JP5592339B2 - 鉄欠乏を検出する方法 - Google Patents
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Description
（関連出願への相互参照）
この出願は、その全体が参考として本明細書によって援用される２００６年１月２０日に出願された仮特許出願番号第６０／７６０，５２０号の米国特許法第１１９条（ｅ）項の下の利益を主張している。
この出願は、その全体が参考として本明細書によって援用される２００６年１月２０日に出願された仮特許出願番号第６０／７６０，５２０号の米国特許法第１１９条（ｅ）項の下の利益を主張している。
（発明の分野）
本発明は、血液学パラメーターの機能を用いる鉄欠乏の検出の方法に関する。
本発明は、血液学パラメーターの機能を用いる鉄欠乏の検出の方法に関する。
（発明の背景）
鉄欠乏（ＩＤ）は、世界的基準で最も蔓延する単一の欠乏状態である。それは、影響を受ける個体が肉体的労働を行う能力を減少させ、そして子供における成長および学習を減少させるため、経済的に重要である。
鉄欠乏（ＩＤ）は、世界的基準で最も蔓延する単一の欠乏状態である。それは、影響を受ける個体が肉体的労働を行う能力を減少させ、そして子供における成長および学習を減少させるため、経済的に重要である。
貧血をともなうかまたは貧血をともなわない絶対的な鉄欠乏、および機能的鉄欠乏（ＦＩＤ）は、高頻度の臨床症状であり、そしてこれらの患者は、鉄欠乏赤血球産生を有している。絶対的鉄欠乏は、減少した身体の総鉄含量として規定される。鉄欠乏貧血（ＩＤＡ）は、鉄欠乏が赤血球産生を減少させるほど十分に重篤である場合に起こり、そして貧血の発症を引き起こす。機能的鉄欠乏は、身体の総鉄含量が正常であるか、または高められてさえいるが、鉄が「しまい込まれ（ｌｏｃｋ ａｗａｙ）」、そして血液細胞の産生のために利用可能でない状態を述べている。この症状は、主に、血液透析を受けている慢性腎不全を有する患者において、および慢性炎症または慢性感染を有する患者において観察される。
鉄の状態は、血液学的指標および生化学的指標を用いて測定され得る。鉄の状態の各パラメーターは、種々の身体鉄区画中の変化を反映し、そして鉄枯渇の種々のレベルで影響を受ける。特定の鉄測定は、ヘモグロビン（Ｈｇｂ）、平均細胞容量（ＭＣＶ）、ヘマトクリット（Ｈｃｔ）、赤血球プロトポルフィリン、血漿鉄、トランスフェリン、トランスフェリン飽和レベル（ＴＳＡＴ）、血清フェリチン（ＳＦ）ならびにより最近では可溶性トランスフェリンレセプター（ｓＴｆＲ）および赤血球分布幅（ＲＤＷ）を含む。
正常な鉄状態の代表的な値は、ＳＦ １００±６０ｎｇ／ｍｌ、ならびに女性について１２〜１７ｇ／ｄｌおよび男性について１４〜１９ｇ／ｄｌのＨｇｂである。鉄欠乏貧血についての代表的な値は、ＳＦ＜２２ｎｇ／ｍｌ、ならびに女性について＜１２ｇ／ｄｌおよび男性について＜１３ｇ／ｄｌのＨｇｂである。
ヘモグロビン（Ｈｇｂ）は、他のいかなる鉄状態のパラメーターよりも長く用いられている。それは、一旦、貧血が発症すると、鉄欠乏の重篤度の定量的尺度を提供する。ヘモグロビン測定は便利かつ単純なスクリーニング方法であり、そして妊娠時および乳児期のように、鉄欠乏の蔓延が重度である場合、特に有用である。鉄状態の尺度としてヘモグロビンを用いることの制限は、その特異度の欠如（なぜなら、ビタミンＢ１２もしくは葉酸欠乏、遺伝子障害および慢性感染のような因子が赤血球産生を制限し得る）、および健常集団と鉄欠乏集団との間の値における顕著な重複に起因するその相対的低感度である。鉄欠乏貧血を同定するために、ヘモグロビンは鉄状態のより選択的な測定方法と一緒に測定される。
平均細胞容量（ＭＣＶ）の減少は、鉄欠乏が重篤になるときに起こり、それは貧血が発症し始めるときとほぼ同時である。それは、一旦、サラセミアおよび慢性疾患の貧血が排除されると、鉄欠乏のかなり特異的な指標である。８０ｆｌのカットオフ値が、成人における正常の下限として受容されている。Ｔｅｃｈｎｉｃｏｎ血液分析器（これは、赤血球の光学測定を用いる）で測定される場合、鉄欠乏血液サンプルは、減少した平均細胞ヘモグロビン（ＭＣＨ）および平均細胞ヘモグロビン濃度（ＭＣＨＣ）を有することが報告されている。しかし、インピーダンスに基づく血液分析器（例えば、ＣｏｕｌｔｅｒまたはＳｙｓｍｅｘ器具）で測定される場合、ＭＣＨＣは鉄欠乏に対して感度は低いが、より特異的である（非特許文献１）。赤血球分布幅（ＲＤＷ）は、貧血の分類のためにその他のパラメーターと組み合わせて近年用いられている。それは、赤血球のサイズの変動を反映し、そして僅かな程度の赤血球不同症を検出するために用いられ得る。
現在最も一般的に用いられる鉄状態パラメーターは、トランスフェリン飽和（ＴＳＡＴ）および血清フェリチン（ＳＦ）である。しかし、両者は、鉄状態の間接的測定値である。トランスフェリンは、２つの鉄結合部位を含み、それによって鉄を貯蔵部位から赤血球前駆体に輸送する輸送タンパク質である。ＴＳＡＴ（すなわち、鉄が占める結合部位の百分率）は、赤血球産生のために利用可能である鉄の尺度である。ＴＳＡＴは、血清鉄を、循環性トランスフェリンの尺度である総鉄結合能力（ＴＩＢＣ）で除し、そして１００を乗じることにより算出される。フェリチンは、網内細胞系内に主に含まれ、一部の量が血清中に放出される貯蔵タンパク質である。鉄過剰の状態下では、フェリチン産生は増加し、血漿鉄の増加を相殺する。したがって、血清中のフェリチンのレベルは、貯蔵中の鉄の量を反映する。
トランスフェリン飽和を用いることの制限は、血清鉄の制限、すなわち、広範な毎日の変動および低い特異度を反映する。ＴＳＡＴはまた、炎症性疾患時に低減される。トランスフェリン飽和は、鉄状態のその他の指標と組み合わせて集団研究で一般に用いられている。その一方、フェリチンは、急性期反応体であるので、その血清レベルは、慢性炎症、感染、悪性疾患および肝臓疾患の存在下で高められ得る。アルコール消費もまた、血清フェリチンを独立に高めることが示唆されている。
最近、数種の新たな赤血球および網状赤血球のパラメーターが、鉄欠乏および機能的鉄欠乏の検出において有用性を有することが報告されている。これらのパラメーターのうちの二つは、ｔｈｅ Ｂａｙｅｒ ＡＤＶＩＡ １２０血液学的分析器によって報告された低色素赤血球百分率（％Ｈｙｐｏと称される）およびＣＨｒ（網状赤血球ヘモグロビン含量）である（非特許文献３）。低色素赤血球百分率は、２８ｇ／ｄｌより少ないヘモグロビンを有する赤血球の百分率として規定される。ＣＨｒは、式（ＣＨｒ＝ＭＣＶｒ×ＣＨＣＭｒ）によって規定され、ここで、ＭＣＶｒは平均網状赤血球容量であり、そしてＣＨＣＭｒは、光学的な細胞ごとのヘモグロビン測定によって得られる網状赤血球の平均ヘモグロビン濃度である。
網状赤血球は、僅か１〜２日の寿命の未成熟赤血球である。これらが骨髄から最初に放出されるとき、それらのヘモグロビン含量の測定は、赤血球産生のために直ちに利用可能な量の鉄を提供し得る。これら網状赤血球中の正常より少ないヘモグロビン含量は、需要に対して不十分な鉄供給の指標である。これら網状赤血球中のヘモグロビンの量はまた、成熟赤血球中のヘモグロビンの量に対応する。ＣＨｒは、鉄欠乏および機能的鉄欠乏のための試験として数多くの研究で近年評価されており、そして感度が高く、そして特異的であることが見出された。しかし、正確な閾値は確立されていない。なぜなら、この閾値は、実験室および用いられる器具に依存して変動するからである。
エポエチンは、赤血球の産生を刺激することで有効であるが、ヘムに結合するために十分な鉄供給なくしては、赤血球は、低色素である（すなわちヘモグロビン含量は低い）。それ故、鉄欠乏の状態では、骨髄から離れる赤血球のうちのかなりの割合は、低ヘモグロビン含量を有する。ヘモグロビン含量が＜２８ｇ／ｄｌの赤血球の％を測定することにより、鉄欠乏が検出され得る。％Ｈｙｐｏ＞１０％は鉄欠乏と相関しており、そしてこれ故、鉄欠乏の検出のための診断基準として用いられている（非特許文献４）。
％Ｈｙｐｏは、光学的な細胞ごとのヘモグロビン測定に基づくいくつかのＢａｙｅｒ血液分析器で報告されるパラメーターである。％Ｈｙｐｏは、新鮮な（血液収集の後４時間より少ない）全血サンプルを用いて測定されなければならない。なぜなら、貯蔵またはサンプルのねかしは、赤血球膨潤に起因する％Ｈｙｐｏ報告の誤った増加に至るからである（非特許文献５）。
２つのその他のパラメーターが、％ＨｙｐｏおよびＣＨｒに相関して最近報告され、それらは、ｔｈｅ Ｓｙｓｍｅｘ ＸＥ−２１００ ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ ａｎａｌｙｓｅｒによって報告されたＲＢＣ−ＹおよびＲｅｔ−Ｈｅである（非特許文献６）。ＲＢＣ−Ｙは、Ｓｙｓｍｅｘ ＸＥ−２１００血液分析器での、成熟赤血球集団内の前方光錯乱ヒストグラムの平均値であり、そしてＲｅｔ−Ｈｅは、網状赤血球測定中で得られる網状赤血球集団内の前方光錯乱ヒストグラムの平均値である。
最も近年、赤血球パラメーターおよび網状赤血球パラメーターのいくつかの機能が、同時係属中の出願番号第１１／５２４，６８２号においてＳｉｍｏｎ−Ｌｏｐｅｚにより鉄欠乏の検出において有用であることが開示された。これらは、ＭＣＶとＭＲＶとの積の関数として規定されるＲＢＣサイズ関数（ＲＳｆ）、ＭＣＶとＨｇｂとの積の関数として規定される容量ヘモグロビン因子（ＶＨｆ）、ＭＣＶ、ＨｇｂおよびＲＤＷの関数として規定される容量−ヘモグロビン／分布因子（ＶＨＤＷｆ）を含む。
