JP5424600B2

JP5424600B2 - アドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ分解剤及び該アドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ分解剤を含有してなる化粧料

Info

Publication number: JP5424600B2
Application number: JP2008237059A
Authority: JP
Inventors: 明弘多田; 晶子金丸
Original assignee: Pola Chemical Industries Inc
Current assignee: Pola Chemical Industries Inc
Priority date: 2008-09-16
Filing date: 2008-09-16
Publication date: 2014-02-26
Anticipated expiration: 2028-09-16
Also published as: JP2010070468A

Description

本発明は、アドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ分解作用を有する化合物、及び、該化合物からなるアドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ分解剤、該アドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ分解剤を含有してなる化粧料に関する。

老化は人間が長生きすれば必ず出会う現象であり、その初期的な兆候は３０代或いは４０代に既に始まっていると言われる。老化により皮膚は弾性を喪失し、色白であった肌は黒ずんでその見た目は決して好ましいものとは言えない。人は誰しも美しくありたいと思うのが心情であり、この様な老化に抗う手段の開発が望まれていると言える。

老化について、皮膚の老化に限局しても、そのメカニズムは数多くのものが提唱されており、それぞれのメカニズムに基づいた抗老化手段が考案されている。例えば、光を累積的に照射して光老化を誘導させる方法で実験モデルを構築し、これに抗う成分をスクリーニングする方法で得られた結果物（例えば、特許文献１、特許文献２を参照）などが例示できる。この様な光老化においては、真皮コラーゲン線維の断裂、真皮コラーゲン線維束構造の崩壊等が誘導され、真皮の弾性、水分保持能などが損失することが知られている。この様な真皮コラーゲン線維束を正常化する成分を皮膚外用剤に配合する方法も一つの有力な抗老化皮膚外用剤の開発のストリームとなっている（例えば、特許文献３を参照）。これ以外に近年注目を集めている老化メカニズムに、メイラード反応とそれに引き続いて起こるアドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ（以下、ＡＧＥｓと略す場合がある。）の生成、蓄積があげられる。この様な反応は、皮膚のタンパク質を酸化的に変性させるため、本来の皮膚タンパクの機能を奪うことになり、これが老化の諸状態へ反映されるとする機序である。この様なＡＧＥｓの生成反応は不可逆反応であり、ＡＧＥｓが一度生成すると、後は蓄積するのみであると言われている。ＡＧＥｓの生成抑制に関しては多種の成分が報告されているが、ＡＧＥｓの分解に関しては、わずかに、オリーブの抽出物、ユキノシタの抽出物、ヨモギ抽出物が知られているのみである（例えば、特許文献４、特許文献５、特許文献６を参照）。これらの抽出物より、ＡＧＥｓ分解作用を有する有効成分を単離した報告は今のところ存しない。天然物の抽出物である以上、有効成分の特定が為し得ないことには、そのＡＧＥｓ活性を定量的に保持することは非常に困難の伴うことと言わざるを得ない。ＡＧＥｓはメイラード反応の結果生成される生成物であるが、メイラード反応は、生体由来のアミノ基とカルボニル基が非触媒的縮合反応によりシッフの塩基を生成し、このアゾメチン結合がアマドリ転移をする前期反応と、このアマドリ転移生成物が脱水、縮合、環化、架橋形成などの複合反応を経て、褐色、蛍光、不溶化して後期生成物に至る後期段階とに分かれ、ＡＧＥｓはこの最終生成物である。このＡＧＥｓは通常は分解しがたいものであるが、ＡＧＥｓ中に存するα−ジケトン構造のケトン間のＣ−Ｃ結合を切断することにより、分解できることが知られている（例えば、非特許文献１を参照）。しかしながら、この様な切断活性のある成分としては、Ｎ−フェナシルチアゾリウムブロミドが知られている。しかしながら、安全性等の問題でかかる化合物をＡＧＥｓ分解の目的で化粧料に含有させることは為し得ない。

