JP2007161662A - アドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ分解用の化粧料 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】バラ科シモツケソウ(Rosaceae Filipendula)属の植物の植物体を極性溶剤で抽出し、抽出物を得て、所望により、前記抽出物を分画、精製、溶媒除去した後、これを化粧料に含有させる場合において、前記抽出物と1−フェニル−1,2−プロパンジオンとをインキュベーションし、生成する安息香酸の量を確認した後、該抽出物を含有せしめて、化粧料を製造する。前記バラ科シモツケソウ属の植物としては、シモツケソウ(別名セイヨウナツユキソウ;Filipendula ulmaria)が好ましく、前記抽出溶剤としては、含水エタノールが好ましい。
【選択図】なし
Description
(1)バラ科シモツケソウ(Rosaceae Filipendula)属の植物の植物体を極性溶剤で抽出し、抽出物を得て、所望により、前記抽出物を分画、精製、溶媒除去した後、これを化粧料に含有させる場合において、前記抽出物と1−フェニル−1,2−プロパンジオンとをインキュベーションし、生成する生成する安息香酸の量が生成することを確認し、しかる後、該抽出物を含有せしめることを特徴とする化粧料の製造法。
(2)前記バラ科シモツケソウ属の植物が、シモツケソウ(別名セイヨウナツユキソウ;Filipendula ulmaria)であることを特徴とする、(1)に記載の化粧料の製造法。
(3)前記抽出溶剤が含水エタノールであることを特徴とする、(1)又は(2)に記載の化粧料の製造法。
(4)バラ科シモツケソウ(Rosaceae Filipendula)属の植物の植物体を極性溶剤で抽出し、抽出物を得て、所望により、前記抽出物を分画、精製、溶媒除去する工程が、バラ科シモツケソウ(Rosaceae Filipendula)属の植物の植物体を含水エタノールで抽出し、抽出物を得て、これから抽出溶剤を除去し、しかる後に酢酸エチルと水とを加え、液液抽出し、酢酸エチル相をとり、該酢酸エチル相の溶剤を除去する工程であることを特徴とする、(1)〜(3)何れか1項に記載の化粧料の製造法。
(5)更に、バラ科シモツケソウ(Rosaceae Filipendula)属の植物の抽出物乃至はその分画精製物について、アドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ・牛血清アルブミン複合体とともにインキュベーションし、インキュベーション後にアドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ・牛血清アルブミン複合体を定量し、該定量値がバラ科シモツケソウ(Rosaceae Filipendula)属植物の抽出物乃至はその分画精製物の非存在下に比して減少していることを確認した上で、化粧料に含有させることを特徴とする、(1)〜(4)何れか1項に記載の化粧料の製造方法。
(6)前記化粧料が、シワを既に形成している人が、該シワの程度を軽減するために用いるものであることを特徴とする、(1)〜(5)何れか1項に記載の化粧料の製造法。
(7)前記シワの程度の軽減が、皮膚に蓄積した、アドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ(Advanced Glycation Endproducts)の分解によるものであることを特徴とする、(1)〜(6)何れか1項に記載の化粧料の製造法。
(8)バラ科シモツケソウ(Rosaceae Filipendula)属の植物の植物体の極性溶剤又はその分画・精製物をアドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツを分解するのに十分な量配合してなる化粧料。
(9)バラ科シモツケソウ属セイヨウナツユキソウの花又は花序を50%エタノール水溶液で抽出し、溶媒を除去した後、酢酸エチルと水とで液液抽出を行い、酢酸エチル相を取り、濃縮した分画を10−5%以上含有してなる化粧料。
22mM 1−phenyl−1,2−propanedion/MeOH+0.1Mリン酸緩衝液(PH7.4)1mlと、ポテンチラ属の植物の抽出物乃至は分画精製物1mlを混合し、37℃で10時間反応させ、安息香酸の量をHPLCにて定量した。
(HPLC条件)
・分析条件 検出器 :紫外吸光光度計(測定波長:260nm)
・・・・・・カラム :東ソー TSK−ODS80TsQA カラム温度:室温
・・・・・・移動層 :氷酢酸2g/アセトニトリル500ml+エデト酸二ナトリウ ・・・・・・ム溶液(1→250)500ml 流量:1ml/min
用いる材料は以下の通り。
AGE−BSA:グルコースとBSAを37℃で12週間以上インキュベートし、
・・・・・・・・PD−10 columns(Amersham Bioscien
・・・・・・・・ces 17−0851−01)にて余分なglucoseを除いた
