(T−MEM)培地を用いて、3.0×10cells/mLの細胞密度に希釈した後、48ウェルプレートに1ウェルあたり450μLずつ播種し、細胞を定着させるため培養した。 Human breast cancer-derived cells (MCF-7) were cultured in a MEM medium containing 10% FBS, 1% NEAA and 1 mmoL / L sodium pyruvate, and then cells were collected by trypsin treatment. The collected cells were treated with activated carbon-treated 10% FBS, 1% NEAA and 1 mmol / L sodium pyruvate, and the phenol red-free MEM (T-MEM) medium was used at 3.0 × 10 4 cells / After dilution to a cell density of mL, the cells were seeded at 450 μL per well in a 48-well plate and cultured to establish the cells.

6時間後(0日目)にT−MEMで終濃度の10倍に調製した試料溶液(試料濃度:12.5μg/mL)を各ウェルに50μLずつ添加し、培養を続けた。3日目に培地を抜き、T−MEMで終濃度に調製した試料溶液を各ウェルに0.5mLずつ添加し、さらに培養を続けた。   Six hours later (day 0), 50 μL of a sample solution (sample concentration: 12.5 μg / mL) prepared to 10 times the final concentration with T-MEM was added to each well, and the culture was continued. On the third day, the medium was removed, 0.5 mL of the sample solution prepared to the final concentration with T-MEM was added to each well, and the culture was further continued.

エストロゲン様作用は、MTTアッセイを用いて測定した。培養終了後、培地を抜き、1%NEAA及び1mmol/Lのピルビン酸ナトリウムを含有するMEMに終濃度0.4mg/mLで溶解したMTTを各ウェルに200μLずつ添加した。2時間培養した後に、細胞内に生成したブルーホルマザンを2−プロパノール200μLで抽出した。抽出後、波長570nmにおける吸光度を測定した。同時に濁度として波長650nmにおける吸光度を測定し、両者の差をもってブルーホルマザン生成量とした。ポジティブコントロールとして、1×10−9Mエストラジオールを使用した。得られた測定結果から、下記式により、エストロゲン様作用率(%)を算出した。 Estrogen-like effects were measured using the MTT assay. After completion of the culture, the medium was removed, and 200 μL of MTT dissolved in MEM containing 1% NEAA and 1 mmol / L sodium pyruvate at a final concentration of 0.4 mg / mL was added to each well. After culturing for 2 hours, blue formazan produced in the cells was extracted with 200 μL of 2-propanol. After extraction, the absorbance at a wavelength of 570 nm was measured. At the same time, the absorbance at a wavelength of 650 nm was measured as turbidity, and the difference between the two was used as the amount of blue formazan produced. As a positive control, 1 × 10 −9 M estradiol was used. From the measurement results obtained, the estrogen-like action rate (%) was calculated by the following formula.

エストロゲン様作用率(%)=A/B×100
式中、Aは「試料添加時の吸光度」を表し、Bは「試料無添加時の吸光度」を表す。
Estrogen-like action rate (%) = A / B × 100
In the formula, A represents “absorbance when a sample is added”, and B represents “absorbance when no sample is added”.

上記式により算出した結果、湖南甜茶抽出物の酸加水分解物(試料2)のエストロゲン様作用率は、214.3±2.0%であり、湖南甜茶抽出物の酸加水分解物(試料2)は、優れたエストロゲン様作用を有することが確認された。   As a result of calculation by the above formula, the estrogen-like action rate of the acid hydrolyzate (sample 2) of Hunan 甜 tea extract is 214.3 ± 2.0%, and the acid hydrolyzate (sample 2) of Hunan 甜 tea extract ) Was confirmed to have an excellent estrogenic effect.

〔試験例6〕IV型コラーゲン産生促進作用試験
製造例2で得られた試料2について、以下のようにしてIV型コラーゲン産生促進作用を試験した。
[Test Example 6] Type IV collagen production promoting action test Sample 2 obtained in Production Example 2 was tested for type IV collagen production promoting action as follows.

ヒト正常線維芽細胞(NB1RGB)を、10%FBS含有ダルベッコMEM培地を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を1.6×10cells/mLの細胞密度になるようにダルベッコMEM培地を用いて希釈した後、96ウェルマイクロプレートに1ウェルあたり100μLずつ播種し、一晩培養した。 Human normal fibroblasts (NB1RGB) were cultured using Dulbecco's MEM medium containing 10% FBS, and then cells were collected by trypsin treatment. The collected cells were diluted with Dulbecco's MEM medium to a cell density of 1.6 × 10 5 cells / mL, then seeded at 100 μL per well in a 96-well microplate, and cultured overnight.