Ｂａｉｎ、Ｂ．Ｊ．、Ｂｌｏｏｄ Ｃｅｌｌｓ、Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｇｕｉｄｅ、第２版、Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｌｔｄ．、１９９５、第８章、１９７〜１９９頁 Ｅｋｎｏｙａｎ Ｇら、Ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ ｑｕａｌｉｔｙ ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ：ＤＱＯＩ ｂｅｃｏｍｅｓ Ｋ／ＤＱＯＩ ａｎｄ ｉｓ ｕｐｄａｔｅｄ． Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｋｉｄｎｅｙ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ’ｓ Ｄｉａｌｙｓｉｓ Ｏｕｔｃｏｍｅｓ Ｑｕａｌｉｔｙ Ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ． Ａｍ Ｊ Ｋｉｄｎｅｙ Ｄｉｓ．、２００１ １月；３７（１）：１７９〜１９４； Ａｎｅｍｉａ Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｉｎ Ｃｈｒｏｎｉｃ Ｋｉｄｎｅｙ Ｄｉｓｅａｓｅ：Ｒｏｌｅ ｏｆ Ｆａｃｔｏｒｓ Ａｆｆｅｃｔｉｎｇ Ｅｐｏｅｔｉｎ Ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓ、ＥＳＣＨＢＡＣＨ、Ｊ．、Ｊ Ａｍ Ｓｏｃ Ｎｅｐｈｒｏｌ １３：１４１２〜１４１４、２００２ Ｔｈｏｍａｓら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｍａｒｋｅｒｓ ａｎｄ Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｉｃ Ｉｎｄｉｃｅｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｉｒｏｎ Ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ、Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ４８：７、１０６６〜１０７６、２００２ Ｒｅｖｉｓｅｄ Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｂｅｓｔ Ｐｒａｃｔｉｃｅ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｍａｎａｇｅｍａｎｔ ｏｆ Ａｎａｅｍｉａ ｉｎ Ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ Ｃｈｒｏｎｉｃ Ｒｅｎａｌ Ｆａｉｌｕｒｅ、Ｌｏｃａｔｅｌｌｉ、Ｆら、Ｎｅｐｈｒｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｄｙａｌｉｓｉｓ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ、１９巻２００４年５月（補遺２）、Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ ＩＩＩ．２、ｉｉ２２〜２４頁 Ｒｅｖｉｓｅｄ Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｂｅｓｔ Ｐｒａｃｔｉｃｅ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ Ａｎａｅｍｉａ ｉｎ Ｐａｔｉｅｎｔｓ Ｗｉｔｈ Ｃｈｒｏｎｉｃ Ｒｅｎａｌ Ｆａｉｌｕｒｅ、Ｌｏｃａｔｅｌｌｉ、Ｆら、Ｎｅｐｈｒｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｄｙａｌｉｓｉｓ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ、１９巻２００４年５月（補遺２）、Ａｐｐｅｎｄｉｘ Ｂ、ｉｉ３９〜４１頁 Ｍａｃｈｉｎ Ｓ．Ｊ．ら、Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｉｒｏｎ Ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ａｎｄ Ｎｅｗ Ｒｅｄ Ｃｅｌｌ Ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ ｏｎ ｔｈｅ Ｓｙｓｍｅｘ ＸＥ−２１００、ＩＳＬＨ ２００１ Ｉｎｄｕｓｔｒｙ−Ｓｐｏｎｄｏｒｅｄ Ｗｏｒｋｓｈｏｐｓ、ＩＳＬＨ ＸＩＶｔｈ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ、２００１：およびＬａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ、Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ ２００５、１１：１４〜２３
Ｂａｉｎ、Ｂ．Ｊ．、Ｂｌｏｏｄ Ｃｅｌｌｓ、Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｇｕｉｄｅ、第２版、Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｌｔｄ．、１９９５、第８章、１９７〜１９９頁 Ｅｋｎｏｙａｎ Ｇら、Ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ ｑｕａｌｉｔｙ ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ：ＤＱＯＩ ｂｅｃｏｍｅｓ Ｋ／ＤＱＯＩ ａｎｄ ｉｓ ｕｐｄａｔｅｄ． Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｋｉｄｎｅｙ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ’ｓ Ｄｉａｌｙｓｉｓ Ｏｕｔｃｏｍｅｓ Ｑｕａｌｉｔｙ Ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ． Ａｍ Ｊ Ｋｉｄｎｅｙ Ｄｉｓ．、２００１ １月；３７（１）：１７９〜１９４； Ａｎｅｍｉａ Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｉｎ Ｃｈｒｏｎｉｃ Ｋｉｄｎｅｙ Ｄｉｓｅａｓｅ：Ｒｏｌｅ ｏｆ Ｆａｃｔｏｒｓ Ａｆｆｅｃｔｉｎｇ Ｅｐｏｅｔｉｎ Ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓ、ＥＳＣＨＢＡＣＨ、Ｊ．、Ｊ Ａｍ Ｓｏｃ Ｎｅｐｈｒｏｌ １３：１４１２〜１４１４、２００２ Ｔｈｏｍａｓら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｍａｒｋｅｒｓ ａｎｄ Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｉｃ Ｉｎｄｉｃｅｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｉｒｏｎ Ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ、Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ４８：７、１０６６〜１０７６、２００２ Ｒｅｖｉｓｅｄ Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｂｅｓｔ Ｐｒａｃｔｉｃｅ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｍａｎａｇｅｍａｎｔ ｏｆ Ａｎａｅｍｉａ ｉｎ Ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ Ｃｈｒｏｎｉｃ Ｒｅｎａｌ Ｆａｉｌｕｒｅ、Ｌｏｃａｔｅｌｌｉ、Ｆら、Ｎｅｐｈｒｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｄｙａｌｉｓｉｓ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ、１９巻２００４年５月（補遺２）、Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ ＩＩＩ．２、ｉｉ２２〜２４頁 Ｒｅｖｉｓｅｄ Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｂｅｓｔ Ｐｒａｃｔｉｃｅ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ Ａｎａｅｍｉａ ｉｎ Ｐａｔｉｅｎｔｓ Ｗｉｔｈ Ｃｈｒｏｎｉｃ Ｒｅｎａｌ Ｆａｉｌｕｒｅ、Ｌｏｃａｔｅｌｌｉ、Ｆら、Ｎｅｐｈｒｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｄｙａｌｉｓｉｓ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ、１９巻２００４年５月（補遺２）、Ａｐｐｅｎｄｉｘ Ｂ、ｉｉ３９〜４１頁 Ｍａｃｈｉｎ Ｓ．Ｊ．ら、Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｉｒｏｎ Ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ａｎｄ Ｎｅｗ Ｒｅｄ Ｃｅｌｌ Ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ ｏｎ ｔｈｅ Ｓｙｓｍｅｘ ＸＥ−２１００、ＩＳＬＨ ２００１ Ｉｎｄｕｓｔｒｙ−Ｓｐｏｎｄｏｒｅｄ Ｗｏｒｋｓｈｏｐｓ、ＩＳＬＨ ＸＩＶｔｈ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ、２００１：およびＬａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ、Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ ２００５、１１：１４〜２３
