JP5596318B2 - 感染症治療剤 - Google Patents
感染症治療剤 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5596318B2 JP5596318B2 JP2009191378A JP2009191378A JP5596318B2 JP 5596318 B2 JP5596318 B2 JP 5596318B2 JP 2009191378 A JP2009191378 A JP 2009191378A JP 2009191378 A JP2009191378 A JP 2009191378A JP 5596318 B2 JP5596318 B2 JP 5596318B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- granulysin
- group
- expression vector
- tuberculosis
- vivo expression
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 title claims description 29
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 title claims description 23
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title description 10
- 101710168479 Granulysin Proteins 0.000 claims description 222
- 102100021186 Granulysin Human genes 0.000 claims description 219
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims description 113
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 claims description 70
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 claims description 63
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 claims description 63
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 claims description 49
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 claims description 49
- 241000187479 Mycobacterium tuberculosis Species 0.000 claims description 41
- 108010065637 Interleukin-23 Proteins 0.000 claims description 40
- 102000013264 Interleukin-23 Human genes 0.000 claims description 40
- 108010066979 Interleukin-27 Proteins 0.000 claims description 30
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 27
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 26
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims description 25
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 21
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 19
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 17
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 9
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 claims description 7
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 claims description 7
- 101710104159 Chaperonin GroEL Proteins 0.000 claims description 5
- 241000711408 Murine respirovirus Species 0.000 claims description 5
- 229940100601 interleukin-6 Drugs 0.000 claims description 5
- 241001646725 Mycobacterium tuberculosis H37Rv Species 0.000 claims description 4
- 108700035964 Mycobacterium tuberculosis HsaD Proteins 0.000 claims description 4
- 229940117681 interleukin-12 Drugs 0.000 claims description 4
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 claims description 3
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 claims description 3
- 229940124829 interleukin-23 Drugs 0.000 claims description 3
- 102100036678 Interleukin-27 subunit alpha Human genes 0.000 claims 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 118
- 102100033096 Interleukin-17D Human genes 0.000 description 29
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 28
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 24
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 24
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 22
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 21
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 21
