JP5503552B2 - メチシリン耐性黄色ブドウ球菌の検出 - Google Patents
メチシリン耐性黄色ブドウ球菌の検出 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5503552B2 JP5503552B2 JP2010539500A JP2010539500A JP5503552B2 JP 5503552 B2 JP5503552 B2 JP 5503552B2 JP 2010539500 A JP2010539500 A JP 2010539500A JP 2010539500 A JP2010539500 A JP 2010539500A JP 5503552 B2 JP5503552 B2 JP 5503552B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- primer
- region
- amplification
- meca
- probe
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims description 83
- RJQXTJLFIWVMTO-TYNCELHUSA-N Methicillin Chemical compound COC1=CC=CC(OC)=C1C(=O)N[C@@H]1C(=O)N2[C@@H](C(O)=O)C(C)(C)S[C@@H]21 RJQXTJLFIWVMTO-TYNCELHUSA-N 0.000 title claims description 39
- 229960003085 meticillin Drugs 0.000 title claims description 39
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 title claims description 37
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 217
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 claims description 190
- 230000003321 amplification Effects 0.000 claims description 188
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 116
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 88
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 83
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 64
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 64
- 239000013611 chromosomal DNA Substances 0.000 claims description 63
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 claims description 37
- 101000743006 Lactococcus lactis subsp. cremoris UPF0177 protein in abiGi 5'region Proteins 0.000 claims description 34
- 101150008979 mecA gene Proteins 0.000 claims description 33
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 26
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 22
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 22
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 claims description 20
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 16
- 238000013518 transcription Methods 0.000 claims description 15
- 230000035897 transcription Effects 0.000 claims description 15
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 claims description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 4
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 25
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 19
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 15
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 15
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 11
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 11
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 9
- 101150003203 mec gene Proteins 0.000 description 8
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 7
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 7
- 241000295644 Staphylococcaceae Species 0.000 description 6
- 241000191963 Staphylococcus epidermidis Species 0.000 description 6
- 108091093088 Amplicon Proteins 0.000 description 5
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 5
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 5
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 4
- 238000013461 design Methods 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 4
- 238000007834 ligase chain reaction Methods 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 4
- 108010065152 Coagulase Proteins 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 108700039691 Genetic Promoter Regions Proteins 0.000 description 3
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 3
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 3
- 230000001351 cycling effect Effects 0.000 description 3
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 3
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 3
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- 101100004560 Bacteroides fragilis ccrA gene Proteins 0.000 description 2
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101100114777 Brucella suis biovar 1 (strain 1330) crcB2 gene Proteins 0.000 description 2
- 101710116957 D-alanyl-D-alanine carboxypeptidase Proteins 0.000 description 2
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 2
- 238000002944 PCR assay Methods 0.000 description 2
- 101710202686 Penicillin-sensitive transpeptidase Proteins 0.000 description 2
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 2
- 108010052160 Site-specific recombinase Proteins 0.000 description 2
- DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N Uridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000005202 decontamination Methods 0.000 description 2
- 230000003588 decontaminative effect Effects 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 2
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 238000005304 joining Methods 0.000 description 2
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 2
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 2
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 2
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 2
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 2
- 238000012340 reverse transcriptase PCR Methods 0.000 description 2
- 238000005096 rolling process Methods 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 2