特開２００５−２２００４３号公報特開２００４−５１５８０号公報特開２００５−５３７９８号公報特開２００１−１２２７５８号公報特開２００１−１０８６２２号公報特開２００７−１６１６６３号公報 Sara Vasan, et.al.,Nature,382(1996),275-278

本発明は、この様な状況下為されたものであり、キク科ヨモギの植物体の抽出物において、ＡＧＥｓ分解作用を担う有効成分の本体を明らかにし、以て、ＡＧＥｓ分解作用を安定に維持させることを課題とする。

この様な状況に鑑みて、本発明者らは、キク科ヨモギの植物体の抽出物において、ＡＧＥｓ分解作用を担う有効成分を求めて、鋭意努力を重ねた結果、次の性状を有する化合物が、ＡＧＥｓ分解作用の本体であることを見出し、発明を完成させるに至った。即ち、本発明は以下に示すとおりである。
＜１＞次の性状を有する化合物、乃至は、前記化合物より誘導される誘導体であって、前記化合物と等価なアドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ分解作用を有する誘導体。
（１）λmaxを４０５〜４１５ｎｍと、６６０〜６７０ｎｍとに有する。
（２）図１に示す¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルを有する。
（３）図２に示す¹³Ｃ−ＮＭＲスペクトルを有する。
（４）以下の条件でのＨＰＬＣ分析において、リテンションタイム１５分前後にシングルピークを示す。
移動相：９０％アセトニトリル
カラム：ＯＤＳ４．６×２５０ｍｍ
流速：１ｍｌ／ｍｉｎ．
温度：４０℃
検知：紫外部２１０ｎｍ
（５）化学組成式はC₃₄H₄₀O₉であり、質量分析スペクトルは５９３（Ｍ＋Ｈ）
＜２＞＜１＞に記載の化合物は、キク科ヨモギの植物体を抽出し、分画、精製して得られたものであることを特徴とする、＜１＞に記載の化合物乃至はその誘導体。
＜３＞＜１＞又は＜２＞に記載の化合物乃至はその誘導体からなるアドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ分解剤。
＜４＞キク科ヨモギ乃至はカワラヨモギの植物体を極性溶媒で抽出し、抽出物を、酢酸エチルと水で液液抽出し、酢酸エチル相を取り、これを濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて、クロロホルム・メタノール混液系で分画し、得られた分画のアドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ分解作用の有無を指標に、アドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ分解作用を有し、薄層クロマトグラフにおけるスポットが同一である分画を集め、以下の性状を有することを確認することを特徴とする、＜３＞に記載のアドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ分解剤の製造方法。
（性状）
（１）λmaxを４０５〜４１５ｎｍと、６６０〜６７０ｎｍとに有する。
（２）図１に示す¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルを有する。
（３）図２に示す¹³Ｃ−ＮＭＲスペクトルを有する。
（４）以下の条件でのＨＰＬＣ分析において、リテンションタイム１５分前後にシングルピークを示す。
移動相：９０％アセトニトリル
カラム：ＯＤＳ４．６×２５０ｍｍ
流速：１ｍｌ／ｍｉｎ．
温度：４０℃
検知：紫外部２１０ｎｍ
（５）化学組成式はC₃₄H₄₀O₉であり、質量分析スペクトルは５９３（Ｍ＋Ｈ）
＜５＞＜３＞に記載のアドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ分解剤を含有してなる化粧料。