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 17
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 17
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 description 15
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 15
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 14
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 14
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 13
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 12
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 12
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 10
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 10
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 7
- 238000002224 dissection Methods 0.000 description 7
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 7
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 7
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 7
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 6
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 6
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 5
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 5
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 5
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 4
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 4
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 4
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 4
- KHGNFPUMBJSZSM-UHFFFAOYSA-N Perforine Natural products COC1=C2CCC(O)C(CCC(C)(C)O)(OC)C2=NC2=C1C=CO2 KHGNFPUMBJSZSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 3
- 230000002365 anti-tubercular Effects 0.000 description 3
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 3
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 3
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 3
- 210000005265 lung cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 229930192851 perforin Natural products 0.000 description 3
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 230000004544 DNA amplification Effects 0.000 description 2
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 239000004067 bulking agent Substances 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 2
- 230000001524 infective effect Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 1
- 101100018698 Mus musculus Il27 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000944608 Mycobacterium tuberculosis (strain ATCC 25618 / H37Rv) Chaperonin GroEL 2 Proteins 0.000 description 1
- 206010034133 Pathogen resistance Diseases 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 108700005077 Viral Genes Proteins 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 239000013601 cosmid vector Substances 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 1
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 231100001083 no cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 108060008226 thioredoxin Proteins 0.000 description 1