培養終了後、培地を抜き、0.25%FBS含有ダルベッコMEM培地に溶解した試料溶液(試料濃度:100μg/mL)を各ウェルに150μLずつ添加し、3日間培養した。培養後、各ウェルの培地中のIV型コラーゲン量をELISA法により測定した。得られた測定結果から、下記式によりIV型コラーゲン産生促進率(%)を算出した。   After completion of the culture, the medium was removed, 150 μL of a sample solution (sample concentration: 100 μg / mL) dissolved in 0.25% FBS-containing Dulbecco's MEM medium was added to each well and cultured for 3 days. After culture, the amount of type IV collagen in the medium of each well was measured by ELISA. From the obtained measurement results, the type IV collagen production promotion rate (%) was calculated by the following formula.

IV型コラーゲン産生促進率(%)=A/B×100
式中、Aは「試料添加時のIV型コラーゲン量」を表し、Bは「試料無添加時のIV型コラーゲン量」を表す。
Type IV collagen production promotion rate (%) = A / B × 100
In the formula, A represents “amount of type IV collagen when a sample is added”, and B represents “amount of type IV collagen when no sample is added”.

上記式により算出した結果、湖南甜茶抽出物の酸加水分解物(試料2)のIV型コラーゲン産生促進率は、209.3±19.2%であり、湖南甜茶抽出物の酸加水分解物(試料2)は、優れたIV型コラーゲン産生促進作用を有することが確認された。   As a result of calculation by the above formula, the rate of type IV collagen production promotion of the acid hydrolyzate (sample 2) of Hunan coffee tea extract is 209.3 ± 19.2%, and the acid hydrolyzate of Hunan coffee tea extract ( Sample 2) was confirmed to have an excellent type IV collagen production promoting effect.

〔試験例7〕紫外線照射によるダメージ回復作用試験
製造例1及び製造例2で得られた各試料(試料1,2)について、以下のようにして紫外線照射によるダメージ回復作用を試験した。
[Test Example 7] Damage recovery action test by UV irradiation The samples (Samples 1 and 2) obtained in Production Example 1 and Production Example 2 were tested for damage recovery action by UV irradiation as follows.

ヒト正常皮膚線維芽細胞(NB1RGB)を、10%FBS含有α−MEM培地を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を2.0×10cells/mLの細胞密度になるようにα−MEM培地を用いて希釈した後、48ウェルプレートに1ウェルあたり200μLずつ播種した。24時間培養後、培地を100μLのPBS(−)へ交換し、1.0J/cmのUV−Bを照射した。照射後、直ちに、PBS(−)を抜き、10%FBS含有α−MEMに溶解した試料溶液(試料濃度;100μg/mL)を各ウェルに400μLずつ添加し、24時間培養した。 Human normal skin fibroblasts (NB1RGB) were cultured using α-MEM medium containing 10% FBS, and then cells were collected by trypsin treatment. The collected cells were diluted with α-MEM medium to a cell density of 2.0 × 10 5 cells / mL, and then seeded at 200 μL per well in a 48-well plate. After culturing for 24 hours, the medium was replaced with 100 μL of PBS (−) and irradiated with 1.0 J / cm 2 of UV-B. Immediately after the irradiation, PBS (-) was taken out, 400 µL of a sample solution (sample concentration; 100 µg / mL) dissolved in 10% FBS-containing α-MEM was added to each well, and cultured for 24 hours.

紫外線(UV−B)照射によるダメージ回復作用は、MTTアッセイを用いて測定した。培養終了後、培地を抜き、終濃度0.4mg/mLで溶解したMTTを各ウェルに200μLずつ添加した。2時間培養した後に、細胞内に生成したブルーホルマザンを2−プロパノール200μLで抽出し、抽出後、波長570nmにおける吸光度を測定した。同時に濁度として波長650nmにおける吸光度を測定し、両者の差をもってブルーホルマザン生成量とした。また、同様に細胞を播種した後、UV−Bを照射しない細胞及びUV−Bを照射し試料溶液を添加しない細胞についても同様に測定し、それぞれ非照射群及び照射群とした。得られた測定結果から、下記式により、紫外線(UV−B)照射によるダメージ回復率(%)を算出した。   The damage recovery effect by ultraviolet (UV-B) irradiation was measured using an MTT assay. After completion of the culture, the medium was removed, and 200 μL of MTT dissolved at a final concentration of 0.4 mg / mL was added to each well. After culturing for 2 hours, blue formazan produced in the cells was extracted with 200 μL of 2-propanol, and after extraction, absorbance at a wavelength of 570 nm was measured. At the same time, the absorbance at a wavelength of 650 nm was measured as turbidity, and the difference between the two was used as the amount of blue formazan produced. Similarly, after seeding the cells, the cells not irradiated with UV-B and the cells irradiated with UV-B but not added with the sample solution were also measured in the same manner, and were set as a non-irradiated group and an irradiated group, respectively. From the obtained measurement results, the damage recovery rate (%) by ultraviolet (UV-B) irradiation was calculated by the following formula.