ＣＨｒおよび％Ｈｙｐｏは、Ｂａｙｅｒの血液分析器で提供されるのみであることが認識されている。従って、この情報は、多くの臨床実験室および病院にとっては利用可能ではない。その一方、ＭＣＶ、ＭＣＨ、ＭＣＨＣおよびＨｇｂは、すべての自動血液分析器で提供される伝統的な赤血球指標である。これらの伝統的な赤血球パラメーターの利用可能性のため、ＣＨｒおよび％Ｈｙｐｏのような公知のパラメーターと比較できる臨床的正確さ、感度および特異度で、鉄欠乏の検出のためにこれらパラメーターを用いて診断指標を開発することが所望される。
（発明の要旨）
１つの局面では、本発明は、鉄欠乏の検出の方法を提供する。
１つの局面では、本発明は、鉄欠乏の検出の方法を提供する。
１つの局面では、本発明は、鉄欠乏の検出においてＣＨｒと類似の診断能力を有する新規な鉄欠乏指数（ＩＤＩ１）を用いる鉄欠乏の検出の方法に関する。この方法は、血液分析器で血液サンプルを分析し、そして赤血球の平均細胞ヘモグロビン（ＭＣＨ）および平均細胞容量（ＭＣＶ）を得る工程；このＭＣＨおよびＭＣＶの関数として規定される鉄欠乏指数（ＩＤＩ１）を得る工程；このＩＤＩ１を所定のＩＤＩ１鉄欠乏基準と比較する工程；および上記ＩＤＩ１が上記所定のＩＤＩ１鉄欠乏基準を満たす場合、鉄欠乏の指標を報告する工程を包含する。
１つの実施形態では、ＩＤＩ１は、以下の式：
さらなる実施形態では、本発明は、鉄欠乏の検出において％Ｈｙｐｏと類似の診断能力を有する鉄欠乏指数（ＩＤＩ２）を用いる鉄欠乏の検出方法に関する。この方法は、血液分析器で血液サンプルを分析し、そして赤血球の平均細胞ヘモグロビン濃度（ＭＣＨＣ）および平均ヘモグロビン（ＭＣＨ）を得る工程；このＭＣＨＣおよびＭＣＨの関数として規定される鉄欠乏指数（ＩＤＩ２）を得る工程；このＩＤＩ２を所定のＩＤＩ２鉄欠乏基準と比較する工程；および上記ＩＤＩ２が上記所定のＩＤＩ２鉄欠乏基準を満たす場合、鉄欠乏の指標を報告する工程を包含する。
１つの実施形態において、ＩＤＩ２は、以下の式：
さらなる局面において、本発明は、血液分析器を用いて上記に規定される鉄欠乏指数を得る方法を提供する。
１つの実施形態では、血液分析器で血液サンプルの鉄欠乏指数（ＩＤＩ１）を得る方法は、血液サンプルの第１のアリコートを血液希釈剤と混合して第１のサンプル混合物を形成し、上記血液分析器で上記第１のサンプルを分析し、そして赤血球の平均細胞容量（ＭＣＶ）および赤血球濃度（ＲＢＣ）を得る工程；上記血液サンプルの第２のアリコートを試薬系と混合して第２のサンプル混合物を形成し、上記血液分析器で上記第２のサンプルを分析し、そして上記血液サンプルのヘモグロビン濃度（Ｈｇｂ）を得る工程；得られたＲＢＣおよびＨｇｂを用いて平均細胞ヘモグロビン（ＭＣＨ）を得る工程；得られたＭＣＶおよびＭＣＨを用いて上記鉄欠乏指数（ＩＤＩ１）を得る工程；ならびに上記血液分析器の上記血液サンプルのＩＤＩ１を報告する工程を包含する。
さらなる実施形態では、血液分析器で血液サンプルの鉄欠乏指数（ＩＤＩ２）を得る方法は：血液サンプルの第１のアリコートを血液希釈剤と混合して第１のサンプル混合物を形成し、上記血液分析器で上記第１のサンプルを分析し、そして赤血球の平均細胞容量（ＭＣＶ）および赤血球濃度（ＲＢＣ）を得る工程；上記血液サンプルの第２のアリコートを試薬系と混合して第２のサンプル混合物を形成し、上記血液分析器で上記第２のサンプルを分析し、そして上記血液サンプルのヘモグロビン濃度（Ｈｇｂ）を得る工程；得られたＭＣＶ、ＲＢＣおよびＨｇｂを用いて平均細胞ヘモグロビン（ＭＣＨ）および平均細胞ヘモグロビン濃度（ＭＣＨＣ）を得る工程；得られたＭＣＨおよびＭＣＨＣを用いて上記鉄欠乏指数（ＩＤＩ２）を得る工程；および上記血液分析器で上記血液サンプルのＩＤＩ２を報告する工程を包含する。
本発明の利点は、本発明の例示の実施形態を示す添付の図面と組み合わせて考慮し、以下の記載から明らかになる。
例えば、本発明は以下を提供する：
（項目１）
鉄欠乏を検出する方法であって：
（ａ）血液分析器で血液サンプルを分析し、そして赤血球の平均細胞ヘモグロビン（ＭＣＨ）および平均細胞容量（ＭＣＶ）を得る工程；
（ｂ）該ＭＣＨおよび該ＭＣＶの関数として規定される鉄欠乏指数（ＩＤＩ １ ）を得る工程；
（ｃ）該ＩＤＩ １ を所定のＩＤＩ １ 鉄欠乏基準と比較する工程；ならびに
（ｄ）該ＩＤＩ １ が該所定のＩＤＩ １ 鉄欠乏基準を満たす場合、鉄欠乏の指標を報告する工程、を包含する、方法。
（項目２）
前記ＩＤＩ １ が、以下の方程式：
によって規定される、前記ＭＣＨおよび前記ＭＣＶのロジスティック関数であり、ここで、ａ、ｂおよびｃは定数である、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記ａ、ｂおよびｃが、それぞれ−３５．６、０．０８７および１．６１である、項目２に記載の方法。
（項目４）
前記鉄欠乏が、絶対的鉄欠乏または機能的鉄欠乏を含む、項目１に記載の方法。
（項目５）
鉄欠乏を検出する方法であって：
（ａ）血液分析器で血液サンプルを分析し、そして赤血球の平均細胞ヘモグロビン濃度（ＭＣＨＣ）および平均細胞ヘモグロビン（ＭＣＨ）を得る工程；
（ｂ）該ＭＣＨＣおよび該ＭＣＨの関数として規定される鉄欠乏指数（ＩＤＩ ２ ）を得る工程；
（ｃ）該ＩＤＩ ２ を所定のＩＤＩ ２ 鉄欠乏基準と比較する工程；ならびに
（ｄ）該ＩＤＩ ２ が該所定のＩＤＩ ２ 鉄欠乏基準を満たす場合、鉄欠乏の指標を報告する工程、
を包含する、方法。
（項目６）
前記ＩＤＩ ２ が、以下の方程式：
によって規定される、前記ＭＣＨおよびＭＣＨＣのロジスティック関数であり、ここで、ｉ、ｊおよびｋは定数である、項目５に記載の方法。
（項目７）
前記ｉ、ｊおよびｋが、それぞれ−９７．９８、０．２４および２．９１である、項目６に記載の方法。
（項目８）
前記鉄欠乏が、絶対的鉄欠乏または機能的鉄欠乏を含む、項目５に記載の方法。
（項目９）
血液分析器で血液サンプルの鉄欠乏指数（ＩＤＩ １ ）を得る方法であって：
（ａ）血液サンプルの第１のアリコートを血液希釈剤と混合して第１のサンプル混合物を形成し、該血液分析器で該第１のサンプルを分析し、そして赤血球の平均細胞容量（ＭＣＶ）および赤血球濃度（ＲＢＣ）を得る工程；
（ｂ）該血液サンプルの第２のアリコートを試薬系と混合して第２のサンプル混合物を形成し、該血液分析器で該第２のサンプルを分析し、そして該血液サンプルのヘモグロビン濃度（Ｈｇｂ）を得る工程；
（ｃ）該ＲＢＣおよび該Ｈｇｂを用いて平均細胞ヘモグロビン（ＭＣＨ）を得る工程；
（ｄ）該ＭＣＶおよび該ＭＣＨを用いて該鉄欠乏指数（ＩＤＩ １ ）を得る工程であって、該ＩＤＩ １ が該ＭＣＶおよび該ＭＣＨのロジスティック関数として規定される工程；ならびに
（ｅ）該血液分析器で該血液サンプルの該ＩＤＩ １ を報告する工程、
を包含する、方法。
（項目１０）
前記ＩＤＩ １ が、以下の方程式：
によって規定され、ここで、ａ、ｂおよびｃは定数である、項目１０に記載の方法。
（項目１１）
前記ａ、ｂおよびｃが、それぞれ−３５．６、０．０８７および１．６１である、項目１０に記載の方法。
（項目１２）
血液分析器で血液サンプルの鉄欠乏指数（ＩＤＩ ２ ）を得る方法であって：
（ａ）血液サンプルの第１のアリコートを血液希釈剤と混合して第１のサンプル混合物を形成し、該血液分析器で該第１のサンプルを分析し、そして赤血球の平均細胞容量（ＭＣＶ）および赤血球濃度（ＲＢＣ）を得る工程；
（ｂ）該血液サンプルの第２のアリコートを試薬系と混合し第２のサンプル混合物を形成し、該血液分析器で該第２のサンプルを分析し、そして該血液サンプルのヘモグロビン濃度（Ｈｇｂ）を得る工程；
（ｃ）該ＭＣＶ、該ＲＢＣおよび該Ｈｇｂを用いて、平均細胞ヘモグロビン（ＭＣＨ）および平均細胞ヘモグロビン濃度（ＭＣＨＣ）を得る工程；
（ｄ）該ＭＣＨおよび該ＭＣＨＣを用いて該鉄欠乏指数（ＩＤＩ ２ ）を得る工程であって、該ＩＤＩ ２ が該ＭＣＨおよび該ＭＣＨＣのロジスティック関数として規定される工程；ならびに