- 230000005030 transcription termination Effects 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/20—Interleukins [IL]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/164—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/1703—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- A61K38/1709—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/1703—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- A61K38/1709—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- A61K38/1729—Cationic antimicrobial peptides, e.g. defensins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/20—Interleukins [IL]
- A61K38/204—IL-6
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/20—Interleukins [IL]
- A61K38/208—IL-12
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/04—Mycobacterium, e.g. Mycobacterium tuberculosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
- A61P31/06—Antibacterial agents for tuberculosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Zoology (AREA)
- Marine Sciences & Fisheries (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
しかし、9Kグラニュライシンがマクロファージに入り込むためには、同じ細胞傷害性顆粒内分子であるパーフォリンを必要とする。これは、9Kグラニュライシンが細胞内に入るためにはパーフォリンによって標的細胞に穴を空ける必要があるからである。従って、9Kグラニュライシンは細胞障害性がある。
ところが、15Kグラニュライシンは標的細胞に穴をあけるパーフォリンを必要とせず、マクロファージに入り込み、マクロファージに取り込まれた結核菌等の細菌を殺傷する。よって15Kグラニュライシンには細胞障害性がない。
しかしながら、更に強力な感染症治療剤を作製するために、15Kグラニュライシンと組み合わせて投与することで15Kグラニュライシン単独で投与するよりもマクロファージに取り込まれた結核菌等の細菌による感染症に効果のある感染症治療剤が求められている。
請求項2に係る発明は、15Kグラニュライシンと以下の物質(a)又は(b)を有効成分として含む、結核菌による感染症治療剤に関する。
(a)インターロイキン6
(b)インターロイキン23
請求項3に係る発明は、15Kグラニュライシンをコードする遺伝子を組み込んで、15Kグラニュライシンを体内発現させるベクターと以下の物質(a)乃至(c)のいずれか一つを有効成分として含む、結核菌による感染症治療剤に関する。
(a)インターロイキン6
(b)インターロイキン23
(c)インターロイキン27
請求項4に係る発明は、以下の(a)、(b)を有効成分として含む、結核菌による感染症治療剤に関する。
(a)15Kグラニュライシンをコードする遺伝子を組み込んで、15Kグラニュライシンを体内発現させるベクター
(b)センダイウイルスのエンベロープにヒト型結核菌H37Rvの65KDaヒートショックプロテインをコードする遺伝子とインターロイキン12をコードする遺伝子を組み込んで、65KDaのヒートショックプロテインとインターロイキン12を体内発現させるベクター
請求項5に係る発明は、前記15Kグラニュライシンが、組換え蛋白質であることを特徴とする請求項1又は2に記載の結核菌による感染症治療剤に関する。
尚、HSP65DNAとIL-12DNA体内発現ベクターはヒト型結核菌H37Rvの65KDaヒートショックプロテインのDNA(HSP65DNA)とIL-12のDNAをセンダイウイルス(HVJ)のエンベロープに組み込んだ体内発現ベクターで、結核菌に対して強い治療効果を有することが知られている(Okada et.al, Jpn.J.Clin.Immunol.,31 (5) 356〜368(2008))。
本治療剤の有効成分として用いる15Kグラニュライシンは、生体から分離して用いることも可能であるが、生体微量成分である故、15Kグラニュライシンをコードする遺伝子を発現させて得られる、組換え蛋白質として用いることが好適である。また、15Kグラニュライシンをコードする遺伝子が組み込まれた、15Kグラニュライシンの体内発現ベクターを有効成分として、体内で15Kグラニュライシンを産生させることも、好適な手段である。
15Kグラニュライシンをコードする遺伝子配列は、既に報告されており、これを基に、15Kグラニュライシンをコードする遺伝子を効率的に調製して、この遺伝子を発現させることにより、15Kグラニュライシンの組換え蛋白質を調製することが可能である。
これを、適切な遺伝子発現用ベクターに組み込み、かかる組換えベクターで形質転換を行った大腸菌、枯草菌、酵母、昆虫細胞などの適切な宿主から、所望する15Kグラニュライシンを得ることができる。
この形態の本治療剤の有効成分は、上記の組換え蛋白質の発現に用いられた、15Kグラニュライシンをコードする遺伝子を、体内発現ベクターに組み込んだ、組換えベクターである。
15Kグラニュライシンの組換え蛋白質と15Kグラニュライシンの体内発現ベクターの両物質を用いることにより、単独で用いるよりも強いマクロファージに取り込まれた結核菌等の細菌の殺傷効果を得ることができる。
15Kグラニュライシンの組換え蛋白質とIL-6またはIL−23またはIL−27のいずれか一つを用いることにより、単独で用いるよりも強いマクロファージに取り込まれた結核菌等の細菌の殺傷効果を得ることができる。
15Kグラニュライシンの体内発現ベクターとIL-6またはIL−23またはIL−27のいずれか一つを用いることにより、単独で用いるよりも強いマクロファージに取り込まれた結核菌等の細菌の殺傷効果を得ることができる。
15Kグラニュライシンの体内発現ベクターとHSP65DNAとIL-12DNA体内発現ベクターの投与形態は、注射剤形態であることが一般的であり、静脈内、筋肉内、骨内、関節内、皮下、皮内、腹腔内投与などにより、投与され得る。このような本治療剤の投与量は、剤の投与方法、投与形態、患者の症状などに応じて適宜選択することが可能であり、特に限定されるべきものではない。
15Kグラニュライシン組換え蛋白質はR&D Systems社の精製蛋白質を使用した。IL-6はMiltenyi Biotec(Auburn, CA)社製の精製蛋白質を使用した。IL−23、IL−27はR&D Systems 社のrecombinant mouse IL-23及びrecombinant mouse IL-27の精製蛋白質を使用した。
マウスはDBA/1とBALB/cを用いた。これらのマウスは結核菌に易感染性である。
有意差検定にはStudentのt検定を用いた。
15Kグラニュライシンの体内発現ベクターは1匹(20g)あたり1日に100μg/0.2mlを50μgずつ両側下肢の前頸骨筋に筋肉注射することによって投与した。