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 108020000946 Bacterial DNA Proteins 0.000 description 1
- GNWUOVJNSFPWDD-XMZRARIVSA-M Cefoxitin sodium Chemical compound [Na+].N([C@]1(OC)C(N2C(=C(COC(N)=O)CS[C@@H]21)C([O-])=O)=O)C(=O)CC1=CC=CS1 GNWUOVJNSFPWDD-XMZRARIVSA-M 0.000 description 1
- SHIBSTMRCDJXLN-UHFFFAOYSA-N Digoxigenin Natural products C1CC(C2C(C3(C)CCC(O)CC3CC2)CC2O)(O)C2(C)C1C1=CC(=O)OC1 SHIBSTMRCDJXLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091029865 Exogenous DNA Proteins 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 229930010555 Inosine Natural products 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N Inosine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=NC=NC(O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 101710203526 Integrase Proteins 0.000 description 1
- 102000003960 Ligases Human genes 0.000 description 1
- 108090000364 Ligases Proteins 0.000 description 1
- 101000735344 Lymantria dispar Pheromone-binding protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 208000037942 Methicillin-resistant Staphylococcus aureus infection Diseases 0.000 description 1
- 241000582786 Monoplex Species 0.000 description 1
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 1
- 108020004711 Nucleic Acid Probes Proteins 0.000 description 1
- 108020005187 Oligonucleotide Probes Proteins 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 229930185560 Pseudouridine Natural products 0.000 description 1
- PTJWIQPHWPFNBW-UHFFFAOYSA-N Pseudouridine C Natural products OC1C(O)C(CO)OC1C1=CNC(=O)NC1=O PTJWIQPHWPFNBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010066717 Q beta Replicase Proteins 0.000 description 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 108091081062 Repeated sequence (DNA) Proteins 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- 241000191984 Staphylococcus haemolyticus Species 0.000 description 1
- 208000031650 Surgical Wound Infection Diseases 0.000 description 1
- 101710137500 T7 RNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N Thiophosphoric acid Chemical class OP(O)(S)=O RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 210000003578 bacterial chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N beta-L-uridine Natural products O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N 0.000 description 1
- WGDUUQDYDIIBKT-UHFFFAOYSA-N beta-Pseudouridine Natural products OC1OC(CN2C=CC(=O)NC2=O)C(O)C1O WGDUUQDYDIIBKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 238000009640 blood culture Methods 0.000 description 1
- 125000002057 carboxymethyl group Chemical group [H]OC(=O)C([H])([H])[*] 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 229960002682 cefoxitin Drugs 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 125000003636 chemical group Chemical group 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- QONQRTHLHBTMGP-UHFFFAOYSA-N digitoxigenin Natural products CC12CCC(C3(CCC(O)CC3CC3)C)C3C11OC1CC2C1=CC(=O)OC1 QONQRTHLHBTMGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SHIBSTMRCDJXLN-KCZCNTNESA-N digoxigenin Chemical compound C1([C@@H]2[C@@]3([C@@](CC2)(O)[C@H]2[C@@H]([C@@]4(C)CC[C@H](O)C[C@H]4CC2)C[C@H]3O)C)=CC(=O)OC1 SHIBSTMRCDJXLN-KCZCNTNESA-N 0.000 description 1
- ZPTBLXKRQACLCR-XVFCMESISA-N dihydrouridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)CC1 ZPTBLXKRQACLCR-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 206010014665 endocarditis Diseases 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 210000004013 groin Anatomy 0.000 description 1
- 125000004029 hydroxymethyl group Chemical group [H]OC([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 229960003786 inosine Drugs 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 238000007899 nucleic acid hybridization Methods 0.000 description 1
- 239000002853 nucleic acid probe Substances 0.000 description 1
- 239000002751 oligonucleotide probe Substances 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 239000013610 patient sample Substances 0.000 description 1
- 150000002960 penicillins Chemical class 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- PTJWIQPHWPFNBW-GBNDHIKLSA-N pseudouridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1C1=CNC(=O)NC1=O PTJWIQPHWPFNBW-GBNDHIKLSA-N 0.000 description 1
- 238000012797 qualification Methods 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011897 real-time detection Methods 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000011895 specific detection Methods 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 239000005451 thionucleotide Substances 0.000 description 1
- DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N uracil arabinoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940045145 uridine Drugs 0.000 description 1
- 238000003260 vortexing Methods 0.000 description 1
- QAOHCFGKCWTBGC-QHOAOGIMSA-N wybutosine Chemical compound C1=NC=2C(=O)N3C(CC[C@H](NC(=O)OC)C(=O)OC)=C(C)N=C3N(C)C=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O QAOHCFGKCWTBGC-QHOAOGIMSA-N 0.000 description 1
- QAOHCFGKCWTBGC-UHFFFAOYSA-N wybutosine Natural products C1=NC=2C(=O)N3C(CCC(NC(=O)OC)C(=O)OC)=C(C)N=C3N(C)C=2N1C1OC(CO)C(O)C1O QAOHCFGKCWTBGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
