JP5601346B2 - 燃料電池 - Google Patents

Description

本発明は生体代謝を利用した燃料電池に関する。

燃料電池は、基本的に燃料極と酸化剤極（空気極）と電解質とを備えるものであり、その動作原理は水の電気分解の逆動作に基づく。すなわち、燃料電池は、水素及び酸素を送り込まれることによって、水（Ｈ₂ Ｏ）を生成するとともに電気を取り出す、すなわち発電を行う。より具体的に説明すると、燃料極に供給された燃料（水素）が酸化されて電子とプロトン（Ｈ⁺ ）とに分離し、このＨ⁺ が電解質を介して空気極まで移動し、空気極に供給された酸素と反応することによってＨ₂ Ｏを生成する。

燃料電池は、燃料の持つエネルギーを直接電気エネルギーに変換する、高効率な発電装置として機能し、天然ガス、石油、石炭等の化石エネルギーがもつエネルギーを使用場所や使用時によらずに、しかも高い変換効率にて電気エネルギーとして取り出すことができる。

従来から大規模発電用途等としての燃料電池の開発研究が活発に行われており、例えばスペースシャトルに燃料電池が搭載され、電力と同時に乗組員の水を供給できることや、クリーンな発電装置であることを証明した実績がある。

近年、高分子固体電解質燃料電池等、室温から９０℃程度の比較的低温な作動温度域を示す燃料電池が開発され、注目を集めている。このため、大規模発電用途のみならず、自動車の駆動用電源、パーソナルコンピュータやモバイル機器等のポータブル電源等の小型システムへの応用が模索されつつある。

しかしながら、固体高分子型燃料電池は先に述べたように低温な作動温度域を示すという利点があるものの、解決すべき多くの課題が残されている。具体的には、燃料としてメタノールを用い、且つ室温付近で動作させた場合のＣＯによる触媒被毒、Ｐｔ等の高価な貴金属を用いた触媒が必要であること、クロスオーバーによるエネルギーロスの発生、燃料に水素を用いる場合の取り扱いが困難であること等である。

そこで、生物内で行われている生体代謝が高効率なエネルギー変換機構であることに着目し、これを燃料電池に適用する提案がなされている。ここでいう生体代謝には、微生物や細胞内で行われる呼吸、光合成等が含まれる。生体代謝は、発電効率が極めて高く、また、室温程度の穏やかな条件で反応が進行するという特長を兼ね備えている。

例えば呼吸は、糖類、脂肪、タンパク質等の栄養素を微生物又は細胞内に取り込み、これらの化学エネルギーを、数々の酵素反応ステップを有する解糖系及びトリカルボン酸（tricarboxylic acid: 以下ＴＣＡと称する。）回路を介して二酸化炭素（ＣＯ₂ ）を生成する過程でニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（nicotinamide adenine dinucleotide ：以下ＮＡＤ⁺ と称する。）を還元して還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤＨ）のような酸化還元エネルギー、すなわち電気エネルギーに変換し、さらに電子伝達系においてこれらのＮＡＤＨの電気エネルギーをプロトン勾配の電気エネルギーに直接変換するとともに酸素を還元し、水を生成する機構である。ここで得られた電気エネルギーは、ＡＴＰ合成酵素を介して、ＡＤＰからＡＴＰを生成し、このＡＴＰは微生物や細胞が生育するために必要な反応に利用される。このようなエネルギー変換は、細胞質ゾル及びミトコンドリアで行われている。

また、光合成は、光エネルギーを取り込み、電子伝達系を介してニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸（nicotinamide adenine dinucleotide phosphate:以下ＮＡＤＰ⁺ と称する。）を還元して還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸（ＮＡＤＰＨ）のような電気エネルギーに変換する過程で、水を酸化し酸素を生成する機構である。この電気エネルギーは、ＣＯ₂ を取り込み炭素固定化反応に利用され、炭水化物の合成に利用される。

これら生体代謝において重要な位置を占めるＮＡＤＨの生成反応は、下記式（３）で表される。

脱水素酵素（デヒドロゲナーゼ）としては、これまでに数百種類が知られており、様々な基質から生成物への変換を高選択的に触媒する重要な役割を果たしている。酵素のこのような反応選択性は、酵素がタンパク質分子であるために独特の三次元構造を有することに起因する。このため、生体内においては取り込まれた燃料に対して数十種類のデヒドロゲナーゼ等が順序よく反応し、最終的にはＣＯ₂ になるまで酸化が進行することになる。

上述したような生体代謝を燃料電池に利用する技術としては、微生物中で発生した電気エネルギーを電子メディエータを介して微生物外に取り出し、この電子を電極に渡すことで電流を得る微生物電池が報告されている（例えば、特許文献１等を参照）。

しかしながら、微生物及び細胞には上述したような化学エネルギーから電気エネルギーへの変換といった目的の反応以外にも不要な機能が多く存在するため、上述した方法では望まない反応に電気エネルギーが消費されて充分なエネルギー変換効率が発揮されない。

特開２０００−１３３２９７号公報

そこで、微生物や細胞内から反応に関与する酵素や電子メディエータを取り出すとともに適切な環境を再現させることで所望の反応のみを行うような燃料電池の構成が提案されている。
しかしながら、このような構成の燃料電池では、酵素の反応速度が遅く、実際に得られる電流密度が極めて小さいという問題を有している。

そこで本発明はこのような従来の問題点を解決するために提案されたものであり、生体代謝を利用しながらも、大きな電流密度を実現することが可能な燃料電池を提供することを目的とする。

上述の目的を達成するために、本発明に係る燃料電池は、燃料を複数の酵素による段階的な反応により分解するとともに、酸化反応に伴って生成する電子を電極に受け渡す燃料電池であって、酵素１による分解反応により分解物１が生成する際の酵素１の酵素活性をＵ（Ｅ１）とし、分解物１を分解する酵素群２の酵素活性の総和をＵ（Ｅ２）とするとき、Ｕ（Ｅ１）≦Ｕ（Ｅ２）であることを特徴とする。

燃料を複数の酵素によって段階的に分解する複合酵素反応においては、酵素活性を損ねるような中間生成物は速やかに分解する必要がある。本発明においては、後段の分解反応を行う酵素群の酵素活性が前段の分解反応を行う酵素１の酵素活性よりも大となるように、各酵素の酵素活性を段階的に設定しているので、燃料が速やかに分解される。

