JP5364695B2 - カテプシンｋインヒビターのアミド化調製方法 - Google Patents

Description

発明の背景
本発明は、ペルフルオロ化アミノ酸を活性化し得て、塩基の存在下で、アミンで処理して、光学純度を失うことなくアミドを生成させることからなるアミド化方法について記載する。得られるアミドは選択的カテプシンＫインヒビターであり、それは、骨粗しょう症及び転移性骨疾患の治療に使用し得る。

発明の要旨
本発明により、構造式（Ｉ）：

で示される化合物の調製方法であって、式（ＩＩＡ）で示される塩又は式（ＩＩＢ）で示される酸：

［式中、Ｒ^１はＣ_１−６アルキル又はＣ_１−６ハロアルキルであり；
Ｒ^２はＣ_１−６アルキル又はＣ_１−６ハロアルキルであり；
Ｒ^３はＳＯ_ｍ（Ｃ_１−６アルキル）であり；
Ｘは三級アミン、二級アミン、又は金属塩であり；及び
ｍは０ないし２の整数である］を、カップリング剤、塩基、及び溶媒の存在下で、ｌ−アミノシクロプロパンカルボニトリルによりアミド化することを特徴とする前記方法が提供される。

図１は結晶性Ｎ^１−（１−シアノシクロプロピル）−４−フルオロ−Ｎ^２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）−１，１’−ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミドの特徴的なＸ線回折パターンである。 図２は結晶性Ｎ^１−（１−シアノシクロプロピル）−４−フルオロ−Ｎ^２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）−１，１’−ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミドの典型的な示差走査熱量測定（ＤＳＣ）曲線である。 図３は無定形の（アモルファスの）Ｎ^１−（１−シアノシクロプロピル）−４−フルオロ−Ｎ^２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）−１，１’−ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミドの典型的な示差走査熱量測定（ＤＳＣ）曲線である。

発明の詳細な記載
本発明により、構造式（Ｉ）：

で示される化合物の調製方法であって、式（ＩＩＡ）で示される塩又は式（ＩＩＢ）で示される酸：

［式中、Ｒ^１はＣ_１−６アルキル又はＣ_１−６ハロアルキルであり；
Ｒ^２はＣ_１−６アルキル又はＣ_１−６ハロアルキルであり；
Ｒ^３はＳＯ_ｍ（Ｃ_１−６アルキル）であり；
Ｘは三級アミン、二級アミン、又は金属塩であり；また、
ｍは０ないし２の整数である］を、カップリング剤、塩基、及び溶媒の存在下で、１−アミノシクロプロパンカルボニトリルによりアミド化することを特徴とする前記方法が提供される。

本発明の実施態様において、Ｒ^１はＣ_１−６ハロアルキルである。本発明の一クラスにおいて、Ｒ^１は（２−フルオロ、２−メチル）プロピルである。

本発明の実施態様において、Ｒ^２はＣ_１−６ハロアルキルである。本発明の一クラスにおいて、Ｒ^２はトリフルオロメチルである。

本発明の実施態様において、Ｒ^３はＳＯ_２（Ｃ_１−６アルキル）である。本発明の一クラスにおいて、Ｒ^３はＳＯ_２ＣＨ_３である。

本発明の実施態様において、Ｘは二級アミンである。本発明の一クラスにおいて、ＸはＤＣＨＡである。

本発明の実施態様において、式（Ｉ）の化合物は下式のＮ^１−（１−シアノシクロプロピル）−４−フルオロ−Ｎ^２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）−１，１’−ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミドである。

α−アミノ酸又はその対応する塩を活性化し、次いで塩基の存在下で、アミンで処理する。活性化はハロゲン化アシル、混合無水物の形成により、又はカップリング剤での処理により、さらなる活性化剤を用いるか、又は用いずに、適当な塩基の存在下で、適当な溶媒中で、達成してもよい。

本発明の実施態様において、カップリング剤はカルボジイミド、ホスホニウム塩、又はウロニウム塩である。本発明の一クラスにおいて、カップリング剤はＥＤＣである。

本発明の実施態様において、活性化剤はＨＯＢｔ、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド、２−ヒドロキシピリジン、Ｎ−ヒドロキシフタルイミド、又はＣＤＩである。本発明の一クラスにおいて、活性化剤はＨＯＢｔである。