- C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
- C12Q1/689—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms for bacteria
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/106—Pharmacogenomics, i.e. genetic variability in individual responses to drugs and drug metabolism
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/156—Polymorphic or mutational markers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/16—Primer sets for multiplex assays
Description
(i)SCCmec右端部連結部位増幅概念(Hiramatsu et al.国際公開第97/31125号;欧州特許第0887424号;米国特許第6,156,507号;およびさらに、Huletsky and Rossbach 国際公開第02/099034号(2002);Huletsky et al.J.Clin.Microbiol.42(5):1875−1884 (2004));
(ii)Francoisおよび共同研究者により記載される免疫選択菌培養(immuno−enrichment)概念(Francois,P et al.J.Clin.Microbiol.41(1):254−260 (2003);国際公開第02/082086号)、免疫選択菌培養の後に続いて3種類のマーカー(mecA遺伝子、黄色ブドウ球菌特異的マーカー、および表皮ブドウ球菌特異的マーカー)が増幅される。
a.SCCmecカセットの端部連結領域に特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプライマーと、
b.黄色ブドウ球菌染色体DNAの端部連結領域に特異的にハイブリダイズすることのできる第2のプライマーと、
c.第1のプライマーがハイブリダイズすることのできる領域と連結部位との間にあるSCCmecカセット領域に対して特異的にハイブリダイズすることのできるプローブと
を利用して、サンプルにおいて増幅及び検出反応を行うことを含み、
第1のプライマーおよび第2のプライマーの各々は、増幅条件下において、連結部位が増幅されるように方向付けられ、かつ
サンプルがMRSAを含む場合、プローブのハイブリダイゼーションが検出される。本明細書において示されるこのような方法において、「a」プライマー、プローブ、などは、特に指定のない限りまたは文脈で別に指示されていない限り、1以上のプライマーまたはプローブを意味し得る。
a)1)SCCmecカセットの端部連結領域に特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプライマーと、
2)黄色ブドウ球菌染色体DNAの端部連結領域において特異的にハイブリダイズすることのできる第2のプライマーと、
3)第1のプライマーがハイブリダイズすることのできる領域と連結部位との間にあるSCCmecカセット領域に対して特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプローブと
を利用して、挿入されたSCCmecカセットと黄色ブドウ球菌染色体DNAの連結部位の存在を検出する増幅及び検出反応をサンプルにおいて行うステップと、ここで、第1のプライマーおよび第2のプライマーの各々は、増幅条件下、連結部位が増幅されるように方向付けられており、
b)mecA遺伝子の存在を検出する、増幅および検出反応をサンプルにおいて行うステップと、ここで、サンプルがMRSAを含む場合、サンプル中の標的連結部位およびmecA遺伝子の両方の存在が検出される、
を含む。
該増幅反応が、
a.1)SCCmecカセットの端部連結領域に特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプライマーと、
2)黄色ブドウ球菌染色体DNAの端部連結領域に特異的にハイブリダイズすることのできる第2のプライマーと、
3)第1のプライマーがハイブリダイズすることのできる領域と連結部位との間にあるSCCmecカセット領域に対して特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプローブと
を利用して、挿入したSCCmecカセットと黄色ブドウ球菌染色体DNAの連結部位の存在を増幅および検出するステップと、ここで、第1のプライマーおよび第2のプライマーの各々は、増幅条件下、連結部位が増幅されるように方向付けられており、
b.mecA遺伝子の存在を増幅及び検出するステップと、ここで、サンプルがMRSAを含む場合、サンプル中の標的連結部位とmecAの両方の存在が検出される、
を含む、マルチプレックス増幅反応をサンプルに行うステップを含む。
a.サンプルにおいて(1)挿入されたSCCmecカセットと黄色ブドウ球菌染色体DNAの連結部位および(2)mecA領域の両方を同時に増幅することのできる増幅反応を行うステップと、
b.増幅産物の中で、連結部位とmecAの各々の存在又は不在を検出するステップと、ここで、サンプルがMRSAを含む場合、サンプル中の標的連結部位とmecAの両方の存在が検出される、
を含む。
単一容器中で、生体サンプルを、
a)(1)SCCmecカセットの端部連結領域と特異的にハイブリダイズする核酸配列を有する第1のオリゴヌクレオチドと、
(2)SCCmecカセットに隣接する黄色ブドウ球菌染色体DNA領域と特異的にハイブリダイズする核酸配列を有する第2のオリゴヌクレオチドと
を含む、生体サンプルならびに該第1および第2のオリゴヌクレオチドの第1の反応産物を形成するための第1のオリゴヌクレオチドセットと、
b)(3)mecA核酸の第1の領域と特異的にハイブリダイズするヌクレオチド配列を有する第3のオリゴヌクレオチドと、
(4)mecA核酸の第2の領域と特異的にハイブリダイズするヌクレオチド配列を有する第4のオリゴヌクレオチドと
を含む、生体サンプルならびに該第3および第4のオリゴヌクレオチドの第2の反応産物を形成するための第2のオリゴヌクレオチドセットと
に接触させるステップと、
第1および第2の反応産物の両方を検出することによりMRSAの存在を同定するステップとを含む。同定する段階は、一実施形態では、第1および第2の反応産物を、(1)第1の反応産物と特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプローブおよび(2)第2の反応産物と特異的にハイブリダイズすることのできる第2のプローブと接触させるステップを含み得る。
(a)SCCmecカセットの端部連結領域に特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプライマーと、
(b)端部連結部位の領域において黄色ブドウ球菌染色体DNAと特異的にハイブリダイズすることのできる第2のプライマーと、
(c)第1のプライマーがハイブリダイズすることのできる領域と連結部位との間にあるSCCmecカセット領域内において完全に特異的にハイブリダイズすることのできるプローブとを含み、
この際、第1のプライマーおよび第2のプライマーの各々は、増幅条件下、連結部位が増幅されるように方向付けられている。さらに、本発明は、SCCmecカセットが黄色ブドウ球菌染色体DNAの中に挿入されているメチシリン耐性黄色ブドウ球菌(MRSA)のサンプルの存在を同定するためのキットを提供し、このキットは、
a)1)SCCmecカセットの端部連結領域において特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプライマーと、
2)端部連結部位の領域に黄色ブドウ球菌染色体DNAと特異的にハイブリダイズすることのできる第2のプライマーと、
3)(1)第1のプライマーがハイブリダイズすることのできる領域と連結部位との間にあるSCCmecカセット領域内において主に特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプローブ、および、(2)第1のプライマーがハイブリダイズすることのできる領域と連結部位との間にあるSCCmecカセット領域内において完全に特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプローブからなる群より選択される第1のプローブとを含み、
第1のプライマーおよび第2のプライマーの各々は、増幅条件下、連結部位が増幅されるように方向付けられている、第1の増幅および検出オリゴヌクレオチドセット、ならびに
b)4)mecAの第1の領域と特異的にハイブリダイズすることのできる、第3のプライマーと、
5)mecAの第2の領域と特異的にハイブリダイズすることのできる第4のプライマーと、
6)mecAの第1の領域と第2の領域との間のmecA領域と特異的にハイブリダイズすることのできる第2のプローブとを含み、
この際、第3のプライマーおよび第4のプライマーの各々は、増幅条件下、前記mecAの第1の領域と前記mecAの第2の領域の間のmecA領域が増幅されるように方向付けられている、第2の増幅および検出オリゴヌクレオチドセットを含む。
a.SCCmecカセットの端部連結領域に特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプライマーと、
b.黄色ブドウ球菌染色体DNAの端部連結領域に特異的にハイブリダイズすることのできる第2のプライマーと、
c.第1のプライマーがハイブリダイズすることのできる領域と連結部位との間にあるSCCmecカセット領域と特異的にハイブリダイズすることのできるプローブと
を利用して、サンプルにおいて増幅及び検出反応を行うことを含み、
この際、第1のプライマーおよび第2のプライマーの各々は、増幅条件下、連結部位が増幅されるように方向付けられ、かつ、サンプルがMRSAを含む場合、プローブのハイブリダイゼーションが検出される。
(a)次の1)SCCmecカセットの端部連結領域に特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプライマーと、
2)黄色ブドウ球菌染色体DNAの端部連結領域に特異的にハイブリダイズすることのできる第2のプライマーと、
3)第1のプライマーがハイブリダイズすることのできる領域と連結部位との間にあるSCCmecカセット領域と特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプローブと
を利用して、挿入されたSCCmecカセットと黄色ブドウ球菌染色体DNAの連結部位の存在を検出する増幅及び検出反応をサンプルに行うステップと、
ここで、第1のプライマーおよび第2のプライマーの各々が、増幅条件下、連結部位が増幅されるように方向付けられており、
(b)mecA遺伝子の存在を検出する、増幅および検出反応をサンプルにおいて行うステップと、
ここで、サンプルがMRSAを含む場合、サンプル中の標的連結部位およびmecA遺伝子の両方の存在が検出される、
を含む。
上記のような方法は、MRSAを、mecA(しかし完全なSCCmecカセットではない)が欠失している、やや希なMSSAと区別する際に特に役立つ。
サンプルにおいてマルチプレックス増幅反応を行うことを含み、この際、増幅反応は、
a.1)SCCmecカセットの端部連結領域に特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプライマーと、