本発明によれば、キク科ヨモギの植物体の抽出物において、ＡＧＥｓ分解作用を担う有効成分の本体を明らかにし、以て、ＡＧＥｓ分解作用を安定に維持させることができる。

＜１＞本発明の化合物
本発明の化合物は次に示す性状を有することを特徴とする。
（性状）
（１）λmaxを４０５〜４１５ｎｍと、６６０〜６７０ｎｍとに有する。
（２）図１に示す¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルを有する。
（３）図２に示す¹³Ｃ−ＮＭＲスペクトルを有する。
（４）以下の条件でのＨＰＬＣ分析において、リテンションタイム１５分前後にシングルピークを示す。
本発明の化合物の紫外・可視吸収スペクトルは図４に示す。この図より、４０５〜４１５ｎｍと、６６０〜６７０ｎｍとにλmaxが存する特徴が明確に判別できる。本発明の化合物を特定する場合、かかる紫外・可視部吸収特性は非常に有利である。即ち、多波長の検出器を備えたＨＰＬＣを用いて、２１０ｎｍの吸収で分析し、ピークについて４０５〜４１５ｎｍと、６６０〜６７０ｎｍとの吸収を確認し、同様に強い吸収が認められた場合には、本願発明の化合物である蓋然性が非常に高い。この意味で有力な確認手段となる。本願発明の化合物は、極性溶媒抽出物の非極性部分に存在する。この為、溶媒で抽出し、抽出溶媒を減圧濃縮などで除去した後に酢酸エチルと水で分液し、酢酸エチル相を採取することにより、濃縮することが出来る。このものをシリカゲルカラムクロマトグラフィーなどを用いて、クロロホルム／メタノール混液系で分画精製することにより単離することが出来る。単離したかどうかについては、以下の条件のＨＰＬＣ分析でシングルピーク（リテンションタイム１５分前後）であるか否かを判別することにより特定することが出来る。図３に分析例を示す。この場合のリテンションタイムは１４．７分である。
（ＨＰＬＣ条件）
移動相：９０％アセトニトリル
カラム：ＯＤＳ４．６×２５０ｍｍ
流速：１ｍｌ／ｍｉｎ．
温度：４０℃
検知：紫外部２１０ｎｍ
（５）化学組成式はC₃₄H₄₀O₉であり、質量分析スペクトルは５９３（Ｍ＋Ｈ）

かかる本発明の化合物は、キク科ヨモギ乃至はキク科カワラヨモギの植物体を極性溶媒、例えば、含水していても良い有機溶媒、例えば、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、ｎ−ブタノール、プロピレングリコール、１，３−ブタンジオールなどのアルコール類、アセトン、メチルエチルケトンなどのケトン類、ジエチルエーテル、イソプロピルエーテル、テトラヒドロフランなどのエーテル類、クロロホルム、ジクロロメタンなどのハロゲン化炭化水素、酢酸エチル、蟻酸メチルなどのカルボン酸エステル類、アセトニトリルなどのニトリル類などで抽出することにより、前記化合物を含む抽出物を得ることが出来、これを前記の如く、液液抽出やカラムクロマトグラフィーなどの精製手段により単離精製することが出来る。抽出溶媒としては、含水アルコールが特に好ましく、７０〜９０％エタノール水溶液を用いることが特に好ましい。抽出に用いる植物体の部位は、地上部を用いることが好ましい。植物体は、抽出に先立って、細切乃至は乾燥して粉砕するなど、細片化処置を行うことが好ましい。抽出は、室温であれば数日間、沸点付近の温度であれば数時間植物体乃至はその加工物を溶媒に浸漬することにより為しうる。

斯くして得られた化合物は、シリカゲルを担体とする薄層クロマトグラフィー（展開液、クロロホルム：メタノール＝９５：５〜８：２）においてシングルスポットを呈し、ＡＧＥｓ分解活性を示す。ＡＧＥｓ分解活性は、簡易的にはα−ジケトンの切断活性の強さを指標とし、定量化することが出来る。即ち、１−フェニル−１，２−プロパンジオンとともにインキュベートし、切断によって生じる安息香酸を吸光度で定量し、安息香酸の生成量が多いほどＡＧＥｓ分解能が高いと判別できる。これよりｖｉｖｏに近い評価としては、実際にグルコースと牛血清アルブミンとをインキュベートして作成したＡＧＥｓを分解せしめ、分解量を定量し、かかる分解量を指標にＡＧＥｓ分解能を定量する方法も存する。本発明の化合物はこの様な方法でＡＧＥｓ分解能を定量した場合、α−ジケトンの分解において４０〜６０％程度の分解率を呈し、牛アルブミンＡＧＥｓに対しては、１０^−３質量％で６５〜８０％程度の分解率を呈する。この性質を利用して本発明の化合物はＡＧＥｓ分解剤として化粧料等に配合し、光照射などで生じたＡＧＥｓを速やかに分解し、この蓄積を防ぐことが出来る。以下に、これらの評価方法の手順を示す。