（ｅ）該血液分析器で該血液サンプルの該ＩＤＩ ２ を報告する工程、
を包含する、方法。
（項目１３）
前記ＩＤＩ ２ が、以下の式：
によって規定され、ここで、ｉ、ｊおよびｋは定数である、項目１２に記載の方法。
（項目１４）
前記ｉ、ｊおよびｋが、それぞれ−９７．９８、０．２４および２．９１である、項目１３に記載の方法。
例えば、本発明は以下を提供する：
（項目１）
鉄欠乏を検出する方法であって：
（ａ）血液分析器で血液サンプルを分析し、そして赤血球の平均細胞ヘモグロビン（ＭＣＨ）および平均細胞容量（ＭＣＶ）を得る工程；
（ｂ）該ＭＣＨおよび該ＭＣＶの関数として規定される鉄欠乏指数（ＩＤＩ １ ）を得る工程；
（ｃ）該ＩＤＩ １ を所定のＩＤＩ １ 鉄欠乏基準と比較する工程；ならびに
（ｄ）該ＩＤＩ １ が該所定のＩＤＩ １ 鉄欠乏基準を満たす場合、鉄欠乏の指標を報告する工程、を包含する、方法。
（項目２）
前記ＩＤＩ １ が、以下の方程式：
（項目３）
前記ａ、ｂおよびｃが、それぞれ−３５．６、０．０８７および１．６１である、項目２に記載の方法。
（項目４）
前記鉄欠乏が、絶対的鉄欠乏または機能的鉄欠乏を含む、項目１に記載の方法。
（項目５）
鉄欠乏を検出する方法であって：
（ａ）血液分析器で血液サンプルを分析し、そして赤血球の平均細胞ヘモグロビン濃度（ＭＣＨＣ）および平均細胞ヘモグロビン（ＭＣＨ）を得る工程；
（ｂ）該ＭＣＨＣおよび該ＭＣＨの関数として規定される鉄欠乏指数（ＩＤＩ ２ ）を得る工程；
（ｃ）該ＩＤＩ ２ を所定のＩＤＩ ２ 鉄欠乏基準と比較する工程；ならびに
（ｄ）該ＩＤＩ ２ が該所定のＩＤＩ ２ 鉄欠乏基準を満たす場合、鉄欠乏の指標を報告する工程、
を包含する、方法。
（項目６）
前記ＩＤＩ ２ が、以下の方程式：
（項目７）
前記ｉ、ｊおよびｋが、それぞれ−９７．９８、０．２４および２．９１である、項目６に記載の方法。
（項目８）
前記鉄欠乏が、絶対的鉄欠乏または機能的鉄欠乏を含む、項目５に記載の方法。
（項目９）
血液分析器で血液サンプルの鉄欠乏指数（ＩＤＩ １ ）を得る方法であって：
（ａ）血液サンプルの第１のアリコートを血液希釈剤と混合して第１のサンプル混合物を形成し、該血液分析器で該第１のサンプルを分析し、そして赤血球の平均細胞容量（ＭＣＶ）および赤血球濃度（ＲＢＣ）を得る工程；
（ｂ）該血液サンプルの第２のアリコートを試薬系と混合して第２のサンプル混合物を形成し、該血液分析器で該第２のサンプルを分析し、そして該血液サンプルのヘモグロビン濃度（Ｈｇｂ）を得る工程；
（ｃ）該ＲＢＣおよび該Ｈｇｂを用いて平均細胞ヘモグロビン（ＭＣＨ）を得る工程；
（ｄ）該ＭＣＶおよび該ＭＣＨを用いて該鉄欠乏指数（ＩＤＩ １ ）を得る工程であって、該ＩＤＩ １ が該ＭＣＶおよび該ＭＣＨのロジスティック関数として規定される工程；ならびに
（ｅ）該血液分析器で該血液サンプルの該ＩＤＩ １ を報告する工程、
を包含する、方法。
（項目１０）
前記ＩＤＩ １ が、以下の方程式：
（項目１１）
前記ａ、ｂおよびｃが、それぞれ−３５．６、０．０８７および１．６１である、項目１０に記載の方法。
（項目１２）
血液分析器で血液サンプルの鉄欠乏指数（ＩＤＩ ２ ）を得る方法であって：
（ａ）血液サンプルの第１のアリコートを血液希釈剤と混合して第１のサンプル混合物を形成し、該血液分析器で該第１のサンプルを分析し、そして赤血球の平均細胞容量（ＭＣＶ）および赤血球濃度（ＲＢＣ）を得る工程；
（ｂ）該血液サンプルの第２のアリコートを試薬系と混合し第２のサンプル混合物を形成し、該血液分析器で該第２のサンプルを分析し、そして該血液サンプルのヘモグロビン濃度（Ｈｇｂ）を得る工程；
（ｃ）該ＭＣＶ、該ＲＢＣおよび該Ｈｇｂを用いて、平均細胞ヘモグロビン（ＭＣＨ）および平均細胞ヘモグロビン濃度（ＭＣＨＣ）を得る工程；
（ｄ）該ＭＣＨおよび該ＭＣＨＣを用いて該鉄欠乏指数（ＩＤＩ ２ ）を得る工程であって、該ＩＤＩ ２ が該ＭＣＨおよび該ＭＣＨＣのロジスティック関数として規定される工程；ならびに
（ｅ）該血液分析器で該血液サンプルの該ＩＤＩ ２ を報告する工程、
を包含する、方法。
（項目１３）
前記ＩＤＩ ２ が、以下の式：
（項目１４）
前記ｉ、ｊおよびｋが、それぞれ−９７．９８、０．２４および２．９１である、項目１３に記載の方法。
（発明の詳細な説明）
１つの実施形態では、本発明は、平均細胞ヘモグロビン（ＭＣＨ）および平均細胞容量（ＭＣＶ）の関数として規定される鉄欠乏指数（ＩＤＩ１）を用いる鉄欠乏の検出のための方法を提供する。本明細書中で用いられる鉄欠乏の用語は、絶対的鉄欠乏、および機能的鉄欠乏（ＦＩＤ）を含む。
１つの実施形態では、本発明は、平均細胞ヘモグロビン（ＭＣＨ）および平均細胞容量（ＭＣＶ）の関数として規定される鉄欠乏指数（ＩＤＩ１）を用いる鉄欠乏の検出のための方法を提供する。本明細書中で用いられる鉄欠乏の用語は、絶対的鉄欠乏、および機能的鉄欠乏（ＦＩＤ）を含む。
絶対的鉄欠乏は、しばしば文献中では鉄欠乏と称され、減少した総鉄身体含量として規定される。鉄欠乏貧血（ＩＤＡ）は、鉄欠乏が赤血球産生を減少させるほど十分に重篤である場合に起こり、そして貧血の発症を引き起こす。潜在的鉄欠乏は、いまだ貧血ではない鉄欠乏の存在のことをいう。その一方、機能的鉄欠乏は、身体の総鉄含量が正常であるかまたは高められてさえいるが、この鉄が赤血球の産生のために利用可能でない状態を規定する。この状態は、主に、血液透析中の慢性腎臓不全を有する患者で観察される。潜在的な機能的鉄欠乏は、機能的鉄欠乏の貧血前段階（ｐｒｅ−ａｎｅｍｉｃ ｓｔａｇｅ）をいう。上記に記載のような鉄欠乏の種々の形態を有する個体は、種々の程度の鉄欠乏赤血球産生を有する。
より詳細には、上記方法は、（ａ）血液分析器で血液サンプルを分析し、そしてその血中サンプルのＭＣＨおよびＭＣＶを得る工程；（ｂ）ＭＣＨおよびＭＣＶの関数として規定される鉄欠乏指数（ＩＤＩ１）を得る工程；（ｃ）このＩＤＩ１を所定のＩＤＩ１鉄欠乏基準と比較する工程；および（ｄ）上記ＩＤＩ１が上記所定のＩＤＩ１鉄欠乏基準を満たす場合、鉄欠乏の指標を報告する工程を包含する。
上記鉄欠乏指数（ＩＤＩ１）は、以下の式：
平均細胞ヘモグロビン（ＭＣＨ）（これは、赤血球あたりのヘモグロビン量とも言及される）は、ＭＣＨ＝Ｈｇｂ／ＲＢＣ＊１０と規定され、ここでＨｇｂは血液サンプルの総ヘモグロビン濃度であり、そしてＲＢＣは血液サンプル中の赤血球濃度（これは、一般に赤血球カウントと言及される）である。自動血液分析器で、ＨｇｂおよびＲＢＣは、本明細書で以後詳細に記載されるように、代表的には、血液サンプルの２つのアリコートを用いて別個に測定され、そしてＭＣＨは、得られたＨｇｂおよびＲＢＣから得られる。しかし、ＭＣＨはまた、血液サンプルを溶解することなく、個々の赤血球の光学的な細胞ごとのヘモグロビン測定によっても測定され得る。本発明の目的のために、ＭＣＨは、いずれかのアプローチを用いて得られ得る。
血液分析器での赤血球の測定では、血液サンプルは、代表的には、サンプルチャンバーまたは浴中において、希釈剤で実質的に希釈される。非集束流れアパーチャでのインピーダンス測定を用い、血液サンプルは大幅に（例えば、６２５０：１の希釈比で）希釈され得る。非集束流れセルが測定に用いられるとき、この希釈比は、２９０：１のように実質的により低くあり得る。血液分析器での赤血球の測定の間にそれらの容量および形態を維持するために、等張希釈剤が血液サンプルを希釈するために用いられる。代表的には、この希釈剤は、１つ以上のアルカリ金属塩を含む。種々の商業的に利用可能な等張血液希釈剤が、血液サンプルを希釈するために用いられ得る。適切な例としては、米国特許第４，５２１，５１８号、同第４，５２８，２７４号、同第５，９３５，８５７号および同第６，７０６，２５６号に記載される希釈剤が挙げられるが、それらに限定されない。
伝導性水性溶液中に懸濁した粒子または血液細胞が、流れセルまたはアパーチャを通過するとき、電気信号またはパルスが、インピーダンスの増加に起因して測定され得る。これら電気パルスは、血液サンプルの血液細胞の数をカウントするために用いられている。その一方、パルス形状、高さおよび幅は、粒子の容量またはサイズに直接相関し、そして測定された細胞の容量に変換され得る。異なる容量を有する２つ以上の異なる血液細胞を含むサンプルが測定されるとき、この測定から得られるヒストグラムは、これら血液細胞の容量分布を提示し得る。ＤＣインピーダンス測定デバイスを装備した血液分析器による細胞カウントおよびサイズ決めのために用いられる検出方法および装置は、一般に米国特許番号第２，６５６，５０８号、同第３，８１０，０１１号、および同第５，１２５，７３７号に記載され、これらは、それらの全体が参考として本明細書によって援用される。本明細書では、語句「血液細胞サイズ決め」は、細胞容量測定をいう。
あるいは、低角度光散乱測定がまた、血液細胞のカウントおよびサイズ決めのために用いられ得る。本明細書では、用語「低角度光散乱」は、入射光から１０゜未満にある範囲で測定される光散乱信号をいう。
細胞容量測定では、細胞容量分布ヒストグラムが得られる。赤血球測定のために、得られたヒストグラムは、赤血球分布ヒストグラムと言及される。正常血液サンプルについては、狭くかつ輪郭のはっきりとした赤血球分布、代表的にはガウス分布が得られる。臨床的に異常な血液サンプルについては、分布の種々の歪みが観察されており、より高いかもしくはより低い容量側いずれかへの分布のシフト、非対称的分布、より高いかもしくはより低い容量側いずれか、または両方の側への集団拡大などがある。平均細胞容量（ＭＣＶ）および赤血球分布幅（ＲＤＷ）は、上記赤血球分布ヒストグラムから算出される。