2)黄色ブドウ球菌染色体DNAの端部連結領域に特異的にハイブリダイズすることのできる第2のプライマーと、
3)第1のプライマーがハイブリダイズすることのできる領域と連結部位との間にあるSCCmecカセット領域と特異的にハイブリダイズすることのできるプローブと
を利用して挿入したSCCmecカセットと黄色ブドウ球菌染色体DNAの連結部位の存在を増幅および検出するステップと、
この際、第1のプライマーおよび第2のプライマーの各々が、増幅条件下、連結部位が増幅されるように方向付けられており、
b.mecA遺伝子の存在を増幅及び検出するステップと、
ここで、サンプルがMRSAを含む場合、サンプル中の標的連結部位およびmecAの両方の存在が検出される、
を含む。
a.(1)挿入したSCCmecカセットと黄色ブドウ球菌染色体DNAとの連結部位および(2)mecA領域の両方を増幅することのできるマルチプレックス増幅反応を、サンプルにおいて行うステップと、
b.増幅産物の中で、連結部位とmecAの各々の存在又は不在を検出するステップとを含み、
この際、サンプルがMRSAを含む場合、サンプル中の標的連結部位とmecAの両方の存在が検出される。
1)SCCmecカセットの端部連結領域に特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプライマーと、
2)黄色ブドウ球菌染色体DNAの端部連結領域に特異的にハイブリダイズすることのできる第2のプライマーと、
3)第1のプライマーが特異的にハイブリダイズすることのできる領域と連結部位との間にあるSCCmecカセット領域に特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプローブと
を利用することにより達成することができ、
この際、第1のプライマーおよび第2のプライマーの各々は、増幅条件下、連結部位が増幅されるように方向付けられている。このプローブは、SCCmec領域内で完全に特異的にハイブリダイズするように選択することができる。連結部位とmecAのいずれかの存在または不在は、産物の検出をもたらすあらゆる分析により決定することができ、例えば、標識プローブを使用する場合、適切な検出装置によるハイブリダイズした標識の検出により決定することができる。検出可能なシグナルがないことは、その標的が存在しないことを示し、検出可能なシグナルの認知は、その標的の存在を示す。
単一容器中で、生体サンプルを、
a)(1)SCCmecカセットの端部連結領域と特異的にハイブリダイズする核酸配列を有する第1のオリゴヌクレオチドと、
(2)SCCmecカセットに隣接する黄色ブドウ球菌染色体DNA領域と特異的にハイブリダイズする核酸配列を有する第2のオリゴヌクレオチドと
を含む、生体サンプルならびに第1および第2のオリゴヌクレオチドの第1の反応産物を形成するための第1のオリゴヌクレオチドセットと、
b)(3)mecA核酸の第1の領域と特異的にハイブリダイズするヌクレオチド配列を有する第3のオリゴヌクレオチドと、
(4)mecA核酸の第2の領域と特異的にハイブリダイズするヌクレオチド配列を有する第4のオリゴヌクレオチドと
を含む、生体サンプルならびに第3および第4のオリゴヌクレオチドの第2の反応産物を形成するための第2のオリゴヌクレオチドセットと
に接触させるステップと、
第1および第2の反応産物の両方を検出することによりMRSAの存在を同定するステップとを含む。第1および第2の反応産物は、増幅反応により形成することができる。試薬をサンプルと接触させる条件は、選択された増幅反応に適した条件であってもよい。同定段階は、一実施形態では、第1および第2の反応産物と(1)第1の反応産物が存在する場合、それに対して特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプローブ、および(2)第2の反応産物が存在する場合、それに対して特異的にハイブリダイズすることのできる第2のプローブを接触させることを含んでもよい。
a)1)SCCmecカセットの端部連結領域に特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプライマーと、
2)端部連結部位の領域において黄色ブドウ球菌染色体DNAと特異的にハイブリダイズすることのできる第2のプライマーと、
3)(a)第1のプライマーがハイブリダイズすることのできる領域と連結部位との間にあるSCCmecカセットの領域内において主に特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプローブ、および、(b)第1のプライマーがハイブリダイズすることのできる領域と連結部位との間にあるSCCmecカセットの領域内において完全に特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプローブからなる群より選択される第1のプローブと
を含み、
第1のプライマーおよび第2のプライマーの各々は、増幅条件下、連結部位が増幅されるように方向付けられている、第1の増幅および検出オリゴヌクレオチドセットと、
b)4)mecAの第1の領域と特異的にハイブリダイズすることのできる、第3のプライマーと、
5)mecAの第2の領域と特異的にハイブリダイズすることのできる第4のプライマーと、
6)mecAの第1の領域と第2の領域との間のmecAの領域と特異的にハイブリダイズすることのできる第2のプローブを含み、
第3のプライマーおよび第4のプライマーの各々が、増幅条件下、前記mecAの第1の領域と前記mecAの第2の領域との間のmecAの領域が増幅されるように方向付けられている、第2の増幅および検出オリゴヌクレオチドセットと
を含む。
a)1)SCCmecカセットの端部連結領域に特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプライマーと、
2)端部連結部位の領域において黄色ブドウ球菌染色体DNAと特異的にハイブリダイズすることのできる第2のプライマーと、
3)第1のプライマーがハイブリダイズすることのできる領域と連結部位との間にあるSCCmecカセット領域内において、主に、または完全に特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプローブと
を含み、
第1のプライマーおよび第2のプライマーの各々が、増幅条件下、連結部位が増幅されるように方向付けられている、第1の増幅および検出オリゴヌクレオチドセットと、
b)4)mecAの第1の領域と特異的にハイブリダイズすることのできる第3のプライマーと、
5)mecAの第2の領域と特異的にハイブリダイズすることのできる第4のプライマーと、
6)前記mecAの第1の領域と前記mecAの第2の領域との間のmecAの領域と特異的にハイブリダイズすることのできる第2のプローブと
を含み、
第3のプライマーおよび第4のプライマーの各々が、増幅条件下、mecAの第1の領域と第2の領域との間のmecAの領域が増幅されるように方向付けられている、第2の増幅および検出オリゴヌクレオチドセットと
を含む。
すべての実験に関して、次のDNA−NASBA条件を用いた。
染色体DNAを増幅のための材料として使用した。各々の菌株について、デンシトメーター(bioMerieux,Marcy l’Etoile,France)を用いて細菌懸濁液を0.5マクファーランド(1.5×108CFU/ml)に標準化した。DNAを、ガラスビーズおよびボルテックスによる機械的溶解技法を用いて細菌細胞から放出し、最終的に段階希釈を溶解した懸濁液から調製した。
「アプローチ1」は、カセットの右部分に位置する5つのP2、黄色ブドウ球菌orfXに位置する1つの一般的なP1および黄色ブドウ球菌orfXに位置する1つの一般的なビーコンの使用に基づく(図2)。DNA NASBAは、5つのSCCmecカセット特異的プライマー2(P2)(配列番号1、配列番号2、配列番号3、配列番号4、配列番号5)、1つの一般的なP1(配列番号13)および1つの一般的なFAM標識されたビーコン(配列番号18)を用いて行った。NASBA曲線を、MRSA(MREJ i、ii、iii、iv、vおよびvii型に属する6菌株)およびMSSAについて得た。ライセートの投入は、NASBAにつき105CFUに相当する。最大シグナル比(最終シグナルと初期バックグラウンドとの間の比)を表2に示す。この実験は、一般的なビーコンNASBA(アプローチ1)を用いる、21のMSSA菌株のうち5について(24%)陽性の最大シグナル比を示す。
MSSAの非特異的検出を克服するため、「アプローチ2」を定義し、開発した。具体的には、orfXの代わりにSCCmecカセットの右部分に位置するビーコンを定義した。「アプローチ2」は、5つの特異的プライマー2(P2)および1つの一般的なP1を使用するが、カセットの右部分に位置する5つの特異的ビーコンが一般的なビーコンの代わりに使用される(図3参照)。
アプローチ2を用いて、一部の偽陽性は除去される、従ってMRSAを検出するための改良された方法が提供される。しかし、mecA遺伝子を含まないカセットを保有するMSSA菌株は検出され得、さらなる改良が調査された。この例に示されるように、挿入カセット領域(アプローチ2を使用)とmecA遺伝子の両方の同時増幅および検出(図4参照)は、このような菌株(偽MRSA陽性)の検出を減らすのに役立ち得る。
アプローチ2(SCCmecカセット特異的ビーコン)をmecA検出(実施例3に記載されるものと同じ条件)と共に用いて、6つのSCCmecカセット特異的P2(配列番号:1〜6)、6つの特異的なSCCmecカセット特異的FAMビーコン(配列番号:7〜12)および1つのorfX P1(配列番号13)を利用して、MRSAの多重(同一反応チューブ)増幅および検出を行った。MRSA菌株の陽性の検出が得られた。
Claims (75)
- サンプル中の、SCCmecカセットが黄色ブドウ球菌染色体DNAの中に挿入されているメチシリン耐性黄色ブドウ球菌(MRSA)を検出する方法であって、
a)前記SCCmecカセットの右端部連結領域内に特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプライマーと、
b)黄色ブドウ球菌染色体DNAの右端部連結領域に特異的にハイブリダイズすることのできる第2のプライマーと、
c)前記第1のプライマーがハイブリダイズすることのできる前記領域と右SCCmec−染色体連結部位との間にある前記SCCmecカセットの領域と特異的にハイブリダイズすることのできるプローブと
を利用して、前記サンプルにおいて増幅及び検出反応を行うステップを含み、
前記第1のプライマーおよび前記第2のプライマーの各々が、増幅条件下、前記連結部位が増幅されるように方向付けられ、かつ、
前記サンプルがMRSAを含む場合、前記プローブのハイブリダイゼーションが検出される、方法。 - 前記プローブが複数のプローブを含み、各々が異なる種類のMRSAと特異的にハイブリダイズすることができる請求項1に記載の方法。
- 前記プローブが5以上のプローブを含み、各々が異なる種類のMRSAと特異的にハイブリダイズすることができる請求項1に記載の方法。
- 前記増幅反応が、転写に基づく増幅およびPCRからなる群より選択される、請求項1に記載の方法。
- 前記転写に基づく増幅が、NASBAである請求項4に記載の方法。
- 前記NASBAが、DNA−NASBAである、請求項5に記載の方法。
- 前記第1のプライマーが、前記SCCmecカセットの端部連結領域においてハイブリダイズすることのできる複数のプライマーを含む、請求項1に記載の方法。
- 前記第2のプライマーが、配列番号13として示される核酸を含む、請求項1に記載の方法。
- 前記プローブが、配列番号7、8、9、10、11、および12からなる群より選択される配列を含む、請求項1に記載の方法。