＜α−ジケトンのＣ−Ｃ結合切断能の測定＞
２２ｍＭ１−ｐｈｅｎｙｌ−１，２−ｐｒｏｐａｎｅｄｉｏｎ／ＭｅＯＨ＋０．１Ｍリン酸緩衝液（ＰＨ７．４）１ｍｌと、各濃度の試料１ｍｌを混合し、３７℃で１０時間反応させ、安息香酸の量をＨＰＬＣにて定量する。
（ＨＰＬＣ条件）
分析条件検出器：紫外吸光光度計（測定波長：２６０ｎｍ）
カラム：東ソーＴＳＫ−ＯＤＳ８０Ｔｓカラム温度：室温
移動層：氷酢酸２ｇ／アセトニトリル５００ｍｌ＋エデト酸二ナトリウム溶液（１→２５０）５００ｍｌ流量：１ｍｌ／ｍｉｎ

＜グルコース−牛血清アルブミンＡＧＥｓ分解能の測定＞
用いる材料は以下の通り。
ＡＧＥ−ＢＳＡ：グルコースとＢＳＡを３７℃で１２週間以上インキュベートし、
ＰＤ−１０ｃｏｌｕｍｎｓ（ＡｍｅｒｓｈａｍＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ１７−０８５１−０１）にて余分なｇｌｕｃｏｓｅを除いたもの
１次抗体：Ａｎｔｉ−Ａｌｂｕｍｉｎ，ＢｏｖｉｎｅＳｅｒｕｍ，
Ｒａｂｂｉｔ−ＰｏｌｙＲＯＣＫＬＡＮＤ
２０１−４１３３１／２００００
２次抗体：Ｇｏａｔａｎｔｉ−ｒａｂｂｉｔＩＧｇｈｏｒｓｅｒａｄｉｓｈ
ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅｃｏｎｊｕｇａｔｅＢｉｏＲＡＤ
１７０−６５１５１／１００００
基質：ＴＭＢｓｏｌｕｔｉｏｎＷａｋｏ５４６−０１９１１
（手順）
ｔｙｐｅＩコラーゲンでコートした９６穴マイクロプレート（ＢｉｏＣｏａｔ３５４４０７）に１０μｇ／ｍｌのＡＧＥ−ＢＳＡを１００μｌ加え、（１．０μｇＡＧＥ−ＢＳＡ／ｗｅｌｌ）３７℃にて４時間静置した後、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０／ＰＢＳ（−）にて３回洗浄（マイクロミキサー上で室温・３分間振とう）し、ＰＢＳ（−）に溶解した各濃度の試料を１００μｌを加え、３７℃で１０時間以上反応させる。その後、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０／ＰＢＳ（−）にて３回洗浄し、１次抗体を各ｗｅｌｌに１００μｌ／ｗｅｌｌ加え、室温で３０分間静置する。０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０／ＰＢＳ（−）にて３回洗浄し、２次抗体を１００μｌ／ｗｅｌｌ入れ、室温３０分間静置する。０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０／ＰＢＳ（−）にて３回洗浄し、ＴＭＢを１００μｌ／ｗｅｌｌ加え、室温１５分反応させる。１ＮＨＣｌを１００μｌ／ｗｅｌｌ入れ、反応を止め、４５０ｎｍの吸光度を測定する。ＡＧＥｓの量を変え、検量線を引き、この検量線より残存ＡＧＥｓ量を定量した。残存ＡＧＥｓを添加したＡＧＥｓより減じ、添加したＡＧＥｓで除し、１００を乗じてＡＧＥｓ分解率を算出した。