IL-6は1匹(20g)あたり1日に1μg(≧5×104International Unit)、IL−23は1匹(20g)あたり2μg(≧5×104International Unit)、IL-27は1匹(20g)あたり1日に1μg(≧5×104International Unit)を3回に分けて1/3ずつ腹腔内投与した。
結核菌を腹腔内感染させる場合は1×107CFUを生理食塩水0.2mlに懸濁し、これを腹腔内に投与することによって行った。
結核菌を肺感染させる場合にはエアゾルチャンバーで1×103CFUをマウス気道内に投与することによって行った。
(腹腔内感染における15Kグラニュライシン組換え蛋白質と15Kグラニュライシンの体内発現ベクターの結核菌に対する相乗効果について)
8週齢のDBA/1マウスに結核菌を腹腔内感染させた。そのマウスを何も与えない群(G1群)、15Kグラニュライシン組換え蛋白質と15Kグラニュライシンの体内発現ベクターを与える群(G2群)、15Kグラニュライシン組換え蛋白質のみを与える群(G5群)、15Kグラニュライシンの体内発現ベクターのみを与える群(G6群)に分けた。
(DBA/1マウスにおける15Kグラニュライシン組換え蛋白質とIL-6の結核菌に対する相乗効果について)
8週齢のDBA/1マウスにエアゾルチャンバーで結核菌を肺感染させた。これらのマウスを何も与えない群(G1群)、15Kグラニュライシン組換え蛋白質とIL-6を与える群(G3群)と15Kグラニュライシン組換え蛋白質のみを与える群(G5群)、IL-6のみを与える群(G7群)に分けた。
(15Kグラニュライシンの体内発現ベクターとIL-6の結核菌に対する相乗効果について)
エアゾルチャンバーで結核菌を肺感染させた8週齢のDBA/1マウスを何も投与しない群(G1群)、15Kグラニュライシンの体内発現ベクターとIL-6を投与する群(G9群)と15Kグラニュライシンの体内発現ベクターのみを投与する群(G6群)、IL-6のみを投与する群(G10群)に分けた。
(BALB/cマウスにおける15Kグラニュライシンの組換えタンパク質とIL-6の結核菌に対する相乗効果について)
結核の感染実験によく用いられるBALB/cマウスにエアゾルチャンバーで結核菌を肺感染させた。これらのマウスを何も投与しない群(G1群)、15Kグラニュライシン組換え蛋白質とIL-6を投与する群(G3群)と15Kグラニュライシン組換え蛋白質のみを投与する群(G5群)、IL-6のみを投与する群(G7群)に分けた。
(肺感染における、DBA/1マウスにおける15Kグラニュライシンの組換えタンパク質と15Kグラニュライシンの体内発現ベクターの結核菌に対する相乗効果について)
8週齢のDBA/1マウスにエアゾルチャンバーで結核菌を肺感染させた。これらのマウスを15Kグラニュライシン組換え蛋白質と15Kグラニュライシンの体内発現ベクターを投与する群(G2群)と15Kグラニュライシン組換え蛋白質のみを投与する群(G5群)、15Kグラニュライシンの体内発現ベクターのみを投与する群(G6群)に分けた。
(肺感染における15Kグラニュライシン組換え蛋白質と15Kグラニュライシンの体内発現ベクターの結核菌に対する相乗効果について)
8週齢のDBA/1マウスにエアゾルチャンバーで結核菌を肺感染させた。これらのマウスを何も投与しない群(G1群)、15Kグラニュライシン組換え蛋白質と15Kグラニュライシンの体内発現ベクターを投与する群(G2群)と15Kグラニュライシン組換え蛋白質のみを投与する群(G5群)、15Kグラニュライシンの体内発現ベクターのみを投与する群(G6群)に分けた。
(15Kグラニュライシン組換え蛋白質とIL-23の結核菌に対する相乗効果について)
DBA/1マウスにエアゾルチャンバーで結核菌を肺感染させた。これらのマウスを何も投与しない群(G1群)、15Kグラニュライシン組換え蛋白質とIL-23を投与する群(G3群)と15Kグラニュライシン組換え蛋白質のみを投与する群(G5群)、IL-23のみを投与する群(G7群)に分けた。
(15Kグラニュライシンの体内発現ベクターとIL-23の結核菌に対する相乗効果について)
DBA/1マウスにエアゾルチャンバーで結核菌を肺感染させた。これらのマウスを何も投与しない群(G1群)、15Kグラニュライシンの体内発現ベクターとIL-23を投与する群(G4群)と15Kグラニュライシンの体内発現ベクターのみを投与する群(G6群)、IL-23のみを投与する群(G7群)に分けた。
(15Kグラニュライシンの体内発現ベクターとIL-27の結核菌に対する相乗効果について)
BALB/cマウスにエアゾルチャンバーで結核菌を肺感染させた。これらのマウスを15Kグラニュライシンの体内発現ベクターとIL-27を投与する群(G4群)と15Kグラニュライシンの体内発現ベクターのみを投与する群(G6群)、IL-27のみを投与する群(G7群)に分けた。
(15Kグラニュライシンの体内発現ベクターとHSP65DNAとIL-12DNA体内発現ベクターの結核菌に対する相乗効果について)
エアゾルチャンバーで結核菌を肺感染させた8週齢のDBA/1マウスを15Kグラニュライシンの体内発現ベクターとHSP65DNAとIL-12DNA体内発現ベクターを投与する群(G11群)と15Kグラニュライシンの体内発現ベクターのみを投与する群(G6群)、HSP65DNAとIL-12DNA体内発現ベクターのみを投与する群(G12群)に分けた。
Claims (5)
- 15Kグラニュライシンと15Kグラニュライシンをコードする遺伝子を組み込んで、15Kグラニュライシンを体内発現させるベクターを有効成分として含む、結核菌による感染症治療剤。
- 15Kグラニュライシンと以下の物質(a)又は(b)を有効成分として含む、結核菌による感染症治療剤。
(a)インターロイキン6
(b)インターロイキン23 - 15Kグラニュライシンをコードする遺伝子を組み込んで、15Kグラニュライシンを体内発現させるベクターと以下の物質(a)乃至(c)のいずれか一つを有効成分として含む、結核菌による感染症治療剤。
(a)インターロイキン6
(b)インターロイキン23
(c)インターロイキン27 - 以下の(a)、(b)を有効成分として含む、結核菌による感染症治療剤。
(a)15Kグラニュライシンをコードする遺伝子を組み込んで、15Kグラニュライシンを体内発現させるベクター
(b)センダイウイルスのエンベロープにヒト型結核菌H37Rvの65KDaヒートショックプロテインをコードする遺伝子とインターロイキン12をコードする遺伝子を組み込んで、65KDaのヒートショックプロテインとインターロイキン12を体内発現させるベクター - 前記15Kグラニュライシンが、組換え蛋白質であることを特徴とする請求項1又は2に記載の結核菌による感染症治療剤。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US12/386974 | 2009-04-24 | ||
US12/386,974 US8288509B2 (en) | 2002-02-22 | 2009-04-24 | Therapeutic agent for infections, and treatment method using the same |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2010254662A JP2010254662A (ja) | 2010-11-11 |
JP5596318B2 true JP5596318B2 (ja) | 2014-09-24 |
Family