血液サンプルの総ヘモグロビン濃度（Ｈｇｂ）は、代表的には、血液分析器で、血液サンプルのアリコートを溶解試薬と混合することによって測定される。この溶解試薬に曝すと、赤血球は完全に溶解し、そしてヘモグロビンはサンプル混合物に放出され、これは溶解試薬中のリガンドとの反応に際し色原体を形成する。このヘモグロビン色原体は、次いで、所定の波長でＵＶ−ＶＩＳ分光光度法によって測定され、そしてＨｇｂはこの測定から算出される。
Ｈｇｂを測定するために適切な１つの溶解試薬系は、等張血液希釈剤（例えば、米国特許第４，５２１，５１８号、同第４，５２８，２７４号、同第５，９３５，８５７号および同第６，７０６，５２６号に記載される希釈剤）、ならびに溶解試薬（例えば、米国特許第５，７６３，２８０号、同第５，８３４，３１５号および同第６，５７３，１０２号に記載される溶解試薬）を含み、これら特許は、それらの全体が参考として本明細書によって援用される。あるいは、この試薬系はまた、米国特許第５，８８２，９３４号（その全体が参考として本明細書によって援用される）に記載のような単一の溶解試薬であり得る。さらに、ヘモグロビンの測定のために当該技術分野で公知の種々の溶解試薬が、本発明の目的のために用いられ得る。
Ｃｏｕｌｔｅｒ ＬＨ７５０またはＧＥＮ＊Ｓ血液分析器（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ、Ｉｎｃ．Ｆｕｌｌｅｒｔｏｎ、ＣＡ）を用いて、血液サンプルのいくつかのアリコートが異なる分析モードで同時に分析される。ＣＢＣモードでは、血液サンプルの第１のアリコートは、希釈剤によって希釈されて第１のサンプル混合物を形成し、そして赤血球および血小板がこの第１のサンプル混合物から測定される。同時に、血液サンプルの第２のアリコートが希釈剤および溶解試薬と混合されて第２のサンプル混合物を形成し、そして上記ヘモグロビン濃度は、この第２のサンプル混合物を用いて測定される。とりわけ、種々の赤血球パラメーターが、これらの測定から報告され、これらは、赤血球濃度（ＲＢＣ）、平均細胞容量（ＭＣＶ）、総ヘモグロビン濃度（Ｈｇｂ）、平均細胞ヘモグロビン（ＭＣＨ）、平均細胞ヘモグロビン濃度（ＭＣＨＣ）などを含む。これらの血液分析器で、ＭＣＨおよびＭＣＨＣは、ＭＣＶ、ＲＢＣおよびＨｇｂから算出される導出パラメーターである。
上記で考察されるように、Ｂａｙｅｒ血液分析器によって報告されるＣＨｒ（網状赤血球ヘモグロビン含量）は、近年、鉄欠乏および機能的鉄欠乏の検出のために用いられており、そして高度に感受性があり、かつ特異的であることが見出されている。代表的には、ＣＨｒ＜２８ｐｇまたは＜２９ｐｇのカットオフ値が、絶対的鉄欠乏および機能的鉄欠乏を決定するために用いられる。
実施例１は、ＣＨｒと比較して、絶対的鉄欠乏および機能的鉄欠乏の検出のために上記で規定された鉄欠乏指数（ＩＤＩ１）を用いる本発明の方法を示す。ＩＤＩ１の受信者動作特性（ＲＯＣ）分析が、鉄欠乏を規定するための基準としてＣＨｒ≦２８ｐｇを用いて、２４７の臨床全血サンプルに対して実施された。図１は、ＩＤＩ１のＲＯＣ曲線を示す。ｙ軸上に感度（真の陽性フラクション）がプロットされ、そしてｘ軸上に特異度（偽陽性フラクション）がプロットされる。完全識別をともなう試験は、上左隅を通過するＲＯＣ曲線を有し、ここで、真の陽性フラクションは１００％である（完全感度）。識別なしの試験のための理論曲線は、下左隅から上右隅まで４５゜の対角線である。曲線が上左隅に近い程、試験の全体の正確さは高い。さらに、ＲＯＣ曲線の下の領域（ＡＵＣ）はまた、診断試験の臨床的正確さの一般的な尺度である。
表１は、統計学的分析結果を示す。示されるように、ＡＵＣはＩＤＩ１について０．９８４１であり、これはＩＤＩ１がＣＨｒと高度に相関することを示す。ＡＵＣおよびＲＯＣ曲線の値は、ＩＤＩ１が鉄欠乏の検出においてＣＨｒと類似の診断能力を有することを示した。０．５に等しいカットオフで、ＩＤＩ１は、９４．９％の感度および９７．６％の特異度を有する。数学的には、０．５のカットオフ値は、最高の感度および特異度を与えることが注記される。しかし、臨床的には、感度が、臨床症状の検出のためにより重要である。０．９に等しいカットオフで、ＩＤＩ１は９７．４％の感度および８９．９％の特異度を有することが見出された。
ＣＨｒのために推奨されたカットオフは、用いられる特定のＢａｙｅｒ血液分析器に依存して異なり得る。比較研究では、比較器の基準設定が、カットオフ値およびＩＤＩ１の方程式中の定数ａ、ｂおよびｃに影響し得る。例えば、実施例１で、ＣＨｒ≦２９ｐｇが鉄欠乏を規定するために用いられる基準である場合、ＩＤＩ１の方程式中の定数ａ、ｂおよびｃは、それぞれ、−３６．１５６、−０．０１９９および１．９６である。０．５８５に等しいカットオフで、ＩＤＩ１は９５．７％の感度および９５．２％の特異度を有する。この場合、所定のＩＤＩ１鉄欠乏基準は、ＩＤＩ１が０．５８５以下である場合に鉄欠乏を規定する。
さらなる実施形態では、本発明は、鉄欠乏の検出のために、ＭＣＨＣおよびＭＣＨの関数として規定される第２の鉄欠乏指数（ＩＤＩ２）を用いる方法を提供する。より詳細には、この方法は、以下の工程：（ａ）血液分析器で血液サンプルを分析し、そしてこの血液サンプルのＭＣＨＣおよびＭＣＨを得る工程；（ｂ）ＭＣＨＣおよびＭＣＨの関数として規定される鉄欠乏指数（ＩＤＩ２）を得る工程；（ｃ）ＩＤＩ２を所定のＩＤＩ２鉄欠乏基準と比較する工程；および（ｄ）このＩＤＩ２が上記所定のＩＤＩ２鉄欠乏基準を満たす場合、鉄欠乏の指標を報告する工程を包含する。ＭＣＨＣおよびＭＣＨの関数を用い、鉄欠乏検出のための臨床的正確さが増大され得ることが見出された。
１つの実施形態では、この第２の鉄欠乏指数（ＩＤＩ２）は、以下の式：
平均細胞ヘモグロビン濃度（これは、赤血球あたりのヘモグロビン濃度とも称される）は、方程式ＭＣＨＣ＝（Ｈｇｂ／（ＲＢＣ＊ＭＣＶ））＊１０００によって規定される。Ｈｇｂ、ＲＢＣおよびＭＣＶの測定は上記に記載されている。最も自動化された血液分析器で、ＭＣＨＣは、これらの直接的に測定されるパラメーターから得られる。さらに、ＭＣＨＣは、細胞を溶解することなく、個々の赤血球の細胞容量測定および光学的な細胞ごとのヘモグロビン測定によって得られ得る。本発明の目的のために、ＭＣＨＣは、いずれかのアプローチを用いて得られ得る。
上記のように、低色素性赤血球百分率（％Ｈｙｐｏ）がまた、鉄欠乏を決定するために用いられている。％Ｈｙｐｏ＜５％は正常と考えられる。２つの異なる基準、より詳細には、％Ｈｙｐｏ＞５％および＞１０％が用いられている。％Ｈｙｐｏ＞１０％が、絶対的鉄欠乏および機能的鉄欠乏を規定するためにより一般的に用いられている（Ｒｅｖｉｓｅｄ Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｂｅｓｔ Ｐｒａｃｔｉｃｅ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ Ａｎａｅｍｉａ ｉｎ Ｐａｔｉｅｎｔｓ Ｗｉｔｈ Ｃｈｒｏｎｉｃ Ｒｅｎａｌ Ｆａｉｌｕｒｅ、Ｌｏｃａｔｅｌｌｉ、Ｆら、Ｎｅｐｈｒｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｄｙａｌｉｓｉｓ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ、１９巻、２００４年５月（補遺２）、Ａｐｐｅｎｄｉｘ Ｂ、ｉｉ３９〜４１頁）。
実施例２は、％Ｈｙｐｏと比較して、絶対的鉄欠乏および機能的鉄欠乏の検出のための上記で規定された鉄欠乏指数（ＩＤＩ２）を用いる本発明の方法を示す。ＩＤＩ２の受信者動作特性（ＲＯＣ）分析を、鉄欠乏を規定するための基準として％Ｈｙｐｏ≧１０を用いて、２４７の臨床全血サンプルについて実施した。図２は、ＩＤＩ２のＲＯＣ曲線を示す。
ＩＤＩ２のＲＯＣ曲線の下の領域（ＡＵＣ）は０．９６７５であり、ＩＤＩ２が％Ｈｙｐｏと高度に相関することを示す。０．５９のカットオフで、ＩＤＩ２は、９２．４％の感度および９１．５％の特異度をそれぞれ有する。ＡＵＣおよびＲＯＣ曲線の値は、ＩＤＩ２が絶対的鉄欠乏および機能的鉄欠乏の検出において％Ｈｙｐｏと類似の能力を有することを示した。
ＭＣＶ、ＭＣＨまたはＭＣＨＣは、鉄欠乏または鉄欠乏赤血球産生条件の下での特定の細胞特徴を反映し得る。鉄欠乏赤血球産生では、２つの異常な細胞特徴が代表的には観察される：低色素症（赤血球中の低ヘモグロビン含量）、および小球症（小赤血球容量）である。歴史的には、ＭＣＶ、ＭＣＨまたはＭＣＨＣは、個々に、その他の臨床化学的または血液学パラメーターと組み合わせて鉄欠乏のための指標として用いられてきた。鉄欠乏の検出のためにＩＤＩ１またはＩＤＩ２を用いる本発明の方法は、これら個々のパラメーターの１つ以上を用いる方法に対して利点を有する。