ダメージ回復率(%)={(Nt−C)−(Nt−Sa)}/(Nt−C)×100
式中、Ntは「UV−Bを照射していない細胞での吸光度」を表し、Cは「UV−Bを照射し試料溶液を添加していない細胞での吸光度」を表し、Saは「UV−Bを照射し試料溶液を添加した細胞」での吸光度を表す。
結果を表5に示す。
Damage recovery rate (%) = {(Nt−C) − (Nt−Sa)} / (Nt−C) × 100
In the formula, Nt represents “absorbance in cells not irradiated with UV-B”, C represents “absorbance in cells irradiated with UV-B but not added with a sample solution”, and Sa represents “UV Absorbance in “cells irradiated with B and added with sample solution”.
The results are shown in Table 5.

[表5]
試 料 紫外線照射によるダメージ回復率(%)
試料1 7.1±1.9
試料2 53.4±1.8
[Table 5]
Sample Damage recovery rate by UV irradiation (%)
Sample 1 7.1 ± 1.9
Sample 2 53.4 ± 1.8

表5に示すように、湖南甜茶抽出物(試料1)及びその酸加水分解物(試料2)は、紫外線照射によるダメージ回復作用を有することが確認された。特に湖南甜茶抽出物の酸加水分解物(試料2)は、優れた紫外線によるダメージ回復作用を有することが確認された。   As shown in Table 5, it was confirmed that Hunan 甜 tea extract (sample 1) and its acid hydrolyzate (sample 2) have a damage recovery effect by ultraviolet irradiation. In particular, it was confirmed that the acid hydrolyzate (sample 2) of Hunan 甜 tea extract has an excellent damage recovery action by ultraviolet rays.

〔試験例8〕トランスグルタミナーゼ−1産生促進作用試験
製造例2で得られた試料2について、以下のようにしてトランスグルタミナーゼ−1産生促進作用を試験した。
[Test Example 8] Transglutaminase-1 production promoting action test Sample 2 obtained in Production Example 2 was tested for transglutaminase-1 production promoting action as follows.

ヒト正常新生児皮膚表皮角化細胞(NHEK)を、ヒト正常新生児表皮角化細胞用培地(KGM)を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を1.0×10cells/mLの細胞密度になるようにKGMを用いて希釈した後、96ウェルプレートに1ウェルあたり100μLずつ播種し、2日間培養した。 Human normal neonatal skin epidermal keratinocytes (NHEK) were cultured using human normal neonatal epidermal keratinocyte medium (KGM), and then cells were collected by trypsin treatment. The collected cells were diluted with KGM to a cell density of 1.0 × 10 5 cells / mL, then seeded at 100 μL per well in a 96-well plate, and cultured for 2 days.

培養終了後、KGMで溶解した試料溶液(試料濃度:25μg/mL)を各ウェルに100μLずつ添加し、24時間培養した。培養終了後、培地を抜き、細胞をプレートに固定させて細胞表面に発現したトランスグルタミナーゼ−1の量を、モノクロナール抗ヒトトランスグルタミナーゼ−1抗体を用いたELISA法により測定した。得られた測定結果から、下記式によりトランスグルタミナーゼ−1産生促進率(%)を算出した。   After completion of the culture, 100 μL of a sample solution dissolved in KGM (sample concentration: 25 μg / mL) was added to each well and cultured for 24 hours. After completion of the culture, the medium was removed, the cells were fixed on a plate, and the amount of transglutaminase-1 expressed on the cell surface was measured by ELISA using a monoclonal anti-human transglutaminase-1 antibody. From the obtained measurement results, the transglutaminase-1 production promotion rate (%) was calculated by the following formula.

トランスグルタミナーゼ−1産生促進率(%)=A/B×100
式中、Aは「試料添加時の波長405nmにおける吸光度」を表し、Bは「試料無添加時の波長405nmにおける吸光度」を表す。
Transglutaminase-1 production promotion rate (%) = A / B × 100
In the formula, A represents “absorbance at a wavelength of 405 nm when a sample is added”, and B represents “absorbance at a wavelength of 405 nm when no sample is added”.

上記式により算出した結果、湖南甜茶抽出物の酸加水分解物(試料2)のトランスグルタミナーゼ−1産生促進率は、115.5±1.9%であり、湖南甜茶抽出物の酸加水分解物(試料2)は、優れたトランスグルタミナーゼ−1産生促進作用を有することが確認された。   As a result of calculation by the above formula, the transglutaminase-1 production promotion rate of the acid hydrolyzate of Hunan coffee tea extract (sample 2) is 115.5 ± 1.9%, and the acid hydrolyzate of Hunan coffee tea extract (Sample 2) was confirmed to have an excellent transglutaminase-1 production promoting action.

〔試験例9〕テストステロン5α−レダクターゼ阻害作用試験
製造例1及び製造例2で得られた各試料(試料1,2)について、以下のようにしてテストステロン5α−レダクターゼ阻害作用を試験した。
[Test Example 9] Testosterone 5α-reductase inhibitory action test Each sample (Samples 1 and 2) obtained in Production Example 1 and Production Example 2 was tested for testosterone 5α-reductase inhibitory action as follows.