また、本発明においては、前記酵素１が酸化酵素であり、前記酵素１による分解反応が酸化反応であり、当該酸化反応により補酵素に電子の受け渡しをする燃料電池において、上記要件に加えて、さらに、前記補酵素の酸化体を生成する補酵素酸化酵素を有し、当該補酵素酸化酵素の酵素活性をＵ（Ｃｏ）とし、前記複数の酵素のうち、当該補酵素の還元体の生成に関与する酵素群の酵素活性の総和をＵ（Ｅ）とするとき、Ｕ（Ｃｏ）≧Ｕ（Ｅ）であることを特徴とする。

酵素１による酸化反応により補酵素に電子の受け渡しをする燃料電池においては、補酵素の還元体の生成速度に対してこれを酸化する補酵素酸化酵素が不足すると、当該補酵素酸化酵素の酵素反応が律速となる。本発明では、補酵素の酸化を行う補酵素酸化酵素の酵素活性Ｕ（Ｃｏ）を燃料の酸化（すなわち補酵素の還元体の生成）に関与する酵素群の酵素活性の総和Ｕ（Ｅ）以上としているので、前記補酵素酸化酵素の酵素反応が律速となることはなく、補酵素の還元体は速やかに酸化され、このとき生ずる電子が電子メディエータを介して電極に受け渡される。

燃料としてメタノールを使用する場合を例にしてより具体的に説明すると、メタノールを燃料とする燃料電池は、例えば、燃料極と、空気極と、上記燃料極及び上記空気極の間に介在するプロトン伝導膜と、上記燃料極と電子の受け渡し可能とされた酵素溶液とを有し、上記酵素溶液は、アルコールデヒドロゲナーゼと、ホルムアルデヒドデヒドロゲナーゼと、蟻酸デヒドロゲナーゼと、ジアホラーゼと、電子メディエータとを含有する。ここで、上記アルコールデヒドロゲナーゼ、上記ホルムアルデヒドデヒドロゲナーゼ、上記蟻酸デヒドロゲナーゼ、及び上記ジアホラーゼの酵素活性をそれぞれＵ（ＡＤＨ）、Ｕ（ＦａｌＤＨ）、Ｕ（ＦａｔｅＤＨ）、Ｕ（ＤＩ）とする。

先ず、アルコールデヒドロゲナーゼを酵素１とすると、酵素１の酵素活性Ｕ（Ｅ１）に相当するＵ（ＡＤＨ）は、分解物（ホルムアルデヒド）を分解する酵素群（ホルムアルデヒドデヒドロゲナーゼ及び蟻酸デヒドロゲナーゼ）の酵素活性の総和Ｕ（Ｅ２）＝Ｕ（ＦａｌＤＨ）＋Ｕ（ＦａｔｅＤＨ）に対して、Ｕ（Ｅ１）＝Ｕ（ＡＤＨ）≦Ｕ（Ｅ２）＝Ｕ（ＦａｌＤＨ）＋Ｕ（ＦａｔｅＤＨ）であることが必要である。次に、ホルムアルデヒドデヒドロゲナーゼを酵素１とすると、酵素１の酵素活性Ｕ（Ｅ１）に相当するＵ（ＦａｌＤＨ）は、分解物（蟻酸）を分解する酵素群（蟻酸デヒドロゲナーゼ）の酵素活性の総和Ｕ（Ｅ２）＝Ｕ（ＦａｔｅＤＨ）に対して、Ｕ（Ｅ１）＝Ｕ（ＦａｌＤＨ）≦Ｕ（Ｅ２）＝Ｕ（ＦａｔｅＤＨ）であることが必要である。これらを勘案すると、上記メタノールを燃料とする燃料電池は、以下の式（１）を満足することが好ましい。
０＜Ｕ（ＡＤＨ）≦Ｕ（ＦａｌＤＨ）≦Ｕ（ＦａｔｅＤＨ）... 式（１）

次に、上記燃料電池においては、補酵素酸化酵素がジアホラーゼであり、その酵素活性Ｕ（ＤＩ）がＵ（Ｃｏ）に相当し、アルコールデヒドロゲナーゼ、ホルムアルデヒドデヒドロゲナーゼ、及び蟻酸デヒドロゲナーゼは、いずれも補酵素の還元体の生成に関与する。したがって、以下の式（２）の関係を満足する必要がある。
Ｕ（ＡＤＨ）＋Ｕ（ＦａｌＤＨ）＋Ｕ（ＦａｔｅＤＨ）≦Ｕ（ＤＩ）... 式（２）

以上のように構成された燃料電池では、アルコールデヒドロゲナーゼ、ホルムアルデヒドデヒドロゲナーゼ及び蟻酸デヒドロゲナーゼが、燃料であるメタノールからＣＯ₂ までの酸化反応を触媒する過程で合計３分子のＮＡＤＨを生成する。また、ジアホラーゼは、生成したＮＡＤＨから電子メディエータを介して燃料極へ２つの電子を渡す。これらの過程で発生するＨ⁺ は、酵素溶液及びプロトン伝導膜を介して空気極に到達する。空気極においては、Ｈ⁺ と酸素（Ｏ₂ ）と外部回路からの電子とから水が生成する。

そして、メタノールを酸化する順序、すなわちアルコールデヒドロゲナーゼ、ホルムアルデヒドデヒドロゲナーゼ及び蟻酸デヒドロゲナーゼの順序に従って各酵素の酵素活性が大となるように酵素溶液が調製されるので、メタノールの分解が滞ることなく、この結果ＮＡＤＨの生成速度が大となる。

また、ジアホラーゼの酵素活性がアルコールデヒドロゲナーゼ、ホルムアルデヒドデヒドロゲナーゼ及び蟻酸デヒドロゲナーゼの酵素活性の和よりも高くなるように酵素溶液を調製するので、ジアホラーゼが飽和することなくＮＡＤＨから燃料極への電子の受け渡し速度を向上させられる。

本発明に係る燃料電池は、さらに、補酵素から、さらに電子メディエータに電子の受け渡しをする燃料電池において、上記電子メディエータはビタミンＫ３であることを特徴とする。

例えば、メタノールを燃料とする燃料電池の場合、燃料極と、空気極と、上記燃料極及び上記空気極の間に介在するプロトン伝導膜と、上記燃料極と電子を受け渡し可能とされた酵素溶液とを有し、燃料としてメタノールを用いる燃料電池であって、上記酵素溶液は、アルコールデヒドロゲナーゼと、ホルムアルデヒドデヒドロゲナーゼと、蟻酸デヒドロゲナーゼと、ジアホラーゼと、電子メディエータとを含有し、上記電子メディエータはビタミンＫ３であることを特徴とする。
ビタミンＫ３は平衡酸化還元電位が補酵素を酸化する補酵素酸化酵素（例えばジアホラーゼ）と比較的近いため、ジアホラーゼと電子の受け渡しの相性が良く、電子メディエータとして用いることで電子の受け渡し速度が向上する。