- 前記プローブが、少なくとも5つの異なる核酸を含み、前記核酸の各々が配列番号7、8、9、10、11、および12のうちの1つを含む、請求項1に記載の方法。
- 前記第1のプライマーが、配列番号1、2、3、4、5、および6からなる群より選択される配列を含む核酸を含む、請求項1に記載の方法。
- 前記第1のプライマーが、少なくとも5つの異なる核酸を含み、前記核酸の各々が配列番号1、2、3、4、5、および6のうちの1つを含む、請求項1に記載の方法。
- サンプル中の、SCCmecカセットが黄色ブドウ球菌染色体DNAの中に挿入されているメチシリン耐性黄色ブドウ球菌(MRSA)を検出する方法であって、
a)1)前記SCCmecカセットの右端部連結領域に特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプライマーと、
2)黄色ブドウ球菌染色体DNAの右端部連結領域に特異的にハイブリダイズすることのできる第2のプライマーと、
3)前記第1のプライマーがハイブリダイズすることのできる前記領域と右SCCmec−染色体連結部位との間にある、前記SCCmecカセット領域と特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプローブと
を利用して、挿入されたSCCmecカセットと黄色ブドウ球菌染色体DNAの連結部位の存在を検出する増幅及び検出反応を前記サンプルにおいて行うステップと、
ここで、前記第1のプライマーおよび前記第2のプライマーの各々は、増幅条件下、前記連結部位が増幅されるように方向付けられており、
b)mecA遺伝子の存在を検出する、増幅および検出反応を前記サンプルについて行うステップと、
ここで、前記サンプルがMRSAを含む場合、前記サンプル中の標的連結部位およびmecA遺伝子の両方の存在が検出される、
を含む方法。 - 前記第1のプローブが複数のプローブを含み、各々が異なる種類のMRSAと特異的にハイブリダイズすることができる、請求項13に記載の方法。
- 前記第1のプローブが5以上のプローブを含み、各々が異なる種類のMRSAと特異的にハイブリダイズすることができる、請求項13に記載の方法。
- 前記増幅反応が、転写に基づく増幅およびPCRからなる群より選択される、請求項13に記載の方法。
- 前記転写に基づく増幅が、NASBAである、請求項16に記載の方法。
- 前記NASBAが、DNA NASBAである、請求項17に記載の方法。
- 前記第1のプライマーが、前記SCCmecカセットの右端部連結領域においてハイブリダイズすることのできる複数のプライマーを含む、請求項13に記載の方法。
- 前記第2のプライマーが、配列番号13として示される核酸を含む、請求項13に記載の方法。
- 前記第1のプローブが、配列番号7、8、9、10、11、および12からなる群より選択される配列を含む、請求項13に記載の方法。
- 検出が、前記第1のプローブとして、少なくとも5つの異なる核酸を用いて行われ、前記核酸の各々が、配列番号7、8、9、10、11、および12のうちの1つを含む、請求項13に記載の方法。
- 増幅が、前記第1のプライマーとして、配列番号1、2、3、4、5、および6からなる群より選択される配列を含む核酸を用いて行われる、請求項13に記載の方法。
- 増幅が、前記第1のプライマーとして、少なくとも5つの異なる核酸を用いて行われ、前記核酸の各々が配列番号1、2、3、4、5、および6のうちの1つを含む、請求項13に記載の方法。
- 前記mecAの増幅が、配列番号15及び16からなる群より選択される核酸を含むmecAプライマーを利用する、請求項13に記載の方法。
- mecAの検出が、配列番号14に示される該核酸を含むmecAプローブを利用する、請求項13に記載の方法。
- サンプル中の、SCCmecカセットが黄色ブドウ球菌染色体DNAの中に挿入されているメチシリン耐性黄色ブドウ球菌(MRSA)を検出する方法であって、
マルチプレックス増幅反応をサンプルに行うステップを含み、該増幅反応が、
a)1)前記SCCmecカセットの右端部連結領域に特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプライマーと、
2)黄色ブドウ球菌染色体DNAの右端部連結領域に特異的にハイブリダイズすることのできる第2のプライマーと、
3)前記第1のプライマーがハイブリダイズすることのできる前記領域と右SCCmec−染色体連結部位との間にある、前記SCCmecカセット領域と特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプローブと
を利用して、挿入されたSCCmecカセットと黄色ブドウ球菌染色体DNAの連結部位の存在を増幅および検出するステップと、
ここで、前記第1のプライマーおよび前記第2のプライマーの各々が、増幅条件下、前記連結部位が増幅されるように方向付けられており、
b)mecA遺伝子の存在を増幅及び検出するステップと、
ここで、前記サンプルがMRSAを含む場合、前記サンプル中の標的連結部位とmecAの両方の存在が検出される、
を含む方法。 - 前記第1のプローブが複数のプローブを含み、各々が異なる種類のMRSAと特異的にハイブリダイズすることができる、請求項27に記載の方法。
- 前記第1のプローブが5以上のプローブを含み、各々が異なる種類のMRSAと特異的にハイブリダイズすることができる、請求項27に記載の方法。
- 前記増幅反応が、転写に基づく増幅およびPCRからなる群より選択される、請求項27に記載の方法。
- 前記転写に基づく増幅が、NASBAである、請求項30に記載の方法。
- 前記NASBAが、DNA−NASBAである、請求項31に記載の方法。
- 前記第1のプライマーが、前記SCCmecカセットの端部連結領域においてハイブリダイズすることのできる複数のプライマーを含む、請求項27に記載の方法。
- 前記第2のプライマーが、配列番号13として示される核酸を含む、請求項27に記載の方法。
- 前記第1のプローブが、配列番号7、8、9、10、11、および12からなる群より選択される配列を含む、請求項27に記載の方法。
- 検出が、前記第1のプローブとして、少なくとも5つの異なる核酸を用いて行われ、前記核酸の各々が、配列番号7、8、9、10、11、および12のうちの1つを含む、請求項27に記載の方法。
- 増幅が、前記第1のプライマーとして、配列番号1、2、3、4、5、および6からなる群より選択される配列を含む核酸を用いて行われる、請求項27に記載の方法。
- 増幅が、プライマーとして、少なくとも5つの異なる核酸を用いて行われ、前記核酸の各々が配列番号1、2、3、4、5、および6のうちの1つを含む、請求項27に記載の方法。
- mecAの前記増幅が、配列番号15及び16からなる群より選択される核酸を含むmecAプライマーを利用する、請求項27に記載の方法。
- mecAの検出が、配列番号14に示される前記核酸を含むmecAプローブを利用する、請求項27に記載の方法。
- サンプル中の、SCCmecカセットが黄色ブドウ球菌染色体DNAの中に挿入されているメチシリン耐性黄色ブドウ球菌(MRSA)を検出する方法であって、
a)(1)挿入したSCCmecカセットと黄色ブドウ球菌染色体DNAの連結部位と、(2)mecAの領域との両方を増幅することのできるマルチプレックス増幅反応をサンプルにおいて行うステップと、
b)増幅産物の中で、前記連結部位とmecAの各々の存在又は不在を検出するステップと、
ここで、前記サンプルがMRSAを含む場合、前記サンプル中の標的連結部位とmecAの両方の存在が検出される、
を含む方法であって、前記連結部位の増幅が、
1)前記SCCmecカセットの右端部連結領域に特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプライマーと、
2)黄色ブドウ球菌染色体DNAの右端部連結領域に特異的にハイブリダイズすることのできる第2のプライマーと、
3)前記第1のプライマーが特異的にハイブリダイズすることのできる前記領域と右SCCmec−染色体連結部位との間にある前記SCCmecカセット領域と特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプローブと
を利用して行われ、
前記第1のプライマーおよび前記第2のプライマーの各々が、増幅条件下、前記連結部位が増幅されるように方向付けられている、
方法。 - 前記増幅反応が、転写に基づく増幅およびPCRからなる群より選択される、請求項41に記載の方法。
- 前記転写に基づく増幅が、NASBAである、請求項42に記載の方法。
- 前記NASBAが、DNA−NASBAである、請求項43に記載の方法。
- 前記第1のプライマーが、前記SCCmecカセットの端部連結領域においてハイブリダイズすることのできる複数のプライマーを含む、請求項41に記載の方法。
- 前記第1のプローブが複数のプローブを含み、各々が異なる種類のMRSAと特異的にハイブリダイズすることができる、請求項41に記載の方法。
- 前記第1のプローブが5以上のプローブを含み、各々が異なる種類のMRSAと特異的にハイブリダイズすることができる、請求項41に記載の方法。
- 前記第2のプライマーが、配列番号13に示される核酸を含む、請求項41に記載の方法。
- 前記mecAの領域の増幅が、mecAプライマーを利用し、そのmecAプライマーが、配列番号15及び16からなる群より選択される核酸を含む、請求項41に記載の方法。
- 前記第1のプローブが、配列番号7、8、9、10、11、および12からなる群より選択される配列を含む、請求項41に記載の方法。
- 検出が、前記第1のプローブとして、少なくとも5つの異なる核酸を用いて行われ、前記核酸の各々が、配列番号7、8、9、10、11、および12のうちの1つを含む、請求項41に記載の方法。
- 増幅が、前記第1のプライマーとして、配列番号1、2、3、4、5、および6からなる群より選択される配列を含む核酸を用いて行われる、請求項41に記載の方法。
- 増幅が、前記第1のプライマーとして少なくとも5つの異なる核酸を用いて行われ、前記核酸の各々が配列番号1、2、3、4、5、および6のうちの1つを含む、請求項41に記載の方法。
- 前記mecAの増幅が、配列番号15及び16からなる群より選択される核酸を含むmecAプライマーを利用する、請求項41に記載の方法。
- mecAの検出が、配列番号14に示される該核酸を含むmecAプローブを利用する、請求項41に記載の方法。
- SCCmecカセットが黄色ブドウ球菌染色体DNAの中に挿入されているメチシリン耐性黄色ブドウ球菌(MRSA)の検出のためのキットであって、
a)増幅条件下、前記SCCmecカセットの右端部連結領域に特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプライマーと、
b)増幅条件下、黄色ブドウ球菌染色体DNAの右端部連結領域に特異的にハイブリダイズすることのできる第2のプライマーと、
c)(1)増幅条件下、前記第1のプライマーがハイブリダイズすることのできる前記領域と右SCCmec−染色体連結部位との間にある前記SCCmecカセット領域内において主に特異的にハイブリダイズすることのできるプローブ、および(2)増幅条件下、前記第1のプライマーがハイブリダイズすることのできる前記領域と前記連結部位との間にある前記SCCmecカセット領域内において完全に特異的にハイブリダイズすることのできるプローブ、からなる群より選択されるプローブと
を含み、
前記第1のプライマーおよび前記第2のプライマーの各々が、増幅条件下、前記連結部位が増幅されるように方向付けられている、キット。 - 前記第1のプライマーが、配列番号1、2、3、4、5、および6からなる群より選択される配列を含む核酸である、請求項56に記載のキット。
- 前記第2のプライマーが、orfXと特異的にハイブリダイズすることができる、請求項56に記載のキット。