本発明の実施態様において、塩基はＮ−メチルモルホリン、ＴＥＡ、Ｎ−エチルジイソプロピルアミン、２，６−ルチジン、２，４，６−コリジン、又は１−メチルピペリジンである。本発明の一クラスにおいて、塩基はＮ−メチルモルホリンである。

本発明の実施態様において、溶媒はＤＭＦ、ＤＭＡｃ、ＮＭＰ、アセトニトリル、ＴＨＦ、又はＤＭＳＯである。本発明の一クラスにおいて、溶媒はＤＭＦである。

本発明の実施態様においては、構造式：

で示される化合物の調製方法であって、式：

で示される塩を、ＥＤＣ、ＨＯＢｔ、Ｎ−メチルモルホリン、及びＤＭＦの存在下で、１−アミノシクロプロパンカルボニトリルでアミド化することを特徴とする前記方法である。

本明細書にて使用する場合、「アルキル」という用語は、直鎖若しくは分枝鎖の鎖状の飽和炭化水素から１個の水素原子を概念的に除去することによって誘導された置換し得る一価の基を意味する（すなわち、−ＣＨ_３、−ＣＨ_２ＣＨ_３、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、−ＣＨ（ＣＨ_３）_２、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２、−Ｃ（ＣＨ_３）_３など）。

当業者が正しく認識するものとして、「ハロ」又は「ハロゲン」は、本明細書にて使用する場合、クロロ、フルオロ、ブロモ、及びヨードを包含するものとする。「ケト」という用語は、カルボニル（Ｃ＝Ｏ）を意味する。用語「アルコキシ」は、本明細書にて使用する場合、アルキルが上記定義のように、酸素原子を介して該分子の残りの部分に結合しているアルキル部分を意味する。アルコキシの例は、メトキシ、エトキシなどを包含する。

用語「ハロアルキル」とは、別に特定しない限り、１個ないし５個、好ましくは１個ないし３個のハロゲンにより置換された上記定義のアルキル基を意味する。代表的な例は、限定されるものではないが、トリフルオロメチル、ジクロロエチルなどである。

用語「三級アミン」とは、限定されるものではないが、トリメチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、ジメチルエタノールアミン、及びビス−トリスである。

用語「二級アミン」とは、限定されるものではないが、ジメチルアミン、ジエチルアミン、メチルエタノールアミン、アジリジン、アゼチジン、ピロリジン、ピペリジン、及びジシクロヘキシルアミン（ＤＣＨＡ）である。

用語「金属塩」とは、限定されるものではないが、アルミニウム、アンチモン、カルシウム、銅、金、鉄、鉛、リチウム、マグネシウム、白金、カリウム、ナトリウム、銀、ストロンチウム、スズ、チタン、タングステン、及び亜鉛の塩である。好適な金属塩は、リチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム、アルミニウム、及び亜鉛の塩である。

用語「カルボジイミド」とは、カルボン酸をアミドの生成に向けて活性化するためにしばしば使用される一群のカップリング剤をいう。限定するものではないカルボジイミドの例は：ＤＣＣ（Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド）、ＤＩＣ（Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド）、及びＥＤＣ（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩）である。

ホスホニウム塩という用語は、カップリング剤として有用なホスホニウムイオン（ＰＨ_４ ^＋）を含む塩をいう。限定するものではないホスホニウム塩の例は、ヨウ化ホスホニウム、ヨウ化テトラメチルホスホニウム、ＰｙＢｒＯＰ（ブロモ−トリス−ピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート）、及びＰｙＡＯＰ（（７−アザベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）トリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート）である。

ウロニウム塩（ｕｒｏｎｉｕｍ ｓａｌｔ）という用語はウロニウムイオンを含む塩をいう。限定されるものではないウロニウム塩の例は、ＨＢＴＵ（２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＨＡＴＵ（２−（７−アザ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＴＡＴＵ（（Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロボレート）、及びＴＢＴＵ（２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロボレート）である。