以上の説明からも明らかなように、本発明に係る燃料電池は、燃料を分解する反応、及び補酵素（例えばＮＡＤＨ）が燃料極へ電子を渡す反応の反応が滞らないように各酵素の酵素活性の大小が調節されている。または、本発明に係る燃料電池は、電子の移動速度を速めるために、電子メディエータとして脱水素酵素（例えばＤＩ）との相性が良いビタミンＫ３を選択している。したがって本発明によれば、反応速度の向上が図られ、より大きな電流密度を実現する燃料電池を提供することが可能である。

本発明を適用した燃料電池の反応の概要を説明するための模式図である。 図１中、燃料極側の反応を詳細に説明するための模式図である。 エタノールを燃料とした場合の複合酵素反応を示す図である。 グルコースを燃料とした場合の複合酵素反応を示す図である。 実験１におけるＮＡＤＨの経時変化を示す特性図である。 実験２におけるＯＣＶの経時変化を示す特性図である。

以下、本発明を適用した燃料電池について、図面を参照しながら詳細に説明する。
本発明の燃料電池は、生体代謝を利用したものであり、図１に示すように、燃料極と、空気極と、燃料極と空気極とを隔離するプロトン伝導膜と、後述する酵素、補酵素、電子メディエータ等が溶解されてなる酵素溶液とを基本的な構成要素とする。酵素溶液は燃料極と接触するように燃料極室内に保持されている。そして燃料極室中の酵素溶液に、燃料が連続的に供給される。

この燃料電池では、酵素溶液中で、複合脱水素酵素として後述するような１種類以上のＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼが複数の段階を経て燃料（例えばメタノール）をＣＯ₂ まで酸化する際に、補酵素ＮＡＤ⁺ からＮＡＤＨを生成させる。生成したＮＡＤＨは、ジアホラーゼにより電子メディエータを介して燃料極へ２つの電子を受け渡す。そして、外部回路を通って空気極に電子が到達することで、電流が発生する。また、上述したような過程で発生するＨ⁺ は、プロトン伝導膜又は膜のない酵素溶液を介して空気極まで移動する。そして空気極では、到達したＨ⁺ と、外部回路から供給された２つの電子と、酸素とから水が生成される。

本発明では、以下に述べるように、ＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼ等の酵素の酵素活性を最適化すること、最適な電子メディエータを選択することのいずれか一方又はこれらを組み合わせることにより、燃料極への電子の移動速度を速め、電流密度の向上を実現している。そこで、図１に示す反応のうち酵素溶液から燃料極に電子を渡す反応について図２を用いてさらに詳細に説明する。

酵素溶液には、ＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼとして、燃料であるメタノールからホルムアルデヒド及びＮＡＤＨを生成するアルコールデヒドロゲナーゼ（alcohol dehydrogenase:以下ＡＤＨと称する。）と、ホルムアルデヒドから蟻酸及びＮＡＤＨを生成するホルムアルデヒドデヒドロゲナーゼ（formaldehyde dehydrogenase: 以下ＦａｌＤＨと称する。）と、蟻酸からＣＯ₂ 及びＮＡＤＨを生成する蟻酸デヒドロゲナーゼ（formate dehydrogenase:以下ＦａｔｅＤＨと称する。）の３種類が溶解されている。また、酵素溶液にはＮＡＤＨを酸化してＮＡＤ⁺ とＨ⁺ とに分解するＮＡＤＨデヒドロゲナーゼ、すなわちジアホラーゼ（diaphorase: 以下ＤＩと称する。）が溶解されている。また、酵素溶液には、ＤＩを介してＮＡＤＨから２つの電子を受け取るとともに燃料極へ渡す電子メディエータが溶解されている。また、ＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼが反応に必要とする補酵素ＮＡＤ⁺ も、酵素溶液中に溶解されている。

ここで、酵素溶液中に含まれる燃料を分解する複数の酵素の酵素活性は、次の条件を満たす必要がある。先ず、アルコールデヒドロゲナーゼを酵素１とすると、酵素１の酵素活性Ｕ（Ｅ１）に相当するＵ（ＡＤＨ）は、分解物（ホルムアルデヒド）を分解する酵素群（ホルムアルデヒドデヒドロゲナーゼ及び蟻酸デヒドロゲナーゼ）の酵素活性の総和Ｕ（Ｅ２）＝Ｕ（ＦａｌＤＨ）＋Ｕ（ＦａｔｅＤＨ）に対して、Ｕ（Ｅ１）＝Ｕ（ＡＤＨ）≦Ｕ（Ｅ２）＝Ｕ（ＦａｌＤＨ）＋Ｕ（ＦａｔｅＤＨ）であることが必要である。次に、ホルムアルデヒドデヒドロゲナーゼを酵素１とすると、酵素１の酵素活性Ｕ（Ｅ１）に相当するＵ（ＦａｌＤＨ）は、分解物（蟻酸）を分解する酵素群（蟻酸デヒドロゲナーゼ）の酵素活性の総和Ｕ（Ｅ２）＝Ｕ（ＦａｔｅＤＨ）に対して、Ｕ（Ｅ１）＝Ｕ（ＦａｌＤＨ）≦Ｕ（Ｅ２）＝Ｕ（ＦａｔｅＤＨ）であることが必要である。これらを勘案すると、上記メタノールを燃料とする燃料電池は、以下の式（１）を満足することが好ましい。
０＜Ｕ（ＡＤＨ）≦Ｕ（ＦａｌＤＨ）≦Ｕ（ＦａｔｅＤＨ）... 式（１）

上述した３種類の最適なＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼを選択するとともにその酵素活性の比をメタノールの分解の順序にしたがって増大させることで、ホルムアルデヒドや蟻酸といった中間生成物を蓄積させることなくメタノールをＣＯ₂ まで迅速に分解し、ＮＡＤＨの生成速度を充分に高くすることができる。

また、ＮＡＤＨから燃料極への電子の授受に関与するＤＩの酵素活性を、ＮＡＤＨの生成に関与する３種類のＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼの酵素活性の和よりも大とする必要があり、これにより、生成したＮＡＤＨから燃料極への電子の移動速度を速められる。このことは、ＤＩの酵素活性をＵ（ＤＩ）としたとき、以下の式（２）で表される。
Ｕ（ＡＤＨ）＋Ｕ（ＦａｌＤＨ）＋Ｕ（ＦａｔｅＤＨ）≦Ｕ（ＤＩ）... 式（２）