蓋付V底試験管にて、テストステロン(和光純薬工業社製)4.2mgをプロピレングリコール1mLに溶解したもの20μLと、1mg/mLのNADPHを含有する5mmol/mLのトリス塩酸緩衝液(pH7.13)825μLとを混合した。   In a V-bottom test tube with a lid, 20 μL of testosterone (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) dissolved in 1 mL of propylene glycol and 5 mmol / mL Tris-HCl buffer (pH 7) containing 1 mg / mL NADPH. .13) 825 μL was mixed.

さらに、各試料(試料1,2)のエタノール水溶液80μL及びS−9(ラット肝臓ホモジネート,オリエンタル酵母工業社製)75μLを加えて混合し、37℃にて30分間インキュベートした。その後、塩化メチレン1mLを加えて反応を停止させた。これを遠心分離し(1600×g,10分間)、塩化メチレン層を分取して、分取した塩化メチレン層について、下記の条件にてガスクロマトグラフィー分析をし、3α−アンドロスタンジオール、5α−ジヒドロテストステロン(5α−DHT)及びテストステロンの濃度(μg/mL)を定量した。コントロールとして、試料溶液の代わりに試料溶媒を同量(80μL)用いて同様に処理し、ガスクロマトグラフィー分析をした。   Further, 80 μL of an ethanol aqueous solution of each sample (Samples 1 and 2) and 75 μL of S-9 (rat liver homogenate, manufactured by Oriental Yeast Co., Ltd.) were added and mixed, and incubated at 37 ° C. for 30 minutes. Thereafter, 1 mL of methylene chloride was added to stop the reaction. This was centrifuged (1600 × g, 10 minutes), the methylene chloride layer was separated, and the separated methylene chloride layer was subjected to gas chromatography analysis under the following conditions to obtain 3α-androstanediol, 5α. -The concentration of dihydrotestosterone (5α-DHT) and testosterone (μg / mL) was quantified. As a control, the same amount (80 μL) of the sample solvent was used instead of the sample solution, and the same treatment was performed for gas chromatography analysis.

[ガスクロマトグラフィー条件]
使用装置:Shimadzu GC-7A(島津製作所社製)
カラム:DB−1701(内径:0.53mm,長さ:30m,膜厚:1.0μm,J&W Scientific社製)
カラム温度:240℃
注入口温度:300℃
検出器:FID
試料注入量:1μL
スプリット比:1:2
キャリアガス:窒素ガス
キャリアガス流速:3mL/min
[Gas chromatography conditions]
Equipment used: Shimadzu GC-7A (manufactured by Shimadzu Corporation)
Column: DB-1701 (inner diameter: 0.53 mm, length: 30 m, film thickness: 1.0 μm, manufactured by J & W Scientific)
Column temperature: 240 ° C
Inlet temperature: 300 ° C
Detector: FID
Sample injection volume: 1 μL
Split ratio: 1: 2
Carrier gas: Nitrogen gas Carrier gas flow rate: 3 mL / min

3α−アンドロスタンジオール、5α−DHT及びテストステロンの濃度の定量は、下記の方法により行った。
3α−アンドロスタンジオール、5α−DHT及びテストステロンの標準品を塩化メチレンに溶解し、当該溶液についてガスクロマトグラフィー分析をし、これらの化合物の濃度(μg/mL)及びピーク面積から、ピーク面積と化合物の濃度との対応関係を予め求めておいた。そして、テストステロンとS−9との反応後の3α−アンドロスタンジオール、5α−DHT及びテストステロンのそれぞれのピーク面積あたりの濃度を、予め求めておいた対応関係を利用して、下記式(1)に基づいて求めた。
Quantification of the concentrations of 3α-androstanediol, 5α-DHT and testosterone was performed by the following method.
Standard products of 3α-androstanediol, 5α-DHT and testosterone were dissolved in methylene chloride, and the solution was subjected to gas chromatography analysis. From the concentration (μg / mL) and peak area of these compounds, peak area and compound Correspondence with the concentration of was previously determined. Then, the concentration per peak area of 3α-androstanediol, 5α-DHT and testosterone after the reaction of testosterone and S-9 is calculated using the following formula (1). Based on.

A=B×C/D・・・(1)
式中、Aは「3α−アンドロスタンジオール、5α−DHT又はテストステロンの濃度(μg/mL)」を表し、Bは「3α−アンドロスタンジオール、5α−DHT又はテストステロンのピーク面積」を表し、Cは「標準品の濃度(μg/mL)」を表し、Dは「標準品のピーク面積」を表す。
A = B × C / D (1)
In the formula, A represents “3α-androstanediol, 5α-DHT or testosterone concentration (μg / mL)”, B represents “3α-androstanediol, 5α-DHT or testosterone peak area”, and C Represents “concentration of standard product (μg / mL)”, and D represents “peak area of standard product”.

式(1)に基づいて算出された化合物濃度を用いて、下記式(2)に基づき、変換率(テストステロン5α−レダクターゼによりテストステロンが還元されて生成した3α−アンドロスタンジオール及び5α−DHTの濃度と、テストステロンの初期濃度との濃度比)を算出した。   Using the compound concentration calculated based on the formula (1), based on the following formula (2), the conversion rate (the concentrations of 3α-androstanediol and 5α-DHT produced by reducing testosterone by testosterone 5α-reductase) And the ratio of the initial concentration of testosterone).