本発明の化合物は、図１、図２のＮＭＲデータより、水酸基等の反応性置換基を有すると考えられ、かかる反応性基を利用して誘導体へと導くことが出来る。かかる誘導体が本発明の化合物の誘導体である。本発明の誘導体としては、例えば、メチルアイオダイドなどのハロゲン化炭化水素を用いてアルキル化したアルキルエーテル体、アルキルエステル体、アシルハライドを反応させて得られるアシル化体、モノエタノールアミンなどを反応させたアミド体などが好適に例示できる。前記の評価法においてＡＧＥｓ分解能を有する限り、これらの誘導体は本発明の技術的範囲に属する。

＜２＞本発明の化粧料
本発明の化粧料は、前記本発明の化合物を含有することを特徴とする。かかる構成を採用することにより、光照射などで生じたＡＧＥｓを速やかに分解し、この蓄積を防ぐことが出来る。この様な効果を奏するためには、前記化合物濃度が少なくとも１０^−５質量％程度になるように含有させることが好ましい。この様な要件を備える限りにおいて、その含有の形態は問わない。即ち、化合物として単離して含有させても良いし、抽出物の分画濃縮物の形態で含有させても良い。好ましい抽出物の分画濃縮形態としては、７０〜９０％エタノール水溶液で抽出し、これに水を加えて、エタノール濃度を６０％以下に落とし、−５〜２０℃の冷暗所で２〜１０日熟成させて澱引きして澱を用いる方法が好ましく例示できる。

本発明の前記化合物はＡＧＥｓ分解作用を有することから、これを含有する、本発明の化粧料にはＡＧＥｓの生成を抑制作用を有する物質との併用が特に好ましい。ＡＧＥｓ生成抑制作用を有する物質としては、例えば、ユキノシタ、ライチ、スギナ、ドアーフマートル等の生薬の抽出物が好ましく例示できる（例えば、特開２００１−１３１０４４号公報を参照）。かかる抽出物の含有量は０．００１〜０．１質量％が好ましい。この様な形態を取ることにより、既に蓄積されているＡＧＥｓを減ずることも出来る。