ＤＩの酵素活性がＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼの酵素活性の和を下回る場合、ＤＩの酵素反応が律速となり、電子の移動速度が遅くなるので電流密度が不足する。

なお、ここで言うＵ（ユニット）とは、酵素活性を示す１つの指標であり、ある温度及びｐＨにおいて１分間あたり１μｍｏｌの基質が反応する度合いを示す。

燃料電池の電圧は、それぞれの電極に用いる電子メディエータの酸化還元電位を制御することで設定される。つまり、より高い電圧を得るには、燃料極側ではよりネガティブな電位の電子メディエータを、空気極側ではよりポジティブな電位の電子メディエータを選ぶと良い。しかし、電子メディエータの、酵素に対する反応親和性、電極との電子交換速度、阻害因子（光、酸素等）に対する構造安定性等も考慮しなければならない。

このようなトータルな観点から、燃料極に作用する電子メディエータとして、ビタミンＫ３（2-methyl-1,4-naphthoquinone 、Vitamin K3: 以下ＶＫ３と称する）、を選択することが現状では好ましい。ＶＫ３は平衡酸化還元電位（ｐＨ７．０の溶液中）が−２１０ｍＶ（ｖｓＡｇ／ＡｇＣｌ）であり、活性点としてフラビンモノヌクレオチド（flavin mononucleotide:以下FMN と称する。）を有するＤＩの平衡酸化還元電位（ｐＨ７．０の溶液中）である約−３８０ｍＶ（ｖｓＡｇ／ＡｇＣｌ）と比較して、電位が若干ポジティブである。これにより、ＤＩと電子メディエータとの間の電子の交換速度が適度に速くなり、大きな電流密度を得られるのと同時に、空気極と組み合わせて電池を構成した場合に比較的大きな電圧を得ることができる。

これに対して、ＶＫ３よりもさらに電位がポジティブである例えば1,4-benzoquinone(
＋９３ｍＶ（ｖｓＡｇ／ＡｇＣｌ）) を電子メディエータとして用いた場合、溶液中の電子メディエータ分子の拡散の影響が大きくなり、電流密度はＶＫ３と比べて殆ど変化せず、期待される程の効果は得られない。そればかりか、電池電圧がより小さくなることになるという問題が生じる。また、ＶＫ３よりもさらに電位がネガティブであり、且つＤＩよりも電位が若干ポジティブである例えばanthraquinone-2-sulfonate(−５４９ｍＶ（ｖｓＡｇ／ＡｇＣｌ）) を電子メディエータとして用いた場合、逆に電流密度が減少するが、電池電圧は向上する。この場合、電極構造を工夫して反応場を３次元的に高密度に構築することで反応電極面積を増大させれば、電池としての電流密度をある程度まで向上させることができる。このように、ＶＫ３の他に適当な酸化還元電位を有する電子メディエータを選択することも可能である。他に、例えばキノン骨格を有する化合物、Ｏｓ、Ｒｕ、Ｆｅ、Ｃｏ等の金属錯体、ベンジルビオローゲン等のビオローゲン化合物、ニコチンアミド構造を有する化合物、リボフラビン構造を有する化合物、ヌクレオチド−リン酸構造を有する化合物等を燃料極に作用する電子メディエータとして利用できる。

また、空気極に作用する電子メディエータとしては、主にＡＢＴＳ〔2,2'-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonate) 〕）、Ｏｓ、Ｒｕ、Ｆｅ、Ｃｏ等の金属錯体等を用いることができる。

そしてこの系においては、以下のようにして発電が行われる。先ず、酵素溶液に燃料であるメタノールが供給されると、酵素溶液中のＡＤＨがメタノールの酸化を触媒し、ホルムアルデヒドを生成する。このときメタノールから２Ｈ⁺ と２電子とを除去し、ＮＡＤ⁺ の還元体であるＮＡＤＨと、Ｈ⁺ とを生じる。

次に、ＦａｌＤＨがホルムアルデヒドにＨ₂ Ｏを付加するとともに２Ｈ⁺ と２電子とを除去し、蟻酸を生成する。このとき、ＮＡＤＨとＨ⁺ とを生じる。

次に、ＦａｔｅＤＨが蟻酸から２Ｈ⁺ と２電子とを除去して、最終生成物であるＣＯ₂ を生成する。このとき、ＮＡＤＨとＨ⁺ とを生じる。最終生成物であるＣＯ₂ は、酵素溶液系から取り除かれれば（通常ガスとして）、酵素溶液のｐＨを大きく変化させることがない。このため、酵素活性の低下が抑制される。

そして次に、上述した過程で生成したＮＡＤＨをＤＩが酸化して、電子メディエータの酸化体に電子を渡して電子メディエータの還元体とする。なお、電子メディエータがＶＫ３である場合には、ＶＫ３の酸化体は２電子と２Ｈ⁺とを受け取り、ＶＫ３の還元体となる。次いで電子メディエータの還元体が電子を燃料極に渡し、電子メディエータの酸化体に戻る。ＤＩによってＮＡＤＨは酸化され、ＮＡＤ⁺とＨ⁺とになり、生成したＮＡＤ⁺は上述したＮＡＤ⁺依存型デヒドロゲナーゼによるメタノールの分解過程で再度利用される。この結果、１分子のＮＡＤＨから燃料極へ２つの電子を渡すことになり、直流電流を取り出すことができる。

以上のように、３種類のＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼが１分子のメタノールをＣＯ₂ まで分解する過程で、合計３分子のＮＡＤＨが作られる。この段階では、エネルギー状態の異なるＨ⁺ を有する燃料からそれぞれのＨ⁺ を引き抜く過程で、それらの化学エネルギーをＮＡＤＨという同一物質に変換する。このＮＡＤＨが有する化学エネルギーを利用すること、すなわちＮＡＤＨが有する電子を燃料極に渡すことにより、高いエネルギー変換効率の燃料電池を実現することができる。