変換率=(E+F)/(E+F+G)・・・(2)
式中、Eは「3α−アンドロスタンジオールの濃度(μg/mL)」を表し、Fは「5α−DHTの濃度(μg/mL)」を表し、Gは「テストステロンの濃度(μg/mL)」を表す。
Conversion rate = (E + F) / (E + F + G) (2)
In the formula, E represents “3α-androstanediol concentration (μg / mL)”, F represents “5α-DHT concentration (μg / mL)”, and G represents “testosterone concentration (μg / mL)”. ".

式(2)に基づいて算出された変換率を用いて、下記式(3)に基づき、テストステロン5α−レダクターゼ阻害率(%)を算出した。
阻害率(%)=(1−H/I)×100・・・(3)
式中、Hは「試料添加時の変換率」を表し、Iは「コントロールの変換率」を表す。
Using the conversion rate calculated based on the formula (2), the testosterone 5α-reductase inhibition rate (%) was calculated based on the following formula (3).
Inhibition rate (%) = (1-H / I) × 100 (3)
In the formula, H represents “conversion rate at the time of sample addition”, and I represents “control conversion rate”.

試料濃度を段階的に減少させて上記阻害率の測定を行い、テストステロン5α−レダクターゼ阻害率が50%になる試料濃度IC50(μg/mL)を内挿法により求めた。
結果を表6に示す。
The inhibition rate was measured by gradually reducing the sample concentration, and the sample concentration IC 50 (μg / mL) at which the testosterone 5α-reductase inhibition rate was 50% was determined by interpolation.
The results are shown in Table 6.

[表6]
試 料 IC 50 (μg/mL)
試料1 1123
試料2 201
[Table 6]
Sample IC 50 (μg / mL)
Sample 1 1123
Sample 2 201

表6に示すように、湖南甜茶抽出物(試料1)及びその酸加水分解物(試料2)は、優れたテストステロン5α−レダクターゼ阻害作用を有することが確認された。また、テストステロン5α−レダクターゼ阻害作用の程度は、湖南甜茶抽出物及び/又はその酸加水分解物の濃度によって調節できることが確認された。   As shown in Table 6, it was confirmed that Hunan 甜 tea extract (sample 1) and its acid hydrolyzate (sample 2) have an excellent testosterone 5α-reductase inhibitory action. Moreover, it was confirmed that the degree of testosterone 5α-reductase inhibitory action can be adjusted by the concentration of Hunan 甜 tea extract and / or its acid hydrolyzate.

〔試験例10〕アンドロゲン受容体結合阻害作用試験
製造例1で得られた試料1について、以下のようにしてアンドロゲン受容体結合阻害作用を試験した。
Test Example 10 Androgen Receptor Binding Inhibitory Action Test Sample 1 obtained in Production Example 1 was tested for androgen receptor binding inhibitory action as follows.

マウス自然発生乳癌(シオノギ癌;SC115)よりクローニングされたアンドロゲン依存性マウス乳癌細胞(SC−3細胞)を、2%DCC−FBS及び10−8mol/Lのテストステロンを含有するMEM培地(以下、MEM−2という。)を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を1.0×10cells/μLの細胞密度になるようにMEM−2培地で希釈し、96ウェルプレートに1ウェルあたり100μLずつ播種し、37℃、5%CO−95%airの条件下で培養した。24時間後、試料(試料1)及び1.0×10−9mol/LのDHTを添加した0.5%BSA含有HamF12+MEM培地(以下、HMB培地という。)に培地を交換して48時間培養した。その後、培地を0.97mmol/LのMTTを含むMEM−2培地に交換し、2時間培養後、培地をイソプロパノールに交換して細胞内に生成したブルーホルマザンを抽出した。溶出したブルーホルマザンを含有するイソプロパノールについて、ブルーホルマザンの吸収極大点がある570nmの吸光度を測定した。 Androgen-dependent mouse breast cancer cells (SC-3 cells) cloned from mouse spontaneous breast cancer (Shionogi cancer; SC115) were cultured in MEM medium containing 2% DCC-FBS and 10 −8 mol / L testosterone (hereinafter, After culturing using MEM-2, the cells were collected by trypsin treatment. The collected cells are diluted with MEM-2 medium so as to have a cell density of 1.0 × 10 5 cells / μL, seeded at 100 μL per well in a 96-well plate, 37 ° C., 5% CO 2 -95%. The cells were cultured under air conditions. After 24 hours, the medium was replaced with the sample (sample 1) and 0.5% BSA-containing HamF12 + MEM medium (hereinafter referred to as HMB medium) supplemented with 1.0 × 10 −9 mol / L DHT, and cultured for 48 hours. did. Thereafter, the medium was replaced with MEM-2 medium containing 0.97 mmol / L of MTT, and after culturing for 2 hours, the medium was replaced with isopropanol, and blue formazan produced in the cells was extracted. For the isopropanol containing the eluted blue formazan, the absorbance at 570 nm where the absorption maximum of blue formazan is present was measured.