第１に、それぞれ、ＩＤＩ１はＭＣＶおよびＭＣＨのロジスティック関数であり、そしてＩＤＩ２はＭＣＨおよびＭＣＨＣのロジスティック関数である。各指標は、２つの異なる個々のパラメーターの影響を組み合わせ、これらは、診断指標の感度、特異度、またはそれらの両方を増大し得る。さらに、両方の指標は、正常サンプルと鉄欠乏サンプルとをより良好に区別するために最適化される。なぜなら、ロジスティック回帰は、２つの群の間のより良好な識別を提供するからである。さらに、両方の指標は、０〜１（または０〜１００％）の範囲のスケールであり、これらは、個々のパラメーターの測定の単位に依存しない。従って、ＩＤＩ１またはＩＤＩ２は、鉄欠乏の検出のための独立かつ有効な指標として用いられ得る。
一方、上記のように、低色素性赤血球％は、血液採集後４時間未満の新鮮全血サンプルを用いて測定されなければならない。なぜなら、サンプルのねかしは、赤血球膨潤に起因する％Ｈｙｐｏ報告の誤った増加に至るからである。対照的に、ＭＣＨＣ、ＭＣＨおよびＭＣＶは、血液採集後２４時間で安定である。従って、鉄欠乏の診断の目的のために、ＩＤＩ１またはＩＤＩ２のいずれかは、％Ｈｙｐｏの分析で要求されるようなサンプルねかしの狭い窓によって制限されることなく、全血サンプルの慣習的な血液分析を用いて得られ得る。これは、サンプル取り扱いおよび作業フロー管理の点から、血液学実験室のために実質的な利点を提供する。例えば、種々の商業的血液学実験室では、多くの全血サンプルが個々の医者のオフィスで採集され、そして分析のために実験室に送られる。これら血液サンプルは、しばしば、血液採集後２４時間以上で受け入れられる。これらのサンプルは、もはや％Ｈｙｐｏの分析にはもはや適切ではない。しかし、信頼性あるＩＤＩ１およびＩＤＩ２がなお、これら２４時間が経過した古いサンプルで得られ得る。
報告されたＨｇｂ、ＭＣＶおよびＲＢＣは、異なる装置製造業者によって用いられる検出方法および試薬に依存して異なる血液分析器間でわずかに変動することが理解されるべきである。結果として、導出パラメーターであるＭＣＨおよびＭＣＨＣは、異なる血液分析器の間である程度変動する。従って、本発明の方法において、ＩＤＩ１およびＩＤＩ２のためのカットオフ値、または対応する所定の鉄欠乏基準は、用いられる血液分析器に依存して変動し得る。さらに、Ｈｇｂ、ＭＣＶおよびＲＢＣ、ならびに導出されたＭＣＨおよびＭＣＨＣは、患者人口統計、および癌センターまたは腎臓透析センターのような特定の病院または施設の臨床的な焦点に依存して変動し得る。従って、本発明の目的のためのＩＤＩ１およびＩＤＩ２のカットオフ値は、各病院または用いられる血液分析器について実験的に確認されるべきである。本明細書中に示される研究において得られるＩＤＩ１およびＩＤＩ２のカットオフ値は、本発明の方法の有用性を例示し、そして本発明の制限として解釈されるべきではない。
ＭＣＨＣ、ＭＣＨおよびＭＣＶは、高度スループット装置および医者のオフィスで用いられる小機器の両方を含む、すべての製造業者によってもたらされたすべての商業的な血液分析器で報告されたパラメーターであることが認識され得る。従って、ＩＤＩ１およびＩＤＩ２は、本発明の方法を用いて鉄欠乏の検出のために必要な指標であり、すべての商業的な血液分析器から得られ得る。
さらに、鉄欠乏の検出のためにＩＤＩ１およびＩＤＩ２を用いる本発明の方法は、時間を節約し、かつ低コストアプローチである。なぜなら、これらのパラメーターは、さらなるコストなくして全血サンプルの慣習的な血液学分析から得られ得るからである。
以下の実施例は、本発明の例示であり、そして特許請求の範囲に規定されるような本発明の範囲を制限するといかなる方法においても解釈されるべきではない。先行する開示に従って、種々のその他の成分および比率が採用され得ることが理解される。
（実施例１）
２４７の臨床全血サンプルを、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｃｏｌｌｅｇｅ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｌｏｎｄｏｎで、Ｃｏｕｌｔｅｒ ＬＨ７５０およびＢａｙｅｒ ＡＤＶＩＡ １２０血液分析器でそれぞれ分析した。すべての血液分析器を、それらの標準的な作動条件下で作動させ、そして操作マニュアルおよび研究のプロトコールに従って、製造業者により提供される較正物質を用いて較正した。
２４７の臨床全血サンプルを、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｃｏｌｌｅｇｅ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｌｏｎｄｏｎで、Ｃｏｕｌｔｅｒ ＬＨ７５０およびＢａｙｅｒ ＡＤＶＩＡ １２０血液分析器でそれぞれ分析した。すべての血液分析器を、それらの標準的な作動条件下で作動させ、そして操作マニュアルおよび研究のプロトコールに従って、製造業者により提供される較正物質を用いて較正した。
Ｃｏｕｌｔｅｒ ＬＨ７５０血液分析器（Ｂｅｃｋａｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ、Ｉｎｃ．，Ｆｕｌｌｅｒｔｏｎ、ＣＡ）で、サンプルを、ＣＢＣおよびＲｅｔｉｃモードを用いて分析した。血液サンプルの第１のアリコートの１．６μｌを、Ｉｓｏｔｏｎ ３Ｅにより、６２５０：１の希釈比で希釈し、第１のサンプル混合物を形成し、これをＤＣインピーダンス測定によって測定し、赤血球パラメーターを生成した。血液サンプルの第２のアリコートの２８μｌを、６ｍｌのＩｓｏｔｏｎ ３Ｅで希釈し、そして次に、１ｍｌのＬｙｓｅ Ｓ ＩＩＩ ｄｉｆｆと混合し、第２のサンプル混合物を形成した。この第２のサンプル混合物の吸収を、５４０ｎｍで測定しＨｇｂを得た。上記に記載の試薬は、Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ，Ｉｎｃ．の製品であった。
鉄欠乏指数（ＩＤＩ１）を、Ｃｏｕｌｔｅｒ ＬＨ７５０血液分析器から報告されたＭＣＨおよびＭＣＶを用いて算出した。ＩＤＩ１は、ＩＤＩ１＝ｅｘｐ（−３５．６−０．０８７＊ＭＣＶ＋１．６１＊ＭＣＨ）／（１＋ｅｘｐ（−３５．６−０．０８７＊ＭＣＶ＋１．６１＊ＭＣＨ）の方程式を用いて規定した。受信者動作特性（ＲＯＣ）分析を、正常および鉄欠乏を分類するための基準としてＣＨｒ≦２８ｐｇを用いＩＤＩ１に対して実施した。より詳細には、ＣＨｒ≦２８ｐｇを有する７８の血液サンプルを、鉄欠乏または陽性として同定し、そしてＣＨｒ＞２８ｐｇを有する１６９のサンプルを、正常または陰性として同定した。得られたＲＯＣ曲線を図１に示し、そしてＡＵＣ、標準誤差（ＳＥ）、ｐ値および９５％信頼区間を含む統計学的データを表１に示す。
（実施例２）
実施例１で採集したのと同じ血液サンプルの血液データは、鉄欠乏指数（ＩＤＩ２）を用いる鉄欠乏の検出のためであった。ＩＤＩ２は、Ｃｏｕｌｔｅｒ ＬＨ７５０血液分析器から報告されたＭＣＨおよびＭＣＨＣを用いて算出した。ＩＤＩ２を、ＩＤＩ２＝ｅｘｐ（−９７．７８＋０．２４＊ＭＣＨ＋２．９１＊ＭＣＨＣ）／（１＋ｅｘｐ（−９７．９８＋０．２４＊ＭＣＨ）＋２．９１＊ＭＣＨＣ）の方程式を用いて規定した。
実施例１で採集したのと同じ血液サンプルの血液データは、鉄欠乏指数（ＩＤＩ２）を用いる鉄欠乏の検出のためであった。ＩＤＩ２は、Ｃｏｕｌｔｅｒ ＬＨ７５０血液分析器から報告されたＭＣＨおよびＭＣＨＣを用いて算出した。ＩＤＩ２を、ＩＤＩ２＝ｅｘｐ（−９７．７８＋０．２４＊ＭＣＨ＋２．９１＊ＭＣＨＣ）／（１＋ｅｘｐ（−９７．９８＋０．２４＊ＭＣＨ）＋２．９１＊ＭＣＨＣ）の方程式を用いて規定した。
ＲＯＣ分析を、％Ｈｙｐｏ＞１０％を正常および鉄欠乏を分類するための基準として用いてＩＤＩ２に対して実施した。より詳細には、％Ｈｙｐｏ＞１０％を有する１０５の血液サンプルを、鉄欠乏または陽性として同定し、そして％Ｈｙｐｏ≦１０％を有する１４２のサンプルを、正常または陰性として同定した。得られたＲＯＣ曲線を図２に示し、そしてＡＵＣ、標準誤差（ＳＥ）、ｐ値および９５％信頼区間を含む統計学的データを表２に示す。
示されるように、ＩＤＩ２は、％Ｈｙｐｏと高度に相関していた。ＡＵＣおよびＲＯＣ曲線の値は、ＩＤＩ２が鉄欠乏の検出において％Ｈｙｐｏ類似の診断能力を有していたことを示した。ＩＤＩ２のカットオフ値はＲＯＣ分析から得た。０．５９のカットオフで、ＩＤＩ２は、９２．４％の感度および９１．５％の特異度をそれぞれ有していた。
Claims (5)
- 鉄欠乏を検出する方法であって：
（ａ）血液分析器で血液サンプルを分析し、そして赤血球の平均細胞ヘモグロビン濃度（ＭＣＨＣ）および平均細胞ヘモグロビン（ＭＣＨ）を得る工程；
（ｂ）該ＭＣＨＣおよび該ＭＣＨのロジスティック関数として規定される鉄欠乏指数（ＩＤＩ２）を得る工程であって、該ＩＤＩ ２ が、以下の方程式：
（ｃ）該ＩＤＩ２を所定のＩＤＩ２鉄欠乏基準と比較する工程；ならびに
（ｄ）該ＩＤＩ２が該所定のＩＤＩ２鉄欠乏基準を満たす場合、鉄欠乏の指標を報告する工程、
を包含する、方法。 - 前記ｉ、ｊおよびｋが、それぞれ−９７．９８、０．２４および２．９１である、請求項１に記載の方法。
- 前記鉄欠乏が、絶対的鉄欠乏または機能的鉄欠乏を含む、請求項１に記載の方法。
- 血液分析器で血液サンプルの鉄欠乏指数（ＩＤＩ２）を得る方法であって：
（ａ）血液サンプルの第１のアリコートを血液希釈剤と混合して第１のサンプル混合物を形成し、該血液分析器で該第１のサンプル混合物を分析し、そして赤血球の平均細胞容量（ＭＣＶ）および赤血球濃度（ＲＢＣ）を得る工程；
（ｂ）該血液サンプルの第２のアリコートを試薬系と混合し第２のサンプル混合物を形成し、該血液分析器で該第２のサンプル混合物を分析し、そして該血液サンプルのヘモグロビン濃度（Ｈｇｂ）を得る工程；