ＮＡＤＨから燃料極への電子の移動を円滑に行うためには、ＤＩの酵素活性に対して電子メディエータを酵素溶液中に充分に存在させることが好ましい。

また、上記の酵素が効率よく定常的に反応するために、酵素溶液は、トリス緩衝液、リン酸緩衝液等の緩衝液によって、例えばｐＨ７付近にｐＨが維持されていることが好ましい。また、酵素溶液の温度も、温度制御系によって例えば４０℃付近に維持されていることが好ましい。さらに、酵素溶液のイオン強度（Ion Strength: 以下Ｉ．Ｓ．と称する。）は、あまり大きすぎても小さすぎても酵素活性に悪影響を与えるが、電気化学応答性も考慮すると、適度なイオン強度であること、例えば０．３程度であることが好ましい。ただし、上記のｐＨ、温度及びイオン強度は、用いる酵素それぞれに最適値が存在し、上述した値に限定されるものではない。

さらに、上述した各種の酵素、補酵素及び電子メディエータは、酵素溶液中に溶解されて用いられる他、バイオセンサ等の分野で提案されている一般的な方法でこれらのうち少なくとも一種が電極上又は電極近傍に固定化されて用いられてもかまわない。例えば、燃料極として、活性炭等の表面積の広い材料を３次元的に高密度に配列させた電極を用いることで、電子メディエータの有効な反応電極面積を拡大し、電流密度のさらなる向上を図ることができる。また、例えばグルタルアルデヒドによる架橋で酵素を電極表面に高密度に固定化させることで、酵素から電極表面近傍の電子メディエータへの電子の受け渡しがより効率的となり、電流密度を向上させることもできる。

なお、本発明に用いられる酵素は、上述した酵素に限定されず、その他の酵素でも構わない。また、上述したＡＤＨ、ＦａｌＤＨ、ＦａｔｅＤＨ及びＤＩは、ミューテーションによりｐＨや阻害物質に対して比較的安定とされていてもよい。さらに、空気極用の酵素としては、ラッカーゼ、ビリルビンオキシダーゼ等の公知の酵素を用いてもよい。

本発明の燃料電池の燃料としては、メタノールの他、エタノール等のアルコール、グルコース等の糖類、脂肪類、タンパク質、糖代謝の中間生成物等の有機酸（グルコース−６−リン酸、フルクトース−６−リン酸、フルクトース−１，６−ビスリン酸、トリオースリン酸イソメラーゼ、１，３−ビスホスホグリセリン酸、３−ホスホグリセリン酸、２−ホスホグリセリン酸、ホスホエノールピルビン酸、ピルビン酸、アセチル−ＣｏＡ、クエン酸、ｃｉｓ−アコニット酸、イソクエン酸、オキサロコハク酸、２−オキソグルタル酸、スクシニル−ＣｏＡ、コハク酸、フマル酸、Ｌ−リンゴ酸、オキサロ酢酸等）、これらの混合物等を用いてもよい。中でもグルコース、エタノール、糖代謝の中間生成物等は、上述した酵素を単独又は適当な複数種類用いて組み合わせるとともに、特にＴＣＡ回路に関与する複数の酵素を用い、環境条件を最適化することで、上述した燃料をメタノールとした系と同様に、燃料がＣＯ₂ まで酸化される系を実現できる。特にグルコースは取り扱いが極めて容易な材料であるため好ましい燃料である。

この場合、用いる酵素は、燃料に応じて最適な酵素を選択して使用することが好ましい。例えば燃料極に用いる酵素としては、グルコースデヒドロゲナーゼ、電子伝達系の一連の酵素、ＡＴＰ合成酵素、糖代謝に関与する酵素（例えばヘキソキナーゼ、グルコースリン酸イソメラーゼ、ホスホフルクトキナーゼ、フルクトース二リン酸アルドラーゼ、トリオースリン酸イソメラーゼ、グリセルアルデヒドリン酸デヒドロゲナーゼ、ホスホグリセロムターゼ、ホスホピルビン酸ヒドラターゼ、ピルビン酸キナーゼ、Ｌ−乳酸デヒドロゲナーゼ、Ｄ−乳酸デヒドロゲナーゼ、ピルビン酸デヒドロゲナーゼ、クエン酸シンターゼ、アコニターゼ、イソクエン酸デヒドロゲナーゼ、２−オキソグルタル酸デヒドロゲナーゼ、スクシニル−ＣｏＡシンテターゼ、コハク酸デヒドロゲナーゼ、フマラーゼ、マロン酸デヒドロゲナーゼ等）等の公知の酵素を挙げることができる。

図３は、燃料にエタノールを用いた場合の複合酵素反応を示すものである。エタノールの場合、第１段階では、アルコールデヒドロゲナーゼ（ＡＤＨ）の作用によりエタノールが酸化されてアセトアルデヒドになり、第２段階では、アルデヒドデヒドロゲナーゼ（ＡｌＤＨ）の作用によりアセトアルデヒドが酸化されて酢酸になる。各段階では、ＮＡＤ⁺ （酸化体）が還元されて、ＮＡＤＨ（還元体）が生成する。電子メディエータを介した電子の受け渡しは、先の図２に示すメタノールの場合と同様である。ここで、ＡＤＨ及びＡｌＤＨの酵素活性をそれぞれＵ（ＡＤＨ）、Ｕ（ＡｌＤＨ）とすると、Ｕ（Ｅ１）に相当するＵ（ＡＤＨ）とＵ（Ｅ２）に相当するＵ（ＡｌＤＨ）は、０＜Ｕ（ＡＤＨ）≦Ｕ（ＡｌＤＨ）である。また、これらＵ（ＡＤＨ）とＵ（ＡｌＤＨ）の総和はＤＩの酵素活性Ｕ（ＤＩ）以下であり、Ｕ（ＡＤＨ）＋Ｕ（ＡｌＤＨ）≦Ｕ（ＤＩ）である。

図４は、燃料にグルコースを用いた場合の複合酵素反応を示すものである。グルコースの場合、第１段階の酸化反応では、グルコースデヒドロゲナーゼ（ＧＤＨ）の作用により、β−Ｄ−グルコースがＤ−グルコノ−δ−ラクトンに分解される。Ｄ−グルコノ−δ−ラクトンは、加水分解によりＤ−グルコネートになり、Ｄ−グルコネートは、グルコノキナーゼの存在下、アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）をアデノシン二リン酸（ＡＤＰ）とリン酸に加水分解することでリン酸化され、６−フォスフォ−Ｄ−グルコネートになる。この６−フォスフォ−Ｄ−グルコネートは、第２段階の酸化反応において、フォスフォグルコネートデヒドロゲナーゼ（ＰｈＧＤＨ）の作用により、２−ケト−６−フォスフォ−Ｄ−グルコネートに酸化される。各酸化反応では、ＮＡＤ⁺ （酸化体）が還元されて、ＮＡＤＨ（還元体）が生成する。電子メディエータを介した電子の受け渡しは、先の図２に示すメタノールの場合と同様である。ここで、ＧＤＨ及びＰｈＧＤＨの酵素活性をそれぞれＵ（ＧＤＨ）、Ｕ（ＰｈＧＤＨ）とすると、Ｕ（Ｅ１）に相当するＵ（ＧＤＨ）とＵ（Ｅ２）に相当するＵ（ＰｈＧＤＨ）は、０＜Ｕ（ＧＤＨ）≦Ｕ（ＰｈＧＤＨ）である。また、これらＵ（ＧＤＨ）とＵ（ＰｈＧＤＨ）の総和はＤＩの酵素活性Ｕ（ＤＩ）以下であり、Ｕ（ＧＤＨ）＋Ｕ（ＰｈＧＤＨ）≦Ｕ（ＤＩ）である。