なお、付着細胞の影響を補正するため、同時に650nmの吸光度も測定し、両吸光度の差をもってブルーホルマザンの生成量に比例する値とした(下記結合阻害率の計算式における吸光度はこの補正済み吸光度である)。上記と並行して、試料単独でSC−3細胞に及ぼす影響をみるため、HMB培地にDHTを添加せず試料のみを添加して、同様の培養と測定とを行った。さらに、コントロールとして、試料及びDHTを添加しないHMB培地で培養した場合、並びに試料を添加せずDHTのみを添加したHMB培地で培養した場合についても同様の測定を行った。測定結果より、アンドロゲン受容体結合阻害率(%)を下記式により算出した。   In order to correct the influence of adherent cells, the absorbance at 650 nm was also measured at the same time, and the difference between the two absorbances was taken as a value proportional to the amount of blue formazan produced (the absorbance in the formula for calculating the binding inhibition rate is the corrected absorbance below). Is). In parallel with the above, in order to examine the effect of the sample alone on the SC-3 cells, the same culture and measurement were performed by adding only the sample without adding DHT to the HMB medium. Further, as a control, the same measurement was performed when culturing in an HMB medium without addition of a sample and DHT, and when culturing in an HMB medium without addition of a sample and only DHT. From the measurement results, the androgen receptor binding inhibition rate (%) was calculated by the following formula.

アンドロゲン受容体結合阻害率(%)={1−(A−B)/(C−D)}×100
式中、Aは「DHT添加・試料添加の場合の吸光度」を表し、Bは「DHT無添加・試料添加の場合の吸光度」を表し、Cは「DHT添加・試料無添加の場合の吸光度」を表し、Dは「DHT無添加・試料無添加の場合の吸光度」を表す。
Androgen receptor binding inhibition rate (%) = {1− (A−B) / (C−D)} × 100
In the formula, A represents “absorbance when DHT is added / sample added”, B represents “absorbance when DHT is not added / sample is added”, and C is “absorbance when DHT is added / sample is not added”. D represents “absorbance when DHT is not added / sample is not added”.

試料溶液の濃度を段階的に減少させて上記阻害率の測定を行い、各濃度におけるアンドロゲンの結合阻害率(%)を求め、その結果から内挿法により、アンドロゲンの受容体への結合を50%阻害する試料濃度IC50(μg/mL)を求めた。 The concentration of the sample solution is decreased stepwise to measure the inhibition rate, and the inhibition rate of androgen binding (%) at each concentration is determined. From the result, androgen binding to the receptor is determined by interpolation. The sample concentration IC 50 (μg / mL) that inhibits% was determined.

湖南甜茶抽出物(試料1)のIC50は、60.0μg/mLであり、湖南甜茶抽出物(試料1)は、優れたアンドロゲン受容体結合阻害作用を有することが確認された。また、アンドロゲン受容体結合阻害作用の程度は、湖南甜茶抽出物の濃度によって調節できることが確認された。 The IC 50 of the Hunan coffee extract (Sample 1) was 60.0 μg / mL, and it was confirmed that the Hunan coffee tea extract (Sample 1) has an excellent androgen receptor binding inhibitory action. In addition, it was confirmed that the degree of the androgen receptor binding inhibitory action can be adjusted by the concentration of Hunan 甜 tea extract.

〔配合例1〕
下記組成の乳液を常法により製造した。
湖南甜茶抽出物(製造例1) 0.1g
ホホバオイル 4.0g
オリーブオイル 2.0g
スクワラン 2.0g
セタノール 2.0g
モノステアリン酸グリセリル 2.0g
ポリオキシエチレンセチルエーテル(20E.O.) 2.5g
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(20E.O.) 2.0g
黄杞エキス 0.1g
グリチルリチン酸ジカリウム 0.1g
イチョウ葉エキス 0.1g
コンキオリン 0.1g
オウバクエキス 0.1g
カミツレエキス 0.1g
1,3−ブチレングリコール 3.0g
パラオキシ安息香酸メチル 0.15g
香料 0.05g
精製水 残部(全量を100gとする)
[Formulation Example 1]
An emulsion having the following composition was produced by a conventional method.
Hunan 甜 tea extract (Production Example 1) 0.1g
Jojoba oil 4.0g
Olive oil 2.0g
Squalane 2.0g
Cetanol 2.0g
Glyceryl monostearate 2.0g
Polyoxyethylene cetyl ether (20E.O.) 2.5g
Oleic acid polyoxyethylene sorbitan (20E.O.) 2.0g
Twilight extract 0.1g
0.1g dipotassium glycyrrhizinate
Ginkgo biloba extract 0.1g
Conchiolin 0.1g
Oat extract 0.1g
Chamomile extract 0.1g
1,3-butylene glycol 3.0 g
Methyl paraoxybenzoate 0.15g
Fragrance 0.05g
Purified water remainder (total amount is 100 g)