本発明の化粧料は、本発明のＡＧＥｓ分解剤である前記化合物乃至はその誘導体以外に、通常化粧料で使用される任意成分を含有させることができる。この様な任意成分の含有においては、常法に従って行えばよい。この様な任意成分としては、例えば、マカデミアナッツ油、アボガド油、トウモロコシ油、オリーブ油、ナタネ油、ゴマ油、ヒマシ油、サフラワー油、綿実油、ホホバ油、ヤシ油、パーム油、液状ラノリン、硬化ヤシ油、硬化油、モクロウ、硬化ヒマシ油、ミツロウ、キャンデリラロウ、カルナウバロウ、イボタロウ、ラノリン、還元ラノリン、硬質ラノリン、ホホバロウ等のオイル、ワックス類；流動パラフィン、スクワラン、プリスタン、オゾケライト、パラフィン、セレシン、ワセリン、マイクロクリスタリンワックス等の炭化水素類；オレイン酸、イソステアリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘン酸、ウンデシレン酸等の高級脂肪酸類；セチルアルコール、ステアリルアルコール、イソステアリルアルコール、ベヘニルアルコール、オクチルドデカノール、ミリスチルアルコール、セトステアリルアルコール等の高級アルコール等；イソオクタン酸セチル、ミリスチン酸イソプロピル、イソステアリン酸ヘキシルデシル、アジピン酸ジイソプロピル、セバチン酸ジ−２−エチルヘキシル、乳酸セチル、リンゴ酸ジイソステアリル、ジ−２−エチルヘキサン酸エチレングリコール、ジカプリン酸ネオペンチルグリコール、ジ−２−ヘプチルウンデカン酸グリセリン、トリ−２−エチルヘキサン酸グリセリン、トリ−２−エチルヘキサン酸トリメチロールプロパン、トリイソステアリン酸トリメチロールプロパン、テトラ−２−エチルヘキサン酸ペンタンエリトリット等の合成エステル油類；ジメチルポリシロキサン、メチルフェニルポリシロキサン、ジフェニルポリシロキサン等の鎖状ポリシロキサン；オクタメチルシクロテトラシロキサン、デカメチルシクロペンタシロキサン、ドデカメチルシクロヘキサンシロキサン等の環状ポリシロキサン；アミノ変性ポリシロキサン、ポリエーテル変性ポリシロキサン、アルキル変性ポリシロキサン、フッ素変性ポリシロキサン等の変性ポリシロキサン等のシリコーン油等の油剤類；脂肪酸セッケン（ラウリン酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム等）、ラウリル硫酸カリウム、アルキル硫酸トリエタノールアミンエーテル等のアニオン界面活性剤類；塩化ステアリルトリメチルアンモニウム、塩化ベンザルコニウム、ラウリルアミンオキサイド等のカチオン界面活性剤類；イミダゾリン系両性界面活性剤（２−ココイル−２−イミダゾリニウムヒドロキサイド−１−カルボキシエチロキシ２ナトリウム塩等）、ベタイン系界面活性剤（アルキルベタイン、アミドベタイン、スルホベタイン等）、アシルメチルタウリン等の両性界面活性剤類；ソルビタン脂肪酸エステル類（ソルビタンモノステアレート、セスキオレイン酸ソルビタン等）、グリセリン脂肪酸類（モノステアリン酸グリセリン等）、プロピレングリコール脂肪酸エステル類（モノステアリン酸プロピレングリコール等）、硬化ヒマシ油誘導体、グリセリンアルキルエーテル、ＰＯＥソルビタン脂肪酸エステル類（ＰＯＥソルビタンモノオレエート、モノステアリン酸ポリオキエチレンソルビタン等）、ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル類（ＰＯＥ−ソルビットモノラウレート等）、ＰＯＥグリセリン脂肪酸エステル類（ＰＯＥ−グリセリンモノイソステアレート等）、ＰＯＥ脂肪酸エステル類（ポリエチレングリコールモノオレート、ＰＯＥジステアレート等）、ＰＯＥアルキルエーテル類（ＰＯＥ２−オクチルドデシルエーテル等）、ＰＯＥアルキルフェニルエーテル類（ＰＯＥノニルフェニルエーテル等）、プルロニック型類、ＰＯＥ・ＰＯＰアルキルエーテル類（ＰＯＥ・ＰＯＰ２−デシルテトラデシルエーテル等）、テトロニック類、ＰＯＥヒマシ油・硬化ヒマシ油誘導体（ＰＯＥヒマシ油、ＰＯＥ硬化ヒマシ油等）、ショ糖脂肪酸エステル、アルキルグルコシド等の非イオン界面活性剤類；ポリエチレングリコール、グリセリン、１，３−ブチレングリコール、エリスリトール、ソルビトール、キシリトール、マルチトール、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、ジグリセリン、イソプレングリコール、１，２−ペンタンジオール、２，４−ヘキサンジオール、１，２−ヘキサンジオール、１，２−オクタンジオール等の多価アルコール類；ピロリドンカルボン酸ナトリウム、乳酸、乳酸ナトリウム等の保湿成分類；表面を処理されていても良い、マイカ、タルク、カオリン、合成雲母、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、無水ケイ酸（シリカ）、酸化アルミニウム、硫酸バリウム等の粉体類;表面を処理されていても良い、ベンガラ、黄酸化鉄、黒酸化鉄、酸化コバルト、群青、紺青、酸化チタン、酸化亜鉛の無機顔料類；表面を処理されていても良い、雲母チタン、魚燐箔、オキシ塩化ビスマス等のパール剤類；レーキ化されていても良い赤色２０２号、赤色２２８号、赤色２２６号、黄色４号、青色４０４号、黄色５号、赤色５０５号、赤色２３０号、赤色２２３号、橙色２０１号、赤色２１３号、黄色２０４号、黄色２０３号、青色１号、緑色２０１号、紫色２０１号、赤色２０４号等の有機色素類；ポリエチレン末、ポリメタクリル酸メチル、ナイロン粉末、オルガノポリシロキサンエラストマー等の有機粉体類；パラアミノ安息香酸系紫外線吸収剤；アントラニル酸系紫外線吸収剤；サリチル酸系紫外線吸収剤；桂皮酸系紫外線吸収剤；ベンゾフェノン系紫外線吸収剤；糖系紫外線吸収剤；２−（２’−ヒドロキシ−５’−ｔ−オクチルフェニル)ベンゾトリアゾール、４−メトキシ−４’−ｔ−ブチルジベンゾイルメタン等の紫外線吸収剤類；エタノール、イソプロパノール等の低級アルコール類；ビタミンＡ又はその誘導体、ビタミンＢ6塩酸塩、ビタミンＢ6トリパルミテート、ビタミンＢ6ジオクタノエート、ビタミンＢ2又はその誘導体、ビタミンＢ12、ビタミンＢ15又はその誘導体等のビタミンＢ類；α−トコフェロール、β−トコフェロール、γ−トコフェロール、ビタミンＥアセテート等のビタミンＥ類、ビタミンＤ類、ビタミンＨ、パントテン酸、パンテチン、ピロロキノリンキノン等のビタミン類等；フェノキシエタノール等の抗菌剤などが好ましく例示できる。