本発明の燃料電池において、燃料極には、グラッシーカーボン等のカーボン、Ｐｔ、Ａｕ等を使用できる。空気極としては、例えばＰｔ等の触媒を担持したカーボンをフッ素系樹脂等で接合したもの等を利用できる。また、空気極には、さらにラッカーゼ等の酸化還元酵素を含有させてもよい。プロトン伝導膜としては、例えば、米国デュポン社製、商品名Nafion117 等のフッ素系樹脂等が好適である。

以上説明したように、本発明の燃料電池では、各酵素の酵素活性の比を後段階となるにしたがって増大させ、例えば上述の式（１）及び式（２）のように規定することで、燃料（例えばメタノール）をＣＯ₂ まで分解するとともにＮＡＤＨ及びＨ⁺ を生成する反応、及び生成したＮＡＤＨを分解する反応を迅速に進めることができる。また、電子メディエータとしてＶＫ３を選択することで、ＮＡＤＨから燃料極への電子の移動速度を速めることができる。以上の手法を単独で、又は併用することで、生体代謝を利用した燃料電池において、これまでにない大きな電流密度を実現することが可能となる。特に２つの方法を併用することが好ましく、これによってさらなる反応速度の向上が図られ、より大きな電流密度が得られる。

また、本発明の燃料電池は、高効率なエネルギー変換機構である生体代謝を利用して発電を行うので、室温での安定動作性に優れ、小型化及び軽量化が可能であり、燃料の取り扱いも極めて容易である等の利点も兼ね備える。

さらに、電池反応に寄与する酵素は、目的の酵素を産生する細胞や微生物等を培養し、常法により抽出、精製すること等により得られるため、燃料電池の低コスト化を図ることも可能となる。

なお、本発明は上述の記載に限定されることはなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲において適宜変更可能である。

以下、本発明を適用した具体的な実施例について、実験結果に基づいて説明する。下記の比較例及び実施例では、溶液中に酵素、補酵素、電子メディエータ、燃料等を随時添加していくが、それぞれを先ず溶液に溶解させ、添加量を数μｌオーダーと非常に少なく制御し、滴下以前の物質濃度減少、および溶液温度変化が無視できるように実験を行った。

＜実験１＞
先ず、ＮＡＤＨの生成速度を調べることで、ＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼの最適な酵素活性の比について検討した。

実施例１
３ｍｌの０．１Ｍトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．０、Ｉ．Ｓ．＝０．３）にＮＡＤ⁺ を５ｍＭ、メタノールを１Ｍ添加し、この溶液を撹拌するとともにアルゴンガスでパージを行った。さらにＡＤＨを２５ユニット、ＦａｌＤＨを５０ユニット、ＦａｔｅＤＨを７５ユニット添加した。これらＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼを溶液に添加した時点から、紫外可視分光光度計を用いて吸光度を経時的に測定した。光路長は１ｃｍである。測定波長はＮＡＤＨに特徴的な３４０ｎｍを選び、その吸光度変化から生成したＮＡＤＨ濃度を決定した。なお、酵素溶液の温度は、４０±１℃の範囲に収まるように制御した。

実施例２
ＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼとして、ＡＤＨを２５ユニット、ＦａｌＤＨを１００ユニット、ＦａｔｅＤＨを２００ユニット添加したこと以外は、実施例１と同様にしてＮＡＤＨ濃度を測定した。

比較例１
ＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼとして、ＡＤＨを２５ユニット添加し、ＦａｌＤＨ及びＦａｔｅＤＨを添加しなかったこと以外は、実施例１と同様にしてＮＡＤＨ濃度を測定した。

比較例２
ＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼとして、ＡＤＨを２５ユニット、ＦａｌＤＨを５０ユニット添加し、ＦａｔｅＤＨを添加しなかったこと以外は、実施例１と同様にしてＮＡＤＨ濃度を測定した。

比較例３
ＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼとして、ＡＤＨを２５ユニット添加し、ＦａｌＤＨ及びＦａｔｅＤＨを添加せずに測定を開始し、測定開始後７．８時間後にＦａｌＤＨを５０ユニット添加し、さらに測定開始後９．０時間後にＦａｔｅＤＨを７５ユニット添加したこと以外は、実施例１と同様にしてＮＡＤＨ濃度を測定した。

比較例４
ＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼとして、ＡＤＨを２５ユニット、ＦａｌＤＨを２０ユニット、ＦａｔｅＤＨを１５ユニット添加したこと以外は、実施例１と同様にしてＮＡＤＨ濃度を測定した。

以上のように測定した実施例１、実施例２、及び比較例１〜比較例４の測定時間に対するＮＡＤＨ濃度の変化を、図５に示す。また、実施例１、実施例２、及び比較例１〜比較例４に用いたＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼの添加量を下記の表１に示す。なお、表１中、比較例３の（＋）は、測定の最初から酵素を添加したのではなく、測定途中に酵素を添加したことを表す。

図５から、実施例１は、時間の経過に伴ってＮＡＤＨが順調に増加しており、ＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼを１種類又は２種類しか含まない比較例１及び比較例２に比べてＮＡＤＨの生成速度が著しく高いことがわかる。

また、ＡＤＨ、ＦａｌＤＨ、ＦａｔｅＤＨの順に増大する酵素活性の比を、実施例１に比べてさらに増大させた実施例２では、実施例１よりもさらにＮＡＤＨの生成速度の向上が観察された。