〔配合例2〕
下記組成の化粧水を常法により製造した。
湖南甜茶酸加水分解物(製造例2) 0.1g
グリセリン 3.0g
1,3−ブチレングリコール 3.0g
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(20E.O.) 0.5g
パラオキシ安息香酸メチル 0.15g
クエン酸 0.1g
クエン酸ソーダ 0.1g
油溶性甘草エキス 0.1g
海藻エキス 0.1g
キシロビオースミクスチャー 0.5g
クジンエキス 0.1g
香料 0.05g
精製水 残部(全量を100gとする)
[Formulation Example 2]
A lotion having the following composition was produced by a conventional method.
Hunan 甜 tea acid hydrolyzate (Production Example 2) 0.1g
Glycerin 3.0g
1,3-butylene glycol 3.0 g
Oleic acid polyoxyethylene sorbitan (20E.O.) 0.5g
Methyl paraoxybenzoate 0.15g
Citric acid 0.1g
Sodium citrate 0.1g
Oil soluble licorice extract 0.1g
Seaweed extract 0.1g
Xylobiose Mixture 0.5g
Kujin extract 0.1g
Fragrance 0.05g
Purified water remainder (total amount is 100 g)

〔配合例3〕
下記組成のクリームを常法により製造した。
湖南甜茶抽出物(製造例1) 0.1g
流動パラフィン 5.0g
サラシミツロウ 4.0g
セタノール 3.0g
スクワラン 10.0g
ラノリン 2.0g
ステアリン酸 1.0g
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(20E.O.) 1.5g
モノステアリン酸グリセリル 3.0g
1,3−ブチレングリコール 6.0g
酵母抽出液 0.1g
シソ抽出液 0.1g
シナノキ抽出液 0.1g
ジユ抽出液 0.1g
パラオキシ安息香酸メチル 1.5g
香料 0.1g
精製水 残部(全量を100gとする)
[Composition Example 3]
A cream having the following composition was produced by a conventional method.
Hunan 甜 tea extract (Production Example 1) 0.1g
Liquid paraffin 5.0g
Salami beeswax 4.0g
Cetanol 3.0g
Squalane 10.0g
Lanolin 2.0g
Stearic acid 1.0g
Oleic acid polyoxyethylene sorbitan (20E.O.) 1.5g
3.0 g glyceryl monostearate
1,3-butylene glycol 6.0 g
Yeast extract 0.1g
Perilla extract 0.1g
Linden extract 0.1g
Jiuyu Extract 0.1g
1.5 g of methyl paraoxybenzoate
Fragrance 0.1g
Purified water remainder (total amount is 100 g)

〔配合例4〕
下記組成のパックを常法により製造した。
湖南甜茶酸加水分解物(製造例2) 0.2g
ポリビニルアルコール 15.0g
ポリエチレングリコール 3.0g
プロピレングリコール 7.0g
エタノール 10.0g
セージ抽出液 0.1g
トウキ抽出液 0.1g
ニンジン抽出液 0.1g
パラオキシ安息香酸エチル 0.05g
香料 0.05g
精製水 残部(全量を100gとする)
[Formulation Example 4]
A pack having the following composition was produced by a conventional method.
Hunan 甜 tea acid hydrolyzate (Production Example 2) 0.2g
Polyvinyl alcohol 15.0g
Polyethylene glycol 3.0g
Propylene glycol 7.0g
Ethanol 10.0g
Sage extract 0.1g
Toki extract 0.1g
Carrot extract 0.1g
0.05 g ethyl paraoxybenzoate
Fragrance 0.05g
Purified water remainder (total amount is 100 g)

〔配合例5〕
下記組成の養毛ヘアトニックを常法により製造した。
湖南甜茶抽出物(製造例1) 0.2g
塩酸ピリドキシン 0.1g
レゾルシン 0.01g
D−パントテニルアルコール 0.1g
グリチルリチン酸ジカリウム 0.1g
L−メントール 0.05g
1,3−ブチレングリコール 4.0g
ニンジンエキス 0.5g
エタノール 25.0g
香料 0.01g
精製水 残部(全量を100gとする)
[Formulation Example 5]
A hair nourishing hair tonic having the following composition was produced by a conventional method.
Hunan coffee extract (Production Example 1) 0.2g
0.1 g of pyridoxine hydrochloride
Resorcin 0.01g
D-pantothenyl alcohol 0.1g
0.1g dipotassium glycyrrhizinate
L-Menthol 0.05g
1,3-butylene glycol 4.0 g
Carrot extract 0.5g
Ethanol 25.0g
Fragrance 0.01g
Purified water remainder (total amount is 100 g)