（ｃ）該ＭＣＶ、該ＲＢＣおよび該Ｈｇｂを用いて、平均細胞ヘモグロビン（ＭＣＨ）および平均細胞ヘモグロビン濃度（ＭＣＨＣ）を得る工程；
（ｄ）該ＭＣＨおよび該ＭＣＨＣを用いて該鉄欠乏指数（ＩＤＩ２）を得る工程であって、該ＩＤＩ２が該ＭＣＨおよび該ＭＣＨＣのロジスティック関数として規定され、該ＩＤＩ ２ が、以下の方程式：
（ｅ）該血液分析器で該血液サンプルの該ＩＤＩ２を報告する工程、
を包含する、方法。 - 前記ｉ、ｊおよびｋが、それぞれ−９７．９８、０．２４および２．９１である、請求項４に記載の方法。
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| US20100120081A1 (en) * | 2008-11-07 | 2010-05-13 | Beckman Coulter, Inc. | High sensitivity parameters for the detection of vitamin b12 and/or folate deficiencies and methods of use |
| WO2010083034A1 (en) | 2009-01-13 | 2010-07-22 | Acceleron Pharma Inc. | Methods for increasing adiponectin |
| CA2759392A1 (en) | 2009-04-27 | 2010-11-04 | Abbott Laboratories | Method for discriminating red blood cells from white blood cells by using forward scattering from a laser in an automated hematology analyzer |
| CN102482339B (zh) * | 2009-06-08 | 2015-06-17 | 阿塞勒隆制药公司 | 用于增加产热脂肪细胞的方法 |
| KR20180026795A (ko) | 2009-06-12 | 2018-03-13 | 악셀레론 파마 인코포레이티드 | 절두된 ＡｃｔＲＩＩＢ-ＦＣ 융합 단백질 |
| CA2773494A1 (en) * | 2009-09-09 | 2011-03-17 | Acceleron Pharma Inc. | Actriib antagonists and dosing and uses thereof |
| JP5836961B2 (ja) * | 2009-11-03 | 2015-12-24 | アクセルロン ファーマ， インコーポレイテッド | 脂肪肝疾患を処置するための方法 |
| ES2658292T3 (es) * | 2009-11-17 | 2018-03-09 | Acceleron Pharma, Inc. | Proteínas ActRIIB y variantes y usos de las mismas con respecto a la inducción de la utrofina para el tratamiento de la distrofia muscular |
| US8906308B2 (en) | 2010-01-15 | 2014-12-09 | Abbott Laboratories | Method for determining volume and hemoglobin content of individual red blood cells |
| JP5782318B2 (ja) * | 2010-07-16 | 2015-09-24 | 住友化学株式会社 | 高分子化合物を含む組成物及びそれを用いる発光素子 |
| JP5868982B2 (ja) * | 2010-09-16 | 2016-02-24 | ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション | 診断のための赤血球動力学 |
| CN103298832A (zh) | 2010-11-08 | 2013-09-11 | 阿塞勒隆制药公司 | Actriia结合剂及其用途 |
| JP6031513B2 (ja) | 2011-07-22 | 2016-11-24 | ロッシュ ダイアグノスティクス ヘマトロジー インコーポレイテッド | 網赤血球の同定および測定 |
| EP3964224A1 (en) | 2012-11-02 | 2022-03-09 | Celgene Corporation | Activin-actrii antagonists and uses for use in treating renal disease |
| US20170108487A1 (en) * | 2014-06-05 | 2017-04-20 | The General Hospital Corporation | Predicting morbidity associated with red blood cell volume variance |
| BR122023023170A2 (pt) | 2014-06-13 | 2024-02-20 | Acceleron Pharma Inc. | Uso de um antagonista de actrii no tratamento ou prevenção de úlcera cutânea associada com beta-talassemia |
| MA41052A (fr) | 2014-10-09 | 2017-08-15 | Celgene Corp | Traitement d'une maladie cardiovasculaire à l'aide de pièges de ligands d'actrii |
| ES2946160T3 (es) | 2014-12-03 | 2023-07-13 | Celgene Corp | Antagonistas de activina-ActRII y usos para tratar síndrome mielodisplásico |
| AU2016322966B2 (en) | 2015-09-17 | 2021-10-14 | S.D. Sight Diagnostics Ltd | Methods and apparatus for detecting an entity in a bodily sample |
| WO2017106461A1 (en) | 2015-12-15 | 2017-06-22 | The General Hospital Corporation | Methods of estimating blood glucose and related systems |
| WO2017168411A1 (en) | 2016-03-30 | 2017-10-05 | S.D. Sight Diagnostics Ltd | Image processing device for identifying blood parasites |
| US11293852B2 (en) | 2016-04-07 | 2022-04-05 | The General Hospital Corporation | White blood cell population dynamics |
| JP6942148B2 (ja) * | 2016-05-11 | 2021-09-29 | エス．ディー．サイト ダイアグノスティクス リミテッド | 試料に対する光学測定の実施 |
| US11307196B2 (en) | 2016-05-11 | 2022-04-19 | S.D. Sight Diagnostics Ltd. | Sample carrier for optical measurements |
| JP7214729B2 (ja) | 2017-11-14 | 2023-01-30 | エス．ディー．サイト ダイアグノスティクス リミテッド | 光学測定用試料収容器 |
| JPWO2022102734A1 (ja) * | 2020-11-13 | 2022-05-19 |
Family Cites Families (32)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2656508A (en) * | 1949-08-27 | 1953-10-20 | Wallace H Coulter | Means for counting particles suspended in a fluid |
| US3810011A (en) * | 1970-05-25 | 1974-05-07 | Coulter Electronics | Apparatus and method for analyzing the particle volume distribution for a plurality of particles of different size in a quantity of liquid |
| JPS5916667B2 (ja) * | 1975-02-28 | 1984-04-17 | トウアイヨウデンシ カブシキガイシヤ | 自動血液分析装置 |