これに対して、ＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼとしてＡＤＨのみが添加された比較例１では、ＮＡＤＨの生成は測定７時間後にほぼ頭打ちとなった。また、ＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼとしてＡＤＨ及びＦａｌＤＨが添加された比較例２では、比較例１に比べてＮＡＤＨ生成速度は向上しているものの、やはりＮＡＤＨの生成は頭打ちとなった。この原因は、メタノールがＣＯ₂ まで分解されずにホルムアルデヒド又は蟻酸として酵素溶液に蓄積し、これらがｐＨの変化等を招いて酵素活性を低下させたためと考えられる。なお、図５中には示していないが、比較例１では、測定開始後７．８時間以降もＮＡＤＨ濃度の顕著な増加は観察されなかった。

また、比較例３では、ＦａｌＤＨの添加までは比較例１と同じく低いＮＡＤＨ生成速度であったが、ＦａｌＤＨ及びＦａｔｅＤＨの添加によって、それぞれの時点でＮＡＤＨの生成速度が急激に上昇した。この理由は、測定開始後しばらくはホルムアルデヒドが蓄積していたが、ＦａｌＤＨ及びＦａｔｅＤＨの添加によって蟻酸、さらにＣＯ₂ へと分解が進行したためと考えられる。

また、比較例４は、３種類のＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼを含有するものの、ＡＤＨ、ＦａｌＤＨ、ＦａｔｅＤＨの酵素活性比を実施例１とは逆に順次減少させたものであり、ＮＡＤＨ生成速度は頭打ちとなった。この比較例４では、ＡＤＨの酵素活性に比べてＦａｌＤＨ及びＦａｔｅＤＨの酵素活性が不足しており、中間生成物であるホルムアルデヒド及び蟻酸の分解が停滞することによって、比較例１及び比較例２と同様の現象が引き起こされたと考えられる。

以上の実験１の結果から、メタノールをＣＯ₂ に分解するに際して酵素活性を低下させるような中間生成物は速やかに分解する必要があり、このためにはＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼとしてＡＤＨ、ＦａｌＤＨ、ＦａｔｅＤＨの３種類の酵素を、これらの酵素活性の比がこの順に増大させるよう存在させなければならないことが判明した。

＜実験２＞
次に、３極セルを用いてオープンサーキット（ＯＣＶ）測定を行い、ＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼ及びＤＩの最適な酵素活性の比を検討した。３極セルは、作用極としてグラッシーカーボン（直径３ｍｍ）、対極としてＰｔ線、参照電極としてＡｇ／ＡｇＣｌを用いたものである。また３極セルは、４０±１℃の範囲内に収まるように温度制御される。

実施例３
実施例３では、実験１における実施例１の酵素溶液にＶＫ３を添加して調製した酵素溶液に、ＤＩを２００ユニット添加したときのＯＣＶを測定した。

そして、以下のようにしてＯＣＶ測定を行った。具体的には、１ｍｌのトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．０）（Ｉ．Ｓ．＝０．３）にＶＫ３（酸化体）を５ｍＭ、ＮＡＤ⁺ を５ｍＭ、メタノールを１Ｍ添加し、この溶液を撹拌するとともにアルゴンガスでパージを行った。なお、ここでのＶＫ３の濃度（５ｍＭ）は、ＤＩの酵素活性に対して充分量である。次にＡＤＨを２５ユニット、ＦａｌＤＨを５０ユニット、ＦａｔｅＤＨを７５ユニット添加し、ＯＣＶ測定を行った。ＯＣＶが安定した時点でさらにＤＩを２００ユニット添加し、この時点を測定開始時刻としてＯＣＶを経時的に測定した。

実施例４
ＤＩを４００ユニット添加したこと以外は、実施例３と同様にしてＯＣＶを測定した。

比較例５
ＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼとしてＡＤＨを２５ユニット添加し、ＦａｌＤＨ及びＦａｔｅＤＨを添加しなかったこと以外は、実施例３と同様にしてＯＣＶを測定した。

比較例６
ＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼとして、ＡＤＨを２５ユニット、ＦａｌＤＨを５０ユニット添加し、ＦａｔｅＤＨを添加しなかったこと以外は、実施例３と同様にしてＯＣＶを測定した。

比較例７
ＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼとして、ＡＤＨを２５ユニット添加し、ＦａｌＤＨ及びＦａｔｅＤＨを添加せずに測定を開始し、ＯＣＶ測定開始後２８．１分後にＦａｌＤＨを５０ユニット添加し、さらに測定開始後３７．３分後にＦａｔｅＤＨを７５ユニット添加したこと以外は、実施例３と同様にしてＯＣＶを測定した。

比較例８
ＤＩを１００ユニット添加したこと以外は、実施例３と同様にしてＯＣＶを測定した。

以上のように測定した実施例３、実施例４、及び比較例５〜比較例８のＯＣＶの変化を、図６に示す。また、実施例３、実施例４、及び比較例５〜比較例８に用いたＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼ及びＤＩの添加量（酵素活性）を下記の表２に示す。なお、表２中、比較例７の（＋）は、測定の最初から酵素を添加したのではなく、測定途中に酵素を添加したことを表す。

図６から明らかなように、いずれの例においてもＯＣＶ測定開始後から酵素反応が進行してＶＫ３の還元体が生成し、ＯＣＶの減少が観察された。しかしながら、添加した酵素活性の大小によってＯＣＶの減少速度が異なるという結果が得られた。例えば実施例３では、ＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼによって生成するＮＡＤＨに対してＤＩが充分量存在し、後述する比較例５〜比較例８に比べてＯＣＶの減少速度が大であった。また、ＤＩの酵素活性をさらに増大させた実施例４では、ＮＡＤＨからＶＫ３への電子の受け渡しが加速し、ＯＣＶの減少速度が増大し、ＶＫ３の平衡酸化還元電位である−０．２１Ｖ（ｖｓＡｇ／ＡｇＣｌ）付近に迅速に到達した。これらのことから、実施例３及び実施例４のＤＩは、生成されるＮＡＤＨ量に対して充分であったといえる。

これに対して、ＮＡＤＨの生成速度に比べてＤＩの酵素活性を不足させた比較例８では、測定開始初期のＯＣＶの減少速度は充分であったが、時間の経過とともにＯＣＶの減少速度が低下した。この理由は、ＤＩの酵素反応が律速となり、ＮＡＤＨ量が増加したためと考えられる。

また、比較例５〜比較例７では、ＤＩの酵素活性は充分であるが、ＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼの酵素活性が不足し、ＮＡＤＨ生成速度が律速となり、ＯＣＶの減少速度が小さくなったと考えられる。なお、図６中には示していないが、比較例５では、測定開始後２８．１分以降もＯＣＶの顕著な低下は観察されなかった。