・・・・・・・・もの
1次抗体 :Anti−Albumin,Bovine Serum,
・・・・・・・・Rabbit−Poly ROCKLAND
・・・・・・・・201−41331/20000
2次抗体 :Goat anti−rabbitIGg horseradish
・・・・・・・・peroxidase conjugate Bio RAD
・・・・・・・・170−6515 1/10000
基質 :TMB solution Wako 546−01911
(手順)
typeIコラーゲンコートした96穴マイクロプレート(Bio Coat 35 4407)に10μg/mlのAGE−BSAを100μl加え、(1.0μgAGE−BSA/well) 37℃にて4時間静置した後、0.05%Tween20/PBS(−)にて3回洗浄(マイクロミキサー上で室温・3分間振とう)し、PBS(−)に溶解した各濃度の試料を100μlを加え、37℃で10時間以上反応させる。その後、0.05%Tween20/PBS(−)にて3回洗浄し、1次抗体を各wellに100μl/well加え、室温で30分間静置する。0.05%Tween20/PBS(−)にて3回洗浄し、2次抗体を100μl/well入れ、室温30分間静置する。0.05%Tween20/PBS(−)にて3回洗浄し、TMBを100μl/well加え、室温15分反応させる。1N HClを100μl/well入れ、反応を止め、450nmの吸光度を測定する。AGEsの量を変え、検量線を引き、この検量線より残存AGEs量を定量した。残存AGEsを添加したAGEsより減じ、添加したAGEsで除し、100を乗じてAGEs分解率を算出した。
Claims (9)
- バラ科シモツケソウ(Rosaceae Filipendula)属の植物の植物体を極性溶剤で抽出し、抽出物を得て、所望により、前記抽出物を分画、精製、溶媒除去した後、これを化粧料に含有させる場合において、前記抽出物と1−フェニル−1,2−プロパンジオンとをインキュベーションし、生成する生成する安息香酸の量が生成することを確認し、しかる後、該抽出物を含有せしめることを特徴とする化粧料の製造法。
- 前記バラ科シモツケソウ属の植物が、シモツケソウ(別名セイヨウナツユキソウ;Filipendula ulmaria)であることを特徴とする、請求項1に記載の化粧料の製造法。
- 前記抽出溶剤が含水エタノールであることを特徴とする、請求項1又は2に記載の化粧料の製造法。
- バラ科シモツケソウ(Rosaceae Filipendula)属の植物の植物体を極性溶剤で抽出し、抽出物を得て、所望により、前記抽出物を分画、精製、溶媒除去する工程が、バラ科シモツケソウ(Rosaceae Filipendula)属の植物の植物体を含水エタノールで抽出し、抽出物を得て、これから抽出溶剤を除去し、しかる後に酢酸エチルと水とを加え、液液抽出し、酢酸エチル相をとり、該酢酸エチル相の溶剤を除去する工程であることを特徴とする、請求項1〜3何れか1項に記載の化粧料の製造法。
- 更に、バラ科シモツケソウ(Rosaceae Filipendula)属の植物の抽出物乃至はその分画精製物について、アドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ・牛血清アルブミン複合体とともにインキュベーションし、インキュベーション後にアドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ・牛血清アルブミン複合体を定量し、該定量値がバラ科シモツケソウ(Rosaceae Filipendula)属植物の抽出物乃至はその分画精製物の非存在下に比して減少していることを確認した上で、化粧料に含有させることを特徴とする、請求項1〜4何れか1項に記載の化粧料の製造方法。
- 前記化粧料が、シワを既に形成している人が、該シワの程度を軽減するために用いるものであることを特徴とする、請求項1〜5何れか1項に記載の化粧料の製造法。
- 前記シワの程度の軽減が、皮膚に蓄積した、アドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ(Advanced Glycation Endproducts)の分解によるものであることを特徴とする、請求項1〜6何れか1項に記載の化粧料の製造法。
- バラ科シモツケソウ(Rosaceae Filipendula)属の植物の植物体の極性溶剤又はその分画・精製物をアドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツを分解するのに十分な量配合してなる化粧料。
- バラ科シモツケソウ属セイヨウナツユキソウの花又は花序を50%エタノール水溶液で抽出し、溶媒を除去した後、酢酸エチルと水とで液液抽出を行い、酢酸エチル相を取り、濃縮した分画を10−5%以上含有してなる化粧料。
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