〔配合例6〕
下記組成のシャンプー(クリームシャンプー)を常法により製造した。
湖南甜茶酸加水分解物(製造例2) 0.2g
ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸ナトリウム 30.0g
ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸アンモニウム 20.0g
ヤシ油脂肪酸アミドプロピルベタイン 6.0g
ヤシ油脂肪酸モジエタノールアミド 4.0g
ジステアリン酸エチレングリコール 2.0g
防腐剤(パラオキシ安息香酸メチル) 0.15g
ムクロジエキス 0.2g
黄杞エキス 0.5g
オウバクエキス 0.3g
ローズマリーエキス 0.5g
1,3−ブチレングリコール 3.0g
香料 0.01g
精製水 残部(全量を100gとする)
[Composition Example 6]
A shampoo (cream shampoo) having the following composition was produced by a conventional method.
Hunan 甜 tea acid hydrolyzate (Production Example 2) 0.2g
Sodium polyoxyethylene alkyl ether sulfate 30.0g
Polyoxyethylene alkyl ether ammonium sulfate 20.0g
Coconut oil fatty acid amidopropyl betaine 6.0g
Coconut oil fatty acid modiethanolamide 4.0g
2.0g ethylene distearate
Preservative (Methyl paraoxybenzoate) 0.15g
Mukuroji extract 0.2g
Twilight extract 0.5g
Oat extract 0.3g
Rosemary extract 0.5g
1,3-butylene glycol 3.0 g
Fragrance 0.01g
Purified water remainder (total amount is 100 g)

〔配合例7〕
下記組成のリンスを常法により製造した。
湖南甜茶抽出物(製造例1) 0.2g
塩化ステアリルトリメチルアンモニウム 1.5g
ポリオキシエチレンセチルエーテル 1.0g
セチルアルコール 2.0g
オクチルドデカノール 1.0g
カチオン化セルロース 0.5g
プロピレングリコール 5.0g
ムクロジエキス 0.2g
黄杞エキス 0.5g
オウバクエキス 0.3g
ローズマリーエキス 0.5g
香料 3.0g
精製水 残部(全量を100gとする)
[Formulation Example 7]
A rinse having the following composition was produced by a conventional method.
Hunan coffee extract (Production Example 1) 0.2g
Stearyltrimethylammonium chloride 1.5g
Polyoxyethylene cetyl ether 1.0g
Cetyl alcohol 2.0g
Octyldodecanol 1.0g
Cationized cellulose 0.5g
Propylene glycol 5.0g
Mukuroji extract 0.2g
Twilight extract 0.5g
Oat extract 0.3g
Rosemary extract 0.5g
Fragrance 3.0g
Purified water remainder (total amount is 100 g)

本発明の抗炎症剤は、各種炎症性疾患の予防・改善に、本発明の抗老化剤は、肌の過敏症、弾力性低下、潤いの減少等の皮膚の老化の予防・改善に、本発明の育毛剤又は抗男性ホルモン剤は、男性型脱毛症、多毛症、脂漏症、座瘡(ニキビなど)、前立腺肥大症、前立腺腫瘍、男児性早熟等の予防・改善に大きく貢献することができる。   The anti-inflammatory agent of the present invention is used for the prevention / improvement of various inflammatory diseases, and the anti-aging agent of the present invention is used for the prevention / improvement of skin aging such as skin hypersensitivity, decreased elasticity, and reduction of moisture. The hair-restoring agent or anti-androgen agent of the invention greatly contributes to the prevention and improvement of androgenetic alopecia, hirsutism, seborrhea, acne (acne etc.), benign prostatic hyperplasia, prostate tumor, premature boyhood, etc. Can do.

Claims (4)

湖南甜茶(Lithocarpus litseifolius)からの抽出物及び/又は当該抽出物の酸加水分解物を有効成分として含有することを特徴とする育毛剤。   A hair restorer comprising, as an active ingredient, an extract from Linancarpus litseifolius and / or an acid hydrolyzate of the extract. 前記抽出物が、テストステロン5α−レダクターゼ阻害作用及び/又はアンドロゲン受容体結合阻害作用を有しており、
前記酸加水分解物が、テストステロン5α−レダクターゼ阻害作用を有することを特徴とする請求項1に記載の育毛剤。
The extract has testosterone 5α-reductase inhibitory action and / or androgen receptor binding inhibitory action,
The hair restorer according to claim 1, wherein the acid hydrolyzate has a testosterone 5α-reductase inhibitory action.
湖南甜茶(Lithocarpus litseifolius)からの抽出物及び/又は当該抽出物の酸加水分解物を有効成分として含有することを特徴とする抗男性ホルモン剤。   An anti-androgen agent characterized by containing an extract from Lithocarpus litseifolius and / or an acid hydrolyzate of the extract as an active ingredient. 前記抽出物が、テストステロン5α−レダクターゼ阻害作用及び/又はアンドロゲン受容体結合阻害作用を有しており、
前記酸加水分解物が、テストステロン5α−レダクターゼ阻害作用を有することを特徴とする請求項3に記載の抗男性ホルモン剤。
The extract has testosterone 5α-reductase inhibitory action and / or androgen receptor binding inhibitory action,
The anti-androgenic agent according to claim 3, wherein the acid hydrolyzate has a testosterone 5α-reductase inhibitory action.
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