結晶性Ｎ^１−（１−シアノシクロプロピル）−４−フルオロ−Ｎ^２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）−１，１’−ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミドについて、銅Ｋα放射線を用いて集めた、１９．７、２０．１、及び１７．６度での特徴的な反射ピークに相当するＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンにより特徴づけられる。このパターンはさらに２３．６、１７．９、及び１９．１度での特徴的な反射ピークにより特徴づけられる。このパターンはさらに２４．８、１１．７、及び１１．９度での特徴的な反射ピークにより特徴づけられる。ＸＲＰＤパターンは、シンタッグ（Ｓｃｉｎｔａｇ）ＸＤＳ−２０００、Ｓｉ（Ｌｉ）ペルティエ−冷却ソリッドステート検出計、ＣｕＫα源（発生器電力：４５ｋＶ及び４０ｍＡ）、及び拡散ビーム（２ｍｍ及び４ｍｍ）及び受ビームスリット（０．５ｍｍ及び０．２ｍｍ）により測定する。走査範囲はステップサイズ０．０２°及び計測時間２秒として２−４０°２θにセットする。標品はポテンシャル面内配向効果を減少させるために回転させながら、石英ディスク上で測定する。ピーク位置は標準のコランダムプレート（ＮＩＳＴ ＳＲＭ１９７６）を用いて、毎週、正確さを確かめる。

上記のＸ線粉末回折パターンに加えて、結晶性Ｎ^１−（１−シアノシクロプロピル）−４−フルオロ−Ｎ^２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）−１，１’−ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミドは、２１４℃での融解開始点により特徴づけられる。ＤＳＣ熱挙動はセイコーロボットＤＳＣ（ＲＤＣ−２２０）を用いて検討する。ＤＳＣ分析（ｎ＝２）はひだ状アルミニウムパン中で実施する（２、１０、及び２０℃／分、８０ｍＬ／分の窒素）。ＤＳＣはガリウム（グッドフェロー、９９．９９％純度）、インジウム（グッドフェロー、９９．９９９％純度）、及びスズ（ＮＩＳＴ ＳＲＭ２２２０）での温度と熱流について校正する。

無定形のＮ^１−（１−シアノシクロプロピル）−４−フルオロ−Ｎ^２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）−１，１’−ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミドも観察し得る。無定形フォームのガラス転移温度は温度サイクリングにより評価し、その中間点で測定する。標品を１０℃／分で−３０℃から７５℃に加熱し、次いで１０℃／分で−３０℃まで冷却し、次いで、その標品を１０℃／分で１８０℃まで再加熱する（ｎ＝１）。約６４℃のガラス転移温度（Ｔｇ）（中間点、１０℃／分）とそれに引き続くピーク温度１０１℃での発熱転移（無定形物質の再結晶化による）が主として無定形（アモルファス）である標品について得られる。ＤＳＣ熱挙動はセイコーロボットＤＳＣ（ＲＤＣ−２２０）を用いて検討する。ＤＳＣ分析（ｎ＝２）はひだ状アルミニウムパン中で実施する（２、１０、及び２０℃／分、８０ｍＬ／分の窒素）。ＤＳＣはガリウム（グッドフェロー、９９．９９％純度）、インジウム（グッドフェロー、９９．９９９％純度）、及びスズ（ＮＩＳＴ ＳＲＭ２２２０）での温度と熱流量について測定される。

下記反応工程図及び実施例において、種々の試薬の記号及び略号は、以下の意味を有する：

反応工程図１は、カップリング剤、活性化剤、及び塩基の存在下で、置換α−アミノ酸又はその塩とアミンとを反応させ、α−立体中心（α−ｓｔｅｒｅｏｃｅｎｔｅｒ）のエピマー化を起こさずに、対応するα−アミノ酸産物を生成させることを示す。

以下の実施例は、本発明化合物の調製についてさらにその詳細を説明する。当業者は以下の調製手法の条件と工程の既知の変更が、これらの化合物を調製するために使用し得ることを容易に理解しよう。温度は他の方法を示さない限り、すべて摂氏（ｄｅｇｒｅｅ Ｃｅｌｓｉｕｓ）である。
実施例１