本発明の化粧料は前記の成分を常法に従って処理することにより製造することが出来る。

以下に、実施例を挙げて、本発明について更に詳細に説明を加える。

＜製造例１＞
キク科ヨモギ属ヨモギの全草の乾燥物１００ｇを、細切した後、５００ｍｌのメタノールを加えて３時間、加熱還流し、冷却後濾過にて不溶物を取り除いた後、減圧濃縮し、ついで凍結乾燥し、抽出物１を得た。しかる後に、抽出物１に２００ｍｌの水と２００ｍｌの酢酸エチルを加え、液液抽出を行い、酢酸エチル相をとり、減圧濃縮し、分画１を得た。分画１を減圧濃縮した後、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにて分画精製した。即ち、シリカゲルをクロロホルムで濡らし、カラムに充填し、クロロホルムに溶解させた分画１の濃縮物をチャージし、クロロホルム、１％メタノール含有クロロホルム、５％メタノール含有クロロホルム、１０％メタノール含有クロロホルム次いで１５％メタノール含有クロロホルムを５０ｍｌ流し、流出分を減圧濃縮した。これらの分画を順に分画２、分画３、分画４、分画５、分画６とした。分画１〜６についてα−ジケトンの切断活性を調べたところ、分画３が最も高く４８％であった。分画３を更にクロロホルム・メタノール混液系を溶出溶媒とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーで４回精製し（１回目クロロホルム：メタノール＝１００：０→１：１、２回目クロロホルム：メタノール＝１００：２→９：１、３回目クロロホルム：メタノール＝１００：５→８：２、４回目クロロホルム：メタノール＝１００：０→１００：５）、シリカゲル薄層クロマトグラフィー（展開溶媒クロロホルム：メタノール＝９５：５）で、５０％硫酸水溶液焼付での呈色でシングルスポットであるアモルファスの分画７を得た。このもののＮＭＲを図１、図２に示す。ＨＰＬＣ（条件は下記の通り）でのチャートを図３に示す。又、紫外・可視部吸収スペクトルは図４に、質量分析スペクトルを図５に示す。これらの結果より、構造そのものは不明であるものの、分画７は単一物質であることが推測される。

＜ＡＧＥｓ分解作用＞
００１２に記載のグルコース−アルブミンＡＧＥｓ分解スクリーニングの手技に則って、実施例１の分画７の種々の濃度のＡＧＥｓ分解作用を測定した。結果をグラフとして図６に示す。これより、分画７の本発明の化合物が１０^-5質量％存在すれば、その有効性を発現することが判る。