ID=42312886
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2009191378A Active JP5596318B2 (ja) | 2009-04-24 | 2009-08-20 | 感染症治療剤 |
Country Status (4)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US8288509B2 (ja) |
EP (2) | EP2243489B1 (ja) |
JP (1) | JP5596318B2 (ja) |
CN (1) | CN101869714A (ja) |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US8288509B2 (en) * | 2002-02-22 | 2012-10-16 | National Hospital Organization Kinki-chuo Chest Medical center | Therapeutic agent for infections, and treatment method using the same |
GB201005262D0 (en) * | 2010-03-29 | 2010-05-12 | Griffith Susan | Granulysin and derived peptides: use as novel anthelmintic molecules |
ES2521365B1 (es) * | 2013-02-06 | 2015-09-09 | Universidad De Zaragoza | Uso de la granulisina para el tratamiento de tumores sólidos |
CN105879058B (zh) * | 2016-05-10 | 2017-11-14 | 华中科技大学 | 一种结核病基因药物及其制备方法 |
CN107904252A (zh) * | 2017-11-20 | 2018-04-13 | 湖南丰晖生物科技有限公司 | 质粒载体及其构建方法、应用 |
CN107868799A (zh) * | 2017-11-20 | 2018-04-03 | 湖南丰晖生物科技有限公司 | 表达载体及其构建方法和应用 |
Family Cites Families (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0586812B1 (en) | 1992-07-13 | 2000-01-05 | Nisshin Flour Milling Co., Ltd. | Medicaments comprising glicentin as active ingredient |
WO1999022755A1 (en) * | 1997-11-04 | 1999-05-14 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Use of granulysin as an antimicrobial agent |
AU2002354427A1 (en) * | 2001-12-17 | 2003-06-30 | Bml, Inc. | Method of detecting extracellular granulysin |
US8288509B2 (en) * | 2002-02-22 | 2012-10-16 | National Hospital Organization Kinki-chuo Chest Medical center | Therapeutic agent for infections, and treatment method using the same |
JP4149713B2 (ja) * | 2002-02-22 | 2008-09-17 | 全司 岡田 | 感染症治療剤 |
US7160696B2 (en) * | 2003-04-14 | 2007-01-09 | The Penn State Research Foundation | Bovine lymphocyte-derived antibacterial protein |
WO2005026194A2 (en) * | 2003-09-12 | 2005-03-24 | The Regents Of The University Of California | Granulysin peptides and methods of use thereof |
US20050249699A1 (en) * | 2004-05-05 | 2005-11-10 | Stoff Jesse A | Immunodynamic complexes and methods for using and preparing such complexes |
US8357365B2 (en) * | 2005-02-14 | 2013-01-22 | The Regents Of The University Of California | Granulysin peptides and methods of use thereof |
US8202835B2 (en) * | 2005-06-17 | 2012-06-19 | Yitzchak Hillman | Disease treatment via antimicrobial peptides or their inhibitors |
EP1950218A1 (en) * | 2007-01-24 | 2008-07-30 | Centre National de la Recherche Scientifique | Sulfoglycolipid antigens, their process of preparation, and their use against tuberculosis |
EP2498795B1 (en) * | 2009-10-12 | 2016-12-07 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department of Health and Human Services | Granulysin in immunotherapy |
-
2009
- 2009-04-24 US US12/386,974 patent/US8288509B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2009-08-20 JP JP2009191378A patent/JP5596318B2/ja active Active
- 2009-09-30 EP EP09171752A patent/EP2243489B1/en not_active Not-in-force
- 2009-09-30 EP EP12183606.8A patent/EP2532358B1/en not_active Not-in-force
- 2009-10-21 CN CN200910206609A patent/CN101869714A/zh active Pending
-
2012
- 2012-09-06 US US13/604,645 patent/US20130011366A1/en not_active Abandoned