４−フルオロ−Ｎ−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシン・ジシクロへキシルアミン塩

ビフェニル酸（２０．７４ｇ）を２−プロパノール（１８６ｍＬ）／水（２０．７ｍＬ）に溶解した。２−プロパノール（２１ｍＬ）／水（２ｍＬ）中のＮ，Ｎ−ジシクロヘキシルアミン（９．８２ｍＬ）の溶液を加え（約１０％容量）、この溶液にＤＣＨＡ塩（１０ｍｇ）を種として加えた。形成された重みのある種晶床（ｓｅｅｄ ｂｅｄ）とスラリーを室温で３０分間攪拌した。ＤＣＨＡの添加は２０〜３０分間継続した。スラリーを室温で一夜攪拌し、濾過した。濾過ケーキを２−プロパノール／水（２×３０ｍＬ、１０：１）及びＭＴＢＥ（２×３０ｍＬ）で洗浄した。ＤＣＨＡ塩を白色固体として得た。２４．４ｇ（８４％収率）。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ）δ８．０７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．０），７．９４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．０），７．７５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．０），７．６１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．０），４．３１（ｍ，１Ｈ），３．４６（ｂｑ，１Ｈ，Ｊ＝４），３．２２（ｍ，２Ｈ），３．１９（ｓ，３Ｈ），２．１１（ｂｍ，５Ｈ），１．９１（ｂｍ，５Ｈ），１．７５（ｂｍ，２Ｈ），１．４９（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝２１．６），１．４８（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝２１．６），１．３５（ｍ，９Ｈ）；^１９ＦＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ）δ−７２．９，−１２９．４；ｍｐ２０９−２１１℃，［α］_Ｄ ^２０＋１８．７（ｃ＝０．２９，ＭｅＯＨ）。
実施例２

Ｎ−（１−シアノシクロプロピル）−４−フルオロ−Ｎ^２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミド

酸（１．９ｇ）をＤＭＡｃ（１０ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却した。１−アミノシクロプロパンカルボニトリル塩酸塩（０．５７ｇ）及びＨＡＴＵ（１．８５ｇ）を加えた。得られるスラリーを１５分間攪拌し、ＤＩＥＡ（２．１２ｍＬ）を１．５時間で加えた。反応液を１時間熟成させた。水（１１．２ｍＬ）を滴下漏斗から７０分を要して加え、そのスラリーを２０℃で１時間熟成させた。混合物を濾過し、濾過ケーキをＤＭＡｃ：水の溶液（９．４ｍＬ、１：１．２）、水（１８．７ｍＬ）、２−プロパノール（９．３ｍＬ）で洗った。バッチを乾燥して対応するアミド（１．６７ｇ；７９％収率）を得た。

アミド（２．５６ｇ）を３０℃でＴＨＦ（３０．７ｍＬ）に溶かした。水（１９ｍＬ）は滴下漏斗から加えた。バッチに種晶を加え、２０℃で１時間熟成させた。追加の水（４０．９ｍＬ）を１．５時間かけて加え、そのバッチを１６時間熟成させた。バッチを濾過し、水（１５ｍＬ）で洗浄した。固形物は一定重量となるまで乾燥し、純アミド（２．５０ｇ；９７％収率）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ）δ８．１７（ｂｓ，１Ｈ），８．０５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．５），７．９６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．５），７．８０（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．０），７．６４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．０），４．４３（ｍ，１Ｈ），３．５５（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．０，８．５，８．０），３．１８（ｓ，３Ｈ），２．８４（ｂｍ，１Ｈ），２．０２（ｍ，２Ｈ），１．４６（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝２１．５），１．４３（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝２２．０），１．３６（ｍ，２Ｈ），１．０７（ｍ，１Ｈ），０．９４（ｍ，１Ｈ）；^１３ＣＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ）δ；^１９ＦＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ）δ−７３．２，−１３６．８；ＩＲ（ｃｍ^−１）３３３１，２２４４，１６８７，１３０４，１１５２；ｍｐ２２３−２２４℃，［α］_Ｄ ^２０＋２３．３（ｃ＝０．５３，ＭｅＯＨ）。
実施例３

Ｎ−（１−シアノシクロプロピル）−４−フルオロ−Ｎ^２−｛（１Ｓ）−２，２，２−トリフルオロ−１−［４’−（メチルスルホニル）ビフェニル−４−イル］エチル｝−Ｌ−ロイシンアミド