＜製造例＞
キク科ヨモギ属ヨモギの全草の乾燥物１００ｇを、細切した後、５００ｍｌの８０％エタノール水溶液を加えて１週間室温で浸漬し、これに水を加えて、アルコール濃度を４０％に落とした。これを５℃の恒温室で１週間熟成し、生じた澱を濾取し、五酸化燐デシケーターで、減圧乾燥させてアモルファスを得た。このものの前記化合物の含有率は１．２質量％であった。

＜配合例＞
下記に示す処方に従って、本発明の化粧料を作成した。即ち、イ、ロ、ハ、ニの成分をそれぞれ８０℃に加温し、攪拌可溶化し、攪拌下徐々にイにロを加えて乳化し、次いでハを加えて中和し、ニを加えて、速やかに攪拌冷却し、本発明の化粧料である乳液（化粧料１）を得た。

実施例４と同様に本発明の化粧料２を作成した。

実施例４と同様に本発明の化粧料３を作成した。

＊１０％１，３−ブタンジオールで抽出し、不溶分を濾過で除去したもの。

＜使用テスト＞
顔のくすみに悩むパネラー１名を用いて、半顔には化粧料１、残る半顔には化粧料３を朝晩２回１４日間連続して塗布する試験を行い、試験前と試験終了後の写真からくすみの改善度合いを観察したところ、化粧料１、３ともに著しい改善が見られ、その程度は化粧料３の方が有意に改善度合いが高かった。

本発明は化粧料に応用できる。

分画７の化合物の^１Ｈ−ＮＭＲを示す図である。分画７の化合物の^１３Ｃ−ＮＭＲを示す図である。分画７の化合物のＨＰＬＣチャートを示す図である。分画７の化合物の紫外・可視部吸収スペクトルを示す図である。分画７の化合物の質量分析スペクトルを示す図である。実施例２の結果を示す図である。

Claims

次の性状を有する化合物。
（１）λmaxを４０５〜４１５ｎｍと、６６０〜６７０ｎｍとに有する。
（２）図１に示す¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルを有する。
（３）図２に示す¹³Ｃ−ＮＭＲスペクトルを有する。
（４）以下の条件でのＨＰＬＣ分析において、リテンションタイム１５分前後にシングルピークを示す。
移動相：９０％アセトニトリル
カラム：ＯＤＳ４．６×２５０ｍｍ
流速：１ｍｌ／ｍｉｎ．
温度：４０℃
検知：紫外部２１０ｎｍ
（５）化学組成式はC₃₄H₄₀O₉であり、質量分析スペクトルは５９３（Ｍ＋Ｈ）
キク科ヨモギの植物体を抽出する工程、
シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて、クロロホルム・メタノール混液系で分画する工程、および、
得られた分画から前記化合物を単離する工程、
を含む方法によって得られる、請求項１に記載の化合物。
請求項１又は２に記載の化合物からなるアドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ分解剤。
キク科ヨモギ又はカワラヨモギの植物体を極性溶媒で抽出し、抽出物を、酢酸エチルと水で液液抽出し、酢酸エチル相を取り、これを濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて、クロロホルム・メタノール混液系で分画し、得られた分画のアドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ分解作用の有無を指標に、アドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ分解作用を有し、薄層クロマトグラフにおけるスポットが同一である分画を集め、以下の性状を有することを確認することを特徴とする、請求項３に記載のアドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ分解剤の製造方法。
（性状）
（１）λmaxを４０５〜４１５ｎｍと、６６０〜６７０ｎｍとに有する。
（２）図１に示す¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルを有する。
（３）図２に示す¹³Ｃ−ＮＭＲスペクトルを有する。
（４）以下の条件でのＨＰＬＣ分析において、リテンションタイム１５分前後にシングルピークを示す。
移動相：９０％アセトニトリル
カラム：ＯＤＳ４．６×２５０ｍｍ
流速：１ｍｌ／ｍｉｎ．
温度：４０℃
検知：紫外部２１０ｎｍ
（５）化学組成式はC₃₄H₄₀O₉であり、質量分析スペクトルは５９３（Ｍ＋Ｈ）