- 前記第2のプライマーが、配列番号13として示される該核酸を含む、請求項56に記載のキット。
- 前記プローブが複数のプローブを含み、各々が異なる種類のMRSAと特異的にハイブリダイズすることができる、請求項56に記載のキット。
- 前記プローブが、配列番号7、8、9、10、11、および12からなる群より選択される配列を含む核酸である、請求項56に記載のキット。
- SCCmecカセットが黄色ブドウ球菌染色体DNAの中に挿入されているメチシリン耐性黄色ブドウ球菌(MRSA)の検出のためのキットであって、
(a)増幅条件下、前記SCCmecカセットの右端部連結領域に特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプライマーと、
(b)増幅条件下、右端部連結領域において黄色ブドウ球菌染色体DNAと特異的にハイブリダイズすることのできる第2のプライマーと、
(c)次の、(1)増幅条件下、前記第1のプライマーがハイブリダイズすることのできる前記領域と右SCCmec−染色体連結部位との間にある前記SCCmecカセット領域内において主に特異的にハイブリダイズすることのできるプローブ、および(2)増幅条件下、前記第1のプライマーがハイブリダイズすることのできる前記領域と前記連結部位との間にある前記SCCmecカセット領域内において完全に特異的にハイブリダイズすることのできるプローブ、からなる群より選択されるプローブと
を含み、
前記第1のプライマーおよび前記第2のプライマーの各々が、増幅条件下、前記連結部位が増幅されるように方向付けられている、キット。 - SCCmecカセットが黄色ブドウ球菌染色体DNAの中に挿入されているメチシリン耐性黄色ブドウ球菌(MRSA)のサンプルの存在を同定するためのキットであって、
a)1)増幅条件下、前記SCCmecカセットの右端部連結領域に特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプライマーと、
2)増幅条件下、右端部連結領域において黄色ブドウ球菌染色体DNAに特異的にハイブリダイズすることのできる第2のプライマーと、
3)増幅条件下、前記第1のプライマーがハイブリダイズすることのできる前記領域と右SCCmec−染色体連結部位との間の、前記SCCmecカセットの領域内で完全に特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプローブと
を含み、
前記第1のプライマーおよび前記第2のプライマーの各々が、増幅条件下、前記連結部位が増幅されるように方向付けられている、第1の増幅および検出オリゴヌクレオチドセットと、
b)4)増幅条件下、mecAの第1の領域と特異的にハイブリダイズすることのできる第3のプライマーと、
5)増幅条件下、mecAの第2の領域と特異的にハイブリダイズすることのできる第4のプライマーと、
6)増幅条件下、前記mecAの前記第1の領域と前記mecAの第2の領域との間のmecAの領域と特異的にハイブリダイズすることのできる第2のプローブと
を含み、
前記第3のプライマーおよび前記第4のプライマーの各々が、増幅条件下、前記mecAの第1の領域と前記mecAの第2の領域との間のmecAの領域が増幅されるように方向付けられている、第2の増幅および検出オリゴヌクレオチドセットと
を含む、キット。 - 前記第1、第2、第3および第4のプライマーが、単一の容器内に提供される、請求項63に記載のキット。
- 前記第1および第2の増幅および検出オリゴヌクレオチドセットが、単一の容器内に提供される、請求項63に記載のキット。
- 前記第1のプライマーが、前記SCCmecカセットの右端部連結領域においてハイブリダイズすることのできる複数のプライマーを含む、請求項63に記載のキット。
- 前記第1のプライマーが、配列番号1、2、3、4、5、および6からなる群より選択される配列を含む核酸を含む、請求項63に記載のキット。
- 前記第1のプローブが、1よりも多くのプローブを含み、各々が異なる種類のMRSAと特異的にハイブリダイズすることができる、請求項63に記載のキット。
- 前記第1のプローブが5以上のプローブを含み、各々が異なる種類のMRSAと特異的にハイブリダイズすることができる、請求項63に記載のキット。
- 前記第1のプローブが、配列番号7、8、9、10、11、および12からなる群より選択される配列を含む、請求項63に記載のキット。
- 前記第3のプライマーが、配列番号15及び16からなる群より選択される核酸を含む、請求項63に記載のキット。
- 前記第4のプライマーが、配列番号15及び16からなる群より選択される核酸を含む、請求項63に記載のキット。
- 前記第2のプローブが、配列番号14に示される該核酸を含む、請求項63に記載のキット。
- (1)増幅条件下、SCCmecカセットの右端部連結領域と特異的にハイブリダイズする核酸配列を有する第1のオリゴヌクレオチドと、
(2)増幅条件下、前記SCCmecカセットの右端部連結部位に隣接する黄色ブドウ球菌染色体DNA領域と特異的にハイブリダイズする核酸配列を有する第2のオリゴヌクレオチドと、
(3)増幅条件下、前記第1のプライマーがハイブリダイズすることのできる前記領域と右SCCmec−染色体連結部位との間にある前記SCCmecカセット領域と特異的にハイブリダイズすることのできる第1のプローブと
を含むオリゴヌクレオチド組成物。 - (4)増幅条件下、mecA核酸の第1の領域と特異的にハイブリダイズするヌクレオチド配列を有する第3のオリゴヌクレオチドと、
(5)増幅条件下、mecA核酸の第2の領域と特異的にハイブリダイズするヌクレオチド配列を有する第4のオリゴヌクレオチドと、
(6)増幅条件下、前記mecAの第1の領域と前記mecAの第2の領域との間のmecAの領域と特異的にハイブリダイズすることのできる第2のプローブと
をさらに含む、請求項74に記載のオリゴヌクレオチド組成物。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US868007P | 2007-12-21 | 2007-12-21 | |
US61/008,680 | 2007-12-21 | ||
PCT/US2008/013922 WO2009085221A2 (en) | 2007-12-21 | 2008-12-19 | Detection of methicillin-resistant staphylococcus aureus |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2014050190A Division JP2014147388A (ja) | 2007-12-21 | 2014-03-13 | メチシリン耐性黄色ブドウ球菌の検出 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2011507516A JP2011507516A (ja) | 2011-03-10 |
JP5503552B2 true JP5503552B2 (ja) | 2014-05-28 |
Family
ID=40824947
Family Applications (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2010539500A Active JP5503552B2 (ja) | 2007-12-21 | 2008-12-19 | メチシリン耐性黄色ブドウ球菌の検出 |
JP2014050190A Pending JP2014147388A (ja) | 2007-12-21 | 2014-03-13 | メチシリン耐性黄色ブドウ球菌の検出 |
JP2016018097A Active JP6427512B2 (ja) | 2007-12-21 | 2016-02-02 | メチシリン耐性黄色ブドウ球菌の検出 |
Family Applications After (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2014050190A Pending JP2014147388A (ja) | 2007-12-21 | 2014-03-13 | メチシリン耐性黄色ブドウ球菌の検出 |
JP2016018097A Active JP6427512B2 (ja) | 2007-12-21 | 2016-02-02 | メチシリン耐性黄色ブドウ球菌の検出 |
Country Status (10)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US8367337B2 (ja) |
EP (3) | EP2231869B2 (ja) |
JP (3) | JP5503552B2 (ja) |
CN (1) | CN101918593B (ja) |
AU (3) | AU2008343878B2 (ja) |
CA (2) | CA3046259C (ja) |
ES (2) | ES2425267T5 (ja) |
IL (1) | IL206499A (ja) |
WO (1) | WO2009085221A2 (ja) |
ZA (1) | ZA201005180B (ja) |
Families Citing this family (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA2348042A1 (en) | 2001-06-04 | 2002-12-04 | Ann Huletsky | Sequences for detection and identification of methicillin-resistant staphylococcus aureus |
US11834720B2 (en) * | 2005-10-11 | 2023-12-05 | Geneohm Sciences, Inc. | Sequences for detection and identification of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) of MREJ types xi to xx |
GB0605965D0 (en) | 2006-03-24 | 2006-05-03 | Univ East Anglia | Fluorescence based detection of substances |
EP2231869B2 (en) | 2007-12-21 | 2022-05-11 | Biomerieux Sa | Detection of methicillin-resistant staphylococcus aureus |
US20110200995A1 (en) * | 2009-09-04 | 2011-08-18 | Intelligent Medical Devices, Inc. | Optimized probes and primers and methods of using same for the detection, screening, isolation and sequencing of vancomycin resistance genes and vancomycin resistant enterococci |
JP5083571B2 (ja) * | 2009-12-11 | 2012-11-28 | 愛知県 | 黄色ブドウ球菌の遺伝子型別分類法およびこれに用いるプライマーセット |
US9316640B2 (en) * | 2011-11-11 | 2016-04-19 | Alere San Diego, Inc. | Devices and methods for detection of Panton-Valentine Leukocidin (PVL) |