-
2014
- 2014-06-02 US US14/292,940 patent/US9233142B2/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US9233142B2 (en) | 2016-01-12 |
US20090274651A1 (en) | 2009-11-05 |
US20140308240A1 (en) | 2014-10-16 |
EP2532358A1 (en) | 2012-12-12 |
US20130011366A1 (en) | 2013-01-10 |
EP2243489A2 (en) | 2010-10-27 |
EP2243489B1 (en) | 2012-10-31 |
EP2532358B1 (en) | 2014-01-08 |
EP2243489A3 (en) | 2010-12-08 |
CN101869714A (zh) | 2010-10-27 |
US8288509B2 (en) | 2012-10-16 |
JP2010254662A (ja) | 2010-11-11 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5596318B2 (ja) | 感染症治療剤 | |
Kovach et al. | Cathelicidin-related antimicrobial peptide is required for effective lung mucosal immunity in Gram-negative bacterial pneumonia | |
Pott et al. | Type I and III interferon in the gut: tight balance between host protection and immunopathology | |
Broide et al. | Immunostimulatory DNA sequences inhibit IL-5, eosinophilic inflammation, and airway hyperresponsiveness in mice | |
Deng et al. | CpG oligodeoxynucleotides stimulate protective innate immunity against pulmonary Klebsiella infection | |
JP2006519014A (ja) | 乳酸菌からの抗炎症活性 | |
Duarte-Mata et al. | Antimicrobial peptides immune modulation role in intracellular bacterial infection | |
Sjölinder et al. | Important role for Toll-like receptor 9 in host defense against meningococcal sepsis | |
Heinrich et al. | The essential role of lipopolysaccharide-binding protein in protection of mice against a peritoneal Salmonella infection involves the rapid induction of an inflammatory response | |
US20050130889A1 (en) | Bacterical/permability-increasing protein(BPI) deletion analogs | |
WO2006123164A2 (en) | Lps-binding and bactericidal cytokines and interferons | |
WO2005014008A2 (en) | Treatment of disorders associated with natural killer t cells | |
JP7423523B2 (ja) | ディフェンシンによる移植片対宿主病の予防と治療 | |
US10736928B2 (en) | Pegylated recombinant bacteriophage | |
CN106552259A (zh) | 一种融合蛋白及其治疗疾病的用途 | |
JP4149713B2 (ja) | 感染症治療剤 | |
Williams et al. | The potential for monocyte-mediated immunotherapy during infection and malignancy-Part II: In vivo activation by exogenous cytokines and clinical applications | |
EP3355910A1 (en) | Aluminum based adjuvants for tolerogenic vaccination | |
US20090214469A1 (en) | Methods and Compositions for the Treatment of Sepsis | |
RU2744843C2 (ru) | Иммуноиндуцирующее средство | |
JP2001233784A (ja) | インターロイキン−18産生促進剤 | |
Jankowski et al. | IL-27 in Health and Disease | |
KR20220084052A (ko) | 치료제로서의 gne | |
Jacinto | Innate immunity adaptation and sensitization by toll-like receptor (TLR) 2-, TLR4-and TLR9-specific microbial pathogens in human monocytic cells | |
KR20030012199A (ko) | 사이토카인 유전자를 유효성분으로 포함하는 dna 백신 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20120815 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20131016 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20140303 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20140424 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20140512 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20140714 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20140807 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5596318 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |