JP5356174B2

JP5356174B2 - Ｓ−ラクトイルグルタチオン及び／又はその塩を含有することを特徴とする医薬組成物

Info

Publication number: JP5356174B2
Application number: JP2009230208A
Authority: JP
Inventors: 祐子村上; 浩田中
Original assignee: Nippon Menard Cosmetic Co Ltd
Current assignee: Nippon Menard Cosmetic Co Ltd
Priority date: 2009-10-02
Filing date: 2009-10-02
Publication date: 2013-12-04
Anticipated expiration: 2029-10-02
Also published as: JP2011074049A

Description

本発明は、Ｓ−ラクトイルグルタチオン及び／又はその塩を含有することを特徴とする医薬組成物に関する。

現在、日本人の主な死因は、悪性腫瘍、心疾患、脳血管性障害等であり、死因に関わる心疾患及び脳血管性障害は血栓症に由来する。血栓症を原因とする疾患として、脳血栓、脳塞栓、一過性脳虚血発作、狭心症、心筋梗塞、心房内血栓、肺血栓塞栓症、深部静脈血栓症（エコノミー症候群）、播種性血管内凝固症候群（ＤＩＣ）等が挙げられる。例えば、心筋梗塞は、心臓に栄養や酸素を供給している冠状動脈の血流が、血栓等の原因で閉塞することによって完全に止まり、心筋が壊死することで引き起こされる。又、ＤＩＣは、全身の血管内において、無秩序に血液凝固反応が起きて血栓が多発することで臓器障害が引き起こされる。このように、血栓症は多くの疾患の引き金となっている。

血栓の形成には、主に三つの要因が存在する。一つ目は、血管内皮細胞の傷害であり、喫煙、高脂血症、高血圧、肥満、糖尿病等により血管内皮細胞が傷害を受け、血栓が生じる。二つ目は、血流の緩慢であり、固定や長時間に及ぶ同じ姿勢が原因で血管が圧迫されることによって血流が緩慢又は停止している場所や、動脈瘤、静脈瘤、心臓内等の血流が渦巻く場所に血栓が生じる。三つ目は、血液性状の変化（粘稠度の増加、繊維素溶解活性低下、血液凝固因子の増加）であり、高脂血症、脱水症状時、妊娠・出産時、老齢等では血液成分が変化しているため、血栓が生じやすい。

血栓症のリスクは加齢に伴い増加する。高齢化が進む日本では、血栓症が原因として引き起こされる多発性脳梗塞による痴呆や脳血管性障害による身体麻痺、心筋梗塞、ＤＩＣ等は深刻な問題である。血栓症に対する薬剤として、アスピリンやチクロピジン等が知られているが、アスピリンの副作用として、再生不良性貧血、血小板減少、白血球減少等、チクロピジンの副作用として、血栓性血小板減少性紫斑病、無顆粒球症、重篤な肝障害等が報告されている。このように、血栓症に効果のある薬剤では少なからず副作用が認められることから、有効でかつ副作用の少ない抗血栓症薬が求められている。

近年、動物、植物及び微生物等の生体内に広く存在するグルタチオンの乳酸誘導体であるＳ−ラクトイルグルタチオン及び／又はその塩の研究が進められ、美白剤（特許文献１）、抗炎症剤（特許文献２）が開示されているが、Ｓ−ラクトイルグルタチオン及び／又はその塩の血栓症を予防、改善、治療する効果は報告されていない。

今までのところ、Ｓ−ラクトイルグルタチオンの前駆体であるグルタチオンに抗血栓症効果は認められていない。又、グルタチオンの誘導体であるＳ−（１,２−ジカルボキシエチル）グルタチオン又はその塩に、血小板凝集抑制効果が認められている（特許文献３）。

特許第２８７６２２４号特許第２５２２９４０号特開平２−２５５６２４号

本発明は、有効でかつ副作用の少ない抗血栓症薬である医薬組成物を提供することを課題とする。

本発明者らは、この問題点を解決すべく、鋭意研究を重ねた結果、Ｓ−ラクトイルグルタチオン及び／又はその塩に優れた抗血栓症効果を発見し、本発明を完成するに至った。本発明は化学式（１）で表されるＳ−ラクトイルグルタチオン及び／又はその塩を含有することを特徴とする抗血栓症薬である。

本発明は、血栓症によって引き起こされる動脈硬化、敗血症、心筋梗塞、肝疾患、悪性腫瘍、重症感染症、ＤＩＣ等の疾患を予防、改善、治療するための、請求項１に記載の抗血栓症薬である。

本発明はＳ−ラクトイルグルタチオン及び／又はその塩を含有することを特徴とするＰＡＩ−１（ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒｉｎｈｉｂｉｔｏｒ−１）産生抑制剤である。

本発明のＳ−ラクトイルグルタチオン及び／又はその塩は、動脈硬化、敗血症、心筋梗塞、肝疾患、悪性腫瘍、重症感染症、ＤＩＣ等の疾患になると高値を示すことが知られているＰＡＩ−１量を減少させることで、優れた抗血栓症効果を示し、これらの疾患を予防、改善、治療することができる。

Ｓ−ラクトイルグルタチオンは、細胞増殖制御機構の過程において、メチルグリオキサールがグルタチオンと非酵素的に反応して中間体ヘミメルカプタールを与え、このヘミメルカプタールがグリオキサラーゼＩによって代謝されて生成される。

Ｓ−ラクトイルグルタチオンは市販品を用いても良いが、上述のようにグリオキサラーゼＩによって酵素的にメチルグリオキサールとグルタチオンから製造することもできる（特開平１−９８４８７号）。

Ｓ−ラクトイルグルタチオンの塩としては、ナトリウム、カリウム、リチウム等のアルカリ金属塩、カルシウム、マグネシウム等のアルカリ土類金属塩、アンモニウム及びモノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トリエチルアミン、ピペラジン、アルギニン等のアミン類との塩、そして塩酸塩等が挙げられるが、これらは常法によりＳ−ラクトイルグルタチオンから製造することができる。

本発明におけるＳ−ラクトイルグルタチオン及び／又はその塩の投与量は、通常１０ｍｇ〜５，０００ｍｇ／日、好ましくは２５ｍｇ〜１，０００ｍｇ／日、より好ましくは５０ｍｇ〜１００ｍｇ／日である。

本発明の抗血栓症薬は、経口投与される医薬品又は食品として用いることができる。医薬品の形態としては、散剤、錠剤、顆粒剤、カプセル剤、トローチ剤、内服液剤、懸濁剤、シロップ剤が挙げられる。食品の形態としては、上述の医薬品的な形態に加え、ビスケット、クッキー、キャンディー、チョコレート等の菓子、食酢、醤油、ドレッシング等の調味料、ハム、ベーコン、ソーセージ等の食肉製品、かまぼこ、はんぺい等の魚肉練り製品、果汁飲料、清涼飲料、アルコール飲料等の飲料、パン、麹、ジャム等にすることができる。これらの医薬品及び食品は、何れもＳ−ラクトイルグルタチオン及び／又はその塩を１０ｍｇ〜５，０００ｍｇ／日摂取できる形態であるが、摂取量を調製しやすい錠剤、顆粒剤、カプセル剤、トローチ剤、内服液剤及び飲料がより好ましい。又、医薬品及び食品の製造にあたっては、必要に応じて賦形剤、結合剤、滑沢剤、矯味剤、安定剤、ビタミン、ミネラル、香料等の医薬品及び食品の技術分野で通常使用されている補助剤を用いることができる。

ＰＡＩ−１（ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒｉｎｈｉｂｉｔｏｒ−１、別名ＳｅｒｐｉｎＥ１）は血管内皮細胞及び肝臓から放出されるポリペプチドで、ｔ−ＰＡの活性を消失させて線溶系を抑制するポリペプチドである。このため、血中ＰＡＩ−１濃度が増加し過ぎると血栓ができやすくなる。血中ＰＡＩ−１濃度は、メタボリック症候群、感染、炎症等の病的因子によって増加する一方、加齢、日内変動等の生理的因子によっても変化する。ヒト血中ＰＡＩ−１濃度の正常値は５０ｎｇ／ｍｌ以下であり、血栓症が原因として引き起こされる動脈硬化、敗血症、心筋梗塞、肝疾患、悪性腫瘍、重症感染症、ＤＩＣ等になると高値を示すことが知られており、ＰＡＩ−１を指標にして、上記の疾患を予想することが可能であると考えられている。従って、ＰＡＩ−１の増加を抑制することは、血栓症が原因として引き起こされる動脈硬化、敗血症、心筋梗塞、肝疾患、悪性腫瘍、重症感染症、ＤＩＣ等の疾患を予防、改善、治療することができる。

本発明を詳細に説明するため、実施例１として本発明の処方例、及び、実施例２として実験例を挙げるが、本発明はこれに限定されるものではない。

本発明の化学式（１）で表されるＳ−ラクトイルグルタチオン及び／又はその塩は、処方例として下記の製剤化を行うことができる。

処方例１飲料
処方配合量（ｇ）
１．Ｓ−ラクトイルグルタチオン０．１
２．クエン酸０．７
３．果糖ブドウ糖液糖６０．０
４．香料０．１
５．精製水３９．１
全量１００．０
［製造方法］成分５に成分１〜４を加え、攪拌溶解してろ過し、加熱殺菌後、５０ｍｌガラス瓶に充填する。当該飲料を１日１本摂取することで、Ｓ−ラクトイルグルタチオン及び／又はその塩を５０ｍｇ／日摂取できる。

比較例１従来の飲料
処方例１において、Ｓ−ラクトイルグルタチオンを精製水に置き換えたものを従来の飲料とした。

処方例２錠剤
処方配合量（ｇ）
１．Ｓ−ラクトイルグルタチオンナトリウム５．０
２．トウモロコシデンプン１０．０
３．精製白糖２０．０
４．カルボキシメチルセルロースカルシウム１０．０
５．微結晶セルロース４０．０
６．ポリビニルピロリドン５．０
７．タルク１０．０
全量１００．０
［製造方法］成分１〜５を混合し、次いで成分６の水溶液を結合剤として加え、常法により顆粒化する。これに滑沢剤として成分７を加えて配合した後、１錠１００ｍｇの錠剤に打錠する。当該錠剤を１日１２錠摂取することで、Ｓ−ラクトイルグルタチオン及び／又はその塩を６０ｍｇ／日摂取できる。

処方例３カプセル剤
処方配合量（ｇ）
１．Ｓ−ラクトイルグルタチオンカルシウム５．０
２．微結晶セルロース６０．０
３．トウモロコシデンプン１５．０
４．乳糖１８．０
５．ポリビニルピロリドン２．０
全量１００．０
［製造方法］成分１〜５を混合して顆粒化した後、２号硬カプセルに２５０ｍｇ充填してカプセル剤を得る。当該カプセル剤を１日６個摂取することで、Ｓ−ラクトイルグルタチオン及び／又はその塩を７５ｍｇ／日摂取できる。

処方例４散剤
処方配合量（ｇ）
１．Ｓ−ラクトイルグルタチオン５．０
２．微結晶セルロース４０．０
３．トウモロコシデンプン５５．０
全量１００．０
［製造方法］成分１〜３を混合し、常法により散剤を得る。当該顆粒を１日１ｇ摂取することで、Ｓ−ラクトイルグルタチオン及び／又はその塩を５０ｍｇ／日摂取できる。

処方例５錠菓
処方配合量（ｇ）
１．Ｓ−ラクトイルグルタチオンカルシウム１．０
２．乾燥コーンスターチ５０．０
３．エリスリトール４０．０
４．クエン酸５．０
５．ショ糖脂肪酸エステル３．０
６．香料１．０
全量１００．０
[製造方法]成分１〜４に精製水を適量加えて練和し、押出し造粒した後、乾燥して顆粒を得る。顆粒に成分５及び６を加えて打錠し、１個１ｇの錠菓を得る。当該錠菓を１日６個摂取することで、Ｓ−ラクトイルグルタチオン及び／又はその塩を６０ｍｇ／日摂取できる。

以下、本発明を効果的に説明するために、実験例を挙げる。尚、本発明はこれにより限定されるものではない。

実験例１正常ヒト成人皮膚微小血管内皮細胞（ＨＭＶＥＣ）における、ＰＡＩ−１遺伝子の発現変化
ＨＭＶＥＣを６０ｍｍｄｉｓｈに２ラ１０^５個播種した。そこに、１０μＭの５−ｂｒｏｍｏ−２−ｄｅｏｘｙｕｒｉｄｉｎｅ（ＢｒｄＵ）を添加して４日間培養することにより、老化誘導した。同時に、１０μＭのＳ−ラクトイルグルタチオン、比較対象として１０μＭのグルタチオン及び１０μＭのＳ−（１,２−ジカルボキシエチル）グルタチオン（いずれもＷａｋｏ）を添加した。培養後、総ＲＮＡの抽出を行った。細胞からの総ＲＮＡの抽出はＴＲＩＺＯＬＲｅａｇｅｎｔ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて行い、総ＲＮＡ量は分光光度計（ＮａｎｏＤｒｏｐ）を用いて２６０ｎｍにおける吸光度により求めた。ｍＲＮＡ発現量の測定は、細胞から抽出した総ＲＮＡを基にしてリアルタイムＲＴ−ＰＣＲ法により行った。リアルタイムＲＴ−ＰＣＲ法には、ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔＩＩＩＰｌａｔｉｎｕｍＴｗｏ−ＳｔｅｐｑＲＴ−ＰＣＲＫｉｔｗｉｔｈＳＹＢＲＧｒｅｅｎ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いた。すなわち、５００ｎｇの総ＲＮＡを逆転写反応後、ＰＣＲ反応（９５℃:１５秒間、６０℃：３０秒間、４０ｃｙｃｌｅｓ）を行った。使用したプライマーを以下に示す。その他の操作は定められた方法に従い、ｍＲＮＡの発現量を内部標準であるＧＡＰＤＨｍＲＮＡの発現量に対する割合として求めた。尚、各遺伝子の発現量の測定に使用したプライマーは次の通りである。

ＰＡＩ−１用のプライマーセット
ＣＧＴＧＧＴＴＴＴＣＴＣＡＣＣＣＴＡＴＧＧ（配列番号１）
ＣＴＧＧＧＴＴＴＣＴＣＣＴＣＣＴＧＴＴＧＴＣ（配列番号２）
ＧＡＰＤＨ用のプライマーセット
ＴＧＡＡＣＧＧＧＡＡＧＣＴＣＡＣＴＧＧ（配列番号３）
ＴＣＣＡＣＣＡＣＣＣＴＧＴＴＧＣＴＧＴＡ（配列番号４）

その結果を表１に示す。ＨＭＶＥＣをＢｒｄＵにて老化誘導すると、ＰＡＩ−１ｍＲＮＡの発現量は増加したが、Ｓ−ラクトイルグルタチオンはこの変化を回復させた。一方、グルタチオンにはこの効果は認められなかった。また、Ｓ−（１,２−ジカルボキシエチル）グルタチオンは効果が認められたが、Ｓ−ラクトイルグルタチオンと比較すると、Ｓ−ラクトイルグルタチオンの方が顕著に強かった。従って、Ｓ−ラクトイルグルタチオンは、血栓症の原因となるＰＡＩ−１の増加を抑制する作用があることが示された。

実験例２使用試験
処方例１及び比較例１の飲料を用いて、男性被験者６名ずつの合計１２名（２５−６０歳）を対象に、１日５０ｍｌを任意の時間に摂取させ、２ヶ月間の使用試験を行った。飲用前及び２ヶ月後に血液を採取し、動脈硬化の診断基準として使用されるＬＤＬコレステロール及び中性脂肪の測定を行った（動脈硬化性疾患予防ガイドライン、２００７年度版）。又、血管年齢（アルテットＣ、Ｕ−ＭｅｄｉｃａＩｎｃ．）も同時に測定した。血管年齢とは、指先に伝播する心拍の波形から動脈硬化の進展を推測し、血管老化度を年齢として算出したものである。

これらの試験結果を表２、３及び４に示した。その結果、比較例１と比較して、処方例１で得られる飲料は、動脈硬化の指標であるＬＤＬコレステロール及び中性脂肪の値、又、血管年齢を下げ、動脈硬化改善効果に優れていた。尚、試験期間中、トラブルは一人もなく、安全性においても問題なかった。

以上の結果より、本発明のＳ−ラクトイルグルタチオン及び／又はその塩を含有することを特徴とする医薬組成物は、ヒトにおける使用試験に対して優れた動脈硬化抑制効果、すなわち、抗血栓症効果を示すことが明らかとなった。

本発明のＳ−ラクトイルグルタチオン及び／又はその塩を含有することを特徴とする医薬組成物は、優れた抗血栓症効果を示す。又、この医薬組成物は、動脈硬化、敗血症、心筋梗塞、肝疾患、悪性腫瘍、重症感染症、ＤＩＣ等の疾患になると高値を示すことが知られているＰＡＩ−１量を減少させることで、これらの疾患を予防、改善、治療することができる。

Claims

化学式（１）で表されるＳ−ラクトイルグルタチオン及び／又はその塩を含有することを特徴とする抗血栓症薬。
血栓症によって引き起こされる動脈硬化、敗血症、心筋梗塞、肝疾患、悪性腫瘍、重症感染症、ＤＩＣから選ばれる１種又は２種以上の疾患を予防、改善、治療するための、請求項１に記載の抗血栓症薬。
Ｓ−ラクトイルグルタチオン及び／又はその塩を含有することを特徴とするＰＡＩ−１（ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒｉｎｈｉｂｉｔｏｒ−１）産生抑制剤。