IN2014DN05831A (ja) | 2011-12-23 | 2015-06-26 | Biomerieux Sa | |
EP2617836A1 (en) | 2012-01-23 | 2013-07-24 | Steffen Mergemeier | Method for detecting a methicillin resistant coagulase positive Staphylococcus aureus strain |
US20170260576A1 (en) * | 2012-02-24 | 2017-09-14 | Seegene, Inc. | Td probe and its uses |
CN108424972B (zh) * | 2012-04-06 | 2021-11-05 | 基因欧姆科技加拿大公司 | 用于检测和鉴定MREJ型xxi的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的序列 |
CN103146835B (zh) * | 2013-03-25 | 2015-10-28 | 华南师范大学 | 基于nasba的试纸条检测食源致病菌的方法及试剂盒 |
CN104745688A (zh) * | 2015-01-30 | 2015-07-01 | 湖北永邦医疗科技有限公司 | 一种用于检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因的引物、探针和试剂盒 |
KR101721605B1 (ko) * | 2015-06-15 | 2017-03-31 | 대한민국 | 신규한 국내형 메티실린-내성 황색포도상구균 균주 |
EP4289972A1 (en) | 2022-06-09 | 2023-12-13 | Congen Biotechnologie GmbH | Method for detecting methicillin resistant staphylococcus aureus |
Family Cites Families (42)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4213893A (en) | 1978-10-12 | 1980-07-22 | Miles Laboratories, Inc. | Flavin adenine dinucleotide-labeled conjugates for use in specific binding assays |
DE3041653A1 (de) | 1980-11-05 | 1982-06-09 | Hoechst Ag, 6000 Frankfurt | Reaktive haertbare bindemittelmischung und deren verwendung zur herstellung von ueberzuegen |
FI63596C (fi) | 1981-10-16 | 1983-07-11 | Orion Yhtymae Oy | Mikrobdiagnostiskt foerfarande som grundar sig pao skiktshybridisering av nukleinsyror och vid foerfarandet anvaenda kombinationer av reagenser |
ATE202801T1 (de) | 1983-01-10 | 2001-07-15 | Gen Probe Inc | Verfahren zum nachweis, identifizieren und quantifizieren von organismen und viren |
US4683202A (en) | 1985-03-28 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying nucleic acid sequences |
US4683195A (en) | 1986-01-30 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences |
US4965188A (en) | 1986-08-22 | 1990-10-23 | Cetus Corporation | Process for amplifying, detecting, and/or cloning nucleic acid sequences using a thermostable enzyme |
WO1986006726A1 (en) | 1985-05-15 | 1986-11-20 | Integrated Genetics, Inc. | Cytidine analogs |
US4751177A (en) | 1985-06-13 | 1988-06-14 | Amgen | Methods and kits for performing nucleic acid hybridization assays |
US4882269A (en) | 1985-12-13 | 1989-11-21 | Princeton University | Amplified hybridization assay |
CA1340807C (en) | 1988-02-24 | 1999-11-02 | Lawrence T. Malek | Nucleic acid amplification process |
US5130238A (en) | 1988-06-24 | 1992-07-14 | Cangene Corporation | Enhanced nucleic acid amplification process |
CA2020958C (en) | 1989-07-11 | 2005-01-11 | Daniel L. Kacian | Nucleic acid sequence amplification methods |
EP0731175A3 (en) | 1989-07-11 | 2004-05-26 | Gen-Probe Incorporated | Oligonucleotide probes for HIV nucleic acid |
US5766849A (en) | 1989-07-11 | 1998-06-16 | Gen-Probe Incorporated | Methods of amplifying nucleic acids using promoter-containing primer sequence |
CA2035010C (en) | 1990-01-26 | 1996-12-10 | Keith C. Backman | Method of amplifying target nucleic acids applicable to both polymerase and ligase chain reactions |
US5210015A (en) | 1990-08-06 | 1993-05-11 | Hoffman-La Roche Inc. | Homogeneous assay system using the nuclease activity of a nucleic acid polymerase |
ZA936016B (en) | 1992-08-24 | 1994-03-10 | Akzo Nv | Method for nucleic acid amplification |
US6379897B1 (en) | 2000-11-09 | 2002-04-30 | Nanogen, Inc. | Methods for gene expression monitoring on electronic microarrays |
US5702895A (en) * | 1995-01-19 | 1997-12-30 | Wakunaga Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method and kit for detecting methicillin-resistant Staphylococcus aureus |
JP3957338B2 (ja) * | 1996-02-23 | 2007-08-15 | 株式会社カイノス | 診断薬 |
US5994076A (en) | 1997-05-21 | 1999-11-30 | Clontech Laboratories, Inc. | Methods of assaying differential expression |
ZA989950B (en) | 1997-11-17 | 1999-05-04 | Akzo Nobel Nv | Transcription based amplification of double stranded DNA targets |
JP2000316574A (ja) | 1999-03-10 | 2000-11-21 | Matsushita Seiko Co Ltd | Mrsaが産生する毒素タンパクの検出方法およびモノクローナル抗体とその断片およびmrsaが産生する毒素タンパク検出用キットおよびモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマ |
ATE352640T1 (de) | 2001-03-15 | 2007-02-15 | Jacques Schrenzel | Nachweis von methicillin-resistenten staphylococcus aureus bakterien (mrsa) |
CA2348042A1 (en) * | 2001-06-04 | 2002-12-04 | Ann Huletsky | Sequences for detection and identification of methicillin-resistant staphylococcus aureus |
DE60210621T2 (de) | 2001-07-19 | 2007-03-08 | Infectio Diagnostic (I.D.I.) Inc., Sainte-Foy | Universelle methode und zusammensetzung zur schnellen lysierung von zellen zur freisetzung von nukleinsäuren und ihre detektion |
DE60304481T8 (de) | 2003-11-07 | 2007-03-08 | Federal Rep. of Germany repr.by the Ministry of Health & Soc.Security, the latter repr. by the Pres. of the Robert Koch Inst. | Verfahren zur Identifizierung von Methicilin resistente Staphylococcus aureus (MRSA) |
JP2008507296A (ja) | 2004-07-26 | 2008-03-13 | ナノスフェアー インコーポレイテッド | 混合培養物中でメチシリン耐性黄色ブドウ球菌とメチシリン感受性黄色ブドウ球菌とを区別する方法 |
JP2006271370A (ja) | 2005-03-02 | 2006-10-12 | Kitasato Inst:The | 黄色ブドウ球菌とメチシリン耐性菌の検出方法及びキット |
CA2606253A1 (en) * | 2005-04-21 | 2006-10-26 | Uti Limited Partnership | Pcr for mrsa sccmec typing |