以上の実験２の結果から、ＮＡＤＨを生成するＮＡＤ⁺ 依存型デヒドロゲナーゼの酵素活性の和よりも、ＮＡＤＨを酸化するＤＩの酵素活性が大きくなければならないことが判明した。

なお、上述の実験２では、作用電極、すなわち燃料極としてグラッシーカーボンを用いて動作させた例を示したが、Ｐｔ及びＡｕを用いた場合にも同様に動作することが確認された。

また、上述の実験２では３極セルを用いた例を示したが、空気極としてＰｔ触媒、プロトン伝導膜としてＮａｆｉｏｎ膜を用いた燃料電池を動作させた場合にも、実験２と同様な結果が得られることを確認した。

Claims (8)

1. 燃料を３段階以上の反応により分解し、前記分解における酸化反応により電子を生成し、少なくとも１つの酵素が補酵素の還元体を生成する酵素群を有し、前記補酵素から、さらに電子メディエータに電子の受け渡しをする燃料電池であって、
   前記酵素群は、第１の酵素、第２の酵素、及び、第３の酵素、並びに、前記補酵素の酸化体を生成する補酵素酸化酵素を含み、
   前記第１の酵素は前記燃料の分解反応により分解物１を生成し、
   前記第２の酵素は前記分解物１または前記分解物１の加水分解物の分解反応により分解物２を生成し、
   前記第３の酵素は前記分解物２または前記分解物２の加水分解物の分解反応により分解物３を生成し、
   前記酵素群は、以下の式（１）および式（２）を満たす燃料電池。
   ０＜Ｕ（Ｅ１）≦Ｕ（Ｅ２）≦Ｕ（Ｅ３）・・・・・・・・（１）
   Ｕ（Ｅ）≦Ｕ（Ｃｏ）・・・・・・・・・・・・・・・・・（２）
   但し、Ｕ（Ｅ１）は第１の酵素の酵素活性を表し、Ｕ（Ｅ２）は第２の酵素の酵素活性を表し、Ｕ（Ｅ３）は第３の酵素の酵素活性を表し、Ｕ（Ｃｏ）は前記補酵素酸化酵素の酵素活性を表し、Ｕ（Ｅ）は前記酵素群のうち、前記補酵素の還元体の生成に関与する酵素の酵素活性の総和を表す。
2. 前記電子メディエータはキノン骨格を有する化合物である請求項１に記載の燃料電池。
3. 前記燃料が、アルコール、糖類、脂肪、タンパク質、有機酸から選ばれる少なくとも１種である請求項１に記載の燃料電池。
4. 前記燃料が、メタノール、グルコースから選ばれる少なくとも１種である請求項３に記載の燃料電池。
5. 前記燃料がメタノールであり、前記第１の酵素がアルコールデヒドロゲナーゼ、前記第２の酵素がホルムアルデヒドデヒドロゲナーゼ、前記第３の酵素が蟻酸デヒドロゲナーゼである請求項１に記載の燃料電池。
6. 前記燃料がグルコースであり、前記第１の酵素がグルコースデヒドロゲナーゼ、前記第２の酵素がグルコノキナーゼ、前記第３の酵素がフォスフォグルコネートデヒドロゲナーゼである請求項１に記載の燃料電池。
7. 燃料電池を用いるポータブル電源において、
   前記燃料電池が、
   燃料を３段階以上の反応により分解し、前記分解における酸化反応により電子を生成し、少なくとも１つの酵素が補酵素の還元体を生成する酵素群を有し、前記補酵素から、さらに電子メディエータに電子の受け渡しをする燃料電池であって、
   前記酵素群は、第１の酵素、第２の酵素、及び、第３の酵素、並びに、前記補酵素の酸化体を生成する補酵素酸化酵素を含み、
   前記第１の酵素は前記燃料の分解反応により分解物１を生成し、
   前記第２の酵素は前記分解物１または前記分解物１の加水分解物の分解反応により分解物２を生成し、
   前記第３の酵素は前記分解物２または前記分解物２の加水分解物の分解反応により分解物３を生成し、
   前記酵素群は、以下の式（１）および式（２）を満たすものであるポータブル電源。
   ０＜Ｕ（Ｅ１）≦Ｕ（Ｅ２）≦Ｕ（Ｅ３）・・・・・・・・（１）
   Ｕ（Ｅ）≦Ｕ（Ｃｏ）・・・・・・・・・・・・・・・・・（２）
   但し、Ｕ（Ｅ１）は第１の酵素の酵素活性を表し、Ｕ（Ｅ２）は第２の酵素の酵素活性を表し、Ｕ（Ｅ３）は第３の酵素の酵素活性を表し、Ｕ（Ｃｏ）は前記補酵素酸化酵素の酵素活性を表し、Ｕ（Ｅ）は前記酵素群のうち、前記補酵素の還元体の生成に関与する酵素の酵素活性の総和を表す。
8. 燃料電池を用いる電子機器において、
   前記燃料電池が、
   燃料を３段階以上の反応により分解し、前記分解における酸化反応により電子を生成し、少なくとも１つの酵素が補酵素の還元体を生成する酵素群を有し、前記補酵素から、さらに電子メディエータに電子の受け渡しをする燃料電池であって、
   前記酵素群は、第１の酵素、第２の酵素、及び、第３の酵素、並びに、前記補酵素の酸化体を生成する補酵素酸化酵素を含み、
   前記第１の酵素は前記燃料の分解反応により分解物１を生成し、
   前記第２の酵素は前記分解物１または前記分解物１の加水分解物の分解反応により分解物２を生成し、
   前記第３の酵素は前記分解物２または前記分解物２の加水分解物の分解反応により分解物３を生成し、
   前記酵素群は、以下の式（１）および式（２）を満たすものである電子機器。
   ０＜Ｕ（Ｅ１）≦Ｕ（Ｅ２）≦Ｕ（Ｅ３）・・・・・・・・（１）
   Ｕ（Ｅ）≦Ｕ（Ｃｏ）・・・・・・・・・・・・・・・・・（２）
   但し、Ｕ（Ｅ１）は第１の酵素の酵素活性を表し、Ｕ（Ｅ２）は第２の酵素の酵素活性を表し、Ｕ（Ｅ３）は第３の酵素の酵素活性を表し、Ｕ（Ｃｏ）は前記補酵素酸化酵素の酵素活性を表し、Ｕ（Ｅ）は前記酵素群のうち、前記補酵素の還元体の生成に関与する酵素の酵素活性の総和を表す。

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