| JPS5379599A (en) * | 1976-12-23 | 1978-07-14 | Toa Medical Electronics | Automatic blood analyzer |
| US4521518A (en) | 1980-06-16 | 1985-06-04 | Coulter Electronics, Inc. | Multi-purpose blood diluent and lysing agent for differential determination of lymphoid-myeloid population of leukocytes |
| US4528274A (en) * | 1982-07-06 | 1985-07-09 | Coulter Electronics, Inc. | Multi-purpose blood diluent and lysing agent for differential determination of lymphoid-myeloid population of leukocytes |
| KR970007077B1 (ko) * | 1987-03-13 | 1997-05-02 | 코울터 일렉트로닉스 인커퍼레이티드 | 광산란 기술을 이용한 다중-부분식별 분석 방법 |
| JPH02304354A (ja) * | 1989-05-18 | 1990-12-18 | Toa Medical Electronics Co Ltd | 血液データの解析方法 |
| JP3703858B2 (ja) * | 1993-09-30 | 2005-10-05 | シスメックス株式会社 | 帰属度判別装置 |
| CA2183558C (en) * | 1994-03-11 | 2006-01-24 | Young Ran Kim | Cyanide-free reagent and method for the determination of hemoglobin |
| US5834315A (en) | 1994-12-23 | 1998-11-10 | Coulter Corporation | Cyanide-free reagent and method for hemoglobin determination and leukocyte differentitation |
| WO1997022870A1 (en) * | 1995-12-18 | 1997-06-26 | Center For Laboratory Technology, Inc. | Multi-parameter hematology apparatus and method |
| US5686309A (en) * | 1996-01-19 | 1997-11-11 | Coulter International Corp. | Method and apparatus for determination of hemoglobin content of individual red blood cells |
| US5882934A (en) * | 1997-01-21 | 1999-03-16 | Coulter International Corp. | Composition and method for hemoglobin and cell analysis |
| US5763280A (en) * | 1997-01-21 | 1998-06-09 | Coulter International Corp. | Cyanide-free lytic reagent composition and method for hemoglobin and cell analysis |
| US5935857A (en) * | 1997-08-01 | 1999-08-10 | Coulter International Corp. | Blood diluent |
| JPH11326315A (ja) * | 1998-05-21 | 1999-11-26 | Sysmex Corp | β−サラセミアの鑑別方法 |
| US6030838A (en) * | 1998-09-24 | 2000-02-29 | Emt & Associates, Inc. | Hematological parameter |
| US6228652B1 (en) * | 1999-02-16 | 2001-05-08 | Coulter International Corp. | Method and apparatus for analyzing cells in a whole blood sample |
| US20020098589A1 (en) * | 2001-01-19 | 2002-07-25 | Crews Harold Richardson | Multi-purpose reagent system and method for enumeration of red blood cells, white blood cells and thrombocytes and differential determination of white blood cells |
| US6268217B1 (en) * | 1999-11-12 | 2001-07-31 | James C. Barton | Erythrocyte parameters in hemochromatosis |
| US6535836B1 (en) * | 2000-09-29 | 2003-03-18 | Coulter International Corp. | Method for the analysis of abnormal particle populations |
| US20030027347A1 (en) * | 2001-05-25 | 2003-02-06 | Phyllis Shapiro | Automated method for correcting blood analysis parameter results affected by interference from exogenous blood substitutes in whole blood, plasma, and serum |
| US6573102B2 (en) * | 2001-07-27 | 2003-06-03 | Coulter International Corp. | Lytic reagent composition for determination of nucleated blood cells |
| US7659074B2 (en) * | 2001-09-14 | 2010-02-09 | Roche Diagnostics Corporation | Diagnosis and treatment of disorders of iron metabolism |
| EP1425589B1 (en) * | 2001-09-14 | 2007-12-05 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Differential diagnosis of disorders of iron metabolism |
| US6706526B2 (en) * | 2002-01-24 | 2004-03-16 | Coulter International Corp. | Low formaldehyde producing blood diluent |
| US6916662B2 (en) * | 2003-01-31 | 2005-07-12 | Abbott Laboratories | Performance improvement for hematology analysis |
| US7095492B2 (en) * | 2003-12-19 | 2006-08-22 | Beckman Coulter, Inc. | Method and apparatus for measuring cell-by-cell hemoglobin |
| US7609369B2 (en) * | 2005-09-24 | 2009-10-27 | Beckman Coulter, Inc. | Methods of detection of iron deficiency and hemochromatosis |
| US7586589B2 (en) * | 2005-09-24 | 2009-09-08 | Beckman Coulter, Inc. | Methods of determination of responsiveness to erythropoietin treatment |
| US7361510B2 (en) * | 2006-01-20 | 2008-04-22 | Beckman Coulter, Inc. | Methods of detection of iron deficiency |
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