丸底フラスコにビフェニル酸・ＤＣＨＡ塩（７６．６ｇ；９９．２％ｅｅ；ジアステレオマー比３４２：１）及びＤＭＦ（５９０ｇ）を満たした。固形のアミノシクロプロパンカルボニトリルＨＣｌ（１５．２ｇ）、ＨＯＢｔ・Ｈ_２Ｏ（１７．９ｇ）、及びＥＤＣ・ＨＣｌ（２９．１ｇ）すべてを加えると、白色スラリーが形成された。次いで、バッチを３８〜４２℃に加熱し、５時間熟成した。次いで、バッチを２０〜２５℃に冷却し、一夜保持した。ＨＰＬＣ分析は９９．４％の変換を示した。このバッチを３８〜４２℃に加熱し、水（３７５ｇ）を２時間かけてバッチに加えた。バッチは水添加の間中、スラリー状に維持した。次いで、バッチを５８〜６２℃に加熱し、１時間熟成した。熟成の後、水（３７５ｇ）を２．１ｇ／分の速度で３時間かけて加えた。次いで、バッチを１５〜２５℃に冷却し、一夜熟成した。バッチを濾過し、３９％ＤＭＦ／水（２×３００ｇ）と２−プロパノール（１８０ｇ）で洗った。固形物をフィルター中、４０〜６０℃で２４時間乾燥した。所望の粗生成物を白色固体として単離した（５７ｇ、９２％収率、９９．４ｗｔ％）。粗生成物（５７ｇ）及びアセトン／水溶液（３２４ｇ、８８／１２）を丸底フラスコに満たした。次いで、このスラリーを４０℃に加熱すると、この時点でバッチが溶液となった；これを１時間熟成した。次いで、水（４６ｇ）を３０分間かけて加えた。次いで、バッチに種晶（１．７ｇ、３．０ｗｔ％）を加え、バッチを４０℃で１時間熟成し、その後、結晶化を続行した。水（２５５ｇ）を４．５時間かけて加えた。次いで、バッチを１．５時間で２３℃に冷やし、４時間熟成し、濾過した。固形物をアセトン／水（１５８ｇ、４５／５５）及び水（１７６ｇ）で洗った。濾過ケーキを５５℃の窒素の掃引／減圧により乾燥した。所望の生成物（５７．２ｇ、９９．９ｗｔ％、９９．８Ａ％（エナンチオマーＮＤ））を９４．９％収率で得た。^１ＨＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ）δ８．１７（ｂｓ，１Ｈ），８．０５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．５），７．９６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．５），７．８０（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．０），７．６４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．０），４．４３（ｍ，１Ｈ），３．５５（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．０，８．５，８．０），３．１８（ｓ，３Ｈ），２．８４（ｂｍ，１Ｈ），２．０２（ｍ，２Ｈ），１．４６（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝２１．５），１．４３（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝２２．０），１．３６（ｍ，２Ｈ），１．０７（ｍ，１Ｈ），０．９４（ｍ，１Ｈ）；^１３ＣＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ）δ；^１９ＦＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ）δ−７３．２，−１３６．８；ＩＲ（ｃｍ^−１）３３３１，２２４４，１６８７，１３０４，１１５２；ｍｐ２２３−２２４℃，［α］_Ｄ ^２０＋２３．３（ｃ＝０．５３，ＭｅＯＨ）。

Claims (4)

1. 式（Ｉ）：
   

   

   で示される化合物の調製方法であって、式（ＩＩＡ）で示される塩：
   

   

   ［式中、Ｒ ^１ は（２−フルオロ、２−メチル）プロピルであり；
   Ｒ^２はトリフルオロメチルであり；
   Ｒ^３はＳＯ _２ ＣＨ _３ であり；
   Ｘは三級アミン、二級アミン、又は金属塩である］を、カップリング剤としてＥＤＣ、塩基としてＮ−メチルモルホリン、活性化剤としてＨＯＢｔ、及び溶媒ＤＭＦの存在下で、１−アミノシクロプロパンカルボニトリルによりアミド化することを特徴とする前記方法。
2. 式（ＩＩＡ）で示される塩において、Ｘがジシクロヘキシルアミンである、請求項１に記載の方法。
3. 反応温度３８〜４２℃で５時間反応を成熟させ、その後、２０〜２５℃で一夜放置する、請求項１に記載の方法。
4. ＤＭＦ５９０ｇにつき、式（ＩＩＡ）の化合物のジシクロヘキシルアミン塩を７６．６ｇ、１−アミノシクロプロパンカルボニトリルＨＣｌを１５．２ｇ、ＨＯＢｔをＨＯＢｔ・Ｈ２Ｏとして１７．９ｇ及びＥＤＣ・ＨＣｌを２９．１ｇ用いる、請求項２に記載の方法。

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