WO2007096702A2 (en) * | 2005-07-25 | 2007-08-30 | Asm Scientific, Inc. | Methods for multiplexing recombinase polymerase amplification |
CA2621622A1 (en) * | 2005-09-05 | 2007-03-15 | Bio-Rad Pasteur | Use of both rd9 and is6110 as nucleic acid targets for the diagnosis of tuberculosis, and provision of multiplex-compliant is6110 and rd9 targets |
US7838221B2 (en) * | 2005-10-11 | 2010-11-23 | Geneohm Sciences, Inc. | Sequences for detection and identification of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) |
US11834720B2 (en) | 2005-10-11 | 2023-12-05 | Geneohm Sciences, Inc. | Sequences for detection and identification of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) of MREJ types xi to xx |
AU2006315715A1 (en) * | 2005-11-10 | 2007-05-24 | Creighton University | Identification of USA300 community-associated methicillin-resistant staphylococcus aureus |
EP1903116A1 (en) | 2006-09-01 | 2008-03-26 | Bundesrepublik Deutschland vertr. d. d. Bundes- ministerium für Gesundheit und Soziale Sicherung letztvertr. d.d. Präs. d. Robert Koch Instituts | Supplementation of sequence based typing of methicillin-resistant S. aureus (MRSA) by PCR-based grouping of SCCmec-elements; sequencing directly from the multiplex-PCR |
WO2008080620A1 (en) | 2006-12-29 | 2008-07-10 | Roche Diagnostics Gmbh | Methods for detecting methicillin-resistant s. aureus as well as primers, probes and kits for the same |
JP2010524454A (ja) * | 2007-04-19 | 2010-07-22 | モレキュラー ディテクション インコーポレーテッド | 抗生物質耐性細菌の検出および分析のための方法、組成物、およびキット |
US7888075B2 (en) | 2007-07-31 | 2011-02-15 | Quest Diagnostics Investments Incorporated | Detection of methicillin-resistant and methicillin-sensitive Staphylococcus aureus in biological samples |
EP2231869B2 (en) | 2007-12-21 | 2022-05-11 | Biomerieux Sa | Detection of methicillin-resistant staphylococcus aureus |
FI121884B (fi) | 2008-01-17 | 2011-05-31 | Mobidiag Oy | Menetelmä metisilliiniresistenttien stafylokokkien havaitsemiseksi ja tunnistamiseksi sekä menetelmään tarkoitettu koetin ja testipakkaus |
-
2008
- 2008-12-19 EP EP08868000.4A patent/EP2231869B2/en active Active
- 2008-12-19 CA CA3046259A patent/CA3046259C/en active Active
- 2008-12-19 US US12/339,471 patent/US8367337B2/en active Active
- 2008-12-19 WO PCT/US2008/013922 patent/WO2009085221A2/en active Application Filing
- 2008-12-19 ES ES08868000T patent/ES2425267T5/es active Active
- 2008-12-19 ES ES13169580.1T patent/ES2686677T3/es active Active
- 2008-12-19 EP EP18176851.6A patent/EP3434785A1/en not_active Withdrawn
- 2008-12-19 AU AU2008343878A patent/AU2008343878B2/en active Active
- 2008-12-19 EP EP13169580.1A patent/EP2657351B1/en active Active
- 2008-12-19 CN CN200880123825.5A patent/CN101918593B/zh active Active
- 2008-12-19 CA CA2709356A patent/CA2709356C/en active Active
- 2008-12-19 JP JP2010539500A patent/JP5503552B2/ja active Active
-
2010
- 2010-06-20 IL IL206499A patent/IL206499A/en active IP Right Grant
- 2010-07-20 ZA ZA2010/05180A patent/ZA201005180B/en unknown
-
2012
- 2012-12-28 US US13/729,529 patent/US9273360B2/en active Active
-
2014
- 2014-03-13 JP JP2014050190A patent/JP2014147388A/ja active Pending
- 2014-07-03 AU AU2014203649A patent/AU2014203649A1/en not_active Abandoned
-
2016
- 2016-02-02 JP JP2016018097A patent/JP6427512B2/ja active Active
- 2016-02-23 US US15/051,255 patent/US20160177379A1/en not_active Abandoned
- 2016-12-19 AU AU2016277561A patent/AU2016277561C1/en active Active
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5503552B2 (ja) | メチシリン耐性黄色ブドウ球菌の検出 | |
ES2869285T3 (es) | Secuencias para la detección e identificación de Staphylococcus aureus resistente a meticilina (SARM) con MREJ de tipo xxi | |
AU2018256562B2 (en) | Detection of MecA Variant Strains of Methicillin-Resistant Staphylococcus Aureus | |
EP4276196A1 (en) | Decoy-oligonucleotides in nucleic acid detection methods | |
JPWO2009099037A1 (ja) | クラミドフィラ・キャビエ検出用プライマー及びプローブ、並びにこれを用いたクラミドフィラ・キャビエの検出方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20111205 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20130712 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20131015 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20140114 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20140212 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20140217 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20140314 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5503552 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
S531 | Written request for registration of change of domicile |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313531 |
|
S533 | Written request for registration of change of name |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313533 |
|
R371 | Transfer withdrawn |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R371 |
|
S631 | Written request for registration of reclamation of domicile |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313631 |
|
S633 | Written request for registration of reclamation of name |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313633 |
|
S634 | Written request for registration of reclamation of nationality |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313634 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |